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1 第 55 卷 第 3 期 厦 门 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) V.55 N 年 5 月 JunafXamnUnvy (NauaScnc) May2016 d: /j.n 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 双 孢 蘑 菇 致 腐 微 生 物 的 体 外 抑 菌 效 果 比 较 柯 莉 娜 1, 胡 泳 华 1, 高 焕 娟 1, 潘 志 针 2, 王 勤 1* (1. 厦 门 大 学 生 命 科 学 学 院, 滨 海 湿 地 生 态 系 统 教 育 部 重 点 实 验 室, 福 建 厦 门 ; 2. 福 建 省 农 业 科 学 研 究 院 农 业 生 物 资 源 研 究 所, 福 建 福 州 ) 摘 要 : 双 孢 蘑 菇 (Agacubpu (Lang)Sng) 组 织 细 嫩, 营 养 价 值 高, 采 后 呼 吸 代 谢 旺 盛, 为 微 生 物 的 生 长 繁 殖 提 供 了 有 利 条 件, 但 容 易 引 起 一 些 不 良 的 生 理 反 应, 加 速 组 织 的 衰 老 和 腐 败, 极 大 地 降 低 了 双 孢 蘑 菇 的 商 品 价 值. 本 文 从 腐 烂 的 双 孢 蘑 菇 中 分 离 鉴 定 得 到 6 株 细 菌 和 8 株 真 菌, 分 别 为 黏 质 沙 雷 氏 菌 (Saa maccn,2 株 ) 产 酸 克 雷 伯 菌 (Kbaxyca,1 株 ) 不 动 杆 菌 属 (Acnbacguua,1 株 ) 沙 雷 氏 菌 属 (Saap.,1 株 ) 和 阿 氏 肠 杆 菌 (Enbacaua,1 株 ) 以 及 哈 茨 木 霉 (Tchdmahazanum,5 株 ) 多 变 根 毛 霉 (Rhzmucvaab,1 株 ) 绿 色 木 霉 (T.vd,1 株 ) 和 米 根 霉 (Rhzpuyza,1 株 ). 分 别 采 用 琼 脂 扩 散 法 和 生 长 速 率 法 测 定 了 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 上 述 细 菌 和 真 菌 的 抑 制 作 用, 研 究 结 果 表 明 肉 桂 酸 及 衍 生 物 对 这 些 菌 株 有 不 同 程 度 的 抑 制 作 用, 抑 制 效 果 的 强 弱 依 次 为 4- 甲 基 肉 桂 酸 > 4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 > 肉 桂 酸 > 4- 羟 基 肉 桂 酸. 本 研 究 结 果 可 为 双 孢 蘑 菇 的 采 后 防 腐 提 供 依 据. 关 键 词 : 肉 桂 酸 衍 生 物 ; 双 孢 蘑 菇 ; 细 菌 ; 真 菌 中 图 分 类 号 : Q936 文 献 标 志 码 : A 文 章 编 号 : (2016) 双 孢 蘑 菇 (Agacubpu (Lang)Sng) 色 泽 洁 白, 组 织 细 嫩, 味 道 鲜 美, 营 养 价 值 高, 不 仅 是 一 种 高 档 的 菌 类 蔬 菜, 而 且 是 一 种 具 有 保 健 功 能 的 营 养 食 品. 双 孢 蘑 菇 含 有 17 种 氨 基 酸, 所 含 的 蛋 白 质 几 乎 高 [1] 于 所 有 的 豆 类 和 蔬 菜. 双 孢 蘑 菇 在 采 收 后, 虽 然 离 开 了 培 养 基 中 水 分 和 养 分 的 供 给, 同 化 作 用 基 本 停 止, 但 是 生 命 活 动 仍 在 继 续, 仍 然 是 活 的 有 机 体 ; 由 于 其 含 水 量 高, 采 后 呼 吸 代 谢 旺 盛, 极 易 出 现 失 水 萎 蔫 褐 变 开 伞, 同 时 也 为 微 生 物 的 生 长 繁 殖 提 供 了 有 利 条 件, 因 此 易 引 发 一 些 不 良 的 生 理 反 应, 破 坏 正 常 的 组 织 代 谢, 加 速 组 织 的 衰 老 和 腐 败, 极 大 地 降 低 了 双 孢 蘑 菇 [2] [3] 的 商 品 价 值. 陈 少 珍 等 分 离 鉴 定 了 蘑 菇 黑 斑 病 病 原 [4] [5] 菌, 李 河 等 分 离 鉴 定 了 褐 腐 病 病 原 菌,Gaupn 等 通 过 质 谱 成 像 及 基 因 组 分 析 研 究 了 双 孢 蘑 菇 软 腐 病 病 原 菌 Janhnbacumagacdamnum 中 抗 真 菌 毒 [6] 力 因 子 的 特 征, 冯 伟 林 等 研 究 了 不 同 覆 土 基 质 微 生 物 的 结 构 特 征 对 双 孢 蘑 菇 产 量 质 量 的 影 响. 目 前 对 双 孢 蘑 菇 中 微 生 物 的 研 究 主 要 集 中 于 蘑 菇 的 病 害 菌, 而 对 于 引 起 蘑 菇 腐 烂 的 微 生 物 并 未 见 报 道. 肉 桂 酸 是 一 种 天 然 提 取 物, 安 全 无 毒, 微 有 桂 皮 气 味. 目 前 对 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 的 研 究 包 括 了 酪 氨 酸 酶 抑 [7] [8] [9] 制 剂 抑 菌 作 用 保 鲜 作 用. 我 们 的 前 期 研 究 发 现 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 可 以 延 缓 双 孢 蘑 菇 的 褐 变 [9], 同 时 双 孢 蘑 菇 在 采 后 易 发 生 腐 烂, 而 由 于 微 生 物 作 用 导 致 的 腐 烂 是 否 能 够 同 时 被 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 所 抑 制 尚 不 清 楚. 因 此, 本 研 究 首 先 从 腐 烂 蘑 菇 中 分 离 鉴 定 致 腐 菌 株, 继 而 研 究 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 这 些 菌 株 的 抑 制 作 用, 该 研 究 结 果 可 为 今 后 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 在 采 后 双 孢 蘑 菇 防 微 生 物 腐 烂 的 应 用 提 供 理 论 和 实 践 基 础. 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 供 试 菌 株 菌 株 均 由 福 建 省 农 业 科 学 研 究 院 农 业 生 物 资 源 研 收 稿 日 期 : 录 用 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 ( ); 中 国 博 士 后 科 学 基 金 (2015M570556) * 通 信 作 者 :qwang@xmu.du.cn 引 文 格 式 : 柯 莉 娜, 胡 泳 华, 高 焕 娟, 等. 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 双 孢 蘑 菇 致 腐 微 生 物 的 体 外 抑 菌 效 果 比 较 [J]. 厦 门 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ),2016,55(3): Can:KELN,HUY H,GAO HJ,a.Anmcbaacvfcnnamcacdanddvavmcganmadfm nagacubpu[j].junafxamnunvy(nauascnc),2016,55(3): (nchn) hp : jxmu.xmu.du.cn

2 第 3 期 柯 莉 娜 等 : 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 双 孢 蘑 菇 致 腐 微 生 物 的 体 外 抑 菌 效 果 比 较 331 究 所 分 离 得 到. 从 腐 烂 蘑 菇 中 分 离 到 的 6 株 细 菌 菌 株 编 号 分 别 为 :FJAT-17802FJAT-17804FJAT FJAT-17806FJAT-17807FJAT 从 腐 烂 蘑 菇 中 分 离 到 的 8 株 真 菌 菌 株 编 号 分 别 为 :FJAT FJAT-30525FJAT-30526FJAT-30527FJAT FJAT-30529FJAT-30530FJAT 培 养 基 细 菌 培 养 采 用 的 是 LB 培 养 基, 真 菌 培 养 采 用 的 是 PDA 培 养 基 试 剂 肉 桂 酸 4- 甲 基 肉 桂 酸 和 4- 羟 基 肉 桂 酸 为 上 海 生 工 生 物 工 程 股 份 有 限 公 司 产 品 ;4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 为 Sgma-Adch 公 司 产 品 ; 脱 氧 核 糖 核 苷 三 磷 酸 (dntp)taq 酶 (5 U/ μ L) 为 上 海 博 尚 生 工 生 物 工 程 技 术 服 务 有 限 公 司 产 品 ; 其 他 试 剂 均 为 国 产 分 析 纯 试 剂 ; 蒸 馏 水 为 去 离 子 重 蒸 水 (ddh2o) 引 物 细 菌 通 用 16SRNA 引 物 :9F(5'-GAGTTT- GATCCTGGCTCAG-3') 和 1542R (5'-AGAAAG- GAGGTGATCCAGCC-3'); 真 菌 通 用 引 物 :ITS4(5'- TCCTCCGCTTATTGATATGC-3') 和 ITS5 (5'- GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3'). 上 述 引 物 均 由 上 海 生 工 生 物 工 程 股 份 有 限 公 司 合 成. 1.2 方 法 细 菌 菌 株 鉴 定 [10] 采 用 龙 雯 等 的 方 法, 进 行 修 改 后 如 下 : 将 菌 种 在 固 体 LB 培 养 基 上 划 线 活 化,30 培 养 2d. 收 集 细 菌 提 取 DNA, 采 用 25μLPCR 反 应 体 系 (10 Buf 2.5μL,10mm/LdNTP0.5μL, 引 物 各 1μL,5U/ μltaq 酶 0.3μL,ddH2O18.7μL,DNA 模 板 1μL) 进 行 扩 增.PCR 反 应 程 序 为 :94 预 变 性 5mn;94 变 性 30,55 退 火 45,72 延 伸 1mn30,35 个 循 环 ; 最 后 72 延 伸 10 mn. 用 1.5%( 质 量 分 数 ) 的 琼 脂 糖 凝 胶 对 产 物 进 行 检 测, 检 测 出 有 条 带 的 菌 株 PCR 产 物 送 至 上 海 博 尚 生 工 生 物 工 程 技 术 服 务 有 限 公 司 进 行 测 序, 将 结 果 进 行 16SRNA 鉴 定, 所 得 序 列 在 NCBI 网 站 上 进 行 序 列 比 对 分 析 真 菌 菌 株 鉴 定 [11] 采 用 修 改 后 的 华 娟 等 的 方 法 : 将 菌 种 在 添 加 硫 酸 链 霉 素 的 固 体 PDA 培 养 基 ( 每 200mL 培 养 基 中 加 入 1mL40mg/mL 的 硫 酸 链 霉 素 ) 上 划 线 活 化,28 培 养 2d. 采 用 尿 素 提 取 法 提 取 菌 株 的 DNA, 采 用 25μLPCR 反 应 体 系 (10 Buf2.5μL,10 mm/ldntp0.5 μl, 引 物 各 1μL,5U/ μ LTaq 酶 0.25μL,ddH2O18.75 μl,dna 模 板 1μL) 进 行 扩 增.PCR 反 应 程 序 为 :94 预 变 性 5mn;94 变 性 1mn,55 退 火 1mn,72 延 伸 1mn,30 个 循 环 ; 最 后 72 延 伸 10 mn. 电 泳 检 测 PCR 产 物 测 序 及 序 列 比 对 分 析 同 上 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 细 菌 的 抑 制 作 用 检 测 [12] 采 用 琼 脂 扩 散 法 测 定 抑 菌 圈 大 小. 将 -20 冷 冻 保 藏 的 供 试 菌 在 固 体 LB 培 养 基 上 划 线 活 化, 置 于 37 恒 温 培 养 24h. 从 活 化 后 的 各 菌 落 中 挑 取 单 菌 落, 接 种 于 25mL 的 液 体 LB 培 养 基 中, 于 /mn 下 摇 床 培 养 24h, 制 备 菌 悬 液. 将 灭 菌 后 的 固 体 LB 培 养 基 ( 含 1%( 质 量 分 数, 下 同 ) 的 琼 脂 ) 约 15 ml 倒 入 灭 菌 后 的 平 皿 中, 配 制 底 层 培 养 基, 过 夜 保 证 无 污 染. 将 灭 菌 后 的 LB 培 养 基 ( 含 0.7% 的 琼 脂 ) 冷 却 至 50, 接 种 实 验 菌 ( 菌 密 度 为 10 6 ml -1 ), 摇 匀, 倒 在 底 层 平 板 上, 配 制 上 层 培 养 基. 用 打 孔 器 在 平 板 上 打 孔, 孔 直 径 为 0.7cm, 每 个 平 板 7 个 孔, 分 别 设 置 5 个 效 应 物 浓 度 (1.25,2.5,5,10,20 mm/l)1 个 阴 性 对 照 ( 二 甲 基 亚 砜 )1 个 阳 性 对 照 (2000 U/mL 庆 大 霉 素 ),37 恒 温 培 养 24h, 观 察 结 果, 并 用 游 标 卡 尺 测 定 抑 菌 圈 大 小, 每 个 实 验 设 置 3 个 重 复 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 真 菌 的 抑 制 作 用 检 测 [13] 采 用 生 长 速 率 法. 将 -20 冷 冻 保 藏 的 供 试 菌 在 固 体 PDA 培 养 基 上 划 线 活 化, 置 于 30 恒 温 活 化 48h. 将 约 20mL 灭 菌 后 的 PDA 培 养 基 ( 含 1% 的 琼 脂 ) 与 400μL 梯 度 稀 释 的 效 应 物 混 合 倒 入 平 皿 中. 然 后 将 培 养 好 的 真 菌 打 成 直 径 为 0.7cm 的 菌 饼 ( 初 始 菌 饼 ) 贴 于 平 皿 中 央, 使 有 菌 丝 的 一 面 朝 下, 每 个 平 皿 一 个 浓 度 (1.25,2.5,5,10,20 mm/l), 以 未 添 加 效 应 物 组 作 为 对 照,30 恒 温 培 养 48h, 观 察 结 果, 并 用 游 标 卡 尺 采 用 十 字 交 叉 法 测 定 菌 落 直 径, 每 个 实 验 设 置 3 个 重 复, 计 算 抑 制 率, 公 式 如 下 : 抑 制 率 =( 对 照 菌 落 直 径 - 处 理 菌 落 直 径 )/ ( 对 照 菌 落 直 径 - 初 始 菌 饼 直 径 ) 100% 数 据 分 析 实 验 数 据 采 用 Exc 软 件 进 行 统 计 分 析, 结 果 用 平 均 值 ± 标 准 差 表 示. 2 结 果 与 分 析 2.1 腐 烂 双 孢 蘑 菇 中 细 菌 的 分 离 纯 化 及 鉴 定 从 腐 烂 蘑 菇 中 分 离 出 6 株 细 菌 ( 图 1), 经 16S hp : jxmu.xmu.du.cn

3 年 厦门大学学报(自然科学版) RNA 鉴定, FJAT17802 和 FJAT17804 为黏质沙雷 ), 氏菌 ( 其 中 S a a ma c c n FJAT17802 序 列 长度1400bp, FJAT17804 序列长度1013bp; FJAT( ), 为产酸 克 雷 伯 菌 序 列长 K b axy ca 霉,序列 长 度 642bp; FJAT30530 为 哈 茨 木 霉,序 列 长 度 625 bp;fjat30531 为 米 根 霉 (Rh zpu ), 序列长度 yza 650bp. 度 1395bp; FJAT17806 为 不 动 杆 菌 属 (Ac n bac gu u a ),序 列 长 度 1396bp; ),序 列 长 度 FJAT17807 为沙雷 氏 菌 属 ( S a a p. 1405bp; FJAT17808 为 阿 氏 肠 杆 菌 ( En bac a bu a),序列长度1407bp. ( a)~ ( f)分别为 FJAT17802 FJAT17804 FJAT17805 和 FJAT17806 FJAT17807 FJAT 图 1 腐烂双孢蘑菇中细菌的分离纯化鉴定 F.1 Thba c a a df m na. b p u g 2.2 腐烂双孢蘑菇中真菌的分离纯化及鉴定 从腐烂的双孢 蘑 菇 中 分 离 得 到 8 株 真 菌 (图 2). 经鉴定, FJAT30524 为 哈 茨 木 霉 ( T chd maha z anum ),序列长度 639bp; FJAT30525 为哈茨木霉, 序列长度 629bp; FJAT30526 为多变 根 毛 霉( Rh z - muc va ab ),序 列 长 度 655bp; FJAT30527 为 绿色木霉 ( T. v d),序 列 长 度 638bp; FJAT30528 为哈茨木霉,序列长度 640bp; FJAT30529 为 哈 茨 木 h xmu. xmu. du. cn p: j ( a)~ ( h)分别为 FJAT30524 FJAT30525 FJAT30526 FJAT30527 FJAT30528 FJAT30529 FJAT30530 和 FJAT 图 2 双孢蘑菇中真菌的分离纯化鉴定 F.2 Thf ung a df m na. b p u g 2.3 肉桂酸及其衍生物对腐烂双孢蘑菇中 细菌的抑制作用 采用琼 脂 扩 散 法 研 究 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 从 腐 烂的双孢蘑菇中分 离 出 的 细 菌 的 抑 制 作 用,其 中 黏 质 沙雷 氏 菌 以 FJAT肉桂酸及其衍生物 为 代 表. 对阿氏肠杆菌的作用如图 3( a)所示:肉桂酸对阿 氏 肠 杆菌无抑制作用; 4 -甲 基 肉 桂 酸 和 4 -甲 氧 基 肉 桂 酸 对 其有轻微抑 制 作 用,但 效 果 不 显 著 ;而 4-羟 基 肉 桂 酸

4 第 3 期 柯 莉 娜 等 : 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 双 孢 蘑 菇 致 腐 微 生 物 的 体 外 抑 菌 效 果 比 较 333 对 其 的 抑 制 作 用 不 显 著. 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 黏 质 沙 雷 氏 菌 的 作 用 如 图 3(b) 所 示 :4- 甲 基 肉 桂 酸 和 4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 对 黏 质 沙 雷 氏 菌 的 抑 制 效 果 不 显 著, 而 肉 桂 酸 和 4- 羟 基 肉 桂 酸 对 黏 质 沙 雷 氏 菌 的 生 长 无 影 响. 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 沙 雷 氏 菌 属 的 作 用 如 图 3(c) 所 示 : 当 肉 桂 酸 浓 度 达 到 5 mm/l 时, 对 沙 雷 氏 菌 属 的 抑 制 效 果 比 阳 性 对 照 好 ; 而 4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 对 沙 雷 氏 菌 属 有 轻 微 抑 制 作 用, 但 效 果 不 显 著 ;4- 甲 基 肉 桂 酸 和 4- 羟 基 肉 桂 酸 对 沙 雷 氏 菌 属 的 生 长 无 影 响. 此 外, 我 们 也 研 究 了 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 不 动 杆 菌 属 和 产 酸 克 雷 伯 菌 的 抑 制 效 果, 研 究 结 果 表 明, 它 们 对 这 2 种 细 菌 的 生 长 并 无 抑 制 作 用. 2.4 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 腐 烂 双 孢 蘑 菇 中 真 菌 的 抑 制 作 用 采 用 生 长 速 率 法 研 究 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 腐 烂 的 双 孢 蘑 菇 中 筛 选 鉴 定 得 到 的 真 菌 的 抑 制 作 用, 其 中 哈 茨 木 霉 以 FJAT 为 代 表. 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 绿 色 木 霉 的 作 用 如 图 4(a) 所 示 : 对 绿 色 木 霉 的 抑 制 作 用 强 弱 依 次 为 4- 甲 基 肉 桂 酸 >4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 > 肉 桂 酸, 当 浓 度 达 到 20 mm/l 时, 抑 制 率 分 别 为 50.00%,47.89% 和 33.33%. 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 哈 茨 木 霉 的 作 用 如 图 4(b) 所 示 : 对 哈 茨 木 霉 的 抑 制 作 用 强 弱 依 次 为 4- 甲 基 肉 桂 酸 >4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 > 肉 桂 酸 >4- 羟 基 肉 桂 酸, 当 浓 度 达 到 20 mm/l 时, 抑 制 率 分 别 为 100%,39.19%,10.00% 和 4.00%. 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 米 根 霉 的 作 用 如 图 4(c) 所 示 : 当 浓 度 达 到 20mm/L 时, 肉 桂 酸 4- 甲 基 肉 桂 酸 和 4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 对 米 根 霉 的 抑 制 率 均 达 到 100%. 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 多 变 根 毛 霉 的 作 用 如 图 4(d) 所 示 : 随 着 浓 度 的 升 高,4- 甲 基 肉 桂 酸 和 4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 对 多 变 根 毛 霉 的 抑 制 率 均 呈 上 升 趋 势, 而 4- 甲 基 肉 桂 酸 的 抑 制 效 果 优 于 4- 甲 氧 基 肉 桂 酸, 当 浓 度 达 到 20 mm/l 时, 抑 制 率 分 别 为 48.61% 和 18.82%. 此 外, 肉 桂 酸 对 多 变 根 毛 霉 的 生 长 无 影 响,4- 羟 基 肉 桂 酸 对 绿 色 木 霉 米 根 霉 多 变 根 毛 霉 均 为 无 抑 制 作 用. 3 讨 论 图 3 肉 桂 酸 及 衍 生 物 对 腐 烂 双 孢 蘑 菇 中 阿 氏 肠 杆 菌 (a) 黏 质 沙 雷 氏 菌 (b) 沙 雷 氏 菌 属 (c) 的 抑 制 作 用 Fġ3 Anmcbaacvfcnnamcacdand dvave.abua (a),s.maccn (b)and Saap.(c)fmnA.bpu 本 实 验 鉴 定 得 到 的 黏 质 沙 雷 氏 菌 菌 落 有 黏 性, 呈 中 心 颗 粒 状, 有 恶 臭 气 味, 广 泛 存 在 于 水 土 壤 和 食 品 中, 在 28 下 培 养 有 玫 瑰 红 色 色 素 产 生, 所 产 红 色 素 会 随 着 培 养 时 间 的 变 化 而 变 化, 培 养 时 间 越 长, 颜 色 [14] 越 淡. 克 雷 伯 菌 属 机 会 致 病 菌, 呼 吸 道 常 居 菌 群, 在 人 及 动 物 肠 道 中 亦 常 见, 其 中 产 酸 克 雷 伯 菌 已 被 确 认 为 病 原 菌 [15], 而 本 实 验 分 离 得 到 的 产 酸 克 雷 伯 菌 是 否 具 有 致 病 性 还 需 进 一 步 验 证. 肠 杆 菌 科 细 菌 分 布 广, 寄 主 范 围 大, 与 人 类 关 系 密 切. 不 动 杆 菌 属 为 非 发 酵 菌, 是 条 件 致 病 菌, 其 腐 生 性 致 病 性 需 进 一 步 验 证. 哈 茨 木 霉 被 认 为 是 具 有 重 要 价 值 的 生 防 菌, 主 要 通 过 识 别 寄 主 后 缠 绕 寄 主 真 菌 的 菌 丝, 随 后 产 生 细 胞 壁 降 解 酶 和 抗 生 素, 以 及 对 空 间 和 营 养 的 竞 争 机 制, [16] 达 到 防 治 植 物 病 原 菌 的 目 的. 绿 色 木 霉 也 属 于 生 防 菌, 对 多 数 植 物 病 原 菌 有 抑 制 作 用. 多 变 根 毛 霉 多 见 于 医 学 性 致 皮 肤 病 的 病 菌, 但 在 2008 年, 广 东 从 泰 国 进 hp : jxmu.xmu.du.cn

5 334 厦 门 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 2016 年 导 致 新 鲜 蘑 菇 腐 烂 以 及 是 否 通 过 产 生 L- 乳 酸 和 富 马 [19] 酸 等 有 机 酸 代 谢 产 物 来 加 快 蘑 菇 腐 烂, 或 者 这 些 代 谢 产 物 是 否 能 杀 死 其 他 腐 生 菌 从 而 达 到 蘑 菇 保 鲜 的 作 用 等 仍 需 进 一 步 探 讨. 本 实 验 从 腐 烂 的 双 孢 蘑 菇 中 分 离 鉴 定 得 到 6 种 细 菌 和 8 种 真 菌, 探 讨 了 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 这 些 菌 株 的 作 用, 结 果 显 示 这 些 菌 株 对 4- 羟 基 肉 桂 酸 均 不 敏 感.4- 甲 基 肉 桂 酸 对 阿 氏 肠 杆 菌 哈 茨 木 霉 多 变 根 毛 霉 绿 色 木 霉 和 米 根 霉 的 抑 制 效 果 均 优 于 其 他 化 合 物,4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 的 效 果 仅 次 于 4- 甲 基 肉 桂 酸, 而 肉 桂 酸 对 沙 雷 氏 菌 属 有 很 好 的 抑 制 效 果. 我 们 推 测 由 于 取 代 基 的 不 同 导 致 了 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 的 抑 菌 效 果 不 同 : 由 于 4- 甲 氧 基 和 4- 甲 基 的 结 构 较 为 相 近, 因 此 这 2 种 化 合 物 的 抑 菌 效 果 也 较 为 相 近 ; 而 羟 基 的 水 溶 性 较 好, 使 得 该 物 质 进 入 细 胞 较 为 不 易 从 而 导 致 4- 羟 基 肉 桂 酸 的 抑 菌 效 果 相 对 较 差. 我 们 的 研 究 结 果 将 为 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 在 采 后 双 孢 蘑 菇 防 腐 的 应 用 提 供 进 一 步 的 理 论 和 实 践 基 础. 参 考 文 献 : [1] MEND D,SONG T,SHEN L, a.phav 图 4 肉 桂 酸 及 衍 生 物 对 腐 烂 双 孢 蘑 菇 中 绿 色 木 霉 (a) 哈 茨 木 霉 (b) 米 根 霉 (c) 和 多 变 根 毛 霉 (d) 的 抑 制 作 用 Fġ4 Anmcbaacvfcnnamcacdand dvavt.vd (a),t.hazanum (b),r.yza (c)andr.vaab (d)fmna.bpu 口 的 腐 烂 榴 莲 中 首 次 分 离 到 多 变 根 毛 霉 [17], 而 早 在 [18] 1992 年, 杨 坚 就 对 苹 果 腐 烂 菌 群 进 行 了 分 析, 从 中 分 离 了 5 株 毛 霉 属 真 菌. 米 根 霉 菌 丝 发 达, 对 于 其 是 否 hp : jxmu.xmu.du.cn appcanfmhyjamnafmpvngquaynnfagacubpufubd[j].junaf Agcuua and Fd Chmy,2012,60 (23): [2] JIANG T.Efcfnaamycnncmbnan whpu xygnamnnphavquayandcdnzymacvfbunmuhm (Agacubpu) [J].JunafAgcuuaandFdChmy,2012,60 (10), [3] 陈 少 珍, 黄 思 良, 黄 卓 忠, 等. 蘑 菇 黑 斑 病 病 原 菌 分 离 与 鉴 定 [J]. 广 西 农 业 科 学,2009,40(1): [4] 李 河, 周 国 英, 刘 君 昂. 双 孢 蘑 菇 褐 腐 病 病 原 菌 的 分 离 及 分 子 鉴 定 [J]. 食 用 菌 学 报,2009,16(2): [5] GRAUPNER K,SCHERLACH K,BRETSCHNEIDER T,a.Imagng mapcmyandgnm mnng vahghyanfungavuncfacfmuhmf pahgn [J].Angwanda Chm Innana Edn,2012,51(52): [6] 冯 伟 林, 金 群 力, 范 丽 军, 等. 不 同 覆 土 基 质 微 生 物 结 构 特 征 研 究 及 其 对 双 孢 蘑 菇 产 量 的 影 响 [J]. 菌 物 学 报,2014, 33(2): [7] SHIY,CHEN Q X,WANG Q,a.Inhbyfcf cnnamc acd and dvav n h dphna acvyfmuhm (Agacubpu)yna[J]. FdChmy,2005,92(4):

6 第 3 期 柯 莉 娜 等 : 肉 桂 酸 及 其 衍 生 物 对 双 孢 蘑 菇 致 腐 微 生 物 的 体 外 抑 菌 效 果 比 较 335 acvyfgchanaganphyphhacapc andhpanpahgncfungnv[j].pcd BchmyandPhygy,2007,87(3): [14] 黄 文 芳. 黏 质 沙 雷 氏 菌 (Sa maccn) 的 研 究 Ⅰ: 黏 质 沙 雷 氏 菌 9-2 菌 株 分 离 分 类 鉴 定 和 形 态 特 征 [J]. 华 南 师 范 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ),2003(3): [15] 盂 静, 王 锐. 牛 奶 中 一 株 产 酸 克 雷 伯 菌 的 检 出 [J]. 食 品 工 程,2010(3): [16] 石 一 瑁, 申 屠 旭 萍, 俞 晓 平. 重 寄 生 菌 哈 茨 木 霉 的 研 究 及 其 在 植 病 生 防 中 的 应 用 [J]. 生 物 技 术 通 报,2008( 增 刊 1): [17] 王 卫 芳, 胡 佳, 陈 晓 玲, 等. 广 东 口 岸 从 泰 国 进 境 榴 莲 上 截 获 果 腐 病 菌 多 变 根 毛 霉 [J]. 植 物 检 疫,2009(4):60. [18] 杨 坚. 苹 果 腐 烂 菌 群 分 析 [J]. 食 品 科 学,1992(11): [19] 付 永 前, 黄 和, 李 霜, 等. 固 定 化 米 根 霉 发 酵 生 产 有 机 酸 的 现 状 及 发 展 趋 势 [J]. 现 代 化 工,2008,28(12): AnmcbaAcvfCnnamcAcdandIDvav McganmIadfm RnAgacubpu KELna 1,HU Ynghua 1,GAO Huanjuan 1,PANZhzhn 2,WANG Qn 1* (1.KyLabayfhMnyfEducanfCaaand WandEcym, SchfLfScnc,XamnUnvy,Xamn361102,Chna;2.AgcuuaBuc Inu,FujanAcadmyfAgcuuaScnc,Fuzhu350003,Chna) [8] 梁 盛 年, 段 志 芳, 付 莉, 等. 几 种 肉 桂 酸 衍 生 物 与 肉 桂 酸 抑 菌 作 用 比 较 研 究 [J]. 食 品 科 技,2005(9): [9] HU Y H,CHEN C M,XU L, a.phav appcanf4-mhxycnnamcacdfxndngh hfffmuhm (Agacubpu)[J].PhavBgyandTchngy,2015,104: [10] 龙 雯, 陈 存 社.16SRNA 测 序 在 细 菌 鉴 定 中 的 应 用 [J]. 北 京 工 商 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ),2006,24(5): [11] 华 娟, 李 淋 玲, 程 华, 等. 罗 田 栗 实 致 腐 真 菌 的 分 离 鉴 定 及 拮 抗 菌 筛 选 [J]. 中 国 农 学 通 报,2013,29(25): [12] ZHU YJ,ZHOU H T,HU Y H,a.Anyna andanmcbaacvf2-phnyhan,2-phnȳ acadhyd and 2-phnyacc acd [J].Fd Chmy,2011,124(1): [13] XU J G,ZHAO X M,HAN X W,a.Anfunga Abac: Agacubpuhaavgupanafhavng,dudcauandhhghnunavau, whchpvdfavabcndnfhgwhfmcb,caungmbadphygcaacn,accanghagngand cupn,andgayducnghcmmdyvaufa.bpu.wdnfdxbacaanandghfungaanfm na.bpu,whchasaamaccn(2),kbaxyca(1),acnbacguua(1),saap.(1),enbacabua(1),andtchdmahazanum(5),rhzmucvaab(1),t.vd(1)andrhzpuyza(1).mv, anmcbaacvfcnnamcacdanddvavwnvgad.thuhwdhacnnamcacdanddvav xhbddfndgfhgwhnhbnnmcba.thnghfnhbnfcdcafwnghquncf 4-mhycnnamcacd,4-mhxycnnamcacd,cnnamcacdand4-hydxycnnamcacd.Thumaypvdhca andpaccabanhappcanfanmcbangfphava.bpunhfuu. Kywd: cnnamcacddvav ;Agacubpu;baca;fung hp : jxmu.xmu.du.cn

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