第 3 期 马 养 民 等 :2D NMR 对 马 蹄 香 中 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 的 结 构 解 析 425 [6,7] 数 据, 并 且 其 氢 谱 数 据 的 部 分 归 属 有 误. 核 磁 共 振 技 术 是 解 析 复 杂 化 合 物 结 构 非 常 [8-10] 有 效 的

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1 第 30 卷 第 3 期 波 谱 学 杂 志 2013 年 9 月 ChineseJournalofMagneticResonance Vol.30No.3 Sep.2013 文 章 编 号 : (2013) 犇 犖 犕 犚 对 马 蹄 香 中 马 兜 铃 内 酰 胺 犐 犞 的 结 构 解 析 马 养 民 1,2, 贾 强 强 1, 程 小 伟 1, 王 鹏 飞 1 (1. 陕 西 科 技 大 学, 教 育 部 轻 化 工 助 剂 化 学 与 技 术 重 点 实 验 室, 陕 西 西 安 ; 2. 陕 西 农 产 品 加 工 技 术 研 究 院, 陕 西 西 安 ) 摘 要 : 通 过 核 磁 共 振 技 术 对 从 马 蹄 香 中 分 离 得 到 的 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 进 行 了 结 构 解 析, 第 一 次 报 道 了 该 化 合 物 的 碳 谱 数 据, 并 通 过 二 维 核 磁 共 振 (HSQC,HMBC) 对 其 碳 和 氢 信 号 进 行 了 全 归 属, 更 正 了 文 献 [6,7] 中 H 2 和 H 5 信 号 的 归 属 错 误. 关 键 词 : 核 磁 共 振 (NMR); 归 属 ;2D NMR; 马 兜 铃 内 酰 胺 IV; 马 蹄 香 中 图 分 类 号 :O 文 献 标 识 码 :A 引 言 马 蹄 香 ( 犛 犪 狉 狌 犿 犪 犺 犲 狀 狉 狔 犻 Oliv.) 为 马 兜 铃 科 (Aristolochiaceae) 马 蹄 香 属 植 物, 是 我 国 特 有 的 单 种 属 植 物, 广 泛 分 布 于 陕 西 四 川 贵 州 湖 北 江 西 河 南 甘 肃 等 地. 马 蹄 香 为 多 年 生 草 本 植 物, 其 干 燥 的 根 茎 在 民 间 药 用. 具 有 温 中 散 寒, 理 气 止 痛 之 功 效 [1]. 马 兜 铃 酸 (AAs) 和 马 兜 铃 内 酰 胺 (ALs) 是 马 兜 铃 科 植 物 的 主 要 活 性 组 分 物 质, 目 前 的 研 究 主 要 有 三 方 面 : 一 是 结 构 与 活 性 关 系 的 研 究, 二 是 在 原 植 物 中 或 配 方 中 的 定 量 和 定 性 研 究, 三 是 研 究 新 的 分 析 方 法 用 于 确 定 药 品 中 是 否 含 有 这 些 化 合 物. 在 这 些 工 作 中 均 需 要 纯 的 ALs [2,3]. 因 此, 分 离 纯 化 鉴 定 ALs 是 非 常 有 意 义 的. 到 目 前 为 止, 只 有 我 [4] [5] 国 学 者 董 诗 文 和 一 位 日 本 学 者 对 马 蹄 香 的 化 学 成 分 做 了 研 究. 主 要 分 离 得 到 了 生 物 碱 和 黄 酮 两 类 化 合 物. 本 文 综 合 利 用 各 种 柱 色 谱 法 从 马 蹄 香 中 首 次 分 离 得 到 了 马 兜 铃 内 [6] [7] 酰 胺 IV, 该 化 合 物 已 从 印 度 马 兜 铃 和 阿 根 廷 马 兜 铃 中 分 离 得 到, 但 均 未 报 到 其 碳 谱 收 稿 日 期 : ; 收 修 改 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 林 业 公 益 性 行 业 科 研 专 项 资 助 项 目 ( ). 作 者 简 介 : 马 养 民 (1963 ), 男, 陕 西 西 安 人, 博 士 后, 教 授, 研 究 方 向 为 天 然 产 物 化 学 和 有 机 合 成. 电 话 : ,E mail:mym63@sina.com. 通 讯 联 系 人.

2 第 3 期 马 养 民 等 :2D NMR 对 马 蹄 香 中 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 的 结 构 解 析 425 [6,7] 数 据, 并 且 其 氢 谱 数 据 的 部 分 归 属 有 误. 核 磁 共 振 技 术 是 解 析 复 杂 化 合 物 结 构 非 常 [8-10] 有 效 的 方 法, 本 文 第 一 次 报 道 了 该 化 合 物 的 碳 谱 数 据, 并 通 过 二 维 核 磁 共 振 对 其 碳 和 氢 信 号 进 行 了 全 归 属, 更 正 了 文 献 中 的 一 些 错 误, 为 以 后 的 研 究 工 作 提 供 一 定 的 参 考. 1 实 验 部 分 1.1 仪 器 及 试 剂 BrukerAvance I 400 型 超 导 核 磁 共 振 仪 测 定, 溶 剂 为 DMSO 犱 6.TMS 为 内 标. 1 H 和 13 CNMR 的 工 作 频 率 分 别 为 和 MHz, 峰 宽 分 别 为 Hz 和 Hz. 二 维 谱 包 括 HSQC HMBC 谱, 均 采 用 标 准 脉 冲 程 序.HSQC HMBC 的 犉 1( 1 H) 和 犉 2( 13 C) 的 峰 宽 分 别 为 Hz 和 Hz, 采 样 数 据 点 阵 狋 2 狋 1 = 药 材 马 蹄 香 采 自 陕 西 省 太 白 山 地 区, 经 西 北 农 林 科 技 大 学 林 学 院 鉴 定 为 马 蹄 香 ( 犛 犪 狉 狌 犿 犪 犺 犲 狀 狉 狔 犻 Oliv.). 1.3 分 离 马 蹄 香 全 草 粗 粉 (7.35kg), 用 工 业 乙 醇 提 取 3 次, 合 并 提 取 液, 减 压 浓 缩 得 乙 醇 提 取 物 520g, 将 其 混 悬 于 适 量 的 水 中, 分 别 用 乙 酸 乙 酯, 正 丁 醇 进 行 萃 取, 减 压 回 收 溶 剂 得 到 乙 酸 乙 酯 萃 取 物 187g, 正 丁 醇 萃 取 物 45g. 乙 酸 乙 酯 部 分 经 硅 胶 柱 色 谱, 用 石 油 醚 乙 酸 乙 酯 (1 0,20 1,10 1,5 1,2 1,1 1, 犞 / 犞 ) 及 乙 酸 乙 酯 甲 醇 (1 0,2 1,1 1,0 1, 犞 / 犞 ) 梯 度 洗 脱, 得 到 10 个 组 分 (FrA~FrJ), 对 FrF 反 复 用 硅 胶 凝 胶 柱 层 析 分 离 和 多 次 重 结 晶 后 得 到 化 合 物 马 兜 铃 内 酰 胺 IV. 经 薄 膜 色 层 分 析 (TLC) 检 识 测 定 其 犚 犳 值 为 0.5( 石 油 醚 乙 酸 乙 酯 1 1). 2 结 果 与 讨 论 2.1 一 维 核 磁 共 振 分 析 该 化 合 物 为 黄 色 无 定 形 粉 末,mp.344 ~346, 与 文 献 值 345 [7] 基 本 一 致, HR ESI MS 犿 / 狕 :[M+Na] ( 理 论 计 算 值 , 给 出 分 子 式 C 18H 13 [6,7] NO 5 ). 再 将 其 氢 谱 数 据 与 文 献 数 据 比 较, 确 定 该 化 合 物 为 马 兜 铃 内 酰 胺 IV. 1 H NMR 显 示 有 4 个 芳 香 氢 信 号 :δh7.29 (1H,s),7.68 (1H,s),6.85 (1H,d, 犑 =2.1 Hz),7.65(1H,d, 犑 =2.1Hz), 其 中 2 个 单 峰 为 H 2 和 H 9 的 信 号,2 个 双 重 峰 为 H 5 和 H 7 的 信 号.δH10.7(1H,s) 为 酰 胺 上 的 氢 信 号,δH3.91(3H,s) 和 3.99(3H,s) 为 2 个 甲 氧 基 上 的 氢 信 号,δH6.49 (2H,s) 为 亚 甲 二 氧 基 上 的 氢 信 号. 结 合 DEPT 135 和 13 CNMR ( 图 1) 可 以 判 断 δc103.7 为 亚 甲 二 氧 基 的 碳 信 号,δC 为 酰 胺 羰 基 的 碳 信 号,δC56.45 和 为 2 个 甲 氧 基 的 碳 信 号, 其 余 都 为 芳 香 碳 信 号.

3 426 波 谱 学 杂 志 第 30 卷 图 1 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 的 13 CNMR 谱 Fig.1 The 13 CNMRspectrumofaristololactamIV 2.2 二 维 核 磁 共 振 解 析 在 HMBC 中, 与 δc168.4 相 关 的 芳 香 氢 信 号 为 δh7.68 (s), 可 知 7.68 为 H 2, 则 另 一 个 芳 香 氢 的 单 峰 信 号 δh7.29 只 能 为 H 9. 由 δh7.29(h 9) 和 3.99 同 时 与 δc156.8 相 关 可 知 为 C 8,δH3.99 为 8 OCH 3 的 氢 信 号, 结 合 HSQC 可 判 断 δc56.45 为 8 OCH 3 的 碳 信 号, 故 δh3.91 只 能 为 6 OCH 3 的 氢 信 号,δC55.83 为 6 OCH 3 的 碳 信 号, HSQC 谱 也 证 明 了 这 一 点. 结 合 HMBC 中 δh 3.91 与 δc158.3 相 关 可 知 为 C 6. 由 δc156.8 和 同 时 与 δh6.85 处 的 双 重 峰 相 关 可 知 6.85 为 H 7 的 信 号, 则 另 一 个 双 重 峰 信 号 δh7.65 只 能 为 H 5. 根 据 以 上 对 氢 谱 的 归 属 并 结 合 HSQC 可 知 δc101.1 为 C 5,δC106.4 为 C 2,δC99.14 为 C 7,δC98.81 为 C 9. 通 过 和 文 献 [6,7] 对 比, 发 现 两 文 献 对 H 2 和 H 5 的 归 属 与 以 上 归 属 不 符, 文 献 中 H 2 的 化 学 位 移 在 高 场,H 5 在 低 场, 与 本 文 归 属 正 好 相 反. 在 1 H NMR 中, 以 NH 信 号 为 基 准, δh7.68 对 应 峰 的 面 积 为 1,δH 7.64 和 7.65 对 应 2 个 峰 的 总 面 积 为 1, 说 明 δh7.68 为 1 个 氢 的 单 峰,δH7.64~7.65 为 1 个 氢 的 双 重 峰, 再 结 合 HMBC 中 δc99.14 (C 7) 和 δh 7.65 (H 5) 相 关, 与 δh7.68 (H 2) 不 相 关, 进 一 步 验 证 了 本 文 的 归 属 是 正 确 的. 图 2 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 的 HMBC 主 要 相 关 图 示 Fig.2 ThemaincorrelationintheHMBCof aristololactamiv 在 HMBC 中, 由 δh 10.7 ( NH),7.68 (H 2) 和 7.29(H 9) 都 与 δc126.1 相 关, 可 知 为 C 10a, 又 根 据 δh 10.7 ( NH) 与 δc

4 第 3 期 马 养 民 等 :2D NMR 对 马 蹄 香 中 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 的 结 构 解 析 也 存 在 远 程 相 关, 可 以 确 定 为 C 1.δH 6.49 ( OCH 2O ) 与 δc 和 相 关, 说 明 和 为 C 3 和 C 4 的 信 号, 同 时 由 于 与 7.68(H 2) 也 相 关, 可 以 判 断 为 C 4, 那 么 就 为 C 3. 由 δh 7.65 (H 5) 和 6.85 (H 7) 同 时 与 δc118.9 相 关, 可 知 为 C 8a, 又 根 据 δh 7.65 (H 5) 与 δc111.3 也 存 在 远 程 相 关, 可 以 确 定 为 C 4a.δH7.29 (H 9) 与 10.7 ( NH) 同 时 与 δc133.1 相 关, 可 确 定 为 C 10. 文 献 报 道 马 兜 铃 内 酰 胺 骨 架 中 C 4b 和 C 10a 的 化 学 位 移 非 常 接 [11] 近, 故 判 断 C 4b 和 C 10a 的 信 号 在 δc126.1 处 重 合. 该 化 合 物 的 HMBC 相 关 情 况 及 HMBC 谱 分 别 见 图 2 和 图 3. 图 3 Fig.3 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 的 HMBC 局 部 放 大 谱 图 AsectionofHMBCspectrumofaristololactamIV 3 结 论 本 文 第 一 次 报 道 了 化 合 物 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 的 碳 谱 数 据. 综 合 运 用 HR ESI MS 1D NMR 2D NMR 等 实 验 测 试 技 术, 解 析 归 属 了 该 化 合 物 的 所 有 碳 氢 信 号 ( 见 表 1), 更 正 了 文 献 [6,7] 中 H 2 和 H 5 信 号 的 归 属 错 误, 完 善 了 该 化 合 物 的 核 磁 数 据, 为 马 兜 铃 内 酰 胺 骨 架 的 确 定 提 供 了 波 谱 依 据.

5 428 波 谱 学 杂 志 第 30 卷 表 1 马 兜 铃 内 酰 胺 犐 犞 的 犖 犕 犚 归 属 ( 犇 犕 犛 犗 犱 6) Table1 NMRassignmentofaristololactamIVinDMSO 犱 6 Position δc DEPT δh( 犑 /Hz) Ref.[3] δh Ref.[4] HSQC HMBC C / / / / NH CH 7.68 (1H,s) 7.52(s) 7.62(s) + / C / / / / OCH2O C / / / / H 2, OCH2O 4a C / / / / H 5 4b C / / / / H CH 7.65 (1H,d, 犑 =2.1) 7.60(d) 7.65(d) + H C / / / / H 7,6 OCH CH 6.85(1H,d, 犑 =2.1) 6.77(d) 6.82(d) + H C / / / / H 9,8 OCH3,H 7,H 5 8a C / / / / H 5,H CH 7.29(1H,s) 7.27(s) 7.28(s) + / C / / / / H 9, NH 10a C / / / / H 2,H 9, NH C=O C / / / / H 2, NH 6 OCH CH3 3.91(3H,s) 3.91(3H,s) 3.88(3H,s) + / 8 OCH CH3 3.99(3H,s) 3.98(3H,s) 3.94(3H,s) + / OCH2O CH2 6.49(2H,s) 6.40(2H,s) 6.40(2H,s) + / NH / / 10.7(1H,s) 10.6(1H,s) 10.6(1H,s) / / 为 文 献 中 归 属 错 误 的 氢 信 号 参 考 文 献 : [1] ChineseAcademyofScienceFloraofChinaEditorialBoard( 中 国 科 学 院 中 国 植 物 志 编 辑 委 员 会 ).FloraofChina ( 中 国 植 物 志 )[M].Beijing( 北 京 ):SciencePress( 科 学 出 版 社 ),1988. [2] HegdeV R,BorgesS,PuHai yan, 犲 狋 犪 犾.Semi syntheticaristolactams inhibitorsofcdk2enzyme[j].bioorg MedChem Let,2010,20: [3] ZhangJ,XiaoYS,FengJT, 犲 狋 犪 犾.Selectivelypreparativepurificationof 犪 狉 犻 狊 狋 狅 犾 狅 犮 犺 犻 犮 acidsandaristololactams from 犪 狉 犻 狊 狋 狅 犾 狅 犮 犺 犻 犪 plants[j].jpharmbiomedanal,2010,52: [4] DongSW,ShangM Y,WangX, 犲 狋 犪 犾.Chemicalconstituentsisolatedfrom 犛 犪 狉 狌 犿 犪 犺 犲 狀 狉 狔 犻 [J].JournalofChi nesepharmaceuticalsciences(jcps),2009,18: [5] IwashinaT,MarubashiW,SuzukiT.ChalconesandflavonolsfromtheChinesespecies 犛 犪 狉 狌 犿 犪 犺 犲 狀 狉 狔 犻 [J].Bio chemsystecol,2002,30: [6] KupchanS M,Merianos,JJ.Theisolationandstructuralelucidationofnovelderivativesofaristolochicacid fromaristolochiaindica[j].jorgchem,1968,33: [7] PriestapH A.Sevenaristololactamsfrom 犪 狉 犻 狊 狋 狅 犾 狅 犾 犮 犺 犻 犪 argentina[j].phytoehenristry,1985,24: [8] SunXue wei( 孙 学 伟 ),LiZhi gang( 李 志 刚 ),NiGuang cai( 倪 广 才 ), 犲 狋 犪 犾.Spectralstudiesandstructuralelu

6 第 3 期 马 养 民 等 :2D NMR 对 马 蹄 香 中 马 兜 铃 内 酰 胺 IV 的 结 构 解 析 429 cidationofaspoxicilin( 阿 扑 西 林 结 构 确 证 的 谱 学 研 究 )[J].ChineseJMagnReson( 波 谱 学 杂 志 ),2012,29(4): [9] LiYing jie( 李 英 俊 ),QiuWen long( 邱 文 龙 ),XuYong ting( 许 永 廷 ), 犲 狋 犪 犾.AnNMRstudyonanacylthiosem icarbazidecontainingbenzimidazolemoiety( 一 个 含 苯 并 咪 唑 环 的 酰 氨 基 硫 脲 NMR 研 究 )[J].ChineseJ Magn Reson( 波 谱 学 杂 志 ),2013,30(1): [10] PengShuang( 彭 双 ),HanLi feng( 韩 立 峰 ),LiuEr wei( 刘 二 伟 ), 犲 狋 犪 犾.NMRcharacterizationoftwoflavonyl glycosidesisolatedfromdrynariafortune( 骨 碎 补 中 2 个 黄 酮 苷 类 化 合 物 的 NMR 研 究 )[J].ChineseJ Magn Reson( 波 谱 学 杂 志 ),2013,30(1): [11] PriestapH A. 13 CNMRspectroscopyofaristolochicacidsandaristololactams[J].MagnResonChem,1989, 27: 犛 狋 狉 狌 犮 狋 狌 狉 犲 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 狅 犳 犃 狉 犻 狊 狋 狅 犾 狅 犾 犪 犮 狋 犪 犿 犐 犞 犳 狉 狅 犿 犛 犪 狉 狌 犿 犪 犺 犲 狀 狉 狔 犻 犗 犾 犻 狏. 犫 狔 2 犇 犖 犕 犚 1,2 犕 犃 犢 犪 狀 犵 犿 犻 狀, 犑 犐 犃 犙 犻 犪 狀 犵 狇 犻 犪 狀 1 犵, 犆 犎 犈 犖 犌 犡 犻 犪 狅 狑 犲 犻 1 1, 犠 犃 犖 犌 犘 犲 狀 犵 犳 犲 犻 (1.KeyLaboratoryofAuxiliaryChemistry & TechnologyforChemicalIndustry,MinistryofEducation, ShaanxiUniversityofScience& Technology,Xi'an710021; 2.ShaanxiResearchInstituteofAgriculturalProductsProcessingTechnology,Xi'an710021) 犃 犫 狊 狋 狉 犪 犮 狋 :ThestructureofaristololactamIVisolatedfrom 犛 犪 狉 狌 犿 犪 犺 犲 狀 狉 狔 犻 Oliv.wase lucidatedvianmr.the 13 CNMRdataandcompleteassigmentofthe 1 Hand 13 Cchem icalshiftsofthecompoundby2d NMR (HSQC,HMBC)wasfirstlyobtained,andthe assignmentsofh 2andH 5ofthecompoundwerealsocorrected. 犓 犲 狔 狑 狅 狉 犱 狊 :NMR,assignment,2D NMR,aristololactamIV, 犛 犪 狉 狌 犿 犪 犺 犲 狀 狉 狔 犻 Correspondingauthor:MaYang min,tel: ,E mail:mym63@sina.com.

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