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1 疾 病 名 血 友 病 甲 英 文 名 hemophilia A 别 名 血 友 病 A ICD 号 D69.8 病 因 和 发 病 机 制 研 究 的 进 展 1. 病 因 研 究 进 展 2. 发 病 机 制 研 究 进 展 FⅧ 基 因 相 当 大, 基 因 定 位 于 Xq28, 由 26 个 外 显 子 和 25 个 内 含 子 组 成, 全 长 达 186kb, 已 发 现 约 300 多 种 基 因 突 变, 基 因 型 与 表 型 密 切 相 关 点 突 变, 小 的 基 因 缺 失 引 起 轻 度 FⅧ 缺 乏 终 止 密 码 子, 大 的 基 因 缺 失, 插 入, 移 位, 无 义 突 变 往 往 引 起 严 重 的 FⅧ 缺 乏 和 临 床 表 型 1993 年,La-kich 和 Naylor 等 分 别 发 现, 已 知 HA 中 的 一 半 为 重 型, 而 重 型 HA 中, 约 有 40%~50% 是 由 于 发 生 在 FⅧ 基 因 22 内 含 子 中 的 倒 位 突 变 所 致 在 其 IVS22 中 有 1 个 转 录 方 向 与 FⅧ 相 反 的 基 因 称 为 F8A 的 基 因 在 FⅧ 基 因 5' 远 端 相 距 分 别 约 400kb 及 500kb 处, 分 别 具 有 1 个 与 F8A 的 及 其 周 围 序 列 长 达 9.5kb 的 高 度 同 源 的 转 录 方 向 与 FⅧ 相 同 的 基 因 序 列, 分 别 称 为 F8A 和 F8A 因 此 与 F8A 或 与 F8A, 可 能 发 生 同 源 重 组, 从 而 使 用 FⅧ 基 因 发 生 倒 位, 与 F8A 间 重 组 产 生 的 倒 位 叫 近 端 倒 位 与 F8A 间 重 组 产 生 的 倒 位 为 近 端 倒 位 最 近 在 1% 的 重 型 血 友 病 甲 中 还 发 现 FⅧ 内 含 子 1 倒 位 突 变 诊 断 研 究 进 展 1. 辅 助 诊 断 检 查 进 展 (1) 实 验 室 检 查 进 展 : (2) 特 殊 检 查 进 展 : 2. 临 床 诊 断 进 展 (1) 血 友 病 甲 基 因 突 变 的 检 测 方 法 1 直 接 基 因 诊 断 : 直 接 基 因 诊 断 由 于 直 接 检 测 突 变 基 因, 提 高 了 诊 断 的 可 靠 性, 适 用 于 无 法 获 得 血 友 病 甲 先 证 者 DNA 样 本 进 行 连 锁 分 析, 未 能 提 供 诊 断 信 息 的 情 况 下 直 接 检 测 法 通 常 要 比 连 锁 分 析 更 准 确 直 接 基 因 诊 断 有 如 下 几 种 : A. 长 距 离 PCR(LD-PCR): 以 往 倒 位 突 变 的 检 测 依 赖 于 传 统 的 Southern 杂 交, 用 Bcl I 限 制 性 内 切 酶 对 基 因 组 DNA 进 行 酶 切, 再 利 用 放 射 性 核 素 标 记 的
2 探 针 进 行 Southern 杂 交 此 方 法 DNA 用 量 大, 操 作 繁, 周 期 长, 需 使 用 放 射 性 核 素 近 几 年 报 道 了 运 用 长 距 离 PCR(LD-PCR) 技 术 检 测 FⅧ 子 基 因 倒 位, 发 现 44% 的 重 型 HA 病 人 或 家 系 成 员 存 在 FⅧ 因 倒 位 刘 敬 忠 等 首 先 运 用 LD-PCR 技 术, 能 快 速 灵 敏 地 检 测 FⅧ 内 含 子 22 倒 位 且 可 作 为 重 型 HA 的 筛 选 试 验, 约 1/4 的 家 系 可 通 过 此 技 术 检 出 倒 位 携 带 者 及 患 者, 且 可 用 于 产 前 诊 断 近 年 来 发 现 FⅧ 基 因 第 1 号 内 含 子 倒 位 是 仅 次 于 第 22 号 内 含 子 倒 位 的 突 变 热 点, 方 怡 等 提 出, 在 重 型 HA 患 者 携 带 者 诊 断 和 产 前 诊 断 时, 应 加 入 第 1 号 内 含 子 倒 位 的 筛 查, 使 遗 传 咨 询 的 分 子 诊 断 策 略 更 趋 完 善 B. 直 接 测 序 (DS): 通 过 DNA 自 动 测 序 仪 对 基 因 直 接 进 行 测 序, 找 出 基 因 突 变 的 确 切 位 置, 可 提 供 最 为 准 确 的 信 息 但 由 于 对 整 段 基 因 进 行 测 序, 工 作 量 大, 时 问 长, 限 制 了 其 在 HA 诊 断 上 的 广 泛 应 用 C. 单 链 构 象 多 态 性 (SSCP): 近 年 来 用 PCR- 单 链 构 象 多 态 性 分 析 法 检 测 小 片 段 PCR 产 物 (200bp 以 下 ), 可 筛 查 出 点 突 变 等 的 70%~95% 当 PCR 产 物 大 于 400bp 其 点 突 变 等 检 出 率 不 足 50% D. 变 性 梯 度 凝 胶 电 泳 (DGGE): 利 用 野 生 型 和 突 变 型 基 因 DNA 在 变 性 梯 度 凝 胶 过 程 中 迁 移 率 不 同 来 检 测 基 因 突 变, 当 被 检 测 片 段 长 度 小 于 600bp 时 检 出 率 可 达 95% 较 SSCP 相 比, 可 靠 精 确, 且 检 测 DNA 片 段 长 度 较 长 F. 变 性 高 效 液 相 色 谱 (DHPLC): 是 一 种 新 的 高 效 的 突 变 检 测 技 术, 通 过 分 离 柱 进 行 突 变 DNA 片 段 的 分 离 和 分 析, 对 FⅧ 基 因 突 变 的 检 测 率 达 96%, 该 法 快 速 高 效, 易 于 自 动 化, 被 检 片 断 的 长 度 可 达 1500bp 以 上, 但 需 要 再 经 测 序 才 能 确 定 突 变 的 具 体 位 置 2 间 接 基 因 诊 断 : 约 70%~80% 血 友 病 甲 的 FⅧ 基 因 突 变 呈 高 度 异 质 性, 完 全 靠 直 接 基 因 诊 断 查 找 其 基 因 突 变, 工 作 量 大 时 间 长 因 此 间 接 基 因 诊 断 法 对 DNA 多 态 性 标 志 进 行 连 锁 分 析 仍 是 目 前 广 泛 采 用 的 方 法, 主 要 有 以 下 两 种 1PCR 结 合 酶 解 进 行 限 制 性 内 切 酶 片 段 长 度 多 态 性 分 析 (PCR-RFLP), 成 为 临 床 对 非 倒 位 重 型 HA 及 轻 中 型 HA 的 患 者 和 携 带 者 检 出 及 产 前 诊 断 的 经 典 方 法 之 一 如 位 于 外 显 子 18 的 Bcl I 位 于 内 含 子 22 的 Xba I 位 于 内 含 子 19 的 Hind Ⅲ 等 2 可 变 数 目 的 串 联 重 复 序 列 (VNTR) 又 称 小 卫 星 DNA, 是 人 类 基 因 组 中 种 类 多, 分 布 广 又 具 有 高 度 多 态 性 的 小 片 段 重 复 序 列, 是 人 类 基 因 组 中 常 见 的 一 种
3 多 态 标 记, 其 直 用 十 分 广 泛, 如 在 距 FⅧ 基 因 4cm 处 的 可 变 数 目 串 联 重 复 序 列 DXS52(St14) 等, 其 重 复 序 列 为 (60~70bp)n 这 些 标 志 物 已 被 广 泛 应 用 于 HA 患 者 及 携 带 者 的 基 因 诊 断 与 产 前 诊 断 检 测 由 于 在 不 同 地 区 不 同 民 族 中, 各 种 多 态 性 标 志 物 的 杂 合 率 ( 对 HA 类 的 X 连 锁 遗 传, 杂 合 率 等 于 突 变 检 测 的 最 大 检 出 率 ) 有 所 不 同, 为 了 提 供 更 多 的 多 态 信 息 进 行 有 效 的 基 因 检 测, 首 先 应 研 究 各 多 态 性 标 志 物 在 人 群 中 的 杂 合 率, 然 后 根 据 人 群 实 际 情 况 选 择 杂 合 率 较 高 的 标 志 物, 且 联 合 应 用 几 种 标 志 物, 可 以 提 高 检 出 率 连 锁 分 析 对 于 HA 患 者 及 携 带 者 的 基 因 诊 断 与 产 前 检 测 不 失 为 一 种 简 便 快 捷 的 方 法 但 该 方 法 的 局 限 性 是 : 患 者 的 母 亲 必 须 是 HA 基 因 突 变 的 携 带 者, 这 对 于 一 些 由 于 新 的 基 因 突 变 造 成 的 无 任 何 家 族 史 的 散 发 病 例 是 不 适 合 的 ; 同 时 也 可 能 一 些 家 族 无 可 利 用 的 有 效 的 多 态 性 标 志 物, 以 及 多 态 性 标 志 物 与 突 变 位 点 偶 发 基 因 重 组 也 可 直 接 导 致 连 锁 误 差 (2) 产 前 诊 断 : 产 前 诊 断 的 基 因 检 测 过 程 与 前 述 的 基 因 检 测 过 程 相 同, 可 分 为 创 伤 性 产 前 诊 断 和 非 创 伤 性 产 前 诊 断, 创 伤 性 的 包 括 绒 毛 膜 活 检 羊 水 穿 刺 胎 儿 脐 带 血 等 ; 非 创 伤 性 包 括 植 入 前 诊 断 胎 儿 细 胞 学 诊 断 孕 妇 血 清 筛 查 及 超 声 诊 断 等 1 创 伤 性 产 前 诊 断 : 包 括 绒 毛 活 检 羊 水 穿 刺 胎 儿 脐 带 血 等, 产 前 诊 断 可 于 妊 娠 早 期 进 行, 所 需 标 本 可 通 过 妊 娠 10~13 周 吸 取 绒 毛 或 妊 娠 15~18 周 穿 刺 取 羊 水 获 得, 但 上 述 操 作 具 有 创 伤 性, 可 导 致 流 产 胎 儿 畸 形 或 死 亡 (5%) 等 胎 儿 脐 带 血 穿 刺 为 近 年 来 发 展 的 一 项 新 技 术, 需 要 有 高 度 熟 练 的 人 员 在 B 超 直 视 下 操 作, 一 般 在 妊 娠 18~24 周 可 成 功 采 取 血 样, 可 用 于 HA 等 疾 病 诊 断 2 非 创 伤 性 产 前 诊 断 : 近 几 年 开 展 的 利 用 孕 妇 外 周 血 中 胎 儿 细 胞 进 行 产 前 诊 断 的 方 法, 不 仅 取 材 方 便, 风 险 小 而 且 易 于 为 孕 妇 所 接 受 已 在 诸 如 胎 儿 8 地 中 海 贫 血 识 别 胎 儿 性 别 等 产 前 诊 断 中 获 得 成 功 但 由 于 其 操 作 复 杂, 费 用 昂 贵, 临 床 上 尚 不 可 能 广 泛 应 用 至 于 新 近 开 展 的 植 入 前 遗 传 诊 断, 虽 然 已 在 HA 产 前 诊 断 中 尝 试 成 功, 但 由 于 涉 及 体 外 受 精 和 染 色 体 荧 光 原 位 杂 交 技 术, 尚 不 能 广 泛 开 展 所 以 目 前 产 前 诊 断 仍 主 要 采 用 绒 毛 吸 取 和 羊 膜 穿 刺 术 随 着 分 子 生 物 学 技 术 的 提 高, 上 述 两 种 十 分 有 潜 力 的 无 创 性 产 前 诊 断 方 法 必 将 得 到 进
4 一 步 发 展 近 来 有 人 利 用 孕 妇 外 周 血 清 DNA 开 展 对 胎 儿 疾 病 的 产 前 诊 断, 是 较 有 意 义 的 探 索 治 疗 与 预 防 方 法 研 究 的 进 展 血 友 病 作 为 一 种 遗 传 病, 到 目 前 为 止, 没 有 根 治 的 办 法 血 友 病 主 要 是 止 血 治 疗 : 1. 局 部 止 血 包 括 局 部 压 迫 放 置 冰 袋 局 部 用 血 浆 止 血 粉 纤 维 蛋 白 泡 沫 凝 血 酶 肾 上 腺 素 或 明 胶 海 绵 贴 敷 等 2. 替 代 疗 法 是 目 前 最 有 效 的 治 疗 手 段 主 张 尽 早 治 疗, 将 凝 血 因 子 提 高 到 止 血 水 平, 避 免 出 血 并 发 征, 防 止 功 能 丧 失 如 果 采 用 为 患 者 定 期 输 注 浓 缩 凝 血 因 子 的 预 防 疗 法, 即 使 是 重 度 的 血 友 病 患 者, 也 可 以 过 上 几 乎 和 正 常 人 一 样 的 生 活, 但 目 前 全 世 界 尚 有 80% 患 者 没 有 任 何 替 代 治 疗 血 浆 制 品 的 产 率 仅 5%~10%, 随 血 源 紧 张 将 越 来 越 匮 乏 与 昂 贵, 中 国 的 患 者 很 难 承 受 这 种 预 防 疗 法, 只 能 在 发 生 出 血 后 输 注 浓 缩 凝 血 因 子 (1) 输 血 浆 为 轻 型 病 例 的 首 选 疗 法, 输 入 1000ml 新 鲜 血 浆 可 使 因 子 Ⅷ 含 量 提 高 到 正 常 的 20%~25%, 一 次 注 射 剂 量 不 宜 超 过 10~15ml/kg (2) 冷 沉 淀 物 : 冰 冻 冷 沉 淀 制 剂 中 每 袋 含 因 子 Ⅷ 的 活 性 平 均 为 100u, 可 使 因 子 Ⅷ 血 浆 浓 度 提 高 到 正 常 的 50% 以 上 (3) 因 子 Ⅷ 浓 缩 剂 : 每 单 位 的 因 子 Ⅷ 相 当 于 正 常 人 新 鲜 血 浆 内 平 均 的 活 性, 每 公 斤 体 重 注 入 1U 因 子 Ⅷ, 可 使 体 内 因 子 Ⅷ 的 活 性 升 高 约 2% 因 子 Ⅷ 在 体 内 半 寿 期 为 8~12h 必 须 每 12 小 时 补 充 1 次 ; 早 期 小 出 血 一 般 用 7U/kg 体 重 即 有 效 ; 中 度 出 血, 需 补 充 20~30U/kg 体 重 ( 每 12 小 时 重 复 注 射 ), 严 重 者 ; 需 补 充 50~100U/kg 体 重 ( 每 12~24 小 时 给 20~25U/kg 直 到 出 血 停 止 或 创 口 愈 合 ) 这 是 目 前 最 安 全 方 便 有 效 的 治 疗 方 法 (4) 猪 FⅧ 浓 缩 物 : 多 数 抑 制 物 对 猪 FⅧ 的 亲 和 性 比 对 人 FⅧ 亲 和 性 差, 不 易 与 人 FⅧ 抗 体 发 生 交 叉 反 应, 用 于 高 反 应 型 抑 制 物 且 严 重 出 血 患 者 的 治 疗 副 作 用 : 轻 度 发 热, 皮 疹, 血 小 板 减 少 (5%~11%), 多 与 剂 量 有 关, 偶 尔 有 变 态 反 应, 未 经 病 毒 灭 活 猪 与 人 FⅧ 有 交 叉 免 疫 性, 约 30% 产 生 抗 猪 FⅧ 抗 体, 造 成 耐 药 强 调 开 始 足 量, 迅 速 降 低 抗 体, 抗 体 滴 度 <5BU:50U/kg;5~30BU: 75~100U/kg:>30U:100~150U/kg 最 近 重 组 的 猪 FⅧ 进 入 一 期 临 床 试 验 : 重 组 人 一 猪 FⅧ 混 合 物 利 用 抗 原 性 较 弱 的 无 B 区 的 猪 FⅧ 序 列 替 代 人 FⅧA2, 活
5 化 的 肽 -A3 和 C2 序 列, 以 降 低 免 疫 原 性 与 抗 原 性, 可 望 成 为 治 疗 抑 制 物 的 新 制 剂 (5)FⅧ 旁 路 制 剂 - 不 依 赖 FⅧ 的 止 血 的 制 剂 : 其 作 用 原 理 是 绕 开 内 源 性 凝 血 途 径, 通 过 补 充 外 源 或 共 同 凝 血 途 径 中 所 需 的 凝 血 因 子 同 样 可 达 到 凝 血 终 点 凝 血 酶 原 复 合 物 (PCC) 和 激 活 的 凝 血 酶 原 复 合 物 (APCC): 可 改 善 止 血 功 能, 且 与 FⅧ 抗 体 效 价 无 关, 适 用 于 FVII 抗 体 效 价 高 的 患 者, 对 关 节 肌 肉 创 伤 出 血, 有 效 率 约 50%~60% 3. 其 他 疗 法 (1) 达 那 唑, 对 轻 中 度 者 有 效 ; (2)1- 脱 氨 基 8-D- 精 氨 酸 加 压 素 (DDAVP) 静 脉 滴 注, 对 血 友 病 甲 有 效 ; (3) 静 脉 输 注 丙 球 (IVIG): 免 疫 球 蛋 白 中 的 特 异 抗 体 可 灭 活 FⅧ 抗 体, 具 有 长 短 期 的 免 疫 抑 制 效 果, 剂 量 0.4g/(kg d) 5d, 需 与 其 他 药 物 联 合 应 用, 不 宜 首 选 (4) 其 他 治 疗 如 6- 氨 基 己 酸 糖 皮 质 激 素 女 性 避 孕 药 花 生 衣 制 剂 抗 纤 溶 药 物 等 可 选 用 : 4. 替 代 疗 法 时 的 不 良 反 应 及 处 理 (1)FⅧ 抑 制 物 是 临 床 最 常 见 的 引 起 出 血 的 凝 血 因 子 抑 制 物,1940 年 报 告 了 首 例 获 得 性 血 友 病 80 年 代 以 前, 伴 有 抑 制 物 的 血 友 病 患 者 治 疗 棘 手, 死 亡 率 较 高 目 前 随 着 FⅧ 旁 路 制 剂 的 应 用, 使 患 者 的 预 后 大 大 改 观 抑 制 物 产 生 的 流 行 病 学 与 危 险 因 素 HA 患 者 接 受 含 有 FⅧ 的 血 制 品 替 代 治 疗 后 产 生 的 特 异 性 抑 制 或 灭 活 FⅧ 促 凝 活 性 的 抗 体, 发 生 率 占 HA20%~30%,95% 的 抑 制 物 发 生 在 中 重 型 抑 制 物 产 生 的 平 均 时 间 为 暴 露 于 抗 原 后 50 天 内 ( 中 位 数 5~16 天 ) 1/3 抑 制 物 为 一 过 性, 无 临 床 意 义 80% 为 高 反 应 型 多 发 生 于 儿 童 (10 岁 以 前 ) 有 阳 性 家 族 史, 某 些 种 族 ( 如 非 洲 人 种 ), 免 疫 应 答 反 应 强 者 发 生 抑 制 物 危 险 性 较 高 近 年 发 现 抑 制 物 产 生 与 基 因 关 系 密 切, 大 片 断 基 因 缺 失 ( 约 占 30%), 无 义 突 变 ( 约 占 25%);22 内 含 子 基 因 倒 位 ( 约 占 20%~30%), 终 止 密 码 子 引 起 FⅧ 蛋 白 缺 失, 抑 制 物 的 发 生 率 占 35%, 而 小 的 基 因 缺 失, 错 义 突 变, 剪 切 点 突 变 致 FⅧ 蛋 白 存 在, 但 活 性 丧 失, 这 种 抑 制 物 的 发 生 率 仅 占 5%~10% 因 此 可 见, 基 因 突 变 类 型 可 成 为 临 床 预 测 抑 制 物 发 生 的 危 险 因 素 之 一 较 重 要 的 突 变 往 往 缺 乏 FⅧ 抗
6 原 (CRM-), 重 型 患 者 由 于 体 内 基 本 无 FⅧ 蛋 白 ( 抗 原 ) 的 合 成 与 分 泌, 替 代 治 疗 采 用 的 FⅧ 则 成 为 异 体 蛋 白 ( 抗 原 ), 诱 导 免 疫 反 应, 产 生 同 种 免 疫 抗 体 轻 中 型 HA 可 合 成 和 分 泌 无 功 能 活 性 的 FⅧ 蛋 白, 因 此 部 分 患 者 可 形 成 免 疫 耐 受, 抗 体 发 生 率 低 (3%~13%) 但 某 些 CRM+ 错 义 突 变 的 轻 中 型 HA 也 是 抑 制 物 产 生 的 危 险 因 素 引 起 稳 定 的 FⅧ 分 子 异 常 的 突 变 ( 如 Cys 残 基 可 导 致 异 常 二 硫 化 键 形 成 ) 是 抑 制 物 产 生 的 最 危 险 因 素 抑 制 物 的 免 疫 生 物 学 特 性 FⅧ 抑 制 物 属 多 克 隆 高 亲 和 性 的 免 疫 球 蛋 白, 多 IgG( 自 身 抗 体 大 多 为 Ig1 Ig3 Ig4), 某 些 IgG 中 和 FⅧ 可 能 是 由 于 其 内 源 性 蛋 白 水 解 活 性 此 反 应 可 发 生 在 非 HA 患 者, 如 自 身 免 疫 性 疾 病 (SLE, 类 风 湿 关 节 炎 ), 此 外 药 物 ( 如 青 霉 素,α- 干 扰 素 等 ), 妊 娠 或 分 娩 后 抗 体 产 生 机 制 复 杂, 尚 未 完 全 清 楚, 与 治 疗 的 强 度, 制 剂 有 关 (2) 病 毒 感 染 并 发 症 :1985 年 以 前, 多 数 接 受 浓 缩 物 治 疗 的 血 友 病 患 者 感 染 HIV, 乙 肝 (HBV), 丙 肝 病 毒 (HCV), 直 至 近 几 年 献 血 员 筛 选 及 病 毒 灭 活 得 到 改 善 肝 脏 病 变 :HCV,HBV 感 染 发 展 成 慢 性 活 动 性 肝 炎, 慢 性 迁 延 性 肝 炎 (50%), 肝 硬 化 (10%~20%), 肝 癌 发 生 率 高 于 一 般 人 群 30 倍 肝 功 能 衰 竭 已 成 为 血 友 病 患 者 死 亡 的 不 可 忽 视 的 原 因 之 一 HCV 治 疗 同 非 血 友 病 患 者 的 肝 炎, α 干 扰 素 及 病 毒 唑 合 用, 约 1/2 获 得 长 期 缓 解 国 外 对 少 数 失 代 偿 性 肝 硬 化 血 友 病 患 者 进 行 肝 移 植, 移 植 的 肝 脏 产 生 一 定 的 FⅧ, 因 此 血 友 病 同 时 得 到 改 善 少 数 患 者 HCV 合 并 HIV 感 染, 治 疗 棘 手, 死 亡 率 大 大 增 加 (3) 获 得 性 免 疫 缺 陷 病 (AIDS):1978~1985 年,90% 重 型 HA 感 染 HIV,AIDS 成 为 血 友 病 死 亡 的 主 要 原 因 ( 占 65%) HIV 感 染 引 起 继 发 性 免 疫 缺 陷, 卡 波 氏 瘤 增 加 200 倍, 非 霍 奇 金 淋 巴 瘤 增 加 29 倍 1985 年 以 来, 随 着 严 格 献 血 员 筛 选, 病 毒 检 测 及 病 毒 灭 活 技 术 ( 加 热 法, 有 机 溶 剂 加 表 面 活 性 剂, 亲 和 层 析 法, 二 步 法 病 毒 灭 活 ) 的 不 断 改 进, 现 已 基 本 消 除 感 染 HIV 的 危 险, 血 制 品 的 安 全 性 与 有 效 性 得 到 大 大 提 高 治 疗 同 其 它 非 血 友 病 AIDS 患 者 (4) 血 :FⅧ 浓 缩 剂 是 从 大 量 混 合 血 浆 中 制 备 的, 因 此 不 代 X-STR 位 点 一 般 有 2 条 不 同 的 等 位 基 因 ( 纯 合 子 时 相 同 ), 其 中 1 条 为 父 源 性, 而 男 性 后 代 仅 有 1 条 母 源 性 等 位 基 因 通 过 与 亲 代 X-STR 基 因 型 对 比, 根 据 等 位 基 因 的 数 目 位 置 可 确 定 子 代 个 体 及 其 性 别 但 在 特 定 X-STR 位 点 双 亲 存 在 相 同 等 位 基 因 等
7 情 况 下, 单 一 位 点 分 析 常 难 以 作 出 肯 定 结 论 为 了 避 免 上 述 问 题, 本 研 究 组 联 合 应 用 了 2 个 X-STR 位 点 DXS101 DXS6797 据 报 道,DXS101 DXS6797 在 中 国 汉 族 群 体 的 多 态 性 分 别 为 , 两 者 联 用 可 互 相 补 充 验 证, 增 加 STR 位 点 分 析 的 有 效 信 息 量, 提 高 检 测 的 可 靠 性 和 准 确 度 本 研 究 结 果 表 明, 单 一 DXS101 男 胎 诊 断 符 合 率 为 94.12%, 女 胎 符 合 率 为 100% 单 一 DXS6797 男 胎 女 胎 诊 断 符 合 率 分 别 为 94.12% 和 93.33% DXS101+DXS6797 判 断 胎 儿 性 别 的 准 确 率 则 达 100% 16 例 同 时 接 受 SRY 基 因 及 STR 位 点 分 析 的 样 本, 两 种 方 法 均 准 确 判 断 胎 儿 性 别, 结 果 一 致 证 实 了 多 个 X-STR 分 析 可 准 确 鉴 定 DNA 来 源 及 胎 儿 性 别 该 法 不 局 限 于 男 胎, 对 女 胎 亦 能 得 出 肯 定 结 论, 适 用 范 围 广, 可 用 于 性 连 锁 遗 传 病 甚 至 某 些 性 染 色 体 病 等 的 诊 断, 为 无 创 性 产 前 诊 断 开 辟 了 新 的 思 路 但 是 该 法 需 同 时 分 析 双 亲 基 因 型, 操 作 较 繁 琐, 而 且 由 于 缺 乏 Y 染 色 体 信 息, 单 独 应 用 不 能 确 切 排 除 常 见 性 染 色 体 异 常 ( 如 Klinefelter 综 合 征 等 ) 总 之, 本 研 究 组 在 高 纯 度 高 特 异 性 胎 儿 细 胞 群 分 选 及 微 量 模 板 预 扩 增 的 基 础 上, 分 别 采 用 SRY 基 因 及 多 X-STR 位 点 作 为 胎 源 细 胞 鉴 定 系 统, 表 明 两 种 方 法 均 能 有 效 判 断 母 血 中 有 核 红 细 胞 来 源, 且 各 有 优 缺 点, 两 者 结 合 将 有 更 广 阔 的 应 用 前 景, 对 无 创 性 产 前 诊 断 的 发 展 具 有 重 要 意 义 目 前 存 在 问 题 和 研 究 热 点 近 期 期 刊 发 表 的 部 分 论 文 凝 血 因 子 Ⅷ 内 含 子 ⅩbaⅠ 多 态 位 点 检 测 及 其 在 血 友 病 A 产 前 诊 断 中 的 应 用 单 细 胞 四 重 巢 式 荧 光 聚 合 酶 链 反 应 进 行 血 友 病 A 基 因 诊 断 和 性 别 鉴 定 的 研 究 应 用 遗 传 多 态 性 连 锁 分 析 进 行 血 友 病 A 家 系 分 析 提 高 血 友 病 A 患 者 生 活 质 量 的 干 预 模 式 获 得 性 血 友 病 A 的 治 疗 血 友 病 A 家 庭 治 疗 46 例 经 验 总 结 血 友 病 甲 患 者 产 生 FⅧ 抗 体 的 机 制 及 治 疗 新 进 展 血 友 病 甲 患 者 因 子 Ⅷ 抑 制 物 发 生 的 相 关 因 素 分 析 血 友 病 的 基 因 治 疗
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