中華民國 第51屆中小學科學展覽會

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1 中 華 民 國 第 51 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 國 中 組 生 物 科 擠 黴 弄 演 研 究 麵 包 黴 間 的 競 爭 關 係 學 校 名 稱 : 嘉 義 縣 立 六 嘉 國 民 中 學 作 者 : 指 導 老 師 : 國 一 陳 瑩 珊 國 一 康 浚 維 林 子 欽 王 秀 芬 關 鍵 詞 : 黴 生 態 棲 位 競 爭 排 斥

2 壹 摘 要 麵 包 黴 間 的 競 爭 排 擠 現 象 可 能 是 造 成 不 同 種 黴 適 合 生 長 在 不 同 溫 度 棲 位 的 原 因 研 究 三 種 黴 互 相 競 爭 72 小 時 後 的 結 果 發 現, 黴 在 競 爭 時 生 長 及 孢 子 數 量 都 會 比 單 獨 生 長 時 少 黑 黴 最 具 競 爭 優 勢, 其 次 是 根 黴, 生 長 最 差 的 是 青 黴 現 實 生 活 中, 已 被 命 名 的 黴 高 達 20 多 萬 種, 競 爭 的 結 果 並 非 只 有 一 種 黴 存 在 麵 包 黴 實 驗 發 現 孢 子 濃 度 及 溫 度 是 影 響 族 群 數 量 的 主 要 因 素 在 相 同 孢 子 濃 度 下, 同 時 植 入 根 黴 與 青 黴, 在 不 同 溫 度 下 二 者 的 生 長 分 布 會 出 現 差 異 溫 度 在 30 以 上 只 有 根 黴 生 長, 溫 度 在 20 時 青 黴 具 有 優 勢, 在 不 同 的 溫 度 環 境 下 黴 生 長 的 情 形 不 同 利 用 環 境 溫 度 差 異 區 隔 生 長, 黴 間 的 競 爭 演 化 出 不 同 的 生 態 棲 位 1

3 貳 研 究 動 機 黴 在 自 然 界 中 可 說 是 無 所 不 在 的, 我 們 常 常 有 機 會 看 到 黴 的 蹤 影, 發 黴 對 人 類 而 言 是 視 覺 上 的 心 理 障 礙, 事 實 上 它 只 是 隨 大 自 然 的 生 命 死 亡 分 解 回 歸 土 壤 的 一 種 過 程 不 同 的 黴 適 應 不 同 的 生 態 環 境, 有 的 喜 食 麵 包, 有 的 喜 愛 樹 葉 ; 有 的 發 現 於 樹 枝 上, 有 的 生 長 於 樹 根 但 它 們 大 多 喜 愛 潮 溼 的 環 境, 只 要 你 知 道 它 在 生 態 中 扮 演 的 重 要 性, 你 就 會 想 去 保 護 它 它 的 物 種 多 樣 性, 可 以 確 保 地 球 的 永 續 生 存 生 活 中 的 環 境 並 不 容 易 見 到 黴, 它 們 通 常 在 過 期 的 土 司 或 腐 爛 的 水 果 上 出 現, 國 中 自 然 課 中 有 黴 相 關 的 課 程, 為 了 能 觀 察 與 認 識 這 些 神 秘 生 物, 我 們 開 始 時 使 用 土 司 培 養 黴, 希 望 能 進 一 步 控 制 變 因 比 較 時 我 們 使 用 家 裡 製 作 的 培 養 基 來 操 作 參 研 究 目 的 1. 研 究 發 霉 麵 包 上 的 黴 優 勢 族 群 種 類 2. 黴 在 不 同 的 競 爭 模 式 下 對 彼 此 生 長 的 影 響 3. 研 究 黴 的 分 泌 物 是 否 會 影 響 另 一 種 黴 的 生 長 4. 探 討 環 境 因 子 對 黴 生 長 的 影 響 肆 研 究 材 料 與 器 材 一 實 驗 材 料 : 培 養 基 青 黴 黑 黴 根 黴 二 實 驗 器 材 : 自 行 設 計 恆 溫 控 制 系 統 相 機 複 式 顯 微 鏡 電 腦 防 潮 箱 紫 外 線 滅 機 水 族 箱 方 格 紙 日 光 燈 Pipette 溫 濕 度 計 3M 除 塵 機 血 球 計 數 器 鍋 子 無 操 作 台 無 過 濾 膜 電 磁 爐 三 培 養 基 配 置 : 一 固 體 培 養 基 成 分 及 配 置 : 硝 酸 鈣 400mg/l 硫 酸 0.5ml 氧 化 鈷 2.5mg/l 磷 酸 鎂 200mg/l 硫 酸 錳 3g 乙 二 胺 四 3.78mg/l 醋 酸 鈉 硝 酸 鉀 200mg/l 硫 酸 鋅 500mg/l 肌 醇 100mg/l 洋 菜 粉 10000mg/l 硼 酸 500mg/l 甘 胺 酸 1mg/l 2

4 鉬 酸 鈉 25mg/l 硫 酸 銅 2.5mg/l 菸 鹼 酸 400mg/l 硫 酸 銅 2.5mg/l 鉬 酸 鈉 25mg/l 維 生 素 B1 1mg/l 維 生 素 B2 5mg/l 香 蕉 100g 椰 子 水 1500ml 1 先 裝 一 桶 水 需 要 的 量 將 水 煮 滾 2 將 香 蕉 用 果 汁 機 打 成 泥 倒 入 滾 水 中 3 使 用 天 秤 秤 取 藥 物 需 要 的 量 與 洋 菜 粉 倒 入 滾 水 中 4 等 到 水 滾, 將 培 養 基 倒 入 錐 形 瓶 中 每 瓶 100C.C. 5 放 入 高 壓 蒸 汽 滅 器 當 壓 力 1.5 磅 溫 度 127 度 消 毒 20 分 鐘 6 等 壓 力 歸 0 即 可 拿 出 培 養 基 二 液 體 培 養 基 成 分 及 配 置 : 磷 酸 鎂 200 Mg/l 特 製 白 砂 糖 7.5 g/l 硝 酸 鉀 200 Mg/l 精 緻 二 號 砂 糖 7.5 g/l 硝 酸 胺 400 Mg/l 香 蕉 15g 氧 化 鉀 100 Mg/l 椰 子 水 200ml 肌 醇 100 Mg/l 特 製 白 砂 糖 7.5 g/l 精 緻 二 號 砂 糖 7.5 g/l 1 先 用 天 秤 秤 取 需 要 的 藥 物 量 2 將 藥 物 倒 入 蒸 餾 水 中 3 再 將 香 蕉 打 成 泥, 倒 入 蒸 餾 水 中 4 將 液 體 培 養 基 混 和 均 勻, 倒 入 錐 形 瓶 中 5 放 入 高 壓 蒸 汽 滅 器 當 壓 力 1.5 磅 溫 度 127 度 消 毒 20 分 鐘 6 等 壓 力 歸 0 即 可 拿 出 培 養 基 3

5 伍 研 究 過 程 與 方 法 本 研 究 開 始 於 2010 年 10 月 至 2011 年 6 月, 歷 經 收 集 與 研 讀 相 關 文 獻 資 料 擬 訂 實 驗 計 畫 與 方 法 並 與 老 師 討 論 可 行 的 研 究 目 標 擬 定 實 驗 假 說, 經 由 師 生 的 共 同 觀 察 與 實 驗 室 實 驗 後, 彙 整 並 經 討 論 提 出 我 們 的 實 驗 結 果, 實 驗 規 劃 如 下 圖 1 進 行 麵 包 上 黴 的 觀 察 區 別 與 純 化 培 養 研 究 黴 在 不 同 的 競 爭 模 式 下 對 彼 此 生 長 的 影 響 由 觀 察 過 程 中 提 出 可 研 究 的 問 題 與 方 向 文 字 照 觀 察 統 整 片 及 及 與 實 驗 檢 討 紀 錄 結 論 研 究 環 境 因 子 對 麵 包 黴 的 影 響 查 閱 相 關 資 料 或 請 教 專 家 學 者 圖 1 實 驗 規 劃 與 流 程 一 研 究 發 霉 麵 包 上 的 黴 優 勢 族 群 一 收 集 資 料 : 首 先 我 們 收 集 資 料 以 瞭 解 麵 包 上 生 活 的 是 什 麼 黴 許 元 勳 2002, 廖 若 陞 2007, 王 也 珍 1997 並 進 一 步 分 離 和 純 化 培 養 二 發 霉 麵 包 上 黴 的 分 離 和 純 化 培 養 1 黴 的 分 離 培 養 先 將 玻 棒 用 紫 外 線 殺, 然 後 將 玻 棒 沾 水 並 沾 取 發 霉 麵 包 上 的 單 一 種 黴 孢 子, 將 孢 子 移 植 至 自 製 培 養 基 上, 並 放 於 28 恆 溫 水 浴 中 培 養 72 小 時 2 黴 的 鑑 定 利 用 玻 片 直 接 觀 察 : 先 在 載 玻 片 上 滴 一 滴 清 水 及 亞 甲 藍 液, 用 牙 籤 在 黴 落 邊 緣 處 純 化 的 培 養 基 內 挑 取 少 量 已 產 生 孢 子 的, 先 置 於 50% 乙 醇 中 洗 去 脫 落 的 孢 子, 再 放 在 載 玻 片 上 觀 察 記 錄 3 純 化 黴 落 的 配 置 將 在 自 然 環 境 中 發 霉 麵 包 上 的 黴 分 離 後, 選 取 28 恆 溫 水 浴 中 培 4

6 養 72 小 時 的 落, 用 30ml 滅 的 蒸 餾 水 將 黴 孢 子 黑 黴 根 黴 與 青 黴 分 別 沖 下, 以 四 層 無 紗 布 過 濾 後, 在 複 式 顯 微 鏡 下 計 算 孢 子 數 目 配 成 個 /ml 的 純 化 孢 子 懸 浮 液 圖 純 化 黴 簡 要 流 程 A 圖 B 圖 C 圖 D 圖 E 圖 圖 2 純 化 黴 簡 要 流 程 A 圖 用 75% 的 酒 精 與 殺 過 的 布 將 無 操 作 台 全 部 擦 一 次 ;B 圖 用 火 將 植 時 須 用 到 的 器 具 消 毒 ;C 圖 用 消 毒 後 長 夾 取 出 黴 孢 子 植 入 無 培 養 基 內 ;D 圖 同 一 黴 接 種 3 瓶 每 植 好 一 瓶 就 須 馬 上 蓋 上 蓋 子 ; E 圖 放 入 自 製 恆 溫 水 浴 環 境 中 25 度 培 養 72 小 時 3.2 黴 孢 子 懸 浮 液 製 備 簡 要 流 程 5

7 根 黴 落 黑 黴 落 青 黴 落 STEP1 培 養 72 小 時 的 黴 落 加 入 30CC 滅 後 的 純 水 STEP2 利 用 蒸 餾 水 震 盪 將 純 化 後 培 養 的 黑 黴 根 黴 與 青 黴 孢 子 沖 下 STEP3 輕 輕 搖 晃 讓 孢 子 融 入 水 中 STEP4 以 四 層 無 紗 布 過 濾 STEP5 製 成 純 化 液 STEP6 配 成 個 /ml 孢 子 懸 液 圖 3 黴 孢 子 懸 浮 液 製 備 簡 要 流 程 6

8 將 在 自 然 環 境 中 發 霉 麵 包 上 的 黴 分 離 後, 選 取 28 恆 溫 水 浴 中 培 養 72 小 時 的 落, 用 30ml 滅 的 蒸 餾 水 將 黴 孢 子 黑 黴 與 青 黴 分 別 沖 下, 以 四 層 無 紗 布 過 濾 後, 在 複 式 顯 微 鏡 下 計 算 孢 子 數 目 配 成 個 /ml 的 純 化 孢 子 懸 浮 液 圖 不 同 濃 度 黴 落 的 配 置 培 養 將 純 化 黴 孢 子 懸 浮 液 個 /ml 孢 子 做 的 梯 度 稀 釋, 分 別 取 10 0 至 組 稀 釋 液 0.02ml 加 入 培 養 基 中, 放 置 於 28 恆 溫 水 浴 中, 以 12L12D 進 行 光 照 培 養 72 小 時, 觀 察 落 生 長 情 形 圖 4 圖 4 不 同 濃 度 黴 落 的 配 置 培 養 二 黴 在 不 同 的 競 爭 模 式 下 對 彼 此 生 長 的 影 響 一 觀 察 : 已 被 命 名 的 黴, 種 類 高 達 20 萬 種 以 上, 實 驗 一 發 現 麵 包 上 有 三 種 優 勢 的 黴 族 群, 為 何 其 他 種 類 族 群 無 法 在 麵 包 上 生 長? 在 麵 包 上 的 不 同 黴 族 群 它 們 有 何 關 係? 二 實 驗 假 設 : 不 同 黴 有 不 同 的 生 活 棲 位, 可 以 避 免 或 減 少 互 相 競 爭 孢 子 萌 發 需 一 個 啟 動 因 子, 由 實 驗 三 的 結 果 我 們 認 為 溫 度 是 啟 動 因 子 7

9 三 實 驗 設 計 : 3.1 單 一 種 黴 生 長 曲 線 繪 製 1 以 接 種 環 植 : A 取 青 黴 黑 黴 根 黴 的 稀 釋 液 濃 度 1*10-2 B 使 用 接 種 環 沾 取 稀 釋 液, 每 種 植 入 兩 瓶 培 養 基 中 2 固 定 濃 度 以 滴 管 植 : A 取 青 黴 黑 黴 根 黴 的 稀 釋 液 濃 度 1*10-2 B 使 用 滴 管 取 出 0.02ml, 每 種 植 入 兩 瓶 培 養 基 中 再 將 培 養 瓶 放 入 25 的 水 浴 中 培 養 72 小 時, 每 隔 12 小 時, 以 數 位 相 機 拍 照 紀 錄, 用 百 分 比 計 算 法 進 行 照 片 分 析, 畫 出 百 分 比 與 時 間 之 生 長 曲 線 3.2 溫 度 對 黴 間 競 爭 的 影 響 準 備 無 的 培 養 瓶 8 個, 將 根 黴 及 青 黴 的 純 化 黴 孢 子 懸 浮 液 個 /ml 孢 子 的 10-2 稀 釋 液 各 0.02ml 一 起 進 行 黴 植, 植 後 將 培 養 基 放 置 於 自 行 設 計 的 恆 溫 水 浴 環 境 圖 7, 將 溫 度 的 變 因 分 為 四 組, 依 序 為 及 34 組, 每 日 於 上 午 7:30 分 及 下 午 7:30 分 拍 照 持 續 進 行 72 小 時, 利 用 image J 軟 體 測 量 黴 落 的 大 小, 再 利 用 excel 比 較 不 同 種 類 黴 間 競 爭 的 情 形 3.3 不 同 位 置 對 黴 間 競 爭 的 影 響 準 備 108 瓶 培 養 基, 將 溫 度 控 制 在 25 度 分 成 3 大 組 分 別 是 第 一 組 青 黴 加 黑 黴 第 二 組 青 黴 加 根 黴 及 第 三 組 黑 黴 加 根 黴 再 將 上 述 三 組 依 接 種 黴 的 方 式 分 為 :1 滴 管 植 入 組 : 將 兩 種 黴 懸 浮 液 取 出 1ml 將 兩 種 懸 液 充 分 混 合 後, 利 用 滴 管 植 入 0.02ml 的 懸 液 進 入 培 養 基 2 接 種 環 植 入 組 : 利 用 接 種 環 將 兩 種 不 同 的 懸 液 植 在 培 養 基 中, 兩 者 懸 液 不 可 接 觸 每 小 組 有 18 瓶 培 養 基 完 成 上 述 步 驟 後, 將 已 植 的 培 養 基 放 入 恆 溫 水 浴 25 度 中 培 養, 每 隔 12 小 時 取 出 3 瓶 拍 照, 再 以 隔 水 加 熱 的 方 式 將 培 養 基 融 化, 利 用 慮 網 將 過 濾, 將 過 濾 的 放 入 烘 箱 中 以 50 的 溫 度 烘 乾 30 分 鐘 後, 再 利 用 微 量 天 平 計 算 重 量 ; 並 利 用 血 球 計 數 器 估 計 培 養 基 中 黴 孢 子 的 數 量 8

10 圖 5 不 同 位 置 對 黴 間 競 爭 的 影 響 實 驗 設 備 三 觀 察 黴 的 分 泌 物 是 否 會 影 響 其 他 黴 的 生 長 一 觀 察 : 實 驗 三 的 結 果 發 現 青 黴 生 長 時 在 其 周 圍 會 產 生 一 個 較 大 的 圈 圈, 這 個 圈 圈 沒 有 其 他 黴 生 長 自 然 課 本 第 二 冊 4-3 說 明 青 黴 所 提 煉 的 盤 尼 西 林, 可 作 為 抗 生 素 抑 制 有 害 細 的 生 長 尤 丁 玫 等 2011 二 實 驗 假 設 : 青 黴 的 分 泌 物 可 以 抑 制 其 他 黴 的 生 長 三 實 驗 設 計 : 1 黴 的 分 泌 物 的 置 備 : 液 體 培 養 基 中 的 根 黴 落 STEP1 培 養 72 小 時 的 黴 落 液 體 培 養 基 中 的 青 黴 落 黑 黴 落 輕 輕 搖 晃 讓 孢 子 融 入 水 中 9

11 STEP2 利 用 蒸 餾 水 震 盪 將 純 化 後 培 養 的 黑 黴 根 黴 與 青 黴 孢 子 沖 下 STEP3 將 液 體 培 養 基 倒 入 燒 杯 中 圖 6 黴 分 泌 物 製 備 簡 要 流 程 STEP4 以 無 針 筒 及 過 濾 膜 過 濾 2 用 70 ml 針 筒 將 含 有 黴 的 分 泌 物 取 出, 使 用 無 過 濾 膜 過 濾 分 泌 物 到 試 管 中 3 將 黑 黴 與 根 黴 接 種 在 培 養 基 上, 再 滴 入 1ml 青 黴 分 泌 物 4 重 複 步 驟 1~3, 更 改 滴 入 1ml 根 黴 分 泌 物 觀 察 其 影 響 四 探 討 環 境 因 子 對 黴 生 長 的 影 響 一 溫 度 對 黴 生 長 的 影 響 : 1 觀 察 : 生 活 中 發 現 在 春 夏 時 食 物 較 容 易 發 黴, 不 同 的 黴 在 麵 包 上 出 現 的 順 序 不 同, 這 種 現 象 和 黴 對 溫 度 適 應 差 異 是 否 有 關? 2 文 獻 探 討 : 自 然 課 本 中 提 到 黴 常 使 濕 熱 環 境 中 的 食 物 快 速 腐 敗 南 一 版, 黴 在 攝 氏 20~30 度 的 溫 度 下 最 活 潑 也 就 是 說, 人 類 與 黴 的 適 溫 範 圍 相 符 合 攝 氏 20 度 以 下, 溫 度 越 低, 黴 生 長 得 越 慢 高 鳥 浩 介 實 驗 假 設 : 溫 度 較 高 黴 生 長 較 好, 不 同 種 類 黴 適 合 生 長 溫 度 不 同 4 實 驗 方 法 : 1 固 定 溫 度 實 驗 : 準 備 無 的 培 養 瓶 24 個, 參 考 文 獻 中 提 到 黴 最 適 生 長 溫 度 溫 度 為 變 因, 分 為 四 組 依 序 為 及 34, 以 純 化 黴 孢 子 懸 浮 液 個 /ml 孢 子 的 10-2 稀 釋 液 0.02ml 進 行 黴 植, 植 後 將 培 養 基 放 置 於 自 行 設 計 的 恆 溫 水 浴 環 境 圖 7, 每 日 於 上 午 7:30 分 及 下 午 7:30 分 拍 照, 利 用 image J 軟 體 測 量 黴 落 的 大 小 圖 8, 再 利 用 excel 比 較 各 種 溫 度 下 黴 生 長 情 形 10

12 溫 度 計 溫 度 加 熱 棒 冰 袋 圖 7 利 用 溫 度 加 熱 棒 及 冰 袋 控 制 的 恆 溫 水 浴 環 境 2 週 期 性 溫 度 變 動 實 驗 : 用 玻 璃 棒 將 麵 包 上 的 青 黴 及 根 黴 植 入 培 養 瓶 內 的 培 養 基 上, 並 蓋 上 蓋 子 實 驗 分 成 四 組 分 別 是 : 室 溫 20~25 20~30 恆 溫 25 度, 實 驗 組 溫 度 控 制 從 上 午 10 點 自 20 開 始 加 熱, 每 一 小 時 溫 度 調 升 至 目 標 溫 度 的 一 半, 至 12 時 達 到 目 標 溫 度 後, 開 始 調 降 溫 度 於 14 時 至 20, 其 餘 時 間 皆 控 制 在 20, 進 行 實 驗 72 小 時 每 日 於 上 午 7:30 分 及 下 午 7:30 分 拍 照, 利 用 image J 軟 體 測 量 黴 生 長 的 大 小, 再 利 用 excel 比 較 各 種 溫 度 下 黴 生 長 情 形 二 濕 度 對 黴 生 長 的 影 響 : 1 觀 察 : 先 前 麵 包 發 霉 的 實 驗, 發 現 不 加 水 的 麵 包 黴 無 法 生 長, 黴 在 室 內 多 生 長 於 潮 濕 的 地 方 2 文 獻 探 討 : 台 灣 台 灣 位 於 亞 熱 帶 氣 候 區, 扣 除 高 山 地 區 之 後 各 地 年 平 均 相 對 濕 度 均 在 75% 以 上, 而 各 個 月 份 之 平 均 相 對 濕 度 亦 在 70% 以 上 中 央 氣 象 局,1971~2000 台 灣 地 區 在 夏 季 時, 空 戶 室 內 真 濃 度 高 於 美 國 芬 蘭 等 國 家, 顯 示 台 灣 氣 候 較 適 合 真 的 生 長 蔡 耀 賢 和 江 哲 銘,2009 黴 的 生 長 需 適 當 的 溫 濕 度 及 養 分 Clarkea, 問 題 : 不 同 的 濕 度 是 否 會 影 響 黴 生 長? 4 實 驗 假 設 : 麵 包 上 的 黴 在 相 對 濕 度 越 高 時 生 長 越 好 5 實 驗 方 法 : 11

13 1 濕 度 控 制 : 利 用 防 潮 箱 及 加 溼 機 控 制 微 環 境 濕 度, 實 驗 依 濕 度 不 同 分 為 相 對 濕 度 40% 60% 及 80% 三 組, 每 天 二 次 檢 查 各 實 驗 組 濕 度 並 記 錄, 調 整 濕 度 值 在 目 標 值 的 ±5 % 內 2 植 與 觀 察 記 錄 : 以 純 化 黴 孢 子 懸 浮 液 個 /ml 孢 子 的 10-2 稀 釋 液 0.02ml 進 行 黴 植, 植 後 將 培 養 基 放 置 於 濕 度 控 制 的 環 境 圖 9, 每 日 於 上 午 7:30 分 及 下 午 7:30 分 拍 照, 利 用 image J 軟 體 測 量 黴 落 的 大 小, 再 利 用 excel 比 較 各 種 濕 度 下 黴 生 長 情 形 圖 8 利 用 image J 軟 體 測 量 黴 落 的 大 小 圖 9 濕 度 對 黴 生 長 的 影 響 實 驗 設 備 與 培 養 情 形 12

14 陸 研 究 結 果 : 一 研 究 發 霉 麵 包 上 的 黴 優 勢 族 群 一 區 別 發 霉 麵 包 上 的 黴 族 群 觀 察 加 水 的 麵 包 發 霉 的 情 形, 利 用 複 式 顯 微 鏡 區 別 麵 包 上 的 黴, 發 現 有 三 種 黴 優 勢 族 群 圖 10, 包 括 黑 黴 青 黴 及 根 黴 三 種 麵 包 上 的 黴 區 別 方 式 如 下 表 1 黑 黴 黑 黴 根 黴 青 黴 青 黴 圖 10 發 霉 麵 包 上 的 黴 優 勢 族 群 表 1 三 種 麵 包 上 的 黴 區 別 方 式 項 目 種 類 黑 黴 青 黴 根 黴 學 名 macor rouxii Penicillium notatum rhizopus stolonifer 外 部 型 態 圖 片 孢 子 型 態 呈 黑 色 為 囊 孢 子 呈 綠 色 或 灰 綠 色 為 頂 端 孢 子 呈 褐 色 為 囊 孢 子 三 種 使 外 型 呈 現 棉 花 狀 及 細 毛 狀 二 種, 為 囊 孢 子 柄 較 粗 較 扁 平 狀 生 長, 較 短 較 細, 為 頂 端 孢 子 柄 氣 生 粗 短, 扁 平 狀 分 布, 無 分 枝 有 隔 膜 與 虛 根 長 13

15 二 不 同 濃 度 黴 落 生 長 狀 況 1 根 黴 : 表 2 不 同 濃 度 根 黴 落 生 長 單 位 mm 2 稀 釋 濃 度 時 間 12 小 時 小 時 小 時 小 時 小 時 小 時 mm 2 稀 釋 濃 度 時 間 圖 11 不 同 濃 度 根 黴 落 生 長 說 明 : 1. 1 倍 與 10-1 倍 的 孢 子 液 在 48 小 時 最 早 有 孢 子 成 熟, 孢 子 液 溶 度 越 高 孢 子 成 熟 時 間 愈 早 表 2 2. 根 黴 72 小 時 的 培 養 觀 察 發 現, 所 有 濃 度 的 孢 子 稀 釋 液 都 使 成 長 圖 培 養 60 小 時 後 可 以 區 別 1 倍 10-1 倍 與 10-2 倍 三 種 濃 度 的 生 長 14

16 2 青 黴 : 表 3 不 同 濃 度 青 黴 生 長 單 位 mm 2 稀 釋 濃 度 時 間 12 小 時 小 時 小 時 小 時 小 時 小 時 mm 2 稀 釋 濃 度 時 間 圖 12 不 同 濃 度 青 黴 落 生 長 說 明 : 1. 1 倍 與 10-1 倍 的 孢 子 液 在 48 小 時 最 早 有 孢 子 成 熟, 孢 子 液 溶 度 越 高 孢 子 成 熟 時 間 愈 早 表 3 2. 青 黴 72 小 時 的 培 養 觀 察 發 現, 所 有 濃 度 的 孢 子 稀 釋 液 都 使 成 長 圖 培 養 60 小 時 後 可 以 區 別 六 種 濃 度 的 生 長 二 黴 在 不 同 的 競 爭 模 式 下 對 彼 此 生 長 的 影 響 1 單 一 種 黴 生 長 曲 線 繪 製 1-1 以 接 種 環 植 黴 的 生 長 曲 線 百 分 比 : 單 位 % 15

17 表 4 接 種 環 植 黴 的 生 長 曲 線 12h 24h 36h 48h 60h 72h 黑 黴 青 黴 根 黴 百 分 比 % 黑 黴 青 黴 根 黴 12h 24h 36h 48h 60h 72h 培 養 時 間 小 時 圖 13 以 接 種 環 植 黴 的 生 長 曲 線 說 明 : 比 較 三 種 黴 的 生 長 曲 線 圖, 發 現 在 第 3 天 時 黑 黴 與 根 黴 可 達 40% 以 上, 青 黴 則 只 有 0.4% 的 1-2 以 固 定 濃 度 接 種 黴 的 生 長 曲 線 百 分 比 : 單 位 % 表 5 以 固 定 濃 度 接 種 黴 的 生 長 曲 線 12h 24h 36h 48h 60h 72h 黑 黴 青 黴 根 黴 百 分 比 % 圖 14 以 固 定 濃 度 接 種 黴 的 生 長 曲 線 培 養 時 間 小 時 16

18 2 不 同 溫 度 下 麵 包 黴 間 競 爭 關 係 的 研 究 mm 2 根 圖 15 二 種 麵 包 黴 在 不 同 溫 度 下 的 競 爭 關 係 說 明 : 由 圖 15 可 知 二 種 麵 包 黴 在 不 同 溫 度 下 的 競 爭, 在 固 定 溫 度 30 及 34 上 的 溫 度 培 養 72 小 時 下, 培 養 基 內 生 長 的 都 是 根 黴 在 固 定 溫 度 20 時 則 只 生 長 青 黴 25 的 溫 度 則 二 種 麵 包 黴 都 存 在, 但 是 青 黴 的 生 長 是 根 黴 的 4.6 倍 / 不 同 位 置 對 黴 間 競 爭 的 影 響 3-1 滴 管 植 入 組 二 種 黴 的 位 置 很 近 表 6 以 滴 管 植 入 方 式 接 種 黴 的 競 爭 孢 子 數 個 /cc; 生 長 比 例 :% 滴 管 青 加 根 青 加 黑 根 加 黑 青 黴 根 黴 黑 黴 青 黴 孢 子 數 根 黴 孢 子 數 黑 黴 孢 子 數 青 黴 生 長 比 例 根 黴 生 長 比 例 黑 黴 生 長 比 例 百 分 比 % 組 別 溫 度

19 孢 子 數 個 / cc 組 別 圖 16 三 種 麵 包 黴 以 滴 管 植 入 方 式 接 種 黴 的 競 爭 關 係 說 明 : 1 由 圖 16 可 知 三 種 麵 包 黴 以 滴 管 植 入 方 式 接 種 的 競 爭 關 係, 競 爭 的 結 果 在 生 長 比 例 及 產 生 孢 子 數 上 皆 以 黑 黴 為 佳 2 三 種 麵 包 黴 競 爭 後 的 生 長 比 例 及 產 生 孢 子 數, 皆 比 單 獨 生 長 時 為 差 3-2 接 種 環 接 種 組 表 7 以 接 種 環 接 種 黴 的 競 爭 孢 子 數 個 /cc; 生 長 比 例 :% 接 種 環 青 加 根 青 加 黑 根 加 黑 青 黴 根 黴 黑 黴 青 黴 孢 子 數 根 黴 孢 子 數 黑 黴 孢 子 數 青 黴 生 長 比 例 根 黴 生 長 比 例 黑 黴 生 長 比 例 百 分 比 % 組 別 18

20 孢 子 數 個 / cc 組 別 圖 17 三 種 麵 包 黴 以 接 種 環 接 種 黴 的 競 爭 關 係 說 明 : 1 由 圖 17 可 知 三 種 麵 包 黴 以 接 種 環 接 種 組 接 種 的 競 爭 關 係, 競 爭 的 結 果 在 生 長 比 例 及 產 生 孢 子 數 上 皆 以 黑 黴 為 佳 2 三 種 麵 包 黴 競 爭 後 的 生 長 比 例 及 產 生 孢 子 數, 皆 比 單 獨 生 長 時 為 差 三 研 究 黴 的 分 泌 物 是 否 會 影 響 其 他 黴 的 生 長 百 分 比 % 百 分 比 % 根 黴 +1ml 青 黴 分 泌 物 平 均 所 佔 根 黴 單 一 生 長 所 佔 0 12h 24h 36h 48h 60h 72h 時 間 時 間 百 分 比 % 時 間 百 分 比 % 圖 18 二 種 麵 包 黴 加 入 其 他 黴 分 泌 物 的 影 響 時 間 19

21 說 明 : 1 由 圖 18 可 知 三 種 麵 包 黴 加 入 其 他 黴 分 泌 物 後, 皆 使 實 驗 組 生 長 較 好, 因 此 推 測 其 分 泌 物 對 其 他 黴 沒 有 抑 制 效 果 四 探 討 環 境 因 子 對 黴 生 長 的 影 響 一 溫 度 對 黴 生 長 的 影 響 : 1 固 定 溫 度 實 驗 : 培 養 72 小 時 以 後, 不 同 溫 度 下 落 生 長 有 顯 著 的 差 別, 如 圖 19 和 圖 20 此 結 果 明 顯 的 顯 示 出 在 25 下, 青 黴 與 根 黴 在 培 養 基 中 對 落 的 擴 大 為 最 適 的 溫 度 表 8 根 黴 在 不 同 溫 度 下, 生 長 72 小 時 的 落 生 長 情 形 溫 度 時 間 12 小 時 小 時 小 時 小 時 小 時 小 時 mm 2 溫 度 圖 19 根 黴 在 不 同 溫 度 下 培 養 72 小 時 後 的 平 均 生 長 20

22 表 9 青 黴 在 不 同 溫 度 下, 生 長 72 小 時 的 落 生 長 情 形 溫 度 時 間 12 小 時 小 時 小 時 小 時 小 時 小 時 mm 2 溫 度 圖 20 青 黴 在 不 同 溫 度 下 培 養 72 小 時 後 的 平 均 生 長 說 明 : 1. 根 黴 20 至 34 皆 可 生 長, 生 長 情 形 隨 溫 度 增 加 增 加, 但 34 時 生 長 反 而 下 降 表 8 圖 青 黴 的 生 長 在 25 至 30 較 佳,34 時 生 長 只 有 25mm2 表 9 圖 根 黴 的 生 長 溫 度 分 布 與 青 黴 的 生 長 溫 度 分 布 不 同, 青 黴 低 溫 時 生 長 較 佳 21

23 2 週 期 性 溫 度 變 動 實 驗 : mm 2 培 養 時 間 / 小 時 圖 21 根 黴 在 週 期 性 溫 度 變 動 下 生 長 情 形 mm 2 培 養 時 間 / 小 時 圖 22 青 黴 在 週 期 性 溫 度 變 動 下 生 長 情 形 說 明 : 1. 根 黴 的 生 長 在 室 溫 表 現 最 佳, 青 黴 的 生 長 在 20 至 25 最 佳 2. 實 驗 期 間 室 溫 的 最 高 溫 為 32.4, 最 低 溫 度 為 在 根 黴 的 25 及 20 至 25 的 實 驗 結 果 比 較, 由 實 驗 三 結 果 預 測 在 25 時 生 長 應 該 較 佳, 但 實 驗 後 結 果 表 示 週 期 性 溫 度 變 動 20 至 25 生 長 較 佳, 相 同 情 形 在 比 較 青 黴 的 25 與 室 溫 時 亦 同 22

24 二 濕 度 對 黴 生 長 的 影 響 : mm 2 % 培 養 時 間 / 小 時 圖 23 根 黴 在 不 同 相 對 濕 度 下 生 長 情 形 mm 2 % 培 養 時 間 / 小 時 圖 24 青 黴 在 不 同 相 對 濕 度 下 生 長 情 形 說 明 : 比 較 根 黴 與 青 黴 在 不 同 相 對 濕 度 下 生 長 情 形, 根 黴 在 相 對 濕 度 60% 培 養 60 小 時 後, 生 長 有 差 異 圖 23, 青 黴 的 差 異 則 不 明 顯 圖 24 23

25 柒 討 論 與 結 論 : 1. 觀 察 加 水 的 麵 包 發 霉 情 形, 以 複 式 顯 微 鏡 區 別 麵 包 上 的 黴, 發 現 有 三 種 黴 優 勢 族 群 圖 10, 包 括 黑 黴 macor rouxii 青 黴 Penicillium notatum 及 根 黴 rhizopus stolonifer, 三 者 雖 會 同 時 出 現 在 相 同 麵 包 上, 但 出 現 時 間 與 族 群 數 量 不 相 同 2. 將 稀 釋 後 的 孢 子 溶 液 培 養 發 現 濃 度 越 高 孢 子 成 熟 時 間 愈 早 表 2 3, 生 長 越 大 圖 這 種 方 式 培 養 60 小 時 後 可 以 利 用 的 生 長 來 區 別 不 同 濃 度 或 是 未 知 濃 度 的 黴 根 黴 rhizopus stolonifer.. 青 黴 Penicillium notatum. 孢 子 數 3. 溫 度 對 黴 生 長 的 影 響 在 很 多 文 獻 中 被 提 及, 大 多 種 類 以 20~30 為 黴 最 佳 的 生 長 溫 度 實 驗 以 固 定 溫 度 培 養 根 黴 與 青 黴, 二 者 的 生 長 在 不 同 溫 度 下 呈 現 常 態 分 布 的 現 象,25 至 30 是 較 佳 的 生 長 溫 度 青 黴 在 低 溫 時 生 長 較 佳 25 生 長 >30, 根 黴 在 高 溫 時 生 長 較 佳 30 生 長 >25 4. 以 週 期 性 溫 度 變 化 來 培 養 黴, 在 根 黴 的 25 及 20 至 25 的 實 驗 結 果 比 較, 由 實 驗 三 結 果 預 測 在 25 時 生 長 應 該 較 佳, 但 實 驗 後 結 果 表 示 週 期 性 溫 度 變 動 20 至 25 生 長 較 佳, 相 同 情 形 在 比 較 青 黴 的 25 與 室 溫 最 高 溫 為 32.4, 最 低 溫 度 為 29.4 時 亦 同, 討 論 可 能 原 因 為 室 溫 每 日 溫 度 的 改 變 律 動 可 能 使 得 生 長 速 度 增 加 5. 以 不 同 相 對 濕 度 來 培 養 根 黴 青 黴, 在 相 對 溼 度 60% 時 根 黴 生 長 較 佳, 但 相 對 濕 度 的 改 變 對 青 黴 則 沒 有 明 顯 的 影 響 6. 以 單 一 種 黴 生 長 曲 線 圖 來 看, 在 相 同 的 條 件 下, 黑 黴 的 生 長 速 度 最 快, 生 長 也 最 大, 其 次 是 根 黴, 最 差 是 青 黴 7. 比 較 三 種 黴 單 一 生 長 72h 與 互 相 競 爭 72h 的 結 果 發 現, 不 管 以 滴 管 或 是 接 種 環 接 種 黴, 兩 種 黴 在 競 爭 時 生 長 及 孢 子 數 量 都 會 比 單 一 生 長 時 還 小 在 不 同 位 置 的 競 爭 實 驗 中, 比 較 三 種 黴 競 爭 的 結 果 來 看, 黑 黴 最 佔 優 勢, 其 次 是 根 黴, 最 後 是 青 黴, 實 驗 結 果 和 討 論 與 結 論 第 6 點 相 符 8. 以 黴 的 分 泌 物 是 否 會 影 響 其 他 黴 生 長 的 結 果 來 看, 用 加 入 黴 分 泌 物 72h 與 單 一 培 養 72h 的 結 果 比 較 後, 發 現 加 入 黴 分 泌 物 後, 會 讓 黴 的 生 長 與 孢 子 數 量 增 24

26 加, 討 論 後 認 為 可 能 原 因 是, 因 操 作 實 驗 時 我 們 先 將 黴 以 接 種 環 接 種 後, 再 加 入 黴 分 泌 物, 因 此 可 能 將 孢 子 沖 散, 讓 黴 生 長 擴 散 9. 孢 子 濃 度 及 溫 度 是 影 響 黴 族 群 數 量 的 主 要 因 素, 在 相 同 孢 子 濃 度 下, 同 時 植 入 根 黴 與 青 黴, 二 者 的 生 長 分 布 會 出 現 差 異 生 態 棲 位 溫 度 是 影 響 分 布 差 異 的 主 要 因 素, 溫 度 在 30 以 上 根 黴 具 有 優 勢, 只 有 根 黴 生 長, 溫 度 在 20 時 青 黴 具 有 優 勢, 只 有 青 黴 生 長 25 時 二 者 同 時 存 在, 但 青 黴 生 長 較 佳 柒 參 考 資 料 : 王 也 珍, 有 趣 的 真, 國 立 自 然 科 學 博 物 館,1997 林 翰 葳 蔡 慶 宗, 褐 褐 有 名 - 利 用 生 物 防 治 與 植 物 的 過 敏 反 應, 台 北 市 立 中 正 高 級 中 學, 2011 許 元 勳, 病 毒 入 侵 - 新 世 紀 人 類 的 浩 劫, 世 茂 出 版 社,2002,52~55 黃 瑞 陽, 雙 黴 搶 珠 - 從 黴 的 競 爭 關 係 尋 找 生 物 抑 制 物, 財 團 法 人 旺 宏 基 金 教 育 會 第 六 屆 旺 宏 科 學 獎, 國 立 台 中 第 一 高 級 中 學, 2007 廖 若 陞, 科 學 發 展 415 期, 行 政 科 學 委 員 會,2007,17~21 曾 思 鳴 尤 丹 文, 抗 生 素 的 利 與 弊, 國 立 彰 化 女 子 高 級 中 學,2006 凌 郁 捷 黃 富 榆 黃 微 嘉, 鏈 黴 對 真 影 響 因 素 之 探 討, 國 立 台 中 女 子 高 級 中 學,

27 評 語 能 就 麵 包 發 黴 實 驗 中 發 現 多 種 共 同 生 長 之 黴 2. 宜 定 性 分 析 培 養 基 的 成 分 是 否 都 適 合 這 三 種 黴 的 生 長, 如 果 不 先 就 營 養 成 分 的 確 認, 則 無 法 確 定 是 競 爭 優 勢 所 造 成 的 結 果 3. 加 入 他 種 黴 的 分 泌 液 實 驗, 應 確 認 濾 液 中 有 其 分 泌 液, 才 可 以 得 到 會 不 會 影 響 其 生 長 的 結 論

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