序 言 药 学 院 目 前 有 药 学 药 物 制 剂 学 和 临 床 药 学 三 个 专 业, 均 属 实 践 性 强, 动 手 能 力 要 求 高 的 专 业 基 于 药 学 生 学 科 基 础 不 同, 培 养 目 标 不 同, 社 会 需 求 不 同, 药 学 院 药 理 学 和 毒 理 学

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1 药 学 生 毕 业 前 药 理 毒 理 学 强 化 培 训 自 编 教 材 主 编 : 沈 志 强 副 主 编 : 陈 鹏 周 轶 萍 王 鹏 杨 桂 梅 编 者 : 陈 亚 娟 何 波 罗 敏 罗 绍 忠 徐 湘 婷 张 六 一 宋 京 风 张 玲 昆 明 医 科 大 学 药 学 院 药 理 系 二 零 一 二 年 八 月

2 序 言 药 学 院 目 前 有 药 学 药 物 制 剂 学 和 临 床 药 学 三 个 专 业, 均 属 实 践 性 强, 动 手 能 力 要 求 高 的 专 业 基 于 药 学 生 学 科 基 础 不 同, 培 养 目 标 不 同, 社 会 需 求 不 同, 药 学 院 药 理 学 和 毒 理 学 应 该 有 不 同 于 医 学 专 业 的 特 点 药 理 学 和 药 物 毒 理 学 是 综 合 反 映 药 物 二 重 性 的 科 学, 是 新 药 研 制 过 程 中 起 主 导 作 用 的 环 节, 进 行 毒 理 学 和 药 效 学 研 究 才 能 对 新 药 的 安 全 性 和 有 效 性 作 出 科 学 准 确 全 面 地 评 价, 该 研 究 结 果 将 决 定 一 个 目 标 化 合 物 最 终 能 否 成 为 新 药 充 分 利 用 药 学 院 暨 省 级 重 点 实 验 室 的 优 势 特 点, 需 注 重 培 养 学 生 的 新 药 研 发 能 力 和 研 究 思 路, 了 解 新 药 发 现 的 途 径 和 研 发 的 基 本 过 程, 凸 显 药 学 院 暨 重 点 实 验 室 的 药 学 特 色 因 此, 为 我 校 药 学 院 本 科 生 开 设 药 学 生 毕 业 前 药 理 毒 理 学 强 化 培 训 尤 为 必 要 我 们 的 总 体 目 标 是 要 将 强 化 培 训 变 成 药 理 学 与 毒 理 学 知 识 的 中 转 站 合 理 用 药 和 新 药 研 发 能 力 的 训 练 场 应 用 型 药 学 人 才 的 孵 化 器, 提 高 创 新 思 维 独 立 分 析 和 解 决 问 题 的 能 力, 增 强 药 学 生 实 习 和 毕 业 后 岗 位 适 应 能 力 和 社 会 竞 争 能 力 药 学 院 药 理 系 2012 年 8 月

3 目 录 实 验 一 药 理 毒 理 学 实 验 基 本 技 能 1 实 验 二 实 验 终 末 大 鼠 处 理 方 法 与 技 能 6 实 验 三 药 物 不 同 剂 量 对 药 物 作 用 的 影 响 10

4 实 验 一 药 理 毒 理 学 实 验 基 本 技 能 目 的 学 习 并 掌 握 实 验 动 物 的 捉 拿 固 定 给 药 取 血 等 方 法, 了 解 实 验 动 物 的 性 别 鉴 别 与 编 号 及 实 验 动 物 用 药 量 的 确 定 及 计 算 方 法 器 材 灌 胃 针 注 射 器 (1ml,2ml) 毛 细 吸 管 烧 杯 (25ml) 手 术 剪 眼 科 剪 有 齿 镊 止 血 钳 手 套 药 品 生 理 盐 水 饱 和 苦 味 酸 动 物 大 鼠 小 鼠 方 法 实 验 动 物 (Laboratory animal): 是 指 经 人 工 饲 育 对 其 携 带 的 微 生 物 实 行 控 制 遗 传 背 景 明 确 或 者 来 源 清 楚, 用 于 科 学 研 究 教 学 生 产 检 定 以 及 其 他 科 学 实 验 的 动 物 实 验 动 物 是 生 命 科 学 研 究 最 重 要 的 和 不 可 替 代 的 实 验 材 料 实 验 动 物 和 动 物 实 验 是 研 究 包 括 人 类 在 内 的 生 命 活 动 及 其 疾 病 防 治 规 律 的 基 本 手 段 药 理 学 常 用 的 实 验 动 物 有 小 鼠 大 鼠 豚 鼠 家 兔 狗 猴 等 一 实 验 动 物 的 微 生 物 分 类 根 据 不 同 的 微 生 物 等 级 标 准 和 环 境 控 制 要 求, 我 国 将 实 验 动 物 分 为 4 个 等 级, 即 普 通 级 动 物 清 洁 级 动 物 无 特 定 病 原 体 动 物 和 无 菌 动 物 普 通 动 物 Conventional(CV)animal: 不 携 带 用 现 有 检 测 手 段 可 测 的 人 兽 共 患 病 原 和 动 物 烈 性 传 染 病 病 原 清 洁 动 物 Clean(CL)animal: 除 普 通 动 物 应 排 除 的 病 原 体 外, 不 携 带 对 动 物 危 害 大 的 和 对 科 学 研 究 干 扰 大 的 病 原 体 无 特 殊 病 原 体 动 物 Specific pathogen free(spf)animal: 除 普 通 动 物 清 洁 动 物 应 排 除 的 病 原 外, 不 携 带 对 科 学 实 验 干 扰 大 的 致 病 性 病 原 体 无 菌 动 物 germ free(gf)animal: 不 能 检 出 一 切 生 命 体 的 动 物 二 实 验 动 物 的 性 别 鉴 别 与 编 号 实 验 动 物 的 性 别 鉴 别 : 大 白 鼠 和 小 白 鼠 根 据 动 物 肛 门 与 生 殖 器 之 间 的 距 离 来 区 分, 距 离 远 的 为 雄 性, 近 的 为 雌 性 ; 雌 鼠 可 见 性 器 官 部 位 有 开 孔 ( 阴 道 口 ), 腹 部 有 明 显 的 乳 头 ; 雄 性 可 见 阴 囊 内 睾 丸 下 垂, 天 热 时 尤 为 明 显 实 验 动 物 的 编 号 方 法 : 1. 染 色 法 是 用 化 学 药 品 在 动 物 明 显 部 位 被 毛 上 进 行 涂 染, 并 用 不 同 颜 色 来 区 别 各 组 动 物, 是 实 验 室 最 常 用 且 容 易 掌 握 的 方 法 给 大 白 鼠 小 白 鼠 标 记, 一 般 用 黄 色 苦 味 酸 染 料 2. 挂 牌 法 给 狗 猫 等 大 动 物 挂 牌 编 号, 可 将 铝 制 号 码 牌 固 定 在 耳 腿 颈 部 等 处 3. 被 毛 剪 号 用 剪 刀 在 动 物 背 部 剪 毛 标 记 4. 笼 子 编 号 把 笼 号 作 为 个 体 号, 代 替 动 物 编 号 三 实 验 动 物 的 捉 拿 与 固 定 抓 取 固 定 实 验 动 物 前, 必 须 对 各 种 动 物 的 一 般 习 性 有 所 了 解, 在 进 程 过 程 中, 既 要 小 心 仔 细, 又 要 大 胆 敏 捷 ; 既 要 防 止 动 物 对 人 员 的 伤 害, 又 要 防 止 对 动 物 的 伤 害, 达 到 抓 取 好 固 定 动 物 的 目 的 小 鼠 小 鼠 一 般 不 会 咬 人, 但 抓 取 时 要 轻 稳 先 用 右 手 抓 住 鼠 尾 提 起, 放 在 试 验 台 上 或 鼠 笼 盖 上, 在 其 向 前 爬 行 时, 用 左 手 的 拇 指 和 食 指 抓 住 小 鼠 的 两 耳 及 颈 背 部 皮 肤, 然 后 将 小 鼠 置 于 左 手 手 心 中 把 后 肢 拉 直, 用 左 手 的 无 名 指 和 小 指 按 住 尾 巴 和 后 肢, 完 全 固 定 后 松 开 右 手 对 操 作 熟 练 者 可 采 用 左 手 抓 取 法, 根 据 实 验 需 要 可 将 小 鼠 固 定 在 手 中, 也 可 将 小 鼠 固 定 在 固 定 器 中, 如 小 鼠 固 定 盒 1

5 小 鼠 的 捉 拿 法 图 1 图 1 图 1 小 鼠 的 捉 拿 法 大 鼠 大 鼠 的 牙 齿 尖 锐, 容 易 激 怒 咬 人, 初 次 抓 取 大 鼠 者 可 戴 厚 帆 布 手 套, 不 要 突 然 袭 击 式 的 去 抓 大 鼠, 抓 取 时 右 手 慢 慢 伸 向 大 鼠 尾 巴, 尽 量 向 尾 巴 根 部 靠 近, 抓 住 其 尾 巴 后 提 起, 置 于 试 验 台 上, 右 手 轻 轻 抓 住 尾 巴 向 后 拉, 左 手 抓 紧 大 鼠 两 耳 及 头 颈 部 皮 肤, 并 将 大 鼠 固 定 在 左 手 中, 也 可 将 大 鼠 固 定 在 大 鼠 固 定 器 或 大 鼠 固 定 板 上 图 2 图 2 大 鼠 的 捉 拿 法 四 实 验 动 物 的 给 药 方 法 在 动 物 实 验 过 程 中, 根 据 不 同 的 实 验 目 的 动 物 种 类 药 物 类 型 来 决 定 动 物 的 给 药 途 径 与 方 法 动 物 的 给 药 方 法 主 要 有 经 口 给 药 法 注 射 给 药 法 及 皮 肤 给 药 法 经 口 给 药 法 1 器 材 灌 胃 针 ( 带 圆 珠 头 ) 注 射 器 2 给 药 步 骤 (1) 固 定 动 物 大 鼠 小 鼠 用 手 固 定, 用 左 手 拇 指 和 食 指 抓 住 鼠 两 耳 和 头 颈 皮 肤, 其 他 三 指 抓 住 背 部 皮 肤, 将 鼠 抓 在 手 掌 内 (2) 插 入 灌 胃 针 或 胃 管 大 鼠 小 鼠 豚 鼠 直 接 插 入, 灌 胃 针 插 入 食 管 时 很 流 畅, 动 物 通 常 不 反 抗, 若 误 入 气 管 因 阻 碍 呼 吸, 动 物 会 挣 扎 (3) 灌 胃 灌 胃 针 插 入 需 要 到 达 的 位 置 后, 缓 慢 注 入 药 物 (4) 拔 去 灌 胃 针 灌 药 完 毕 后, 轻 轻 拔 出 灌 胃 针 注 射 给 药 法 1 器 材 注 射 器 镊 子 酒 精 棉 球 干 棉 球 2 注 射 部 位 和 方 法 (1) 腹 腔 注 射 在 腹 部 下 1/3 处, 略 靠 外 侧, 朝 头 方 向 平 行 刺 入 皮 肤 约 5mm, 再 把 针 竖 起 45 穿 过 腹 膜 进 入 腹 腔 内, 在 慢 慢 注 入 药 物, 大 鼠 小 鼠 一 般 一 人 即 可 完 成 操 作 (2) 静 脉 注 射 2

6 a 大 小 鼠 尾 静 脉 注 射 尾 静 脉 注 射 时 常 用 左 右 两 侧 的 两 根 静 脉, 背 侧 的 尾 静 脉 也 可 用, 但 由 于 其 位 置 容 易 移 动, 不 如 两 侧 的 静 脉 好 使 用 动 物 在 筒 式 固 定 器 固 定 好 后, 反 复 用 酒 精 棉 球 擦 尾 部, 以 达 到 消 毒 和 使 血 管 扩 张 的 目 的 选 择 靠 尾 尖 部 的 部 位, 将 尾 折 一 适 宜 的 角 度 (<30 ), 对 准 血 管 中 央, 针 尖 轻 轻 抬 起 与 血 管 平 行 刺 入, 针 头 如 在 血 管 内 推 进 时, 无 阻 力 如 注 射 部 位 皮 下 出 血 肿 胀, 说 明 针 头 不 在 血 管 内 五 实 验 动 物 的 取 血 方 法 大 小 鼠 的 采 血 方 法 有 : 眼 眶 后 静 脉 丛 取 血 摘 眼 球 取 血 等 1 眼 眶 后 静 脉 丛 取 血 左 手 拇 指 及 食 指 抓 住 鼠 两 耳 之 间 的 皮 肤 使 鼠 固 定, 并 轻 轻 压 迫 颈 部 两 侧, 阻 碍 静 脉 回 流, 使 眼 球 充 分 外 突, 提 示 眼 眶 后 静 脉 丛 充 血 右 手 持 玻 璃 采 血 管, 将 其 尖 端 插 入 内 眼 角 与 眼 球 之 间, 轻 轻 向 眼 底 方 向 刺 入, 小 鼠 刺 入 2-3mm, 大 鼠 刺 入 4-5mm, 当 感 到 有 阻 力 时 即 停 止 刺 入, 放 置 取 血 管 以 切 开 静 脉 丛, 血 液 即 流 入 取 血 管 中 采 血 结 束 后, 拔 出 取 血 管, 放 松 左 手, 出 血 即 停 止 用 本 法 在 短 期 内 可 重 复 采 血 小 鼠 一 次 可 取 血 0.2~ 0.3ml, 大 鼠 一 次 可 取 血 0.5~1.0ml 为 防 止 血 液 在 取 血 管 中 凝 固, 可 将 取 血 管 浸 入 1% 肝 素 溶 液, 干 燥 后 使 用 2 摘 眼 球 取 血 此 法 常 用 于 鼠 类 大 量 采 血 采 血 时, 用 左 手 固 定 动 物, 压 迫 眼 球, 尽 量 使 眼 球 凸 出, 右 手 用 弯 头 镊 子 迅 速 摘 除 眼 球, 眼 眶 内 很 快 流 出 血 液 六 实 验 动 物 用 药 量 的 确 定 及 计 算 方 法 实 验 动 物 给 药 量 的 确 定 观 察 一 种 药 物 对 实 验 动 物 的 作 用 时, 一 个 重 要 的 问 题 就 是 给 动 物 用 多 大 的 剂 量 较 合 适 剂 量 太 小, 作 用 不 明 显, 剂 量 太 大, 又 可 能 引 起 动 物 中 毒 致 死 通 常 情 况 下, 可 以 按 下 述 方 法 确 定 剂 量 : 1. 先 用 少 量 小 鼠 粗 略 地 探 索 中 毒 剂 量 或 致 死 剂 量, 然 后 用 小 于 中 毒 量 的 剂 量, 或 取 致 死 量 的 若 干 分 之 一 作 为 应 用 剂 量, 一 般 可 取 1/10~1/5 2. 植 物 药 粗 制 剂 的 剂 量 多 按 生 药 折 算 3. 化 学 药 品 可 参 考 化 学 结 构 相 似 的 已 知 药 物, 特 别 是 化 学 结 构 和 作 用 都 相 似 的 剂 量 4. 确 定 剂 量 后, 如 第 一 次 用 药 的 作 用 不 明 显, 动 物 也 没 有 中 毒 的 表 现, 可 以 加 大 剂 量 再 次 实 验 如 出 现 中 毒 现 象, 作 用 也 明 显, 则 应 降 低 剂 量 再 次 实 验 在 一 般 情 况 下, 在 适 宜 的 剂 量 范 围 内, 药 物 的 作 用 常 随 剂 量 的 加 大 而 增 强 所 以 有 条 件 时, 最 好 同 时 用 几 个 剂 量 作 实 验, 以 便 迅 速 获 得 关 于 药 物 作 用 的 较 完 整 的 资 料 如 实 验 结 果 出 现 剂 量 与 作 用 强 度 之 间 毫 无 规 律 时, 则 更 应 慎 重 分 析 5. 用 大 动 物 进 行 实 验 时, 防 止 动 物 中 毒 死 亡, 开 始 的 剂 量 可 采 用 鼠 类 的 1/15~1/2, 以 后 可 根 据 动 物 的 反 应 调 整 剂 量 6. 确 定 动 物 给 药 剂 量 时, 要 考 虑 给 药 动 物 的 年 龄 大 小 和 体 质 强 弱 一 般 说 确 定 的 给 药 剂 量 是 指 成 年 动 物 的, 如 是 幼 龄 动 物, 剂 量 应 减 小 以 狗 为 例 :6 个 月 以 上 的 狗 给 药 剂 量 为 1 份 时,3~6 个 月 的 给 1/2 份, 45~89 日 的 给 1/4 份,20~44 日 的 给 1/8 份,10~19 日 的 给 1/16 份 7. 确 定 动 物 给 药 剂 量 时, 要 考 虑 因 给 药 途 径 不 同, 所 用 剂 量 也 不 同 以 口 服 量 为 100 时, 皮 下 注 射 量 为 30~50, 肌 肉 注 射 量 为 20~30, 静 脉 注 射 量 为 25 人 与 动 物 的 用 药 量 换 算 方 法 人 与 动 物 对 同 一 药 物 耐 受 性 不 同, 一 般 动 物 的 耐 受 性 要 比 人 大, 单 位 体 重 的 用 药 量 动 物 比 人 要 高 必 须 将 人 的 用 药 量 换 算 成 动 物 的 用 药 量 一 般 可 按 下 列 比 例 换 算 : 人 用 药 量 : 1 大 小 鼠 : 50~100 兔 豚 鼠 : 15~20 狗 猫 : 5~10 以 上 均 按 单 位 体 重 口 服 用 药 量 换 算 如 给 药 途 径 为 静 脉 皮 下 腹 腔 注 射, 换 算 比 例 应 3

7 适 当 减 小 些 此 外, 可 以 采 用 人 与 动 物 的 体 表 面 积 计 算 法 来 换 算 : (1) 人 体 体 表 面 积 计 算 法 计 算 我 国 人 的 体 表 面 积, 一 般 认 为 许 文 生 氏 公 式 ( 中 国 生 理 学 杂 志 12:327,1937) 尚 较 适 用 即 : 体 表 面 积 (m2)= 身 高 (cm) 体 重 (kg) 例 : 某 人 身 高 168cm, 体 重 55kg, 试 计 算 其 体 表 面 积 解 : =1.576m2 (2) 动 物 的 体 表 面 积 计 算 法 有 许 多 种, 在 需 要 由 体 重 推 算 体 表 面 积 时, 一 般 认 Meeh-Rubner 氏 公 式 尚 较 适 用 : 式 中 的 K 为 一 常 数, 随 动 物 种 类 而 不 同 : 小 白 鼠 和 大 白 鼠 9.1 豚 鼠 9.8 家 兔 10.1 猫 9.8 狗 11.2 猴 11.8 人 10.6( 上 列 K 值 各 家 报 导 略 有 出 入 ) 应 当 指 出, 这 样 计 算 出 来 的 表 面 积 还 是 一 种 粗 略 的 估 计 值, 不 一 定 完 全 符 合 于 每 个 动 物 的 实 测 数 值 例 : 试 计 算 体 重 1.50kg 家 兔 的 体 表 面 积 进 行 不 同 种 类 动 物 间 剂 量 换 算 时 的 常 用 数 据 Meeh-Rubner 体 重 (kg) 体 表 面 积 Mg/kg-mg/m2 转 移 每 kg 体 重 占 动 物 公 式 的 K 值 (m2) 因 子 有 体 面 积 相 种 类 对 比 值 小 白 鼠 (0.02kg) 大 白 鼠 (0.20kg) 豚 鼠 (0.40kg) 4

8 家 兔 (2.0kg) 猫 (2.5kg) 狗 (10.0kg) 猴 (3.0kg) 人 (50.0kg) 人 和 动 物 间 按 体 表 面 积 折 算 的 等 效 剂 量 比 值 表 小 白 鼠 大 白 鼠 (20g) (200g) 豚 鼠 (400g) 家 兔 (1.5kg) 猫 (2.0kg) 猴 (4.0kg) 狗 (12kg) 人 (70kg) 小 白 鼠 (20g) 大 白 鼠 (200g) 豚 鼠 (400g) 家 兔 (1.5kg) 猫 (2.0kg) 猴 (4.0kg) 狗 (12kg) 人 (70kg)

9 按 人 与 各 种 动 物 以 及 各 种 动 物 之 间 用 药 剂 量 换 算 已 知 A 种 动 物 每 kg 体 重 用 药 量, 欲 估 算 B 种 动 物 每 kg 体 重 用 药 剂 量 时, 可 先 从 表 中 查 到 折 算 系 数 (W), 再 按 下 式 计 算 : B 种 动 物 的 剂 量 (mg/kg)=w A 种 动 物 的 剂 量 (mg/kg) 例 如, 已 知 某 药 对 小 鼠 的 最 大 耐 受 量 为 20mg/kg(20g 小 鼠 用 0.4mg), 需 折 算 为 家 兔 量 查 A 种 动 物 为 小 鼠,B 种 动 物 为 兔, 交 叉 点 为 折 算 系 数 W=0.37, 故 家 兔 用 药 量 为 mg/kg=7.4mg/kg,1.5kg 家 兔 用 药 量 为 11.1mg 动 物 与 人 体 的 每 公 斤 体 重 剂 量 折 算 系 数 表 A 组 动 物 或 成 人 折 算 系 数 W 小 鼠 0.02kg 大 鼠 0.2kg 豚 鼠 0.4kg 兔 1.5kg 猫 2kg 犬 12kg 成 人 60kg B 种 动 物 或 成 人 小 鼠 20g 大 鼠 0.2kg 豚 鼠 0.4kg 兔 1.5kg 猫 2.0kg 犬 12kg 成 人 60kg 观 察 实 验 带 教 老 师 正 确 捉 拿 动 物 方 法 给 药 方 法 和 取 血 方 法 注 意 事 项 1 家 兔 的 正 确 捉 拿 与 固 定 方 法 2 腹 腔 注 射 最 适 宜 部 位 3 采 血 场 所 有 充 足 的 光 线 ; 室 温 夏 季 最 好 保 持 在 25~28, 冬 季,15~20 为 宜 ; 采 血 用 的 注 射 器 和 试 管 一 般 需 要 进 行 消 毒, 必 须 保 持 清 洁 干 燥 4 若 需 抗 凝 全 血, 在 注 射 器 或 试 管 内 需 预 先 加 入 抗 凝 剂 思 考 题 实 验 结 束 后 实 验 动 物 处 理 应 注 意 哪 些 问 题? 5

10 实 验 二 实 验 终 末 大 鼠 处 理 方 法 与 技 能 目 的 通 过 学 习, 了 解 动 物 实 验 终 末 动 物 处 理 的 方 法, 熟 悉 动 物 实 验 终 末 动 物 处 理 方 案 的 设 计 及 质 量 控 制, 掌 握 大 鼠 的 称 重 麻 醉 采 血 解 剖 的 流 程 及 脏 器 辨 认 的 方 法 器 材 手 术 剪 眼 科 剪 有 齿 镊 无 齿 镊 止 血 钳 眼 科 弯 镊 强 力 剪 骨 剪 注 射 器 5ml 负 压 管 采 血 针 PV 管 试 管 试 管 架 振 荡 器 电 子 天 秤 培 养 皿 橡 胶 板 图 钉 乳 胶 手 套 棉 花 纱 布, 线 手 套 药 品 生 理 盐 水 麻 醉 药 ( 戊 巴 比 妥 钠 ) 动 物 大 鼠 基 础 理 论 实 验 终 末 必 须 根 据 实 验 目 的 获 取 相 关 的 材 料 ( 如 血 液 细 胞 组 织 等 ), 进 行 分 析 处 理, 从 而 获 得 相 应 的 数 据 例 如 : 滴 眼 液 的 药 物 试 验, 试 验 终 末 要 考 虑 抽 取 房 水 进 行 药 液 吸 收 测 定 ; 采 聚 血 液 检 查 药 物 入 血 情 况, 氧 化 还 原 指 标, 及 测 定 相 关 蛋 白 ; 摘 取 眼 球 的 相 关 组 织 ( 如 角 膜 睫 状 体 视 网 膜 泪 腺 等 ) 进 一 步 进 行 病 理 学 检 查 确 定 组 织 细 胞 结 构 变 化 等 哺 乳 动 物 一 般 分 为 10 大 系 统, 每 个 系 统 涉 及 的 组 织 器 官 粗 略 分 为 : 运 动 系 统 : 肌 肉 骨 骼 外 周 神 经 节 及 神 经 末 稍 循 环 系 统 : 心 脏 动 脉 静 脉 及 毛 细 血 管 网 呼 吸 系 统 : 鼻 腔 喉 气 管, 支 气 管 肺 泌 尿 系 统 : 肾 输 尿 管 膀 胱 尿 道 及 附 属 腺 消 化 系 统 : 口 腔 唾 液 腺 食 管 胃 肠 肛 门 肝 脏 胰 腺 内 分 泌 系 统 : 垂 体 松 果 体 甲 状 腺 肾 上 腺 胰 岛 等 神 经 系 统 : 脑 脊 髓 脑 神 经 脊 神 经 眼 耳 造 血 系 统 : 骨 髓 脾 肝 免 疫 系 统 : 淋 巴 结 淋 巴 管 脾 胸 腺 生 殖 系 统 : 雄 性 乳 腺 睾 丸 附 睾 精 囊 腺 前 列 腺 ; 雌 性 乳 腺 卵 巢 子 宫 输 卵 管 阴 道 皮 肤 是 一 个 独 立 的 器 官, 不 属 于 任 一 系 统 每 一 个 试 验 涉 及 的 脏 器 组 织 不 尽 相 同, 必 须 根 据 实 验 目 的 做 出 选 择 国 家 的 一 些 指 导 原 则 内 对 检 查 的 脏 器 组 织 有 明 确 的 要 求 长 期 毒 性 研 究 中 需 进 行 组 织 病 理 学 检 查 的 组 织 : 啮 齿 类 动 物 需 进 行 组 织 病 理 学 检 查 的 组 织 脑 ( 大 脑 小 脑 脑 干 ) 脊 髓 ( 颈 胸 腰 段 ) 垂 体 甲 状 腺 食 管 胸 腺 甲 状 旁 腺 唾 液 腺 6

11 胃 肝 脏 肾 脏 脾 脏 气 管 主 动 脉 雄 性 动 物 附 睾 雌 性 动 物 卵 巢 雄 性 动 物 前 列 腺 坐 骨 神 经 小 肠 和 大 肠 胰 腺 肾 上 腺 心 脏 肺 脏 雄 性 动 物 睾 丸 雌 性 动 物 子 宫 雌 性 动 物 乳 腺 膀 胱 骨 髓 淋 巴 结 ( 包 括 给 药 局 部 淋 巴 结 肠 系 膜 淋 巴 结 ) 给 药 局 部 实 验 终 末 处 理 中 往 往 涉 及 多 个 学 科 的 交 叉, 多 项 操 作, 各 项 操 作 的 要 求 又 不 尽 相 同, 要 求 熟 悉 各 项 操 作, 合 理 安 排 流 程, 以 确 保 实 验 正 常 进 行 及 数 据 之 间 的 稳 定 性 与 可 比 性 例 如 : 同 时 处 理 100 只 动 物 时, 可 能 需 要 5-6 小 时, 为 保 证 肝 脏 结 构 无 肝 糖 元 消 耗 导 致 的 变 化, 必 须 禁 食, 故 需 按 照 事 前 决 定 的 解 剖 顺 序 分 批 禁 食, 而 禁 食 后 大 鼠 的 血 糖 后 发 生 变 化, 为 保 证 各 个 实 验 组 之 间 的 数 据 均 衡, 消 除 人 为 操 作 的 影 响, 又 必 须 把 各 个 组 的 动 物 平 均 分 配 到 各 个 时 间 段 禁 食 方 法 1. 流 程 大 鼠 称 重 根 据 体 重, 按 3-5ml/100g 的 给 药 量 腹 腔 注 射 3% 戊 巴 比 妥 钠 固 定 大 鼠 采 血 放 血 解 剖 脏 器 称 重 脏 器 固 定 2. 固 定 大 鼠 将 大 鼠 仰 卧 于 黑 色 的 橡 胶 板 上, 用 图 钉 固 定 四 肢, 要 求 固 定 伸 展 稳 定 3. 大 鼠 采 血 的 方 法 3.1. 腹 主 动 脉 采 血 法 将 大 鼠 仰 卧 固 定, 用 手 术 剪 刀 沿 腹 正 中 线 剪 开 腹 腔 术 者 右 手 持 穿 刺 针, 针 尖 斜 面 朝 下, 入 针 角 度 约 25 ~30, 朝 向 心 端 方 向 刺 入, 深 度 以 5 mm 左 右 为 宜, 见 到 回 血 即 可, 可 以 反 复 采 集 多 管 的 血 样 进 行 不 同 项 目 的 测 试, 一 般 体 重 200~300g 大 鼠 可 采 血 液 6~8 ml, 一 般 采 3 种 血 样 全 过 程 只 需 2 min 7

12 3.2. 眼 眶 后 静 脉 丛 的 采 血 法 将 大 鼠 固 定 在 实 验 台 边 缘, 左 手 抓 紧 大 鼠 颈 部 皮 肤 固 定 头 部, 并 轻 轻 向 下 压 迫 颈 两 侧, 使 眼 球 充 血 用 事 先 准 备 好 的 10 号 金 属 针 头 顶 端 ( 针 尖 斜 面 朝 内 ), 垂 直 插 入 内 眦 并 向 眼 底 方 向 转 动 以 便 切 开 静 脉 丛, 血 液 便 会 连 续 不 断 地 滴 入 采 血 管 用 此 法 大 约 可 取 2~3 ml 血 液 取 血 完 毕, 立 刻 用 脱 脂 棉 压 迫 止 血 3.3. 心 脏 穿 刺 采 血 方 法 操 作 者 右 手 持 5.0 ml 注 射 器, 针 头 紧 贴 剑 突 下, 以 角 度 25 ~30 斜 行 向 上 进 针 刺 入 皮 下, 边 进 针 边 缓 缓 回 抽 针 管, 针 尖 穿 过 横 膈 膜 继 续 斜 行 刺 入 2.5~3.0 cm, 约 相 当 于 5 ml 注 射 器 的 针 头 长 度, 一 旦 感 到 针 管 有 轻 微 搏 动, 表 明 针 尖 已 进 入 心 脏 内, 血 液 借 心 脏 跳 动 的 力 量 涌 入 注 射 器 内, 采 血 完 成 后 拔 出 针 头 左 手 轻 轻 按 压 心 脏 搏 动 处, 大 鼠 放 回 笼 内 观 察, 待 大 鼠 苏 醒 开 始 爬 行 时, 再 按 性 别 分 开 喂 养 3.4. 尾 尖 采 血 方 法 将 大 鼠 固 定 好, 用 50 左 右 温 水 浸 泡 尾 部 约 2 min, 血 管 充 血 后, 酒 精 棉 球 消 毒, 用 消 毒 手 术 剪 剪 去 尾 尖 5~10mm, 然 后 从 尾 根 部 向 尾 尖 按 摩, 血 自 尾 尖 流 出 此 法 可 采 1. 5~2 ml 血 液 各 种 方 法 各 有 优 缺 点, 除 以 上 提 及 的 方 法 外 还 有 腋 动 脉 股 动 脉 颈 静 脉 颈 动 脉 舌 下 静 脉 挖 眼 眼 球 法 断 头 等 采 血 方 法 腹 主 动 脉 采 血 法 取 血 量 大 不 易 溶 血, 适 用 于 多 项 目 检 测, 不 损 伤 器 官 不 会 出 现 因 操 作 不 当 造 成 的 气 栓 与 瘀 血 等, 有 利 于 病 理 组 织 学 检 查 本 试 验 采 用 腹 主 动 脉 采 血 法 4. 解 剖 4.1. 检 查 腹 腔 各 脏 器 有 无 出 血 化 脓 坏 死 粘 连 大 小 颜 色 异 常 渗 出 液 肿 块 形 成 等 4.2. 摘 取 肾 上 腺 4.3. 摘 取 脾 肝 4.4. 胃 胰 和 肠 一 并 剪 下 4.5. 摘 取 肠 系 膜 淋 巴 结 4.6. 摘 取 肾 4.7. 摘 取 膀 胱 睾 丸 ( )/ 卵 巢 ( ) 附 睾 ( ) 前 列 腺 ( )/ 子 宫 及 宫 颈 ( ) 4.8. 从 胸 骨 剑 突 处 沿 胸 骨 两 侧 自 下 而 上 至 锁 骨 处 剪 开 肋 骨, 取 胸 骨 4.9. 剪 开 颈 部 皮 肤, 暴 露 气 管, 检 查 气 管 食 管 甲 状 腺 从 喉 头 处 切 断 气 管 食 管 和 血 管, 用 止 血 钳 夹 住 气 管, 沿 食 管 后 壁 自 上 而 下 分 离 软 组 织, 至 膈 肌 处, 将 气 管 食 管 甲 状 腺 及 胸 腔 脏 器 一 并 取 出 分 离 气 管 食 管 甲 状 腺 胸 腺 肺 和 心 松 开 固 定 动 物 的 图 钉, 翻 转 动 物, 从 正 中 线 剪 开 头 皮, 暴 露 整 个 颅 骨 ; 在 枕 骨 大 孔 和 第 一 颈 椎 之 间 断 开 脊 柱 与 头 骨, 并 用 止 血 钳 小 心 地 向 两 侧 剥 离 骨 块 ; 剪 断 两 眼 之 间 骨 性 连 接 ; 剪 断 脊 髓 及 颅 底 各 神 经, 取 出 脑 ; 8

13 4.13. 检 查 并 一 起 取 出 脑 垂 体 和 其 下 蝶 骨 鞍 部 注 意 事 项 : 解 剖 过 程 中 动 作 要 轻 柔, 避 免 造 成 组 织 损 伤 ; 镊 子 血 管 钳 等 器 械 应 避 免 钳 夹 器 官 组 织 本 身, 尽 量 钳 夹 器 官 组 织 周 围 的 筋 膜 肾 上 腺 : 右 肾 上 腺 紧 贴 肝 下 缘, 取 材 时 要 小 心, 以 防 破 损 丢 失 甲 状 腺 : 不 分 离, 连 同 甲 状 软 骨 一 同 固 定 脑 : 尽 量 连 嗅 球 一 同 摘 取, 避 免 破 损 丢 失 垂 体 : 连 蝶 鞍 一 起 固 定 各 种 哺 乳 动 物 组 织 器 官 不 尽 相 同, 如 大 鼠 无 胆 囊, 而 小 鼠 有 胆 囊 5. 脏 器 称 重 使 用 电 子 天 秤 称 重 肝 心 肺 肾 脑 脾 肾 上 腺 6. 尸 体 不 得 随 意 处 理, 严 禁 食 用 肉 尸 和 内 脏, 未 经 处 理 的 皮 毛 等 物 也 不 得 利 用 解 剖 后 动 物 尸 体 放 入 指 定 冰 箱 统 一 处 理 9

14 实 验 三 药 物 不 同 剂 量 对 药 物 作 用 的 影 响 目 的 1 练 习 小 白 鼠 的 捉 拿 和 腹 腔 注 射 法 2 观 察 药 物 的 不 同 剂 量 对 作 用 的 影 响 器 材 小 鼠 笼 天 平 1 m1 注 射 器 针 头 药 品 2 % 水 合 氯 醛 溶 液 苦 味 酸 动 物 小 白 鼠 方 法 取 小 鼠 3 只, 称 重 编 号, 观 察 各 鼠 的 正 常 活 动 情 况, 再 分 别 腹 腔 注 射 : 甲 鼠 2 % 水 合 氯 醛 溶 液 0.05 m1/10 g 乙 鼠 2 % 水 合 氯 醛 溶 液 0.15 m1/10 g 丙 鼠 2 % 水 合 氯 醛 溶 液 0.5 m1 /10 g 给 药 后 分 别 将 小 鼠 置 于 小 鼠 笼 中, 观 察 各 鼠 活 动 有 何 变 化? 记 录 给 药 后 小 鼠 反 应 和 发 生 时 间, 并 比 较 三 鼠 有 何 不 同? 结 果 鼠 号 体 重 药 物 及 药 给 药 前 情 况 用 药 后 反 应 及 发 生 时 间 (g) 量 活 动 度 呼 吸 皮 肤 粘 膜 翻 正 活 动 度 呼 吸 皮 肤 粘 膜 翻 正 反 射 反 射 甲 乙 丙 注 意 事 项 水 合 氯 醛 为 镇 静 催 眠 药, 小 鼠 的 中 枢 抑 制 反 应 可 表 现 为 活 动 减 少 闭 目 静 卧 翻 正 反 射 消 失 和 呼 吸 停 止 等 因 此, 给 药 前 仔 细 观 察 小 鼠 的 活 动 情 况 及 翻 正 反 射, 给 药 后 也 要 仔 细 观 察 小 鼠 的 活 动 情 况 及 翻 正 反 射, 并 记 录 给 药 时 间 翻 正 反 射 消 失 时 间 恢 复 时 间 思 考 题 以 水 合 氯 醛 为 例 说 明 药 物 剂 量 对 药 物 作 用 的 影 响, 并 简 述 临 床 用 药 应 注 意 的 问 题 10

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