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2 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 专 家 论 坛 我 国 水 产 养 殖 动 物 病 害 防 治 研 究 的 主 要 成 就 与 当 前 存 在 的 问 题 近 些 年 来 袁 我 国 水 产 养 殖 业 一 直 保 持 持 续 尧 稳 定 的 发 展 态 势 遥 在 水 产 养 殖 业 快 速 发 展 的 同 时 袁 水 产 动 物 因 各 种 病 害 造 成 的 损 失 也 处 于 上 升 的 趋 势 遥 2006 年 对 全 国 水 产 养 殖 动 物 病 害 检 测 的 结 果 显 示 袁 在 人 工 养 殖 的 80 种 左 右 的 水 产 养 殖 动 物 中 约 发 生 了 180 种 疾 病 袁 全 国 30% 以 上 的 水 产 养 殖 面 积 受 到 各 种 病 害 的 严 重 侵 扰 袁 由 病 害 造 成 的 直 接 经 济 损 失 达 140 亿 元 以 上 遥 本 文 回 顾 了 我 国 水 产 动 物 疾 病 学 研 究 的 主 要 成 就 袁 分 析 当 前 水 产 养 殖 业 中 病 害 防 治 方 面 存 在 的 主 要 问 题 袁 为 我 国 水 产 养 殖 动 物 疾 病 防 治 研 究 提 供 参 考 遥 1 水 产 养 殖 动 物 病 害 防 治 研 究 的 主 要 成 就 1.1 关 于 水 产 动 物 病 毒 病 的 研 究 我 国 对 水 产 动 物 病 毒 病 的 研 究 虽 然 起 步 较 晚, 但 取 得 的 成 绩 却 是 非 常 显 著 的 遥 首 先 是 开 展 了 对 鱼 类 病 毒 病, 主 要 是 草 鱼 出 血 病 的 研 究 遥 从 20 世 纪 70 年 代 以 来, 先 后 在 草 鱼 出 血 病 的 病 原 学 尧 流 行 病 学 尧 病 理 学 尧 检 测 方 法 尧 病 毒 的 基 因 组 结 构 尧 免 疫 学 尧 细 胞 培 养 灭 活 疫 苗 尧 防 治 方 法 等 研 究 与 应 用 方 面 取 得 了 一 系 列 突 破 性 的 成 果 遥 首 先 是 系 统 地 研 究 草 鱼 出 血 病 病 毒 的 组 织 培 养 尧 分 类 鉴 定 袁 并 证 实 了 草 鱼 出 血 病 是 由 病 毒 引 起 的, 最 终 不 仅 分 离 尧 鉴 定 了 草 鱼 呼 肠 孤 病 毒 (Reovirus), 建 立 了 多 株 草 鱼 的 细 胞 系, 同 时 还 成 功 地 研 制 出 了 组 织 浆 灭 活 疫 苗 和 细 胞 灭 活 疫 苗, 研 制 出 病 毒 疫 苗 的 大 规 模 制 备 技 术, 从 技 术 上 解 决 了 草 鱼 出 血 病 的 防 治 问 题 遥 其 次, 有 关 单 位 对 草 鱼 呼 肠 孤 病 毒 基 因 组 和 多 肽 结 构 尧 病 毒 RNA 的 转 录 酶 活 性 尧 病 毒 糖 蛋 白 结 构 多 肽 的 抗 原 型 尧 病 毒 多 肽 及 基 因 组 的 体 外 翻 译 和 病 毒 基 因 组 的 体 内 转 录 尧 疾 病 与 环 境 的 关 系 等 也 进 行 了 研 究 遥 早 在 20 世 纪 60 年 代 后 期 袁 珠 江 水 产 科 学 研 究 所 将 研 制 灭 活 组 织 浆 疫 苗 注 射 尧 接 种 于 草 鱼 获 得 成 功 以 来 袁 相 关 单 位 还 开 展 了 草 鱼 呼 肠 孤 病 毒 病 原 体 免 疫 学 特 性 的 研 究 袁 研 制 出 了 灭 活 疫 苗 尧 弱 毒 疫 苗 尧 亚 单 位 苗 尧 基 因 工 程 疫 苗 尧 DNA 疫 苗 等 多 种 类 型 的 疫 苗 袁 并 进 行 了 生 产 性 防 病 试 验 袁 获 得 了 一 定 的 成 功 遥 除 研 制 开 发 疫 苗 外 袁 还 对 鱼 用 疫 苗 的 免 疫 接 种 途 径 尧 免 疫 刺 激 剂 尧 营 养 与 免 疫 的 关 系 尧 抗 病 毒 干 扰 素 的 诱 生 和 检 陈 昌 福, 华 中 农 业 大 学 水 产 学 院, 教 授,430070, 武 汉 收 稿 日 期 : 陈 昌 福 2 测 等 方 面 开 展 了 研 究 遥 目 前 已 能 够 进 行 草 鱼 出 血 病 病 毒 灭 活 细 胞 疫 苗 和 减 毒 细 胞 疫 苗 的 工 厂 化 生 产 袁 免 疫 接 种 草 鱼 后 其 成 活 率 可 以 达 到 85% 以 上 袁 免 疫 能 力 保 持 13 个 月 以 上 袁 已 经 产 生 了 一 定 的 经 济 效 益 遥 此 外, 对 鲤 痘 疮 病 尧 传 染 性 胰 脏 坏 死 症 尧 传 染 性 造 血 器 官 坏 死 症 尧 淋 巴 囊 肿 病 尧 鳜 虹 彩 病 毒 病 尧 月 鳢 病 毒 病 尧 真 鲷 病 毒 病 等 也 进 行 了 研 究 遥 对 两 栖 类 和 爬 行 类 中 的 牛 蛙 病 毒 病 尧 乌 龟 病 毒 病 尧 中 华 鳖 病 毒 病 等 也 有 报 道 遥 我 国 水 产 动 物 病 毒 病 的 研 究 主 要 集 中 在 对 疾 病 的 描 述 尧 病 原 的 分 离 和 初 步 鉴 定 尧 超 薄 切 片 电 镜 观 察 等 方 面 遥 对 于 甲 壳 类 病 毒 病 的 研 究 是 以 对 虾 疾 病 为 主 进 行 的 袁 也 是 水 产 无 脊 椎 动 物 的 病 害 研 究 中 进 展 最 快 的 遥 早 在 20 世 纪 80 年 代 中 期 研 究 者 就 发 现 了 对 虾 肝 胰 腺 细 小 病 毒 袁 直 到 1993 年 袁 对 虾 暴 发 流 行 性 疾 病 促 使 对 虾 病 毒 学 成 为 了 一 个 引 人 注 目 的 研 究 领 域 遥 目 前 在 我 国 已 报 道 的 对 虾 病 毒 约 5~6 种 袁 在 对 虾 皮 下 及 造 血 组 织 坏 死 杆 状 病 毒 渊 或 称 白 斑 综 合 症 病 毒 袁 WSSV 冤 及 肝 胰 腺 细 小 病 毒 渊 HPV 冤 的 研 究 方 面 处 于 国 际 先 进 水 平 遥 几 种 病 毒 的 基 因 组 得 到 了 部 分 克 隆 和 测 序 袁 有 力 地 促 进 了 疾 病 诊 断 和 病 毒 检 测 技 术 的 发 展 遥 与 国 际 上 甲 壳 类 病 毒 研 究 的 特 点 类 似 袁 我 国 对 虾 病 毒 的 研 究 也 主 要 集 中 在 组 织 病 理 学 尧 分 离 纯 化 尧 形 态 学 尧 核 酸 和 多 肽 特 性 尧 病 毒 的 流 行 病 学 尧 感 染 特 性 及 病 症 尧 环 境 因 子 对 发 病 的 影 响 等 方 面 袁 特 色 研 究 主 要 在 对 虾 病 毒 的 传 播 途 径 及 病 毒 生 态 学 方 面 袁 WSSV 的 基 因 组 测 序 的 研 究 进 展 也 较 为 显 著 袁 其 诊 断 和 检 测 技 术 与 国 际 发 展 水 平 同 步 遥 在 蟹 类 病 毒 研 究 方 面 袁 中 华 绒 螯 蟹 颤 抖 病 病 毒 渊 现 在 有 人 认 为 病 原 是 螺 原 体 冤 的 研 究 初 见 成 效 遥 与 鱼 类 或 昆 虫 类 的 病 毒 学 研 究 比 较 袁 由 于 缺 乏 甲 壳 类 传 代 细 胞 株 和 标 准 实 验 动 物 袁 其 病 毒 学 的 研 究 进 展 受 到 很 大 影 响 袁 研 究 层 次 和 深 度 也 显 得 相 对 较 低 遥 在 贝 类 病 毒 病 方 面 已 经 发 现 了 两 种 病 毒 院 三 角 帆 蚌 瘟 病 病 毒 和 皱 纹 盘 鲍 病 病 毒 袁 但 还 需 更 进 一 步 的 研 究 遥 免 疫 学 检 测 技 术 已 初 步 实 现 了 商 品 化 袁 已 经 对 草 鱼 出 血 病 病 毒 尧 对 虾 白 斑 综 合 症 病 毒 尧 肝 胰 腺 细 小 病 毒 等 进 行 了 单 克 隆 抗 体 研 制 袁 并 完 善 了 相 应 的 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 (ELISA) 和 乳 胶 凝 集 试 验 等 快 速 检 测 技 术 遥 对 虾 病 毒 WSSV 的 核 酸 探 针 检 测 技 术 及 PCR 检 测 技 术 已 经 有 了 商 品 化 的 检 测 试 剂 盒 遥

3 专 家 论 坛 陈 昌 福 : 我 国 水 产 养 殖 动 物 病 害 防 治 研 究 的 主 要 成 就 与 当 前 存 在 的 问 题 1.2 关 于 水 产 动 物 细 菌 病 的 研 究 对 水 产 动 物 大 多 数 细 菌 性 疾 病 都 有 了 不 同 程 度 的 研 究 袁 其 中 对 主 要 淡 水 养 殖 鱼 类 的 细 菌 性 败 血 症 的 研 究 最 为 系 统 和 深 入 袁 已 经 在 病 原 尧 致 病 机 理 尧 流 行 规 律 尧 治 疗 药 物 尧 免 疫 尧 环 境 与 生 态 防 治 等 方 面 取 得 了 一 系 列 的 研 究 成 果 袁 发 现 了 嗜 水 气 单 胞 菌 尧 温 和 气 单 胞 菌 尧 产 碱 假 单 胞 菌 尧 鲁 克 氏 耶 尔 森 氏 菌 尧 河 弧 菌 生 物 变 种 III 尧 副 溶 血 弧 菌 尧 创 伤 弧 菌 等 多 种 革 兰 氏 阴 性 细 菌 病 原 遥 通 过 对 嗜 水 气 单 胞 菌 分 子 毒 素 的 结 构 和 致 病 机 理 袁 以 及 细 菌 性 疾 病 病 原 的 快 速 检 测 方 法 和 防 治 方 法 研 究 袁 成 功 地 研 制 出 了 嗜 水 气 单 胞 菌 的 灭 活 疫 苗 袁 建 立 了 鱼 类 出 血 性 败 血 症 细 菌 疫 苗 的 生 产 工 艺 流 程 袁 并 进 行 了 大 规 模 的 生 产 和 推 广 应 用 遥 建 立 了 疫 苗 防 治 技 术 及 综 合 预 防 措 施 袁 使 上 述 细 菌 性 疾 病 基 本 上 得 到 了 控 制 袁 也 对 鱼 类 细 菌 的 个 别 质 粒 的 提 取 尧 分 子 结 构 尧 抗 性 机 理 等 进 行 了 较 为 深 入 的 研 究 遥 在 细 菌 耐 药 性 方 面 从 鱼 类 病 原 菌 各 种 耐 药 性 的 发 生 尧 发 展 到 其 机 理 的 研 究 均 已 逐 步 深 入 袁 分 离 并 深 入 分 析 了 耐 药 性 的 遗 传 因 子 渊 抗 性 质 粒 的 基 因 结 构 尧 抗 性 谱 等 冤 遥 此 外 袁 细 菌 的 鉴 定 除 快 速 鉴 定 系 统 外 袁 还 在 16S rrna 尧 质 粒 等 方 面 开 展 了 一 系 列 分 子 生 物 学 鉴 定 技 术 的 研 究 遥 目 前 袁 利 用 现 代 生 物 学 技 术 检 测 细 菌 性 病 害 的 研 究 发 展 很 迅 速 袁 主 要 有 荧 光 抗 体 技 术 尧 免 疫 酶 技 术 尧 单 克 隆 抗 体 技 术 尧 核 酸 杂 交 技 术 尧 聚 合 酶 链 反 应 渊 PCR 冤 技 术 等 遥 由 于 上 述 检 测 技 术 具 有 灵 敏 度 高 尧 特 异 性 强 尧 实 用 性 好 等 特 点 袁 现 在 已 成 为 多 种 水 产 动 物 细 菌 性 病 害 的 常 规 诊 断 方 法 遥 利 用 鱼 类 和 虾 的 主 要 细 菌 性 病 原 的 相 应 免 疫 学 或 分 子 生 物 学 病 原 的 检 测 技 术 袁 已 经 部 分 地 开 发 了 商 品 化 的 试 剂 盒 遥 1.3 关 于 水 产 动 物 寄 生 虫 病 的 研 究 20 世 纪 50 年 代 开 始 袁 我 国 水 产 动 物 疾 病 学 的 研 究 内 容 主 要 是 针 对 各 类 寄 生 虫 病 展 开 的 遥 对 于 水 产 养 殖 动 物 寄 生 虫 病 的 研 究 袁 主 要 集 中 在 病 原 的 形 态 描 述 尧 分 类 地 位 确 定 尧 生 活 史 尧 流 行 病 学 以 及 防 治 方 法 等 方 面 遥 经 过 多 年 努 力 袁 我 国 水 产 动 物 寄 生 虫 病 的 研 究 水 平 已 处 于 世 界 前 列 袁 部 分 在 世 界 范 围 内 有 影 响 力 的 论 文 和 专 著 相 继 发 表 和 出 版 袁 为 我 国 水 产 动 物 寄 生 虫 病 学 的 研 究 处 于 世 界 领 先 地 位 奠 定 了 基 础 遥 利 用 现 代 分 子 生 物 学 技 术 研 究 水 产 动 物 寄 生 虫 病 学 也 正 在 逐 步 展 开 遥 对 小 瓜 虫 的 免 疫 研 究 尧 鱼 类 单 吸 虫 等 抗 原 及 基 因 组 的 分 子 生 物 学 研 究 等 均 比 较 深 入 袁 确 定 了 抗 原 蛋 白 及 其 定 位 袁 构 建 了 部 分 基 因 文 库 袁 研 究 了 PCR 和 核 酸 探 针 检 测 方 法 袁 为 检 测 尧 免 疫 尧 防 治 提 供 了 一 定 的 理 论 基 础 和 实 际 应 用 技 术 遥 3 2 存 在 的 问 题 与 不 足 由 于 我 国 水 产 养 殖 业 的 养 殖 方 式 从 粗 放 式 向 集 约 化 方 式 转 变, 导 致 水 产 养 殖 业 者 和 相 关 科 研 人 员 已 经 掌 握 的 水 产 养 殖 和 防 治 养 殖 动 物 疾 病 的 技 术 总 是 不 能 满 足 不 断 转 换 的 水 产 养 殖 方 式 的 需 要, 科 学 研 究 滞 后 于 水 产 养 殖 生 产 的 发 展 遥 同 时 袁 水 产 养 殖 动 物 预 防 知 识 的 科 学 普 及 工 作 不 到 位, 从 事 水 产 养 殖 的 人 员 缺 乏 必 要 的 相 关 知 识, 因 此 在 实 际 水 产 养 殖 生 产 中 存 在 很 多 问 题 遥 2.1 准 确 诊 断 病 原 菌 和 对 症 治 疗 困 难 国 外 对 鱼 类 病 毒 病 的 研 究 历 史 较 早 袁 也 非 常 深 入 袁 很 多 研 究 内 容 都 达 到 了 分 子 生 物 学 水 平 袁 如 在 病 原 结 构 的 分 子 生 物 学 尧 分 子 流 行 病 学 尧 分 子 毒 理 学 尧 分 子 免 疫 学 及 基 因 工 程 疫 苗 等 的 研 究 中 袁 均 已 经 取 得 了 丰 硕 的 成 果 遥 在 病 毒 分 子 生 物 学 方 面, 病 毒 基 因 组 的 研 究 已 深 入 到 了 各 基 因 片 段 编 码 的 蛋 白 鉴 定 尧 体 内 转 录 尧 糖 蛋 白 肽 以 及 不 同 病 毒 分 离 株 的 基 因 组 和 蛋 白 多 肽 的 差 异 袁 病 毒 各 基 因 组 片 段 的 克 隆 尧 测 序 和 表 达 袁 进 而 进 行 基 因 工 程 疫 苗 的 研 究 等 遥 在 疾 病 流 行 病 学 方 面 袁 通 过 对 全 国 范 围 内 鱼 类 种 群 中 病 毒 感 染 的 检 测 来 预 测 流 行 规 律 袁 从 而 制 定 当 年 的 控 制 对 策 曰 运 用 频 率 分 布 来 描 述 鱼 类 寄 生 虫 在 寄 主 种 群 中 的 分 布 袁 并 从 其 动 态 中 了 解 疾 病 发 生 的 可 能 遥 而 我 国 在 这 些 方 面 的 研 究 刚 刚 起 步 袁 与 国 外 相 比 还 存 在 明 显 的 差 距, 对 病 原 的 生 物 学 特 性 了 解 不 够 深 入 袁 且 由 于 水 产 动 物 疾 病 的 病 原 种 类 多 尧 发 病 规 律 复 杂 尧 流 行 趋 势 多 变, 对 疾 病 的 诊 断 不 够 及 时 袁 往 往 贻 误 了 有 效 防 治 疾 病 的 时 机 遥 2.2 高 效 的 适 用 于 水 产 动 物 的 兽 药 少 国 外 对 水 产 用 兽 药 的 毒 理 学 尧 药 理 学 的 研 究 均 比 较 细 致 深 入 袁 其 兽 药 的 毒 理 学 涉 及 各 个 研 究 范 畴 袁 药 理 学 的 深 入 研 究 为 水 产 动 物 专 用 兽 药 的 科 学 使 用 奠 定 了 基 础 遥 而 我 国 在 水 产 动 物 专 用 兽 药 的 研 究 方 面 存 在 许 多 问 题 院 水 产 动 物 专 用 兽 药 药 理 学 等 基 础 理 论 滞 后 袁 导 致 其 兽 药 的 使 用 徘 徊 在 一 个 非 常 低 的 水 平 曰 安 全 有 效 的 水 产 动 物 专 用 兽 药 及 其 剂 型 贫 乏 袁 制 剂 的 工 艺 水 平 很 低 曰 缺 少 水 产 动 物 专 用 兽 药 评 价 的 方 法 和 试 验 平 台 曰 安 全 尧 科 学 用 药 的 知 识 普 及 有 限 袁 在 水 产 养 殖 生 产 中 滥 用 水 产 动 物 专 用 兽 药 的 现 象 仍 然 很 严 重 遥 目 前 袁 我 国 的 水 产 养 殖 动 物 专 用 药 物 的 种 类 比 较 少 袁 针 对 性 差 遥 对 水 产 养 殖 动 物 疾 病 的 防 治 主 要 依 靠 使 用 化 学 药 物 袁 如 人 药 尧 农 药 尧 兽 药 等 袁 用 药 效 果 差 遥 滥 用 药 物 的 事 件 在 水 产 养 殖 生 产 中 时 有 发 生 袁 致 使 养 殖 水 体 中 微 生 态 环 境 破 坏 严 重 袁 耐 药 菌 株 大 量 出 现 袁 不 仅 直 接 造 成 了 暴 发 性 流 行 病 的 不 断 出 现 袁 同 时 也 造 成 了 水 产 养 殖 动 物 的 食 品 安 全 问 题 遥 此 外 袁 供 水 产 养 殖

4 陈 昌 福 : 我 国 水 产 养 殖 动 物 病 害 防 治 研 究 的 主 要 成 就 与 当 前 存 在 的 问 题 专 家 论 坛 动 物 使 用 的 疫 苗 非 常 少 遥 2.3 养 殖 技 术 和 养 殖 模 式 不 相 适 应 目 前, 水 产 养 殖 技 术 与 集 约 化 尧 多 种 类 混 合 高 密 度 养 殖 模 式 不 相 适 应 袁 主 要 表 现 在 以 下 几 个 方 面 院 淤 水 产 养 殖 布 局 不 合 理 袁 部 分 地 区 出 现 过 度 尧 无 序 的 开 发 袁 造 成 资 源 浪 费 曰 于 不 断 增 加 养 殖 密 度 袁 使 养 殖 密 度 超 过 水 体 运 载 能 力 袁 破 坏 了 水 质 袁 使 水 体 富 营 养 化 曰 盂 迄 今 为 止 几 乎 所 有 的 水 产 养 殖 动 物 还 只 能 属 于 野 生 种 群 袁 而 生 长 速 度 快 尧 抗 病 能 力 强 的 优 良 抗 病 品 种 匮 乏 曰 榆 缺 乏 专 用 水 产 动 物 饲 料 尧 且 种 类 不 成 系 列 袁 饲 料 系 数 普 遍 偏 高 等 遥 2.4 关 于 水 产 养 殖 动 物 疾 病 研 究 的 试 验 模 型 数 量 极 少 试 验 模 型 对 于 学 科 和 技 术 的 发 展 极 为 重 要, 医 学 和 陆 生 动 植 物 已 建 立 了 包 括 动 物 试 验 尧 组 织 培 养 和 病 原 保 藏 中 心 等 在 内 的 数 百 种 标 准 试 验 模 型, 有 力 地 促 进 了 医 学 和 陆 生 动 植 物 病 害 研 究 的 发 展, 而 水 生 生 物 标 准 的 试 验 模 型 ( 包 括 组 织 培 养 模 型 尧 试 验 动 物 模 型 和 病 原 库 ) 相 对 来 说 数 量 极 少 遥 国 外 建 立 了 60 余 株 鱼 类 细 胞 系, 有 近 40 种 病 毒 采 用 细 胞 培 养 分 离 成 功, 多 数 水 生 生 物 的 病 原 细 菌 也 有 标 准 培 养 物 得 到 保 存 袁 已 有 近 交 50 代 以 上 的 纯 系 鱼 遥 在 甲 壳 类 方 面 袁 我 国 甲 壳 类 等 没 有 传 代 细 胞 系 或 标 准 试 验 模 式 动 物 的 建 立, 而 国 外 某 些 权 威 实 验 室 对 对 虾 病 毒 病 原 已 有 较 为 全 面 的 保 存 遥 总 之, 我 国 关 于 鱼 类 试 验 模 式 动 物 的 研 究 与 国 外 有 一 定 的 差 距, 研 究 工 作 刚 刚 起 步 遥 2.5 养 殖 管 理 不 够 科 学 尧 制 度 不 健 全 病 害 的 综 合 防 治 对 于 疾 病 控 制 极 为 重 要 遥 北 欧 的 鲑 尧 鳟 鱼 类 的 养 殖 历 史 较 早, 对 水 产 养 殖 动 物 的 疾 病 防 治 工 作 进 行 得 较 为 深 入, 他 们 从 苗 种 免 疫 等 角 度 加 强 鱼 体 的 抗 病 力 袁 从 养 殖 环 境 的 改 良 尧 水 质 调 控 尧 优 质 饵 料 尧 病 原 监 控 等 方 面 开 展 了 综 合 的 健 康 管 理 工 作 遥 泰 国 在 对 虾 的 病 害 方 面 进 行 的 综 合 防 治 也 颇 具 特 色, 形 成 了 一 套 围 绕 提 高 对 虾 健 康 状 况 尧 减 少 病 原 入 侵 机 会 尧 保 证 养 殖 环 境 清 洁 稳 定 等 的 健 康 管 理 技 术, 使 泰 国 的 对 虾 养 殖 未 受 到 病 毒 病 的 干 扰, 产 量 跃 居 世 界 首 位 遥 我 国 的 水 产 养 殖 管 理 不 够 科 学 袁 制 度 还 不 完 善 袁 特 别 是 病 害 预 防 尧 控 制 尧 治 理 方 面 缺 乏 应 急 机 制 与 保 障 措 施 曰 在 物 种 引 进 时 没 有 严 格 的 风 险 管 理 制 度 袁 对 疾 病 携 带 的 危 险 估 计 不 够 袁 控 制 措 施 不 力 遥 此 外 研 究 经 费 不 足 也 是 制 约 水 产 养 殖 业 发 展 的 一 个 方 面 遥 总 之 袁 我 国 整 体 的 水 产 养 殖 动 物 疾 病 防 治 研 究 力 量 还 相 对 薄 弱 袁 研 究 者 的 创 新 思 维 受 到 研 究 条 件 局 限 和 经 费 短 缺 的 约 束 袁 低 水 平 或 重 复 性 的 研 究 还 比 较 多 遥 此 外 袁 开 展 的 研 究 工 作 与 实 际 生 产 上 的 需 要 存 在 比 较 大 的 差 距 袁 致 使 一 些 研 究 成 果 在 水 产 养 殖 生 产 中 4 的 应 用 效 果 不 理 想 袁 与 国 外 相 比 袁 成 果 的 实 用 化 和 商 品 化 工 作 还 很 不 完 善 遥 3 对 近 期 水 产 养 殖 动 物 疾 病 防 控 对 策 的 几 点 建 议 3.1 尽 快 建 立 我 国 水 生 动 物 防 疫 体 系 建 立 水 产 养 殖 动 物 疫 病 的 风 险 评 估 和 预 警 机 制 袁 增 强 水 产 养 殖 动 物 的 疫 病 的 控 制 和 预 警 能 力 袁 为 有 效 控 制 水 产 养 殖 动 物 的 疾 病 构 建 和 整 合 社 会 资 源 平 台 遥 3.2 尽 快 开 展 水 产 养 殖 动 物 病 原 菌 耐 药 性 普 查 评 价 和 利 用 现 有 水 产 动 物 专 用 抗 生 素 类 兽 药 袁 为 开 发 新 一 代 药 物 提 供 依 据 袁 并 尽 快 制 订 安 全 尧 科 学 用 药 的 渔 民 培 训 计 划 袁 保 障 水 产 品 质 量 安 全 和 人 类 的 身 体 健 康 袁 促 进 水 产 养 殖 业 可 持 续 发 展 遥 3.3 加 快 疫 苗 的 研 制 和 产 业 化 进 程 在 鱼 用 疫 苗 方 面 采 取 野 用 好 现 有 的 尧 开 发 未 来 的 冶 思 路 遥 目 前 我 国 已 有 草 鱼 出 血 病 疫 苗 尧 淡 水 鱼 类 嗜 水 气 单 胞 菌 疫 苗 的 生 产 批 文 袁 但 是 袁 在 水 产 养 殖 生 产 中 推 广 使 用 尚 存 在 野 没 有 用 好 尧 没 有 用 足 冶 的 问 题 遥 对 此 袁 政 府 可 以 扶 持 企 业 或 组 织 生 产 袁 弥 补 市 场 的 空 缺 遥 另 外 袁 开 发 目 前 科 研 基 础 较 好 尧 较 成 熟 的 鱼 用 疫 苗 研 究 项 目 袁 对 于 鱼 病 病 原 分 离 尧 纯 化 尧 培 养 及 免 疫 研 究 较 好 的 项 目 袁 应 在 产 品 开 发 尧 设 备 投 入 尧 生 产 资 金 尧 推 广 使 用 上 给 予 支 持 尧 扶 持 遥 3.4 采 取 科 学 尧 缜 密 的 生 物 安 全 措 施 袁 严 格 控 制 外 来 病 原 生 物 入 侵 对 进 境 与 境 内 跨 区 域 的 活 体 动 物 及 其 加 工 品 在 移 动 中 可 能 携 带 的 疾 病 尧 疫 病 实 施 监 管 ; 对 生 物 污 染 尧 危 害 程 度 进 行 评 估 遥 建 立 健 全 危 害 程 度 报 告 与 定 期 发 布 制 度, 有 效 切 断 传 播 途 径, 对 重 大 疫 病 尧 新 发 现 和 突 发 性 的 病 害 实 施 扑 灭 措 施 遥 窑 作 者 简 介 窑 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected]) 陈 昌 福,1975 年 毕 业 于 华 中 农 业 大 学 水 产 学 院,1997 年 获 得 日 本 爱 媛 大 学 博 士 学 位 现 为 华 中 农 业 大 学 教 授 ; 中 国 水 产 学 会 资 深 会 员 ; 中 国 水 产 学 会 鱼 病 研 究 会 委 员 ; 中 国 微 生 态 学 会 养 殖 分 会 理 事 ; 中 国 化 工 学 会 二 氧 化 氯 工 作 组 副 组 长 ; 全 国 化 工 标 准 物 质 委 员 会 二 氧 化 氯 专 业 委 员 会 副 主 任 委 员 ; 中 国 兽 药 典 第 三 四 届 委 员 会 委 员 ; 中 国 兽 药 审 评 委 员 ; 全 国 水 产 标 准 化 技 术 委 员 会 水 生 动 物 防 疫 标 准 化 技 术 工 作 组 成 员 主 持 湖 北 省 重 点 科 技 攻 关 项 目 : 草 鱼 细 菌 性 烂 鳃 病 免 疫 防 治 研 究 并 荣 获 1993 年 度 湖 北 省 科 技 进 步 一 等 奖 ; 主 持 湖 北 省 重 点 科 技 攻 关 项 目 草 鱼 细 菌 性 烂 鳃 和 肠 炎 病 二 联 菌 苗 的 研 究 并 荣 获 1998 年 度 湖 北 省 科 技 进 步 二 等 奖 先 后 主 持 3 项 国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目 : 脂 多 糖 (LPS) 对 鱼 类 免 疫 细 胞 的 免 疫 学 活 性 研 究 ( 批 准 号 : ) 鱼 类 种 内 遗 传 多 态 性 和 免 疫 应 答 关 系 的 研 究 ( 批 准 号 : ) 和 鱼 类 免 疫 细 胞 上 脂 多 糖 (LPS) 受 体 的 定 位 与 激 活 机 理 研 究 ( 批 准 号 : ) 发 表 专 业 文 章 80 多 篇, 编 撰 专 业 书 籍 4 本 指 导 研 究 生 30 多 名 先 后 讲 授 水 产 动 物 疾 病 学 鱼 类 免 疫 学 和 鱼 类 病 原 生 物 学 等 课 程

5 饲 料 添 加 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 真 菌 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 的 增 重 试 验 李 耀 忠 李 爱 华 岳 思 君 韩 楠 楠 1 材 料 和 方 法 1.1 材 料 试 验 菌 种 黑 曲 霉 渊 Aspergullus niger 冤 尧 白 地 霉 渊 Geotrichum candidum 冤 尧 米 曲 霉 渊 Aspergillus ochraceus 冤 为 宁 夏 大 学 饲 料 工 程 中 心 保 藏 的 菌 种 遥 试 验 动 物 及 日 粮 组 成 将 40 只 体 重 15.0 耀 16.0 g 健 康 的 ICR 小 公 鼠 分 成 10 组 袁 每 组 4 只 袁 即 对 照 组 和 试 验 1 耀 9 组 袁 组 间 体 重 差 异 不 显 著 渊 P 跃 0.05 冤 袁 编 号 尧 分 笼 饲 养 遥 试 验 所 用 试 验 小 鼠 和 基 础 日 粮 均 由 宁 夏 医 学 院 试 验 动 物 中 心 提 供 袁 试 验 所 用 基 础 日 粮 组 成 见 表 1 遥 表 1 基 础 日 粮 组 成 ( 豫 ) 真 菌 添 加 剂 的 制 备 将 实 验 室 冰 箱 保 藏 的 白 地 霉 尧 黑 曲 霉 尧 米 曲 霉 菌 接 种 于 相 应 的 斜 面 培 养 基 上 活 化 后 分 别 制 成 含 1.0 伊 10 8 尧 3.1 伊 10 8 和 2.3 伊 10 8 个 /ml 孢 子 悬 液 袁 以 6.6% 尧 2.1% 和 2.8% 的 接 种 量 袁 在 28 益 尧 120 r/min 的 摇 床 上 液 体 培 养 72 h 袁 再 以 5% 的 接 种 量 接 种 到 由 小 鼠 基 础 日 粮 组 成 的 固 体 培 养 基 中 袁 28 益 发 酵 72 h 袁 风 干 后 制 成 真 菌 饲 料 添 加 剂 袁 并 按 % 的 比 例 加 入 小 鼠 基 础 日 粮 中 袁 制 成 饲 料 备 用 遥 试 验 设 计 用 不 同 比 例 的 黑 曲 霉 尧 白 地 霉 尧 米 曲 霉 发 酵 物 制 成 9 种 真 菌 饲 料 添 加 剂 袁 试 验 方 案 见 表 2 遥 表 2 真 菌 饲 料 添 加 剂 菌 种 组 成 及 比 例 (%) 培 养 基 李 耀 忠, 宁 夏 大 学 后 勤 处,750021, 宁 夏 银 川 李 爱 华 ( 通 讯 作 者 ) 岳 思 君 韩 楠 楠, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 绎 原 料 玉 米 面 面 粉 麸 皮 豆 粕 鱼 粉 奶 粉 鸡 蛋 骨 粉 复 合 维 生 素 鱼 肝 油 食 盐 微 量 元 素 组 成 收 稿 日 期 : 国 家 863 计 划 项 目 ( 编 号 2005AA001330) 国 家 农 业 科 技 成 果 转 化 资 金 项 目 ( 编 号 2006GB2G300314) 宁 夏 科 技 攻 关 项 目 ( 编 号 ) 资 助 含 量 察 氏 培 养 基 : 硝 酸 钠 (NaNO 3 )3g 尧 磷 酸 氢 二 钾 1g 尧 硫 酸 镁 (MgSO 4 窑 7H 2 O)0.5g 尧 氯 化 钾 0.5g 尧 硫 酸 铁 0.01 g 尧 蔗 糖 30 g 尧 琼 脂 20 g 尧 水 1000 ml 袁 ph 值 6.8 耀 7 遥 麦 芽 汁 培 养 基 院 大 麦 芽 粉 50g 尧 水 150ml 尧 鸡 蛋 1 个, ph 值 6.8 耀 7 遥 马 铃 薯 培 养 基 院 马 铃 薯 块 200 耀 300 g 尧 葡 萄 糖 20 g 尧 琼 脂 20 g 尧 水 1000 ml 袁 ph 值 5.5 耀 5.7 遥 1.2 方 法 5 试 验 组 黑 曲 霉 发 酵 物 原 100 原 酶 活 的 测 定 米 曲 霉 发 酵 物 原 原 100 白 地 霉 发 酵 物 原 原 分 别 用 DNS 法 和 Folin 法 测 定 真 菌 饲 料 添 加 剂 中 C X 酶 和 酸 性 蛋 白 酶 的 酶 活 遥 C X 酶 酶 活 单 位 定 义 : 在 ph 值 4.6 尧 50 益 条 件 下, 1 min 内 从 羧 甲 基 纤 维 素 钠 盐 溶 液 中 降 解 释 放 1 mmol 还 原 糖 所 需 要 的 酶 量 为 一 个 酶 活 单 位 渊 U 冤 遥 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 单 位 定 义 院 1g 固 体 酶 粉 在 ph 值 3.0 尧 40 益 条 件 下 袁 1min 水 解 酪 素 产 生 1 滋 g 酪 氨 酸 所 需 要 的 酶 量 为 1 个 酶 活 单 位 渊 U 冤 遥 C X 酶 酶 活 渊 U/g 冤 越 葡 萄 糖 含 量 /5 伊 E W 曰 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 (U/g) 越 酪 氨 酸 含 量 伊 4 伊 n/1 伊 10 遥 式 中 院 葡 萄 糖 含 量 要 要 查 标 准 曲 线 得 出 渊 mmol 冤 曰 5 要 要 酶 与 底 物 作 用 的 时 间 渊 min 冤 曰 E W 要 要 1ml 酶 液 中 所 含 酶 量 渊 g 冤 曰 酪 氨 酸 含 量 要 要 查 标 准 曲 线 得 出 渊 滋 g 冤 曰 4 要 要 反 应 试 剂 体 积 渊 ml 冤 曰 n 要 要 样 品 稀 释 倍 数 渊 ml/g 冤 曰 1 要 要 参 与 反 应 的 酶 液 量 渊 ml 冤 曰 10 要 要 反 应 时 间 渊 min 冤 遥 饲 喂 与 称 重

6 李 耀 忠 等 : 真 菌 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 的 增 重 试 验 饲 料 添 加 剂 试 验 开 始 和 3 周 时 各 组 小 鼠 空 腹 1d 逐 只 称 重 袁 分 别 作 为 初 重 和 末 重 袁 每 天 饲 喂 2 次 袁 各 组 饲 养 管 理 条 件 一 致 袁 同 时 每 周 空 腹 逐 只 称 重 1 次 以 观 察 其 生 长 情 况 并 记 录 遥 2 结 果 与 分 析 2.1 真 菌 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 的 影 响 渊 见 表 3 冤 组 别 对 照 表 3 初 重 渊 g/ 只 冤 真 菌 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 率 的 影 响 末 重 渊 g/ 只 冤 均 增 重 渊 g/ 只 冤 相 对 增 重 率 渊 豫 冤 ** * * ** * * 注 :* 表 示 差 异 显 著 (P 约 0.05) 袁 ** 表 示 差 异 极 显 著 (P 约 0.01) 遥 下 表 同 遥 从 表 3 可 见,9 个 试 验 组 对 小 鼠 均 有 增 重 效 果 袁 3 周 后 9 个 试 验 组 平 均 增 重 11.8 g/ 只, 比 对 照 组 提 高 14.89% 遥 不 同 菌 种 及 配 合 比 例 的 饲 料 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 率 的 效 果 也 各 异 袁 其 中 2 组 ( 白 地 霉 黑 曲 霉 米 曲 霉 越 3 2 5) 增 重 率 (.24%) 最 好, 其 次 为 7 组 (100% 白 地 霉 ) 袁 增 重 率 (24.27%) 较 高, 均 达 到 极 显 著 的 水 平 渊 P 约 0.01 冤 曰 而 6 组 和 1 组 ( 白 地 霉 尧 黑 曲 霉 尧 米 曲 霉 以 和 的 比 例 ) 增 重 率 较 差, 分 别 为 2.91 豫 和 5.83% 遥 就 复 合 菌 种 组 成 的 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 率 的 效 果 来 看 袁 米 曲 霉 比 例 高 的 效 果 好, 黑 曲 霉 比 例 高 的 效 果 差 一 些 遥 单 菌 种 组 成 的 添 加 剂 对 小 鼠 增 重 率 的 效 果 依 次 是 白 地 霉 > 米 曲 霉 > 黑 曲 霉 遥 2.2 酶 活 的 测 定 渊 见 表 4 冤 组 别 C X 酶 酶 活 (U/g) ** ** 表 4 试 验 各 组 的 酶 活 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 (U/g) ** C X 酶 酶 活 / 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 由 表 4 可 见 袁 不 同 菌 种 及 其 配 合 比 例 制 成 的 真 菌 饲 料 添 加 剂 C X 酶 和 酸 性 蛋 白 酶 的 酶 活 各 异 袁 其 中 8 组 渊 100% 黑 曲 霉 冤 和 2 组 渊 白 地 霉 黑 曲 霉 米 曲 霉 = 冤 的 C X 酶 酶 活 最 高 袁 分 别 高 达 U/g 和 U/g 袁 而 9 组 (100% 米 曲 霉 )C X 酶 酶 活 较 差 袁 为 U/g 遥 以 8 组 的 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 最 高 达 U/g, 而 以 9 组 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 最 低 遥 3 小 结 与 讨 论 试 验 结 果 表 明 袁 3 周 后 9 个 试 验 组 平 均 增 重 11.8g/ 只, 比 对 照 组 提 高 14.89%, 其 中 2 组 增 重 效 果 最 好, 增 重 率 较 对 照 组 提 高.24% 袁 差 异 极 显 著 渊 P 约 0.01 冤 遥 单 菌 株 添 加 剂 增 重 效 果 均 显 著 渊 P<0.01 尧 P<0.05 冤 曰 多 菌 株 饲 料 添 加 剂 中 有 2 尧 3 和 4 组 的 增 重 效 果 显 著 渊 P<0.01 尧 P<0.05 冤 袁 而 1 尧 5 和 6 组 的 增 重 效 果 不 显 著 袁 可 能 因 为 该 真 菌 添 加 剂 作 用 机 理 除 其 含 粗 酶 制 剂 及 菌 体 蛋 白 外 还 含 有 活 菌 袁 不 同 种 属 真 菌 进 入 动 物 肠 道 后 因 其 之 间 可 能 存 在 着 相 互 拮 抗 或 共 生 现 象 袁 表 明 在 研 制 多 种 真 菌 的 生 态 制 剂 或 微 生 物 添 加 剂 时 袁 应 注 意 菌 株 间 的 生 物 拮 抗 关 系 遥 各 真 菌 饲 料 添 加 剂 中 C X 酶 和 酸 性 蛋 白 酶 的 酶 活 不 同, 其 中 8 组 和 2 组 的 C X 酶 酶 活 最 高 袁 8 组 的 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 最 高, 而 100 豫 的 米 曲 霉 添 加 剂 组 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 最 低 遥 真 菌 饲 料 添 加 剂 中 C X 酶 和 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 的 高 低 对 小 鼠 增 重 率 的 影 响 规 律 性 不 强, 但 有 C X 酶 酶 活 高 尧 C X 酶 酶 活 和 酸 性 蛋 白 酶 酶 活 比 例 差 异 大 可 使 小 鼠 增 重 率 提 高 的 趋 势 袁 其 增 重 的 效 果 和 机 理 还 有 待 于 进 一 步 研 究 遥 近 年 来 随 着 我 国 动 物 微 生 态 学 研 究 的 崛 起 袁 微 生 态 制 剂 的 研 究 及 运 用 正 方 兴 未 艾 袁 它 不 仅 能 保 护 和 维 持 畜 禽 尧 鱼 类 等 动 物 肠 道 的 微 生 态 平 衡 袁 进 而 增 强 它 们 对 疾 病 的 防 治 能 力 袁 而 且 还 可 以 促 进 动 物 生 长 发 育 尧 增 重 育 肥 尧 提 高 蛋 白 产 量 及 饲 料 转 化 率 遥 霉 菌 大 量 存 在 于 土 壤 中 袁 不 是 动 物 肠 道 中 的 正 常 微 生 物 袁 但 近 年 来 袁 该 类 微 生 物 在 饲 料 工 业 中 作 为 高 品 质 的 饲 料 添 加 剂 被 广 泛 应 用 袁 以 提 高 家 禽 尧 家 畜 的 生 产 性 能 袁 尤 其 是 反 刍 动 物 遥 用 于 反 刍 动 物 微 生 物 饲 料 添 加 剂 生 产 的 菌 种 主 要 有 黑 曲 霉 和 米 曲 霉 遥 这 些 曲 霉 菌 都 能 产 生 纤 维 素 酶 袁 有 利 于 反 刍 动 物 对 纤 维 素 的 消 化 和 吸 收 利 用 遥 曲 霉 能 透 过 植 物 表 皮 角 质 层 屏 障 袁 破 坏 纤 维 素 的 结 构 完 整 性 袁 降 解 含 木 质 素 的 植 物 细 胞 壁 袁 使 其 能 被 动 物 更 有 效 的 消 化 袁 特 别 是 在 粗 饲 料 成 分 较 多 的 情 况 下 袁 曲 霉 更 显 出 其 重 要 作 用 遥 黑 曲 霉 还 能 产 生 淀 粉 酶 尧 蛋 白 酶 和 果 胶 酶 遥 米 曲 霉 能 产 生 植 酸 酶 袁 使 磷 从 植 酸 和 植 酸 盐 中 释 放 出 来 袁 被 动 物 充 分 吸 收 利 用 袁 提 高 钙 尧 镁 尧 锌 尧 铜 的 吸 收 遥 白 地 霉 可 作 为 饲 料 添 加 剂 袁 具 有 很 高 的 营 养 价 值 且 生 长 繁 殖 快 袁 对 培 养 基 要 求 不 高 遥 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected])

7 饲 料 添 加 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 赵 风 立 朱 连 勤 乔 彦 良 茁 防 御 素 作 为 抗 菌 肽 的 一 种 袁 是 一 类 富 含 精 氨 酸 的 阳 离 子 低 分 子 短 肽 袁 广 泛 分 布 于 动 物 尧 植 物 和 昆 虫 体 内 遥 体 外 抑 菌 试 验 表 明 袁 防 御 素 能 对 革 兰 氏 阳 性 和 最 先 从 鸡 嗜 中 性 粒 细 胞 中 分 离 提 取 的 袁 属 茁 防 御 素 遥 对 其 进 行 分 离 纯 化 袁 得 到 了 3 种 相 似 的 抗 菌 肽 :Gal1 尧 Gal1a 尧 Gal2 渊 Gallinacin 缩 写 为 Gal 冤 遥 阴 性 细 菌 尧 真 菌 尧 分 枝 杆 菌 尧 螺 旋 体 尧 披 膜 病 毒 等 病 原 微 生 物 产 生 较 强 的 杀 伤 作 用 袁 甚 至 对 支 原 体 尧 衣 原 体 尧 2 茁 防 御 素 的 结 构 茁 防 御 素 蛋 白 外 形 小 袁 每 一 种 茁 防 御 素 基 因 编 螺 旋 体 以 及 一 些 恶 性 细 胞 ( 如 肿 瘤 细 胞 ) 和 艾 滋 病 病 毒 也 具 有 杀 伤 作 用 遥 运 用 基 因 工 程 技 术 表 达 而 大 量 生 产 的 防 御 素 无 毒 副 作 用 袁 也 不 会 使 病 原 微 生 物 菌 株 变 异 而 产 生 抗 药 性 袁 且 具 有 广 泛 的 抗 性 谱 遥 自 然 界 中 各 类 生 物 都 具 备 内 在 的 防 御 系 统 遥 研 究 发 现 袁 许 多 生 物 体 内 存 在 一 类 具 有 抗 菌 作 用 的 短 链 多 肽 袁 统 称 为 抗 菌 肽 遥 生 物 有 机 体 合 成 的 内 源 性 抗 菌 肽 具 有 广 谱 尧 高 效 的 抗 微 生 物 活 性 袁 是 其 天 然 免 疫 系 统 的 重 要 组 成 成 分 遥 哺 乳 动 物 的 抗 菌 肽 主 要 分 为 两 大 类 院 防 御 素 (defensins) 和 cathelicidins 遥 前 者 含 有 6 个 保 守 的 半 胱 氨 酸 袁 形 成 3 个 分 子 内 二 硫 键 袁 而 后 者 含 有 保 守 的 cathelin 区 域 袁 形 成 结 构 各 异 的 抗 菌 肽 遥 防 御 素 包 括 由 潘 氏 细 胞 产 生 的 琢 防 御 素 和 由 肠 上 皮 细 胞 产 生 的 茁 防 御 素 遥 茁 防 御 素 为 具 有 广 谱 抗 微 生 物 活 性 的 阳 离 子 多 肽 袁 是 上 皮 细 胞 和 白 细 胞 的 产 物 遥 码 是 由 59 耀 80 个 氨 基 酸 组 成 的 前 蛋 白 袁 平 均 为 65 个 氨 基 酸 袁 再 通 过 尚 不 明 确 的 机 制 裂 解 成 成 熟 多 肽 袁 成 熟 多 肽 大 多 由 36 耀 47 个 氨 基 酸 组 成 袁 平 均 为 45 个 氨 基 酸 遥 防 御 素 蛋 白 最 大 的 特 点 是 具 有 6 个 半 胱 氨 酸 的 基 本 序 列 袁 6 个 半 胱 氨 酸 形 成 3 个 二 硫 键 遥 鸡 的 茁 防 御 素 蛋 白 的 3 个 二 硫 键 连 接 方 式 为 Cys1Cys6 尧 Cys2 Cys4 尧 Cys3Cys5 袁 构 成 稳 定 的 反 相 平 行 的 3 股 茁 片 层 结 构 袁 二 硫 键 可 以 使 小 分 子 防 御 素 紧 密 联 结 以 防 御 蛋 白 酶 水 解 袁 所 以 在 富 含 蛋 白 的 吞 噬 溶 酶 体 环 境 中 仍 能 保 持 其 特 性 袁 这 也 是 防 御 素 区 别 于 其 它 抗 微 生 物 肽 的 主 要 因 素 遥 茁 防 御 素 基 因 含 有 2 个 外 显 子 和 1 个 内 含 子, 第 1 外 显 子 编 码 5 爷 端 非 翻 译 序 列 及 信 号 肽 和 部 分 前 片 段, 第 2 个 外 显 子 编 码 剩 余 部 分 前 片 段 尧 成 熟 肽 和 3 爷 端 非 翻 译 序 列 袁 终 止 密 码 子 一 般 在 成 熟 肽 序 列 末 端 遥 茁 防 御 1 茁 防 御 素 的 分 布 素 的 表 达 既 有 组 成 型 的 袁 又 有 诱 导 型 的 遥 防 御 素 主 要 由 中 性 粒 细 胞 产 生 袁 但 在 其 它 细 胞 中 也 发 现 有 防 御 素 表 达 袁 茁 防 御 素 主 要 存 在 于 哺 乳 动 物 3 茁 防 御 素 的 生 物 活 性 内 源 性 抗 菌 肽 袁 尤 其 是 茁 防 御 素 袁 它 是 机 体 抗 感 的 有 关 组 织 和 细 胞 中 袁 广 泛 分 布 于 人 尧 鼠 尧 牛 尧 羊 尧 猪 的 多 种 器 官 的 上 皮 细 胞 内 袁 小 鼠 的 茁 防 御 素 主 要 分 布 于 肺 尧 气 管 和 肾 脏 曰 牛 的 茁 防 御 素 最 初 是 从 牛 的 气 管 染 中 第 一 道 防 线 要 粘 膜 的 关 键 因 子 遥 可 以 快 速 尧 非 特 异 地 杀 灭 侵 入 的 病 原 体 袁 如 细 菌 尧 真 菌 和 披 膜 病 毒 袁 对 螺 旋 体 尧 分 枝 杆 菌 尧 原 生 动 物 也 有 一 定 的 杀 灭 作 用 遥 粘 膜 上 皮 细 胞 中 发 现 的 曰 猪 的 茁 原 防 御 素 广 泛 分 布 于 消 化 道 尧 呼 吸 道 尧 淋 巴 器 官 尧 心 脏 尧 肝 脏 尧 肾 脏 尧 脑 尧 皮 3.1 抗 菌 作 用 尽 管 茁 防 御 素 抗 菌 素 谱 广, 但 不 同 防 御 素 的 杀 菌 肤 尧 肌 肉 尧 睾 丸 尧 脐 带 及 骨 髓 等 器 官 内 以 及 中 性 粒 细 胞 和 肺 泡 巨 噬 细 胞 内 遥 鸡 的 防 御 素 是 Havwing 等 渊 1994 冤 能 力 的 强 弱 和 抗 菌 谱 的 侧 重 点 仍 有 所 不 同, 天 然 分 离 的 hbd2 对 G 尧 Pseudomouczs aerugiuosa 尧 E. coli 渊 LD g/ml 冤 和 Candida albicans 渊 LD 90 g/ml 冤 均 有 杀 伤 作 用 袁 但 对 G + 菌 和 Staphlococcus 杀 伤 力 不 强 遥 同 时 过 高 赵 风 立, 山 东 信 得 科 技, 研 发 工 程 师,266061, 青 岛 市 香 港 东 路 268 号 D338 朱 连 勤, 莱 阳 农 学 院 乔 彦 良, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 的 盐 浓 度 渊 150 mmol/l 冤 会 导 致 防 御 素 活 性 水 平 急 剧 下 降 遥 Bals 也 报 道 袁 茁 防 御 素 在 高 盐 环 境 中 不 能 保 持 抗 G 菌 的 活 性 遥 另 外 袁 一 价 离 子 对 防 御 素 活 性 影 响 较 小 袁 二 价 离 子 ( 如 钙 尧 镁 离 子 ) 则 可 显 著 降 低 防 御 素 的 活 性 遥 茁 防 御 素 为 毫 摩 尔 浓 度 时 才 具 有 杀 伤 细 菌 的 能 力 袁 而 7

8 赵 风 立 等 : 茁 防 御 素 的 研 究 进 展 饲 料 添 加 剂 纳 摩 尔 浓 度 时 就 具 有 趋 化 活 性 遥 目 前 袁 对 防 御 素 的 抑 菌 机 理 尚 无 明 确 的 定 论 袁 普 3.2 抗 病 毒 作 用 茁 防 御 素 能 杀 灭 一 些 披 膜 病 毒 袁 如 HIV 尧 疱 疹 病 遍 认 为 由 于 茁 防 御 素 分 子 带 正 电 荷 袁 能 够 与 带 负 电 荷 尧 呈 阴 性 的 细 菌 表 面 结 合 袁 结 合 后 其 分 子 中 的 疏 水 毒 等 遥 QuinoncsMatcu 等 渊 2003 冤 第 一 次 研 究 表 明 了 HIV1 诱 导 茁 防 御 素 在 口 腔 上 皮 细 胞 中 的 表 达 袁 茁 防 御 素 通 过 调 变 CCR4 复 合 受 体 阻 滞 HIV1 复 制 遥 防 御 素 对 病 毒 的 抑 制 程 度 依 赖 于 防 御 素 的 浓 度 尧 分 子 内 二 硫 键 的 紧 密 程 度 遥 防 御 素 的 抗 病 毒 作 用 同 样 受 到 ph 值 和 离 子 强 度 的 影 响 袁 在 中 性 及 低 离 子 强 度 时 袁 防 御 素 具 有 强 的 抗 病 毒 功 效 遥 区 可 插 入 到 细 菌 的 胞 膜 曰 而 其 带 电 区 ( 带 正 点 荷 ) 则 与 细 菌 胞 膜 上 带 负 电 荷 的 磷 脂 头 部 和 水 分 子 相 互 作 用 袁 形 成 电 压 依 赖 的 离 子 渗 透 性 膜 通 道 袁 使 膜 具 有 通 透 性 遥 在 细 胞 膜 上 袁 多 个 茁 防 御 素 分 子 聚 集 形 成 孔 隙 或 通 道 袁 从 而 扰 乱 了 细 胞 膜 的 通 透 性 及 细 胞 能 量 状 态, 导 致 细 胞 膜 去 极 化 袁 呼 吸 作 用 受 到 抑 制 以 及 细 胞 ATP 含 量 下 降, 细 胞 必 需 的 代 谢 物 质 外 泄 袁 防 御 素 和 正 常 3.3 细 胞 毒 性 作 用 茁 防 御 素 还 具 有 细 胞 毒 性 作 用 袁 抑 制 某 些 肿 瘤 细 情 况 下 不 能 进 入 细 胞 的 物 质 ( 离 子 尧 酶 尧 及 某 些 抗 生 素 ) 内 渗 袁 最 终 导 致 不 可 逆 性 的 菌 体 死 亡 遥 高 等 动 物 的 细 胞 的 生 长 遥 在 体 外 试 验 研 究 中 观 察 纯 化 的 防 御 素 对 数 种 人 类 及 小 鼠 的 肿 瘤 细 胞 的 作 用 情 况 发 现 袁 防 御 素 对 白 血 病 细 胞 系 尧 淋 巴 瘤 细 胞 系 及 实 体 瘤 细 胞 系 具 有 毒 性 作 用 袁 并 且 这 种 抗 肿 瘤 功 效 与 其 作 用 时 间 和 剂 量 呈 正 相 关 遥 需 要 指 出 的 是 袁 防 御 素 的 这 种 细 胞 毒 活 性 是 非 肿 瘤 细 胞 特 异 的 袁 它 不 仅 对 肿 瘤 细 胞 具 有 毒 性 作 用 袁 而 且 对 自 身 细 胞 也 有 一 定 侵 害 作 用, 其 细 胞 毒 性 活 力 是 不 依 赖 氧 的 机 制 溶 解 靶 细 胞 的, 作 用 主 要 通 过 胞 则 由 于 细 胞 膜 中 负 电 荷 含 量 较 低 而 免 于 被 攻 击 遥 正 是 由 于 这 种 特 殊 的 作 用 机 理 袁 使 防 御 素 具 备 两 个 特 点 院 淤 抗 菌 谱 广 曰 于 目 的 微 生 物 难 以 对 防 御 素 产 生 抗 性 突 变 遥 防 御 素 的 抗 病 毒 作 用 则 是 通 过 与 病 毒 外 壳 蛋 白 结 合 而 导 致 病 毒 失 去 生 物 活 性 遥 防 御 素 对 没 有 包 膜 的 病 毒 缺 乏 抗 病 毒 活 性 袁 这 说 明 膜 的 相 互 作 用 对 防 御 素 的 抗 微 生 物 功 能 是 必 要 的 遥 抑 制 氧 化 酶 的 活 性, 并 部 分 依 赖 于 靶 细 胞 膜 的 脂 质 成 分, 与 过 氧 化 氢 酶 有 协 同 作 用 遥 Mizukawa 等 在 口 腔 鳞 5 茁 防 御 素 的 表 达 尧 基 因 克 隆 和 蛋 白 工 程 天 然 获 取 防 御 素 的 量 极 其 有 限, 合 成 或 从 机 体 中 状 细 胞 癌 病 人 唾 液 中 发 现 袁 hbd1 与 肿 瘤 组 织 相 比 邻 的 朗 氏 细 胞 内 也 发 现 了 防 御 素, 这 些 可 能 与 肿 瘤 有 关 遥 韩 献 萍 等 渊 1994 冤 报 道 袁 柞 蚕 抗 菌 肽 D 对 宫 颈 癌 细 胞 具 有 杀 伤 作 用 遥 提 取 的 由 于 其 分 子 含 有 3 对 二 硫 键, 多 肽 难 以 保 证 正 确 配 对, 影 响 其 生 物 活 性 袁 且 步 骤 复 杂 尧 产 率 低 尧 价 格 昂 贵 遥 防 御 素 基 因 工 程 研 究 由 于 受 到 人 们 的 广 泛 关 注, 发 展 十 分 迅 速, 各 种 先 进 的 生 物 学 技 术 也 为 它 的 发 3.4 连 接 先 天 性 免 疫 和 获 得 性 免 疫 Duit 等 研 究 表 明 袁 茁 防 御 素 可 能 是 不 成 熟 树 突 状 展 提 供 了 条 件 遥 迄 今 为 止, 关 于 防 御 素 基 因 工 程 的 研 究 己 取 得 很 大 的 成 果 遥 Jaynes 等 利 用 基 因 改 造 袁 获 得 了 细 胞 和 记 忆 T 细 胞 的 趋 化 因 子 遥 Yang 等 渊 1999 冤 对 茁 防 御 素 化 学 趋 化 活 性 进 行 研 究 袁 达 到 亚 微 摩 尔 浓 度 的 这 些 茁 防 御 素 即 可 以 吸 引 尚 未 成 熟 的 树 突 状 细 胞 和 记 忆 性 T 细 胞 袁 这 一 效 应 是 由 CC 类 趋 化 受 体 6 所 介 导 的 遥 hbd3 在 体 内 可 能 通 过 其 与 CCR6 的 相 互 作 用 而 招 募 未 成 熟 DC 与 记 忆 性 T 淋 巴 细 胞 向 微 生 物 入 侵 的 皮 下 或 粘 膜 部 位 积 聚 遥 因 此 袁 茁 防 御 素 一 方 面 直 接 杀 灭 病 原 体 曰 另 一 方 面 趋 化 树 突 状 细 胞 尧 T 细 胞 至 感 染 组 织 袁 提 高 了 机 体 抵 抗 微 生 物 感 染 的 获 得 性 免 疫 水 平 袁 成 为 先 天 免 疫 系 统 和 后 天 免 疫 系 统 连 接 的 桥 梁 遥 由 此 可 见 袁 茁 防 御 素 在 机 体 抗 微 生 物 入 侵 的 先 天 性 免 疫 和 获 得 性 免 疫 中 均 具 有 重 要 作 用 遥 比 天 然 提 取 的 肽 有 更 高 活 性 的 新 型 抗 菌 肽 袁 而 人 工 合 成 得 到 的 融 合 抗 菌 肽 有 可 能 表 现 出 了 比 其 它 任 何 一 个 供 体 抗 菌 肽 都 高 的 抗 菌 活 性 遥 蔡 绍 晖 等 渊 2003 冤 研 究 了 C 端 带 Myc 基 因 和 多 聚 组 氨 酸 双 标 记 的 重 组 人 防 御 素 2 在 COS7 细 胞 的 转 染 表 达 遥 吴 映 雅 等 将 柞 蚕 抗 菌 肽 D 基 因 连 接 在 牛 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子 cdn 的 上 游 袁 在 酵 母 中 成 功 地 得 到 了 表 达 袁 表 达 产 物 具 有 抗 菌 活 性 和 牛 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子 的 抗 原 性 遥 Zhang 等 选 择 RepA 蛋 白 的 序 列 作 为 抗 菌 肽 的 融 合 表 达 伴 侣 袁 并 插 入 Histag 等 序 列 作 为 纯 化 亲 和 位 点 袁 实 现 了 在 E.coli 中 的 融 合 表 达 遥 利 用 基 因 工 程 技 术 生 产 防 御 素 由 于 该 分 子 的 抗 菌 4 茁 防 御 素 的 作 用 机 理 活 性 袁 面 临 防 御 素 引 起 工 程 菌 野 自 杀 冶 的 难 题 袁 给 基 因 8

9 饲 料 添 加 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 胆 汁 酸 的 生 理 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 赵 晓 芳 胆 汁 酸 是 胆 汁 的 主 要 成 分, 在 脂 肪 消 化 过 程 中 起 着 重 要 作 用 遥 集 约 化 养 殖 过 程 中 频 繁 的 应 激 无 形 中 加 大 了 动 物 肝 脏 的 压 力, 肝 脏 分 泌 胆 汁 的 功 能 受 到 抑 制 袁 脂 肪 的 消 化 率 随 之 降 低, 从 而 出 现 营 养 性 腹 泻 尧 脂 肪 肝 尧 肝 炎 等 病 症 遥 胆 汁 酸 作 为 一 种 饲 料 添 加 剂, 可 有 效 缓 解 上 述 问 题, 本 文 详 细 介 绍 胆 汁 酸 的 结 构 组 成 尧 生 理 功 能 以 及 在 畜 牧 业 中 的 使 用 效 果 和 存 在 问 题 遥 1 胆 汁 酸 的 组 成 及 合 成 1.1 胆 汁 酸 的 组 成 胆 汁 酸 是 胆 汁 的 主 要 成 分 袁 是 动 物 体 内 胆 固 醇 代 谢 过 程 中 所 产 生 的 一 系 列 固 醇 类 物 质 遥 胆 汁 酸 按 结 构 分 为 游 离 型 胆 汁 酸 和 结 合 型 胆 汁 酸 两 类 袁 前 者 包 括 胆 赵 晓 芳, 南 宁 市 广 东 温 氏 畜 禽 有 限 公 司,530200, 广 西 南 宁 市 邕 宁 区 蒲 庙 镇 龙 岗 村 张 宏 福, 中 国 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所 收 稿 日 期 : 张 宏 福 酸 尧 鹅 脱 氧 胆 酸 尧 脱 氧 胆 酸 尧 石 胆 酸 和 微 量 熊 脱 氧 胆 酸 等 曰 后 者 是 游 离 胆 汁 酸 与 甘 氨 酸 或 牛 黄 酸 结 合 的 产 物 袁 主 要 包 括 甘 氨 胆 酸 尧 甘 氨 鹅 脱 氧 胆 酸 尧 牛 黄 胆 酸 及 牛 黄 鹅 脱 氧 胆 酸 等 遥 另 外, 不 同 动 物 的 胆 汁 酸 种 类 和 数 量 都 不 相 同, 起 作 用 的 成 分 也 有 较 大 差 别 遥 如 人 的 胆 汁 酸 是 以 胆 酸 尧 鹅 脱 氧 胆 酸 为 主 曰 奶 牛 胆 汁 酸 的 主 要 成 分 为 胆 酸 和 脱 氧 胆 酸 曰 鸡 体 内 脱 氧 胆 酸 含 量 很 少, 鹅 脱 氧 胆 酸 的 含 量 最 高 遥 因 此 袁 如 果 胆 汁 酸 要 有 效 发 挥 其 生 理 功 能, 必 须 根 据 动 物 种 类 的 不 同 选 择 适 宜 的 胆 汁 酸 产 品 遥 1.2 胆 汁 酸 的 合 成 及 代 谢 胆 汁 酸 的 合 成 胆 汁 酸 由 胆 固 醇 代 谢 过 程 中 转 变 而 来 袁 其 合 成 分 为 3 个 阶 段 院 淤 初 级 胆 汁 酸 的 合 成 遥 胆 固 醇 在 多 种 酶 的 作 用 下 袁 经 过 羟 化 尧 加 氢 及 侧 链 氧 化 断 裂 等 多 步 反 应 袁 最 终 形 成 初 级 胆 汁 酸 渊 胆 酸 和 鹅 脱 氧 胆 酸 等 冤 遥 于 结 合 型 初 级 胆 汁 酸 的 合 成 遥 初 级 胆 汁 酸 与 甘 氨 酸 或 牛 黄 酸 结 合 袁 形 成 结 合 型 胆 汁 酸 袁 分 泌 入 胆 道 遥 盂 次 级 胆 工 程 表 达 带 来 了 一 定 困 难 遥 能 袁 对 提 高 免 疫 力 尧 预 防 肉 鸡 的 疾 病 有 较 好 效 果 遥 陈 晓 6 茁 防 御 素 的 研 究 应 用 情 况 防 御 素 由 于 分 子 小 并 具 有 稳 定 的 分 子 结 构 等 特 生 等 渊 2005 冤 在 鸭 日 粮 中 添 加 蚕 抗 菌 肽 AD 酵 母 液 体 制 剂 袁 结 果 发 现 抗 菌 肽 可 起 到 抗 菌 促 生 长 的 作 用 遥 点 袁 为 当 今 研 制 多 肽 类 新 药 提 供 了 理 想 的 分 子 骨 架 和 模 板 遥 防 御 素 的 医 用 价 值 己 引 起 研 究 者 的 关 注 袁 其 强 7 展 望 现 在 动 物 疾 病 越 来 越 趋 向 于 复 杂 化 袁 新 的 混 合 性 大 的 抑 菌 功 能 尧 独 特 的 作 用 机 制 袁 为 耐 药 病 原 微 生 物 感 染 的 治 疗 带 来 了 希 望 遥 由 于 防 御 素 之 间 和 防 御 素 与 抗 菌 剂 之 间 的 协 同 作 用 袁 故 联 合 应 用 几 种 防 御 素 和 抗 菌 剂 可 以 取 得 更 好 的 效 果 袁 或 者 利 用 其 诱 导 表 达 的 特 性 袁 设 计 药 物 来 特 异 地 诱 导 靶 器 官 的 防 御 素 表 达 袁 从 而 达 到 治 疗 目 的 遥 刘 温 发 等 渊 2005 冤 报 道 袁 蚕 抗 菌 肽 可 减 轻 断 奶 仔 猪 的 腹 泻 曰 蚕 抗 菌 肽 酵 母 制 剂 可 促 进 仔 鸡 生 长 袁 减 少 排 泄 物 氮 含 量 遥 目 前 袁 广 东 省 应 用 抗 菌 肽 基 感 染 不 断 出 现 袁 不 利 于 畜 牧 业 的 发 展 遥 而 抗 生 素 添 加 剂 的 使 用 严 重 破 坏 了 动 物 肠 道 的 微 生 物 平 衡 袁 并 易 在 动 物 体 内 残 留 袁 严 重 影 响 了 畜 产 品 的 品 质 和 人 类 健 康 遥 运 用 基 因 工 程 技 术 表 达 而 生 产 的 防 御 素 无 毒 副 作 用 袁 也 不 会 使 病 原 微 生 物 菌 株 变 异 而 产 生 抗 药 性 袁 且 具 有 广 泛 的 抗 性 谱 袁 可 以 减 少 化 学 抗 菌 剂 在 畜 牧 业 上 的 应 用 袁 降 低 有 毒 尧 有 害 物 质 在 生 物 体 内 的 残 留 袁 提 高 畜 产 品 的 安 全 袁 具 有 广 阔 的 开 发 应 用 前 景 遥 因 转 化 酵 母 进 行 高 效 表 达 袁 经 发 酵 条 件 优 化 袁 生 产 抗 菌 肽 酵 母 制 剂 袁 并 将 其 用 作 畜 禽 及 水 产 饲 料 添 加 剂 袁 代 替 抗 生 素 来 预 防 及 治 疗 仔 猪 白 痢 及 雏 鸡 白 痢 有 明 ( 参 考 文 献 41 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) 显 效 果 遥 从 柞 蚕 蛹 中 分 离 抗 菌 肽 能 促 进 肉 鸡 生 产 性 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected]) 9

10 赵 晓 芳 等 : 胆 汁 酸 的 生 理 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 饲 料 添 加 剂 汁 酸 的 合 成 遥 结 合 型 初 级 胆 汁 酸 随 胆 汁 进 入 小 肠 参 与 脂 类 的 消 化 吸 收 后 袁 部 分 结 合 型 初 级 胆 汁 酸 在 空 肠 尧 回 肠 及 结 肠 上 段 袁 在 细 菌 酶 的 催 化 下 袁 进 一 步 水 解 尧 结 合 及 脱 羟 生 成 脱 氧 胆 酸 尧 石 胆 酸 尧 熊 脱 氧 胆 酸 等 次 级 胆 汁 酸 遥 面 上 而 起 到 催 化 作 用 遥 脂 肪 酶 的 功 能 发 挥 的 最 佳 ph 值 范 围 为 8 耀 9, 而 在 小 肠 前 端 ph 值 为 6 耀 7 的 环 境 下, 脂 肪 酶 基 本 不 起 作 用 袁 但 是 当 脂 肪 酶 与 胆 汁 酸 形 成 一 种 复 合 物 时 袁 脂 肪 酶 的 性 质 发 生 了 改 变, 能 在 ph 值 为 6 耀 7 的 小 肠 中 发 挥 作 用 遥 并 且 在 脂 肪 的 吸 收 过 程 中, 胆 胆 汁 酸 的 代 谢 动 物 进 食 后 袁 胆 汁 酸 进 入 小 肠 袁 乳 化 脂 肪 遥 乳 化 的 汁 酸 可 以 被 肠 上 皮 细 胞 识 别, 从 而 使 脂 肪 酸 要 胆 汁 酸 复 合 物 进 入 小 肠 绒 毛 膜 内, 提 高 了 脂 肪 的 吸 收 率 遥 脂 肪 被 水 解 为 甘 油 与 脂 肪 酸 后 袁 胆 汁 酸 与 脂 肪 酸 形 成 脂 肪 酸 要 胆 汁 酸 复 合 物 袁 被 小 肠 绒 毛 膜 吸 收 袁 然 后 与 2.2 保 持 体 内 胆 固 醇 的 动 态 平 衡 胆 汁 酸 由 胆 固 醇 转 变 而 来 袁 这 也 是 体 内 胆 固 醇 排 脂 肪 酸 分 离 袁 经 门 静 脉 入 肝 袁 由 肝 细 胞 摄 取 袁 将 游 离 型 胆 汁 酸 再 合 成 结 合 型 胆 汁 酸 袁 并 同 重 吸 收 的 以 及 新 合 成 的 结 合 型 胆 汁 酸 一 起 排 入 肠 道 袁 这 一 过 程 成 为 胆 汁 酸 的 肝 肠 循 环 袁 肝 肠 循 环 使 有 限 的 胆 汁 酸 能 发 挥 最 大 限 度 的 乳 化 作 用 袁 以 保 证 脂 类 食 物 消 化 吸 收 的 正 常 进 行 遥 排 入 肠 道 的 胆 汁 酸 约 95 豫 以 上 被 重 吸 收 袁 其 余 随 泄 的 重 要 途 径 之 一 遥 人 类 每 天 大 约 有 500 mg 的 胆 固 醇 通 过 转 变 为 胆 汁 酸 得 以 清 除 袁 清 除 掉 多 余 的 胆 固 醇 对 于 所 有 动 物 来 说 都 非 常 重 要 袁 尤 其 是 在 胆 固 醇 摄 入 过 多 时 遥 近 年 来 研 究 发 现 袁 胆 汁 酸 还 作 为 一 种 激 素 袁 通 过 改 变 胆 固 醇 合 成 过 程 中 的 限 速 酶 的 转 录 来 参 与 胆 固 醇 的 代 谢 遥 粪 便 排 出 袁 所 以 胆 汁 酸 每 循 环 一 次 约 损 失 5% 遥 返 回 到 肝 的 胆 汁 酸 有 刺 激 肝 胆 汁 分 泌 的 作 用 袁 但 肝 脏 病 变 会 2.3 保 肝 利 胆 袁 维 护 动 物 健 康 随 着 抗 生 素 在 养 殖 业 中 的 大 量 使 用 袁 抗 生 素 杀 灭 降 低 肝 细 胞 摄 取 胆 汁 酸 盐 的 能 力 袁 导 致 肝 脏 分 泌 胆 汁 酸 的 能 力 下 降 袁 影 响 脂 类 的 消 化 吸 收 遥 细 菌 后 产 生 大 量 的 内 毒 素 严 重 影 响 动 物 健 康 袁 而 肝 脏 在 所 有 营 养 物 质 的 消 化 吸 收 尧 有 毒 有 害 物 质 的 分 解 尧 2 胆 汁 酸 的 生 理 功 能 解 毒 过 程 中 起 非 常 重 要 的 作 用 袁 肝 脏 病 变 随 之 引 起 一 2.1 促 进 脂 肪 和 脂 溶 性 物 质 的 消 化 吸 收 食 物 中 的 脂 肪 通 过 胆 汁 酸 的 作 用 先 被 乳 化 袁 而 后 系 列 消 化 吸 收 障 碍 袁 而 胆 汁 酸 可 减 少 动 物 体 内 细 菌 内 毒 素 吸 收 袁 如 果 动 物 摄 入 适 量 的 脱 氧 胆 汁 酸 袁 就 能 有 被 脂 肪 消 化 酶 所 消 化 袁 消 化 产 物 包 含 在 胆 汁 酸 的 微 粒 中 袁 被 小 肠 中 的 绒 毛 膜 吸 收 遥 在 整 个 脂 类 的 消 化 吸 收 过 程 中 袁 胆 汁 酸 具 有 重 要 的 生 理 功 能 遥 当 动 物 采 食 油 脂 含 量 高 的 食 物 时 袁 可 刺 激 十 二 指 肠 分 泌 胆 囊 收 缩 素 袁 促 使 胆 囊 收 缩 将 胆 汁 排 入 肠 道 袁 帮 助 脂 肪 消 化 遥 若 效 分 解 内 毒 素 袁 维 护 动 物 健 康 遥 脱 氧 胆 酸 和 熊 脱 氧 胆 酸 还 可 促 进 肝 细 胞 分 泌 大 量 稀 薄 的 胆 汁, 使 胆 道 畅 通, 消 除 胆 汁 淤 滞, 起 到 利 胆 作 用 遥 很 多 药 物 尧 重 金 属 尧 霉 菌 毒 素 和 其 它 有 害 物 质 亦 可 从 胆 汁 中 排 出, 从 而 维 护 动 物 健 康 遥 胆 汁 酸 分 泌 不 足 袁 过 量 的 脂 肪 会 产 生 腻 感 袁 严 重 抑 制 动 物 的 采 食 袁 从 而 降 低 动 物 的 生 长 性 能 遥 胆 汁 酸 促 进 2.4 消 炎 杀 菌 胆 汁 酸 还 是 一 种 有 效 的 杀 菌 剂 袁 在 动 物 的 大 肠 脂 肪 消 化 吸 收 的 机 理 如 下 院 淤 促 进 脂 肪 的 乳 化 胆 汁 酸 分 子 内 既 含 有 亲 水 性 的 羟 基 及 羧 基 袁 又 含 有 疏 水 性 烷 基 袁 两 类 性 质 不 同 的 基 团 位 于 环 戊 烷 多 氢 菲 核 的 两 侧 袁 使 胆 汁 酸 具 有 较 强 的 表 面 活 性 袁 能 降 低 油 水 两 相 间 的 表 面 张 力 袁 促 进 脂 类 乳 化 袁 并 形 成 可 以 悬 浮 在 水 中 的 脂 肪 酸 乳 糜 颗 粒 袁 扩 大 脂 肪 和 脂 肪 酶 的 接 触 面 袁 加 速 脂 类 的 消 化 遥 于 活 化 脂 肪 酶 袁 增 强 脂 肪 酶 的 活 性 胰 腺 分 泌 的 脂 肪 酶 原 在 小 肠 内 转 变 为 有 活 性 的 脂 肪 酶 才 能 发 挥 作 用, 它 的 激 活 必 须 有 胆 汁 酸 的 参 与, 而 且 胆 汁 酸 可 使 脂 肪 酶 结 合 到 甘 油 三 酯 的 脂 滴 的 表 中 袁 胆 汁 酸 能 够 抑 制 大 肠 杆 菌 尧 链 球 菌 及 其 它 有 害 细 垣 菌 的 增 殖 遥 鸡 胆 汁 酸 对 体 外 培 养 的 G 菌 尧 金 黄 色 葡 萄 球 菌 有 明 显 的 抗 菌 作 用 遥 在 人 类 医 学 上 也 采 用 胆 汁 酸 作 消 炎 药 袁 用 于 治 疗 百 日 咳 尧 金 黄 色 葡 萄 球 菌 感 染 等 遥 哈 斯 苏 荣 等 渊 2001 冤 对 鸡 胆 汁 的 有 效 成 分 牛 黄 酸 (Tau) 和 胆 酸 (CA) 进 行 了 抗 炎 作 用 及 抗 菌 作 用 研 究 袁 结 果 表 明 袁 Tau 和 CA 对 急 慢 性 炎 症 均 有 很 强 的 抑 制 作 用 袁 CA 还 对 体 外 培 养 的 革 兰 氏 阳 性 菌 尧 金 黄 色 葡 萄 球 菌 有 明 显 的 抗 菌 作 用 遥 但 有 些 学 者 认 为 胆 汁 酸 没 有 抗 菌 基 团 袁 其 抗 菌 活 性 是 通 过 促 进 脂 肪 的 消 化 袁 避 免 了 肠 道 菌 群 的 失 衡 而 实 现 的 遥 10

11 饲 料 添 加 剂 赵 晓 芳 等 : 胆 汁 酸 的 生 理 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 2.5 改 善 动 物 的 胴 体 质 量 胆 汁 酸 能 提 高 甲 状 腺 激 素 的 活 性 袁 促 使 多 余 的 脂 肪 野 燃 烧 冶 袁 可 有 效 防 止 动 物 生 长 后 期 脂 肪 的 过 多 沉 积 袁 从 而 改 善 胴 体 品 质 袁 增 加 动 物 的 可 食 比 例 遥 3 胆 汁 酸 的 在 畜 牧 业 上 的 应 用 3.1 胆 汁 酸 对 仔 猪 生 产 性 能 的 影 响 为 保 证 仔 猪 摄 食 饲 料 中 足 够 的 能 量 袁 需 要 在 饲 料 配 方 中 添 加 脂 肪 袁 然 而 袁 仔 猪 肝 功 能 还 不 健 全 袁 胆 汁 酸 分 泌 不 足 袁 对 脂 肪 的 消 化 吸 收 非 常 有 限 袁 未 消 化 脂 肪 易 引 起 仔 猪 腹 泻 袁 在 其 饲 料 中 添 加 胆 汁 酸 可 解 决 仔 猪 脂 肪 消 化 的 问 题 遥 美 国 俄 亥 俄 州 立 大 学 Reinhart 等 渊 1989 冤 在 断 奶 仔 猪 日 粮 中 添 加 0 援 3 豫 的 胆 汁 酸 袁 显 著 提 高 了 体 增 重 和 采 食 量 袁 脂 肪 摄 入 量 和 脂 肪 表 观 吸 收 量 都 增 加 了 袁 氮 摄 入 量 和 氮 贮 留 量 也 显 著 地 增 加 渊 P 约 0 援 01 冤 遥 3.2 胆 汁 酸 对 家 禽 生 产 性 能 的 影 响 胆 汁 酸 还 能 有 效 提 高 家 禽 的 生 产 性 能 遥 Gomez 渊 1979 冤 报 道 袁 饲 料 中 添 加 胆 汁 酸 袁 使 白 洛 克 鸡 脂 肪 表 观 消 化 率 提 高 2 援 l 豫 遥 胆 汁 酸 还 能 提 高 肉 鸡 对 脂 肪 的 利 用 率 渊 Pullen 袁 l983 冤 遥 蛋 鸡 脂 肪 肝 是 产 蛋 鸡 常 见 的 一 种 营 养 代 谢 性 疾 病 袁 影 响 肝 脏 的 正 常 功 能 袁 严 重 的 引 起 肝 细 胞 破 裂 尧 肝 内 出 血 而 死 亡 遥 患 脂 肪 肝 的 鸡 群 很 难 出 现 产 蛋 高 峰 袁 给 养 殖 业 带 来 重 大 经 济 损 失 袁 饲 料 中 额 外 添 加 胆 汁 酸 袁 可 防 止 脂 肪 肝 带 来 的 一 系 列 问 题 袁 利 于 母 鸡 健 康 袁 延 长 产 蛋 高 峰 的 持 续 时 间 遥 3.3 胆 汁 酸 对 水 产 动 物 生 长 的 影 响 饲 料 中 添 加 胆 汁 酸 可 提 高 鲷 鱼 饲 料 的 营 养 价 值 袁 增 重 率 较 对 照 组 提 高 45 援 73 豫 耀 68 援 6 豫 袁 饲 料 利 用 率 提 高 10 援 86 豫 耀 21 援 88 豫 ( 弟 子 丸 修 袁 1981) 遥 林 仕 梅 等 (2003) 在 饲 料 中 添 加 100 mg/kg 的 可 利 康 渊 胆 汁 酸 产 品 冤 袁 异 育 银 鲫 的 生 长 速 度 提 高 了 5.1% 袁 饲 料 转 化 率 提 高 了 22.9% 袁 内 脏 比 例 降 低 袁 鱼 的 可 食 比 例 得 到 提 高 遥 石 原 秀 平 渊 1987 冤 还 发 现 袁 饲 料 中 添 加 胆 汁 酸 袁 能 改 善 真 鲷 的 体 色 袁 提 高 养 殖 鱼 类 的 商 品 价 值 遥 3.4 胆 汁 酸 对 动 物 的 外 观 皮 毛 质 量 的 影 响 由 于 胆 汁 酸 能 提 高 动 物 对 脂 肪 和 脂 溶 性 维 生 素 的 吸 收 率 袁 从 而 改 善 动 物 皮 毛 的 质 量 遥 4 有 待 于 研 究 的 问 题 淤 胆 汁 酸 能 提 高 甲 状 腺 激 素 活 性 袁 使 基 础 代 谢 加 快 袁 促 使 多 余 的 脂 肪 野 燃 烧 冶 袁 若 提 高 了 动 物 的 基 础 11 代 谢 袁 对 动 物 生 产 不 利 遥 胆 汁 酸 作 用 的 发 挥 是 提 高 了 基 础 代 谢 还 是 把 脂 肪 转 化 为 提 供 沉 积 肌 肉 所 需 要 的 能 量 袁 还 有 待 于 研 究 遥 于 胆 汁 酸 品 种 繁 多 袁 必 须 根 据 动 物 种 类 制 备 适 宜 的 胆 汁 酸 产 品 遥 但 是 每 一 种 胆 汁 酸 到 底 适 合 哪 些 品 种 的 动 物 使 用 还 有 待 于 研 究 遥 盂 外 源 添 加 胆 汁 酸 是 否 会 抑 制 动 物 自 身 的 分 泌 袁 胆 汁 酸 在 不 同 日 粮 中 适 宜 的 添 加 量 还 有 待 于 研 究 遥 E.Baue 渊 2005 冤 等 研 究 表 明 袁 低 浓 度 的 胆 汁 酸 盐 能 够 提 高 脂 肪 酶 的 活 性 袁 但 高 浓 度 的 胆 汁 酸 盐 却 抑 制 脂 肪 酶 的 活 性 袁 所 以 袁 胆 汁 酸 的 合 适 添 加 量 对 其 功 能 的 发 挥 非 常 重 要 遥 榆 胆 汁 酸 提 高 了 能 量 的 利 用 袁 同 时 改 变 了 饲 料 中 的 能 蛋 比 袁 是 否 会 导 致 配 方 中 各 营 养 素 的 不 平 衡 袁 从 而 导 致 动 物 的 生 长 和 生 产 性 能 下 降 袁 这 还 有 待 于 进 一 步 研 究 遥 虞 从 动 物 身 上 收 集 的 胆 囊 存 在 一 定 的 安 全 隐 患 袁 能 否 知 道 主 要 发 挥 作 用 的 胆 汁 酸 的 品 种 袁 采 用 化 工 合 成 将 更 安 全 尧 更 经 济 袁 还 需 要 进 一 步 研 究 遥 总 之 袁 胆 汁 酸 作 为 一 种 饲 料 添 加 剂 袁 可 有 效 缓 解 由 于 脂 肪 及 脂 溶 性 维 生 素 消 化 不 良 引 起 的 各 种 问 题 袁 但 若 想 在 畜 牧 生 产 中 更 有 效 尧 更 合 理 地 应 用 胆 汁 酸 袁 还 有 一 系 列 问 题 需 要 研 究 和 解 决 遥 参 考 文 献 1 曾 端, 李 力, 王 群 初, 等. 胆 汁 酸 在 动 物 营 养 研 究 中 的 应 用. 广 东 饲 料,2002,11(3):34 耀 35 2 关 江, 曹 金 山, 李 培 锋, 等. 鸡 胆 汁 有 效 成 分 Tau 和 CA 的 抗 炎 抗 菌 作 用 研 究 [J]. 中 兽 医 医 药 杂 志,2001(2):3 耀 6 3 林 仕 梅, 叶 元 土, 罗 莉. 胆 汁 酸 添 加 剂 对 异 育 银 鲫 生 长 的 影 响 [J]. 广 东 饲 料,2003,12(3):14 耀 15 4 E. Baue,et al. Asianaust JAnim. Sci.,2005,18(2):282 耀 周 根 来, 王 恬. 动 物 脂 肪 代 谢 营 养 调 控 [J]. 饲 料 工 业,2003,24(1): 42 耀 44 6 王 吉 峰, 李 海 贤. 胆 汁 酸 对 蛋 鸡 脂 肪 代 谢 的 影 响 [J]. 饲 料 广 角, 2006(13):16 耀 17 7 沈 同. 生 物 化 学 ( 第 二 版 )[M]. 高 等 教 育 出 版 社,2002 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected])

12 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 酶 制 剂 本 栏 目 由 北 京 挑 战 生 物 技 术 有 限 公 司 协 办 摘 要 用 纤 维 素 酶 和 甘 露 聚 糖 酶 对 壳 聚 糖 进 行 交 替 降 解, 对 酶 的 降 解 产 物 用 Sephadex G100 凝 胶 色 谱 柱 进 行 分 离, 分 析 水 解 产 物 的 相 对 分 子 质 量 分 布 研 究 表 明, 先 用 纤 维 素 酶 水 解 24 h, 再 用 甘 露 聚 糖 酶 水 解 24 h, 可 将 分 子 量 为 100 万 左 右 的 壳 聚 糖 部 分 完 全 降 解, 产 物 相 对 分 子 质 量 主 要 分 布 在 Da 以 下 关 键 词 壳 聚 糖 ; 甘 露 聚 糖 酶 ; 纤 维 素 酶 ; 凝 胶 色 谱 中 图 分 类 号 Q814.4 李 专 胡 远 亮 梁 运 祥 李 专, 华 中 农 业 大 学 农 业 微 生 物 学 国 家 重 点 实 验 室, , 武 汉 市 洪 山 区 绎 壳 聚 糖 是 甲 壳 素 的 脱 乙 酰 化 产 物 袁 是 迄 今 发 现 的 唯 一 的 天 然 碱 性 多 糖 袁 能 溶 于 醋 酸 等 有 机 酸 袁 具 有 良 好 的 生 物 相 溶 性 袁 且 无 毒 袁 可 生 物 降 解 遥 壳 聚 糖 分 子 中 有 胺 基 和 羟 基 袁 容 易 进 行 化 学 改 性 和 修 饰 袁 因 此 在 医 药 尧 纺 织 尧 饲 料 尧 食 品 尧 化 工 尧 生 物 尧 农 业 等 众 多 领 域 具 有 重 要 的 应 用 价 值 [13] 遥 但 是 袁 由 甲 壳 素 脱 乙 酰 化 制 得 的 壳 聚 糖 分 子 量 大 袁 具 有 紧 密 的 晶 体 结 构 袁 不 溶 于 普 通 溶 剂 袁 只 能 在 某 些 酸 性 介 质 中 溶 解 袁 这 使 其 应 用 受 到 了 极 大 限 制 遥 此 外 袁 分 子 量 对 壳 聚 糖 性 质 也 有 很 大 影 响 袁 不 同 分 子 量 的 壳 聚 糖 性 质 差 异 很 大 袁 有 时 甚 至 表 现 出 截 然 相 反 的 特 性 袁 而 壳 聚 糖 的 许 多 独 特 功 能 只 有 在 分 子 量 降 低 到 一 定 程 度 才 表 现 出 来 遥 降 解 壳 聚 糖 的 方 法 主 要 有 物 理 尧 化 学 和 酶 降 解 法 遥 酶 降 解 法 通 常 优 于 其 它 方 法 袁 这 是 由 于 酶 法 降 解 可 特 异 性 地 尧 选 择 性 地 切 断 壳 聚 糖 的 茁 1 袁 4 糖 苷 键 袁 降 解 过 程 和 降 解 产 物 的 分 子 量 易 于 被 控 制 袁 且 条 件 温 和 遥 目 前 袁 国 内 研 究 多 用 单 一 酶 或 是 用 混 合 酶 直 接 降 解 壳 聚 糖 袁 用 多 酶 交 替 降 解 却 不 多 见 遥 本 试 验 用 甘 露 聚 糖 酶 和 纤 维 素 酶 交 替 降 解 壳 聚 糖 袁 再 用 凝 胶 渗 透 色 谱 直 接 测 定 壳 聚 糖 的 相 对 分 子 质 量 分 布 [4] 遥 1 材 料 与 试 剂 1.1 菌 种 里 氏 木 霉 渊 Trichoderma reesei 冤 FT0418 和 短 小 芽 孢 杆 菌 渊 Bacillus pumilus 冤 FB04 均 由 华 中 农 业 大 学 发 酵 工 程 研 究 室 保 藏 遥 胡 远 亮 梁 运 祥 ( 通 讯 作 者 ), 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 浙 江 省 重 大 科 技 攻 关 项 目 (2004C12010) 1.2 仪 器 752 紫 外 光 栅 分 光 光 度 计 渊 由 上 海 精 密 科 学 仪 器 有 限 公 司 生 产 冤 尧 HH4 数 显 恒 温 水 浴 锅 渊 由 江 苏 金 坛 市 荣 华 仪 器 制 造 有 限 公 司 生 产 冤 尧 旋 转 蒸 发 仪 渊 由 上 海 亚 荣 生 化 仪 器 厂 生 产 冤 尧 超 声 波 破 碎 仪 渊 由 宁 波 海 曙 金 达 超 声 波 设 备 有 限 公 司 生 产 冤 尧 乌 氏 粘 度 计 ( 由 成 都 科 析 仪 器 成 套 有 限 公 司 生 产 ) 遥 1.3 试 剂 粉 状 壳 聚 糖 院 脱 乙 酰 逸 90 豫 袁 由 国 药 集 团 生 产 遥 壳 聚 糖 胶 体 溶 液 院 在 3g 壳 聚 糖 中 加 入 75 ml 的 1% 醋 酸 溶 液 袁 85 益 水 浴 中 放 置 10 h 至 完 全 溶 解 袁 再 用 1% 醋 酸 定 溶 至 100 ml 袁 4 益 冷 藏 遥 葡 聚 糖 分 子 量 标 样 院 Dextran T10 袁 Mw 渊 分 子 量 冤 = 曰 Dextran T40 袁 Mw= 曰 Dextran T70 袁 Mw= 曰 Dextran T500 袁 Mw= 遥 分 子 量 标 样 均 由 Pharmacia 公 司 提 供 遥 1.4 培 养 基 产 纤 维 素 酶 固 体 培 养 基 院 稻 草 60 g 尧 麸 皮 40 g 尧 KH 2 PO g 尧 CaCl g 尧 MgSO 4 0. g 尧 (NH 4 ) 2 SO g 尧 NaCl 0.1 g 尧 V 水 V 物 料 =1 2.2 尧 吐 温 80 1% 袁 ph 值 自 然 遥 产 甘 露 聚 糖 酶 一 级 种 子 培 养 基 院 胰 蛋 白 胨 10 g/l 尧 酵 母 提 取 物 5g/l 尧 NaCl 5g/l 袁 加 入 2% 魔 芋 精 粉 袁 灭 菌 袁 ph 值 7.4 遥 产 甘 露 聚 糖 酶 二 级 种 子 培 养 基 院 胰 蛋 白 胨 10 g/l 尧 酵 母 提 取 物 5g/l 尧 NaCl 5g/l 袁 加 入 8% 诱 导 物 ( 诱 导 物 制 备 院 在 13% 魔 芋 溶 液 中 加 入 2% 的 甘 露 聚 糖 粗 酶 液 袁 46 益 水 解 1h, 用 无 水 乙 醇 将 其 沉 淀 袁 干 燥 袁 ph 值 7.4) 遥 刚 果 红 麦 芽 汁 CMC 培 养 基 院 麦 芽 提 取 物 30 ml 尧 琼 脂 粉 15g 尧 CMCNa5g 袁 用 蒸 馏 水 定 容 至 1L 袁 121 益 尧 30 min 灭 菌 袁 趁 热 加 入 1ml 刚 果 红 袁 ph 值 5.5 遥 2 试 验 方 法 12

13 酶 制 剂 李 专 等 : 多 酶 交 替 降 解 壳 聚 糖 及 其 酶 解 产 物 分 子 量 分 布 的 研 究 2.1 粘 均 分 子 量 测 定 壳 聚 糖 分 子 量 的 测 定 方 法 有 粘 度 法 尧 蒸 汽 压 渗 透 法 尧 端 基 分 析 法 和 凝 胶 色 谱 法 等 遥 其 中 袁 粘 度 法 是 测 定 高 聚 分 子 量 的 一 种 常 用 方 法 [5] 渊 粘 度 法 测 定 方 法 为 院 将 0.1 mol/l CH 3 COONa 垣 0.2 mol/l CH 3 COOH 缓 冲 液 用 乌 氏 粘 度 计 袁 于 益 时 测 定 降 解 之 前 壳 聚 糖 胶 体 的 分 子 量 袁 外 推 作 图 法 计 算 粘 均 分 子 量 M=106 万 Da) 遥 2.2 纤 维 素 酶 的 发 酵 通 过 用 紫 外 线 和 Co 60 酌 射 线 对 里 氏 木 霉 进 行 复 合 诱 变, 用 CMC 刚 果 红 作 筛 选 培 养 基 袁 筛 选 出 透 明 圈 直 径 与 菌 落 直 径 之 比 大 的 菌 株 袁 接 种 到 产 酶 培 养 基 中 作 进 一 步 复 筛, 选 育 出 纤 维 素 酶 酶 活 较 高 的 菌 株, 接 种 于 固 体 培 养 基 中,30 益 恒 温 培 养, 每 24 h 测 一 次 纤 维 素 酶 酶 活 遥 培 养 4d 时 所 测 得 的 酶 活 为 U/g, 此 时 酶 活 最 高 遥 纤 维 素 酶 酶 活 的 测 定 方 法 参 照 NY/T912 要 2004 遥 2.3 甘 露 聚 糖 酶 的 发 酵 将 短 小 芽 孢 杆 菌 接 入 一 级 种 子 培 养 基 袁 37 益 尧 180 r/min 条 件 下 培 养 48 h, 得 到 甘 露 聚 糖 酶 的 粗 酶 液 遥 将 短 小 芽 孢 杆 菌 接 入 二 级 种 子 培 养 基 袁 34 益 尧 180 r/min 条 件 下 袁 每 12 h 测 一 次 甘 露 聚 糖 酶 酶 活 [6 袁 7], 48h 时 所 测 定 甘 露 聚 糖 酶 活 为 456U/ml, 此 时 酶 活 最 高 遥 2.4 用 不 同 酶 制 剂 降 解 壳 聚 糖 的 比 较 分 别 采 取 不 同 的 处 理 方 式 院 淤 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 加 入 1ml 甘 露 聚 糖 酶 水 解 48 h( 玉 ) 曰 于 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 加 入 1ml 纤 维 素 酶 水 解 48 h( 域 ) 曰 盂 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 加 入 0.5 ml 甘 露 聚 糖 酶 垣 0.5 ml 纤 维 素 酶 水 解 48 h ( 芋 ) 曰 榆 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 先 加 入 0.5 ml 甘 露 聚 糖 酶 水 解 24 h 袁 再 加 入 0.5 ml 纤 维 素 酶 水 解 24 h( 郁 ) 曰 虞 在 10 ml 的 3 豫 胶 体 壳 聚 糖 溶 液 中 先 加 入 0.5 ml 纤 维 素 酶 水 解 24 h 袁 再 加 入 0.5 ml 甘 露 聚 糖 酶 水 解 24 h( 吁 ) 遥 酶 解 温 度 为 50 益 遥 将 酶 解 后 的 产 物 用 超 声 波 处 理 袁 作 用 条 件 为 院 振 幅 39 豫 尧 脉 冲 5s 尧 暂 停 5s 尧 作 用 10 min 袁 6000 r/min 下 离 心 10 min 袁 取 上 清 液 袁 经 Sephadex G100 柱 分 离 遥 2.5 Sephadex G100 柱 对 酶 解 产 物 的 分 离 Sephadex G100 柱 (1 伊 100 cm) 的 分 离 条 件 院 上 样 量 为 1ml 曰 体 积 流 量 为 75 ml/h 尧 2.5 ml/ 管 曰 洗 脱 液 为 ph 值 4.6 的 醋 酸 原 醋 酸 钠 缓 冲 液 曰 Sephadex G100 柱 相 对 分 子 量 标 定 采 用 标 准 分 子 质 量 葡 聚 糖 Dextran10 尧 Dextran40 尧 Dextran70 尧 Dextran500 曰 糖 含 量 采 用 苯 酚 原 硫 酸 法 测 定 [8] 遥 3 结 果 与 讨 论 3.1 相 对 分 子 质 量 标 准 曲 线 由 于 甘 露 聚 糖 酶 和 纤 维 素 酶 对 壳 聚 糖 都 有 降 解 13 作 用 袁 试 验 中 在 相 同 条 件 下 加 入 总 量 相 等 的 酶 液 对 同 一 壳 聚 糖 体 系 进 行 反 应 袁 对 水 解 产 物 进 行 凝 胶 色 谱 柱 分 离 袁 洗 脱 液 分 步 收 集 袁 并 检 测 洗 脱 液 中 的 糖 含 量 袁 以 比 较 各 种 条 件 对 壳 聚 糖 的 降 解 程 度 遥 试 验 中 选 取 Sephadex G100 柱 凝 胶 介 质 进 行 分 离 袁 该 介 质 的 机 械 强 度 较 好 袁 且 可 分 离 5000 耀 分 子 量 范 围 的 多 糖 袁 比 较 适 合 壳 聚 糖 的 分 离 要 求 遥 标 准 分 子 量 葡 聚 糖 在 Sephadex G100 柱 上 的 分 离 曲 线 见 图 1 袁 相 对 分 子 质 量 标 准 曲 线 见 图 2 袁 从 图 2 中 可 以 看 出 相 对 分 子 质 量 曲 线 的 线 性 良 好 遥 Mw Mw Mw Mw 图 1 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 标 准 分 子 量 葡 聚 糖 洗 脱 曲 线 = R 2 = 图 2 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 相 对 分 子 质 量 标 准 曲 线 3.2 原 料 壳 聚 糖 在 Sephadex G100 柱 上 的 相 对 分 子 量 分 布 渊 见 图 3 冤 图 3 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 原 料 壳 聚 糖 相 对 分 子 质 量 分 布 曲 线 由 图 3 中 原 料 壳 聚 糖 的 相 对 分 子 质 量 分 布 曲 线 可 以 看 出 袁 原 料 壳 聚 糖 有 3 个 主 要 的 分 子 量 分 布 峰 袁

14 李 专 等 : 多 酶 交 替 降 解 壳 聚 糖 及 其 酶 解 产 物 分 子 量 分 布 的 研 究 酶 制 剂 第 一 个 峰 的 相 对 分 子 量 分 布 大 于 8.8 伊 10 5 曰 第 二 个 峰 的 相 对 分 子 质 量 分 布 在 4.0 伊 10 5 耀 1.8 伊 10 5 之 间 曰 第 三 个 峰 的 相 对 分 子 质 量 分 布 在 1.1 伊 10 5 以 下 遥 第 一 个 峰 的 峰 面 积 最 大 袁 主 峰 位 置 在 洗 脱 体 积 22.5 ml 处 遥 3.3 酶 解 后 壳 聚 糖 在 Sephadex G100 柱 上 的 相 对 分 子 量 分 布 渊 见 图 4 尧 5 尧 6 尧 7 尧 8 冤 图 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 纤 维 素 酶 先 水 解 24 h 后 甘 露 聚 糖 酶 再 水 解 24 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 吁 ) 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 图 4 甘 露 聚 糖 酶 水 解 48 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 玉 ) 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 图 5 纤 维 素 酶 水 解 48 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 域 ) 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 图 6 甘 露 聚 糖 酶 垣 纤 维 素 酶 水 解 48 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 芋 ) 图 洗 脱 体 积 渊 ml 冤 甘 露 聚 糖 酶 先 水 解 24 h 后 纤 维 素 酶 再 水 解 24 h 的 相 对 分 子 量 分 布 ( 郁 ) 14 由 图 4 可 以 看 出 袁 甘 露 聚 糖 酶 水 解 48 h 渊 玉 冤 后 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 部 分 基 本 降 解 遥 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 82.5 ml 处 遥 通 过 图 2 的 标 准 曲 线 可 计 算 出 相 对 分 子 质 量 分 布 为 1.7 伊 10 3 左 右 袁 降 解 得 率 为 96% 遥 由 图 5 可 以 看 出 袁 纤 维 素 酶 水 解 48 h 渊 域 冤 后 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 部 分 基 本 降 解 遥 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 62.5 ml 处 遥 在 洗 脱 体 积 52.5 ml 处 还 出 现 一 杂 峰 袁 说 明 此 时 壳 聚 糖 分 子 量 组 分 不 纯 遥 相 对 分 子 质 量 分 布 于 1.4 伊 10 4 左 右 袁 降 解 得 率 为 87% 遥 由 图 6 可 以 看 出 袁 甘 露 聚 糖 酶 垣 纤 维 素 酶 水 解 48 h ( 芋 ) 后 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 部 分 基 本 降 解 袁 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 85 ml 处 遥 相 对 分 子 质 量 分 布 于 1.3 伊 10 3 左 右 袁 降 解 得 率 为 92.6% 遥 由 图 7 可 以 看 出 袁 甘 露 聚 糖 酶 先 水 解 24 h 后 袁 纤 维 素 酶 再 水 解 24 h( 郁 ) 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 部 分 基 本 降 解 袁 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 97.5 ml 处 遥 但 在 洗 脱 体 积 为 90 ml 处 出 现 一 个 杂 峰 袁 说 明 此 时 的 壳 聚 糖 的 分 子 量 组 分 不 纯 遥 相 对 分 子 质 量 分 布 于 4.2 伊 10 2 左 右 袁 降 解 得 率 为 91.9% 遥 由 图 8 可 以 看 出 袁 纤 维 素 酶 先 水 解 24 h 后 袁 甘 露 聚 糖 酶 再 水 解 24 h( 吁 ) 袁 壳 聚 糖 底 物 的 高 分 子 基 本 降 解 袁 产 物 的 主 峰 位 置 移 至 到 洗 脱 体 积 85 ml 处 袁 此 时 的 OD 值 最 高 袁 说 明 降 解 程 度 最 好 遥 相 对 分 子 质 量 分 布 于 1.3 伊 10 3 左 右 袁 降 解 得 率 为 91.8% 遥 3.4 分 析 与 讨 论 由 图 4 至 图 8 可 以 看 出 袁 通 过 降 解 后 分 子 量 和 降 解 得 率 的 比 较 袁 可 以 看 出 甘 露 聚 糖 酶 的 降 解 能 力 比 纤 维 素 酶 的 降 解 能 力 要 强 遥 而 且 袁 先 用 纤 维 素 酶 水 解 后 袁 再 加 入 甘 露 聚 糖 酶 水 解 袁 降 解 效 果 最 好 遥 可 能 是 由 于 纤 维 素 酶 是 由 内 切 型 葡 聚 糖 酶 尧 外 切 型 葡 聚 糖 酶

15 酶 制 剂 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 和 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 丁 斌 鹰 侯 永 清 徐 宁 郭 希 柱 张 晓 明 摘 要 试 验 选 用 360 只 21 日 龄 体 重 为 ( 依 2.07) g 的 樱 桃 谷 肉 鸭, 随 机 分 为 4 组, 每 组 3 个 重 复 ( 圈 ), 每 个 重 复 ( 圈 )30 只 鸭 分 为 正 负 对 照 组, 试 验 玉 组 和 试 验 域 组, 分 别 饲 喂 玉 米 豆 粕 型 日 粮 稻 谷 玉 米 豆 粕 型 日 粮 稻 谷 玉 米 豆 粕 型 日 粮 垣 300 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂 和 稻 谷 玉 米 豆 粕 型 日 粮 垣 600 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂, 各 组 日 粮 营 养 水 平 一 致 进 行 了 为 期 14 d 的 饲 养 试 验, 在 试 验 后 期 进 行 了 消 化 试 验 试 验 结 果 表 明 : 在 稻 谷 玉 米 豆 粕 型 肉 鸭 日 粮 中 添 加 300 和 600 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂, 与 正 对 照 组 和 负 对 照 组 相 比, 肉 鸭 平 均 日 增 重 提 高 4.45% 4.30 豫 和 6.01% 4.92 豫, 料 肉 比 降 低 8.14% 和 8.85 豫 11.15%(P<0.05); 与 负 对 照 组 相 比, 粗 蛋 白 的 表 观 利 用 率 分 别 提 高 2.87% 和 2.20%, 总 磷 的 表 观 利 用 率 分 别 提 高 23.23% 和 豫 (P<0.05), 植 酸 磷 的 利 用 率 分 别 提 高 21.62% 和 30.42%(P< 0.01), 粗 纤 维 的 利 用 率 分 别 提 高 32.30% 和 92.68%(P<0.01) 关 键 词 稻 谷 专 用 酶 制 剂 ; 生 长 性 能 ; 营 养 物 质 表 观 利 用 率 ; 肉 鸭 中 图 分 类 号 A 丁 斌 鹰, 武 汉 工 业 学 院 饲 料 科 学 系, 副 教 授,430023, 湖 北 武 汉 汉 口 常 青 花 园 特 一 号 侯 永 清 徐 宁 郭 希 柱 张 晓 明, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 稻 谷 是 我 国 的 主 要 粮 食 作 物, 含 有 丰 富 的 营 养 物 质, 但 较 少 用 于 配 合 饲 料 生 产, 其 原 因 之 一 是 稻 谷 中 存 在 较 多 的 抗 营 养 因 子, 降 低 了 稻 谷 的 有 效 能 值, 阻 碍 了 其 它 营 养 物 质 的 吸 收 和 利 用, 大 大 限 制 了 稻 谷 在 饲 粮 和 纤 维 素 二 糖 酶 组 成 的 多 酶 体 系 袁 经 过 纤 维 素 酶 水 解 参 考 文 献 后 袁 其 内 切 型 葡 聚 糖 酶 使 壳 聚 糖 内 部 的 甘 露 聚 糖 酶 的 作 用 位 点 暴 露 袁 使 其 降 解 效 果 更 好 遥 1 刘 晓, 杜 昱 光, 白 血 芳. 壳 聚 糖 诱 导 小 麦 种 胚 细 胞 抗 脱 氧 化 雪 腐 镰 刀 菌 烯 醇 抑 制 的 效 应 [J]. 植 物 学 报,2001,43(4):370 耀 374 从 凝 胶 柱 测 得 的 底 物 分 子 量 比 粘 度 法 测 得 的 粘 2 严 淑 兰, 陆 大 年. 降 解 壳 聚 糖 用 于 棉 的 抗 皱 整 理 [J]. 染 整 技 术, 均 分 子 量 小 得 多 袁 粘 度 法 和 凝 胶 渗 透 色 谱 法 都 是 基 于 2001,23(3):13 耀 17 3 Chung YS, Lee K K,Kin JW. Durable Press and Antimicrobial 聚 合 物 的 流 体 力 学 体 积 袁 与 分 子 量 尧 链 的 柔 韧 性 及 与 Finshing of Cotton Fabrics with a Critric Acid and Chitosan 溶 剂 的 相 互 作 用 有 关 遥 此 外 袁 由 于 Sephadex G100 柱 Treatment[J]. Tex. Res.,1998,68(10):772 耀 775 的 分 子 量 标 准 曲 线 采 用 的 是 葡 聚 糖 分 子 袁 葡 聚 糖 分 子 结 构 与 壳 聚 糖 的 分 子 结 构 之 间 有 一 定 的 差 异 袁 虽 然 都 4 姚 汝 华. 微 生 物 工 程 工 艺 原 理 [M]. 广 州 : 华 南 理 工 大 学 出 版 社, 耀 唐 振 兴, 石 陆 娥, 易 喻. 壳 聚 糖 及 其 降 解 分 子 量 的 测 定 [J]. 化 工 技 术 是 无 规 律 的 线 性 分 子 袁 但 壳 聚 糖 是 2 氨 基 2 脱 氧 与 开 发,2004,33(6):38 耀 39 茁 D 葡 萄 糖 和 少 量 的 N 乙 酰 氨 基 2 脱 氧 茁 D 葡 6 姚 冬 生, 黄 小 葵, 刘 大 岭, 等.Armillariella tabescens EJLY2098 茁 甘 萄 糖 通 过 茁 1 袁 4 糖 苷 键 连 接 的 直 链 多 聚 糖 袁 葡 聚 糖 是 葡 萄 糖 通 过 琢 1 袁 4 糖 苷 键 连 接 的 直 链 多 糖 袁 两 者 与 露 聚 糖 酶 的 诱 导 纯 化 及 酶 学 性 质 分 析 [J]. 中 国 生 物 工 程 杂 志, 2006,26(7):57 耀 63 Sephadexe G100 柱 的 吸 引 力 不 同 遥 凝 胶 柱 测 得 的 水 解 产 物 分 子 量 分 布 袁 虽 然 不 能 真 实 地 反 映 相 对 分 子 质 量 7 李 剑 芳, 张 静 娟, 邬 敏 辰, 等. 酸 性 茁 甘 露 聚 糖 酶 固 态 发 酵 工 艺 与 粗 酶 性 质 [J]. 食 品 科 学,2006,27(5):143 耀 147 大 小 袁 但 它 们 之 间 的 相 互 比 较 能 说 明 酶 水 解 效 果 遥 8 张 志 军, 刘 建 华, 李 淑 芳, 等. 灵 芝 多 糖 含 量 的 苯 酚 硫 酸 法 检 测 研 究 [J]. 食 品 工 业 科 技,2006,27(2):193 耀 195 本 试 验 是 用 酶 法 阶 梯 降 解 壳 聚 糖 袁 与 单 纯 的 酶 法 降 解 相 比 有 一 定 的 创 新 袁 且 操 作 简 单 袁 易 于 控 制 袁 在 饲 料 尧 食 品 等 工 业 上 有 良 好 的 应 用 前 景 遥 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected]) 15

16 丁 斌 鹰 等 : 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 和 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 酶 制 剂 中 的 应 用 范 围 遥 随 着 酶 制 剂 的 研 究 与 应 用, 为 研 究 稻 谷 在 饲 粮 中 作 为 主 要 能 量 来 源 提 供 了 新 的 思 路 遥 因 此, 设 计 试 验 研 究 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 的 影 响 遥 1 材 料 与 方 法 1.1 试 验 材 料 复 合 酶 制 剂 稻 谷 专 用 酶 制 剂 由 武 汉 工 业 学 院 饲 料 科 学 系 研 制 袁 其 中 含 有 纤 维 素 酶 尧 植 酸 酶 尧 木 聚 糖 酶 和 茁 原 葡 聚 糖 酶 遥 试 验 动 物 由 武 汉 纳 百 川 农 业 有 限 公 司 提 供 的 21 日 龄 尧 体 重 为 渊 依 2.07 冤 g 的 樱 桃 谷 肉 鸭 360 只 遥 试 验 日 粮 试 验 日 粮 分 4 种 袁 均 配 制 成 粉 料 袁 基 础 日 粮 配 方 及 营 养 水 平 见 表 1 遥 表 1 原 料 渊 豫 冤 玉 米 稻 谷 大 豆 粕 米 糠 菜 籽 粕 棉 籽 粕 豆 油 石 粉 磷 酸 氢 钙 盐 蛋 氨 酸 防 霉 剂 预 混 料 正 负 对 照 组 基 础 日 粮 配 方 及 营 养 水 平 正 对 照 组 负 对 照 组 营 养 水 平 代 谢 能 渊 MJ/kg 冤 粗 蛋 白 渊 % 冤 赖 氨 酸 渊 % 冤 蛋 氨 酸 渊 % 冤 钙 渊 % 冤 总 磷 渊 % 冤 注 院 1. 试 验 玉 尧 域 组 的 日 粮 在 负 对 照 组 的 基 础 上 分 别 添 加 稻 谷 专 用 酶 制 剂 300 g/t 和 600 g/t 遥 为 保 证 日 粮 水 平 袁 将 酶 制 剂 添 加 到 预 混 料 中 曰 2. 预 混 料 向 每 千 克 全 价 日 粮 提 供 院 VA 3000 IU 尧 VD IU 尧 VE 20 IU 尧 VB 2 5mg 尧 VB mg 尧 生 物 素 0.1 mg 尧 泛 酸 10 mg 尧 烟 酸 15 mg 尧 Fe 60 mg 尧 Cu 5mg 尧 Mn 10 mg 尧 Zn 80 mg 尧 I0.35 mg 尧 Se 0.15 mg 曰 3. 营 养 水 平 值 为 计 算 值 遥 1.2 试 验 方 法 饲 养 试 验 选 用 360 只 21 日 龄 尧 体 重 为 ( 依 2.07) g 的 樱 桃 谷 肉 鸭, 按 圈 体 重 一 致 的 原 则 随 机 分 为 4 组, 每 组 3 个 重 复 ( 圈 ), 每 个 重 复 ( 圈 )30 只 鸭 遥 分 为 正 对 照 组 尧 负 对 照 组 尧 试 验 玉 组 和 试 验 域 组, 分 别 饲 喂 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 尧 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 尧 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 垣 300 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂 和 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 垣 600 g/t 稻 谷 专 用 酶 制 剂 遥 采 用 圈 内 网 上 平 养, 每 重 复 设 一 个 食 槽 和 一 个 水 槽, 湿 拌 料 袁 自 由 采 食 尧 饮 水, 每 日 早 上 8 点 清 洁 水 槽 一 次 遥 预 饲 期 7d, 正 试 期 14 d 遥 按 照 武 汉 纳 百 川 农 业 有 限 公 司 肉 鸭 养 殖 基 地 的 正 常 饲 养 管 理 和 防 疫 程 序 进 行 饲 养 管 理 遥 试 验 开 始 后, 记 录 鸭 群 的 健 康 状 况 和 每 日 饲 喂 量 曰 饲 养 试 验 结 束 时, 停 止 喂 料 12 h 袁 禁 水 4h 袁 称 重 遥 计 算 平 均 日 增 重 和 料 肉 比 遥 消 化 试 验 在 饲 养 试 验 结 束 前 7d, 每 圈 选 择 体 重 基 本 一 致 的 5 只 肉 鸭 袁 以 三 氧 化 二 铬 为 外 源 指 示 剂 进 行 消 化 试 验 遥 在 饲 粮 中 均 匀 地 拌 入 0.3% 三 氧 化 二 铬, 预 饲 期 7d 袁 收 粪 期 3d 遥 将 粪 样 用 10% 盐 酸 按 体 积 比 5 1 拌 匀 袁 于 原 4 益 下 密 封 保 存 袁 运 回 实 验 室 后 于 (65 依 2) 益 烘 箱 中 鼓 风 干 燥 袁 制 取 风 干 样 品 遥 最 后 将 3d 分 别 制 取 的 粪 样 混 合 均 匀 遥 根 据 试 验 饲 料 及 粪 样 中 指 示 剂 和 营 养 物 质 的 含 量 计 算 养 分 的 表 观 消 化 率 遥 1.3 数 据 统 计 与 分 析 数 据 采 用 SAS8.0 软 件 进 行 方 差 分 析 袁 LSD 法 渊 最 小 显 著 极 差 法 冤 对 数 据 进 行 多 重 比 较 袁 取 琢 越 0.05 遥 表 中 数 据 为 平 均 数 依 标 准 差 遥 2 结 果 与 分 析 2.1 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 的 影 响 ( 见 表 2) 由 表 2 可 见 袁 试 验 玉 尧 域 组 与 正 对 照 组 相 比, 肉 鸭 平 均 日 增 重 分 别 提 高 5.54 豫 和 4.45% 曰 平 均 日 采 食 量 分 别 降 低 了 3.24% 和 6.31% 曰 料 肉 比 分 别 降 低 8.14% 和 10.47%(P<0.05) 遥 因 此 袁 本 试 验 条 件 下, 在 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 ( 含 40 豫 稻 谷 ) 中 添 加 复 合 酶 制 剂 对 肉 鸭 的 饲 养 效 果 优 于 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 遥 项 目 初 始 体 重 渊 g/ 只 冤 末 期 体 重 渊 g/ 只 冤 平 均 日 增 重 渊 g/ 只 冤 平 均 日 采 食 量 渊 g/ 只 冤 料 肉 比 表 2 正 对 照 组 依 依 依 1.67 ab 依 2.53 a 2.58 依 0.02 a 注 院 表 中 同 行 数 据 肩 标 字 母 不 同 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 复 合 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 的 影 响 负 对 照 组 依 依 依 3.08 b 依 1.59 a 2.60 依 0.12 a 16 试 验 玉 组 依 依 依 3.02 a 依 2.81 ab 2.37 依 0.14 b 试 验 域 组 依 依 依 1.58 a 依 4.10 b 2.31 依 0.09 b

17 酶 制 剂 丁 斌 鹰 等 : 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 肉 鸭 生 长 性 能 和 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 试 验 玉 尧 域 组 与 不 添 加 复 合 酶 制 剂 的 负 对 照 组 相 比 袁 其 平 均 日 增 重 分 别 提 高 6.01% 和 4.92% 渊 P<0.05 冤 曰 平 均 日 采 食 量 分 别 降 低 了 3.71% 和 6.76% 曰 料 肉 比 分 别 降 低 8.85% 和 11.15% 渊 P<0.05 冤 遥 试 验 结 果 表 明 袁 添 加 稻 谷 专 用 酶 制 剂 可 以 改 善 采 食 稻 谷 型 日 粮 肉 鸭 的 生 长 性 能 袁 提 高 生 长 速 度 遥 试 验 玉 尧 域 组 的 试 验 数 据 表 明, 在 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 中 添 加 300 g/t 和 600 g/t 的 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 改 善 肉 鸭 的 饲 养 效 果 相 当 袁 在 统 计 学 上 差 异 不 显 著 袁 试 验 玉 组 和 试 验 域 组 都 可 以 获 得 较 好 的 经 济 效 益 遥 因 此 袁 考 虑 生 产 成 本 袁 本 试 验 条 件 下 的 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 日 粮 只 需 要 添 加 300 g/t 的 稻 谷 专 用 酶 制 剂 就 能 达 到 较 好 的 促 生 长 效 果 遥 2.2 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 饲 料 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 渊 见 表 3 冤 表 3 稻 谷 专 用 酶 制 剂 对 饲 料 营 养 物 质 利 用 率 的 影 响 (%) 项 目 粗 蛋 白 表 观 利 用 率 总 磷 表 观 利 用 率 植 酸 磷 利 用 率 粗 纤 维 利 用 率 负 对 照 组 依 依 0.55 c 依 0.26 Bc 依 3.12 Cc 试 验 玉 组 依 依 0.81 a 依 0.59 Aa 依 2. Bb 试 验 域 组 依 依 0.48 b 依 0.26 Ab 依 1.39 Aa 注 院 表 中 同 行 数 据 肩 标 小 写 字 母 不 同 表 示 差 异 显 著 (P<0.05) 曰 大 写 字 母 不 同 表 示 差 异 极 显 著 (P<0.01) 遥 由 表 3 可 见 袁 试 验 玉 组 和 试 验 域 组 明 显 改 善 了 肉 鸭 对 稻 谷 的 利 用 能 力 遥 与 负 对 照 组 相 比 袁 粗 蛋 白 的 表 观 利 用 率 分 别 提 高 2.87% 和 2.20% 曰 总 磷 的 表 观 利 用 率 分 别 提 高 23.23% 和 13.89(P<0.05) 曰 植 酸 磷 的 利 用 率 分 别 提 高 21.62% 和 30.42% 渊 P<0.01 冤 曰 粗 纤 维 的 利 用 率 分 别 提 高 32.30% 和 92.68% 渊 P<0.01 冤 遥 3 讨 论 稻 谷 与 玉 米 相 比 袁 具 有 潜 在 的 营 养 价 值 袁 但 其 饲 用 效 果 较 差 袁 究 其 原 因 是 稻 谷 中 的 抗 营 养 因 子 含 量 高 袁 尤 其 是 其 中 所 含 的 木 质 素 尧 纤 维 素 尧 果 胶 尧 阿 拉 伯 木 聚 糖 和 茁 原 葡 聚 糖 等 的 抗 营 养 作 用 极 大 地 限 制 了 稻 谷 的 饲 用 价 值 遥 Choct 渊 1990 冤 [1] 尧 李 明 荃 渊 1996) [2] 尧 陈 旭 东 (2001) [3] 的 报 道 表 明 袁 在 家 禽 日 粮 中 添 加 单 一 或 复 合 酶 制 剂 至 少 通 过 3 种 途 径 来 改 善 家 禽 小 肠 中 营 养 物 质 的 消 化 和 吸 收 袁 达 到 促 进 动 物 生 长 和 提 高 饲 料 转 化 率 的 目 的 院 淤 增 加 非 淀 粉 多 糖 的 降 解 速 度 而 降 低 小 肠 内 容 物 的 粘 度 曰 于 破 碎 细 胞 壁 尧 促 进 由 细 胞 壁 包 裹 着 的 蛋 白 质 和 脂 肪 的 释 放 袁 有 利 于 肠 道 内 的 消 化 酶 对 营 养 物 质 的 充 分 接 触 曰 盂 消 除 可 溶 性 非 淀 粉 多 糖 对 内 源 性 消 化 酶 的 抑 制 作 用 等 遥 本 试 验 结 果 再 次 证 实 了 上 述 结 果 袁 说 明 在 纤 维 含 量 较 高 的 日 粮 中 添 加 复 合 酶 制 剂 袁 17 有 助 于 提 高 肉 鸭 的 消 化 机 能 袁 改 善 其 生 长 性 能 遥 张 堂 田 等 (1999) [4] 报 道 袁 日 粮 中 添 加 0.5% 木 聚 糖 酶 尧 0.5% 纤 维 素 酶 和 0.1% 茁 原 葡 聚 糖 酶 袁 能 显 著 提 高 樱 桃 谷 肉 鸭 的 日 增 重 和 饲 料 转 化 率 (P<0.05) 遥 高 树 冬 等 渊 2001 冤 [5] 在 稻 谷 日 粮 中 添 加 复 合 酶 制 剂 袁 肉 鸭 饲 料 转 化 率 提 高 2.26% 耀 4.53% 遥 上 述 报 道 与 本 试 验 研 究 结 果 基 本 一 致 遥 目 前 有 较 多 的 文 献 报 道 单 一 酶 和 2 种 或 3 种 酶 的 组 合 对 家 禽 采 食 麦 类 日 粮 的 效 果 袁 而 很 少 见 到 类 似 本 试 验 研 究 的 纤 维 素 酶 尧 植 酸 酶 尧 木 聚 糖 酶 和 葡 聚 糖 酶 4 种 酶 的 组 合 对 肉 鸭 采 食 稻 谷 型 日 粮 的 饲 喂 效 果 袁 因 此 袁 关 于 多 酶 的 复 合 效 应 还 需 要 进 一 步 有 针 对 性 的 研 究 和 探 讨 遥 4 小 结 在 稻 谷 要 玉 米 要 豆 粕 型 肉 鸭 日 粮 ( 含 40% 稻 谷 ) 中 添 加 稻 谷 专 用 酶 制 剂 袁 可 显 著 提 高 肉 鸭 平 均 日 增 重, 降 低 料 肉 比 渊 P<0.05 冤 曰 可 提 高 粗 蛋 白 的 表 观 利 用 率 袁 显 著 提 高 总 磷 表 观 利 用 率 渊 P<0.05 冤 尧 极 显 著 提 高 植 酸 磷 和 粗 纤 维 的 利 用 率 渊 P<0.01 冤 遥 参 考 文 献 1 Choct Mannison G. Antinutritiveactivity of wheat pentosans in broiler diets [J]. Brit. Poultry Sci., 1990(30):811 耀 李 明 荃 译. 肠 内 容 物 粘 度 和 肉 鸡 性 能 [J]. 国 外 畜 牧 学 猪 与 禽, 1996(4):4 耀 7 3 陈 旭 东. 非 淀 粉 多 糖 的 抗 营 养 作 用 [J]. 当 代 畜 牧,2001(6):40 4 张 堂 田, 孟 秀 丽, 王 时 昌. 酶 制 剂 对 樱 桃 谷 肉 鸭 生 产 性 能 的 影 响 [J]. 安 徽 农 业 科 学,1999,27(4):403 耀 高 树 冬, 马 健, 尤 佩 华, 等. 酶 制 剂 在 肉 鸭 日 粮 中 的 应 用 [J]. 兽 药 与 饲 料 添 加 剂,2001(6):8 耀 9 窑 信 息 采 撷 窑 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected]) 波 兰 发 现 胶 原 质 可 保 持 肉 类 营 养 波 兰 农 业 大 学 的 研 究 人 员 发 现, 往 肉 里 注 射 胶 原 质 可 保 持 肉 类 营 养, 抑 制 碘 和 维 生 素 B 1 的 流 失 肉 制 品 在 储 存 和 烹 饪 时, 可 能 失 去 一 定 量 的 碘 和 维 生 素 B 1 SCI 的 农 业 食 品 科 学 杂 志 报 道, 通 过 增 加 胶 原 纤 维 和 胶 原 质 水 解 产 物 可 以 使 肉 里 的 碘 化 钾 得 到 饱 和, 这 种 方 法 比 使 用 精 制 碘 盐 的 方 法 更 加 有 效 胶 原 质 能 使 鲜 肉 保 持 一 定 的 营 养, 它 也 适 合 冷 冻 储 存 的 肉 类 在 研 究 中, 胶 原 质 被 加 入 到 肉 球 里, 充 当 碘 盐 的 作 用 在 储 存 和 烹 饪 这 些 肉 球 的 时 候, 对 碘 和 维 生 素 B 1 的 含 量 水 平 进 行 测 量, 结 果 显 示, 它 们 都 被 保 存 在 肉 里

18 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 酶 制 剂 酶 制 剂 在 水 产 动 物 饲 料 中 的 应 用 明 建 华 酶 是 活 细 胞 产 生 的 具 有 特 殊 生 物 催 化 功 能 的 生 物 大 分 子 物 质 渊 蛋 白 质 或 RNA 冤 袁 它 广 泛 分 布 于 动 物 尧 植 物 和 微 生 物 体 内 袁 参 与 机 体 的 各 种 生 化 反 应 遥 酶 制 剂 是 一 种 以 酶 为 主 要 功 能 因 子 袁 通 过 特 定 生 产 工 艺 加 工 而 成 的 饲 料 添 加 剂 遥 目 前 袁 酶 制 剂 的 研 究 主 要 集 中 在 外 源 酶 在 畜 禽 饲 料 中 的 应 用 袁 大 部 分 是 关 于 酶 制 剂 作 用 效 果 的 研 究 遥 酶 制 剂 在 水 产 饲 料 中 的 应 用 还 处 在 摸 索 阶 段 袁 本 文 就 酶 制 剂 在 水 产 饲 料 中 的 合 理 应 用 进 行 了 综 述 遥 可 弥 补 内 源 性 蛋 白 酶 的 不 足 渊 特 别 是 幼 体 冤 袁 提 高 蛋 白 质 吸 收 率 10% 左 右 袁 可 起 到 节 约 蛋 白 质 的 目 的 遥 糖 类 物 质 是 廉 价 的 饲 料 原 料 袁 尽 管 水 产 动 物 对 淀 粉 的 消 化 吸 收 率 很 低 袁 但 为 了 保 证 其 安 全 性 和 降 低 成 本 袁 在 饲 料 中 的 添 加 量 仍 达 到 20%~50% 遥 加 入 淀 粉 酶 和 糖 化 酶 后 袁 可 以 补 充 水 产 动 物 严 重 缺 乏 的 淀 粉 酶 袁 将 淀 粉 的 消 化 吸 收 率 从 20%~40% 提 高 到 80% 以 上 袁 从 而 起 到 增 加 饲 料 能 量 尧 提 高 饲 料 利 用 率 尧 减 少 蛋 白 质 作 为 能 量 消 耗 的 作 用 袁 进 而 达 到 降 低 饲 料 成 本 的 目 的 遥 因 此 袁 1 酶 制 剂 在 水 产 饲 料 中 的 应 用 外 源 性 消 化 酶 对 水 产 动 物 来 说 非 常 重 要 遥 外 源 性 消 化 1.1 直 接 分 解 营 养 底 物 袁 提 高 代 谢 水 平 袁 降 低 饵 料 系 酶 还 可 刺 激 水 产 动 物 内 源 性 消 化 酶 的 更 多 分 泌 袁 并 提 数 具 有 生 物 活 性 的 酶 制 剂 袁 能 有 效 地 将 饲 料 中 一 些 高 食 糜 中 内 源 性 消 化 酶 的 活 性 袁 加 速 营 养 物 质 的 消 化 和 吸 收 袁 从 而 提 高 饲 料 的 利 用 率 遥 乔 秀 亭 等 渊 2002 冤 研 大 分 子 多 聚 体 分 解 和 消 化 成 水 产 动 物 容 易 吸 收 的 营 养 物 质 或 分 解 成 小 片 段 营 养 物 质 袁 供 其 它 消 化 酶 进 一 步 消 化 袁 一 些 水 产 动 物 本 身 难 以 分 解 和 吸 收 的 大 分 子 物 质 袁 通 过 添 加 酶 制 剂 促 进 饲 料 中 营 养 物 质 的 分 解 和 消 化 袁 提 高 饲 料 的 利 用 率 遥 在 草 鱼 饲 料 中 添 加 0.1% 酶 制 剂 袁 试 验 组 草 鱼 的 生 长 速 度 比 对 照 组 提 高 了 6.6% 袁 饵 料 系 数 降 低 了 0.29 曰 试 验 组 的 鱼 体 粗 蛋 白 质 含 量 比 究 了 酶 制 剂 对 鲤 鱼 消 化 酶 活 性 的 影 响 袁 添 加 复 合 酶 制 剂 后 袁 各 试 验 组 肠 道 和 肝 胰 脏 的 蛋 白 酶 与 淀 粉 酶 活 性 均 比 对 照 组 有 所 提 高 袁 减 少 了 蛋 白 质 作 为 能 量 的 消 耗 袁 起 到 间 接 节 约 蛋 白 质 的 作 用 遥 仲 军 等 渊 1995 冤 关 于 对 虾 的 试 验 表 明 袁 外 源 酶 系 可 以 通 过 对 动 物 自 身 内 源 酶 原 的 激 活 袁 增 强 内 源 酶 的 作 用 袁 促 进 肝 胰 脏 的 消 化 作 用 袁 提 高 饲 料 的 总 消 化 率 和 蛋 白 质 消 化 率 遥 对 照 组 略 高 袁 而 粗 脂 肪 略 低 曰 试 验 组 的 每 千 克 鱼 饲 料 成 本 比 对 照 组 降 低 8.93% 遥 该 酶 制 剂 使 草 鱼 对 无 机 盐 1.3 消 除 饲 料 中 的 抗 营 养 因 子 袁 改 善 消 化 机 能 配 合 饲 料 中 含 有 的 植 物 性 原 料 常 存 在 一 些 非 淀 转 化 利 用 率 提 高 袁 对 各 种 营 养 物 质 的 吸 收 均 衡 有 效 袁 表 明 该 酶 制 剂 能 促 进 鱼 体 内 各 种 生 化 反 应 袁 提 高 鱼 体 内 蛋 白 质 转 化 率 遥 粉 多 糖 尧 果 胶 尧 纤 维 素 聚 合 物 袁 对 水 产 动 物 的 消 化 吸 收 存 在 一 定 的 抗 营 养 作 用 遥 它 们 在 肠 道 中 部 分 溶 解 袁 从 而 使 食 糜 粘 度 增 大 袁 导 致 养 分 溶 出 速 度 减 缓 袁 养 分 和 1.2 补 充 外 源 消 化 酶 袁 激 活 内 源 消 化 酶 分 泌 袁 提 高 饲 内 源 消 化 酶 扩 散 速 度 减 慢 袁 肠 道 机 械 混 合 食 糜 的 能 力 料 利 用 率 在 畜 禽 饲 料 中 添 加 外 源 酶 对 动 物 内 源 酶 活 性 影 响 的 研 究 较 多 遥 奚 刚 等 渊 1999 冤 在 猪 尧 鸡 饲 料 中 添 加 外 源 酶 的 试 验 结 果 表 明 袁 外 源 酶 能 促 进 内 源 消 化 酶 分 泌 袁 提 高 饲 料 利 用 率 遥 水 产 动 物 消 化 系 统 不 如 畜 禽 完 善 袁 内 源 酶 分 泌 不 如 畜 禽 完 全 遥 鱼 类 消 化 道 中 不 含 木 聚 糖 酶 和 纤 维 素 酶 袁 而 淀 粉 酶 的 活 性 也 很 低 遥 尽 管 鱼 虾 对 蛋 白 质 有 较 高 的 消 化 吸 收 率 袁 但 内 源 蛋 白 酶 还 不 能 完 全 发 挥 作 用 袁 加 入 外 源 性 蛋 白 酶 后 袁 减 弱 袁 饲 料 消 化 率 降 低 遥 同 时 袁 可 溶 性 非 淀 粉 多 糖 还 可 使 肠 粘 膜 表 面 不 动 水 层 增 厚 袁 致 使 营 养 物 质 扩 散 受 阻 袁 影 响 水 产 动 物 对 有 效 营 养 成 分 的 消 化 和 吸 收 遥 此 外 袁 粪 便 排 出 量 因 未 消 化 物 质 的 增 多 而 增 加 袁 还 会 导 致 动 物 胃 肠 道 中 微 生 物 繁 殖 增 多 袁 并 对 水 产 品 品 质 造 成 不 良 影 响 遥 酶 制 剂 中 的 多 种 酶 袁 特 别 是 茁 葡 聚 糖 酶 尧 果 糖 酶 和 纤 维 素 酶 能 将 这 些 物 质 分 解 为 小 分 子 物 质 袁 从 而 降 低 消 化 道 中 物 质 的 粘 度 袁 促 进 动 物 肠 道 的 蠕 动 袁 有 效 地 消 除 这 些 抗 营 养 因 子 的 不 良 影 响 袁 改 善 水 产 动 物 的 消 化 机 能 遥 如 纤 维 素 酶 由 葡 聚 糖 外 切 酶 尧 葡 聚 糖 内 切 酶 以 及 茁 葡 聚 糖 苷 酶 3 种 具 有 高 度 协 同 作 明 建 华, 南 京 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院, 工 程 师,210095, 江 苏 省 南 京 卫 岗 1 号 收 稿 日 期 : 用 的 酶 共 同 组 成 袁 它 能 将 菜 籽 饼 尧 棉 籽 粕 尧 豆 粕 中 的 植 物 纤 维 分 解 成 葡 萄 糖 袁 破 坏 植 物 细 胞 壁 袁 释 放 内 容 物 袁 从 而 综 合 提 高 饲 料 利 用 率 遥 余 丰 年 等 渊 2001 冤 在 以 豆 18

19 酶 制 剂 明 建 华 : 酶 制 剂 在 水 产 动 物 饲 料 中 的 应 用 饼 尧 菜 籽 饼 为 主 的 饲 料 中 添 加 2400 U/kg 纤 维 素 酶 饲 喂 团 头 鲂 袁 提 高 了 鱼 体 对 饲 料 营 养 物 质 的 利 用 率 遥 周 小 秋 等 渊 2001 冤 在 含 豆 粕 尧 菜 粕 尧 棉 仁 粕 为 主 的 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 袁 提 高 了 饲 料 利 用 率 袁 降 低 了 鲤 鱼 消 化 道 食 糜 的 粘 度 袁 有 利 于 营 养 物 质 的 吸 收 利 用 遥 另 外 袁 豆 粕 等 饼 粕 类 饲 料 中 含 有 多 种 抗 营 养 因 子 袁 如 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 尧 植 物 凝 集 素 和 琢 半 乳 糖 苷 等 遥 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 和 小 肠 液 中 胰 蛋 白 酶 结 合 袁 生 成 无 活 性 的 复 合 物 袁 降 低 胰 蛋 白 酶 的 活 性 袁 导 致 饲 料 蛋 白 质 消 化 率 下 降 遥 同 时 袁 由 于 和 胰 蛋 白 酶 结 合 袁 动 物 体 内 蛋 白 质 内 源 性 消 耗 袁 造 成 体 内 含 硫 氨 基 酸 丢 失 袁 加 剧 了 由 于 豆 粕 中 含 硫 氨 基 酸 短 缺 引 起 的 动 物 体 内 代 谢 紊 乱 袁 导 致 生 长 受 阻 或 停 滞 遥 杨 丽 杰 等 渊 2000 冤 报 道 袁 外 源 蛋 白 酶 可 在 常 温 下 使 大 豆 中 的 抗 营 养 因 子 失 活 袁 提 高 其 利 用 率 遥 在 豆 科 饲 料 中 添 加 琢 半 乳 糖 苷 酶 袁 可 增 加 豆 科 饲 料 中 低 聚 糖 的 消 化, 减 轻 或 消 除 消 化 紊 乱 遥 究 袁 无 胃 鱼 对 植 酸 磷 的 平 均 消 化 率 为 8% 袁 有 胃 鱼 稍 高 袁 如 虹 鳟 为 19% 遥 因 此 袁 有 大 量 的 植 酸 磷 被 浪 费 袁 不 仅 使 吸 收 的 磷 不 足 袁 而 且 需 补 充 无 机 磷 袁 从 而 造 成 水 环 境 污 染 遥 近 年 来 袁 许 多 研 究 表 明, 在 水 产 动 物 饲 料 中 添 加 植 酸 酶 可 大 大 降 低 排 泄 物 中 磷 和 其 它 营 养 素 的 浓 度 袁 减 少 对 水 体 的 污 染 袁 改 善 饲 养 环 境 遥 一 般 认 为 袁 添 加 植 酸 酶 可 使 磷 的 利 用 率 提 高 20%~ 50% 遥 Riche 等 渊 1996 冤 在 虹 鳟 饲 料 中 添 加 1000 U/kg 的 植 酸 酶 袁 结 果 可 使 豆 粕 中 磷 的 利 用 率 从 % 增 加 到 57% 袁 提 高 了 128% 遥 Sugiura SH 等 渊 2001 冤 报 道 院 在 以 大 豆 粉 为 基 础 原 料 的 虹 鳟 饲 料 中 添 加 植 酸 酶 袁 鱼 类 消 耗 1kg 饲 料 袁 在 其 粪 便 中 磷 的 排 泄 量 为 0 援 32 g 袁 比 投 喂 商 品 鱼 饲 料 磷 的 排 泄 量 减 少 了 95 豫 ~98 豫 遥 曾 虹 等 渊 2001 冤 在 饼 粕 质 量 分 数 为 5.0% 的 鲤 鱼 饲 料 中 添 加 1000 U/g 的 中 性 植 酸 磷 袁 可 以 将 鲤 鱼 对 饲 料 的 磷 利 用 率 提 高 41%~59.4% 袁 单 位 增 重 的 磷 排 泄 降 低 32.0% 遥 在 实 践 中 袁 可 以 预 先 用 植 酸 酶 处 理 饲 料 遥 余 丰 年 等 渊 2000 冤 先 1.4 提 高 免 疫 抵 抗 力 袁 增 进 水 产 动 物 健 康 在 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 可 促 使 机 体 内 多 种 激 素 水 在 体 外 将 豆 粕 用 植 酸 酶 进 行 处 理 袁 再 加 入 到 其 余 的 饲 料 原 料 中 袁 充 分 混 合 后 进 行 分 析 袁 结 果 表 明 袁 在 异 育 银 平 升 高, 从 而 影 响 淋 巴 细 胞 和 巨 噬 细 胞 的 作 用 机 能 遥 酶 制 剂 还 可 使 饲 料 中 的 多 糖 降 解 产 生 寡 聚 糖 及 其 衍 生 物 遥 有 的 寡 糖 袁 如 甘 露 寡 糖 袁 除 具 有 防 止 致 病 菌 在 肠 道 鲫 体 外 袁 植 酸 磷 就 已 经 在 植 酸 酶 的 作 用 下 发 生 了 有 效 的 降 解 袁 添 加 植 酸 酶 促 进 了 异 育 银 鲫 对 饲 料 中 营 养 物 质 的 吸 收 袁 提 高 了 增 重 率 遥 上 聚 集 尧 减 轻 病 原 菌 对 机 体 的 毒 害 作 用 外 袁 还 参 与 免 2 水 产 动 物 饲 料 中 应 用 酶 制 剂 的 研 究 疫 调 节 袁 提 高 免 疫 能 力 遥 另 外, 营 养 物 质 是 动 物 机 体 产 生 免 疫 的 决 定 因 素 之 一 袁 营 养 对 细 胞 免 疫 尧 体 液 免 疫 尧 2.1 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 的 研 制 目 前 袁 国 内 外 对 植 酸 酶 的 研 究 报 道 袁 在 畜 禽 方 面 补 体 功 能 和 白 细 胞 吞 噬 作 用 都 产 生 极 大 影 响 遥 添 加 酶 制 剂 可 使 更 多 的 养 分 释 放 出 来, 从 而 加 强 机 体 免 疫 力 遥 刘 文 斌 等 渊 1997 冤 对 中 华 鳖 做 了 添 加 酶 制 剂 的 试 验 袁 3 个 试 验 组 的 酶 制 剂 含 量 分 别 为 0.1% 尧 0.2% 和 0.3% 曰 结 果 表 明 袁 3 个 试 验 组 均 比 对 照 组 成 活 率 高 袁 且 随 酶 制 剂 添 加 量 的 增 加 而 升 高 袁 说 明 酶 制 剂 可 增 强 鳖 体 质 袁 提 高 抗 病 力 遥 分 析 原 因 可 能 是 酶 制 剂 中 含 有 酶 类 和 其 它 活 性 物 质 袁 能 分 解 动 物 体 内 的 有 害 物 质 袁 催 化 有 害 物 质 变 为 无 害 物 质, 从 而 增 强 体 质, 提 高 成 活 率 遥 周 嗣 泉 等 渊 2000 冤 在 鳖 饲 料 中 添 加 了 酶 制 剂 袁 结 果 提 高 了 鳖 的 成 活 率 袁 尤 其 是 幼 鳖 最 为 明 显 袁 说 明 酶 制 剂 有 增 强 鳖 抗 病 力 的 作 用 遥 较 多 袁 也 比 较 深 入 袁 生 产 的 植 酸 酶 多 为 适 应 畜 禽 消 化 道 特 点 的 尧 最 适 ph 值 在 酸 性 范 围 的 植 酸 酶 遥 因 此 袁 畜 禽 饲 料 中 添 加 的 酶 制 剂 应 以 木 聚 糖 酶 尧 茁 葡 聚 糖 酶 尧 纤 维 素 酶 尧 淀 粉 酶 作 为 主 要 酶 系 袁 而 以 酸 性 蛋 白 酶 尧 脂 肪 酶 等 作 为 小 酶 系 遥 水 产 动 物 消 化 系 统 不 如 畜 禽 完 善 袁 大 部 分 养 殖 鱼 类 无 胃 袁 只 有 消 化 道 袁 并 且 消 化 道 相 对 于 畜 禽 很 短 袁 ph 值 一 般 呈 中 性 或 微 碱 性 袁 因 此 袁 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 应 以 中 性 或 碱 性 蛋 白 酶 尧 淀 粉 酶 尧 糖 化 酶 为 主 袁 酸 性 蛋 白 酶 尧 脂 肪 酶 尧 木 聚 糖 酶 尧 茁 葡 聚 糖 酶 尧 纤 维 素 酶 为 辅 的 复 合 酶 制 剂 遥 另 外 袁 根 据 水 产 动 物 品 种 尧 年 龄 尧 食 性 尧 生 理 消 化 特 点 和 饲 料 特 异 性 等 具 体 条 件 研 制 与 之 相 适 应 的 专 用 复 合 酶 制 剂 遥 不 同 食 性 的 1.5 促 进 植 酸 磷 的 消 化 吸 收 袁 减 轻 环 境 污 染 在 含 有 豆 饼 尧 菜 籽 粕 等 植 物 性 原 料 的 水 产 动 物 饲 鱼 类 其 消 化 道 内 消 化 酶 的 组 成 也 不 同 袁 内 源 性 消 化 酶 中 淀 粉 酶 的 活 性 由 高 到 低 的 顺 序 是 草 食 性 尧 杂 食 性 尧 料 中 袁 植 酸 盐 的 含 量 约 占 3% 左 右 袁 其 中 植 酸 磷 约 占 饲 料 总 磷 量 的 60%~80% 遥 特 别 是 植 酸 (phytate) 的 存 在 袁 不 仅 使 植 酸 磷 无 法 利 用 袁 而 且 还 能 与 钙 尧 镁 尧 氨 基 酸 和 淀 粉 等 形 成 稳 定 的 络 合 物 袁 难 于 消 化 遥 另 外 袁 鱼 类 的 消 化 道 短 袁 食 物 在 其 中 的 停 留 时 间 也 短 袁 消 化 不 完 全 遥 据 研 肉 食 性 鱼 类 遥 不 同 的 生 长 阶 段 袁 对 于 饲 用 酶 的 需 求 也 存 在 一 定 的 差 异 袁 幼 体 消 化 系 统 发 育 不 完 善 袁 内 源 性 消 化 酶 分 泌 不 足 袁 在 饲 料 中 添 加 外 源 性 消 化 酶 袁 可 以 促 进 水 产 动 物 对 食 物 中 蛋 白 质 尧 脂 肪 和 淀 粉 的 消 化 袁 提 高 生 长 率 遥 19

20 明 建 华 : 酶 制 剂 在 水 产 动 物 饲 料 中 的 应 用 酶 制 剂 2.2 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 的 定 量 研 究 相 对 畜 禽 饲 用 酶 制 剂 来 说 袁 酶 制 剂 在 水 产 动 物 中 多 数 精 酶 产 品 为 胞 外 酶 袁 储 存 时 间 不 超 过 1 年 袁 1 年 后 酶 活 不 足 20% 遥 的 应 用 研 究 不 多 袁 且 大 部 分 停 留 在 定 性 方 面 袁 即 添 加 酶 制 剂 对 水 产 动 物 有 无 促 生 长 作 用 袁 能 否 提 高 饲 料 利 水 中 稳 定 性 酶 制 剂 应 能 在 水 中 保 持 较 长 时 间 而 不 溶 失 遥 用 率 袁 降 低 饵 料 系 数 袁 减 少 磷 排 出 袁 而 对 酶 制 剂 的 定 量 研 究 较 少 遥 定 量 研 究 很 重 要 袁 所 有 酶 制 剂 都 有 一 定 适 2.4 注 重 酶 制 剂 作 用 机 理 研 究 袁 提 高 酶 活 目 前 对 酶 制 剂 的 作 用 机 理 还 不 是 特 别 清 楚 袁 应 该 宜 添 加 范 围 袁 只 有 在 其 适 宜 添 加 范 围 内 才 能 使 生 长 达 到 最 佳 状 态 袁 过 低 过 高 效 果 都 不 好 遥 刘 文 斌 等 (1997) 报 道 袁 在 幼 鳖 饲 料 中 分 别 添 加 0.1% 尧 0.2% 尧 0.3% 的 国 产 复 合 酶 制 剂 袁 观 测 其 生 长 效 果 遥 试 验 结 果 表 明 院 添 加 量 为 0.1% 袁 其 养 殖 效 果 最 好 袁 增 重 率 比 对 照 组 提 高 75% 袁 饵 料 系 数 降 低 14.5% 曰 其 次 为 添 加 量 为 0.2% 袁 增 重 率 比 对 照 组 提 高 20% 袁 饵 料 系 数 降 低 5.9% 曰 添 加 量 0.3% 袁 其 养 殖 效 果 还 不 如 对 照 组 遥 这 与 刘 文 斌 等 (1999) 对 异 育 银 鲫 的 试 验 结 果 一 致 袁 0.75% 的 酶 制 剂 添 加 量 比 0.5% 和 1% 的 添 加 效 果 均 好 遥 分 析 其 原 因 可 能 是 院 淤 外 源 酶 添 加 量 过 高, 可 能 会 抑 制 内 源 酶 分 泌 袁 内 源 酶 分 泌 深 入 研 究 酶 制 剂 对 水 产 动 物 生 理 和 内 分 泌 的 影 响 遥 饲 料 中 添 加 酶 制 剂 袁 与 一 般 酶 的 应 用 方 法 不 同 遥 因 酶 反 应 与 水 产 动 物 体 内 存 在 的 酶 系 有 关 袁 反 应 极 为 复 杂 袁 添 加 哪 种 酶 袁 加 入 多 少 袁 随 不 同 的 水 产 动 物 尧 不 同 的 原 料 种 类 及 其 配 比 而 有 不 同 的 要 求 遥 因 此 袁 应 重 视 应 用 试 验 袁 通 过 试 验 来 决 定 添 加 酶 的 品 种 和 酶 活 数 量 遥 相 对 国 外 酶 制 剂 的 活 性 来 说 袁 国 产 酶 制 剂 的 活 性 还 很 低 遥 酶 制 剂 活 性 的 提 高 袁 关 键 靠 技 术 进 步 袁 要 提 高 发 酵 工 艺 袁 通 过 基 因 工 程 选 择 合 适 菌 种 遥 酶 产 品 活 性 的 大 幅 度 提 高 袁 必 将 会 降 低 成 本 袁 从 而 促 进 酶 制 剂 在 我 国 大 规 模 的 推 广 与 应 用 遥 量 减 少, 影 响 对 饲 料 营 养 成 分 的 消 化 吸 收 率 曰 于 外 源 酶 添 加 量 过 高, 降 低 食 糜 的 粘 度, 缩 短 食 糜 在 肠 道 中 的 滞 2.5 规 范 酶 活 定 义 和 统 一 酶 制 剂 测 定 标 准 酶 制 剂 活 性 测 定 是 评 价 酶 作 用 的 一 个 重 要 指 标 袁 留 时 间, 加 快 营 养 成 分 的 流 失, 减 少 动 物 对 营 养 物 质 的 消 化 吸 收, 使 其 生 产 性 能 下 降 遥 周 小 秋 等 (2001) 在 鲤 鱼 饵 料 中 添 加 酶 制 剂, 结 果 表 明, 在 日 粮 中 添 加 500 g/t 的 酶 制 剂 可 显 著 提 高 鲤 鱼 生 长 速 度 和 饵 料 利 用 率, 但 添 加 量 超 过 700 g/t 时 袁 鲤 鱼 的 生 长 速 度 和 饵 料 利 用 率 显 著 下 降 遥 韩 庆 等 (2002) 对 黄 颡 鱼 的 试 验 表 明, 在 日 粮 中 添 加 0.15% 酶 制 剂 的 效 果 好 于 添 加 0.1% 和 0.% 的 遥 但 目 前 大 部 分 酶 制 剂 的 检 测 都 没 有 统 一 的 国 家 标 准 遥 酶 活 定 义 混 乱 袁 各 个 生 产 厂 家 提 出 的 酶 活 定 义 都 有 差 异 袁 有 的 释 放 底 物 以 纳 克 计 袁 有 的 以 微 克 计 袁 同 样 效 率 的 酶 制 剂 可 能 标 识 相 差 几 百 倍 袁 在 实 际 应 用 中 难 以 辨 别 酶 制 剂 的 优 劣 遥 酶 制 剂 活 性 测 定 没 有 统 一 的 标 准 袁 不 利 于 学 术 交 流 和 开 展 研 究 袁 限 制 了 酶 制 剂 的 开 发 与 应 用 遥 另 外 袁 在 体 外 酶 活 性 的 测 定 不 能 完 全 反 映 水 产 2.3 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 稳 定 性 研 究 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 的 稳 定 性 主 要 包 括 3 方 面 袁 动 物 体 内 酶 的 真 实 活 性 袁 因 为 影 响 酶 制 剂 活 性 因 素 很 多 袁 诸 如 反 应 的 底 物 尧 温 度 尧 ph 值 等 遥 因 此 袁 规 范 酶 活 定 即 热 稳 定 性 尧 储 存 稳 定 性 和 水 中 稳 定 性 遥 义 和 统 一 酶 制 剂 测 定 标 准 对 于 开 发 饲 用 酶 制 剂 是 相 热 稳 定 性 渊 即 耐 高 温 冤 当 重 要 的 遥 酶 是 一 种 具 有 生 物 活 性 的 蛋 白 质, 和 其 它 蛋 白 质 一 样 对 温 度 很 敏 感 遥 一 般 饲 用 酶 的 适 宜 温 度 为 35~40 益 遥 3 水 产 动 物 饲 用 酶 制 剂 的 发 展 前 景 随 着 水 产 饲 料 业 的 发 展 袁 目 前 以 抗 生 素 尧 化 学 合 在 水 产 动 物 饲 料 的 制 粒 过 程 中 袁 温 度 在 90 益 左 右 袁 尤 其 在 膨 化 饲 料 中 袁 温 度 能 达 到 140 益 袁 同 时 在 高 压 尧 高 湿 的 条 件 下 制 粒 袁 酶 的 活 性 受 到 很 大 的 损 失 袁 甚 至 有 些 酶 活 性 已 近 完 全 丧 失 遥 目 前 解 决 此 矛 盾 有 两 种 办 法 院 淤 用 饲 用 酶 制 剂 对 饲 料 原 料 进 行 制 粒 前 预 处 理 曰 于 待 饲 料 颗 粒 出 模 后, 冷 却 到 安 全 温 度 时 把 液 态 饲 用 酶 制 剂 喷 洒 到 颗 粒 表 面 遥 另 外, 国 外 一 些 著 名 的 酶 制 剂 制 造 公 司 在 20 世 纪 90 年 代 成 功 研 制 出 包 埋 型 或 基 因 修 饰 型 饲 用 酶 制 剂 遥 目 前 某 些 国 产 酶 制 剂 也 可 耐 受 80~85 益 的 高 温 制 粒, 但 这 还 不 适 用 于 水 产 动 物 饲 料 遥 成 抗 菌 剂 等 为 主 的 饲 料 添 加 剂 袁 由 于 极 易 造 成 药 物 在 水 产 动 物 体 内 残 留 袁 进 而 危 害 到 人 类 健 康 袁 必 将 会 退 出 市 场 遥 而 酶 制 剂 作 为 无 药 物 残 留 尧 无 毒 副 作 用 尧 不 污 染 环 境 的 环 保 型 绿 色 饲 料 添 加 剂 一 定 会 越 来 越 受 到 人 们 的 重 视 袁 饲 用 酶 制 剂 目 前 被 认 为 是 使 用 最 安 全 的 一 种 饲 料 添 加 剂 遥 随 着 技 术 的 进 步 袁 国 产 酶 制 剂 在 酶 活 性 和 生 产 工 艺 及 稳 定 化 技 术 上 的 提 高 袁 生 产 成 本 的 降 低 袁 饲 用 酶 制 剂 将 在 解 决 水 产 动 物 饲 料 资 源 短 缺 尧 提 高 饲 料 利 用 率 尧 减 少 环 境 污 染 尧 提 高 经 济 效 益 上 得 到 广 泛 的 应 用 遥 储 存 稳 定 性 ( 参 考 文 献 18 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) 目 前 国 产 酶 制 剂 在 常 温 存 放 中 也 有 失 活 问 题 袁 大 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected]) 20

21 水 产 养 殖 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 表 观 消 化 率 的 研 究 田 雪 周 洪 琪 韩 斌 闫 大 伟 刘 兴 国 李 维 娇 摘 要 选 择 健 康 的 尼 罗 罗 非 鱼 为 试 验 鱼, 以 Cr 2 O 3 为 指 示 物, 以 70 豫 参 照 饲 料 和 30 豫 的 试 验 饲 料 原 料 组 成 试 验 饲 料, 测 定 尼 罗 罗 非 鱼 对 鱼 粉 豆 粕 木 薯 粉 和 次 粉 中 的 干 物 质 粗 蛋 白 粗 脂 肪 以 及 灰 分 的 表 观 消 化 率 结 果 表 明 : 淤 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 干 物 质 的 表 观 消 化 率 为 73.14%, 与 鱼 粉 豆 粕 干 物 质 的 表 观 消 化 率 没 有 显 著 差 异 (P>0.05), 较 次 粉 提 高 19.71%(P<0.05); 于 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 蛋 白 质 的 表 观 消 化 率 为 84.58%, 与 豆 粕 的 表 观 消 化 率 不 存 在 显 著 差 异 (P>0.05), 但 显 著 低 于 鱼 粉 (P<0.05); 盂 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 脂 肪 的 表 观 消 化 率 为 93.35%, 与 豆 粕 的 表 观 消 化 率 不 存 在 显 著 差 异 (P>0.05), 较 鱼 粉 低 5.0%(P<0.05); 榆 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 灰 分 的 表 观 消 化 率 为 67.74%, 与 鱼 粉 豆 粕 灰 分 的 表 观 消 化 率 没 有 显 著 差 异 (P>0.05), 显 著 高 于 次 粉 (P<0.05) 关 键 词 木 薯 粉 ; 尼 罗 罗 非 鱼 ; 表 观 消 化 率 中 图 分 类 号 S965.1 田 雪, 上 海 水 产 大 学 省 部 共 建 水 产 种 质 资 源 发 掘 与 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室,200090, 上 海 作 者 绎 罗 非 鱼 在 热 带 和 亚 热 带 地 区 被 广 泛 养 殖, 是 仅 次 于 鲤 科 和 鲑 科 的 第 三 大 养 殖 品 种, 具 有 生 长 快 尧 食 性 广 尧 繁 殖 力 强 尧 病 害 少 尧 肉 质 好 尧 产 量 高 等 优 点 [1] 遥 目 前 罗 非 鱼 养 殖 已 经 向 规 模 化 和 集 约 化 迈 进 袁 饲 料 的 应 用 是 罗 非 鱼 养 殖 的 关 键 环 节 袁 如 何 能 够 降 低 饲 料 成 本, 提 高 饲 料 原 料 的 表 观 消 化 率 便 成 了 研 究 的 热 点 遥 饲 料 原 料 的 消 化 率 是 评 价 饲 料 在 水 产 动 物 饲 料 中 是 否 具 有 应 用 前 景 的 第 一 步 袁 也 是 配 置 平 衡 日 粮 的 前 提 遥 饲 料 原 料 的 表 观 消 化 率 不 仅 为 养 殖 鱼 类 提 供 各 饲 料 原 料 的 可 利 用 营 养 素 信 息 袁 而 且 对 限 制 养 殖 鱼 类 废 物 排 放 也 具 有 参 考 价 值 [2] 遥 近 年 来 袁 国 外 研 究 将 木 薯 用 于 畜 禽 饲 料 [47], 以 补 充 饲 料 原 料 的 不 足, 我 国 用 木 薯 替 代 玉 米 饲 养 畜 禽 已 取 得 良 好 效 果 [811] 遥 但 是, 木 薯 作 为 一 种 饲 料 原 料 在 水 产 饲 料 中 的 应 用 报 道 并 不 多 [12] 袁 因 此 袁 本 试 验 研 究 比 较 罗 非 鱼 对 木 薯 和 鱼 粉 尧 豆 粕 以 及 次 粉 的 表 观 消 化 率 袁 为 木 薯 作 为 罗 非 鱼 的 一 种 饲 料 原 料 的 应 用 提 供 参 考 遥 1 材 料 与 方 法 周 洪 琪 ( 通 讯 作 者 ) 韩 斌 闫 大 伟, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 刘 兴 国, 中 国 水 产 科 学 研 究 院 渔 业 机 械 仪 器 研 究 所 李 维 娇, 广 西 南 宁 壮 德 科 技 有 限 公 司 收 稿 日 期 : 上 海 市 重 点 水 产 学 科 建 设 项 目 Y 援 1 材 料 试 验 鱼 为 雄 性 的 尼 罗 罗 非 鱼 袁 试 验 所 用 木 薯 粉 由 广 西 南 宁 某 公 司 提 供 遥 1 援 2 试 验 饲 料 按 照 Cho 和 Slinger 的 方 法 [13] 配 制 了 4 种 试 验 饲 料, 试 验 饲 料 含 有 70% 的 参 照 饲 料 以 及 30% 试 验 饲 料 原 料 袁 各 饲 料 原 料 的 营 养 成 分 见 表 1, 参 照 饲 料 配 方 见 表 2 遥 在 参 照 饲 料 中 加 入 0.5% 的 Cr 2 O 3 作 为 指 示 物 遥 各 种 饲 料 原 料 粉 碎 后 过 40 目 筛 袁 微 量 组 分 采 用 逐 级 扩 大 法 混 合 袁 混 合 均 匀 后 制 粒 袁 颗 粒 饲 料 粒 径 2mm 袁 风 干 后 置 于 4 益 冰 柜 中 保 存 尧 备 用 遥 饲 料 原 料 鱼 粉 豆 粕 木 薯 粉 次 粉 表 1 1 援 3 饲 养 管 理 蛋 白 质 (%) 试 验 饲 料 原 料 的 营 养 组 成 脂 肪 (%) 灰 分 (%) 表 2 参 照 饲 料 的 组 成 ( 豫 ) 项 目 鱼 粉 大 豆 粉 次 粉 氯 化 胆 碱 维 生 素 预 混 料 无 机 盐 预 混 料 大 豆 油 磷 酸 二 氢 钙 三 氧 化 二 铬 合 计 成 分 ph 值 4.68 正 式 试 验 前 袁 用 参 照 饲 料 对 罗 非 鱼 进 行 驯 养 袁 罗

22 田 雪 等 : 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 表 观 消 化 率 的 研 究 水 产 养 殖 非 鱼 摄 食 正 常 后 开 始 进 行 表 观 消 化 率 试 验 遥 挑 选 体 格 健 壮 尧 规 格 整 齐 的 试 验 鱼 随 机 分 到 15 个 水 族 箱 (90 cm 伊 50 cm 伊 40 cm) 中 进 行 试 验 遥 每 个 试 验 组 设 置 3 个 重 复, 每 个 重 复 放 养 5 尾 鱼 遥 每 天 分 2 次 渊 8 院 00 和 16 院 00 冤 投 喂 袁 投 饲 率 为 体 重 的 5% 左 右 遥 每 天 用 虹 吸 法 排 污 并 换 水 1/5 耀 1/4 袁 保 持 溶 解 氧 浓 度 大 于 5mg/l 袁 氨 氮 浓 度 小 于 0.3 mg/l 袁 各 组 水 质 基 本 保 持 一 致 袁 试 验 期 间 水 温 控 制 在 耀 26 益 遥 1.4 粪 便 收 集 每 天 在 投 饲 1h 后 清 除 残 饵 袁 4h 后 开 始 用 虹 吸 法 收 集 新 鲜 尧 成 型 尧 饱 满 的 粪 便 遥 收 集 到 的 粪 便 样 品 迅 速 移 入 干 燥 滤 纸 上 袁 放 置 于 干 燥 器 中 70 益 烘 干, 以 备 分 析 遥 1 援 5 消 化 率 测 定 及 统 计 将 饲 料 和 粪 便 样 品 在 105 益 下 烘 至 恒 重 袁 测 定 其 水 分 含 量 曰 采 用 凯 氏 定 氮 法 渊 总 氮 伊 6. 冤 测 定 粗 蛋 白 质 含 量 曰 采 用 索 氏 抽 提 法 渊 以 乙 醚 为 溶 剂 冤 测 定 粗 脂 肪 含 量 曰 将 样 品 在 马 福 炉 中 灼 烧 渊 550 益 冤 袁 测 定 灰 分 含 量 曰 饲 料 和 粪 便 中 Cr 2 O 3 含 量 采 用 酸 消 化 法 测 定 遥 依 据 饲 料 和 粪 便 中 各 营 养 成 分 的 含 量 及 Cr 2 O 3 的 含 量 计 算 饲 料 中 各 营 养 成 分 的 表 观 消 化 率 [15] 遥 计 算 试 验 饲 料 原 料 的 干 物 质 尧 粗 蛋 白 尧 粗 脂 肪 和 灰 分 的 表 观 消 化 率 [16] 遥 试 验 饲 料 原 料 的 表 观 消 化 率 计 算 公 式 如 下 院 试 验 饲 料 原 料 营 养 成 分 表 观 消 化 率 ( 豫 ) 越 渊 试 验 饲 料 某 营 养 成 分 的 表 观 消 化 率 原 0.7 伊 参 照 饲 料 某 营 养 成 分 的 表 观 消 化 率 冤 / 渊 0.3 伊 试 验 饲 料 原 料 某 营 养 成 分 冤 遥 试 验 结 果 以 平 均 值 依 标 准 差 表 示 遥 用 SPSS 11.0 软 件 对 试 验 数 据 进 行 方 差 分 析 袁 用 Duncan 爷 s 法 进 行 多 重 比 较 遥 2 结 果 表 3 遥 罗 非 鱼 对 各 试 验 原 料 营 养 成 分 的 表 观 消 化 率 见 表 3 罗 非 鱼 对 饲 料 原 料 营 养 成 分 的 表 观 消 化 率 ( 豫 ) 项 目 鱼 粉 豆 粕 木 薯 粉 次 粉 干 物 质 依 4.53 a 依 4.17 a 依 2.16 a 依 4.87 b 蛋 白 质 依 0.75 a 依 1.41 b 依 1. b 依 0.30 c 脂 肪 依 1.20 a 依 1.01 ab 依 0.51 b 依 1.33 c 注 院 表 中 同 列 数 据 肩 标 字 母 不 同 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 灰 分 依 11.0 a 依 6.58 ab 依 9.67 a 依 3.69 c 由 表 3 可 知 袁 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 的 干 物 质 尧 蛋 白 质 尧 22 脂 肪 和 灰 分 的 表 观 消 化 率 分 别 为 73.14% 尧 84.58% 尧 93.35% 和 67.74% 遥 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 的 干 物 质 表 观 消 化 率 分 别 比 鱼 粉 尧 豆 粕 低 9.04% 和 3.10% 袁 但 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 罗 非 鱼 对 次 粉 的 干 物 质 表 观 消 化 率 最 低 袁 显 著 低 于 鱼 粉 尧 豆 粕 和 木 薯 粉 组 渊 P<0.05 冤 遥 罗 非 鱼 对 鱼 粉 尧 豆 粕 尧 木 薯 粉 蛋 白 质 的 表 观 消 化 率 具 有 较 高 的 水 平, 均 大 于 80% 遥 对 木 薯 粉 的 蛋 白 质 表 观 消 化 率 为 84.58%, 与 豆 粕 的 表 观 消 化 率 渊 88.31% 冤 接 近, 两 者 之 间 不 存 在 显 著 差 异 (P>0.05), 但 均 显 著 低 于 鱼 粉 的 表 观 消 化 率 (P<0.05) 遥 次 粉 的 蛋 白 质 表 观 消 化 率 为 71.03%, 分 别 比 鱼 粉 尧 豆 粕 尧 木 薯 粉 低 23.80% 尧 19.57% 和 16.02% 渊 P<0.05 冤 遥 罗 非 鱼 对 饲 料 原 料 中 脂 肪 的 表 观 消 化 率 同 蛋 白 质 表 观 消 化 率 的 变 化 趋 势 相 似 遥 木 薯 粉 和 豆 粕 的 脂 肪 表 观 消 化 率 分 别 为 93.35% 和 95.81% 袁 差 异 不 显 著 渊 P> 0.05 冤 曰 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 脂 肪 的 表 观 消 化 率 显 著 低 于 鱼 粉 渊 P<0.05 冤 曰 次 粉 的 脂 肪 表 观 率 显 著 低 于 鱼 粉 尧 豆 粕 和 木 薯 粉 渊 P<0.05 冤 遥 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 灰 分 的 表 观 消 化 率 最 高 袁 为 67.74% 袁 与 鱼 粉 尧 豆 粕 组 不 存 在 显 著 差 异 渊 P>0.05 冤 遥 次 粉 的 灰 分 表 观 消 化 率 最 低 袁 为 27.37% 袁 显 著 低 于 鱼 粉 尧 豆 粕 和 木 薯 粉 渊 P<0.05 冤 遥 3 讨 论 罗 非 鱼 对 试 验 饲 料 的 蛋 白 质 和 脂 肪 表 观 消 化 率 较 高, 说 明 罗 非 鱼 对 饲 料 中 蛋 白 质 和 脂 肪 具 有 较 高 的 利 用 能 力 遥 这 一 结 果 同 Koprucu 和 Ozdemir [17] 尧 Maina 等 [18] 以 及 Hanley [19] 对 罗 非 鱼 的 研 究 结 果 相 同 遥 本 试 验 中 尼 罗 罗 非 鱼 对 鱼 粉 尧 豆 粕 和 木 薯 粉 的 蛋 白 质 的 表 观 消 化 率 渊 84.58% 耀 93.22% 冤 基 本 上 与 已 经 报 道 过 的 资 料 相 接 近 遥 Pompa 报 道 袁 罗 非 鱼 对 鲱 鱼 鱼 粉 的 蛋 白 质 消 化 率 为 85% [20] 曰 Hanley 用 解 剖 法 测 得 尼 罗 罗 非 鱼 对 玉 米 的 蛋 白 质 消 化 率 为 83 豫 耀 84% 尧 对 豆 粕 的 蛋 白 质 消 化 率 为 91 豫 耀 94.4% 尧 对 鱼 粉 的 蛋 白 质 消 化 率 86% 遥 Maina 提 出 袁 尼 罗 罗 非 鱼 对 鱼 粉 的 蛋 白 质 消 化 率 为 90% 袁 对 小 麦 麸 的 蛋 白 质 消 化 率 为 75% 遥 可 能 由 于 饲 料 原 料 的 化 学 组 成 成 分 尧 来 源 尧 加 工 过 程 以 及 粪 便 收 集 方 法 的 不 同 导 致 蛋 白 质 表 观 消 化 率 存 在 一 定 程 度 的 偏 差 [21] 遥 国 内 外 大 量 的 研 究 结 果 表 明 袁 饲 料 中 蛋 白 质 的 品 质 是 影 响 鱼 类 生 长 的 首 要 因 素 袁 同 种 养 殖 动 物 对 不 同

23 水 产 养 殖 田 雪 等 : 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 表 观 消 化 率 的 研 究 饲 料 原 料 蛋 白 质 具 有 不 同 的 消 化 率 袁 蛋 白 质 的 表 观 消 化 率 是 用 来 衡 量 鱼 类 对 其 利 用 率 的 指 标 袁 能 影 响 鱼 类 [22] 的 生 长 和 饵 料 系 数 遥 本 试 验 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 的 蛋 白 质 消 化 率 与 木 薯 粉 呈 酸 性 有 关 袁 可 能 因 木 薯 粉 使 饲 料 的 ph 值 下 降 袁 增 加 胃 内 的 酸 度 袁 促 进 胃 蛋 白 酶 原 被 激 [23] 活 进 而 发 挥 对 饲 料 蛋 白 质 的 水 解 作 用 袁 提 高 消 化 酶 的 活 性 和 饲 料 的 消 化 利 用 率 遥 Cho 和 Slinger [24] 尧 Aksnes 和 Opstvedt [] 报 道 袁 鱼 类 对 脂 肪 的 表 观 消 化 率 为 85% 耀 [26] 95% 遥 Sklan 等 用 鱼 粉 尧 肉 粉 尧 玉 米 面 筋 尧 大 豆 粉 尧 油 菜 籽 粉 尧 向 日 葵 籽 粉 尧 次 粉 等 饲 养 罗 非 鱼 袁 罗 非 鱼 对 脂 肪 的 表 观 消 化 率 为 72% 耀 90% 遥 本 试 验 条 件 下 袁 罗 非 鱼 对 次 粉 尧 木 薯 粉 尧 豆 粕 和 鱼 粉 脂 肪 的 表 观 消 化 率 为 72.90% 耀 98.02% 袁 这 与 Sklan 等 尧 Koprucu 和 Ozdemir 的 研 究 结 果 基 本 一 致 遥 通 常 矿 物 元 素 在 碱 性 环 境 中 容 易 形 成 不 溶 性 盐 [27] [23] 而 难 以 吸 收 遥 Vielma 等 尧 潘 庆 等 先 后 报 道 袁 在 饲 料 中 添 加 酸 制 剂 可 改 善 鱼 体 胃 肠 道 的 碱 性 环 境 袁 促 进 鱼 类 肠 道 后 部 对 铁 尧 钙 尧 磷 尧 锰 等 矿 物 质 元 素 的 吸 收 遥 本 试 验 中 袁 罗 非 鱼 对 木 薯 粉 的 灰 分 表 观 消 化 率 高 于 鱼 粉 和 豆 粕 袁 其 原 因 可 能 是 因 为 木 薯 粉 的 酸 性 所 致 遥 参 考 文 献 1 Webster C, Lim C. Nutrient Requirement and Feeding of Finfish for Aquaculture[M]. CAB International, 2002, 273 耀 Lee SM. Apparent digestibility coefficients of various feed ingredi 原 ents for juvenile and grower rockfish (Sebastes schlegeli)[j]. Aqua 原 culture,2002, 207: 79 耀 95 3 Ceballos H, Iglesias CA, P 佴 rez JC, et al. Cassava breeding: oppor 原 tunities and challenges [J]. Plant Molecular Biology, 2004, 56: 503 耀 Ngo TD, Nguyen TM, Ledin I. Effect of replacing acommercial concentrate with cassava hay (Manihot esculenta Crantz) on the per 原 formance of growing goats [J]. Animal Feed Science and Technology, 2005,119:271 耀 Duong NK, Hans W. Performance of growing heifers fed urea treat 原 ed fresh rice straw supplemented with fresh, ensiled or pelleted cas 原 sava foliage[j]. Livestock Science,2006(12):17 6 Dung NNX, Manh LH, Uden P. Tropical fibre sources for pigsdi 原 gestibility, digestaretention and estimation of fibre digestibility in vitro [J]. Animal Feed Science and Technology,2002,102:109 耀 An LV, Hong TTT,Lindberg JE. Ileal and total tract digestibility in growing pigs fed cassava root meal diets with inclusion of fresh, dry and ensiled sweet potato (Ipomoea batatas L. (Lam.)) leaves [J]. Animal Feed Science and Technology,2004, 114:127 耀 杨 亮 宇, 李 清, 刘 勇, 等. 饲 用 木 薯 粉 的 营 养 价 值 评 定 [J]. 云 南 畜 牧 兽 医,2002, 1:1 耀 2 9 李 耀 南, 黄 贤 娟, 沈 应 然. 木 薯 粉 的 营 养 价 值 评 定 [J]. 养 猪, (1):5 耀 7 10 黄 世 仪, 刘 英 强. 木 薯 日 粮 饲 喂 蛋 鸡 的 效 果 观 察 [J]. 饲 料 工 业, 1992, 13(10):7 耀 梁 郁 均, 叶 荣 荣, 冷 和 平, 等. 用 赖 氨 酸 加 蛋 氨 酸 代 替 鱼 粉 结 合 木 薯 代 替 部 分 玉 米 养 猪 实 验 [J]. 广 东 农 业 科 学,1990, 5:41 耀 Omoregie E, Ufodike EBC,Umaru MS. Growth and feed utilization of Oreochromis niloticus fingerlings fed with diets containing cas 原 sava peelings and mango seeds [J]. Aquabyte,1991, 4:6 耀 7 13 Cho CY, Slinger SJ. Apparent digestibility measurement in feed 原 stuff for rainbow trout[j]. Finfish Nutrition and Finfish Technology, 1979, 2:239 耀 Shiau SY. Nutrient Requirements and Feeding of Finfish for Aqua 原 culture [M] 耀 Association of Official Analytical Chemists (AOAC). Official Meth 原 ods of Analysis, 16thed. AOAC, Arlington, VA, Cho CY, Slinger SJ, Bayley HS. Bioenergetics of salmonid fishes: energy intake, expenditure and producticity [J]. Comp. Biochem. Physiol.,1982, 73: 耀 Koprucu Y, Ozdemir Y. Apparent digestibility of selected feed in 原 gredients for Neil tilapia (Orecochromis niloticus) [J]. Aquaculture 2005, 0:308 耀 Maina JG, Beames RM, Higgs D, et al. Digestibility and feeding value of some feed ingredients fed to tilapia, Oreochromis niloticus [J]. Aquaculture Research,2002,33:853 耀 Hanley F. The digestibility of foodstuffs and the effects of feeding selectivity on digestibility determinations in tilapia, Oreochromis niloticus[j]. Aquaculture,1987,66:167 耀 Pompa TJ. Digestibility of selected feedstuffs and naturally occur 原 ring algae by tilapia, PHD dissertation, Auburn University, Bureau DP, Harris AM, Cho CY. Apparent digestibility of ren 原 dered animal protein ingredients for rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)[j]. Aquaculture,1999, 180:345 耀 Halver JE, Hardy RW. Fish nutrition[m]. Third edition, 潘 庆, 谭 永 刚, 毕 英 佐, 等. 酸 制 剂 对 罗 非 鱼 生 长 和 饲 料 利 用 的 影 响 [J]. 水 产 学 报,2004(28):682 耀 Cho CY, Slinger SJ. Apparent digestibility measurement in feed 原 stuffs for rainbow trout. Proc World Symp on Finfish Nutrition and Fishfeed Technology,1979,2:239 耀 247 Aksnes A, Opstvedt J. Content of digestible energy in fish feed in 原 gredients determined by the ingredient substitution method[j]. Aquaculture,1998, 161: 45 耀 Sklan D, Prag T, Lupatsch I. Apparent digestibility coefficients of feed ingredients and their prediction in diets for tilapia, Ore 原 ochromis niloticus 伊 Oreochromis aureus (Teleostei, Cichlidae)[J]. Aquaculture Research,2004, 35: 358 耀 Vielma J, Lall SP. Dietary Fumaric acid enhances apparent di 原 gestibility of minerals in rainbow trout [J]. Aquaculture Nutrition, 1997(4): 265 耀 268 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

24 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 水 产 养 殖 饲 料 中 添 加 磷 脂 油 胆 碱 L 肉 碱 对 军 曹 鱼 生 长 及 组 织 脂 肪 含 量 的 影 响 周 萌 曹 俊 明 马 利 吴 建 开 绎 磷 脂 尧 胆 碱 尧 左 旋 肉 碱 等 是 哺 乳 动 物 的 抗 脂 肪 肝 因 子, 饲 料 中 补 充 这 些 物 质 有 利 于 肝 脏 脂 肪 的 转 运 遥 在 水 产 动 物 中, 磷 脂 可 参 与 肝 脏 中 甘 油 三 酯 向 肝 外 的 转 运 [1] 曰 胆 碱 缺 乏 可 导 致 虹 鳟 尧 大 鳞 大 马 哈 鱼 尧 斑 点 叉 尾 尧 日 本 鳗 鲡 尧 大 黄 鱼 等 出 现 生 长 不 良 尧 肝 脂 积 累 增 加, 甚 至 出 现 脂 肪 肝 等 营 养 缺 乏 症 [2,3] 曰 左 旋 肉 碱 能 降 低 罗 非 鱼 的 肝 脂 [4], 提 高 真 鲷 尧 鲶 鱼 [9,11] 等 的 生 长 性 能 袁 改 善 机 体 的 营 养 组 成 遥 军 曹 鱼 渊 Rachycentron canadum 冤 是 广 泛 分 布 于 热 带 亚 热 带 海 域 的 一 种 大 型 暖 水 性 的 肉 食 性 鱼 类, 被 认 为 是 几 种 极 具 发 展 潜 力 的 网 箱 养 殖 鱼 类 之 一, 在 我 国 东 南 部 沿 海 已 广 泛 养 殖 遥 但 在 军 曹 鱼 的 养 殖 过 程 中 袁 同 样 出 现 了 脂 肪 肝 问 题 袁 尤 其 是 长 期 投 喂 人 工 配 合 饲 料 更 容 易 诱 发 脂 肪 肝 遥 目 前 袁 对 军 曹 鱼 的 营 养 研 究 才 刚 起 步 袁 已 有 的 研 究 也 只 初 步 确 定 了 能 量 蛋 白 比 尧 碳 水 化 合 物 等 的 需 要 量 袁 而 有 关 军 曹 鱼 脂 肪 肝 成 因 及 营 养 调 控 尚 缺 乏 研 究 遥 本 文 通 过 在 饲 料 中 添 加 3 种 抗 脂 肪 肝 物 质 要 要 大 豆 磷 脂 油 渊 含 磷 脂 46 豫 冤 尧 胆 碱 ( 含 胆 碱 99 豫 袁 分 析 纯 ) 尧 肉 碱 ( 含 L 肉 碱 10 豫 ), 初 步 探 讨 其 对 军 曹 鱼 组 织 脂 肪 积 累 的 影 响 及 对 改 善 脂 肪 肝 的 营 养 价 值 遥 1 材 料 和 方 法 1.1 试 验 鱼 试 验 鱼 由 广 东 某 海 水 养 殖 基 地 提 供 遥 试 验 开 始 前 袁 在 网 箱 中 用 基 础 饲 料 驯 养 2 周 遥 1.2 试 验 饲 料 基 础 饲 料 以 白 鱼 粉 尧 豆 粕 为 蛋 白 源 袁 精 制 鱼 油 为 脂 肪 源 袁 琢 淀 粉 为 糖 源 配 制 袁 配 方 及 营 养 组 成 见 表 1 遥 在 基 础 饲 料 中 分 别 添 加 2 个 水 平 的 3 种 抗 脂 肪 肝 物 质 袁 并 用 纤 维 素 作 填 充 剂 曰 以 冰 鲜 饵 料 为 对 照 1 组 袁 以 基 础 饲 料 为 对 照 2 组 袁 共 8 个 试 验 组 渊 见 表 2 冤 遥 饲 料 原 料 均 经 40 目 筛 粉 碎 后 混 合 袁 用 SLX80 颗 粒 机 制 成 周 萌, 广 东 省 农 业 科 学 院 畜 牧 研 究 所,510640, 广 东 广 州 曹 俊 明 马 利 吴 建 开, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 广 东 省 科 技 攻 关 项 目 (2003B21504) 资 助 24 直 径 4mm 的 软 颗 粒 饲 料 袁 在 45 益 烘 干 后 置 于 原 15 益 冰 箱 中 保 存 待 用 遥 饲 料 对 照 1 组 对 照 2 组 试 验 3 组 试 验 4 组 试 验 5 组 试 验 6 组 试 验 7 组 试 验 8 组 1.3 饲 养 管 理 表 1 基 础 饲 料 配 方 及 营 养 组 成 (%) 成 分 白 鱼 粉 豆 粕 琢 淀 粉 鱼 油 维 生 素 预 混 料 矿 物 质 预 混 料 磷 酸 二 氢 钙 纤 维 素 营 养 水 平 粗 蛋 白 粗 脂 肪 粗 灰 分 含 量 表 2 抗 脂 肪 肝 物 质 添 加 量 ( 豫 ) 大 豆 磷 脂 油 胆 碱 肉 碱 纤 维 素 试 验 鱼 驯 养 2 周 后 随 机 分 箱, 每 个 尼 龙 网 箱 渊 2.0m 伊 1.0 m 伊 1.5 m 冤 中 饲 养 15 尾 鱼, 每 个 处 理 组 设 3 平 行 遥 试 验 鱼 平 均 初 重 为 渊 依 3.85 冤 g 遥 试 验 期 间 水 温 耀 31 益 袁 盐 度 30 译 耀 34 译 袁 溶 氧 浓 度 不 低 于 6mg/l 遥 分 别 于 每 天 的 9:00 和 16:00 投 喂 试 验 饲 料 2 次 袁 投 饲 率 为 体 重 的 6% 袁 冰 鲜 饵 料 换 算 成 干 重 后 按 体 重 的 6% 投 喂 渊 平 均 干 物 质 含 量 22% 冤 遥 每 2 周 清 洗 一 次 网 箱 并 测 量 一 次 体 重 袁 调 整 投 喂 量 遥 试 验 进 行 了 8 周 遥 1.4 样 品 制 备 和 分 析 饲 养 结 束 后 称 重 并 统 计 存 活 率, 每 组 各 取 5 尾 鱼 断 尾 取 血, 以 3000 r/min 在 冷 冻 离 心 机 中 离 心 10 min, 分 离 得 到 血 清 样 品 曰 再 每 组 分 别 取 3 尾 鱼 袁 取 内 脏 袁 制 备 肝 胰 脏 样 品 袁 并 去 皮 取 两 侧 背 肌 样 品 遥 以 上 样 品 均 保 存 于 液 氮 中 待 分 析 遥 用 烘 干 法 尧 半 微 量 凯 氏 定 氮 法 尧 石 油 醚 抽 提 法 和 马 福 炉 高 温 灼 烧 法 分 别 测 定 饲 料 和

25 水 产 养 殖 周 萌 等 : 饲 料 中 添 加 磷 脂 油 胆 碱 L 肉 碱 对 军 曹 鱼 生 长 及 组 织 脂 肪 含 量 的 影 响 全 鱼 的 水 分 尧 粗 蛋 白 尧 粗 脂 肪 和 灰 分 含 量 曰 用 氯 仿 甲 醇 提 取 法 提 取 肝 胰 脏 和 肌 肉 脂 肪 遥 试 验 结 束 时 袁 每 组 随 机 选 取 3 尾 鱼 的 肝 胰 脏 用 Bouine 氏 液 固 定 袁 石 蜡 包 埋 袁 制 备 切 片 遥 切 片 厚 度 7nm 袁 用 H.E 染 色 袁 然 后 用 显 微 镜 观 察 袁 并 在 200 倍 下 拍 照 遥 1.5 数 据 分 析 与 统 计 试 验 数 据 用 STATISTIC6.0 软 件 作 统 计 分 析, 试 验 结 果 用 平 均 数 依 标 准 误 差 表 示 遥 采 用 Duncan's 法 进 行 多 重 比 较 遥 2 试 验 结 果 2.1 军 曹 鱼 的 增 重 率 尧 饲 料 系 数 和 蛋 白 质 效 率 ( 见 表 3) 表 3 处 理 组 对 照 1 组 对 照 2 组 试 验 3 组 试 验 4 组 试 验 5 组 试 验 6 组 试 验 7 组 试 验 8 组 军 曹 鱼 的 增 重 率 饲 料 系 数 和 蛋 白 质 效 率 初 始 体 重 (g) 依 依 依 依 依 依 依 依 1.20 增 重 率 (%) 依 a 依 a 依 ab 依 ab 依 ab 依 ab 依 b 依 b 饲 料 系 数 1.51 依 依 依 依 依 依 依 依 0.16 蛋 白 质 效 率 (%) 1.95 依 0.33 b 1.39 依 0.17 a 1.44 依 0.27 a 1.67 依 0.15 a 1.48 依 0.24 a 1.53 依 0.19 a 1.55 依 0.08 a 1.58 依 0.21 a 注 院 同 列 数 据 肩 标 字 母 相 同 者 表 示 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 袁 不 同 者 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 下 表 同 遥 由 表 3 可 见, 饲 料 中 添 加 3 种 抗 脂 肪 肝 物 质 后, 能 不 同 程 度 的 提 高 军 曹 鱼 的 增 重 率 袁 增 重 率 较 对 照 2 组 升 高 了 3.86 豫 耀 29% 袁 但 由 于 某 些 组 的 标 准 误 较 大 袁 仅 第 7 组 和 第 8 组 与 对 照 1 尧 2 组 差 异 达 到 显 著 性 水 平 渊 P<0.05 冤 遥 饲 料 中 随 着 胆 碱 或 肉 碱 添 加 量 的 增 加 军 曹 鱼 的 增 重 率 也 随 着 提 高 渊 5 尧 6 组 和 7 尧 8 组 冤 袁 但 相 互 之 间 没 有 显 著 差 异 渊 P>0.05 冤 遥 试 验 各 组 军 曹 鱼 的 饲 料 系 数 没 有 显 著 差 异 曰 蛋 白 质 效 率 以 对 照 1 组 最 高 袁 且 显 著 高 于 其 它 各 组 遥 2.2 军 曹 鱼 的 肝 体 比 尧 脏 体 比 和 肥 满 度 渊 见 表 4 冤 由 表 4 可 见, 试 验 2 耀 8 组 间 军 曹 鱼 的 肝 体 比 尧 脏 体 比 及 肥 满 度 均 没 有 显 著 差 异, 但 均 高 于 对 照 1 组 遥 表 4 处 理 组 对 照 1 组 对 照 2 组 试 验 3 组 试 验 4 组 试 验 5 组 试 验 6 组 试 验 7 组 试 验 8 组 试 验 军 曹 鱼 的 肝 体 比 脏 体 比 和 肥 满 度 肝 体 比 (%) 1.51 依 0.32 a 2.34 依 0. b 2.39 依 0.33 b 2.61 依 0.01 b 2.38 依 0.21 b 2.58 依 0.15 b 2.53 依 0.17 b 2.23 依 0.15 ab 脏 体 比 (%) 9.48 依 0.90 a 依 0.19 b 依 0.63 b 依 0.37 b 依 0.50 b 11. 依 0.21 b 依 0.41 b 依 0.28 ab 2 援 3 军 曹 鱼 组 织 脂 肪 含 量 渊 见 表 5 冤 肥 满 度 渊 g/cm 3 冤 0.92 依 0.06 a 1.04 依 0.06 ab 1.05 依 0.05 ab 1.00 依 0.05 ab 1.03 依 0.01 ab 1.07 依 0.02 ab 1.01 依 0.03 ab 1.01 依 0.04 b 表 5 试 验 军 曹 鱼 的 肠 脂 肝 脂 和 肌 肉 脂 肪 含 量 ( 豫 ) 处 理 组 对 照 1 组 对 照 2 组 试 验 3 组 试 验 4 组 试 验 5 组 试 验 6 组 试 验 7 组 试 验 8 组 肠 脂 0.05 依 0.00 a 0.93 依 0.06 c 0.46 依 0.03 b 0.48 依 0.04 b 0.44 依 0.03 b 0.34 依 0.01 b 0.51 依 0.06 b 0.31 依 0.03 b 肝 脂 4.23 依 0.33 a 依 1.73 d 依 0.51 c 依 0.62 c 依 0.89 c 依 0.71 c 依 0.56 b 依 0.88 b 肌 肉 脂 肪 5.76 依 0.24 a 依 0.84 b 依 0.82 b 依 0.17 b 依 0.28 b 依 0.07 b 依 0.33 b 依 0.27 b 注 院 肠 脂 含 量 = 肠 脂 重 / 体 重 曰 肝 脂 含 量 = 肝 脂 重 / 体 重 曰 肌 肉 脂 肪 重 越 肌 肉 脂 肪 重 / 体 重 遥 进 一 步 测 定 了 军 曹 鱼 的 肠 脂 尧 肝 脂 及 肌 肉 脂 肪 发 现 袁 添 加 3 种 抗 脂 肪 肝 因 子 的 试 验 组 (3 耀 8 组 ) 较 对 照 2 组 可 不 同 程 度 的 降 低 军 曹 鱼 的 肠 脂 和 肝 脂 含 量, 降 幅 分 别 达 豫 耀 66.67% 和 4.74 豫 耀 28.03% 渊 P<0.05 冤 袁 但 对 肌 肉 脂 肪 含 量 没 有 显 著 影 响 曰 其 中, 以 试 验 8 组 (0.2% 肉 碱 ) 肠 脂 含 量 最 低, 试 验 7 组 (0.1% 肉 碱 ) 肝 脂 含 量 最 低, 且 试 验 7 组 和 试 验 8 组 的 肝 脂 含 量 显 著 低 于 试 验 3 耀 7 组 (P<0.05), 其 余 各 试 验 组 没 有 显 著 差 异 遥 选 取 对 照 1 组 尧 2 组 和 试 验 7 组 完 整 尧 清 晰 的 肝 脏 组 织 各 制 成 切 片 一 张 ( 见 图 1) 遥 其 中, 各 图 中 白 色 细 胞 为 脂 肪 细 胞 遥 由 图 1 可 见, 未 添 加 抗 脂 肪 肝 因 子 的 对 照 2 组 肝 胰 脏 中 出 现 大 量 的 脂 肪 细 胞 曰 试 验 7 组 (0.1% 肉 碱 组 ) 脂 肪 细 胞 数 量 明 显 减 少 曰 对 照 1 组 ( 冰 鲜 组 ) 几 乎 未 见 脂 肪 细 胞, 肝 细 胞 轮 廓 清 晰 遥 渊 A 冤 对 照 2 组 的 肝 脏 组 织 渊 B 冤 试 验 7 组 的 肝 脏 组 织 渊 C 冤 对 照 1 组 的 肝 脏 组 织 图 1 军 曹 鱼 肝 脏 组 织 切 片

26 周 萌 等 : 饲 料 中 添 加 磷 脂 油 胆 碱 L 肉 碱 对 军 曹 鱼 生 长 及 组 织 脂 肪 含 量 的 影 响 水 产 养 殖 3 讨 论 本 试 验 中, 配 合 饲 料 代 替 冰 鲜 饵 料 成 功 地 改 善 了 军 曹 鱼 的 增 重 和 饲 料 系 数 遥 其 中, 对 照 2 组 军 曹 鱼 的 增 重 率 与 冰 鲜 组 无 显 著 差 异, 添 加 3 种 抗 脂 肪 肝 物 质 不 同 程 度 的 提 高 了 军 曹 鱼 的 增 重 率, 在 0.1% 和 0.2% 肉 碱 组 达 到 显 著 性 水 平 遥 但 与 冰 鲜 组 相 比, 添 加 3 种 抗 脂 肪 肝 物 质 的 试 验 组 军 曹 鱼 肝 脂 尧 肠 脂 尧 肌 肉 脂 肪 均 显 著 提 高 曰 而 相 对 于 对 照 2 组, 各 组 织 的 脂 肪 积 累 有 所 改 善, 说 明 用 配 合 饲 料 替 代 冰 鲜 饵 料 饲 喂 军 曹 鱼, 可 能 存 在 着 营 养 素 组 配 失 衡 的 问 题, 饲 料 中 添 加 抗 脂 肪 肝 因 子, 只 能 一 定 程 度 的 改 善 军 曹 鱼 的 脂 肪 肝 症 状 遥 本 研 究 发 现, 饲 料 中 添 加 1.5% 和 3.0% 的 大 豆 磷 脂 油 较 对 照 组 能 一 定 程 度 改 善 军 曹 鱼 的 生 长 和 饲 料 系 数, 且 显 著 降 低 了 肠 及 肝 脏 的 脂 肪 含 量, 这 在 很 多 鱼 类 研 究 中 都 得 到 证 实 [5 原 7] 遥 磷 脂 促 生 长 作 用 的 机 理 被 认 为 是 为 机 体 细 胞 的 形 成 和 更 新 提 供 物 质 基 础 和 能 量 袁 有 利 于 不 饱 和 脂 肪 酸 的 吸 收 和 利 用 曰 同 时 袁 磷 脂 会 影 响 机 体 的 脂 类 转 运 袁 促 进 甘 油 三 酯 由 肝 脏 向 血 液 和 肌 肉 中 转 移 [1] 袁 故 磷 脂 具 有 一 定 的 抗 脂 肪 肝 功 效 遥 在 本 研 究 中 袁 添 加 1.5% 和 3.0% 的 大 豆 磷 脂 油 ( 含 磷 脂 约 0.7% 和 1.4%) 对 军 曹 鱼 的 生 长 及 组 织 脂 肪 含 量 没 有 显 著 差 异 袁 即 军 曹 鱼 幼 鱼 饲 料 中 磷 脂 的 适 宜 添 加 量 可 能 不 高 于 1.4% 袁 低 于 其 他 研 究 者 的 结 果 袁 可 能 与 饲 料 原 料 中 已 含 有 的 一 定 量 磷 脂 有 关 遥 鱼 类 对 磷 脂 的 适 宜 需 求 量 会 因 生 长 阶 段 尧 鱼 种 及 磷 脂 的 种 类 而 异 遥 军 曹 鱼 对 饲 料 磷 脂 的 需 要 量 袁 还 需 进 一 步 研 究 遥 军 曹 鱼 饲 料 中 添 加 0.5% 或 1.0% 的 胆 碱 较 磷 脂 能 更 有 效 的 促 进 军 曹 鱼 的 增 重 袁 降 低 肠 脂 和 肝 脂 的 积 累 遥 胆 碱 对 水 产 动 物 的 生 理 功 能 袁 目 前 已 有 较 明 确 的 结 论 袁 主 要 表 现 在 院 淤 作 为 磷 脂 的 组 成 成 分 袁 参 与 肝 脏 脂 肪 代 谢 袁 防 止 脂 肪 的 过 度 积 累 曰 于 参 与 神 经 传 递 活 动 袁 防 止 肌 肉 收 缩 障 碍 曰 盂 作 为 甲 基 供 体 袁 参 与 机 体 的 合 成 代 谢 遥 胆 碱 的 上 述 功 能 在 本 研 究 及 大 多 数 水 产 动 物 的 研 究 中 得 到 证 实 遥 但 不 同 水 产 动 物 对 胆 碱 的 需 要 量 存 在 很 大 差 异 袁 约 在 400 耀 3000 mg/kg 之 间 [8] 袁 因 种 类 尧 发 育 阶 段 及 评 价 指 标 而 异 遥 本 研 究 中, 添 加 1.0% 胆 碱 较 添 加 0.5% 胆 碱 的 增 重 率 有 上 升 趋 势, 而 且 降 低 肠 脂 和 肝 脂 的 效 果 更 明 显 遥 因 为 饲 料 原 料 鱼 粉 中 胆 碱 含 量 较 高 (>3 000 mg/kg 袁 中 国 饲 料 原 料 数 据 库 袁 2002), 这 表 明 军 曹 鱼 饲 料 中 胆 碱 的 含 量 可 能 会 高 于 1.0% 遥 军 曹 鱼 对 胆 碱 的 适 宜 需 要 量 有 必 要 作 进 一 步 的 研 究 遥 肉 碱 自 20 世 纪 80 年 代 后 应 用 于 水 产 动 物 袁 已 被 证 实 在 淡 尧 海 水 鱼 类 袁 虾 蟹 类 及 甲 鱼 尧 鳗 鱼 中 都 有 促 进 动 物 生 长 发 育 袁 促 进 脂 肪 代 谢 袁 改 善 肉 品 质 的 作 用 遥 肉 碱 是 脂 肪 酸 转 运 到 细 胞 线 粒 体 内 进 行 茁 氧 化 的 唯 一 26 载 体 袁 在 动 物 的 新 陈 代 谢 中 具 有 其 它 添 加 剂 所 不 能 替 代 的 作 用 遥 本 研 究 也 发 现 袁 添 加 肉 碱 对 军 曹 鱼 的 促 生 长 及 降 低 肝 脂 的 效 果 最 明 显 袁 与 对 照 2 组 相 比 差 异 达 到 显 著 性 水 平 遥 影 响 肉 碱 作 用 效 果 的 因 素 是 多 方 面 的 遥 Chatzifrtis 等 [9] 认 为 袁 饲 料 中 的 赖 氨 酸 水 平 会 极 大 的 影 响 肉 碱 的 作 用 效 果 遥 Twibell 等 [10] 认 为 袁 不 同 的 肉 碱 添 加 量 会 对 作 用 效 果 产 生 很 大 影 响 遥 Torreele 等 [11] 认 为 袁 饲 料 中 脂 肪 含 量 及 组 成 可 对 肉 碱 的 作 用 效 果 产 生 影 响 遥 本 试 验 中 袁 饲 料 中 添 加 0.2% 肉 碱 较 0.1% 的 肉 碱 促 生 长 及 降 低 肠 脂 作 用 更 明 显 袁 可 能 是 由 于 饲 料 的 脂 肪 含 量 较 高 袁 增 加 了 军 曹 鱼 对 肉 碱 的 需 要 量 遥 本 研 究 初 步 证 实 了 磷 脂 尧 胆 碱 尧 L 肉 碱 对 军 曹 鱼 幼 鱼 的 促 生 长 及 降 低 组 织 脂 肪 积 累 的 作 用 袁 今 后 有 必 要 对 三 者 之 间 的 相 互 替 代 关 系 及 饲 料 中 其 它 营 养 素 渊 蛋 白 尧 脂 肪 尧 碳 水 化 合 物 冤 与 抗 脂 肪 肝 物 质 之 间 对 军 曹 鱼 脂 肪 肝 的 形 成 与 调 控 的 影 响 作 进 一 步 的 研 究 遥 参 考 文 献 1 She ridan M A. Lip id dynamics in fish: aspects of absorption, transportation and mobilization[j]. Com.Biochem.Pgysiol., 1988,90B: 679 耀 Millikin MR. Qualitative and quantitative nutrient requirement of fish: areview[j]. Fish. Bull.,1982, 80:655 耀 Wilson R, Poe W. Choline nutrition of fingerling catfish. Aquac., 1988, 68:65 耀 71 4 杜 震 宇, 刘 永 坚, 田 丽 霞, 等. 添 加 不 同 构 型 肉 碱 对 罗 非 鱼 生 长 和 鱼 体 营 养 成 分 组 成 的 影 响 [J]. 水 产 学 报,2002,26(3):9 耀 PCoutteau I, Geurden MR, Camara P, et al. Review on the dietary effects of phospholipids in fish and crustacean larviculture [J]. Aquac., 1997, 155:149 耀 Kanazawa A,Teshhihma S,Inamori S,et al. Effects of dietary phospholipids on growth, survival rate and incidence of malformation in the larval ayu [C]. Mem. Fac. Fish, Kagoshima Univ., 1981, 30: 301 耀 Loch mann R, Brown R. Soybean lecithin supplementation od practical diets for juvenile goldfish (Carassius auratus)[j]. Jounal of the American Oil chemists'societv.,1997,74(2):149 耀 冷 向 军, 李 小 勤. 水 产 动 物 的 胆 碱 营 养 [J]. 水 生 动 物 营 养,2005,2: 44 耀 46 9 Chatzifrtis S, Takenchi T, Seikai T. The effect of dietary carnitine supplementation on growth of red sea bream (Pagrus major) fingerlings at two levels of dietary lysine[j]. Aquac., 1996, 147:235 耀 Twibell T G, Brown P B. Effects of dietary carnitine on growth rates and body composition of hybrid striped bass (Morone saxatilis male 伊 M. chrysops female)[j]. Aquac., 2000, 187:153 耀 Torreele BE, Der Sluiszen AV, Verreth J. the effect of dietary L carnitine on the growth performance in fingerlings of the African catfish (Clarias gariepinus) in relation to dietary lipid [J]. Br. J. Nutr., 1993, 69:289 耀 299 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

27 水 产 养 殖 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 不 同 磷 源 对 奥 尼 罗 非 鱼 幼 鱼 生 长 性 能 的 影 响 磷 作 为 动 物 必 需 的 一 种 常 量 矿 物 元 素, 在 动 物 体 内 发 挥 着 重 要 的 生 理 作 用 遥 磷 除 与 钙 结 合 形 成 骨 尧 齿 尧 鳞 尧 甲 壳 外, 其 余 的 分 布 于 全 身 体 细 胞 中 遥 磷 是 三 磷 酸 腺 苷 尧 核 酸 尧 磷 脂 尧 细 胞 膜 和 多 种 辅 酶 的 重 要 组 成 成 分, 磷 与 能 量 转 化, 细 胞 膜 通 透 性, 遗 传 密 码 以 及 生 殖 和 生 长 有 密 切 关 系 遥 磷 还 用 作 缓 冲 液, 以 保 持 体 液 和 细 胞 内 液 的 正 常 的 ph 值 [1] 遥 水 中 的 磷 含 量 较 低, 鱼 虾 为 了 满 足 其 生 长 所 需 要 的 磷 主 要 从 外 界 的 食 物 ( 饲 料 ) 中 获 取 [2 袁 3] 遥 饲 料 中 磷 含 量 不 足 时, 鱼 体 在 糖 酵 解 过 程 中 的 磷 酸 化 作 用 减 弱, 脂 肪 酸 氧 化 受 到 抑 制, 葡 萄 糖 异 生 作 用 增 加, 造 成 鱼 营 养 不 良 尧 生 长 缓 慢 曰 磷 含 量 过 多 时, 又 会 导 致 血 钙 浓 度 降 低, 诱 发 甲 状 旁 腺 机 能 亢 进, 使 鱼 能 量 消 耗 增 加, 而 不 得 不 依 靠 刺 激 葡 萄 糖 异 生 作 用 弥 补 其 耗 损 [4] 遥 饲 料 原 料 及 各 种 磷 酸 盐 所 含 的 磷, 因 化 学 结 构 不 同 及 鱼 种 不 同, 其 利 用 率 各 异 遥 Lovell(1978) 以 美 洲 河 鲇 [5] 尧 Ogino 等 (1979) 以 鲤 鱼 和 虹 鳟 [6] 进 行 不 同 饲 料 原 料 中 磷 的 利 用 率 试 验 遥 一 般 说 来 越 是 溶 解 性 好 的 盐 类 其 利 用 率 就 越 高, 能 分 泌 胃 酸 的 鱼 类 能 吸 收 更 多 的 磷 遥 在 无 机 磷 酸 盐 中, 一 价 盐 的 溶 解 性 能 最 好 尧 二 价 盐 次 之 尧 三 价 盐 最 差 遥 如 化 学 纯 的 磷 酸 二 氢 钙 在 益 水 中 溶 解 率 为 68% 尧 磷 酸 氢 钙 为 38% 遥 Eya 等 (1997) 测 定 了 斑 点 叉 尾 陈 冰, 华 南 农 业 大 学 动 物 科 学 学 院 水 产 养 殖 系,510642, 广 东 广 州 潘 庆 郑 卫 川 毕 英 佐, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 对 无 机 盐 的 可 利 用 率 随 溶 解 性 能 下 降 而 递 减, 但 有 胃 鱼 和 无 胃 鱼 递 减 的 程 度 不 同 [7] 遥 饲 料 中 无 机 磷 的 主 要 来 源 是 磷 酸 盐, 包 括 磷 酸 钙 盐 ( 磷 酸 一 钙 尧 磷 酸 二 钙 和 磷 酸 三 钙 ) 尧 磷 酸 钾 盐 尧 磷 酸 钠 盐 等 遥 目 前 已 做 了 关 于 异 育 银 卿 对 饲 料 中 磷 的 利 用 [8] 尧 磷 酸 氢 钙 在 高 产 鲤 鱼 养 殖 中 的 应 用 [9] 尧 磷 酸 氢 钙 在 长 薄 鳅 养 殖 生 产 中 的 应 用 尧 探 讨 [10] 等 相 关 试 验, 但 由 于 鱼 的 种 类 和 试 验 对 象 年 龄 不 同, 以 及 磷 源 选 择 的 种 类 和 添 加 量 的 不 一 致, 造 成 研 究 结 果 之 间 存 在 较 大 的 差 异 遥 本 试 验 以 罗 非 鱼 为 对 象, 在 饲 料 中 分 别 添 加 磷 酸 二 氢 钙 尧 磷 酸 氢 钙 尧 磷 酸 二 氢 钾 尧 磷 酸 二 氢 钠, 以 观 察 不 同 的 磷 源 对 罗 非 鱼 的 生 长 性 能 尧 消 化 率 和 体 成 分 的 影 响, 为 磷 源 在 罗 非 鱼 饲 料 中 的 合 理 应 用 提 供 参 考 遥 陈 冰 潘 庆 郑 卫 川 毕 英 佐 27 1 材 料 与 方 法 1.1 试 验 饲 粮 试 验 共 设 4 组 饲 粮 袁 分 别 是 在 基 础 料 中 添 加 不 同 的 磷 源 袁 第 1 组 渊 D1 冤 为 基 础 料 添 加 磷 酸 二 氢 钙 尧 第 2 组 渊 D2 冤 添 加 磷 酸 氢 钙 尧 第 3 组 (D3) 添 加 磷 酸 二 氢 钾 尧 第 4 组 (D4) 是 添 加 磷 酸 二 氢 钠 遥 各 组 饲 粮 原 料 全 部 粉 碎 过 40 目 筛 袁 均 匀 混 合 袁 挤 压 制 成 直 径 为 1.2 耀 1.5 mm 的 颗 粒 袁 饲 料 于 20 益 的 冰 箱 中 保 存 袁 备 用 遥 试 验 饲 粮 配 方 及 营 养 水 平 见 表 1 遥 表 1 组 别 原 料 组 成 渊 豫 冤 基 础 饲 粮 纤 维 素 磷 酸 二 氢 钙 磷 酸 氢 钙 磷 酸 二 氢 钾 磷 酸 二 氢 钠 碳 酸 钙 营 养 成 分 水 分 渊 豫 冤 灰 分 渊 豫 冤 粗 蛋 白 渊 豫 冤 粗 脂 肪 渊 豫 冤 钙 渊 豫 冤 磷 渊 豫 冤 Ca P 总 能 渊 MJ/kg 冤 试 验 饲 粮 配 方 及 营 养 水 平 D D D D 注 院 基 础 饲 粮 组 成 为 渊 % 冤 院 豆 粕 35 尧 花 生 粕 12 尧 麦 麸 11 尧 次 粉 30 尧 酵 母 粉 3 尧 豆 油 0.5 尧 矿 物 质 预 混 料 0.3 尧 维 生 素 预 混 料 0.5 尧 三 氧 化 二 铬 0.03 遥 1.2 试 验 管 理 试 验 罗 非 鱼 由 番 禺 鱼 苗 厂 提 供 袁 平 均 体 长 2cm 袁 平 均 体 重 0.30 g 袁 鱼 体 健 康 袁 在 室 内 流 水 饲 养 系 统 水 族 箱 中 驯 养 袁 持 续 充 氧 遥 驯 养 12 d 后 选 平 均 体 重 约 1.05 g 的 360 尾 罗 非 鱼 随 机 分 成 4 组, 每 组 3 个 重 复, 每 个 重 复 30 尾 鱼 遥 在 试 验 期 间 袁 每 天 喂 料 4 次 袁 喂 料 时 间 分 别 为 8 院 00 尧 11 院 30 尧 14 院 30 和 17 院 30, 日 投 喂 率 为 罗 非 鱼 体 重 的 6% 遥 试 验 采 用 流 水 系 统 袁 保 持 充 氧 遥 水 族 箱 水 深 约 0.6 m,ph 值 保 持 在 7.5 左 右, 水 温 为 19.5 耀 28.0 益,NH 4 + 浓 度 <0.005 mg/l, 溶 解 氧 浓 度 >4.0 mg/l 遥 光 照 为 自 然 光 源 袁 光 照 时 间 为 12 h/d 遥 于 投 喂 饲 料 的 第 22 d 开 始 用 虹 吸 管 收 集 粪, 挑 选 完 整 包 膜 的 粪 条 袁 于 105 益 烘 干 15 min 后 采 用 55 益 烘 干 袁 保 存 在 20 益 冰 箱 中 袁 备 测 袁 连 续 收 集 粪 便 3 周 遥 试 验 期 为 8 周 遥

28 陈 冰 等 : 不 同 磷 源 对 奥 尼 罗 非 鱼 幼 鱼 生 长 性 能 的 影 响 水 产 养 殖 1.3 样 品 采 集 饲 养 结 束 时, 鱼 体 空 腹 24 h 后, 称 终 末 体 重 遥 随 机 从 每 箱 取 4 尾 鱼, 立 即 处 死, 剪 碎,105 益 烘 干 15 min 后 再 经 55 益 烘 干, 制 备 全 鱼 样 品 做 体 常 规 营 养 成 分 分 析 遥 每 箱 另 随 机 取 3 尾 鱼, 用 MS222 麻 醉 后 称 体 重, 测 体 长 遥 每 箱 随 机 取 8 尾 鱼 用 微 波 炉 加 热 至 鱼 体 熟 化 后, 分 离 脊 柱, 用 乙 醇 和 苯 混 合 液 (V 乙 醇 V 苯 越 2 1) 浸 泡 48 h, 再 105 益 烘 干, 捣 碎 后 去 脂 制 备 脱 脂 干 骨 遥 1.4 样 品 分 析 饲 料 和 全 鱼 中 的 水 分 尧 灰 分 尧 粗 蛋 白 尧 粗 脂 肪 尧 钙 尧 总 磷 和 鱼 粪 中 的 粗 蛋 白 尧 钙 尧 磷 含 量 均 按 国 标 方 法 进 行 测 定 [11] 袁 能 量 用 半 自 动 氧 氮 式 测 热 计 进 行 测 定 遥 消 化 率 测 定 采 用 间 接 法 袁 用 原 子 吸 收 光 谱 法 测 定 饲 料 和 粪 中 的 铬 含 量 遥 特 定 生 长 率 (%/d)=(ln 终 末 平 均 体 重 ln 初 始 平 均 体 重 )/ 饲 养 天 数 曰 饲 料 效 率 (%)= 体 重 总 增 加 量 / 饲 料 总 投 喂 量 曰 表 观 消 化 率 (%)=1( 粪 便 中 养 分 含 量 / 粪 便 中 指 示 剂 含 量 ) 伊 ( 饲 料 中 指 示 剂 含 量 / 饲 料 中 养 分 含 量 ) 曰 肥 满 度 = 体 重 / 体 长 的 三 次 方 遥 1.5 数 据 统 计 分 析 试 验 结 果 采 用 平 均 数 依 标 准 误 差 渊 M 依 SE 冤 表 示 袁 经 方 差 分 析 后 有 显 著 差 异 再 做 Duncan's 多 重 比 较 进 行 组 间 差 异 显 著 性 比 较 遥 2 结 果 2.1 添 加 不 同 磷 源 饲 料 组 罗 非 鱼 的 生 长 性 能 ( 见 表 2) 表 2 各 饲 料 组 罗 非 鱼 的 特 定 生 长 率 及 饲 料 效 率 (M 依 SE,n=3) 饲 料 组 D1 D2 D3 D4 初 始 平 均 体 重 渊 g/ 尾 冤 1.03 依 依 依 依 0.01 终 末 平 均 体 重 渊 g/ 尾 冤 4.79 依 依 依 依 0.19 耗 料 量 渊 g 冤 依 依 依 依 8.03 总 增 重 渊 g 冤 依 1.45 a 依 3.61 b 依 a 依 8.38 a 特 定 生 长 率 渊 %/d 冤 2.75 依 0.01 a 2.07 依 0.04 b 2.67 依 0.15 a 2.74 依 0.07 a 注 院 同 列 数 据 肩 标 字 母 相 同 的 表 示 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 袁 不 同 字 母 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 下 表 同 遥 饲 料 效 率 渊 % 冤 依 1.00 a 依 1.01 b 依 4.01 a 依 2.02 a 由 表 2 可 见 袁 罗 非 鱼 的 总 增 重 尧 特 定 生 长 率 和 饲 料 效 率 均 以 D2 组 最 低 袁 且 显 著 低 于 D1 组 尧 D3 组 尧 D4 组 (P<0.05) 袁 但 D1 组 尧 D3 组 尧 D4 组 之 间 无 显 著 性 差 异 (P>0.05) 遥 2.2 添 加 不 同 磷 源 饲 料 组 罗 非 鱼 的 表 观 消 化 率 ( 见 表 3) 表 3 各 组 罗 非 鱼 的 粗 蛋 白 钙 磷 表 观 消 化 率 (%)(M 依 SE,n=3) 饲 料 组 D1 D2 D3 D4 粗 蛋 白 消 化 率 依 0.86 a 依 0.98 b 依 1.56 b 依 2.29 b 钙 消 化 率 依 8.54 a 依 3.56 ab 依 4.06 ab 依 6.50 b 磷 消 化 率 依 6.47 a 依 2.58 b 依 7.42 b 依 7.76 b D1 组 的 粗 蛋 白 和 磷 的 表 观 消 化 率 均 显 著 高 于 D2 组 尧 D3 组 尧 D4 组 渊 P<0.05 冤, 但 D2 组 尧 D3 组 尧 D4 组 之 间 无 显 著 性 差 异 遥 钙 的 表 观 消 化 率 以 D1 组 最 高 袁 并 且 D1 组 显 著 高 于 D4 组 渊 P<0.05 冤 遥 2.3 添 加 不 同 磷 源 饲 料 组 全 鱼 的 肥 满 度 和 营 养 成 分 渊 见 表 4 冤 表 4 组 别 肥 满 度 (g/cm 3 ) 水 分 ( 豫 ) 灰 分 ( 豫 ) 粗 蛋 白 ( 豫 ) 粗 脂 肪 ( 豫 ) 钙 ( 豫 ) 磷 ( 豫 ) 各 饲 料 组 罗 非 鱼 全 鱼 的 肥 满 度 和 营 养 成 分 D1 3. 依 0.06 ab 依 依 0.73 a 依 依 0.93 a 3.90 依 0.14 a 4.60 依 0.19 a D 依 0.11 a 依 依 0.32 c 依 依 0.42 b 2.96 依 0.09 b 3.27 依 0.07 c D 依 0.06 b 依 依 0.46 ab 依 依 0.82 a 3.78 依 0.21 a 4.32 依 0.16 ab D 依 0.14 a 依 依 0.78 b 依 依 1.60 c 3.73 依 0.20 a 4.00 依 0.21 b 28 各 饲 料 组 罗 非 鱼 的 肥 满 度 以 D4 组 最 高 袁 且 显 著 高 于 D3 组 渊 P<0.05 冤 遥 体 水 分 和 粗 蛋 白 含 量 各 饲 料 组 之 间 无 显 著 差 异 渊 P>0.05 冤 遥 灰 分 尧 磷 含 量 以 D1 组 最 高 袁 并 且 D1 组 显 著 高 于 D4 组 渊 P<0.05 冤 曰 同 时 D4 组 显 著 高 于 D2 组 渊 P<0.05 冤 遥 体 粗 脂 肪 含 量 以 D2 组 最 高 袁 并 且 D2 组 显 著 高 于 D4 组 渊 P<0.05 冤 曰 同 时 D4 组 显 著 高 于 D1 组 尧 D3 组 渊 P<0.05 冤 遥 体 钙 含 量 以 D2 最 低 袁 且 显 著 低 于 D1 组 尧 D3 组 尧 D4 组 渊 P<0.05 冤 曰 但 D1 组 尧 D3 组 尧 D4 组 之 间 无 显 著 性 差 异 渊 P>0.05 冤 遥 2.4 添 加 不 同 磷 源 饲 料 组 的 罗 非 鱼 的 骨 骼 性 状 渊 见 表 5 冤 表 5 组 别 钙 磷 各 饲 料 组 的 罗 非 鱼 脱 脂 干 骨 的 骨 骼 性 状 (%)(M 依 SE,n=3) D 依 依 0.29 a D 依 依 0.31 b D 依 依 0.18 a D 依 依 0.82 ab 由 表 5 可 见 袁 各 饲 料 组 间 罗 非 鱼 的 脱 脂 干 骨 钙 含 量 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 脱 脂 干 骨 的 磷 含 量 以 D2 组 最 低 袁 且 显 著 低 于 D1 组 尧 D3 组 渊 P<0.05 冤 袁 但 D1 组 尧 D3 组 之 间 无 显 著 差 异 渊 P>0.05 冤 遥 种 磷 源 的 相 对 利 用 率 以 表 2 中 特 定 生 长 率 为 评 价 指 标 袁 磷 酸 二 氢 钙 尧 磷 酸 二 氢 钠 尧 磷 酸 二 氢 钾 尧 磷 酸 氢 钙 的 相 对 生 物 学 效 率 分 别 为 100% 尧 99% 尧 97% 尧 75% 遥 3 讨 论

29 水 产 养 殖 陈 冰 等 : 不 同 磷 源 对 奥 尼 罗 非 鱼 幼 鱼 生 长 性 能 的 影 响 磷 酸 一 钙 袁 又 称 磷 酸 二 氢 钙 袁 含 磷 22% 左 右 尧 钙 15% 左 右 袁 利 用 率 比 磷 酸 二 钙 或 磷 酸 三 钙 好 袁 最 适 合 用 于 水 产 动 物 饲 料 中 遥 磷 酸 氢 钙 袁 含 磷 18% 以 上 尧 钙 21% 以 上 遥 磷 酸 二 氢 钾 含 磷 22% 以 上 尧 钾 28% 以 上 袁 水 溶 性 好 袁 易 为 动 物 吸 收 利 用 袁 可 同 时 提 供 磷 和 钾 袁 适 当 使 用 有 利 于 动 物 体 内 的 电 解 质 平 衡 袁 促 进 动 物 生 长 发 育 和 提 高 生 产 性 能 遥 磷 酸 二 氢 钠 含 磷 约 % 尧 钠 约 19% 袁 因 其 不 含 钙 袁 在 钙 要 求 低 的 饲 料 中 可 充 当 磷 源 袁 在 调 整 高 钙 尧 低 磷 配 方 时 袁 不 会 改 变 钙 的 比 例 [12] 遥 从 本 试 验 结 果 来 看 袁 饲 料 中 添 加 适 当 的 无 机 磷 可 促 进 罗 非 鱼 的 生 长 和 提 高 饲 料 的 利 用 率 袁 这 与 对 其 它 一 些 动 物 选 择 磷 源 的 研 究 结 果 相 同 [9 尧 10 尧 13] 遥 宋 义 晖 等 (1997) 在 研 究 高 产 鲤 鱼 养 殖 中 发 现 袁 在 饲 料 中 添 加 磷 酸 氢 钙 对 保 证 鲤 鱼 快 速 生 长 发 育 和 维 持 正 常 生 理 活 动 起 着 十 分 重 要 的 作 用 [9] 遥 袁 万 安 等 渊 2000 冤 通 过 磷 酸 氢 钙 替 代 磷 酸 二 氢 钙 发 现 袁 随 着 磷 酸 氢 钙 比 例 的 增 加 袁 长 薄 鳅 生 长 率 逐 渐 下 降 袁 饲 料 利 用 率 明 显 降 低 袁 而 磷 酸 二 氢 钙 更 能 促 进 长 薄 鳅 生 长 [10] 遥 尹 兆 正 等 渊 2002 冤 研 究 了 4 种 不 同 化 学 形 式 无 机 磷 源 渊 磷 酸 一 钙 尧 磷 酸 二 钙 尧 磷 酸 三 钙 尧 磷 矿 石 细 粒 冤 的 生 物 学 效 价 袁 发 现 以 磷 酸 一 钙 作 为 肉 雏 鸡 日 粮 的 无 机 磷 源 利 用 效 果 最 好 袁 磷 酸 二 钙 尧 磷 酸 三 钙 也 是 雏 鸡 较 好 的 磷 源 袁 而 磷 矿 石 细 粒 则 是 不 良 磷 源 [13] 遥 某 一 无 机 磷 源 生 物 学 效 价 的 数 值 大 小 受 评 定 指 标 的 影 响 袁 因 而 不 同 化 学 形 式 无 机 磷 源 生 物 学 效 价 之 间 的 比 较 必 须 选 用 相 同 的 评 定 指 标 遥 在 本 研 究 采 用 生 长 性 能 中 的 特 定 生 长 率 为 指 标 来 评 定 其 生 物 学 效 价 袁 结 果 表 明 袁 以 磷 酸 二 氢 钙 作 为 罗 非 鱼 的 无 机 磷 源 利 用 效 果 较 好 袁 磷 酸 二 氢 钠 尧 磷 酸 二 氢 钾 次 之 袁 而 磷 酸 氢 钙 的 利 用 效 果 则 较 差 遥 无 机 磷 主 要 在 小 肠 中 吸 收 遥 影 响 磷 吸 收 程 度 的 因 素 很 多 袁 主 要 有 饲 料 中 磷 的 形 式 尧 钙 磷 的 比 值 尧 肠 道 的 ph 值 尧 维 生 素 D 的 促 进 作 用 等 遥 当 磷 摄 入 量 多 于 排 出 量 而 形 成 正 平 衡 时 袁 磷 在 骨 中 沉 积 袁 促 进 骨 的 生 成 袁 通 过 调 节 机 制 维 持 血 清 中 磷 的 正 常 浓 度 袁 对 动 物 的 健 康 和 生 产 起 着 十 分 重 要 的 作 用 [14] 遥 鱼 类 和 其 它 高 等 脊 椎 动 物 一 样 袁 存 在 磷 的 恒 稳 机 制 遥 鱼 类 可 以 通 过 调 整 肠 道 的 吸 收 袁 尿 磷 排 放 和 骨 骼 的 沉 积 等 机 制 袁 来 适 应 低 磷 和 高 磷 的 摄 入 袁 不 过 对 鱼 类 磷 的 生 理 调 节 机 制 还 没 完 全 弄 清 楚 袁 而 且 现 在 还 不 知 道 为 了 使 鱼 类 保 持 健 康 和 良 好 的 生 长 袁 是 否 必 须 使 鱼 的 骨 骼 达 到 最 大 矿 化 程 度 [15] 遥 罗 非 鱼 是 杂 食 性 鱼 类 袁 有 较 发 达 的 胃 袁 其 胃 腺 细 胞 是 典 型 的 泌 酸 细 胞, 能 分 泌 胃 酸, 高 浓 度 的 胃 酸 能 使 胃 液 的 ph 值 小 于 2.0, 激 活 胃 蛋 白 酶, 促 进 蛋 白 质 的 消 化 遥 罗 非 鱼 的 肠 很 长, 至 少 是 体 长 的 6 倍 [16], 增 加 营 养 物 质 在 肠 道 中 的 停 留 时 间 袁 能 增 大 消 化 酶 与 营 养 物 质 29 的 接 触 面 袁 提 高 养 分 的 消 化 率 遥 本 试 验 结 果 表 明 袁 磷 酸 二 氢 钙 对 罗 非 鱼 的 蛋 白 质 利 用 率 及 钙 尧 磷 的 消 化 率 都 有 显 著 提 高 袁 效 果 均 高 于 其 它 3 组 曰 磷 酸 二 氢 钙 组 鱼 体 粗 脂 肪 含 量 最 低 袁 钙 尧 磷 含 量 最 高 曰 脱 脂 干 骨 中 钙 尧 磷 含 量 也 较 高 遥 其 原 因 可 能 是 磷 酸 二 氢 钙 这 种 化 学 形 式 中 的 磷 易 被 罗 非 鱼 吸 收 和 利 用 袁 并 促 进 对 蛋 白 质 尧 钙 尧 磷 的 吸 收 和 利 用 袁 从 而 提 高 了 鱼 体 的 生 产 性 能 遥 而 磷 酸 氢 钙 组 鱼 体 灰 分 含 量 最 低 袁 脂 肪 含 量 最 高 袁 钙 尧 磷 的 沉 积 量 最 低 遥 可 见 袁 对 磷 酸 氢 钙 这 种 化 学 形 式 的 低 利 用 率 对 鱼 的 体 成 分 影 响 是 多 方 面 的 遥 参 考 文 献 1 李 爱 杰. 水 产 动 物 营 养 与 饲 料 学 [M]. 北 京 : 中 国 农 业 出 版 社, ~62 2 Maguire GB, Hume ID. Astudy of the nutritional requirements of school prawns Metapenaens macleayi (Haswell) in some Australian brackish water farming ponds[j]. Aquaculture, 1982,29:261 耀 Edwin H, David L. Dietary calcium and phosphorus requirement of oreochromis aureus reared in calciumfree water [J]. Aquaculture, 1987,64:267 耀 徐 昌 义. 饲 料 中 磷 含 量 对 尼 罗 罗 非 鱼 几 项 生 理 指 标 的 影 响 [J]. 西 南 农 业 学 报,1990(1):17 5 Lovell R T. Dietary phosphorus requiremext of channel catfish (Ictalurus punctatus)[j]. Trans Am. Fish Soc.,1978,107 :617 耀 Ogino C, Takeuchi L, Takeda H, et al. Availability of dietary phosphorus in carp and rainbow trout. Bull [J]. Jpn. Soc. Sci. Fish. 1979,45:1 527 耀 Eya JC, Lovell RT. Available phosphorus requirements of foodsize channel catfish (Ictalurus Punctatus) fed practical diets in ponds[j]. Aquac., 1997,154:285 耀 叶 军, 贺 锡 勤. 异 育 银 卿 对 鱼 粉 等 11 种 饲 料 中 磷 的 利 用 率. 海 洋 与 湖 沼,1991,22(3):233 耀 宋 义 晖, 高 世 明. 磷 酸 氢 钙 在 高 产 鲤 鱼 养 殖 中 的 应 用 [J]. 河 南 水 产,1997,2(12):12 10 袁 万 安. 磷 酸 氢 钙 在 长 薄 鳅 养 殖 生 产 中 的 应 用 试 验 探 讨 [J]. 饲 料 工 业,2000,21(9):23 耀 崔 淑 文, 陈 必 芳. 饲 料 标 准 汇 编 [M]. 中 国 标 准 出 版 社, 耀 王 成 章, 王 恬. 饲 料 学 [M]. 北 京 : 中 国 农 业 出 版 社, 耀 尹 兆 正, 王 忠 良, 潘 根 长. 不 同 化 学 形 式 的 无 机 磷 源 在 肉 雏 鸡 体 内 生 物 学 效 价 的 研 究 [J]. 浙 江 大 学 学 报 ( 农 业 与 生 命 科 学 版 ),2002, 28(1):74 耀 周 顺 伍. 动 物 生 物 化 学 ( 第 三 版 )[M]. 北 京 : 中 国 农 业 出 版 社, 耀 Bureau D P,Cho C Y.Phosphorus utilization by rainbow trout (Oncorhynchus mykiss):estimation of dissolved phosphorus waste output[j]. Aquac.,1999,179:128 耀 李 家 乐, 钱 荣 华. 罗 非 鱼 类 的 食 物 和 营 养 [J]. 浙 江 海 洋 学 院 学 报, 2001,20(3):233 耀 Onishi T,Suzuki M,Takcuchi M. Changes in carp hepatopancreatic enzyme activities with dietary phosphorus leves.bull Jpn Soc Sci Fish, 1981,47:353 耀 Rodehutscord M.Response of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) growing from gto supplements of dibasic sodium phosphate in apurified diet[j]. Aquac.,1996,126:328 耀 Skonberg DI,Yogev L,Hardy RW,et al. Melabolic response to dietary phosphorus intake in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) [J].Aquaculture,1997,157:15 耀 24 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

30 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 试 验 研 究 不 同 铬 源 在 高 添 加 水 平 下 对 肉 仔 鸡 生 长 性 能 和 组 织 铬 含 量 的 影 响 孟 海 燕, 北 京 爱 德 利 都 饲 料 科 技 开 发 有 限 公 司,100069, 北 京 市 右 安 门 外 东 滨 河 路 4 号 A516 者 苏 晓 鸥 王 建 勋 刘 世 杰 李 慧, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 收 稿 日 期 : 孟 海 燕 苏 晓 鸥 王 建 勋 刘 世 杰 李 慧 摘 要 在 1 耀 21 日 龄 AA 肉 仔 鸡 日 粮 中 添 加 高 水 平 (8 mg/kg) 的 5 种 铬 源 组 成 试 验 组 日 粮, 对 照 组 日 粮 不 添 加 铬, 进 行 饲 养 试 验, 研 究 铬 在 高 添 加 水 平 下, 不 同 的 铬 源 对 肉 仔 鸡 生 长 性 能 的 影 响 结 果 表 明 : 淤 CrY 对 21 日 龄 肉 仔 鸡 的 日 增 重 日 采 食 量 和 料 重 比 没 有 不 良 影 响 (P 跃 0.05), 但 CrPic CrNic CrMet 和 CrCl 3 分 别 使 肉 仔 鸡 的 日 增 重 下 降 8.06% 16.46% 9.06% 41.36%(P 约 0.05);CrMet 使 肉 仔 鸡 日 采 食 量 增 加 豫 (P<0.05), 而 CrCl 3 使 肉 仔 鸡 日 采 食 量 降 低 豫 ;CrPic CrNic CrMet 和 CrCl 3 使 肉 仔 鸡 的 料 重 比 升 高 12.7 豫 20 豫 22 豫 豫 (P<0.05) 可 见,CrMet 和 CrCl 3 对 肉 仔 鸡 生 长 性 能 影 响 最 大, 其 次 为 CrNic 和 CrPic 于 以 CrCl 3 为 铬 源,8 mg/kg 能 显 著 增 加 21 日 龄 肉 仔 鸡 的 腹 脂 率 63.01% (P 约 0.05), 其 它 4 种 铬 源 对 21 日 龄 肉 仔 鸡 的 腹 脂 率 没 有 显 著 影 响 (P 跃 0.05), 表 明 高 添 加 水 平 条 件 下 有 机 铬 对 肉 仔 鸡 腹 脂 蓄 积 的 影 响 比 无 机 铬 小 盂 在 高 添 加 水 平 下, 铬 源 对 0 耀 21 日 龄 肉 仔 鸡 的 肝 脏 铬 含 量 肾 脏 铬 含 量 胫 骨 铬 含 量 有 不 同 程 度 的 影 响 1 材 料 和 方 法 关 键 词 铬 ; 肉 仔 鸡 ; 高 添 加 水 平 ; 生 长 性 能 ; 组 织 中 图 分 类 号 S 动 物 尧 饲 粮 及 管 理 采 用 完 全 随 机 设 计, 将 360 只 1 日 龄 商 品 代 AA 肉 仔 鸡 随 机 分 成 6 组, 每 组 设 3 个 重 复, 每 个 重 复 20 只 鸡, 公 母 各 半, 饲 养 于 不 锈 钢 肉 鸡 笼 内 遥 饲 养 管 理 按 照 叶 AA 肉 仔 鸡 饲 养 管 理 手 册 曳 进 行 遥 试 验 期 21 d, 自 由 采 食 和 饮 水 遥 在 试 验 结 束 时 以 1 个 重 复 笼 作 为 单 位 称 量 鸡 的 空 腹 体 重 和 耗 料 量, 并 统 计 鸡 死 亡 率 遥 采 用 单 因 素 处 理 安 排 遥 以 推 荐 添 加 剂 量 (0.2 mg/kg) 的 40 倍 (8 mg/kg) 作 为 日 粮 中 铬 的 添 加 量 ( 高 水 平 添 加 ), 5 种 铬 源 为 吡 啶 甲 酸 铬 (CrPic) 尧 烟 酸 铬 (CrNic) 尧 酵 母 铬 (CrY) 尧 蛋 氨 酸 铬 (CrMet) 尧 氯 化 铬 (CrCl 3 ), 共 组 成 5 个 试 验 组, 对 照 组 不 添 加 铬, 饲 喂 玉 米 要 豆 粕 型 的 基 础 饲 粮, 基 础 饲 粮 组 成 及 营 养 水 平 见 表 1 遥 1.2 样 品 的 采 集 与 制 备 在 试 验 结 束 时, 每 个 重 复 笼 抽 取 2 只 与 平 均 体 重 相 近 的 试 鸡 屠 宰, 公 母 各 1 只, 立 即 取 出 肝 脏 尧 肾 脏 和 胫 骨 袁 剥 离 腹 部 脂 肪 并 称 重 记 录 遥 肝 脏 尧 肾 脏 和 胫 骨 在 原 20 益 条 件 下 冻 存 遥 每 个 重 复 的 2 只 鸡 的 组 织 合 并 为 1 个 样 品 进 行 分 析 遥 30 原 料 玉 米 豆 粕 玉 米 蛋 白 粉 油 脂 磷 酸 氢 钙 食 盐 石 粉 赖 氨 酸 DL 蛋 氨 酸 50% 氯 化 胆 碱 抗 氧 化 剂 15% 金 霉 素 微 量 元 素 表 1 基 础 饲 粮 组 成 及 营 养 水 平 组 成 渊 % 冤 营 养 水 平 代 谢 能 (MJ/kg) 粗 蛋 白 (%) 蛋 能 比 (g/mj) 亚 油 酸 (%) 赖 氨 酸 (%) 蛋 氨 酸 (%) 蛋 氨 酸 + 胱 氨 酸 (%) 钙 (%) 非 植 酸 磷 (%) 铬 (mg/kg) 注 院 1. 微 量 元 素 向 每 千 克 饲 粮 提 供 VA IU 尧 VD IU 尧 VE64000IU 尧 VK 3 8g 尧 VB 1 4g 尧 VB 6 8g 尧 VB 12 40mg 尧 VH mg 尧 叶 酸 4g 尧 烟 酸 130g 尧 泛 酸 钙 4g 尧 CuSO 4 窑 5H 2O1.596g 尧 FeSO 4 窑 H 2O 26.76g 尧 ZnSO 4 窑 7H 2O14.69 g 尧 MnSO 4 窑 H 2O16 g 尧 KI 0.04 g 尧 Na 2SeO g 尧 沸 石 g 曰 2. 粗 蛋 白 尧 铬 为 实 测 值 遥 1.3 样 品 的 分 析 组 织 样 品 用 浓 硝 酸 和 过 氧 化 氢 通 过 微 波 渊 MPS 2000 CEM Innvators in Microwave Technology 冤 进 行 湿 消 解 后 袁 采 用 石 墨 炉 原 子 吸 收 仪 AAS(Z8200 Polar 鄄 ized Zeeman Aeomic Absorption Spectrotometer, premi 鄄 um 芋,4133 冤 测 定 分 析 其 中 的 铬 含 量 遥 1.4 数 据 统 计 分 析 利 用 SPSS 11.5 系 统 中 的 ONE WAY ANOVA 程 序 进 行 单 因 素 分 析, 每 个 重 复 笼 为 1 个 试 验 单 元 袁 采 用 LSD 法 比 较 平 均 数 间 的 差 异 显 著 性 遥 2 结 果 与 讨 论

31 试 验 研 究 孟 海 燕 等 : 不 同 铬 源 在 高 添 加 水 平 下 对 肉 仔 鸡 生 长 性 能 和 组 织 铬 含 量 的 影 响 2.1 高 添 加 水 平 下 不 同 铬 源 对 肉 仔 鸡 生 长 性 能 和 腹 脂 率 的 影 响 渊 见 表 2 冤 表 2 铬 源 对 照 组 CrPic 组 CrNic 组 CrY 组 CrMet 组 CrCl 3 组 高 添 加 水 平 下 不 同 铬 源 对 肉 仔 鸡 生 长 性 能 的 影 响 日 增 重 (g/ 只 ).82 依 0.13 a 依 0.28 遭 依 0.62 c 24.9 依 0.55 a 依 0.38 b 依 0.32 d 日 采 食 量 (g/ 只 ) 依 0.1 b 依 1.47 b 38.7 依 1.1 b 依 1.64 b 依 0.78 a 依 1.61 c 料 重 比 1.5 依 0.01 b 1.69 依 0.08 a 1.8 依 0.06 a 1.6 依 0.08 b 1.83 依 0.04 a 2.12 依 0.14 c 注 院 同 列 数 据 肩 标 不 同 者 表 示 差 异 显 著 渊 P 约 0.05 冤 遥 下 表 同 遥 腹 脂 率 (%) 0.73 依 0.01 b 0.69 依 0.03 b 0.87 依 0.08 b 0.75 依 0.05 b 0.68 依 0.14 b 1.19 依 0.16 a 由 表 2 可 见, 在 高 添 加 水 平 下,CrY 对 肉 仔 鸡 的 日 增 重 尧 日 采 食 尧 料 重 比 和 腹 脂 率 均 无 显 著 影 响 (P 跃 0.05), 而 其 它 4 种 铬 源 CrPic 尧 CrNic 尧 CrMet 尧 CrCl 3 分 别 使 肉 仔 鸡 的 日 增 重 下 降 8.06% 尧 16.46% 尧 9.06% 尧 41.36% (P 约 0.05);CrPic 和 CrNic 对 肉 仔 鸡 日 采 食 量 无 显 著 影 响 (P 跃 0.05), 而 CrMet 增 加 肉 仔 鸡 日 采 食 量 豫 (P< 0.05),CrCl 3 降 低 肉 仔 鸡 日 采 食 量 豫 (P<0.05);Cr 鄄 Pic 尧 CrNic 尧 CrMet 和 CrCl 3 分 别 使 肉 仔 鸡 的 料 重 比 升 高 12.7% 尧 20 豫 尧 22 豫 尧 豫 (P<0.05); 由 此 推 测,CrMet 显 著 增 加 肉 仔 鸡 日 采 食 量 的 原 因 可 能 是 院 CrMet 分 子 中 的 蛋 氨 酸 发 挥 了 促 进 采 食 作 用, 缓 解 了 部 分 高 含 量 铬 对 生 长 性 能 的 毒 性 作 用 ; 而 无 机 CrCl 3 显 著 降 低 肉 仔 鸡 日 采 食 量, 表 明 高 添 加 水 平 下 无 机 CrCl 3 抑 制 肉 仔 鸡 采 食 机 制, 进 而 显 著 降 低 肉 仔 鸡 的 日 增 重 ; 无 机 氯 化 铬 在 高 添 加 水 平 下 使 肉 仔 鸡 的 腹 脂 率 增 加 豫 (P<0.05), 而 其 它 4 种 有 机 铬 不 影 响 肉 仔 鸡 的 腹 脂 率, 表 明 有 机 铬 对 肉 仔 鸡 腹 脂 蓄 积 的 危 害 较 无 机 铬 小 遥 本 试 验 过 程 中 袁 通 过 肉 眼 观 察 可 发 现 袁 除 了 酵 母 铬 组 外 袁 其 它 4 种 铬 源 组 肉 仔 鸡 与 对 照 组 肉 仔 鸡 在 个 体 大 小 上 存 在 显 著 差 异 袁 表 现 为 生 长 受 阻 袁 通 过 表 2 试 验 数 据 的 统 计 学 分 析 袁 也 验 证 了 这 一 结 果 遥 日 粮 中 添 加 铬 对 肉 仔 鸡 产 生 毒 性 作 用 的 剂 量 范 围 目 前 尚 未 确 定 袁 相 关 的 研 究 报 道 较 少, 相 关 的 数 据 也 存 在 差 异 遥 罗 绪 刚 等 (1999) 给 AA 肉 仔 鸡 日 粮 分 别 添 加 氯 化 铬 和 酵 母 铬, 在 日 粮 中 添 加 10 mg/kg 铬 时, 添 加 铬 组 肉 仔 鸡 的 日 增 重 与 日 采 食 量 均 高 于 对 照 组 (P 约 0.05) 曰 而 日 粮 中 添 加 20 mg/kg 铬 时 对 肉 仔 鸡 的 生 长 有 不 良 影 响 遥 杨 建 成 (2000) 试 验 结 果 表 明, 饲 料 中 分 别 以 氯 化 铬 和 吡 啶 甲 酸 铬 形 式 添 加 2.5 mg/kg 铬 时 均 引 起 肉 仔 鸡 的 死 亡 率 升 高 (P 约 0.05), 造 成 这 种 结 果 差 异 的 原 因 可 能 在 于 基 础 日 粮 铬 含 量 的 不 同, 以 及 不 同 的 铬 源 形 式 尧 不 同 的 试 验 条 件, 日 粮 添 加 铬 对 肉 仔 鸡 腹 脂 率 的 影 响 研 究 的 结 果 也 不 一 致 遥 微 量 元 素 铬 曾 一 度 被 认 为 是 有 毒 元 素 遥 事 实 上, 根 据 Venchiknov 双 相 曲 线, 将 某 一 元 素 划 定 为 有 毒 元 31 素 在 逻 辑 上 是 错 误 的, 因 为 所 有 元 素 在 一 定 范 围 内 均 有 毒 性, 这 主 要 取 决 于 与 生 物 物 质 接 触 的 浓 度 遥 本 试 验 中 袁 高 添 加 水 平 下 酵 母 铬 组 与 对 照 组 的 日 增 重 尧 日 采 食 量 尧 料 重 比 尧 腹 脂 率 无 显 著 差 异, 这 说 明 高 水 平 铬 引 起 的 不 良 毒 性 反 应 除 了 与 添 加 水 平 有 关 以 外, 还 与 不 同 的 铬 源 形 式 有 关 遥 这 种 不 同 铬 源 在 相 同 高 添 加 水 平 下 引 起 不 同 的 不 良 影 响 的 差 异, 是 否 仅 与 其 化 学 形 式 有 关, 还 是 与 因 化 学 形 式 不 同 而 造 成 的 在 消 化 道 内 吸 收 利 用 程 度 不 同 有 关, 尚 待 进 一 步 研 究 遥 在 实 际 饲 料 生 产 加 工 过 程 中 袁 微 量 元 素 因 为 量 少 而 往 往 容 易 在 加 工 过 程 中 过 量 添 加 袁 这 样 不 可 避 免 的 造 成 毒 性 的 增 强 遥 根 据 本 试 验 结 果 可 推 测 袁 在 较 高 添 加 水 平 下 袁 5 种 铬 源 中 酵 母 铬 的 相 对 安 全 性 更 高 袁 在 饲 料 生 产 加 工 过 程 中 即 使 不 慎 过 量 添 加 而 造 成 不 良 影 响 的 可 能 性 也 比 较 小 遥 2.2 高 添 加 水 平 下 不 同 铬 源 对 肉 仔 鸡 肝 尧 肾 尧 胫 骨 铬 含 量 的 影 响 渊 见 表 3 冤 表 3 铬 源 对 照 组 CrPic 组 CrNic 组 CrY 组 CrMet 组 CrCl 3 组 高 添 加 水 平 下 不 同 铬 源 对 肉 仔 鸡 肝 肾 胫 骨 铬 含 量 的 影 响 ( 干 基 计 )( mg/kg) 肝 脏 铬 依 a 依 b 依 c 依 a 依 0.0 b 依 c 肾 脏 铬 0.2 依 葬 依 遭 依 遭 依 糟 依 糟 依 遭 胫 骨 铬 依 葬 依 糟 依 葬 依 遭 依 葬 依 葬 由 表 3 可 见,5 种 铬 源 对 1 耀 21 日 龄 肉 仔 鸡 的 肝 脏 铬 含 量 尧 肾 脏 铬 含 量 尧 胫 骨 铬 含 量 有 不 同 程 度 的 影 响 遥 其 中, 酵 母 铬 对 21 日 龄 肉 仔 鸡 肝 脏 铬 含 量 的 影 响 不 显 著, 而 其 它 4 种 铬 源 在 高 水 平 下 使 肉 仔 鸡 肝 脏 铬 含 量 增 加 豫 尧 豫 尧 豫 尧 豫 (P<0.05) 遥 5 种 铬 源 均 显 著 增 加 肉 仔 鸡 肾 脏 铬 含 量,CrPic 尧 CrNic 尧 CrY 尧 CrMet 尧 CrCl 3 组 比 对 照 组 分 别 增 加 48.89% 尧 豫 尧 24 豫 尧 豫 尧 豫 遥 其 中,CrPic 尧 CrNic 和 CrCl 3 组 肉 仔 鸡 的 肾 脏 铬 含 量 均 显 著 高 于 CrY 和 CrMet 组 遥 CrPic 尧 CrY 组 分 别 增 加 肉 仔 鸡 胫 骨 铬 含 量 77. 豫 尧 豫 渊 P 约 0.05 冤 袁 其 它 3 种 铬 源 对 肉 仔 鸡 胫 骨 铬 含 量 的 沉 积 没 有 显 著 影 响 遥 肉 仔 鸡 日 粮 中 添 加 铬 对 其 组 织 含 量 影 响 的 研 究 报 道 较 少 袁 而 且 由 于 测 定 条 件 和 手 段 的 不 同 袁 组 织 铬 含 量 的 范 围 跨 度 也 较 大 遥 董 小 惠 渊 2000 冤 报 道 袁 在 适 宜 添 加 水 平 下 肉 仔 鸡 的 肝 脏 铬 含 量 低 于 肾 脏 铬 含 量 遥 Anderson Richard 渊 1989 冤 研 究 表 明 袁 火 鸡 日 粮 中 分 别 添 加 0.0 尧 0.10 尧 0.20 mg/kg 铬 袁 肝 脏 铬 和 肾 脏 铬 含 量 均 随 日 粮 铬 含 量 的 增 加 而 呈 线 性 增 加 袁 肾 脏 铬 含 量 高 于 肝 脏 铬 含 量 遥 本 试 验 中 酵 母 铬 在 高 添 加 水 平 下 对 肝 脏

32 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 试 验 研 究 脱 毒 油 茶 粕 饲 料 在 罗 非 鱼 养 殖 中 的 应 用 研 究 周 江 殷 肇 君 目 前, 我 国 对 油 茶 籽 的 利 用 基 本 上 仅 限 于 榨 油 袁 对 榨 油 后 剩 余 的 茶 籽 饼 粕 利 用 还 很 不 够 袁 大 多 直 接 作 清 塘 剂 或 肥 料 使 用 遥 经 检 测 分 析 袁 油 茶 饼 粕 中 富 含 茶 皂 素 尧 蛋 白 质 尧 脂 肪 尧 淀 粉 和 粗 纤 维 等 成 分, 油 茶 籽 粗 蛋 白 含 量 为 12 豫 耀 18% 袁 蛋 白 质 中 含 有 17 种 氨 基 酸 成 分 袁 其 中 7 种 是 人 体 必 需 的 氨 基 酸 遥 然 而 袁 一 方 面 由 于 油 茶 饼 粕 中 含 有 10 豫 耀 15% 的 茶 皂 素 渊 Theas 鄄 aponin 冤 袁 具 有 较 强 的 溶 血 作 用 袁 因 此 在 传 统 水 产 养 殖 业 中 是 作 为 虾 蟹 保 护 剂 和 清 塘 剂 使 用 的 曰 同 时 袁 茶 皂 素 的 存 在 又 使 饲 料 味 苦 且 辛 辣 袁 因 而 限 制 了 油 茶 籽 饼 粕 在 饲 料 工 业 中 的 应 用 袁 造 成 巨 大 的 资 源 浪 费 遥 另 一 方 面 袁 油 茶 粕 中 的 茶 皂 素 具 有 一 定 的 生 物 活 性 袁 在 畜 禽 日 粮 中 低 剂 量 添 加 对 养 殖 效 果 有 一 定 的 影 响 遥 考 虑 到 茶 皂 素 具 有 生 物 活 性 的 特 性 及 采 用 水 浸 提 法 提 取 油 茶 粕 中 茶 皂 素 的 不 彻 底 性 两 方 面 的 情 况 袁 因 此 袁 研 究 脱 毒 后 的 油 茶 粕 饲 用 价 值 和 油 茶 粕 中 残 留 的 低 剂 量 的 茶 皂 素 对 养 殖 对 象 的 影 响 是 本 试 验 的 研 究 出 发 点 遥 本 试 验 利 用 水 浸 提 工 艺 将 油 菜 粕 中 的 茶 皂 素 脱 去 后 添 加 在 水 产 饲 料 中 饲 喂 罗 非 鱼 袁 研 究 其 在 水 产 动 物 中 的 应 用 效 果 遥 1 材 料 与 方 法 1.1 试 验 材 料 油 茶 粕 原 料 由 江 西 省 某 油 脂 食 品 有 限 公 司 提 供 袁 原 料 经 浸 提 工 艺 进 行 脱 脂 处 理 袁 再 经 水 浸 提 工 艺 提 取 茶 皂 素 渊 脱 毒 冤 后 干 燥 尧 粉 碎 备 用 遥 罗 非 鱼 [ 体 重 为 渊 3.19 依 0.39 冤 g] 由 上 海 南 汇 养 殖 场 提 供 遥 1.2 试 验 方 法 试 验 设 计 采 用 单 因 子 浓 度 梯 度 法 设 计 袁 试 验 分 设 6 组 院 对 照 组 尧 5% 油 茶 粕 组 尧 10% 油 茶 粕 组 尧 15% 油 茶 粕 组 尧 20% 油 茶 粕 组 尧 30% 油 茶 粕 组 遥 每 组 设 3 个 重 复 袁 每 个 重 复 15 尾 鱼 遥 根 据 罗 非 鱼 的 营 养 需 求 设 计 饲 料 配 方 袁 饲 料 配 方 及 主 要 营 养 水 平 见 表 1 遥 表 1 饲 料 配 方 及 营 养 水 平 项 目 原 料 组 成 渊 % 冤 玉 米 小 麦 麸 大 豆 粕 大 豆 油 鱼 粉 脱 毒 茶 粕 多 维 多 矿 营 养 水 平 DE 渊 MJ/kg 冤 粗 蛋 白 渊 % 冤 粗 脂 肪 渊 % 冤 粗 纤 维 渊 % 冤 对 照 组 % 油 茶 粕 组 % 油 茶 粕 组 % 油 茶 粕 组 % 油 茶 粕 组 % 油 茶 粕 组 周 江, 中 国 水 产 科 学 院 上 海 渔 业 机 械 研 究 所,200092, 上 海 市 赤 峰 路 63 号 三 号 楼 304 室 殷 肇 君, 上 海 水 产 大 学 收 稿 日 期 : 饲 养 管 理 试 验 水 箱 采 用 自 制 玻 璃 缸 袁 规 格 为 (80 伊 40 伊 50) cm 3 遥 养 殖 用 水 为 自 来 水 袁 经 曝 气 后 使 用 遥 每 天 排 污 并 换 水 1/5 耀 1/3, 日 投 饵 量 约 为 鱼 体 重 的 4% 袁 每 天 8:00 尧 12:00 尧 铬 含 量 无 显 著 影 响 袁 可 能 与 肝 脏 自 身 的 生 理 调 节 机 能 有 关 袁 表 明 酵 母 铬 对 毒 性 排 除 的 反 应 性 最 好 袁 但 是 对 肾 脏 铬 和 胫 骨 铬 含 量 有 显 著 影 响 遥 3 小 结 在 高 添 加 水 平 渊 8mg/kg 冤 的 条 件 下 袁 除 CrY 外 袁 CrPic 尧 CrNic 尧 CrMet 和 CrCl 3 对 肉 仔 鸡 的 生 长 性 能 均 有 不 同 程 度 的 不 良 影 响,CrMet 和 CrCl 3 影 响 最 大 袁 其 32 次 为 CrNic 和 CrPic 遥 根 据 本 试 验 结 果 可 以 推 测, 在 实 际 饲 料 生 产 中,CrY 的 安 全 性 好 ; 在 高 添 加 水 平 (8 mg/kg) 条 件 下 袁 有 机 铬 对 肉 鸡 腹 脂 蓄 积 的 危 害 较 无 机 铬 小 曰 CrY 在 高 添 加 水 平 下 对 肝 脏 铬 含 量 无 显 著 影 响 袁 表 明 酵 母 铬 对 毒 性 排 除 的 反 应 性 最 好 遥 ( 参 考 文 献 29 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

33 试 验 研 究 周 江 等 : 脱 毒 油 茶 粕 饲 料 在 罗 非 鱼 养 殖 中 的 应 用 研 究 16:00 尧 22:00 分 4 次 投 饵 袁 根 据 天 气 尧 水 温 尧 摄 食 情 况 等 作 适 量 调 整 曰 驯 养 2 周 袁 投 喂 基 础 饵 料 袁 鱼 无 异 常 情 况 后 开 始 正 式 试 验 遥 试 验 期 间 水 温 耀 30 益 袁 全 天 充 气 增 氧 遥 各 项 水 质 理 化 指 标 院 ph 值 5.3 耀 7.8 尧 溶 氧 浓 度 逸 5.0 mg/l 尧 NH 3 N 浓 度 <0.5 mg/l 遥 饲 养 期 为 60 d 遥 1.3 酶 液 的 制 备 饲 养 试 验 结 束 后, 用 75% 的 酒 精 擦 拭 鱼 体, 用 剪 刀 沿 鱼 腹 中 线 剪 开, 剔 除 肠 壁 上 的 脂 肪, 漂 洗 消 化 道 内 容 物 遥 分 别 取 肝 胰 腺 尧 肠 道 组 织 块 0.2~1.0 g, 用 生 理 盐 水 漂 洗, 除 去 血 液, 用 滤 纸 拭 干 尧 称 重 后 放 入 5ml 或 10 ml 的 小 烧 杯 内 袁 移 取 0.86% 冷 生 理 盐 水 渊 生 理 盐 水 的 总 体 积 为 组 织 块 的 9 倍 袁 用 移 液 管 或 移 液 器 移 取 总 量 的 2/3 冤 至 烧 杯 中 遥 用 小 剪 刀 快 速 剪 碎 组 织 块 袁 将 剪 碎 的 组 织 倒 入 玻 璃 匀 浆 管 中 袁 再 将 剩 余 的 1/3 冷 生 理 盐 水 冲 洗 残 留 在 烧 杯 中 的 碎 组 织 块, 一 起 倒 入 匀 浆 管 中 匀 浆 渊 在 冰 水 浴 中 进 行 冤 6~8 min, 再 将 制 备 好 的 10% 匀 浆 用 冷 冻 离 心 机 3000 r/min 离 心 10~15 min, 留 取 上 清 液 待 测 肠 道 尧 肝 胰 腺 消 化 酶 活 性 遥 1.4 指 标 检 测 生 长 性 能 指 标 的 测 定 及 计 算 相 对 增 重 率 (%)=( 试 验 末 鱼 体 重 试 验 初 鱼 体 重 )/ 试 验 初 鱼 体 重 曰 饲 料 系 数 = 渊 投 饵 量 残 饵 量 冤 / 渊 试 验 末 鱼 总 体 重 + 试 验 中 死 亡 鱼 体 重 试 验 初 鱼 总 体 重 冤 遥 肉 中 粗 蛋 白 尧 粗 脂 肪 尧 灰 分 尧 水 分 及 氨 基 酸 的 检 测 肌 肉 中 粗 蛋 白 尧 粗 脂 肪 尧 灰 分 尧 水 分 及 氨 基 酸 含 量 的 检 测 按 常 规 方 法 渊 中 华 人 民 共 和 国 国 标 冤 进 行 检 测 分 析 遥 消 化 酶 活 性 的 测 定 蛋 白 酶 活 性 的 测 定 参 照 Folin 酚 试 剂 法, 蛋 白 酶 活 性 单 位 :1ml 酶 液 在 ph 值 为 7.0 尧 40 益 下 保 温 10 min, 每 分 钟 产 生 1 滋 g 酪 氨 酸 所 需 的 酶 量 为 1 个 酶 活 单 位 (U); 淀 粉 酶 活 性 的 测 定 参 照 碘 淀 粉 比 色 法, 淀 粉 酶 活 性 单 位 院 100 ml 血 清 ( 浆 ) 中 的 淀 粉 酶 在 37 益 下 与 底 物 作 用 30 min 水 解 10 mg 淀 粉 所 需 的 酶 量 为 1 个 酶 活 单 位 (U); 脂 肪 酶 活 性 的 测 定 参 照 南 京 建 成 生 物 研 究 所 提 供 的 分 析 方 法 ; 蛋 白 质 的 测 定 参 照 考 马 斯 亮 蓝 法 遥 数 据 处 理 分 析 遥 试 验 数 据 采 用 SPSS 10.0 统 计 软 件 进 行 多 重 比 较 2 试 验 结 果 脱 毒 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 生 长 性 能 的 影 响 不 同 配 比 的 脱 毒 油 茶 粕 饲 料 经 过 60 d 的 喂 养 试 验 袁 罗 非 鱼 的 各 项 生 产 性 能 指 标 渊 包 括 增 重 尧 增 重 率 尧 成 活 率 尧 饲 料 系 数 冤 见 表 2 遥 表 2 项 目 对 照 组 5% 油 茶 粕 组 10% 油 茶 粕 组 15% 油 茶 粕 组 20% 油 茶 粕 组 30% 油 茶 粕 组 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 生 长 性 能 的 影 响 成 活 率 (%) 100 依 依 依 依 依 依 3.87 增 重 (g) 依 0.71 Ba 依 0.98 Ac 依 0.43 Ab 依 1.18 Aa 7.03 依 0.70 Bb 4.98 依 0.77 Bc 增 重 率 (%) 依 Ba 依 Aa 依 Ab 依 Aa 依 7.26 Cc 依 Cb 饲 料 系 数 2.58 依 依 依 依 依 依 0.27 注 : 同 列 数 据 肩 标 小 写 字 母 不 同 者 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 曰 大 写 字 母 不 同 者 表 示 差 异 极 显 著 渊 P<0.01 冤 曰 字 母 相 同 者 表 示 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 下 表 同 遥 2.2 脱 毒 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肉 质 的 影 响 试 验 结 束 后 袁 对 各 组 罗 非 鱼 进 行 抽 样 检 测 其 鱼 体 肌 肉 中 粗 蛋 白 尧 粗 脂 肪 尧 灰 分 和 水 分 的 含 量 袁 分 析 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肌 肉 生 化 组 成 的 影 响 ( 见 表 3) 遥 表 3 脱 毒 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肌 肉 粗 蛋 白 粗 脂 肪 项 目 对 照 组 5% 油 茶 粕 组 10% 油 茶 粕 组 15% 油 茶 粕 组 20% 油 茶 粕 组 30% 油 茶 粕 组 粗 灰 分 和 水 分 的 影 响 ( 豫 ) 粗 蛋 白 依 0.67 Bc 47.5 依 0.51 Bb 依 0.43 Ab 依 0.71 Aa 依 0.35 Ba 依 0.42 C 粗 脂 肪 依 0.52 Bb 依 0.31 Bb 依 0.32 Ab 依 0.28 Aa 依 0.15 Ba 依 0.21 Bc 灰 分 依 1.23 Ab 依 3.23 Ac 依 2.62 Bb 依 2.52 Aa 依 1.51 Ba 依 1.87 Bc 水 分 依 0.72 Ac 依 0.18 Bb 依 0.14 Ba 依 0.45 A 依 0.23 Ab 71.7 依 0.27 Aa 2.3 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肠 道 尧 肝 胰 腺 蛋 白 酶 活 性 的 影 响 渊 见 表 4 尧 5 尧 6 冤 表 4 项 目 对 照 组 5% 油 茶 粕 组 10% 油 茶 粕 组 15% 油 茶 粕 组 20% 油 茶 粕 组 30% 油 茶 粕 组 表 5 项 目 对 照 组 5% 油 茶 粕 组 10% 油 茶 粕 组 15% 油 茶 粕 组 20% 油 茶 粕 组 30% 油 茶 粕 组 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肠 道 肝 胰 腺 蛋 白 酶 活 性 的 影 响 (U/ml) 肠 道 依 Ba 依 Bb 依 Aa 依 Ab 依 1.6 Bba 依 Bbc 肝 胰 脏 依 Ba 依 1.4 Bba 依 Ab 依 Aa 依 Bc 依 Bbb 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肠 道 肝 胰 腺 脂 肪 酶 活 性 的 影 响 (U/gpr) 肠 道 依 Baa 依 Bba 依 Aa 依 Ab 依 Bab 依.775 Bbc 肝 胰 脏 依 Bab 依 Baa 依 Aa 依 Ab 依 Bb 依 Bc

34 周 江 等 : 脱 毒 油 茶 粕 饲 料 在 罗 非 鱼 养 殖 中 的 应 用 研 究 试 验 研 究 表 6 项 目 对 照 组 5% 油 茶 粕 组 10% 油 茶 粕 组 15% 油 茶 粕 组 20% 油 茶 粕 组 30% 油 茶 粕 组 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肠 道 肝 胰 腺 淀 粉 酶 活 性 的 影 响 (U/100 ml) 肠 道 依 Bb 依 B 依 Ac 依 Aa 依 48.3 Ab 依 Ba 肝 胰 脏 依 Ca 依 Ab 依 Ba 依 Aa 依 37.6 Cb 依 Bb 整 体 上 看 袁 本 试 验 的 结 果 显 示 院 罗 非 鱼 的 肠 道 蛋 白 酶 活 性 明 显 高 于 肝 胰 脏 的 蛋 白 酶 活 性 曰 罗 非 鱼 的 肝 胰 脏 的 脂 肪 酶 活 性 高 于 肠 道 脂 肪 酶 活 性 曰 罗 非 鱼 的 肝 胰 脏 的 淀 粉 酶 活 性 总 体 来 说 随 茶 粕 添 加 量 的 增 加 而 上 升 袁 但 并 不 表 现 出 明 显 的 线 性 关 系 遥 3 分 析 与 讨 论 3.1 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 生 长 性 能 的 影 响 试 验 结 果 表 明 袁 各 组 罗 非 鱼 的 成 活 率 均 在 90% 以 上 袁 各 组 之 间 的 差 异 并 不 明 显 袁 表 明 了 油 茶 粕 在 合 理 的 去 除 抗 营 养 因 子 和 粗 纤 维 之 后 袁 是 完 全 可 以 作 为 水 产 养 殖 动 物 的 饲 料 遥 从 试 验 的 结 果 来 看 袁 在 合 适 的 添 加 比 例 范 围 内 袁 饲 料 中 添 加 油 茶 粕 比 例 对 罗 非 鱼 的 成 活 率 并 无 明 显 影 响 遥 从 养 殖 的 效 果 来 看 袁 5% 油 茶 粕 组 比 对 照 组 增 重 率 提 高 了 37.01% 渊 P<0.01 冤 袁 10% 油 茶 粕 组 增 重 率 提 高 了 39.% 渊 P<0.01 冤 袁 15% 油 茶 粕 组 增 重 率 提 高 了 58.56% 渊 P<0.01 冤 袁 与 对 照 组 相 比 差 异 极 显 著 遥 从 饲 料 系 数 上 看 袁 由 于 是 在 试 验 室 条 件 下 养 殖 袁 饲 料 系 数 比 室 外 养 殖 偏 高 袁 但 就 整 体 而 言 袁 各 组 之 间 的 差 异 并 不 明 显 袁 因 此 具 有 一 定 的 实 践 意 义 遥 茶 皂 素 是 从 山 茶 科 植 物 中 提 取 出 来 的 以 多 糖 和 三 萜 皂 甙 为 主 的 绿 色 天 然 产 品 袁 具 有 增 强 机 体 免 疫 功 能 袁 抗 应 激 尧 抗 氧 化 尧 改 善 畜 禽 产 品 品 质 尧 提 高 畜 禽 生 产 性 能 的 作 用 遥 国 内 外 有 学 者 研 究 表 明, 低 剂 量 的 茶 皂 素 对 提 高 鱼 类 的 生 长 有 促 进 作 用 袁 同 时 还 可 以 增 强 鱼 类 的 抗 病 能 力 遥 Francis 等 渊 2001 冤 在 饲 料 中 分 别 添 加 0 尧 150 尧 300 mg/kg 的 三 萜 皂 甙, 研 究 三 萜 皂 甙 对 罗 非 鱼 生 长 尧 代 谢 尧 产 卵 率 及 肌 肉 中 胆 固 醇 含 量 的 影 响 袁 结 果 发 现,14 周 后 300 mg/kg 的 试 验 组 增 重 率 明 显 高 于 对 照 组 渊 P< 0.05 冤 曰 而 添 加 量 150 mg/kg 的 试 验 组 袁 在 前 3 周 内 袁 其 增 重 率 高 于 其 它 2 组 遥 Francis 等 渊 2002 冤 在 鲤 鱼 饲 料 中 添 加 0 尧 150 尧 300 mg/kg 的 三 萜 皂 甙 研 究 其 对 鲤 鱼 生 长 性 能 和 代 谢 效 率 的 影 响 袁 结 果 表 明 袁 在 8 周 后 袁 皂 甙 34 添 加 量 为 150 mg/kg 的 试 验 组 增 重 率 渊 372% 冤 与 其 它 2 组 渊 327% 和 3% 冤 相 比 袁 鱼 体 增 重 明 显, 差 异 显 著 渊 P< 0.05 冤 遥 赵 红 霞 渊 2003 冤 研 究 表 明 袁 茶 皂 素 饲 料 添 加 剂 能 够 提 高 罗 氏 沼 虾 的 增 重 率 袁 而 且 随 着 未 脱 毒 油 茶 粕 量 的 增 加 袁 罗 氏 沼 虾 的 增 重 率 呈 现 出 上 升 的 趋 势 曰 茶 皂 素 添 加 量 为 2000 mg/kg 时 袁 罗 氏 沼 虾 的 增 重 率 显 著 高 于 抗 生 素 组 渊 P<0.01 冤 遥 本 试 验 结 果 与 上 述 结 论 基 本 一 致 袁 20% 油 茶 粕 组 尧 30% 油 茶 粕 组 均 低 于 对 照 组 增 重 袁 但 差 异 不 显 著 遥 油 菜 粕 发 挥 其 效 应 的 原 因 可 能 有 以 下 几 点 院 淤 由 于 经 过 水 浸 提 以 后 袁 油 茶 粕 中 仍 残 留 有 微 量 的 茶 皂 素 和 微 量 的 黄 酮 类 化 合 物 以 及 多 糖 类 化 合 物 袁 低 剂 量 的 茶 皂 素 可 以 刺 激 鱼 类 免 疫 系 统 袁 提 高 鱼 类 的 消 化 酶 的 活 性 袁 促 进 肠 道 的 通 透 性 袁 加 速 营 养 物 质 的 吸 收 袁 促 进 机 体 营 养 物 质 代 谢 袁 对 生 长 有 促 进 作 用 袁 但 其 添 加 量 不 能 超 出 一 定 的 范 围 曰 而 黄 酮 类 化 合 物 中 抗 菌 成 分 较 多 袁 具 有 较 广 的 抗 菌 谱 袁 是 一 种 良 好 的 植 物 免 疫 促 进 剂 袁 同 时 还 可 以 影 响 胃 肠 道 微 生 物 的 主 要 消 化 酶 活 性 袁 改 善 消 化 功 能 袁 提 高 生 产 性 能 遥 于 低 剂 量 的 茶 皂 素 和 黄 酮 类 化 合 物 的 存 在 可 以 增 强 鱼 类 的 免 疫 能 力 袁 使 鱼 类 的 非 特 异 性 免 疫 能 力 得 到 强 化 袁 抑 制 鱼 体 内 的 有 害 菌 袁 增 强 鱼 的 活 力 袁 增 强 其 主 动 摄 食 能 力 袁 提 高 饲 料 的 利 用 率 袁 这 些 在 增 重 明 显 的 试 验 组 表 现 尤 为 明 显 遥 在 增 重 明 显 的 试 验 组 袁 试 验 鱼 表 现 出 大 小 均 匀 袁 活 力 较 强 袁 主 动 摄 食 旺 盛 袁 抗 病 力 强 等 特 点 遥 盂 在 油 茶 粕 添 加 量 较 大 的 20% 油 茶 粕 组 和 30% 油 茶 粕 组 中 袁 其 增 重 率 低 于 对 照 组 袁 可 能 是 因 为 随 着 油 茶 粕 添 加 量 的 增 大 袁 同 时 提 高 了 饲 料 中 的 粗 纤 维 含 量 袁 导 致 鱼 类 肠 道 受 到 刺 激 袁 蠕 动 加 速 袁 致 使 饲 料 中 的 营 养 物 质 来 不 及 吸 收 袁 降 低 了 饲 料 的 利 用 率 袁 而 且 大 量 添 加 会 降 低 饲 料 的 适 口 性 袁 所 以 增 重 效 果 较 差 遥 因 此 袁 油 茶 粕 在 罗 非 鱼 鱼 苗 尧 鱼 种 期 的 适 宜 添 加 量 为 10 豫 耀 15% 袁 不 宜 过 高 遥 在 鱼 类 成 鱼 期 尧 虾 蟹 或 畜 禽 养 殖 上 可 适 当 加 大 其 用 量 遥 3.2 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肉 质 的 影 响 饲 养 试 验 结 束 后 袁 对 各 组 鱼 进 行 解 剖 比 较 袁 各 试 验 组 与 对 照 组 鱼 的 肌 肉 和 内 脏 在 外 观 上 没 有 差 别 遥 经 检 测 分 析 袁 与 对 照 组 相 比 袁 5% 油 茶 粕 组 尧 10% 油 茶 粕 组 尧 15% 油 茶 粕 组 肌 肉 中 的 蛋 白 质 含 量 也 表 现 出 了 上 升 趋 势 袁 3 个 试 验 组 中 鱼 体 肌 肉 中 粗 蛋 白 含 量 分 别 提 高 了 0.34 尧 1.37 和 2.67 个 百 分 点 袁 其 中 10% 油 茶 粕 组 和 15% 油 茶 粕 组 与 对 照 组 相 比 袁 差 异 极 显 著 曰 10% 油

35 试 验 研 究 周 江 等 : 脱 毒 油 茶 粕 饲 料 在 罗 非 鱼 养 殖 中 的 应 用 研 究 茶 粕 组 尧 15% 油 茶 粕 组 与 对 照 组 相 比 袁 肌 肉 中 粗 脂 肪 含 量 也 出 现 了 一 定 程 度 的 上 升 袁 分 别 上 升 了 1.2 尧 1.8 个 百 分 点 袁 5% 油 茶 粕 组 与 对 照 组 相 比 较 袁 差 异 不 明 显 遥 由 此 我 们 可 清 楚 地 看 到 袁 随 饲 料 中 油 茶 粕 添 加 量 的 增 大 渊 5%~15% 冤 袁 鱼 体 肌 肉 粗 蛋 白 含 量 有 小 幅 增 加 袁 同 时 也 使 鱼 体 脂 肪 含 量 有 小 幅 上 升 袁 原 因 可 能 是 在 一 定 的 范 围 内 袁 随 着 油 茶 粕 添 加 量 的 增 加 袁 鱼 体 内 的 脂 肪 酶 活 性 也 随 之 有 所 上 升 遥 3.3 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 消 化 酶 活 性 的 影 响 试 验 结 果 表 明 袁 罗 非 鱼 肠 道 蛋 白 酶 酶 活 与 对 照 组 相 比 袁 5% 油 茶 粕 组 无 显 著 差 异 袁 10% 油 茶 粕 组 和 15% 油 茶 粕 组 蛋 白 酶 酶 活 均 极 显 著 高 于 对 照 组 袁 其 中 以 10% 油 茶 粕 组 肠 道 蛋 白 酶 酶 活 最 高 遥 这 可 能 是 导 致 10% 油 茶 粕 组 尧 15% 油 茶 粕 组 罗 非 鱼 肌 肉 中 蛋 白 质 含 量 较 高 的 主 要 原 因 袁 而 相 应 的 5% 油 茶 粕 组 则 无 此 种 变 化 遥 在 肠 道 脂 肪 酶 酶 活 测 定 中 袁 10% 油 茶 粕 组 尧 15% 油 茶 粕 组 的 脂 肪 酶 酶 活 极 显 著 高 于 对 照 组, 因 而 这 2 个 试 验 组 鱼 体 肌 肉 中 脂 肪 含 量 明 显 高 于 对 照 组 遥 同 样 袁 罗 非 鱼 肝 胰 脏 蛋 白 酶 酶 活 和 脂 肪 酶 酶 活 在 10% 油 茶 粕 组 和 15% 油 茶 粕 组 中 均 表 现 出 显 著 高 于 对 照 组 遥 由 此 我 们 可 以 看 出 袁 油 茶 粕 饲 料 在 一 定 范 围 内 的 添 加 量 确 实 提 高 了 罗 非 鱼 肠 道 和 肝 胰 脏 的 蛋 白 酶 尧 脂 肪 酶 酶 活 遥 在 对 罗 非 鱼 肠 道 尧 肝 胰 脏 淀 粉 酶 酶 活 的 测 定 中 发 现 袁 添 加 油 茶 粕 饲 料 组 罗 非 鱼 肠 道 尧 肝 胰 脏 淀 粉 酶 酶 活 与 对 照 组 相 比 袁 虽 然 总 体 上 是 呈 上 升 趋 势 袁 但 没 有 表 现 出 线 性 关 系 袁 具 体 原 因 及 机 理 有 待 进 一 步 研 究 探 讨 遥 3.4 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 消 化 酶 活 性 作 用 的 机 理 鱼 体 消 化 酶 活 性 的 高 低 直 接 影 响 到 饲 料 的 消 化 利 用 率, 要 促 进 鱼 类 的 快 速 生 长 袁 首 先 要 保 证 鱼 类 对 饲 料 的 消 化 吸 收 袁 消 化 酶 活 性 的 提 高 能 够 加 速 鱼 类 对 饲 料 营 养 物 质 的 消 化 吸 收 遥 上 述 有 关 消 化 酶 的 结 论 与 本 试 验 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 肉 质 影 响 的 数 据 可 以 看 出 袁 消 化 酶 活 性 的 提 高 可 能 与 添 加 的 油 茶 粕 饲 料 有 关 袁 在 油 茶 粕 中 残 留 的 低 剂 量 的 茶 皂 素 对 鱼 体 肠 道 消 化 酶 有 一 定 的 激 活 作 用 遥 因 为 茶 皂 素 是 由 有 机 酸 尧 配 体 和 多 糖 构 成 袁 茶 皂 素 水 解 后 能 生 成 茶 皂 草 精 醇 尧 葡 萄 糖 醛 酸 尧 阿 拉 伯 糖 尧 木 糖 尧 当 归 酸 和 醋 酸 等 物 质 袁 同 时 袁 水 解 过 程 中 还 会 产 生 中 间 体 袁 如 茶 原 皂 草 精 醇 A 和 B 等 遥 茶 皂 素 的 多 糖 为 亲 水 性 基 团 袁 通 过 酯 键 与 另 一 端 疏 水 基 团 相 连 接 袁 疏 水 基 团 是 由 酯 键 形 式 35 连 接 甙 元 渊 即 配 基 冤 和 有 机 酸 袁 因 而 具 有 表 面 活 性 作 用 袁 属 非 离 子 型 的 表 面 活 性 剂 遥 作 为 表 面 活 性 剂 袁 在 饲 料 中 势 必 能 起 到 乳 化 剂 的 作 用 袁 能 使 饲 料 中 的 脂 溶 性 物 质 在 吸 水 后 分 散 而 形 成 比 较 稳 定 的 乳 浊 液 袁 有 利 于 肠 胃 的 吸 收 遥 同 时 袁 油 茶 粕 中 的 茶 皂 素 在 动 物 肠 道 内 有 可 能 发 挥 选 择 性 的 抑 菌 或 杀 菌 作 用 袁 阻 碍 微 生 物 对 养 分 的 吸 收, 提 高 了 养 分 的 利 用 率 遥 此 外 袁 茶 皂 素 作 为 一 种 异 体 生 物 大 分 子 渊 分 子 量 为 冤 袁 饲 料 中 的 茶 皂 素 对 动 物 机 体 的 免 疫 系 统 是 一 种 刺 激 袁 这 种 刺 激 将 使 动 物 的 各 种 生 理 活 动 加 强 袁 提 高 动 物 的 免 疫 机 能 袁 从 而 起 到 促 生 长 的 效 果 渊 张 建 东 袁 2002 冤 遥 而 且 袁 茶 皂 素 可 能 对 增 加 肠 粘 膜 的 通 透 性 起 到 了 一 定 的 作 用 袁 加 速 营 养 物 质 的 吸 收 袁 促 进 了 机 体 营 养 物 质 代 谢 袁 提 高 了 饲 料 的 利 用 率 袁 从 而 促 进 了 动 物 的 生 长 渊 Francis 等 袁 2002 冤 遥 此 外 袁 国 内 外 的 一 些 研 究 也 表 明 袁 将 茶 皂 甙 用 作 饲 料 添 加 剂 能 提 高 动 物 机 体 免 疫 功 能 尧 清 除 自 由 基 尧 促 进 蛋 白 质 合 成 和 提 高 动 物 消 化 酶 活 性 袁 从 而 提 高 畜 禽 成 活 率 尧 生 长 速 度 和 饲 料 转 化 率 遥 它 与 抗 生 素 作 用 的 机 理 完 全 不 同 袁 因 而 不 会 诱 导 耐 药 细 菌 的 产 生 袁 在 养 殖 业 中 完 全 可 以 替 代 抗 生 素 类 饲 料 添 加 剂 遥 同 时 袁 茶 皂 甙 具 有 抗 氧 化 尧 改 善 肉 质 的 作 用 遥 综 合 考 虑 油 茶 粕 饲 料 对 罗 非 鱼 生 长 性 能 和 消 化 酶 活 性 的 影 响 袁 采 用 水 浸 提 的 工 艺 及 方 法 提 取 茶 皂 素 后 的 油 茶 粕 在 淡 水 鱼 类 饲 料 中 的 适 宜 添 加 量 为 10 豫 耀 15% 遥 参 考 文 献 1 国 家 统 计 局. 中 国 统 计 摘 要. 北 京 : 中 国 统 计 出 版 社, 殷 肇 君, 李 红 权, 李 群 芳, 等. 油 茶 粕 中 茶 皂 素 的 提 取 及 纯 化 研 究 [J]. 饲 料 工 业,2004,(12):11 耀 13 3 夏 春 华. 茶 籽 综 合 利 用 的 研 究 [J]. 茶 叶 科 学 研 究 简 报,1982,10: 214 耀 李 红 权, 殷 肇 君, 李 群 芳, 等. 油 茶 粕 饲 料 在 异 育 银 鲫 养 殖 中 的 应 用 研 究 [J]. 饲 料 工 业,2005,26(10):23 耀 5 青 山 新 次 郎. 日 本 药 学 杂 志.1931,51(5):367 6 柳 荣 祥, 朱 全 芬, 夏 春 华, 等. 茶 皂 素 (Theasapanin) 研 究 现 状 [J]. 茶 叶,1995,21(3):2 耀 5 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

36 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 试 验 研 究 碱 式 碳 酸 铜 生 物 效 价 的 研 究 周 文 艺 周 安 国 王 之 盛 摘 要 试 验 研 究 了 碱 式 碳 酸 铜 对 于 仔 猪 的 生 物 效 价 试 验 选 取 20 头 4 周 龄 平 均 体 重 7.5 kg 左 右 DLY( 杜 伊 长 伊 大 ) 断 奶 仔 猪, 随 机 分 为 2 个 处 理 组, 分 别 为 硫 酸 铜 ( 对 照 组 ) 和 碱 式 碳 酸 铜 组, 试 验 进 行 4 周 试 验 结 果 表 明, 碱 式 碳 酸 铜 有 提 高 ADG ADFI 的 趋 势 (P>0.05); 降 低 了 仔 猪 腹 泻 率 (P<0.05) 碱 式 碳 酸 铜 的 绝 对 生 物 效 价 为 30 豫, 高 于 对 照 组 6 个 百 分 点 ; 以 CuZnSOD 活 性 作 为 判 断 指 标 时, 碱 式 碳 酸 铜 的 相 对 生 物 效 价 达 到 了 120 豫 ; 而 以 血 清 铜 浓 度 和 铜 兰 蛋 白 活 性 作 为 判 断 指 标 时, 碱 式 碳 酸 铜 的 相 对 生 物 效 价 为 102 豫 和 104 豫 碱 式 碳 酸 铜 的 生 物 效 价 优 于 硫 酸 铜 关 键 词 周 文 艺, 福 建 省 新 闽 科 生 物 科 技 开 发 有 限 公 司,350008, 福 州 市 仓 山 区 福 湾 工 业 园 盘 屿 路 852 号 周 安 国 王 之 盛, 四 川 农 业 大 学 动 物 营 养 研 究 所 收 稿 日 期 : 碱 式 碳 酸 铜 ; 生 物 效 价 ; 断 奶 仔 猪 ; 腹 泻 率 中 图 分 类 号 S816.7 传 统 的 饲 料 工 业 生 产 中 使 用 的 微 量 元 素 硫 酸 盐 在 动 物 生 产 上 存 在 很 多 问 题 袁 如 硫 酸 分 离 不 彻 底 袁 造 成 动 物 胃 肠 道 溃 疡 曰 金 属 离 子 使 维 生 素 效 价 降 低 袁 并 使 饲 料 中 脂 肪 氧 化 酸 败 袁 降 低 饲 料 营 养 价 值 遥 采 用 其 它 形 式 的 微 量 元 素 来 替 代 传 统 的 硫 酸 盐 势 在 必 行 袁 本 文 对 碱 式 碳 酸 铜 在 动 物 生 产 中 的 营 养 作 用 作 了 探 讨 袁 并 对 其 生 物 效 价 作 了 评 定 遥 1 材 料 和 方 法 1.1 试 验 设 计 试 验 选 取 20 头 4 周 龄 平 均 体 重 为 7.5 kg 左 右 DLY 断 奶 仔 猪 袁 预 饲 3d 后 把 动 物 随 机 分 为 2 个 处 理 组 袁 日 粮 中 分 别 添 加 1 mg/kg 的 硫 酸 铜 渊 对 照 组 冤 和 1 mg/kg 碱 式 碳 酸 铜 组 渊 处 理 组, 铜 含 量 豫 冤 袁 每 个 处 理 组 5 个 重 复, 每 个 重 复 2 头 猪, 试 验 期 为 4 周 遥 1.2 试 验 日 粮 日 粮 参 照 NRC 渊 1998 冤 5 耀 10 kg 体 重 猪 的 营 养 需 要 配 制 ( 见 表 1) 遥 1.3 饲 养 管 理 试 验 在 四 川 农 业 大 学 动 物 营 养 研 究 所 试 验 场 环 控 室 进 行 遥 试 验 前 清 扫 尧 冲 洗 圈 舍 袁 用 4 豫 NaOH 溶 液 清 洗 圈 舍 和 地 面 袁 对 圈 舍 密 闭 门 窗 熏 蒸 渊 每 立 方 米 用 ml 甲 醛 和 g 高 锰 酸 钾 加 水 12.5 ml 冤 24 h 以 上 袁 熏 蒸 完 后 打 开 门 窗 通 风 换 气 48 h 袁 用 清 水 清 洗 地 面 和 圈 舍 袁 冲 掉 地 面 的 碱 液 遥 36 原 料 玉 米 豆 粕 膨 化 大 豆 麦 麸 鱼 粉 乳 清 粉 菜 籽 油 CaCO 3 CaHPO 4 多 维 氯 化 胆 碱 食 盐 矿 物 添 加 剂 抗 生 素 HClLys Met 表 1 试 验 日 粮 配 方 及 营 养 水 平 含 量 (%) 营 养 水 平 DE(MJ/kg) CP(%) Lys(%) Met(%) Trp(%) Ca(%) 有 效 P(%) 注 : 每 千 克 基 础 日 粮 中 含 Fe 150 mg 尧 Mn 4mg 尧 Se 0.3 mg 尧 I0.14 mg 尧 VA IU 尧 VD IU 尧 VE 60 mg 尧 VK mg 尧 VB 1 5mg 尧 VB 2 20 mg 尧 VB 6 3mg 尧 VB mg 尧 烟 酸 20 mg 尧 泛 酸 20 mg 尧 叶 酸 1.5 mg 遥 试 验 仔 猪 自 由 采 食 和 饮 水, 第 1 周 饮 水 为 烧 开 冷 却 的 自 来 水, 每 天 饲 喂 5 次 (8:00 尧 11:00 尧 14:00 尧 17:00 尧 20:00), 每 次 喂 料 量 以 吃 饱 后 略 有 剩 余 为 度 遥 每 天 早 晨 清 洗 料 槽 和 水 槽 袁 并 换 清 洁 饮 水 遥 猪 舍 温 度 保 持 在 益 左 右, 保 持 猪 舍 内 清 洁 卫 生 和 空 气 流 通, 每 周 消 毒 1 次 遥 试 验 期 间, 每 天 观 察 记 录 仔 猪 的 采 食 情 况 尧 精 神 状 况 及 腹 泻 情 况, 如 发 现 腹 泻 立 即 治 疗 遥 收 集 余 料, 风 干 并 称 重 遥 1.4 代 谢 试 验 在 第 24 d 早 上 开 始 4d 的 代 谢 试 验, 代 谢 试 验 开 始 之 前 12 h 让 仔 猪 禁 食, 第 24 d 早 上 空 腹 称 重 后 开 始 代 谢 试 验 并 收 集 全 部 粪 便 遥 粪 样 收 集 后 按 100 g 鲜 重 加 10% 硫 酸 5ml, 滴 加 2 耀 3 滴 甲 苯, 置 于 4 益 冰 箱 保 存 遥 1.5 测 定 指 标

37 试 验 研 究 周 文 艺 等 : 碱 式 碳 酸 铜 生 物 效 价 的 研 究 生 产 性 能 平 均 日 增 重 渊 ADG 冤 院 仔 猪 于 试 验 开 始 每 周 的 第 一 天 早 上 7 院 00 空 腹 单 个 称 重 袁 计 算 各 阶 段 ADG 遥 平 均 日 采 食 量 渊 ADFI 冤 院 以 圈 为 单 位 每 天 结 算 采 食 量 袁 计 算 各 阶 段 ADFI 遥 料 肉 比 (F/G) 院 根 据 日 增 重 和 日 采 食 量 计 算 料 肉 比 遥 腹 泻 率 = 腹 泻 仔 猪 头 数 / 参 试 猪 头 数 遥 腹 泻 严 重 程 度 院 以 1 耀 5 分 评 选 ( 腹 泻 指 数 5 分 法 ), 1 分 为 硬 粪 曰 2 分 为 正 常 粪 便 渊 不 腹 泻 冤 曰 3 分 为 软 粪 渊 轻 度 腹 泻 冤 曰 4 分 为 浆 糊 状 粪 便 渊 中 度 腹 泻 冤 曰 5 分 为 水 状 粪 便 渊 严 重 腹 泻 冤 遥 血 液 生 化 指 标 淤 在 试 验 结 束 时 对 试 验 猪 进 行 前 腔 静 脉 采 血 袁 测 定 血 清 铜 浓 度 尧 CuZnSOD 以 及 铜 兰 蛋 白 活 性 遥 于 计 算 沉 积 氮 尧 氮 表 观 消 化 率 尧 氮 表 观 利 用 率 和 氮 表 观 生 物 效 价 遥 入 铜 曰 沉 积 氮 (g/d) 越 摄 入 氮 原 粪 氮 原 尿 氮 曰 氮 表 观 消 化 率 渊 % 冤 越 渊 摄 入 氮 原 粪 氮 冤 / 摄 入 氮 曰 氮 表 观 利 用 率 渊 % 冤 越 沉 积 氮 / 摄 入 氮 ; 氮 表 观 生 物 效 价 (%,ABV) 越 沉 积 氮 /( 摄 入 氮 原 粪 氮 ); 盂 测 定 粪 中 铜 浓 度, 计 算 碱 式 碳 酸 铜 的 生 物 效 价 遥 碱 式 碳 酸 铜 绝 对 生 物 效 价 (%) 越 ( 食 入 铜 原 粪 铜 )/ 食 碱 式 碳 酸 铜 的 相 对 生 物 效 价 渊 % 冤 越 碱 式 碳 酸 铜 的 生 物 效 价 / 硫 酸 铜 的 生 物 效 价 遥 1.6 数 据 分 析 试 验 结 果 用 平 均 数 依 标 准 差 表 示 袁 用 Excel 进 行 预 处 理 袁 SPSS11.0 软 件 进 行 t 检 验 遥 2 试 验 结 果 和 分 析 2.1 碱 式 碳 酸 铜 对 仔 猪 生 产 性 能 的 影 响 ( 见 表 2) 阶 段 1 耀 2 周 3 耀 4 周 1 耀 4 周 1 耀 4 周 表 2 碱 式 碳 酸 铜 对 仔 猪 生 产 性 能 的 影 响 指 标 ADG(g) ADFI(g) F/G ADG(g) ADFI(g) F/G ADG(g) ADFI(g) F/G 腹 泻 率 ( 豫 ) 注 院 * 表 示 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 遥 硫 酸 铜 依 依 依 依 依 依 依 依 依 依 1.36 碱 式 碳 酸 铜 5.36 依 依 依 依 依 依 依 依 依 依 0.89 * 与 对 照 组 相 比 袁 1 耀 2 尧 3 耀 4 周 时 袁 碱 式 碳 酸 铜 提 高 了 仔 猪 的 ADG 尧 ADFI 袁 降 低 了 料 肉 比 袁 差 异 不 显 著 渊 P> 冤 遥 从 全 期 来 看 袁 试 验 组 料 肉 比 为 1.49 袁 比 对 照 组 降 低 了 6.29 豫 曰 在 ADG 尧 ADFI 方 面 袁 碱 式 碳 酸 铜 有 提 高 ADG 尧 ADFI 的 趋 势 曰 碱 式 碳 酸 铜 显 著 降 低 了 仔 猪 的 腹 泻 率 袁 与 对 照 组 相 比 袁 腹 泻 率 降 低 了 2.2 个 百 分 点 袁 差 异 显 著 渊 P<0.05 冤 袁 因 此 袁 与 硫 酸 铜 相 比 袁 碱 式 碳 酸 铜 可 以 防 止 仔 猪 腹 泻 遥 2.2 碱 式 碳 酸 铜 对 氮 平 衡 的 影 响 渊 见 表 3 冤 表 3 处 理 摄 入 氮 (g/d) 粪 氮 (g/d) 尿 氮 (g/d) 沉 积 氮 (g/d) 氮 的 表 观 消 化 率 ( 豫 ) 氮 的 表 观 利 用 率 ( 豫 ) 氮 的 ABV( 豫 ) 氮 平 衡 试 验 结 果 硫 酸 铜 依 依 依 依 依 依 依 2.94 碱 式 碳 酸 铜 依 依 依 依 依 依 依 2.02 由 表 3 可 以 看 出 袁 在 两 个 处 理 组 摄 入 氮 相 近 的 情 况 下 袁 碱 式 碳 酸 铜 有 降 低 粪 氮 尧 尿 氮 和 提 高 沉 积 氮 的 趋 势 袁 但 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 袁 氮 的 表 观 消 化 率 和 表 观 利 用 率 分 别 比 对 照 组 高 出 6.6 个 百 分 点 和 8.2 个 百 分 点 袁 氮 的 ABV 提 高 了 4.2 个 百 分 点 遥 2.3 碱 式 碳 酸 铜 对 仔 猪 血 液 生 化 指 标 的 影 响 ( 见 表 4) 表 4 指 标 CuZnSOD(U/ml) 血 清 铜 浓 度 (mg/kg) 铜 兰 蛋 白 活 性 渊 U/l 冤 碱 式 碳 酸 铜 对 血 清 铜 浓 度 CuZnSOD 及 铜 兰 蛋 白 活 性 的 影 响 硫 酸 铜 依 依 依 8.20 碱 式 碳 酸 铜 依 依 依 0.81 由 表 4 可 见 袁 碱 式 碳 酸 铜 组 CuZnSOD 活 性 比 对 照 组 提 高 了 31.1 U/ml 渊 P>0.05 冤 袁 在 血 清 铜 浓 度 和 铜 兰 蛋 白 活 性 上 两 组 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 2.4 碱 式 碳 酸 铜 的 生 物 效 价 渊 见 表 5 尧 表 6 冤 表 5 指 标 食 入 铜 (mg/kg) 粪 铜 (mg/kg) 表 观 吸 收 铜 (mg/kg) 绝 对 生 物 效 价 ( 豫 ) 判 据 指 标 表 6 CuZnSOD 活 性 血 清 铜 浓 度 铜 兰 蛋 白 活 性 碱 式 碳 酸 铜 的 绝 对 生 物 效 价 硫 酸 铜 依 依 依 碱 式 碳 酸 铜 的 相 对 生 物 效 价 铜 源 硫 酸 铜 碱 式 碳 酸 铜 硫 酸 铜 碱 式 碳 酸 铜 硫 酸 铜 碱 式 碳 酸 铜 碱 式 碳 酸 铜 依 依 依 相 对 生 物 效 价 ( 豫 )

38 周 文 艺 等 : 碱 式 碳 酸 铜 生 物 效 价 的 研 究 试 验 研 究 由 表 5 可 见 袁 碱 式 碳 酸 铜 组 在 食 入 铜 和 粪 铜 上 均 少 于 对 照 组 渊 P>0.05 冤 袁 而 表 观 吸 收 铜 高 于 对 照 组 渊 P> 0.05 冤 袁 碱 式 碳 酸 铜 的 绝 对 生 物 效 价 为 30 豫 袁 高 出 对 照 组 6 个 百 分 点 遥 由 表 6 可 见 袁 以 CuZnSOD 活 性 作 为 判 断 指 标 时 袁 碱 式 碳 酸 铜 的 相 对 生 物 效 价 达 到 了 120% 袁 而 以 血 清 铜 浓 度 和 铜 兰 蛋 白 活 性 作 为 判 断 指 标 时 袁 碱 式 碳 酸 铜 的 相 对 生 物 效 价 为 102% 和 104% 遥 3 讨 论 3.1 碱 式 碳 酸 铜 对 仔 猪 生 产 性 能 的 影 响 在 本 试 验 条 件 下 袁 碱 式 碳 酸 铜 组 仔 猪 平 均 日 增 重 高 于 对 照 组 (P>0.05) 遥 Ward(1996) 也 发 现 碱 式 碳 酸 铜 有 提 高 小 母 牛 日 增 重 和 降 低 料 肉 比 的 趋 势 渊 P>0.05 冤 袁 这 与 碱 式 碳 酸 铜 和 硫 酸 铜 的 物 理 性 质 有 关 遥 铜 是 氧 化 作 用 的 有 效 催 化 剂 袁 可 氧 化 饲 料 中 不 稳 定 物 质 ( 如 维 生 素 和 脂 肪 ) 袁 而 降 低 饲 料 适 口 性 和 营 养 价 值 遥 硫 酸 铜 是 一 种 酸 性 盐 袁 在 水 中 溶 解 度 较 大 袁 水 溶 性 呈 弱 酸 性, 铜 离 子 可 扩 散 于 饲 料 水 分 中 袁 硫 酸 铜 每 一 结 晶 表 面 都 是 氧 化 反 应 的 活 性 部 位 袁 其 氧 化 作 用 较 强 遥 目 前 袁 硫 酸 铜 在 生 产 应 用 中 存 在 一 些 问 题 院 在 硫 酸 铜 的 生 产 过 程 中, 金 属 铜 和 硫 酸 反 应 不 完 全, 副 产 物 硫 酸 或 废 铜 屑 的 使 用 妨 碍 硫 酸 铜 产 品 的 适 宜 结 晶 曰 不 适 宜 的 干 燥 方 法 可 导 致 化 合 物 中 游 离 硫 酸 的 存 在 曰 硫 酸 铜 研 磨 不 适 宜 以 及 过 度 干 燥 会 使 动 物 小 肠 粘 膜 受 到 2 原 刺 激 曰 同 时,SO 4 还 是 一 种 致 溃 疡 因 子 ( 周 安 国,2003) 遥 这 些 因 素 都 导 致 了 目 前 硫 酸 铜 在 动 物 生 产 应 用 中 效 果 不 是 很 理 想 遥 本 试 验 发 现 袁 硫 酸 铜 组 动 物 腹 泻 率 较 试 验 组 高 袁 也 有 部 分 上 述 原 因 遥 与 硫 酸 铜 相 比 袁 碱 式 碳 酸 铜 在 水 中 的 溶 解 度 为 豫, 几 乎 不 溶 于 水, 而 易 溶 于 酸, 并 且 氧 化 作 用 较 弱, 对 饲 料 中 脂 类 物 质 和 维 生 素 破 坏 作 用 较 小 遥 碱 式 原 碳 酸 铜 化 学 式 为 CuCO 3 窑 Cu(OH) 2, 分 子 中 含 两 个 OH, 水 溶 液 呈 弱 碱 性 袁 碱 性 水 带 负 电 袁 聚 合 度 只 有 4 耀 6 个 水 分 子 袁 比 一 般 水 低 3 耀 5 倍 遥 周 安 国 渊 2005 冤 认 为 袁 对 于 动 物 来 说 袁 水 聚 合 度 越 低 袁 越 容 易 通 过 细 胞 膜 袁 转 运 营 养 物 质 的 速 度 更 快 袁 动 物 的 生 产 性 能 更 好 遥 3.2 碱 式 碳 酸 铜 对 仔 猪 氮 平 衡 的 影 响 碱 式 碳 酸 铜 组 粪 氮 排 泄 低 于 对 照 组 组 袁 氮 的 表 观 消 化 率 尧 表 观 利 用 率 和 ABV 均 略 高 于 硫 酸 铜 组 遥 碱 式 碳 酸 铜 组 氮 平 衡 状 况 也 要 略 优 于 对 照 组 袁 这 可 能 是 对 照 组 脂 类 氧 化 产 物 破 坏 了 赖 氨 酸 和 其 它 含 硫 氨 基 酸 袁 并 且 蛋 白 质 与 脂 类 氧 化 次 级 产 物 发 生 交 联 反 应 袁 降 低 了 动 物 对 蛋 白 质 的 吸 收 遥 3.3 碱 式 碳 酸 铜 对 血 液 生 化 指 标 的 影 响 38 机 体 在 代 谢 过 程 中 会 产 生 大 量 超 氧 阴 离 子 自 由 基 渊 O 2 原 冤 袁 其 具 有 很 强 的 氧 化 性 袁 极 易 破 坏 细 胞 核 内 mrna 袁 并 使 细 胞 膜 等 结 构 发 生 脂 质 过 氧 化 反 应 袁 从 而 对 机 体 造 成 损 伤 遥 SOD 具 有 削 弱 超 氧 阴 离 子 自 由 基 破 坏 细 胞 内 还 原 性 活 性 成 分 的 作 用 袁 保 护 细 胞 免 受 损 伤 渊 Smith 袁 1997 曰 Prohaska 袁 1991 冤 遥 本 试 验 发 现 袁 碱 式 碳 酸 铜 可 提 高 CuZnSOD 活 性 渊 P>0.05 冤 袁 这 可 能 与 碱 式 碳 酸 铜 相 对 于 硫 酸 铜 有 较 高 生 物 利 用 率 有 关 遥 碱 式 碳 酸 铜 组 和 对 照 组 的 血 清 铜 水 平 没 有 太 大 差 异 袁 这 与 Ward(1996) 试 验 结 果 一 致 遥 在 铜 兰 蛋 白 活 性 上 袁 饲 喂 碱 式 碳 酸 铜 的 小 母 牛 的 铜 兰 蛋 白 活 性 高 于 对 照 组 (P 约 0.01)(Ward 袁 1996) 遥 3.4 碱 式 碳 酸 铜 的 生 物 效 价 评 定 本 试 验 发 现 袁 碱 式 碳 酸 铜 对 于 仔 猪 的 绝 对 生 物 效 价 略 高 于 硫 酸 铜 遥 Chapman 渊 1963 冤 也 证 实 袁 肉 牛 对 碱 式 碳 酸 铜 的 吸 收 率 高 于 硫 酸 铜 遥 在 相 对 生 物 效 价 方 面 袁 以 CuZnSOD 活 性 作 为 判 据 指 标 时 袁 碱 式 碳 酸 铜 的 相 对 生 物 效 价 高 于 硫 酸 铜 曰 以 血 清 铜 浓 度 和 铜 兰 蛋 白 活 性 作 为 判 据 指 标 时 袁 其 相 对 生 物 效 价 也 略 高 于 硫 酸 铜 袁 这 表 明 对 于 仔 猪 来 说 袁 碱 式 碳 酸 铜 相 对 于 硫 酸 铜 有 较 高 的 生 物 利 用 率 遥 参 考 文 献 1 周 安 国. 现 代 养 猪 与 饲 粮 营 养 之 间 的 关 系 [J]. 山 东 饲 料,2003(9): 41 耀 42 2 周 安 国. 灰 色 营 养 饲 养 恩 威, 四 川 农 业 大 学 动 物 营 养 研 究 所,2005 年 科 技 成 果 交 流 大 会, Chapman HR Jr, Bell MC. Relative absorption and excretion by beef cattle of copper from various sources[j]. J. Anim. Sci., 1963,22:82 耀 5 4 Ledoux DR, P. R. Henry, C. B. Ammerman, et al. Estimation of the relative bioavailability of inorganic copper sources for chicks using tissue uptake of copper[j]. Anim. Sci., 1991(69): 215 耀 Nelson JD. Benefits of dietary copper in poultry. Proceedings of the 24th Annual Carolina Poultry Nutrition Conference, Prohaska JR. Changes in copper, Zincsuperoxide dismutase cy 原 tochrome C oxidase, glutathione peroxidase and glutathione trans 原 ferase activities in copperdeficient mice and rats[j]. J. Nutr., 1991, 121:335 耀 Smith JW, Tokach MD, Goodband RD, et al. Effects of the Inter 原 relationship Between Zinc Oxide and Copper Sulfate on Growth Per 原 formance of EarlyWeaned Pigs[J]. J. Anim. Sci.,1997,75:1 861 耀 Ward JD, Spears JW, Kegley EB. Bioavailability of Copper Pro 原 teinate and Copper Carbonate Relative to Copper Sulfate in Cattle [J]. J. Dairy Sci,,1996(79): 127 耀 Zanetti MA, PRHenry, CBAmmerman,et al. Estimation of the relative bioavailability of copper sources in chicks fed on conven 原 tional dietary amounts[j]. Br. Poult. Sci., 1991, 32:583 耀 588 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected])

39 营 养 研 究 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 酵 母 对 硒 元 素 的 富 集 研 究 和 改 良 策 略 李 海 彬 曾 礼 华 硒 在 自 然 界 中 以 无 机 硒 和 有 机 硒 两 种 形 式 存 在 遥 与 无 机 硒 相 比 袁 有 机 硒 具 有 吸 收 率 高 尧 生 物 活 性 强 尧 毒 性 低 尧 环 境 污 染 小 等 特 点 遥 有 机 硒 可 由 人 工 合 成, 也 可 通 过 生 物 转 化 和 生 物 富 集 等 不 同 方 式 生 产 遥 目 前 较 为 广 泛 采 用 的 是 酵 母 菌 富 集 法, 即 利 用 酵 母 菌 对 无 机 硒 进 行 富 集 和 生 物 有 机 化, 生 产 富 硒 酵 母 遥 菌 株 遥 胡 卫 红 等 渊 2000 冤 和 蒋 耀 庭 等 渊 2005 冤 分 别 采 用 CO 2 激 光 辐 照 和 高 压 静 电 场 辅 以 激 光 进 行 诱 变 育 种, 获 得 高 产 乙 醇 酵 母 菌 遥 李 寅 等 采 用 代 谢 育 种 技 术 选 育 到 能 够 很 好 地 利 用 无 机 氮 源 渊 如 氯 化 铵 冤 的 高 产 丙 酮 酸 光 滑 球 拟 酵 母 菌 株 遥 在 富 硒 酵 母 的 选 育 工 作 上 袁 可 从 上 述 各 种 方 法 中 得 到 启 示 遥 1 富 硒 酵 母 菌 种 的 选 育 2 酵 母 菌 对 硒 的 富 集 机 制 1.1 酵 母 菌 种 酵 母 富 集 硒 元 素 的 作 用 机 制 相 当 复 杂 袁 其 过 程 一 目 前 袁 国 际 上 多 采 用 酿 酒 酵 母 尧 葡 萄 汁 酵 母 尧 鲁 氏 酵 母 尧 阿 舒 接 合 酵 母 尧 汉 逊 酵 母 尧 球 拟 酵 母 尧 孢 圆 酵 母 尧 假 丝 酵 母 等 中 的 某 些 酵 母 菌 种 以 及 米 曲 霉 和 某 些 担 子 菌 作 为 富 集 硒 元 素 的 酵 母 载 体 遥 般 分 为 胞 外 结 合 与 沉 积 尧 胞 内 吸 收 与 转 化 几 个 步 骤 遥 具 体 的 富 集 途 径 有 物 理 吸 附 尧 生 物 吸 附 尧 表 面 沉 积 尧 主 动 运 输 和 被 动 扩 散 等 袁 其 中 生 物 吸 附 和 主 动 运 输 为 富 集 的 主 要 途 径 遥 1.2 选 育 方 法 除 了 传 统 的 选 育 方 法 外, 出 现 了 选 育 进 程 更 快 的 2.1 生 物 吸 附 生 物 吸 附 是 指 生 物 体 从 溶 液 中 吸 附 金 属 离 子 尧 非 新 方 法, 如 抗 性 驯 化 筛 选 尧 代 谢 调 控 尧 基 因 工 程 尧 原 生 质 体 诱 变 育 种 尧 单 倍 体 分 离 和 原 生 质 体 融 合 等 选 育 技 术 遥 李 明 春 等 渊 2000 冤 尧 吴 宝 强 等 渊 2005 冤 用 抗 性 驯 化 筛 选 法 选 育 出 高 生 物 量 尧 高 有 机 硒 转 化 率 和 高 硒 含 量 的 富 硒 酵 母 菌 株 遥 范 秀 英 等 首 创 将 原 生 质 体 融 合 育 种 技 术 与 亚 硝 基 胍 诱 变 结 合, 选 育 出 细 胞 硒 总 含 量 分 别 为 原 始 亲 株 的 2.8 倍 和 2.0 倍 的 菌 株 遥 高 玉 荣 等 则 运 用 原 生 质 体 融 合 和 紫 外 线 诱 变 结 合 的 技 术, 从 13 株 啤 酒 酵 母 中 筛 选 出 1 株 含 硒 量 高 的 菌 株 遥 近 年 来 不 少 学 者 利 用 新 型 物 理 诱 变 的 育 种 方 法 对 酵 母 菌 进 行 育 种 遥 蒋 海 波 等 采 用 氮 离 子 注 入 法 诱 变 金 属 化 合 物 或 固 体 颗 粒 的 过 程 袁 是 一 个 吸 附 解 吸 的 可 逆 过 程 袁 被 吸 附 的 离 子 可 被 其 它 离 子 尧 螯 合 剂 或 酸 解 吸 下 来 遥 其 机 理 主 要 为 络 合 与 离 子 交 换 遥 被 吸 附 的 金 属 离 子 可 与 生 物 配 位 体 中 带 负 电 的 官 能 团 结 合 而 形 成 络 合 物 袁 如 氨 基 酸 中 带 负 电 的 残 基 可 与 一 些 金 属 离 子 产 生 络 合 物 遥 除 羧 基 具 有 较 强 的 络 合 能 力 外 袁 硫 酸 根 尧 氨 基 尧 羟 基 与 金 属 离 子 也 存 在 络 合 现 象 遥 酵 母 在 吸 附 金 属 离 子 的 同 时 经 常 会 伴 随 其 它 离 子 袁 如 Ca 2+ 尧 Mg 2+ 尧 H + 等 的 释 放, 而 且 释 放 出 的 离 子 总 电 荷 数 大 致 等 于 被 吸 附 的 电 荷 数 遥 因 而 吸 附 的 过 程 可 以 被 看 作 是 一 个 离 子 交 换 过 程 袁 随 着 交 换 的 进 行 袁 使 得 硒 离 子 在 酵 母 细 胞 内 得 到 富 集 遥 选 育 出 高 产 麦 角 醇 酵 母 菌 遥 李 红 民 等 渊 2001 冤 和 由 媛 等 渊 2006 冤 采 用 HeNe 激 光 诱 变 面 包 酵 母 菌 渊 啤 酒 酵 母 冤, 2.2 主 动 运 输 主 动 运 输 是 微 生 物 主 动 吸 收 胞 外 物 质 的 一 种 方 分 别 筛 选 到 遗 传 性 能 稳 定 和 发 酵 特 性 稳 定 的 高 活 力 式, 需 要 细 胞 提 供 能 量 和 载 体 的 参 与, 能 有 效 地 使 胞 外 物 质 在 低 浓 度 下 逆 浓 度 梯 度 进 入 细 胞 内, 从 而 得 到 富 集 遥 主 动 运 输 是 一 个 极 为 复 杂 的 过 程, 与 酵 母 中 的 糖 尧 李 海 彬, 四 川 师 范 大 学 生 命 科 学 学 院,610068, 四 川 成 都 市 锦 江 区 静 安 路 5 号 曾 礼 华, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 脂 尧 蛋 白 质 尧 无 机 盐 的 代 谢 密 切 相 关, 并 形 成 微 量 元 素 与 糖 尧 脂 尧 蛋 白 质 等 的 结 合 体, 因 此 以 主 动 运 输 途 径 富 集 的 硒 元 素 具 有 较 高 的 生 物 活 性 遥 收 稿 日 期 : 转 运 系 统 39

40 李 海 彬 等 : 酵 母 对 硒 元 素 的 富 集 研 究 和 改 良 策 略 营 养 研 究 通 过 吸 收 尧 积 累 的 硒 依 靠 体 内 的 转 动 系 统 而 进 入 菌 体 内 部, 进 而 转 化 为 有 机 硒 遥 Gharieb 等 在 对 富 硒 酿 4.1 硒 浓 度 培 养 基 中 硒 的 浓 度 对 微 生 物 的 生 长 及 其 对 硒 的 酒 酵 母 的 动 力 学 研 究 中 发 现 袁 酵 母 菌 对 硒 的 吸 收 存 在 着 两 个 转 运 系 统 院 高 亲 和 力 转 运 系 统 和 低 亲 和 力 转 运 系 统 遥 当 硒 在 低 浓 度 渊 0.0 耀 0.1 mm 冤 时, 启 动 高 亲 和 力 转 运 系 统 对 吸 收 的 硒 进 行 转 运 曰 当 硒 在 高 浓 度 渊 0.1 耀 1.0 mm 冤 时, 则 启 动 低 亲 和 力 转 运 系 统 遥 亚 硫 酸 盐 对 上 述 转 运 系 统 的 转 运 速 率 起 促 进 作 用, 且 最 佳 浓 度 为 0.5 mm 遥 该 报 道 还 认 为 细 胞 质 小 液 泡 与 酵 母 对 硒 的 吸 收 有 直 接 关 系, 是 对 硒 解 毒 的 作 用 场 所 遥 转 化 率 有 极 大 的 影 响 遥 低 硒 浓 度 下 菌 体 中 的 硒 含 量 随 培 养 基 中 硒 浓 度 的 增 加 而 增 加 曰 但 当 硒 含 量 达 到 一 定 浓 度 时, 菌 体 的 生 物 量 和 对 硒 的 转 化 率 则 随 着 硒 浓 度 的 增 加 而 降 低 遥 因 此, 通 常 将 硒 源 分 批 添 加 至 培 养 基 中, 不 但 可 避 免 在 发 酵 初 期 高 浓 度 的 硒 对 菌 体 分 裂 繁 殖 的 影 响, 而 且 还 有 利 于 菌 体 对 硒 的 富 集 遥 李 爱 芬 等 在 啤 酒 酵 母 发 酵 开 始 后 第 2 耀 11 h 内 采 用 流 加 的 方 法 逐 渐 加 入 亚 硒 酸 钠, 所 得 酵 母 细 胞 中 硒 3 硒 在 酵 母 菌 体 中 的 分 布 及 存 在 形 式 酵 母 菌 吸 收 的 微 量 元 素 有 51% 与 细 胞 壁 的 大 分 浓 度 可 达 到 1900 滋 g/g 以 上 遥 陈 敏 等 通 过 上 罐 发 酵 研 究 发 现, 在 培 养 30 h 后 进 行 定 时 加 入 Se 4+, 得 到 的 干 酵 子 组 分 紧 密 结 合,45% 左 右 与 细 胞 液 中 的 肽 尧 氨 基 酸 结 合, 少 部 分 与 可 溶 性 蛋 白 质 结 合 而 转 化 为 有 机 状 态 遥 硒 在 机 体 内 的 存 在 与 硫 元 素 有 极 大 的 相 似 性, 并 一 般 取 代 化 合 物 中 的 硫 原 子, 使 硫 化 物 转 化 为 相 应 的 硒 化 物 袁 如 蛋 氨 酸 中 的 硫 被 硒 取 代 变 成 硒 代 蛋 氨 酸 遥 酵 母 中 的 硒 以 有 机 结 合 硒 为 主, 主 要 包 括 含 硒 酶 尧 含 硒 蛋 白 质 及 含 硒 多 糖 类 等 遥 铁 梅 等 (2006) 尧 杨 林 生 等 (1995) 研 究 发 现 袁 酵 母 中 的 硒 大 部 分 通 过 共 价 键 结 合 的 方 式 以 硒 多 糖 尧 硒 蛋 白 和 硒 代 蛋 氨 酸 等 生 物 有 机 分 子 形 式 存 在, 很 少 以 游 离 态 存 在 遥 Zhil'tsova 等 研 究 发 现 袁 在 假 丝 酵 母 中 富 集 的 硒 主 要 存 在 于 细 胞 壁 (16 豫 耀 20% 冤 尧 膜 结 构 ( 约 32%) 尧 胞 质 氨 基 酸 片 段 和 可 溶 性 蛋 白 ( 共 约 50%) 曰 分 别 约 有 1% 和 70% 的 硒 以 有 机 硒 的 形 式 存 在 于 脂 质 和 蛋 白 质 ( 或 氨 基 酸 ) 之 中, 有 27% 的 硒 以 无 机 硒 形 式 存 在 遥 Yoshida 等 测 得 富 硒 酵 母 中 的 硒 有 74.8% 以 硒 代 蛋 氨 酸 尧 9.9% 以 硒 代 半 胱 氨 酸 尧 5.1% 以 亚 硒 酸 盐 的 形 式 存 在, 但 有 10.2% 的 硒 以 未 知 形 式 存 在 遥 Schrauzer(2006) 尧 Rayman 等 (2004) 尧 Reyes 等 (2006) 尧 Dumont 等 (2004) 研 究 都 发 现 袁 酵 母 富 集 的 硒 主 要 以 硒 代 蛋 氨 酸 形 式 存 在 遥 Chassaigne H 等 (2002) 测 得 富 硒 酵 母 中 的 小 分 子 硒 是 以 硒 代 半 胱 氨 酸 尧 硒 代 蛋 氨 酸 尧 硒 酸 盐 和 亚 硒 酸 盐 的 形 式 存 在 遥 Po 鬔 atajko 等 (2004) 研 究 发 现 袁 在 细 胞 壁 上 硒 的 存 在 形 式 主 要 为 硒 代 蛋 氨 酸 遥 母 总 硒 含 量 较 摇 瓶 发 酵 所 得 的 要 高,Se 4+ 转 化 率 达 84.71% 遥 Demirci 等 在 糖 蜜 啤 酒 酵 母 富 硒 中, 对 一 次 性 和 分 阶 段 添 加 硒 酸 钠 及 添 加 量 进 行 对 比 试 验 发 现 袁 在 两 种 方 式 中, 低 添 加 量 (31.6 g/l) 的 产 物 生 物 量 和 含 硒 量 都 比 高 添 加 量 (63.2 g/l) 的 高 遥 发 酵 初 期 为 微 生 物 的 增 殖 阶 段, 而 中 后 期 主 要 是 产 物 的 积 累 阶 段 遥 酵 母 细 胞 在 对 数 期 吸 收 硒 的 能 力 显 著 高 于 其 它 生 长 阶 段, 并 随 着 细 胞 的 增 殖 富 硒 能 力 增 强, 以 后 随 稳 定 期 的 接 近 而 逐 渐 减 弱, 故 硒 的 添 加 方 式 采 用 分 期 添 加 为 好 遥 陈 福 生 等 研 究 发 现 袁 在 发 酵 过 程 中 过 早 或 过 迟 地 添 加 硒 源 都 不 能 得 到 理 想 的 富 硒 酵 母, 而 在 第 5 尧 8 尧 11 h 分 别 添 加 10 mg/l 的 亚 硒 酸 钠, 生 物 量 和 富 硒 效 果 都 比 较 好 曰 硒 的 每 次 添 加 量 高 于 20 mg/l 发 酵 液 时 袁 对 酵 母 菌 的 生 长 有 明 显 的 抑 制 作 用 曰 但 当 低 于 20 mg/l 发 酵 液 并 在 发 酵 的 中 后 期 逐 步 增 加 硒 的 添 加 量 时 袁 所 得 产 品 中 硒 的 含 量 较 高 遥 陆 建 安 等 在 酵 母 发 酵 初 期 使 硒 浓 度 保 持 在 较 低 水 平 ( 约 7 滋 g/ml), 当 对 数 生 长 期 来 临 时, 再 提 高 硒 浓 度 至 滋 g/ml 袁 结 果 成 品 酵 母 中 有 机 硒 含 量 达 90% 以 上, 且 生 物 量 提 高 15.2% 遥 Suhajda 等 在 啤 酒 酵 母 的 对 数 期 添 加 30 mg/ml 的 亚 硒 酸 钠, 可 得 到 含 硒 量 1200 耀 1400 滋 g/g 的 干 酵 母 遥 Poncede 等 在 啤 酒 酵 母 生 产 L 硒 代 甲 硫 氨 酸 时 指 出, 最 佳 方 式 是 在 生 长 期 添 加 低 浓 度 (10 耀 20 mg/kg) 的 亚 硒 酸 钠 遥 Infante 等 (2004) 尧 Block 等 (2004) 报 道 了 硒 在 富 硒 酵 母 中 还 以 一 种 称 为 硒 原 甲 基 硒 代 半 胱 氨 酸 的 新 形 式 4.2 培 养 基 天 然 培 养 基 与 合 成 培 养 基 相 比, 除 了 同 样 为 酵 母 存 在 遥 Garc 侏 areyes 等 研 究 也 发 现 袁 硒 还 以 含 硒 腺 嘌 呤 的 新 形 式 存 在 于 富 硒 酵 母 菌 体 中 遥 Lindemann 等 则 发 现 袁 硒 还 以 硒 谷 胱 甘 肽 和 硒 半 胱 氨 酰 甘 氨 酸 的 形 式 存 在 于 富 硒 酵 母 中 遥 菌 提 供 营 养 之 外, 还 含 有 一 些 促 生 长 因 子 之 类 的 物 质, 并 且 成 本 低 遥 麦 芽 汁 培 养 基 为 较 好 的 天 然 培 养 基 遥 王 凤 琴 通 过 试 验 比 较 发 现 袁 麦 芽 汁 培 养 基 比 合 成 培 养 基 效 果 好, 酵 母 产 量 与 硒 富 集 量 都 高, 故 可 选 择 麦 芽 汁 培 4 影 响 酵 母 富 集 硒 的 因 素 养 基 作 为 种 子 和 发 酵 培 养 基 遥 江 澜 等 综 合 比 较 3 种 培 40

41 营 养 研 究 李 海 彬 等 : 酵 母 对 硒 元 素 的 富 集 研 究 和 改 良 策 略 养 基 袁 发 现 选 择 麦 芽 汁 培 养 基 较 为 适 宜 遥 体 含 硒 量 越 高 遥 吴 宝 强 等 研 究 报 道, 在 啤 酒 酵 母 富 硒 4.3 发 酵 培 养 时 间 培 养 时 间 太 短 会 导 致 菌 体 数 量 过 低, 产 物 生 成 量 摇 瓶 培 养 中, 一 定 范 围 内 随 着 转 速 的 增 加, 溶 氧 量 也 在 增 大, 但 转 速 超 出 该 范 围 后, 溶 氧 量 反 而 会 降 低, 并 确 不 足 曰 太 长 则 会 导 致 菌 体 的 死 亡, 同 时 对 产 物 的 生 成 产 生 抑 制 作 用, 而 且 还 会 增 加 成 本 遥 李 明 春 等 分 别 对 培 养 48 尧 60 尧 72 和 84 h 的 酿 酒 酵 母 培 养 物 进 行 了 比 较 发 现 袁 随 着 培 养 时 间 的 延 长, 菌 体 含 硒 量 随 之 下 降 袁 但 是 当 延 长 培 养 至 84 h 时, 硒 含 量 有 一 个 迅 速 的 回 升, 而 且 超 过 48 h 时 硒 含 量 的 一 倍 遥 但 考 虑 到 最 后 的 菌 体 浓 度 和 成 本, 认 为 培 养 时 间 选 择 在 48 h 终 止 发 酵 较 为 合 理 遥 柴 丽 红 研 究 发 现 袁 培 养 h 时 啤 酒 酵 母 有 机 硒 含 量 及 硒 总 含 量 最 高 遥 范 秀 英 等 (2003) 在 糖 蜜 培 养 基 中 对 菌 株 ZFF28 培 养 h, 硒 总 含 量 最 高 遥 定 最 适 转 速 为 200 r/min 遥 范 秀 英 等 (2003) 研 究 发 现, 在 糖 蜜 摇 瓶 培 养 中, 当 0 ml 三 角 瓶 装 液 量 为 50 ml 时 细 胞 硒 总 含 量 达 到 最 高 遥 柴 丽 红 等 在 对 啤 酒 酵 母 富 硒 培 养 中 发 现, 在 200 r/min 的 转 速 下, 当 0 ml 三 角 瓶 装 液 量 为 60 ml 时, 硒 总 含 量 达 到 最 高 值 遥 李 爱 芬 等 在 5L 发 酵 罐 中 所 做 的 啤 酒 酵 母 富 硒 试 验 采 用 分 阶 段 调 节 通 气 量 尧 搅 拌 速 度 的 培 养 方 法, 在 延 迟 期 搅 拌 速 度 为 0 r/min, 通 气 量 为 3.34 kpa 曰 进 入 对 数 生 长 期 后 分 别 提 高 到 500 r/min 和 kpa 袁 得 到 高 硒 质 量 分 数 的 富 硒 酵 母 遥 4.4 接 种 量 接 种 量 的 多 少 影 响 着 菌 体 的 生 长 繁 殖 速 度 遥 接 种 4.7 硒 源 酵 母 菌 对 不 同 的 硒 源 具 有 不 同 的 吸 收 同 化 能 力, 量 多 使 菌 种 移 到 发 酵 瓶 后 容 易 适 应, 而 且 种 子 液 中 还 含 有 大 量 体 外 的 水 解 酶 类, 有 利 于 对 原 料 的 利 用, 但 是 过 多 的 接 种 量 使 菌 体 生 长 过 快, 造 成 基 质 缺 乏 或 溶 解 氧 不 足 而 不 利 于 菌 体 的 繁 殖 曰 而 过 少 则 可 能 导 致 发 酵 周 期 延 长, 菌 体 生 长 较 慢 遥 陆 建 安 等 (2004) 尧 柴 丽 红 等 (2006) 综 合 接 种 量 对 啤 酒 酵 母 的 生 物 量 及 硒 含 量 的 影 响 发 现 袁 接 种 量 选 取 10% 为 佳 遥 吴 宝 强 等 在 蔗 糖 培 养 基 中 对 啤 酒 酵 母 进 行 摇 瓶 培 养 中 也 发 现 最 适 接 种 量 为 10% 遥 亚 硒 酸 钙 是 较 理 想 的 硒 源 遥 黎 星 术 等 研 究 发 现 袁 亚 硒 酸 钠 尧 亚 硒 酸 钙 尧 亚 硒 酸 钴 均 可 作 为 硒 源 生 产 饲 料 硒 酵 母 遥 啤 酒 酵 母 对 亚 硒 酸 钙 有 较 好 的 同 化 吸 收 作 用, 亚 硒 酸 钙 性 质 稳 定 尧 毒 性 低, 使 用 和 管 理 都 较 亚 硒 酸 钠 方 便 遥 邝 光 荣 等 发 现 袁 酵 母 菌 对 亚 硒 酸 钙 尧 亚 硒 酸 钠 尧 二 氧 化 硒 等 多 种 硒 源 的 有 机 转 化 率 不 同, 其 中 亚 硒 酸 钙 作 为 硒 源 具 有 毒 性 小 尧 可 转 化 率 高 的 优 点 遥 各 种 因 素 对 酵 母 产 品 的 生 物 量 及 硒 含 量 的 影 响 是 不 同 的, 且 不 同 研 究 者 得 出 不 同 结 果, 这 与 研 究 者 所 4.5 温 度 和 培 养 基 ph 值 酵 母 菌 的 生 长 随 着 温 度 和 ph 值 的 不 同 而 出 现 不 采 用 的 研 究 方 法 尧 菌 种 尧 原 材 料 和 培 养 条 件 等 因 素 的 不 同 有 关 遥 柴 丽 红 等 (2006) 尧 陆 建 安 等 (2002) 发 现 袁 对 啤 同 的 适 应 性 遥 在 较 低 温 度 时 生 长 相 对 比 较 缓 慢, 在 较 高 温 度 时 生 长 几 乎 停 止, 而 在 28 益 左 右 较 适 合 酵 母 的 生 长 曰 在 较 低 ph 值 条 件 下 酵 母 菌 生 长 相 对 比 较 差, 在 酒 酵 母 富 硒 性 能 影 响 最 大 的 因 素 是 硒 添 加 量 遥 Suhajda 等 报 道 袁 培 养 基 的 ph 值 是 影 响 啤 酒 酵 母 富 集 硒 的 最 重 要 因 素 遥 较 高 ph 值 条 件 下 菌 体 几 乎 停 止 生 长, 而 ph 值 在 中 性 偏 酸 时 较 适 合 酵 母 的 生 长 遥 朱 蕴 兰 等 (2006) 研 究 发 现 袁 在 5 酵 母 富 集 硒 的 研 究 现 状 国 外 从 20 世 纪 70 年 代 就 开 始 进 行 富 硒 酵 母 的 研 温 度 为 28 益 尧 ph 值 为 5 时 液 体 活 性 酵 母 的 有 机 硒 转 化 率 最 高 袁 为 80.6% 遥 吴 宝 强 等 在 对 啤 酒 酵 母 进 行 摇 瓶 培 养 中 得 到 最 适 温 度 30 益 尧 初 始 ph 值 为 4.0 遥 范 秀 英 等 渊 2003 冤 研 究 发 现 袁 在 糖 蜜 培 养 基 中 温 度 为 28 益 尧 ph 值 6.0 耀 6.5 对 菌 株 ZFF28 富 硒 最 适 合 遥 究, 现 在 许 多 国 家 和 地 区 均 有 富 硒 酵 母 作 为 食 品 添 加 剂 和 药 物 出 售 遥 Demirci 等 在 含 有 微 量 硫 和 蛋 氨 酸 的 培 养 基 中 进 行 连 续 发 酵 培 养 富 硒 啤 酒 酵 母, 当 以 0.2 g/h 的 稀 释 速 率 和 0.28 g/l 的 浓 度 添 加 硒 酸 钠 时, 可 得 干 菌 体 生 物 量 为 0.76 g/l 和 干 菌 体 硒 含 量 为 687 滋 g/g 遥 4.6 氧 含 量 酵 母 菌 是 兼 性 厌 氧 菌, 其 生 长 以 有 氧 生 长 为 主, 培 Suhajda 等 利 用 啤 酒 酵 母 进 行 富 硒 研 究 袁 得 到 含 硒 量 1200 耀 1400 滋 g/g 的 干 菌 体 袁 其 体 内 的 无 机 硒 含 量 下 养 基 中 氧 的 溶 解 度 影 响 其 产 量 和 富 硒 效 果 遥 Suhajda 报 道, 培 养 基 的 氧 含 量 是 影 响 啤 酒 酵 母 富 集 硒 的 重 要 因 素 遥 培 养 基 中 氧 的 含 量 可 通 过 改 变 搅 拌 速 度 尧 通 气 量 尧 装 液 量 和 摇 瓶 的 转 速 来 调 节 遥 李 明 春 等 研 究 发 现, 在 500 ml 三 角 瓶 中 培 养 NK2 菌 株 时, 通 气 量 越 大, 菌 降 了 5 豫 耀 6% 遥 Demirci 等 在 比 较 一 次 性 和 分 阶 段 不 同 方 式 添 加 硒 源 中 袁 分 别 获 得 生 物 量 37 g/l 尧 含 硒 量 2846 滋 g/g 干 菌 体 和 生 物 量 45 g/l 尧 含 硒 量 2495 滋 g/g 干 菌 体 的 富 硒 啤 酒 酵 母 遥 我 国 在 这 方 面 的 研 究 虽 然 起 步 较 晚, 但 却 取 得 了 41

42 李 海 彬 等 : 酵 母 对 硒 元 素 的 富 集 研 究 和 改 良 策 略 营 养 研 究 一 定 的 成 绩 遥 王 岁 楼 对 活 性 干 酵 母 进 行 摇 瓶 发 酵 生 产, 获 得 酵 母 体 干 重 尧 有 机 硒 含 量 和 硒 转 化 率 分 别 可 达 15.8 g/l 尧 滋 g/g 和 83.2% 的 富 硒 酵 母 遥 高 玉 荣 等 筛 选 出 富 硒 量 为 821 mg/kg, 酵 母 干 菌 体 收 获 量 为 每 100 ml 的 啤 酒 酵 母 菌 0.88 g 遥 陈 福 生 等 采 用 不 同 添 加 时 间 和 添 加 量 分 多 次 添 加 硒 的 培 养 方 式, 可 得 到 干 菌 体 中 硒 含 量 达 1895 滋 g/g 的 富 硒 酵 母 遥 李 爱 芬 等 采 用 5L 发 酵 罐 啤 酒 酵 母 富 硒 试 验 中 袁 所 得 酵 母 的 硒 含 量 为 1900 滋 g/g 以 上 袁 酵 母 细 胞 对 硒 离 子 的 利 用 效 率 是 50% 以 上 遥 柴 丽 红 等 获 得 硒 含 量 达 滋 g/g 尧 硒 总 含 量 达 滋 g/l 的 啤 酒 酵 母 袁 富 硒 效 果 较 好 遥 陈 敏 等 研 究 了 啤 酒 酵 母 的 上 罐 发 酵 培 养 袁 所 得 到 的 干 酵 母 总 硒 含 量 较 摇 瓶 发 酵 所 得 有 所 提 高 袁 达 滋 g/g 袁 Se 4+ 转 化 率 达 84.71% 遥 吴 宝 强 等 选 育 出 的 富 硒 啤 酒 酵 母 生 物 量 达 到 10 g/l 尧 硒 含 量 超 过 1500 滋 g/g 尧 硒 总 含 量 超 过 滋 g/l, 其 中 有 机 硒 含 量 超 过 90% 遥 范 秀 英 等 运 用 全 新 育 种 技 术 要 要 原 生 质 体 融 合 育 种 技 术, 选 育 出 生 物 量 可 达 8.2 g/l 尧 硒 含 量 达 2050 滋 g/g 尧 硒 总 含 量 达 到 滋 g/l 尧 有 机 硒 含 量 占 细 胞 硒 含 量 的 91% 以 上 的 富 硒 酵 母 遥 6 存 在 问 题 与 改 良 策 略 6.1 富 硒 酵 母 的 生 产 目 前 关 于 酵 母 菌 体 富 集 硒 元 素 的 研 究 主 要 集 中 在 制 造 方 法 尧 应 用 技 术 方 面, 对 于 富 集 机 理 方 面 也 有 报 道, 还 存 在 着 许 多 不 足 和 空 白, 该 方 面 的 相 关 研 究 亟 需 加 强 曰 富 硒 酵 母 的 产 品 中, 还 含 有 一 定 量 的 无 机 硒, 应 通 过 条 件 优 化, 进 一 步 降 低 其 含 量, 提 高 有 机 硒 的 含 量, 以 更 好 地 指 导 生 产 遥 由 于 生 物 机 体 的 复 杂 性, 体 内 的 硒 含 量 和 化 学 形 态 的 稳 定 性 能 难 以 达 到 较 理 想 的 状 态 遥 因 此 袁 在 富 硒 酵 母 生 产 研 究 中, 对 其 相 关 的 应 用 理 论 和 机 理 研 究 应 加 强 投 入 遥 6.2 菌 种 的 选 育 从 国 内 外 的 研 究 看, 自 然 筛 选 所 得 的 菌 种 在 生 产 中 普 遍 存 在 着 菌 体 生 物 量 和 硒 含 量 的 矛 盾, 即 菌 体 硒 含 量 高 的, 其 生 物 量 不 高 曰 而 生 物 量 高 的, 其 硒 含 量 却 较 低 遥 而 通 过 原 生 质 体 融 合 技 术 等 新 育 种 技 术 选 育 出 的 菌 体 在 生 物 量 和 硒 含 量 上 都 能 同 时 得 到 显 著 提 高 袁 分 子 生 物 学 的 发 展 和 应 用, 加 快 了 育 种 的 工 作 进 程 遥 如 果 能 鉴 定 并 克 隆 与 富 硒 能 力 相 关 的 基 因, 那 么 可 通 过 基 因 工 程 培 育 具 有 稳 定 遗 传 性 的 高 富 硒 能 力 酵 母 菌 株 遥 Eide 等 最 近 研 究 发 现 袁 基 因 YDR065W 与 酵 母 42 菌 对 微 量 元 素 ( 包 括 硒 ) 的 吸 收 功 能 有 关 遥 因 此, 应 着 力 开 发 研 究 新 的 尧 高 效 的 育 种 技 术, 以 筛 选 硒 富 集 量 高 尧 生 产 周 期 短 尧 产 量 高 的 菌 株 遥 对 菌 种 的 选 育 目 前 大 多 是 在 常 用 的 菌 种 范 围 内 进 行 筛 选, 这 样 就 在 一 定 程 度 上 限 制 了 菌 种 种 类 的 多 元 化 和 育 种 工 作 的 进 展 及 成 果 的 提 高 程 度 遥 因 此, 以 后 的 育 种 工 作 应 扩 大 菌 种 的 来 源, 促 使 其 多 元 化, 在 菌 种 源 头 上 提 高 酵 母 对 无 机 硒 的 富 集 转 化 能 力, 在 育 种 上 提 高 有 机 硒 的 产 量 遥 在 对 微 量 元 素 的 富 集 研 究 中, 绝 大 多 数 都 是 富 集 单 一 元 素, 同 时 富 集 不 同 元 素 的 报 道 极 少 袁 这 就 使 得 所 产 富 集 酵 母 的 元 素 营 养 价 值 比 较 单 一, 因 此 袁 下 一 步 的 育 种 工 作 应 向 选 育 出 能 同 时 高 效 富 集 多 种 元 素 的 菌 种 方 向 发 展, 以 提 高 酵 母 的 元 素 富 集 价 值 和 元 素 营 养 价 值 遥 现 代 工 农 业 生 产 中 产 生 的 废 弃 物 往 往 含 有 大 量 的 无 机 元 素, 直 接 排 放 既 浪 费 又 对 环 境 造 成 污 染 遥 育 种 工 作 可 从 这 个 角 度 出 发, 选 育 能 在 各 种 相 应 的 工 业 废 弃 物 中 生 长 并 富 集 其 中 无 机 元 素 的 适 宜 菌 种 袁 可 达 到 利 用 资 源 又 环 保 的 作 用 遥 自 然 界 中 某 些 无 机 元 素 大 量 地 存 在 于 某 些 极 端 环 境 中, 菌 种 的 选 育 工 作 也 可 从 这 一 方 面 出 发, 选 育 能 在 极 端 环 境 中 生 长 并 对 无 机 元 素 进 行 富 集 作 用 的 适 合 菌 种, 以 满 足 生 产 的 需 要 遥 征 订 启 事 ( 参 考 文 献 43 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) ( 编 辑 : 高 雁,[email protected]) 本 刊 为 半 月 刊, 大 16 开 本, 每 期 正 文 64 页, 公 开 发 行, 各 地 邮 局 均 可 订 阅, 也 可 直 接 向 本 刊 发 行 部 订 购 国 际 标 准 连 续 出 版 物 号 ISSN X, 国 内 统 一 连 续 出 版 物 号 CN211169/S, 邮 发 代 号 :8163 每 期 定 价 6 元, 全 年 24 期 共 144 元 地 址 : 沈 阳 市 金 沙 江 街 16 号 6 门 邮 编 : 发 行 部 电 话 :

43 营 养 研 究 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 锌 的 营 养 作 用 及 鸡 对 锌 需 要 量 的 研 究 周 秀 霞 锌 是 动 物 机 体 所 必 需 的 微 量 元 素 之 一 袁 是 迄 今 为 止 发 现 的 动 物 必 需 微 量 元 素 中 功 能 最 多 的 一 种 遥 近 年 2.1 锌 的 吸 收 锌 的 吸 收 部 位 因 畜 种 不 同 而 有 所 不 同, 在 单 胃 动 来 袁 锌 的 重 要 性 进 一 步 被 认 识 袁 并 以 饲 料 添 加 剂 的 形 式 在 畜 牧 生 产 中 得 到 了 广 泛 的 应 用 遥 饲 料 中 锌 盈 缺 及 其 平 衡 状 况 袁 不 仅 会 影 响 畜 禽 生 产 效 率 及 饲 料 利 用 率 袁 而 且 会 影 响 畜 禽 产 品 中 锌 元 素 的 含 量 袁 从 而 影 响 人 的 健 康 遥 随 着 营 养 学 研 究 的 深 入 和 检 测 技 术 的 改 进 袁 有 关 锌 的 营 养 作 用 和 功 能 研 究 越 来 越 深 入 袁 其 在 生 产 中 的 应 用 将 会 有 更 广 阔 的 前 景 遥 物 中, 锌 主 要 在 小 肠 远 端 吸 收 ; 在 反 刍 动 物 中 袁 约 有 1/3 的 锌 在 真 胃 吸 收 曰 其 余 大 部 分 动 物 袁 锌 主 要 在 小 肠 吸 收 遥 鸡 对 锌 的 吸 收 始 于 腺 胃 袁 而 以 小 肠 吸 收 量 较 大 袁 其 中 尤 以 十 二 指 肠 吸 收 最 强 遥 被 机 体 吸 收 的 锌 与 血 液 转 运 蛋 白 结 合 袁 通 过 血 液 循 环 运 送 到 肝 脏 和 其 它 组 织 遥 机 体 对 锌 的 稳 恒 态 控 制 主 要 通 过 调 节 吸 收 来 完 成 遥 当 机 体 吸 收 时 袁 胰 腺 分 泌 一 种 锌 结 合 蛋 白 袁 这 种 蛋 白 在 1 锌 在 动 物 体 内 的 分 布 及 在 饲 料 中 的 含 量 锌 广 泛 分 布 于 动 物 体 内 的 所 有 组 织 中, 在 前 列 肠 道 内 与 锌 结 合 形 成 复 合 物 袁 然 后 通 过 肠 道 绒 毛 膜 到 达 上 皮 细 胞 袁 当 机 体 内 缺 锌 时 袁 金 属 复 合 物 释 放 出 锌 袁 腺 尧 精 液 尧 眼 睛 中 的 含 量 最 高, 其 次 是 骨 骼 尧 肝 脏 和 皮 毛, 其 它 组 织 的 含 量 较 少 遥 各 种 动 物 组 织 器 官 中 的 锌 含 量 差 异 不 大, 但 随 着 动 物 年 龄 尧 性 别 和 所 采 食 的 饲 并 进 入 血 液 循 环 中 到 达 各 组 织 发 挥 作 用 遥 当 机 体 内 的 锌 过 量 时 袁 锌 则 与 金 属 复 合 物 结 合 储 存 于 肝 脏 中 袁 在 需 要 时 被 释 放 出 来 供 机 体 利 用 遥 料 锌 浓 度 的 变 化 而 有 所 不 同 遥 哺 乳 动 物 和 禽 类 体 内 含 锌 量 在 10 耀 100 mg/kg 袁 平 均 30 mg/kg 袁 其 中 骨 骼 肌 中 2.2 锌 的 排 泄 在 正 常 情 况 下 袁 锌 主 要 经 粪 排 泄 袁 粪 中 锌 大 部 分 的 锌 约 占 体 内 总 锌 量 的 50% 耀 60% 袁 骨 骼 中 的 锌 约 占 总 锌 量 的 30%, 其 它 组 织 器 官 中 含 锌 较 少, 皮 尧 毛 中 的 锌 随 动 物 种 类 不 同 而 变 化 较 大 遥 成 年 动 物 血 液 中 锌 分 布 为 院 红 细 胞 中 约 占 75%, 血 浆 中 22%, 血 清 锌 可 作 为 是 未 被 吸 收 的 外 源 锌 袁 还 有 一 小 部 分 是 由 消 化 道 分 泌 的 内 源 锌 袁 这 些 锌 随 着 胰 液 和 肠 液 通 过 肠 道 排 出 袁 随 尿 排 出 的 锌 很 少 遥 另 外 袁 通 过 汗 液 尧 乳 汁 尧 脱 落 的 头 发 也 排 出 一 部 分 遥 蛋 鸡 还 可 经 蛋 排 出 部 分 锌 遥 动 物 体 内 锌 营 养 状 况 的 标 识 曰 肌 肉 中 锌 含 量 因 其 色 泽 及 功 能 活 性 不 同 而 异 遥 蛋 中 锌 含 量 也 受 饲 粮 锌 水 平 的 2.3 影 响 锌 利 用 的 因 素 许 多 因 素 影 响 锌 的 利 用 袁 如 各 种 生 理 应 激 尧 疾 病 尧 影 响 遥 植 物 性 饲 料 中 广 泛 存 在 锌 元 素 袁 但 其 锌 含 量 受 土 壤 条 件 尧 作 物 品 种 尧 饲 料 调 制 期 尧 施 肥 状 况 等 影 响 袁 一 般 含 锌 量 随 植 物 成 熟 而 降 低 袁 幼 尧 嫩 植 物 的 含 量 较 高 遥 按 干 物 质 计 算 袁 每 千 克 青 饲 料 平 均 含 锌 量 约 30 mg/kg 袁 小 麦 尧 燕 麦 和 大 麦 中 含 30 耀 40 mg/kg, 玉 米 秸 秆 中 含 6.52 mg/kg 遥 蛋 白 类 饲 料 如 大 豆 饼 尧 芝 麻 饼 尧 棉 籽 饼 和 花 生 饼 锌 含 量 比 禾 谷 类 籽 实 高, 一 般 在 50 耀 70 mg/kg 遥 动 物 性 饲 料 锌 含 量 比 植 物 性 的 高, 其 中 鱼 粉 的 含 锌 量 环 境 变 化 和 饲 粮 组 成 等 均 会 影 响 锌 的 代 谢 遥 据 报 道 袁 高 钙 饲 粮 ( 尤 其 是 单 胃 动 物 尧 家 禽 和 鱼 类 饲 粮 ) 常 导 致 锌 缺 乏 症 袁 钙 不 仅 影 响 锌 的 吸 收 袁 而 且 还 影 响 锌 在 体 内 的 分 配 遥 当 饲 料 中 糠 麸 比 例 过 大 袁 引 起 植 酸 盐 增 多 时 袁 锌 与 植 酸 结 合 袁 并 与 钙 形 成 难 溶 的 钙 原 锌 原 植 酸 复 合 物 袁 阻 碍 了 锌 的 吸 收 遥 其 它 元 素 如 磷 尧 铜 尧 铁 等 与 锌 存 在 着 颉 颃 关 系 袁 锌 与 这 些 元 素 的 竞 争 会 降 低 其 生 物 利 用 率 遥 高 蛋 白 能 增 强 机 体 对 锌 的 吸 收 尧 贮 存 和 代 谢 遥 维 生 素 A 尧 D 尧 E 和 B 也 能 促 进 锌 的 利 用 遥 最 高 遥 通 常 配 合 饲 料 中 的 原 料 能 提 供 给 动 物 体 所 需 要 3 锌 在 动 物 生 产 中 的 作 用 的 锌, 但 由 于 锌 的 吸 收 率 很 低, 必 须 超 量 添 补 才 能 满 足 其 生 理 需 要 遥 3.1 锌 与 动 物 生 长 锌 是 40 种 金 属 酶 的 组 成 成 分 袁 200 多 种 酶 的 激 活 2 锌 在 动 物 体 内 的 代 谢 及 影 响 因 素 周 秀 霞, 山 西 农 业 大 学,030801, 山 西 农 业 大 学 333 信 箱 收 稿 日 期 : 因 子 袁 它 参 与 碳 酸 酐 酶 尧 DNA 聚 合 酶 尧 碱 性 磷 酸 酶 尧 胰 腺 羧 基 肽 酶 尧 乳 酸 脱 氢 酶 等 重 要 酶 的 合 成 袁 并 与 核 酸 及 蛋 白 质 的 合 成 密 切 相 关 袁 因 此 它 能 影 响 细 胞 分 裂 尧 生 长 和 再 生 遥 锌 促 进 幼 年 动 物 的 生 长 发 育 除 了 通 过 组 成 各 种 含 锌 酶 以 外 袁 还 能 参 与 激 素 的 合 成 及 作 用 袁 锌 43

44 周 秀 霞 : 锌 的 营 养 作 用 及 鸡 对 锌 需 要 量 的 研 究 营 养 研 究 还 是 胰 岛 素 的 组 成 成 分 遥 动 物 缺 锌 时 表 现 出 生 长 发 育 受 阻 的 症 状 袁 这 主 要 是 由 于 胸 腺 激 酶 活 性 降 低 袁 削 弱 体 原 性 腺 系 统 的 调 节 遥 张 春 善 等 (2000) 研 究 表 明 袁 饲 喂 高 锌 日 粮 使 肉 仔 鸡 体 内 胰 岛 素 的 浓 度 明 显 升 高 遥 了 DNA 合 成 与 细 胞 分 裂 的 能 力 遥 3.6 锌 与 脑 行 为 3.2 锌 与 骨 骼 和 皮 肤 锌 与 骨 骼 的 发 育 有 密 切 关 系 遥 缺 锌 可 引 起 胃 和 血 锌 在 脑 中 的 分 布 是 不 均 一 的, 以 边 缘 系 统 尧 皮 质 部 尧 扣 带 回 尧 齿 状 回 和 海 马 结 构 中 含 量 较 高, 尤 以 海 马 液 中 碱 性 磷 酸 酶 活 性 降 低, 改 变 骨 的 钙 化 作 用, 致 使 骨 密 度 下 降, 生 长 减 弱 遥 Ott(1965) 报 道, 饲 喂 缺 锌 日 粮 的 犊 牛 和 羔 羊 呈 拱 背 站 立, 四 肢 集 拢, 后 肢 呈 内 弧 弯 曲 状 态 遥 生 长 家 禽 缺 锌 时 发 生 一 种 特 有 的 野 骨 短 粗 症 冶, 缺 锌 雏 鸡 长 骨 的 成 骨 细 胞 活 性 降 低 袁 同 时 软 骨 形 成 变 慢, 软 骨 基 质 增 多 遥 缺 锌 可 能 直 接 或 间 接 地 抑 制 原 始 结 构 和 大 脑 皮 层 含 量 最 高, 而 这 两 者 与 行 为 功 能 密 切 相 关, 因 此 锌 在 脑 中 的 分 布 反 映 其 在 调 节 行 为 功 能 方 面 的 重 要 作 用 遥 谢 良 民 等 报 道, 缺 锌 鼠 小 脑 尧 纹 状 体 尧 下 丘 脑 一 氧 化 氮 复 合 酶 活 性 显 著 降 低 遥 锌 对 脑 中 的 一 些 功 能 蛋 白 有 积 极 的 调 节 作 用, 如 脑 中 的 金 属 硫 蛋 白 (Metdlothionein,MT) 浓 度 明 显 受 脑 中 锌 含 量 的 影 响 遥 软 骨 细 胞 的 分 裂, 影 响 软 骨 细 胞 的 成 熟 和 分 化, 进 而 影 响 骨 的 矿 化 及 成 骨 潜 能 的 激 活 遥 钟 永 安 等 对 雏 鸡 进 行 3.7 锌 与 免 疫 据 报 道 袁 动 物 缺 锌 引 起 免 疫 器 官 如 胸 腺 尧 淋 巴 结 尧 试 验 发 现, 缺 锌 组 鸡 股 骨 髓 软 骨 的 原 发 层 极 显 著 地 薄 于 对 照 组, 近 乎 消 失 ; 而 肥 大 区 却 显 著 地 厚 于 对 照 组 ; 钙 化 区 与 对 照 组 无 显 著 差 异 遥 动 物 缺 锌 时 被 毛 粗 乱 并 伴 有 不 同 程 度 的 脱 毛, 严 重 时 被 毛 成 片 脱 落, 直 至 脱 光 曰 口 鼻 四 周 皮 肤 发 生 损 害, 尤 其 后 肢 膝 部 以 下 更 为 明 显 曰 雏 鸡 尧 小 火 鸡 生 长 不 良, 并 常 发 生 皮 炎 遥 脾 脏 等 发 生 萎 缩, 外 周 淋 巴 细 胞 减 少 尧 T 淋 巴 细 胞 功 能 减 弱, 从 而 导 致 机 体 免 疫 能 力 降 低, 而 补 充 锌 则 使 其 机 能 得 以 恢 复 正 常 遥 Beisel 认 为, 动 物 受 感 染 时, 体 内 锌 的 重 分 布 和 调 整 有 助 于 机 体 抗 御 感 染, 肝 对 锌 的 摄 取 量 的 增 加 袁 能 使 其 机 能 更 好 ; 血 液 含 锌 量 减 少, 更 有 利 于 机 体 吞 噬 细 胞 的 抗 菌 作 用 遥 吕 广 宙 等 试 验 发 现, 给 犊 3.3 锌 与 味 觉 和 食 欲 补 锌 可 以 改 善 机 体 消 化 机 能 和 食 欲 袁 其 作 用 机 制 牛 尧 绵 羊 补 锌 可 提 高 血 清 淋 巴 细 胞 琢 醋 酸 萘 酯 酶 阳 性 率 和 外 周 血 淋 巴 细 胞 转 化 率 遥 细 胞 内 锌 浓 度 对 巨 噬 可 能 是 锌 与 唾 液 蛋 白 形 成 味 觉 素 袁 通 过 味 觉 影 响 口 腔 粘 膜 上 皮 细 胞 的 结 构 和 功 能 遥 缺 锌 时 袁 口 腔 粘 膜 增 生 袁 角 质 化 不 全 袁 造 成 食 物 与 味 蕾 接 触 受 阻 曰 同 时 袁 核 酸 尧 蛋 白 质 的 分 解 和 消 化 酶 的 活 性 降 低 袁 味 蕾 的 结 构 和 功 能 发 挥 受 到 影 响 袁 这 可 能 是 食 欲 下 降 的 原 因 之 一 遥 细 胞 活 力 和 嗜 中 性 白 细 胞 的 杀 菌 能 力 起 决 定 性 作 用 ; 锌 还 能 诱 导 B 细 胞 分 泌 免 疫 球 蛋 白 而 起 抑 菌 作 用 遥 在 胎 儿 期 或 幼 年 期 缺 锌 对 淋 巴 器 官 生 长 的 抑 制 程 度 远 大 于 对 其 它 器 官 生 长 的 影 响 遥 在 怀 孕 期 由 于 缺 锌 导 致 的 免 疫 缺 陷 可 持 续 3 代 遥 张 日 俊 等 报 道, 锌 对 家 禽 的 3.4 锌 与 遗 传 由 于 锌 是 许 多 酶 的 组 成 成 分 袁 缺 锌 可 能 会 影 响 某 免 疫 系 统 发 育 及 功 能 具 有 重 要 的 调 节 作 用, 在 配 合 饲 粮 中 添 加 锌, 可 以 维 持 正 常 的 免 疫 功 能 和 抗 病 力 遥 些 氨 基 酸 和 蛋 白 质 的 合 成 遥 研 究 表 明 袁 大 鼠 缺 锌 时 肝 中 DNA 的 合 成 受 到 破 坏 袁 睾 丸 的 总 蛋 白 质 和 RNA 含 量 3.8 锌 与 繁 殖 锌 通 过 影 响 性 腺 活 动 和 性 激 素 的 分 泌 而 对 动 物 减 少 ; 严 重 缺 锌 时 大 鼠 睾 丸 中 锌 尧 RNA 和 DNA 含 量 比 对 照 组 的 低 袁 而 非 蛋 白 氮 水 平 和 核 酸 活 性 较 高 遥 Rubin (1973) 在 培 养 鸡 胚 细 胞 和 哺 乳 动 物 细 胞 时 袁 证 实 DNA 合 成 过 程 中 需 要 不 断 地 提 供 锌 遥 由 此 可 见 袁 锌 对 蛋 白 质 的 生 物 合 成 和 遗 传 信 息 的 传 递 具 有 间 接 的 影 响 遥 的 性 器 官 正 常 发 育 尧 性 机 能 的 正 常 发 挥 等 表 现 出 重 要 的 生 理 意 义 遥 锌 缺 乏 时 袁 会 影 响 生 殖 器 官 的 生 长 发 育 及 第 二 性 征 的 形 成 袁 致 使 性 成 熟 延 迟 袁 性 机 能 障 碍 遥 产 蛋 鸡 缺 锌 会 造 成 卵 巢 尧 输 卵 管 发 育 不 全 袁 产 蛋 量 和 蛋 壳 品 质 下 降 遥 王 金 法 (1995) 等 通 过 试 验 发 现 袁 饲 粮 中 3.5 锌 与 内 分 泌 锌 对 内 分 泌 的 结 构 和 功 能 尧 激 素 代 谢 以 及 靶 细 胞 铜 尧 锌 尧 锰 尧 硒 对 提 高 肉 鸡 繁 殖 性 能 和 血 液 中 生 殖 激 素 浓 度 有 影 响 袁 当 4 种 元 素 混 合 后 袁 均 可 促 进 睾 酮 尧 雌 二 的 生 理 活 动 有 影 响 遥 迄 今 为 止 袁 己 知 与 锌 有 关 的 激 素 醇 和 孕 酮 的 分 泌 袁 提 高 其 在 血 浆 中 的 浓 度 遥 有 胰 岛 素 尧 胰 高 血 糖 素 尧 生 长 激 素 尧 性 激 素 和 促 肾 上 腺 皮 质 激 素 等 遥 锌 还 是 肾 上 腺 皮 质 激 素 的 固 有 成 分 袁 富 3.9 锌 与 禽 类 生 产 锌 对 家 禽 的 生 长 发 育 及 维 持 健 康 状 况 有 显 著 效 集 于 垂 体 尧 性 腺 袁 参 与 垂 体 原 肾 上 腺 尧 垂 体 原 甲 状 腺 及 垂 果 遥 补 锌 可 促 进 仔 鸡 的 生 长 发 育 遥 在 肉 用 仔 鸡 饲 粮 中 44

45 营 养 研 究 周 秀 霞 : 锌 的 营 养 作 用 及 鸡 对 锌 需 要 量 的 研 究 添 加 锌, 血 清 和 肝 脏 中 的 乳 酸 脱 氢 酶 和 碱 性 磷 酸 酶 活 性 均 随 饲 料 中 锌 水 平 的 提 高 而 升 高 袁 鸡 正 常 生 长 发 育 所 需 要 的 锌 量 高 于 家 畜 遥 生 长 鸡 缺 锌 会 出 现 生 长 缓 慢 尧 腿 骨 粗 短 尧 皮 炎 等 症 状 袁 严 重 缺 锌 时 约 有 50% 的 胚 胎 发 生 缺 损 曰 在 蛋 鸡 饲 粮 中 添 加 蛋 氨 酸 锌 能 提 高 产 蛋 量, 并 有 利 于 减 轻 蛋 鸡 遭 受 到 的 饲 粮 性 应 激, 同 时 还 能 维 持 蛋 壳 质 量, 但 饲 粮 中 锌 水 平 过 高 也 会 对 鸡 体 产 生 危 害 遥 锌 参 与 糖 类 尧 脂 类 尧 蛋 白 质 和 核 酸 等 物 质 代 谢 过 程 袁 对 家 禽 的 生 长 发 育 和 生 产 性 能 有 重 要 作 用 遥 张 桂 芝 渊 2001 冤 应 用 不 同 水 平 锌 对 蛋 雏 鸡 进 行 试 验 袁 结 果 表 明 袁 饲 粮 中 锌 的 添 加 量 为 120 mg/kg 时 能 促 进 雏 鸡 的 生 长 和 发 育 曰 在 试 验 锌 添 加 水 平 范 围 内 袁 耗 料 量 尧 羽 长 和 胫 骨 长 有 随 锌 添 加 量 的 提 高 而 增 加 的 趋 势 遥 李 魁 等 (1995) 报 道, 在 仔 鸡 饲 粮 中 添 加 20 尧 40 尧 60 和 100 mg/kg 的 乳 酸 锌 袁 仔 鸡 增 重 提 高 了 3.0 豫 尧 4.67% 尧 5.6% 尧 6.9% 遥 Roberson(1960) 尧 Stahl(1989) 和 Stevensox 渊 1987 冤 等 研 究 表 明, 蛋 鸡 饲 粮 中 添 加 锌 量 为 1000 耀 2000 mg/kg 时 不 会 出 现 中 毒 症 状 袁 4000 耀 6000 mg/kg 时 生 产 性 能 下 降 遥 曹 盛 丰 等 试 验 表 明 袁 饲 粮 锌 与 血 浆 锌 尧 蛋 黄 锌 及 肝 锌 尧 血 浆 锌 与 蛋 黄 锌 及 肝 锌 袁 饲 粮 铁 与 血 浆 铁 尧 肝 铁 及 蛋 黄 铁 袁 血 浆 铁 与 肝 铁 尧 蛋 黄 铁 均 呈 强 正 相 关 袁 提 示 通 过 饲 喂 高 锌 尧 高 铁 饲 粮 可 以 大 幅 度 提 高 蛋 中 锌 尧 铁 含 量 袁 产 蛋 母 鸡 是 饲 粮 中 锌 铁 向 蛋 中 转 运 的 良 好 载 体 遥 研 究 家 禽 锌 的 需 要 量 时, 应 考 虑 不 同 的 饲 料 组 成 尧 不 同 的 品 系 尧 依 据 的 标 准 和 评 定 指 标 以 及 不 同 锌 源 和 利 用 率 所 造 成 的 影 响 遥 以 传 统 方 法 评 定, 得 出 蛋 鸡 锌 的 需 要 量 为 30 mg/kg, 而 根 据 产 蛋 成 绩 测 出 采 食 高 钙 谷 类 饲 粮 的 27 耀 75 周 龄 产 蛋 鸡 的 锌 需 要 量 为 60 mg/kg 遥 但 是, 为 了 避 免 亚 临 床 锌 缺 乏 的 发 生 袁 微 量 元 素 营 养 需 要 的 研 究 日 趋 需 要 更 为 敏 感 的 生 理 生 化 尧 基 因 表 达 方 面 的 指 标 袁 所 得 结 果 往 往 高 于 传 统 方 法 评 定 的 结 果 遥 一 般 基 础 饲 粮 中 含 锌 量 较 低 袁 不 能 满 足 鸡 的 营 养 需 要 袁 而 添 加 适 量 的 锌 能 提 高 鸡 的 生 产 性 能 遥 参 考 文 献 1 单 安 山. 微 量 元 素 的 生 物 学 功 能 和 鸡 对 锌 的 营 养 需 要 量 [J]. 东 北 农 学 院 学 报,1987,18(3):265 耀 刘 学 剑. 微 量 元 素 锌 的 生 物 学 功 能 及 其 应 用 进 展 [J]. 饲 料 工 业, 1995,16(8):29~31 3 张 革. 生 命 元 素 锌 与 动 物 营 养 [J]. 粮 食 与 饲 料 工 业,1994(2):19 耀 瞿 明 仁 主 编. 饲 料 添 加 剂 应 用 手 册 [M]. 江 西 科 学 出 版 社, 何 玉 琴. 鸡 蛋 增 锌 研 究 [J]. 甘 肃 农 业 大 学 学 报,1997,32(3):247 耀 6 杨 建 英, 张 勇 法, 王 月 影, 等. 微 量 元 素 在 动 物 生 产 中 的 应 用 研 究 [J]. 河 南 畜 牧 兽 医,2002, 23(5):10 耀 11 7 赵 国 芬, 郑 家 茂. 在 猪 饲 料 中 添 加 锌 的 研 究 进 展 [J]. 中 国 饲 料, 1998(23):19 耀 20 8 韩 新 燕, 郭 勇. 微 量 元 素 锌 与 动 物 营 养 [J]. 饲 料 博 览,2000(10): 14 耀 15 9 刘 雨 田, 郭 小 权, 微 量 元 素 锌 的 营 养 学 研 究 进 展 [J]. 饲 料 博 览, 2000(5):14 耀 杨 凤 主 编. 动 物 营 养 学 ( 第 二 版 ). 中 国 农 业 出 版 社, 甲 梁 轩, 刘 福 柱, 沈 伟. 锌 的 生 物 学 作 用 及 其 在 畜 牧 业 中 的 应 用 [J]. 内 蒙 古 畜 牧 科 学,2000,21(4):23 耀 12 韩 海 军. 锌 与 动 物 营 养 [J]. 河 南 畜 牧 兽 医,2000,12(2):11 耀 余 冰, 陈 代 文, 张 克 英. 猪 的 锌 营 养 [J]. 饲 料 博 览,2000(12):23 耀 14 王 余 丁, 赵 国 先, 卢 艳 敏, 等. 微 量 元 素 锌 与 畜 禽 营 养 研 究 进 展 [J]. 河 北 农 业 大 学 学 报,2002, (1): 110 耀 韩 新 燕. 锌 营 养 作 用 的 研 究 [J]. 中 国 饲 料,2001(14):19 耀 彭 西, 崔 恒 敏. 禽 类 缺 锌 症 的 研 究 进 展 [J]. 山 东 家 禽,2002,8:45 耀 仲 飞, 李 秀 锦, 马 建 军, 等. 猪 和 鸡 不 同 部 位 肌 组 织 铜 锌 铁 含 量 分 析 [J]. 营 养 学 报,1996(2):228 耀 何 正 芳, 吴 浩 然. 有 机 和 无 机 微 量 元 素 金 属 络 合 物 对 猪 禽 生 产 的 作 用 [J]. 猪 与 禽.1993(1):12 耀 I4 19 马 雪 云. 饲 料 锌 水 平 对 肉 用 仔 鸡 营 养 和 代 谢 的 某 些 影 响 [J]. 中 国 畜 牧 杂 志,1997(4):30 耀 吕 广 宙. 生 命 元 素 锌 营 养 研 究 进 展 [J]. 山 东 畜 牧 兽 医,1994, 7(1):33 耀 蒋 与 刚. 微 量 元 素 对 金 属 硫 蛋 白 基 因 表 达 的 调 控 [J]. 国 外 医 学 地 理 分 册,2001,22(4):145 耀 吕 广 宙, 陆 治 年, 丁 小 明. 低 锌 日 粮 补 锌 对 断 奶 前 后 犊 牛 免 疫 机 能 的 影 响 [J]. 畜 牧 兽 医 学 报,1995,26(3):207 耀 张 日 俊, 周 毓 平, 黄 燕, 等. 锌 对 肉 用 仔 鸡 免 疫 器 官 生 长 发 育 及 免 疫 功 能 调 节 作 用 的 研 究 [J]. 畜 牧 兽 医 学 报,1999,30(6):504 耀 张 桂 芝, 黄 保 华, 石 天 红, 等. 锌 在 蛋 雏 鸡 上 的 应 用 效 果 研 究 [J]. 山 东 农 业 科 学,2001,5:36 耀 37 武 秀 云, 朱 玉 琴. 肉 仔 鸡 微 量 元 素 锌 需 要 量 的 研 究 [J]. 饲 料 博 览, 1995(5):7~9 26 曹 家 银, 罗 绪 刚,S. R. Davis, 等. 以 组 织 锌 金 属 硫 蛋 白 及 其 基 因 表 达 指 标 评 价 肉 仔 鸡 对 锌 源 的 相 对 生 物 学 利 用 率 [J]. 畜 牧 兽 医 学 报,2003,34(3):227 耀 家 禽 营 养 需 要 ( 第 八 版 ), 农 业 出 版 社, 苏 琪. 段 玉 琴. 刘 金 旭, 等. 我 国 畜 禽 饲 料 中 微 量 元 素 锌 含 量 的 调 查 研 究 [J]. 中 国 农 业 科 学,1994,27(2):83 耀 88 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

46 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 营 养 研 究 胰 岛 素 样 生 长 因 子 的 生 物 学 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 和 玉 丹 下 丘 脑 GHIGFI 轴 是 一 个 重 要 的 体 内 分 泌 代 谢 轴, 对 生 长 发 育 的 调 控 贯 穿 动 物 的 整 个 生 命 过 程 遥 自 Sallmon 和 Daughaday 首 次 发 现 并 报 道 这 一 与 生 长 激 素 密 切 相 关 的 因 子 以 来 袁 人 们 对 胰 岛 素 样 生 长 因 说 明 IGFI 的 作 用 非 常 广 泛 遥 而 IGFII 受 体 和 I 型 受 体 结 构 完 全 不 同 袁 它 是 一 条 直 链 的 单 体 蛋 白 袁 分 子 中 无 二 硫 键 袁 与 胰 岛 素 无 交 叉 反 应 遥 胰 岛 素 与 II 型 受 体 结 合 袁 通 过 G 蛋 白 的 信 号 传 导 通 道 发 挥 其 生 物 学 效 应 遥 子 玉 渊 IGF 玉 冤 的 研 究 方 兴 未 艾 袁 不 仅 对 胰 岛 素 生 长 因 子 渊 IGFS 冤 袁 而 且 对 IGF 受 体 渊 IGFR 冤 尧 IGF 结 合 蛋 白 1.3 胰 岛 素 样 生 长 因 子 结 合 蛋 白 渊 IGFBP 冤 目 前 已 发 现 IGFBPs 家 族 有 6 位 成 员 袁 即 IGFBP 渊 IGFBP 冤 以 及 IGFBP 酶 也 越 来 越 关 注 遥 而 大 量 研 究 表 明 袁 出 生 后 生 长 激 素 渊 GH 冤 对 动 物 生 长 的 调 节 作 用 是 由 IGFI 介 导 的 袁 体 内 外 试 验 也 证 明 袁 IGFI 具 有 促 进 组 织 生 长 和 参 与 组 织 代 谢 活 动 的 作 用 遥 而 重 组 IGFI 生 物 制 品 的 出 现 袁 又 为 其 在 疾 病 诊 断 和 治 疗 方 面 的 研 究 开 辟 更 为 广 阔 的 空 间 遥 渊 1 耀 6 冤 袁 它 们 基 因 结 构 相 似 遥 但 血 液 中 75%IGFI 都 是 与 IGFBP3 及 酸 不 稳 定 亚 单 位 (ALS) 结 合 形 成 150 kd 复 合 物 袁 构 成 IGFI 的 储 备 库 袁 参 与 血 液 循 环 曰 IGFI 和 其 余 的 IGFBP 结 合 成 50 kd 的 小 复 合 物 袁 穿 越 小 血 管 和 毛 细 血 管 袁 进 入 组 织 遥 IGFI 与 IGFBP 结 合 后 可 延 长 其 半 衰 期 袁 对 IGFI 在 机 体 内 的 稳 定 起 重 要 作 1 IGFI 分 子 生 物 学 结 构 用 袁 并 且 可 阻 止 其 与 受 体 结 合 袁 抑 制 IGFI 发 挥 生 物 1.1 IGFI 的 结 构 特 点 IGFI 是 由 70 个 氨 基 酸 组 成 的 单 一 肽 链, 分 子 量 学 作 用 遥 因 此 袁 IGFBP 不 仅 可 以 调 节 IGF 与 其 受 体 结 合 袁 还 可 以 协 助 IGF 在 血 管 内 的 跨 管 壁 运 输 袁 将 IGF 为 7650 kd 袁 IGFI 的 一 级 结 构 首 先 是 由 Rinderknecht 等 渊 1978 冤 阐 明 的 袁 IGFI 与 胰 岛 素 原 高 度 同 源 袁 IGFI 运 送 到 特 定 的 靶 细 胞 曰 其 浓 度 可 以 直 接 改 变 IGFI 的 转 运 袁 改 变 其 在 组 织 和 血 液 中 的 分 配 遥 含 有 A 尧 B 尧 C 尧 D4 个 区 域 袁 其 中 包 括 3 个 链 内 二 硫 键 遥 IGFI 基 因 位 于 第 5 号 染 色 体 上 遥 目 前 袁 多 数 哺 乳 动 物 2 IGFI 的 分 泌 特 点 IGFI 主 要 存 在 于 血 液 中 袁 它 以 内 分 泌 为 主 袁 也 可 的 IGFI 蛋 白 序 列 和 cdna 序 列 都 已 经 确 定 袁 牛 和 猪 的 IGFI 和 人 的 相 同 袁 绵 羊 的 IGFI 和 人 的 有 一 个 氨 基 酸 不 同 袁 大 鼠 和 小 鼠 的 有 3 耀 4 个 氨 基 酸 不 同 遥 说 明 IGFI 具 有 高 度 的 同 源 性 和 保 守 性 袁 这 就 证 明 了 IGF I 对 机 体 生 长 发 育 的 重 要 性 遥 进 行 自 分 泌 和 旁 分 泌 遥 许 多 组 织 都 可 以 表 达 IGFI mrna 袁 但 血 液 中 大 部 分 的 IGFI 来 自 肝 脏 袁 约 占 总 量 的 90% 遥 一 般 认 为 IGFI 是 作 为 GH 发 挥 促 生 长 效 应 的 一 种 介 质, 它 主 要 依 赖 于 GH,GH 与 肝 脏 上 GH 受 体 结 合 后 经 过 一 系 列 生 化 反 应 诱 导 肝 脏 产 生 IGFI 遥 有 1.2 IGF 受 体 IGF 受 体 根 据 其 与 IGFI 和 IGFII 亲 和 力 的 大 人 认 为 IGFI 在 出 生 后 才 作 为 促 生 长 的 介 质 促 进 动 物 的 生 长 发 育 遥 但 Julie Baker 等 研 究 却 发 现 袁 IGFI 在 小 以 及 是 否 能 识 别 胰 岛 素 而 分 为 IGFI 型 受 体 和 IGFII 型 受 体 遥 I 型 受 体 是 寡 聚 蛋 白, 由 2 个 琢 亚 基 和 2 个 茁 亚 基 组 成, 各 亚 基 间 以 二 硫 键 连 接, 其 主 要 与 IGFI 结 合, 化 学 结 构 和 胰 岛 素 受 体 相 似, 与 胰 岛 素 有 交 叉 反 应, 可 以 发 挥 类 胰 岛 素 的 作 用 遥 I 型 受 体 在 细 胞 内 与 酪 氨 酸 激 酶 相 连, 当 IGFI 与 之 结 合 后 可 以 激 活 酪 氨 酸 激 酶, 使 酪 蛋 白 磷 酸 化, 从 而 促 进 细 胞 的 增 殖 分 化 袁 在 许 多 组 织 和 细 胞 中 均 发 现 有 IGF 的 I 型 受 体 袁 这 胚 胎 期 也 有 促 生 长 的 作 用 袁 但 这 种 作 用 不 是 来 自 于 GH 遥 经 放 射 免 疫 分 析 法 可 在 45 d 猪 胎 儿 的 血 液 中 检 测 到 IGFI 袁 而 且 胚 胎 期 IGFI 分 泌 有 脉 冲 式 释 放 的 倾 向 袁 出 生 后 是 连 续 分 泌 袁 这 说 明 胎 儿 和 母 体 的 IGFI 分 泌 是 相 互 独 立 的 遥 有 研 究 表 明 袁 不 同 品 种 和 不 同 性 别 猪 发 育 过 程 中 血 液 的 IGFI 水 平 变 化 趋 势 基 本 一 致 袁 即 胚 胎 期 低 袁 出 生 后 高 遥 胚 胎 期 随 胚 龄 的 增 加 袁 IGFI 水 平 升 高 袁 出 生 后 随 年 龄 尧 体 重 的 增 加 袁 IGFI 水 平 也 上 升 袁 但 不 同 性 别 和 品 种 猪 血 液 中 IGFI 水 平 还 是 有 很 大 差 别 的 遥 和 玉 丹, 浙 江 大 学 饲 料 科 学 研 究 所,310029, 浙 江 省 杭 州 市 秋 涛 北 路 164 号 收 稿 日 期 : 胎 儿 期 袁 瘦 肉 型 猪 肝 脏 中 IGFI 水 平 高 于 脂 肪 型 猪 遥 Buonomo 等 研 究 发 现 袁 出 生 第 1d 血 液 中 IGFI 水 平 瘦 肉 型 猪 高 于 脂 肪 型 猪 袁 其 在 3 耀 5 月 龄 的 IGFI 上 升 46

47 营 养 研 究 和 玉 丹 : 胰 岛 素 样 生 长 因 子 玉 的 生 物 学 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 幅 度 也 高 于 脂 肪 型 猪 遥 对 性 别 差 异 的 研 究 发 现 袁 在 妊 娠 94 耀 98 d 雄 性 的 胎 儿 IGFI 水 平 高 于 雌 性 袁 出 生 后 差 异 仍 然 存 在 袁 在 3 耀 18 月 龄 雄 性 猪 血 液 中 IGFI 水 平 要 比 雌 性 升 高 的 快 遥 对 大 白 猪 的 研 究 也 发 现 袁 45 日 龄 后 大 白 母 猪 的 IGFI 水 平 比 大 白 公 猪 低 遥 以 上 研 究 都 与 其 促 生 长 作 用 相 一 致 遥 和 细 胞 分 化 具 有 重 要 的 作 用, 新 生 仔 猪 在 吸 收 初 乳 的 条 件 下, 小 肠 的 重 量 尧 长 度 尧 蛋 白 质 合 成 等 增 加 很 快 遥 王 恬 等 (2005) 报 道, 新 生 仔 猪 肠 道 的 迅 速 发 育 与 粘 膜 IGFI 受 体 和 IGFI 基 因 的 上 调 有 关 遥 Hammon 等 报 道, 喂 3d 初 乳 的 犊 牛 小 肠 IGFI 受 体 数 量 高 于 喂 1 次 初 乳 和 始 终 喂 代 乳 品 的 犊 牛, 其 胰 岛 素 受 体 和 IGFI 3 IGFI 的 生 物 学 功 能 IGFI 作 为 一 类 多 功 能 的 生 长 因 子 袁 不 仅 可 以 促 受 体 的 数 目 也 较 高 遥 王 恬 等 还 报 道 3 日 龄 的 仔 猪 粘 膜 的 IGFI 表 达 水 平 较 初 生 时 高 遥 这 都 证 明 了 IGFI 基 进 细 胞 对 氨 基 酸 和 葡 萄 糖 的 摄 取 袁 增 加 蛋 白 质 尧 脂 肪 和 糖 原 的 合 成 袁 刺 激 DNA 复 制 和 细 胞 增 殖 分 化 而 促 进 生 长 袁 而 且 还 可 以 刺 激 性 腺 分 泌 性 激 素 袁 促 进 泌 乳 及 新 生 动 物 小 肠 的 发 育 遥 因 表 达 水 平 是 动 物 肠 道 迅 速 发 育 的 重 要 因 素 遥 Balteskard 等 用 IGFI 处 理 新 生 仔 猪 发 现 袁 IGFI 可 以 提 高 肠 道 对 谷 氨 酰 胺 的 吸 收 袁 同 时 促 进 肝 脏 谷 氨 酰 胺 的 释 放 袁 而 谷 氨 酰 胺 具 有 抗 疲 劳 尧 提 高 免 疫 力 和 3.1 IGFI 的 促 生 长 作 用 IGFI 的 促 生 长 作 用 最 早 是 由 Schoenle 等 (1982) 保 护 胃 肠 道 的 作 用 袁 这 对 仔 猪 胃 肠 道 的 发 育 具 有 重 要 意 义 遥 发 现 的 遥 IGFI 的 促 生 长 作 用 可 分 为 两 个 方 面, 即 GH 样 促 生 长 作 用 和 胰 岛 素 样 代 谢 作 用 遥 应 用 原 代 细 胞 培 3.3 IGFI 对 泌 乳 的 影 响 McBride 等 通 过 乳 腺 动 脉 给 泌 乳 山 羊 注 射 IGFI, 养 等 方 法 进 行 研 究 表 明,IGFI 刺 激 DNA 合 成 以 促 进 细 胞 增 殖 袁 可 以 促 进 卵 子 有 丝 分 裂 遥 Hizuka 证 明, 给 生 长 期 大 鼠 每 天 注 射 IGFI 120 滋 g/ 只, 连 续 注 射 7d, 体 重 增 加 12% 遥 用 定 点 基 因 敲 除 技 术 把 大 鼠 肝 脏 中 IGFI 基 因 敲 除 后 袁 肝 脏 中 无 IGFI 表 达, 其 它 组 织 IGFI 不 受 影 响, 血 液 中 IGFI 水 平 下 降 75%, 而 GH 水 平 上 升 3 倍 曰 血 液 中 IGFBP3 下 降 75%, 血 液 中 游 离 的 IGFI 无 变 化, 动 物 生 长 未 受 影 响 (Derek Le Roith 等,2001) 遥 这 说 明 可 能 血 液 中 游 离 的 IGFI 与 动 物 生 长 有 关, 或 者 是 在 肝 脏 中 IGFI 不 表 达 时,GH 的 直 接 促 生 长 作 用 加 强 曰 也 有 可 能 是 其 它 激 素 ( 如 胰 岛 素 ) 与 IGFI 受 体 结 合 促 进 使 产 奶 量 增 加 15% 曰 体 外 试 验 表 明,IGFI 能 刺 激 乳 腺 上 皮 细 胞 合 成 DNA 和 乳 汁 遥 而 且 乳 腺 组 织 中 存 在 IGFI 受 体 及 IGFI mrna, 因 此 可 以 证 明 IGFI 对 乳 腺 组 织 有 直 接 和 间 接 的 作 用 遥 其 促 进 泌 乳 的 作 用 机 理 有 以 下 几 个 方 面 院 淤 IGFI 与 乳 腺 组 织 中 的 受 体 结 合, 刺 激 乳 腺 上 皮 细 胞 合 成 DNA 尧 蛋 白 质 和 乳 汁 曰 于 IGFI 可 以 通 过 调 节 动 物 体 内 营 养 物 质 的 分 配 袁 激 活 体 内 脂 肪 的 分 解, 使 更 多 的 营 养 物 质 进 入 乳 腺 组 织 曰 盂 IGFI 可 以 提 高 血 流 量, 增 加 腺 体 中 乳 汁 的 前 体 物 质, 改 变 分 泌 细 胞 的 合 成 能 力, 减 缓 乳 腺 的 衰 减 率 袁 从 而 增 加 泌 乳 曰 榆 IGFI 可 以 发 挥 类 胰 岛 素 的 功 能, 促 进 蛋 白 质 的 合 成 遥 生 长 遥 另 外 许 多 研 究 发 现, 机 体 的 许 多 细 胞 和 器 官 可 以 经 旁 分 泌 产 生 IGFI 来 促 进 该 细 胞 或 器 官 的 生 长 遥 3.4 IGFI 对 生 殖 系 统 的 影 响 IGFI 也 是 一 种 促 性 腺 活 性 物 质 袁 在 离 体 试 验 中 袁 对 猪 的 试 验 结 果 表 明 袁 血 浆 中 IGFI 水 平 与 体 重 及 增 重 呈 正 相 关 (Dabis,1988 曰 McGuire 等,1992) 遥 Casas Carrillo 等 (1997) 也 证 明 IGFI 与 猪 的 日 增 重 有 较 大 的 相 关 遥 大 量 试 验 证 明 袁 IGFI 可 以 对 靶 细 胞 产 生 合 成 代 谢 性 作 用 袁 可 以 刺 激 软 骨 细 胞 和 人 成 纤 维 细 胞 的 氨 基 酸 摄 取 和 蛋 白 质 合 成 袁 在 胰 岛 素 作 用 的 靶 器 官 袁 特 别 是 脂 肪 组 织 和 肌 肉 袁 IGFI 表 现 出 强 烈 的 胰 岛 素 样 活 性 袁 促 进 葡 萄 糖 的 转 运 和 代 谢 遥 IGFI 的 促 生 长 作 用 是 毋 庸 置 疑 的 袁 但 是 其 在 血 液 中 保 持 高 浓 度 的 作 用 机 理 还 需 要 做 更 进 一 步 的 研 究 遥 IGFI 可 增 加 孕 烯 醇 酮 尧 孕 酮 和 雌 二 醇 的 生 物 合 成 袁 且 与 卵 泡 的 有 丝 分 裂 有 关 遥 Weller 等 渊 1993 冤 研 究 发 现 袁 在 卵 巢 中 袁 IGFI 的 表 达 和 卵 泡 的 生 长 及 雌 二 醇 的 浓 度 呈 正 相 关 遥 目 前 研 究 认 为 袁 卵 巢 中 IGFI 的 受 体 主 要 存 在 于 颗 粒 细 胞 中 袁 IGFI 可 以 通 过 颗 粒 细 胞 上 的 自 身 受 体 调 节 颗 粒 细 胞 的 各 种 功 能 遥 IGFI 可 明 显 增 加 颗 粒 细 胞 对 低 密 度 脂 蛋 白 渊 LDL 冤 的 反 应 袁 在 加 入 LDL 的 同 时 袁 加 入 IGFI 袁 孕 酮 生 成 可 提 高 100 倍 遥 颗 粒 细 胞 经 E2 和 FSH 处 理 可 加 强 IGFI 的 促 孕 酮 分 泌 作 用 袁 并 且 E2 和 IGFI 有 协 同 和 相 互 促 进 的 作 用 袁 增 加 孕 酮 的 生 成 量 遥 IGFI 可 以 促 进 FSH 刺 激 过 的 大 3.2 IGFI 对 新 生 动 物 小 肠 发 育 的 影 响 由 初 乳 转 为 常 乳 后, 乳 中 IGFI 浓 度 显 著 下 降 袁 初 卵 泡 颗 粒 细 胞 分 泌 孕 酮, 但 对 小 卵 泡 的 未 成 熟 颗 粒 细 胞 无 作 用, 因 此 认 为 IGFI 与 FSH 协 同 调 节 颗 粒 细 胞 乳 中 的 IGFI 对 新 生 动 物 的 消 化 道 和 其 它 器 官 的 发 育 的 分 化 遥 IGFI 可 以 刺 激 颗 粒 细 胞 的 基 因 表 达, 并 刺 激 47

48 和 玉 丹 : 胰 岛 素 样 生 长 因 子 玉 的 生 物 学 功 能 及 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 营 养 研 究 颗 粒 细 胞 分 泌 催 产 素 和 孕 酮 袁 这 都 与 卵 泡 的 的 生 长 及 分 化 密 切 相 关 遥 4 IGFI 在 畜 牧 业 中 的 应 用 前 景 目 前 袁 IGFI 的 生 物 制 剂 已 经 在 人 类 治 疗 糖 尿 病 尧 充 血 性 心 力 衰 竭 尧 骨 质 疏 松 等 疾 病 以 及 延 缓 衰 老 上 得 到 临 床 应 用 遥 而 在 诸 多 研 究 中 都 发 现 袁 很 多 营 养 因 子 都 可 以 通 过 增 加 血 液 中 IGFI 浓 度 尧 增 强 IGFIR 敏 感 性 或 IGFI 基 因 表 达 等 对 猪 的 生 长 尧 胴 体 组 成 以 及 奶 牛 泌 乳 量 产 生 影 响 遥 但 专 门 针 对 IGFI 在 动 物 上 的 应 用 研 究 还 很 少 袁 因 此 对 IGFI 在 畜 牧 业 中 的 应 用 应 做 更 进 一 步 的 研 究 袁 使 其 发 挥 更 大 的 作 用 遥 而 随 着 分 子 生 物 学 技 术 的 快 速 发 展 袁 IGFI 生 物 制 剂 价 格 的 降 低 袁 乃 至 IGFI 功 能 类 似 物 的 开 发 都 为 其 研 究 和 应 用 提 供 了 更 为 广 阔 的 前 景 遥 参 考 文 献 48 1 LaronZ Insulinlikegrowthfactor1 (IGF1): agrowth hornone. Clin. Pathol. Mol. Pathol.,2001,4:311 耀 Model for the complex between the insulinlike growth factor1and its receptor: towards designing antagonists for the IGF1 receptor. Protein Eng Des Sel,2006,19(8):377 耀 84 3 Daughaday, WH, Rotwein, P: Insulinlike growth factor 1and II peptide, messenger ribonucleic acid and gene structure, serum, and tissue concentrations. Endocr Rev 1989,10: 68 耀 91 4 Rinderknecht E, Humbel RE. The amino acid sequence of human insulin like growth factor Iand its structural homology, with proin 原 sulin. JBiol Chem 1978,3:2 769 耀 76 5 Adams TE, Epa VC, Garrett TPJ, et al. Structure of the type Iin 原 sulinlike growth factorreceptor.cell Mol Life Sci,2000,57:1 050 耀 93 6 Massague J, Czech MP. The subunit structures of two distinct recep 原 tors for insulinlike growth factors Iand II and their relationship to the insulin receptor. JBiol Chem,1982,7:5 038 耀 45 7 IRubin JB, Shia MA, Pilch PF. Stimulation of tyrosine specific phosphorylation in vitro by insulinlike growth factor. Nature,1983, 305:438 耀 40 8 Ebina Y, Ellis L, Jarnagin K, et al. The human insulin receptor cd 原 NA: the structural basis for hormoneactivated transmembrane sig 原 nalling. Cell,1985,40:747 耀 58 9 De Vos AM, Ultsch M, Kossiakoff A. Crystals of the complex be 原 tween human growth hormone and the extracellular domain of its re 原 ceptor. Science,1992,5:306 耀 McDonald NQ, MurrayRust J, Blundell TL. The first structure of areceptor tyrosine kinase domain: afurther step in understanding the molecular basis of insulin action. Structure 1995,3:1 耀 6 11 Hubbard SR, Wei L, Elis L, et al. Crystal structure of the tyrosine kinase domain of the human insulin receptor. Nature 1994,372: 746 耀 Luo RZT, Beniac DR, Fernandes A, et al. Quaternary structure of the insulininsulin receptor complex. Science 1999;285:1077~80 13 Mynarcik DC, Williams PF, Schaffer L, et al. Identification of com 原 mon ligand binding determinants of the insulin and insulinlike growth factor receptorsinsights into mechanisms of ligand binding. JBiol Chem 1997,272: 耀 5 14 Tannenbaum GS,Ling N. the interrelationship of growth hormonereleasing factor and somatostatin in generation of the ultradian rhythm of GH secretion. Endocrinology 1984,115:1952 耀 7 15 Laron Z. Growth hormone secretagogues: clinical experience and therapeutic potential. Drugs,1995,50:595 耀 Ghigo E, Boghen M, Casanueva FF, et al, eds. Growth hormone sec 原 retagogues.basic findings and clinical implications, Amsterdam: Elsevier, Laron Z. The somatostatinghrhghigfi axis. In:Merimee T, Laron Z, eds. Growth hormone, IGFI andgrowth: new views of old concepts. Modern endocrinology and diabetes, Vol. 4. LondonTel Aviv: Freund Publishing House Ltd, 1996:5 耀 Salmon WD, Jr, Daughaday W. Ahormonally controlled serum fac 原 tor which stimulates sulfate incorporation by cartilage in vitro. J Lab Clin Med 1957,49:8 耀 Hammon HM, Blum JW. Feeding different amounts of colostrums or only milk replacer modify receptors of intestinal insulinlike growth factors and insulin in neonatal calves [J].Domestic Animal Endocrinology,2002,22(3):155 耀 Rinderknecht E, Humbel RE. Polypeptides with nonsuppressible insulinlike and cellgrowth promoting activities in human serum: isolation, chemical characterization, and some biological properties of forms Iand II. Proc Natl Acad Sci USA1976,73:2 365 耀 Laron Z. Somatomedin1 (recombinant insulinlike growth factor I). Clinical pharmacology and potential treatment of endocrine and metabolic disorders. Biodrugs 1999,11:55 耀 Blundell TL, Humbel RE. Hormone families: pancreatic hormones and homologous growth factors. Nature 1980,287:781 耀 Foyt, HL, Roberts. CT Jr: The IGF1 gene: structure, expression, and gene products. In: LeRoith D (ed.). Insulinlike Growth Fac 原 tors: Molecular and Cellular Aspects CRC Press, Boca Raton, FL, 耀 Brissenden JE, Ullrich A, Francke U. Human chromosomal map 原 ping of genes for insulinlike growth factors Iand II and epidermal growth factor. Nature 1984,310:781 耀 784 Mullis PE, Patel MS, Brickell PM, et al. Growth characteristics and response to growth hormone therapy in patients with hypochon 原 droplasia: genetic linkage of the insulinlike growth factor Igene at chromosome 12q23 to the disease in asubgroup of these pa 原 tients. Clin Endocrinol 1991,34:265 耀 Rotwein P. Structure, evolution, expression and regulation of in 原 sulinlike growth factors Iand II. Growth Factors 1991,5:3 耀 Hwa V, Oh Y, Rosenfeld RG. The insulinlike growth factor bind 原 ing protein (IGFBP) superfamily. Endocr Rev 1999,20:761 耀 Lewitt MS, Saunders H, Phuyal JL, et al. Complex formation by hu 原 man insulin like growth factorbinding protein 3 and human acidlabile subunit in growth hormonedeficient rats. Endocrinolo 原 gy 1994,134:2 402 耀 Derek Le Roith, Leuis Scavo,Andrew Butle. What is role of circu 原 lating IGF1. Trends in Endocrinology &Metabelism 2001,12(2): 48 耀 Balteskard L, Unneberg K, Mjaaland M, et al. Growth hormone and insulin like growth factor 1promate intestinal uptake and hepatic release of glutamine in sepasis.ann Surg. 1998,228(1):131 耀 李 键, 王 建 辰.IGFs 对 卵 泡 生 长 发 育 的 影 响. 中 国 兽 医 学 报, 1996,16(3):198~ 霍 永 久, 王 恬, 许 若 军. 新 生 仔 猪 小 肠 生 长 发 育 及 肠 黏 膜 部 分 基 因 的 表 达. 南 京 农 业 大 学 学 报,2005,28(3):129 耀 132 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected])

49 检 测 技 术 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 饲 料 中 三 种 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 超 高 效 液 相 色 谱 同 步 检 测 方 法 魏 晋 梅, 甘 肃 农 业 大 学 食 品 科 学 与 工 程 学 院, 工 程 师, , 甘 肃 兰 州 周 围 ( 通 讯 作 者 ), 甘 肃 出 入 境 检 验 检 疫 局 中 心 实 验 室 毕 阳 刘 彩 云, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 魏 晋 梅 周 围 毕 阳 刘 彩 云 摘 要 利 用 超 高 效 液 相 色 谱 仪 (UPLC) 同 步 检 测 饲 料 中 3 种 硝 基 呋 喃 类 药 物 采 用 微 波 萃 取 方 法 提 取 样 品 中 的 呋 喃 西 林 呋 喃 妥 因 和 呋 喃 唑 酮, 提 取 溶 剂 为 乙 腈, 提 取 条 件 为 80 益 下 微 波 萃 取 10 min; 用 Oasis TM MCX 小 柱 净 化, 流 动 相 为 3 译 冰 醋 酸 溶 液 乙 腈 ( 体 积 比 ) 越 90 10, 流 速 为 0.4 ml/min, 进 样 量 为 5 滋 l 在 上 述 试 验 条 件 下, 呋 喃 西 林 呋 喃 妥 因 和 呋 喃 唑 酮 的 保 留 时 间 分 别 为 和 2.40 min, 检 出 限 分 别 为 滋 g/ml, 平 均 回 收 率 分 别 为 84.6 豫 耀 92.3% 80.0 豫 耀 92.3% 83.8 豫 耀 92.3%, 在 0.05 耀 10 滋 g/ml 范 围 内 有 良 好 的 线 性 关 系 该 方 法 简 便 省 时 灵 敏 度 高, 可 同 时 测 定 饲 料 中 呋 喃 西 林 呋 喃 妥 因 和 呋 喃 唑 酮 的 含 量 关 键 词 呋 喃 西 林 ; 呋 喃 妥 因 ; 呋 喃 唑 酮 ; 超 高 效 液 相 色 谱 仪 中 图 分 类 号 R 硝 基 呋 喃 类 药 物 是 人 工 合 成 的 具 有 5 硝 基 呋 喃 基 本 结 构 的 广 谱 抗 菌 药 物 袁 主 要 有 呋 喃 唑 酮 尧 呋 喃 西 林 和 呋 喃 妥 因 袁 最 早 被 应 用 于 家 禽 尧 家 畜 尧 水 产 养 殖 动 物 传 染 病 的 预 防 和 治 疗 [1] 遥 本 类 药 物 曾 经 被 用 作 饲 料 药 物 添 加 剂 袁 但 由 于 其 药 物 残 留 容 易 引 起 野 三 致 冶 袁 目 前 已 被 全 面 禁 止 用 作 饲 料 添 加 剂 袁 但 作 为 治 疗 药 物 还 在 被 使 用 遥 因 此 袁 对 饲 料 中 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 检 测 有 助 于 从 源 头 上 保 证 动 物 性 食 品 的 安 全 遥 目 前 检 测 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 方 法 主 要 有 液 液 萃 取 高 效 液 相 色 谱 法 渊 HPLC 冤 尧 高 效 液 相 色 谱 串 联 谱 法 渊 LCMS/MS 冤 和 固 相 萃 取 高 效 液 相 色 谱 法 渊 SPE HPLC 冤 等 遥 上 述 方 法 有 的 测 定 成 分 单 一 袁 有 的 检 测 灵 敏 度 不 高 袁 有 的 重 现 性 差 遥 因 此 袁 我 们 提 出 了 微 波 萃 取 尧 Oasis TM MCX 小 柱 净 化 尧 超 高 效 液 相 色 谱 定 性 定 量 的 简 便 尧 快 速 尧 准 确 的 测 定 方 法 遥 微 波 萃 取 法 (MAE) 作 为 一 种 新 兴 发 展 起 来 的 萃 取 技 术 袁 由 于 其 萃 取 效 率 高 尧 低 溶 剂 消 耗 尧 污 染 小 尧 设 备 简 单 尧 节 省 能 源 等 特 点 袁 受 到 不 同 领 域 研 究 人 员 的 重 视 遥 1 试 验 材 料 与 方 法 1.1 仪 器 与 试 剂 Waters Acquity TM UPLC 超 高 效 液 相 色 谱 仪 渊 配 有 高 压 泵 冤 尧 自 动 进 样 器 尧 柱 温 箱 尧 二 极 管 阵 列 检 测 器 49 渊 PDA 冤 渊 美 国 Waters 公 司 生 产 冤 尧 Heidolph 旋 转 蒸 发 仪 渊 德 国 海 道 尔 夫 公 司 生 产 冤 尧 WX4000 微 波 快 速 消 解 系 统 渊 上 海 屹 尧 分 析 仪 器 有 限 公 司 生 产 冤 遥 呋 喃 西 林 尧 呋 喃 妥 因 和 呋 喃 唑 酮 标 准 品 均 由 DIKMA 公 司 提 供 渊 纯 度 跃 99.9% 冤 曰 乙 腈 尧 甲 醇 均 为 色 谱 纯 曰 水 为 二 次 重 蒸 水 袁 自 制 曰 Oasis TM MCX 渊 1cc 冤 固 相 萃 取 小 柱 由 Waters 公 司 提 供 袁 使 用 之 前 用 2ml 甲 醇 尧 2ml 水 活 化 曰 其 它 试 剂 均 为 分 析 纯 遥 1.2 标 准 样 品 配 制 称 取 3 种 药 品 各 10 mg 袁 用 乙 腈 溶 解 并 定 容 至 50 ml 袁 制 成 200 滋 g/ml 混 合 标 准 贮 备 液 袁 使 用 时 逐 级 稀 释 成 浓 度 为 0.01 耀 10 滋 g/ml 的 混 合 标 准 工 作 液 遥 1.3 样 品 市 售 鸡 饲 料 尧 猪 饲 料 尧 牛 饲 料 等 31 份 遥 1.4 UPLC 分 析 条 件 流 动 相 A( 乙 腈 ) B(3 译 冰 醋 酸 )( 体 积 比 )=10 90 尧 流 速 0.4 ml/min 尧 色 谱 柱 为 ACQUITY UPLCTM C 伊 50 mm(i.d. 1.7 滋 m 颗 粒 ) 尧 柱 温 为 益 尧 检 测 波 长 为 365 nm 尧 进 样 量 为 5 滋 l 尧 运 行 时 间 为 3min 遥 1.5 样 品 处 理 称 取 饲 料 样 品 5.0 g 袁 加 入 30 ml 乙 腈 袁 在 80 益 下 微 波 萃 取 10 min 袁 设 定 压 力 为 kpa 遥 取 上 清 液 5ml 旋 转 蒸 发 浓 缩 至 近 干, 用 2% 甲 酸 2ml 溶 解 并 酸 化 残 渣, 酸 化 后 过 经 活 化 的 Oasis TM MCX 固 相 萃 取 小 柱 袁 再 用 2% 甲 酸 2ml 固 定 药 物 遥 用 甲 醇 水 ( 体 积 比 )= 的 淋 洗 液 2ml 淋 洗 后 袁 用 甲 醇 水 ( 体 积 比 )= 的 洗 脱 液 2ml 洗 脱 袁 收 集 洗 脱 液 袁 旋 转 蒸 发 浓 缩 至 近 干, 氮 气 吹 干 袁 用 流 动 相 定 容 至 1ml, 经 0.2 滋 m 滤 膜 过 滤 袁 进 UPLC 分 析 仪 分 析 遥

50 魏 晋 梅 等 : 饲 料 中 三 种 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 超 高 效 液 相 色 谱 同 步 检 测 方 法 检 测 技 术 2 试 验 结 果 2.1 药 品 保 留 时 间 的 测 定 分 别 配 制 3 种 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 混 合 标 准 液 ( 浓 度 为 0.3 滋 g/ml) 袁 进 UPLC 检 测 袁 在 液 相 色 谱 渊 UPLC 冤 条 件 下 的 色 谱 图 见 图 1 遥 图 1 表 明 袁 呋 喃 西 林 尧 呋 喃 妥 因 和 呋 喃 唑 酮 的 保 留 时 间 分 别 为 1.69 尧 1.99 和 2.40 min 遥 程 为 = 袁 相 关 系 数 r=0.994 遥 硝 基 呋 喃 类 药 物 浓 度 在 0.05 耀 10 滋 g/ml 时 有 良 好 的 线 性 关 系 遥 B AC e A 为 呋 喃 西 林 B 为 呋 喃 妥 因 C 为 呋 喃 唑 酮 5.0e 浓 度 渊 滋 g/ml 冤 图 2 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 工 作 曲 线 时 间 渊 min 冤 图 1 混 合 标 准 液 的 液 相 色 谱 图 2.2 工 作 曲 线 的 制 备 按 照 试 验 条 件 和 方 法, 在 系 列 样 品 中 进 行 系 列 浓 度 的 加 标 回 收, 以 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 峰 面 积 为 纵 坐 标, 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 质 量 浓 度 ( 滋 g/ml) 为 横 坐 标 进 行 线 性 回 归, 见 图 2 遥 呋 喃 西 林 的 回 归 方 程 为 = , 相 关 系 数 r=0.990 曰 呋 喃 妥 因 的 回 归 方 程 为 = 袁 相 关 系 数 r=0.995 曰 呋 喃 唑 酮 的 回 归 方 2.3 方 法 准 确 度 和 精 密 度 方 法 准 确 度 是 用 加 入 回 收 量 来 衡 量 的 遥 在 鸡 饲 料 中 准 确 加 入 一 定 量 的 呋 喃 西 林 尧 呋 喃 妥 因 和 呋 喃 唑 酮, 按 同 样 的 操 作 过 程 进 行 提 取 尧 净 化 尧 测 定, 计 算 回 收 率 遥 试 验 选 用 了 3 个 水 平 的 加 标 回 收 控 制 以 检 验 方 法 的 准 确 度, 结 果 见 表 1 遥 鸡 饲 料 空 白 样 品 与 添 加 0.6 滋 g/g 的 样 品 的 回 收 率 液 相 色 谱 图 见 图 3 遥 本 试 验 在 9 个 空 白 的 饲 料 样 品 中 添 加 相 同 浓 度 的 3 种 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 混 合 标 准 液 袁 检 测 回 收 率 袁 以 检 验 方 法 的 精 确 度 袁 结 果 见 表 2 遥 表 1 样 品 的 加 标 回 收 率 及 精 密 度 试 验 (n=3) 添 加 量 ( 滋 g/g) 初 始 浓 度 ( 滋 g/g) 呋 喃 西 林 呋 喃 妥 因 呋 喃 唑 酮 回 收 浓 度 ( 滋 g/g) 0.51~ ~ ~2.4 回 收 率 (%) 85.0~ ~ ~92.3 初 始 浓 度 ( 滋 g/g) 回 收 浓 度 ( 滋 g/g) 0.52~ ~ ~2.4 回 收 率 (%) 86.7~ ~ ~92.3 初 始 浓 度 ( 滋 g/g) 回 收 浓 度 ( 滋 g/g) 0.52~ ~ ~2.38 回 收 率 (%) 86.7~ ~ ~ e e e4 1.5e3 5.0e4 1.0e e e 时 间 渊 min 冤 渊 A 冤 时 间 渊 min 冤 渊 B 冤 图 3 空 白 样 品 液 相 色 谱 图 (A) 与 添 加 0.6 滋 g/g 的 样 品 的 回 收 率 液 相 色 谱 图 (B) 50

51 检 测 技 术 魏 晋 梅 等 : 饲 料 中 三 种 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 超 高 效 液 相 色 谱 同 步 检 测 方 法 表 2 样 品 的 精 密 度 试 验 (n=9) 添 加 量 ( 滋 g/g) 1.3 回 收 浓 度 ( 滋 g/g) 呋 喃 西 林 呋 喃 妥 因 呋 喃 唑 酮 回 收 率 (%) 精 密 度 ( 豫 ) 7.45 回 收 浓 度 ( 滋 g/g) 回 收 率 (%) 精 密 度 ( 豫 ) 7.58 回 收 浓 度 ( 滋 g/g) 回 收 率 (%) 精 密 度 ( 豫 ) 4.72 以 信 噪 比 为 3 时 为 最 低 定 性 检 出 限 曰 以 信 噪 比 为 8 时 为 最 低 定 量 检 出 限 遥 经 测 定, 呋 喃 西 林 尧 呋 喃 妥 因 和 呋 喃 唑 酮 的 最 低 检 出 限 分 别 为 0.01 尧 尧 0.01 滋 g/ml 遥 3 结 论 与 讨 论 3.1 超 高 效 液 相 色 谱 仪 渊 UPLC 冤 的 柱 效 高 袁 因 而 灵 敏 度 高 袁 检 测 速 度 快 袁 大 大 节 省 了 检 测 时 间 袁 本 试 验 的 检 测 时 间 是 3min 遥 但 是 该 设 备 比 较 昂 贵 袁 对 所 使 用 的 溶 剂 要 求 也 较 高 遥 3.2 微 波 萃 取 与 加 速 溶 剂 渊 ASE 冤 萃 取 试 验 比 较 袁 微 波 萃 取 回 收 率 高 袁 且 省 时 袁 加 速 溶 剂 萃 取 的 回 收 率 在 60% 左 右 遥 3.3 本 试 验 所 检 测 的 31 份 饲 料 样 品 中 未 检 出 呋 喃 西 林 尧 呋 喃 妥 因 和 呋 喃 唑 酮 等 3 种 硝 基 呋 喃 类 药 物 袁 其 结 果 与 农 业 部 公 布 的 2006 年 兽 药 检 测 结 果 相 符 袁 说 明 我 国 禁 止 使 用 硝 基 呋 喃 类 药 物 的 效 果 良 好 遥 3.4 硝 基 呋 喃 类 药 物 对 光 敏 感 袁 在 高 温 尧 光 线 直 射 和 暴 露 在 空 气 中 等 条 件 下 袁 会 部 分 降 解 损 失 袁 故 在 试 验 过 程 中 尽 可 能 避 光 遥 参 考 文 献 1 葛 宝 坤, 王 云 凤, 常 春 艳, 等 援 测 定 鸡 肉 水 产 品 中 4 种 硝 基 呋 喃 类 药 物 残 留 量 的 固 相 萃 取 原 液 相 色 谱 法 [J] 援 分 析 测 试 学 报,2003,22 (5):91 耀 93 2 RobertJ, 酝 ccracken 阅,Glenn Kennedy.Determination of furazolidone in animal feedsusing liquid chromatography with UV and thermospray mass spectrometric detection[j]. Journal of Chromatography A, 1997, 771:349 耀 张 心 会, 冯 玉 明, 蔡 根 法 援 HPLC 法 测 定 动 物 源 性 食 品 中 呋 喃 唑 酮 残 留 的 研 究 [J] 援 中 国 卫 生 检 验 杂 志,2004,14(3):310 耀 A. Conneely, A. Nugent, M. O'Keeffe, et al. Isolation of bound residues of nitrofuran drugs from tissue by solidphase extraction with determination by liquid chromatography with UV and tandem mass spectrometric detection[j]. Analytica Chimica Acta,2003( 483): 91 耀 98 5 郭 德 华, 汪 国 权, 王 东 辉, 等 援 高 效 液 相 色 谱 原 串 联 质 谱 法 测 定 动 物 源 性 食 品 中 的 硝 基 呋 喃 类 代 谢 产 物 残 留 量 [J] 援 化 学 计 量 分 析, 2005,14(4):16 耀 18 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected]) 窑 书 讯 窑 书 名 作 者 定 价 ( 元 ) 书 名 作 者 定 价 ( 元 ) 畜 禽 十 大 高 效 饲 料 添 加 剂 李 尚 波 等 22 蛋 鸡 饲 养 技 术 白 修 明 等 8 饲 料 非 营 养 调 控 物 质 的 研 究 与 应 用 饲 料 安 全 与 动 物 营 养 调 控 技 术 研 究 单 安 山 单 安 山 肥 牛 饲 养 技 术 肉 牛 饲 养 技 术 大 全 雷 云 国 韩 荣 生 饲 料 添 加 剂 毛 皮 动 物 饲 养 技 术 猪 鸡 常 用 饲 料 配 方 王 安 杨 福 合 等 张 洪 翔 等 实 用 犬 病 诊 疗 图 册 实 用 猪 病 防 治 图 册 饲 料 添 加 剂 安 全 使 用 规 范 赵 玉 军 陈 国 庆 杨 振 海 等 养 猪 技 术 大 全 养 猪 问 答 王 彪 等 李 树 德 等 全 国 规 模 化 养 猪 场 大 全 默 克 兽 医 手 册 经 济 动 物 疾 病 诊 疗 新 技 术 珍 禽 饲 养 技 术 程 世 鹏 等 王 峰 等 实 用 养 鸭 技 术 肉 鸡 生 产 新 技 术 精 选 杨 桂 芹 邮 局 汇 款 地 址 院 渊 冤 沈 阳 市 金 沙 江 街 16 号 6 门 渊 本 社 发 行 部 收 冤 联 系 电 话 院 渊 024 冤 银 行 汇 款 单 位 院 辽 宁 省 农 牧 业 机 械 研 究 所 有 限 公 司 开 户 行 院 中 信 银 行 沈 阳 分 行 皇 姑 支 行 帐 号 院

52 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 检 测 技 术 气 相 色 谱 质 谱 联 用 法 测 定 饲 料 中 盐 酸 克 仑 特 罗 的 分 析 金 晓 峰 章 厉 劼 古 海 盐 酸 克 仑 特 罗 易 溶 于 水 袁 由 于 饲 料 中 成 分 复 杂 袁 3ml 遥 若 直 接 用 水 溶 液 提 取 袁 则 提 取 液 中 含 大 量 杂 质 遥 利 用 克 仑 特 罗 易 溶 于 乙 酸 乙 酯 和 水 的 特 性 袁 采 用 二 次 提 取 1.2 标 准 溶 液 盐 酸 克 仑 特 罗 储 备 液 : 精 密 称 取 适 量 的 盐 酸 克 仑 特 方 法 来 溶 出 和 纯 化 样 品 袁 即 将 饲 料 中 的 盐 酸 克 仑 特 罗 通 过 化 学 反 应 生 成 克 仑 特 罗 袁 用 乙 酸 乙 酯 提 取 出 来 袁 再 用 稀 盐 酸 通 过 涡 旋 使 乙 酸 乙 酯 中 的 克 仑 特 罗 反 应 罗 标 准 品, 用 甲 醇 配 成 浓 度 约 1mg/ml 的 标 准 储 备 液 遥 盐 酸 克 仑 特 罗 标 准 溶 液 院 将 储 备 液 用 甲 醇 稀 释 为 0.05 耀 2.00 滋 g/ml 袁 存 放 在 冰 箱 中 备 用 遥 生 成 盐 酸 克 仑 特 罗 进 入 水 相 袁 经 阳 离 子 固 相 萃 取 柱 富 集 净 化 后 得 到 理 想 的 提 取 物 遥 克 仑 特 罗 属 难 挥 发 性 化 1.3 仪 器 及 设 备 Aglent5973i 气 相 色 谱 与 质 谱 联 用 仪 尧 SIGMA 高 速 合 物 袁 如 果 用 气 相 色 谱 要 质 谱 渊 GC/MS 冤 联 用 法 测 定 袁 必 须 将 其 衍 生 成 易 挥 发 性 化 合 物 袁 这 里 采 用 BSTFA 冷 冻 离 心 机 尧 GZX9146 MBE 电 热 恒 温 鼓 风 干 燥 箱 尧 METTLERAB104S 电 子 天 平 尧 Reacti 原 ThermIII 氮 吹 仪 遥 渊 N,O 原 双 三 甲 基 甲 硅 烷 三 氟 乙 酰 胺 冤 衍 生 剂 进 行 衍 生 袁 2 盐 酸 克 仑 特 罗 的 分 析 过 程 这 是 因 为 BSTFA 能 够 产 生 容 易 辨 别 的 碎 片 离 子, 其 本 身 是 良 好 的 溶 剂, 可 省 去 吹 干 后 再 溶 解 的 步 骤, 过 量 的 2.1 动 物 饲 料 中 盐 酸 克 仑 特 罗 的 提 取 称 取 5g 左 右 经 粉 碎 的 动 物 饲 料 于 0 ml 具 塞 衍 生 剂 还 能 除 去 体 系 中 少 量 的 水 分, 保 护 衍 生 物 遥 本 文 对 GC/MS 定 性 定 量 测 定 方 法 进 行 考 察 和 试 验 袁 即 线 性 关 系 考 察 尧 精 密 度 试 验 尧 重 复 性 试 验 尧 稳 定 性 试 验 尧 标 准 添 加 试 验 等 袁 以 进 一 步 探 讨 一 种 准 确 尧 可 靠 尧 稳 定 的 定 性 定 量 检 测 方 法 遥 锥 形 瓶 内, 加 入 50 ml 乙 酸 乙 酯 尧 10 ml 碳 酸 钠 溶 液, 10 豫 超 声 提 取 30 min, 每 隔 10 min 拿 出 用 手 振 荡 10 s 遥 取 上 清 液 于 r/min 下 离 心 10 min, 移 取 全 部 上 清 液, 加 入 缘 ml 0.5 mol/l 盐 酸,2 000 r/min 涡 旋 1min, 10000r/min 下 离 心 缘 min, 弃 去 上 层 乙 酸 乙 酯, 用 2.5mol/l 1 材 料 与 方 法 氢 氧 化 钠 溶 液 调 ph 值 至 5.2 袁 加 入 1ml 乙 酸 铵 缓 冲 1.1 试 剂 溶 液 袁 得 到 样 品 提 取 液 遥 乙 酸 铵 缓 冲 溶 液 (20 mmol/l 袁 ph 值 5.2) 院 将 1.45 g 乙 酸 铵 溶 解 于 700 ml 水 中 袁 用 乙 酸 调 ph 值 为 5.2 并 2.2 提 取 液 中 盐 酸 克 仑 特 罗 的 净 化 用 5ml 甲 醇 尧 5ml 水 尧 5ml 盐 酸 (30 mmol/l) 依 次 稀 释 至 员 L 遥 30 mmol/l 盐 酸 : 将 1mol/l 盐 酸 30 ml 稀 释 至 员 L 遥 源 豫 氨 化 甲 醇 院 用 甲 醇 稀 释 源 ml 氨 溶 液 ( 比 重 0.88) 至 100 ml 遥 淋 洗 SCX 小 柱 袁 将 上 述 所 得 样 品 提 取 液 过 柱 袁 依 次 用 5ml 水 尧 5ml 甲 醇 淋 洗 袁 抽 干 袁 用 5ml 氨 化 甲 醇 (4 豫 ) 洗 脱 袁 用 具 塞 的 玻 璃 试 管 收 集 洗 脱 液 袁 挤 干 袁 所 得 洗 脱 液 在 80 益 下 用 氮 气 吹 干 遥 甲 醇 院 色 谱 纯 遥 甲 苯 院 色 谱 纯 遥 2.3 盐 酸 克 仑 特 罗 的 衍 生 向 上 述 用 氮 气 吹 干 的 具 塞 玻 璃 试 管 中 加 入 200 滋 l 乙 酸 乙 酯 院 分 析 纯 遥 10 豫 碳 酸 钠 溶 液 : 溶 解 10 g 碳 酸 钠 于 100 ml 水 中 遥 衍 生 剂 BSTFA:N,O 原 双 三 甲 基 甲 硅 烷 三 氟 乙 酰 胺 遥 甲 苯 和 圆 00 滋 l 的 BSTFA 袁 加 盖 密 闭 涡 旋 混 匀 袁 80 益 烘 箱 中 衍 生 员 h 袁 冷 却 后 加 入 600 滋 l 甲 苯 袁 涡 旋 混 匀 曰 取 适 量 的 盐 酸 克 仑 特 罗 标 准 工 作 液 袁 同 时 衍 生 化 遥 SCX 小 柱 院 supelclean,lc 原 SCXSepPak 小 柱 500mg 袁 3 盐 酸 克 仑 特 罗 的 测 定 3.1 色 谱 条 件 色 谱 柱 院 HP5MS 5% 苯 基 甲 基 聚 硅 氧 烷, 内 径 金 晓 峰, 贵 州 省 饲 料 监 察 所,550003, 贵 州 省 贵 阳 市 贵 惠 路 62 号 章 厉 劼 古 海, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : m 伊 0. mm 袁 膜 厚 0. 滋 m 遥 进 样 口 温 度 院 220 益 遥 进 样 方 式 院 不 分 流 遥 进 样 体 积 院 2 滋 l 遥 52

53 检 测 技 术 金 晓 峰 等 : 气 相 色 谱 质 谱 联 用 法 测 定 饲 料 中 盐 酸 克 仑 特 罗 的 分 析 柱 温 院 70 益 渊 保 持 0.6 min 冤 袁 以 益 /min 升 温 至 200 益 袁 保 持 6min 曰 以 益 /min 升 温 至 280 益 袁 保 持 5min 遥 载 气 院 氦 气 袁 流 速 为 0.9 ml/min( 恒 流 ) 曰 GC/MS 传 输 线 温 度 院 280 益 遥 溶 剂 延 迟 院 8min 遥 EM 电 压 院 高 于 调 谐 电 压 200 V 遥 检 测 器 温 度 院 230 益 遥 四 级 杆 温 度 院 106 益 遥 选 择 检 测 离 子 渊 M/Z 冤 院 86 尧 243 尧 262 尧 277 遥 3.2 定 性 定 量 方 法 定 性 方 法 SIM 下, 样 品 与 标 准 品 的 保 留 时 间 相 差 不 超 过 0.5 豫, 样 品 特 征 离 子 基 峰 百 分 数 与 标 准 品 相 差 不 超 过 20 豫 遥 SCAN 下 袁 样 品 与 标 准 品 的 保 留 时 间 相 差 不 超 过 0.5 豫 袁 样 品 峰 扣 除 其 前 1s 处 的 背 景 后 的 质 谱 图 与 标 准 质 谱 图 基 本 一 致 遥 定 量 方 法 SIM 法 计 算 峰 高 袁 根 据 样 品 液 中 盐 酸 克 仑 特 罗 的 含 量 情 况 袁 选 择 峰 面 积 相 近 的 标 准 工 作 液 遥 标 准 工 作 液 和 样 品 液 中 盐 酸 克 仑 特 罗 的 响 应 值 均 应 在 仪 器 检 测 线 性 范 围 内 遥 对 标 准 工 作 液 和 样 品 液 等 体 积 参 插 进 样 测 定 遥 4 结 果 4.1 线 性 关 系 标 准 品 工 作 液 选 择 离 子 流 图 及 离 子 丰 度 图 见 图 1 袁 以 定 量 离 子 渊 M/Z86 冤 峰 面 积 对 浓 度 渊 滋 g/ml 冤 进 行 回 归 计 算 袁 回 归 方 程 为 院 = 袁 在 线 性 范 围 为 0.05 耀 2.00 滋 g/ml 下 相 关 系 数 r=0.998 遥 图 1 标 准 品 工 作 液 选 择 离 子 流 图 及 离 子 丰 度 图 试 样 色 谱 图 和 质 谱 图 含 盐 酸 克 仑 特 罗 0.01 滋 g/g 的 饲 料 试 样 在 SIM 下 的 离 子 流 图 见 图 2 袁 离 子 丰 度 质 谱 图 见 图 3 遥 0.01 滋 g/g 的 饲 料 试 样 在 该 提 取 方 法 下 能 成 功 检 测 出 盐 酸 克 仑 特 罗 遥 含 盐 酸 克 仑 特 罗 0.20 滋 g/g 的 饲 料 试 样 在 SCAN 下 的 质 谱 图 见 图 4 袁 利 用 全 扫 描 能 正 确 对 盐 酸 克 仑 特 罗 进 行 定 性 判 断 遥 图 2 试 样 选 择 离 子 扫 描 离 子 流 图 53

54 金 晓 峰 等 : 气 相 色 谱 质 谱 联 用 法 测 定 饲 料 中 盐 酸 克 仑 特 罗 的 分 析 检 测 技 术 图 3 试 样 选 择 离 子 扫 描 离 子 丰 度 图 图 4 试 样 全 扫 描 质 谱 图 ( 上 ) 与 标 准 品 质 谱 图 的 对 比 4.3 试 验 精 密 度 在 空 白 饲 料 中 添 加 盐 酸 克 仑 特 罗 含 量 分 别 为 0.01 尧 0.05 尧 0.10 尧 0.20 尧 0.40 滋 g/g 组 成 样 品 饲 料 袁 并 进 行 精 密 度 试 验 袁 每 组 设 6 个 平 行 样 袁 进 行 阳 性 添 加 试 验 袁 结 果 见 表 1 遥 由 表 1 可 知 袁 利 用 气 相 色 谱 质 谱 联 用 法 测 定 饲 料 中 的 盐 酸 克 仑 特 罗 袁 平 均 变 异 系 数 为 2.9 豫 袁 准 确 性 高 遥 表 1 饲 料 中 添 加 盐 酸 克 仑 特 罗 的 精 密 度 试 验 添 加 水 平 渊 ng/g 冤 个 平 行 测 定 值 渊 ng/g 冤 平 均 测 定 值 渊 ng/g 冤 RSD 渊 豫 冤 平 均 RSD 渊 % 冤 讨 论 与 结 论 盐 酸 克 仑 特 罗 是 中 等 极 性 的 疏 水 性 化 合 物 袁 宜 采 用 极 性 溶 剂 提 取 袁 因 此 甲 醇 尧 乙 腈 尧 不 同 比 例 混 合 的 醇 尧 酯 等 常 被 作 为 提 取 液 遥 然 而 袁 当 提 取 液 的 极 性 增 强 时 袁 萃 取 出 来 的 杂 质 也 越 多 遥 农 业 部 行 业 标 准 NY/ T438 要 2001 中 采 用 偏 磷 酸 溶 液 为 提 取 液 袁 但 是 偏 磷 酸 不 易 溶 于 水 袁 并 且 是 剧 毒 物 质 袁 对 环 境 及 实 验 人 员 的 危 害 较 大 遥 本 文 采 用 先 在 碱 性 条 件 下 经 乙 酸 乙 酯 提 取 袁 再 用 酸 溶 液 反 提 的 办 法 袁 有 效 的 去 除 了 饲 料 中 的 杂 质 袁 试 验 结 果 中 样 品 与 标 准 品 的 保 留 时 间 相 差 不 超 过 0.5 豫 袁 SIM 下 特 征 离 子 基 峰 百 分 数 与 标 准 品 相 差 不 超 过 20 豫, 完 全 符 合 农 业 部 行 业 标 准 NY/T438 要 2001 遥 54 参 考 文 献 1 王 选 年, 夏 晓 迪, 潘 耀 谦, 等. 盐 酸 克 仑 特 罗 的 残 留 及 检 测 [J]. 动 物 医 学 进 展,2002,23(3):41~46 2 朱 永 林, 邵 德 佳. 气 相 色 谱 原 质 谱 法 同 时 测 定 猪 肝 中 盐 酸 克 仑 特 罗 莱 克 多 巴 胺 残 留 [J]. 中 国 兽 药 杂 志,2006,40(11):5~8 3 黄 传 峰, 李 晓 华, 吴 宜 群. 克 仑 特 罗 检 测 方 法 进 展 [J]. 中 国 卫 生 检 验 杂 志,2002,12(5):634~636 4 吴 平 谷. 生 物 材 料 中 克 仑 特 罗 的 气 相 色 谱 质 谱 法 测 定 [J]. 分 析 测 试 学 报,2002,21(1):19~21 5 李 俊 锁, 邱 月 明, 王 超. 兽 药 残 留 分 析 [M]. 上 海 科 学 技 术 出 版 社, ~649 6 贺 利 民. 气 相 色 谱 原 质 谱 法 测 定 动 物 组 织 及 饲 料 中 的 克 仑 特 罗 [J]. 质 谱 学 报,2005,26(3):168~171 7 M.Tuomola, et al. Production and characterization of mono CL onal antibodies against avery small hapten 3methylindole[J]. Journal of Immunological Methods, 2000, 240:111~124 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

55 检 测 技 术 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 抗 坏 血 酸 (VC) 微 囊 的 质 量 检 验 及 评 定 邹 大 琼 詹 志 春 詹 连 生 摘 要 文 中 提 出 了 显 微 镜 检 验 突 释 率 释 放 度 等 几 种 鉴 别 检 验 VC 微 囊 的 方 法 和 包 被 质 量 的 判 定 指 标 ; 验 证 了 VC 微 囊 质 量 的 优 劣, 并 测 定 其 在 高 温 高 湿 条 件 下 及 在 微 量 元 素 预 混 料 配 合 饲 料 中 在 贮 存 过 程 中 的 稳 定 性 关 键 词 VC 微 囊 ; 质 量 指 标 ; 检 测 方 法 ; 稳 定 性 中 图 分 类 号 S 抗 坏 血 酸 渊 VC 冤 是 动 物 生 命 代 谢 中 必 不 可 少 的 袁 能 参 与 动 物 体 内 细 胞 间 质 中 胶 原 合 成 尧 细 胞 内 电 子 转 移 及 氧 化 还 原 反 应 曰 增 强 动 物 机 体 免 疫 力 袁 缓 解 应 激 反 应 曰 参 与 活 性 物 质 合 成 代 谢 尧 脂 肪 代 谢 曰 维 持 正 常 血 验 结 果 相 对 照 袁 发 现 二 者 有 高 度 的 相 关 性 遥 试 验 结 果 表 明 袁 包 被 质 量 较 好 的 VC 微 囊 袁 其 稳 定 性 存 留 率 高 遥 由 此 证 明 袁 用 文 中 提 出 的 检 验 及 评 定 标 准 来 鉴 别 VC 微 囊 质 量 是 行 之 有 效 的 方 法 遥 脂 以 及 在 动 物 体 内 各 重 要 器 官 中 具 有 解 毒 功 能 遥 但 是 VC 很 不 稳 定 袁 结 晶 VC 易 受 光 尧 热 尧 氧 和 重 金 属 离 子 1 主 要 仪 器 体 视 显 微 镜 曰 网 篮 渊 见 图 1 冤 由 0.05 mm 孔 径 的 筛 等 的 影 响 而 遭 到 破 坏 袁 饲 料 加 工 贮 藏 不 当 也 易 导 致 网 做 成 曰 电 动 搅 拌 器 尧 搅 拌 桨 由 玻 璃 或 不 锈 钢 做 成 遥 VC 生 物 学 效 价 降 低 遥 VC 微 囊 是 对 VC 晶 体 进 行 包 被 微 囊 化 处 理 的 制 剂 遥 包 被 良 好 的 VC 微 囊 在 各 种 环 境 下 具 有 良 好 的 稳 定 性 袁 具 有 耐 高 温 尧 高 湿 袁 抗 紫 外 线 袁 抗 氧 化 等 特 点 袁 在 溶 液 中 有 一 定 的 缓 释 作 用 遥 由 于 避 免 了 与 环 境 中 不 良 H 渊 36.8 依 3.0 冤 mm 因 子 的 接 触 袁 从 而 提 高 了 VC 的 稳 定 性 和 利 用 率 遥 而 包 被 不 好 的 VC 微 囊 保 护 VC 的 效 果 却 很 差 袁 甚 至 起 不 到 保 护 作 用 遥 鉴 别 VC 微 囊 包 被 的 质 量 是 非 常 重 要 的 遥 据 美 国 H2~3 mm FDA 要 求 院 在 30~40 益 袁 相 对 湿 度 75%~80% 条 件 下 保 囟 (22.2 依 1.0) mm 存 3 个 月 袁 VC 的 稳 定 性 存 留 率 为 93.18%~93.53% 袁 符 图 1 网 篮 合 要 求 遥 此 外 袁 也 有 人 对 VC 进 行 不 同 温 度 尧 不 同 相 对 湿 度 的 条 件 下 袁 在 不 同 载 体 中 的 稳 定 性 试 验 袁 但 都 需 要 较 长 时 间 才 能 得 到 结 果 袁 不 能 满 足 对 流 通 商 品 产 品 2 主 要 试 剂 和 溶 液 碘 标 准 溶 液 渊 0.1 mol/l 冤 尧 1% 淀 粉 溶 液 尧 6% 乙 酸 溶 质 量 鉴 别 的 需 要 遥 液 渊 V/V 冤 遥 文 中 首 次 提 出 了 利 用 显 微 镜 镜 检 尧 VC 的 突 释 率 3 检 验 方 法 及 判 定 指 标 及 释 放 度 的 检 验 方 法 袁 鉴 别 VC 微 囊 的 包 被 质 量 袁 并 3.1 显 微 镜 检 验 把 鉴 定 结 果 与 不 同 条 件 下 在 不 同 物 料 中 的 稳 定 性 试 检 验 方 法 将 VC 微 囊 置 于 载 玻 片 或 培 养 皿 中 心 位 置 袁 然 后 将 载 玻 片 或 培 养 皿 放 到 体 视 显 微 镜 载 物 台 上 袁 选 择 适 邹 大 琼, 国 家 饲 料 质 量 检 测 中 心 ( 武 汉 ), 高 级 工 程 师,430070, 武 汉 市 洪 山 区 卓 刀 泉 路 当 放 大 倍 数 袁 使 物 象 清 晰 遥 随 后 向 微 囊 滴 加 2 滴 水 袁 观 察 微 囊 变 化 遥 詹 志 春 詹 连 生 ( 通 讯 作 者 ), 武 汉 新 华 扬 集 团 收 稿 日 期 : 试 验 结 果 显 微 镜 下 观 察 到 的 VC 晶 体 为 具 有 油 脂 光 泽 尧 白 55

56 邹 大 琼 等 : 抗 坏 血 酸 (VC) 微 囊 的 质 量 检 验 及 评 定 检 测 技 术 色 或 类 白 色 尧 透 明 或 半 透 明 的 颗 粒 袁 流 动 性 好 曰 投 入 水 中 后 袁 VC 微 囊 漂 浮 在 水 面 袁 水 缓 慢 浸 入 膜 内 袁 将 VC 晶 核 溶 解 遥 包 被 完 好 院 镜 下 可 见 水 沿 微 囊 四 周 缓 缓 浸 入 膜 内 袁 VC 晶 核 逐 渐 被 水 溶 解 袁 随 后 出 现 尚 未 溶 完 的 晶 核 和 包 住 晶 核 的 透 明 囊 袋 遥 当 晶 核 被 完 全 溶 解 时 袁 水 面 上 显 现 出 透 明 尧 光 滑 尧 完 整 尧 保 持 原 晶 形 的 囊 袁 并 较 长 时 间 保 持 其 形 态 遥 包 被 不 好 院 镜 下 可 见 VC 微 囊 内 晶 核 被 水 溶 解 袁 或 不 见 包 膜 存 在 袁 或 包 膜 不 完 整 袁 膜 呈 网 状 尧 絮 状 曰 囊 袋 破 裂 或 有 白 色 胶 团 存 在 等 现 象 遥 100% 遥 如 每 颗 VC 微 囊 均 有 一 个 完 整 囊 袋 袁 则 包 封 率 为 3.2 突 释 率 试 验 试 验 方 法 VC 晶 体 极 易 溶 于 水 袁 VC 微 囊 表 面 吸 附 的 VC 和 未 包 封 的 VC 在 水 中 会 很 快 被 释 放 溶 解 遥 用 碘 量 法 测 定 在 一 定 时 间 渊 1min 冤 内 释 放 在 水 中 的 VC 含 量 遥 将 网 篮 置 于 100 ml 烧 杯 的 正 中 袁 加 入 30 ml 水 渊 排 出 篮 底 的 气 泡 冤 遥 将 短 颈 小 漏 斗 渊 管 径 椎 5mm 冤 置 于 烧 杯 上 袁 使 漏 斗 口 正 对 网 篮 中 心 袁 漏 斗 口 高 于 水 面 5mm 遥 称 取 0.1 gvc 微 囊 渊 精 确 至 g 冤 经 漏 斗 倒 入 网 篮 中 袁 开 始 计 时 袁 1min 后 提 出 网 篮 遥 用 碘 量 法 测 出 水 中 VC 的 含 量 渊 每 个 样 品 做 6 次 平 行 测 定 冤 袁 并 同 时 测 出 VC 微 囊 中 的 VC 总 含 量 袁 从 而 计 算 出 VC 微 囊 释 放 在 水 中 的 突 释 率 遥 试 验 结 果 及 判 断 渊 见 表 1 冤 表 1 纯 VC 晶 体 及 不 同 VC 微 囊 的 突 释 率 ( 酸 性 水 益 ) 项 目 浸 溶 时 间 渊 min 冤 突 释 率 渊 % 冤 纯 VC 晶 体 耀 90 VC 微 囊 1# 耀 10 VC 微 囊 2# 耀 50 VC 微 囊 3# 耀 75 表 1 中 所 列 结 果 说 明 袁 没 有 包 被 的 纯 VC 晶 体 突 释 率 最 高 遥 包 被 质 量 越 好 的 VC 微 囊 突 释 率 越 低 袁 包 被 不 好 的 VC 微 囊 突 释 率 接 近 纯 VC 晶 体 遥 依 据 中 国 药 典 对 微 囊 突 释 率 的 要 求, 在 规 定 的 时 间 内 突 释 率 应 低 于 40% 遥 笔 者 认 为 袁 这 一 指 标 可 以 作 为 VC 微 囊 的 质 量 指 标 遥 3.3 VC 微 囊 释 放 度 的 测 定 测 定 方 法 移 取 醋 酸 溶 液 200 ml 加 入 0 ml 高 型 烧 杯 中 袁 56 水 浴 加 热 至 (37 依 0.5) 益 袁 将 搅 拌 桨 置 于 烧 杯 中 心 袁 桨 叶 底 部 离 烧 杯 底 部 的 距 离 为 (15 依 1) mm 遥 开 动 搅 拌 器 并 调 节 桨 叶 转 速 为 50 r/min 袁 加 入 淀 粉 溶 液 1ml 袁 立 即 用 碘 标 准 溶 液 滴 定 至 蓝 色 渊 30 s 不 褪 色 冤 遥 投 入 0.1 g 的 VC 微 囊 袁 开 始 计 时 袁 每 当 蓝 色 消 失 后 袁 再 用 碘 液 滴 定 至 蓝 色 袁 并 记 录 碘 液 消 耗 量 和 时 间 遥 以 该 时 间 内 碘 液 的 累 计 用 量 对 0.1 gvc 微 囊 消 耗 碘 液 总 量 袁 计 算 该 时 间 内 VC 微 囊 的 释 放 度 遥 同 时 按 VC 微 囊 中 VC 含 量 的 测 定 方 法 测 定 0.1 g VC 微 囊 碘 量 消 耗 量 袁 以 其 量 确 定 为 100% 释 放 遥 以 时 间 为 横 坐 标 袁 累 计 释 放 度 为 纵 坐 标 绘 制 释 放 度 曲 线 渊 见 图 3 冤 遥 纯 VC 晶 体 VC 微 囊 3# VC 微 囊 2# VC 微 囊 1# 图 3 时 间 渊 min 冤 释 放 度 测 定 曲 线 说 明 VC 微 囊 释 放 度 曲 线 包 被 质 量 好 的 VC 微 囊 袁 应 具 有 缓 释 特 性 袁 应 符 合 一 级 速 率 方 程 袁 按 其 规 律 释 放 袁 即 按 时 间 变 化 先 多 后 少 的 规 律 释 放 VC 遥 质 量 不 好 的 VC 微 囊 袁 其 释 放 特 性 与 纯 VC 相 近 袁 不 具 有 缓 释 或 低 缓 释 性 遥 质 量 好 的 VC 微 囊 不 仅 有 较 好 的 缓 释 性 袁 且 释 放 度 很 适 宜 水 生 动 物 的 需 要 遥 4 检 测 结 果 与 稳 定 性 试 验 结 果 的 相 关 性 将 VC 晶 体 和 不 同 品 牌 的 VC 微 囊 在 温 度 22~39 益 尧 相 对 湿 度 75%~95% 和 温 度 34~39 益 尧 相 对 湿 度 75%~ 95% 的 空 气 中 暴 露 3~6 个 月 袁 然 后 与 配 合 饲 料 混 合 尧 制 粒 ( 温 度 85 益 尧 相 对 湿 度 95% 尧 水 分 含 量 17%~18%), 与 高 含 量 微 量 元 素 预 混 料 (Cu 145 mg/g 尧 Fe 75 mg/g 尧 Zn 75 mg/g 尧 Mn 28 mg/g) 混 合 袁 塑 料 袋 贮 存 袁 做 稳 定 性 试 验 ( 见 表 2) 遥 表 2 中 所 列 结 果 说 明 袁 检 验 结 果 与 稳 定 性 试 验 结 果 有 较 好 的 相 关 性 袁 即 检 测 VC 微 囊 结 果 为 院 包 膜 完 整 袁 在 水 中 有 完 整 的 保 持 原 晶 形 的 囊 袋 袁 且 经 久 不 破 曰 突 释 率 不 大 于 30% 袁 具 有 明 显 的 缓 释 性 袁 符 合 一 级 释 放 速 率 的 VC 微 囊 袁 在 各 种 条 件 下 的 稳 定 性 也 是 很 高 的 遥

57 兽 医 兽 药 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 畜 禽 专 用 抗 生 素 泰 妙 菌 素 的 研 究 进 展 杨 海 峰 王 权 于 生 兰 泰 妙 菌 素 (Tiamulin) 又 名 泰 妙 灵 和 支 原 净 袁 是 由 高 等 真 菌 担 子 菌 侧 耳 属 Pleurotus mutilus 和 Pleurotus passeckerianuus 菌 种 的 深 层 培 养 液 提 取 的 截 短 侧 耳 素 (Pleuromutilin) 的 氢 化 延 胡 索 酸 盐 袁 是 双 萜 烯 类 化 合 物 半 合 成 的 抗 生 素 遥 1951 年 澳 大 利 亚 Kavangh 首 次 报 道 了 这 类 物 质 袁 20 世 纪 60 年 代 开 始 对 其 进 行 广 泛 研 究 遥 泰 妙 菌 素 在 动 物 体 内 吸 收 迅 速 袁 血 药 浓 度 高 袁 体 内 分 布 广 泛 袁 且 残 留 较 低 袁 对 猪 尧 禽 类 的 支 原 体 病 尧 猪 密 螺 旋 体 性 痢 疾 尧 鸡 的 葡 萄 球 菌 滑 膜 炎 有 良 好 疗 效 袁 又 有 促 生 长 作 用 袁 因 此 作 为 兽 药 和 饲 料 添 加 剂 而 被 广 泛 应 用 遥 本 文 就 国 内 外 对 泰 妙 菌 素 的 药 效 尧 药 动 力 学 尧 毒 理 学 等 方 面 的 研 究 情 况 予 以 综 述 袁 为 其 在 兽 医 临 床 的 合 理 使 用 提 供 参 考 依 据 遥 1 理 化 性 质 泰 妙 菌 素 的 分 子 式 为 C 28 H 47 NO 4 S 袁 分 子 量 袁 实 际 使 用 多 为 泰 妙 菌 素 的 延 胡 索 酸 盐 袁 其 分 子 式 为 C 28 H 47 NO 4 S 窑 C 4 H 4 O 4 袁 分 子 量 为 遥 延 胡 索 酸 泰 妙 菌 素 为 白 色 或 类 白 色 结 晶 性 粉 末 袁 无 臭 尧 无 味 袁 在 乙 醇 中 易 溶 袁 在 水 中 溶 解 袁 在 丙 酮 中 略 溶 袁 在 己 烷 中 几 乎 不 溶 袁 熔 点 为 143 耀 149 益 遥 干 燥 品 稳 定 袁 对 光 尧 热 较 不 稳 定 遥 2 抗 菌 机 理 及 活 性 泰 妙 菌 素 对 几 种 细 菌 的 抗 菌 活 性 见 表 1 遥 表 1 菌 株 鸡 毒 支 原 体 标 准 株 猪 毒 支 原 体 标 准 株 大 肠 杆 菌 ATCC 922 大 肠 杆 菌 C 金 黄 色 葡 萄 球 菌 ATCC 923 金 黄 色 葡 萄 球 菌 分 离 株 大 肠 杆 菌 O 2 禽 巴 氏 杆 菌 分 离 株 鸭 大 肠 杆 菌 分 离 株 1 鸭 大 肠 杆 菌 分 离 株 2 猪 大 肠 杆 菌 分 离 株 猪 链 球 菌 分 离 株 泰 妙 菌 素 和 磷 酸 泰 乐 菌 素 对 不 同 菌 株 的 最 小 抑 菌 浓 度 ( 滋 g/ml) 泰 妙 菌 素 磷 酸 泰 乐 菌 素 >32 > > 杨 海 峰, 江 苏 畜 牧 兽 医 职 业 技 术 学 院 动 物 药 学 系,2300, 江 苏 省 泰 州 市 迎 宾 路 58 号 王 权 于 生 兰, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 泰 妙 菌 素 为 动 物 专 用 的 抗 生 素 袁 其 作 用 机 理 为 抑 制 细 菌 蛋 白 质 的 合 成 袁 即 能 与 敏 感 菌 核 糖 体 50S 亚 基 结 合 袁 通 过 对 转 肽 作 用 或 mrna 位 移 的 阻 断 来 抑 制 肽 链 的 合 成 和 延 长, 影 响 细 菌 蛋 白 质 的 合 成 遥 泰 妙 菌 素 为 项 目 镜 检 突 释 率 渊 % 冤 释 放 度 温 度 34~39 益 袁 相 对 湿 度 75%~95% 袁 在 空 气 中 暴 露 90 d 温 度 22~39 益 袁 相 对 湿 度 75%~95% 袁 在 空 气 中 暴 露 180 d 温 度 85 益 袁 相 对 湿 度 95% 袁 与 配 合 饲 料 混 合 5min 温 度 20~39 益 袁 相 对 湿 度 60%~95% 袁 与 微 量 元 素 预 混 料 混 合 贮 存 60 d 表 2 检 测 结 果 与 稳 定 性 试 验 结 果 的 相 关 性 纯 VC 晶 体 晶 体 在 水 中 很 快 溶 解 袁 无 囊 袋 86~90 无 缓 释 性 VC 微 囊 3# 晶 体 在 水 中 很 快 溶 解 袁 无 完 整 囊 袋 袁 包 膜 呈 絮 状 散 开 袁 或 未 成 膜 的 白 色 粒 状 囊 材 70~75 无 缓 释 性 VC 微 囊 2# 晶 体 在 膜 内 被 水 溶 解 袁 有 囊 袋 袁 但 很 快 破 裂 成 碎 片 40~50 稍 有 缓 释 性 VC 微 囊 1# 水 从 囊 袋 外 缓 慢 浸 入 袁 逐 渐 溶 解 VC 晶 体 袁 有 保 持 原 晶 形 囊 袋 袁 经 久 不 破 6~10 有 缓 释 特 性 袁 符 合 一 级 速 率 结 语 试 验 结 果 说 明 院 本 文 提 出 的 检 验 VC 微 囊 的 方 法 劣 袁 为 鉴 别 VC 微 囊 质 量 的 好 坏 提 供 了 简 便 易 行 的 方 法 袁 有 利 于 商 品 VC 微 囊 的 正 常 使 用 和 签 别 遥 和 所 列 指 标 袁 能 比 较 好 地 反 映 VC 微 囊 稳 定 性 的 优 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected]) 57

58 杨 海 峰 等 : 畜 禽 专 用 抗 生 素 泰 妙 菌 素 的 研 究 进 展 兽 医 兽 药 抑 菌 性 抗 生 素, 在 高 浓 度 下 对 敏 感 菌 也 有 杀 菌 作 用 遥 泰 妙 菌 素 为 窄 谱 抗 生 素 袁 抗 菌 谱 与 大 环 内 酯 类 相 似 袁 对 革 兰 氏 阳 性 菌 渊 如 金 黄 色 葡 萄 球 菌 尧 链 球 菌 冤 尧 支 原 体 渊 猪 肺 炎 支 原 体 尧 鸡 败 血 支 原 体 冤 尧 猪 胸 膜 肺 炎 放 线 合 功 能 氧 化 酶 系 的 活 性 袁 从 而 干 扰 聚 醚 类 抗 生 素 的 体 内 代 谢 过 程 遥 于 泰 妙 菌 素 在 马 上 应 用 可 能 带 来 大 肠 杆 菌 菌 群 失 调 和 结 肠 炎 的 危 险 袁 故 应 禁 用 遥 盂 猪 应 用 过 量 时 袁 可 引 起 短 暂 流 涎 尧 呕 吐 和 中 枢 神 经 抑 制 遥 杆 菌 及 猪 密 螺 旋 体 等 有 较 强 的 抗 菌 活 性 袁 对 支 原 体 和 螺 旋 体 尤 为 敏 感 袁 对 革 兰 氏 阴 性 菌 抗 菌 活 性 较 弱 遥 5 临 床 应 用 临 床 上 泰 妙 菌 素 主 要 用 于 防 治 鸡 的 慢 性 呼 吸 道 3 药 代 动 力 学 特 征 泰 妙 菌 素 的 药 代 动 力 学 特 征 为 院 淤 单 胃 动 物 内 服 病 袁 猪 支 原 体 肺 炎 尧 放 线 菌 性 胸 膜 肺 炎 和 密 螺 旋 体 痢 疾 等 袁 与 金 霉 素 尧 土 霉 素 等 四 环 素 类 抗 生 素 配 伍 可 产 吸 收 好 袁 血 药 浓 度 达 峰 时 间 为 2 耀 4h 袁 生 物 利 用 度 渊 F 冤 在 85% 以 上 曰 于 反 刍 动 物 内 服 可 被 肠 道 菌 群 灭 活 曰 盂 吸 收 后 在 体 内 分 布 广 泛 袁 组 织 中 和 乳 中 的 药 物 浓 度 高 出 血 清 浓 度 几 倍 袁 肺 中 浓 度 最 高 曰 榆 泰 妙 菌 素 在 体 内 被 代 谢 成 20 多 种 代 谢 物 袁 有 的 具 有 抗 菌 活 性 袁 代 谢 物 主 要 经 胆 汁 从 粪 便 排 泄 袁 约 30% 从 尿 中 排 泄 遥 Gatne 等 以 8mg/kg 的 剂 量 分 别 给 小 牛 (80 耀 100 kg) 和 绵 羊 (15 耀 32 kg) 肌 注 泰 妙 菌 素 袁 血 峰 浓 度 (C max ) 分 别 为 3.52 尧 滋 g/ml, 表 观 分 布 容 积 (V d ) 分 别 为 1.31 尧 8.82L/kg, 消 除 半 衰 期 (T 1/2 茁 ) 分 别 为 3 尧 4.65 h 袁 血 浆 清 除 率 (CL) 分 别 为 每 分 钟 尧 ml/kg 遥 猪 内 服 泰 妙 菌 素 易 于 吸 收 袁 单 剂 量 投 服 可 吸 收 85 豫 袁 2 耀 4h 出 现 血 药 峰 浓 度, 在 50 mg/kg 的 剂 量 下 袁 平 均 血 药 浓 度 达 4.5 mg/ml 袁 药 物 在 体 内 分 布 极 其 广 泛 袁 以 肺 中 浓 度 最 高 袁 有 效 血 药 浓 度 维 持 时 间 达 24 h 遥 Laber G 等 研 究 表 明 袁 以 50 mg/kg 的 剂 量 给 鸡 和 火 鸡 口 服 泰 妙 菌 素,2 耀 4h 后 达 到 峰 浓 度 袁 平 均 血 药 浓 度 分 别 为 3.5 尧 2.9 滋 g/ml, 有 效 血 药 浓 度 维 持 时 间 为 12 耀 24 h 遥 Laber G 给 普 通 犬 分 别 皮 下 和 肌 内 注 射 10 mg/kg 泰 妙 菌 素 袁 C max 分 别 为 渊 1.55 依 0.11 冤 尧 渊 0.60 依 0.08 冤 滋 g/ml 袁 肌 注 药 动 参 数 达 峰 时 间 渊 T max 冤 分 别 为 8 尧 6h 袁 吸 收 半 衰 期 渊 T 1/2Ka 冤 分 别 为 渊 2.76 依 0.13 冤 尧 渊 2.23 依 0.76 冤 h, T 1/2 茁 分 别 为 (4.28 依 0.18) 尧 (4.7 依 1.43) h,cl 分 别 为 每 分 钟 0.33 尧 1.36 ml/kg 遥 生 增 效 作 用 遥 低 剂 量 还 可 用 于 促 进 畜 禽 生 长 尧 提 高 饲 料 利 用 率 和 生 产 性 能 遥 泰 妙 菌 素 禁 与 能 结 合 细 菌 核 糖 体 50S 亚 基 的 抗 生 素 合 用 袁 有 拮 抗 作 用 遥 涂 国 众 等 以 支 原 净 100 mg/kg+ 金 霉 素 150 mg/kg 给 断 奶 仔 猪 混 饲 袁 结 果 显 示 袁 仔 猪 腹 泻 率 显 著 下 降 袁 日 增 重 明 显 提 高 袁 为 解 决 仔 猪 早 期 断 奶 的 生 长 受 阻 与 腹 泻 难 题 提 供 了 有 效 方 法 遥 梁 国 煦 等 以 100 mg/kg 支 原 净 +300 mg/kg 土 霉 素 给 生 产 母 猪 拌 饲 袁 在 母 猪 产 前 和 产 后 各 连 续 饲 喂 5d 袁 仔 猪 断 奶 后 母 猪 继 续 以 相 同 浓 度 连 续 饲 喂 5d 曰 28 日 龄 断 奶 仔 猪 以 100 mg/kg 支 原 净 +150 mg/kg 土 霉 素 连 续 混 饲 4 周, 结 果 表 明, 母 猪 与 仔 猪 的 气 喘 病 都 得 到 有 效 控 制, 仔 猪 各 个 阶 段 生 长 均 匀, 育 成 率 显 著 提 高 遥 瑞 士 诺 华 动 物 保 健 品 有 限 公 司 研 制 了 泰 妙 菌 素 注 射 液, 用 于 治 疗 猪 支 原 体 肺 炎 尧 传 染 性 胸 膜 肺 炎 和 猪 密 螺 旋 体 引 起 的 痢 疾, 肌 肉 注 射 10 耀 15 mg/kg 袁 每 日 1 次 袁 连 用 3 日 遥 梁 小 军 等 用 泰 妙 菌 素 分 别 以 饮 水 渊 1.2 mg/kg 冤 尧 拌 料 渊 1.1 mg/kg 冤 和 肌 肉 注 射 渊 1.0 mg/kg 冤 的 给 药 方 法 袁 治 疗 绵 羊 肺 炎 霉 形 体 病 袁 每 日 给 药 1 次 袁 连 用 3 耀 5d 后 袁 临 床 症 状 消 失 袁 成 功 治 疗 了 万 余 例 患 羊 袁 效 果 显 著 袁 且 副 作 用 小 遥 藏 素 敏 等 研 究 了 在 饲 料 中 添 加 泰 妙 菌 素 (20 mg/kg) 对 20 周 龄 的 海 兰 灰 商 品 蛋 鸡 生 产 性 能 的 影 响 袁 结 果 表 明 袁 鸡 群 达 到 产 蛋 高 峰 的 时 间 提 前 7d 渊 P<0.05 冤 袁 产 4 毒 性 与 不 良 反 应 王 丽 平 等 进 行 了 泰 妙 菌 素 的 一 般 毒 性 研 究 袁 口 服 蛋 率 提 高 3.18% 渊 P<0.01 冤 袁 饲 料 报 酬 提 高 7.96% 渊 P< 0.01 冤 袁 体 重 增 加 7.5% 袁 蛋 黄 尧 蛋 壳 颜 色 有 所 改 善 袁 但 泰 妙 菌 素 的 小 鼠 尧 鸡 的 LD 50 分 别 为 1158 和 2119 g/kg 袁 差 异 不 显 著 渊 P>0.05 冤 遥 按 国 际 急 性 毒 性 分 级 标 准 可 判 断 为 实 际 无 毒 袁 蓄 积 系 数 K>5 袁 为 弱 蓄 积 性 袁 小 鼠 对 其 不 具 有 耐 受 性 遥 泰 妙 菌 素 的 不 良 反 应 主 要 有 院 淤 本 品 与 莫 能 菌 素 尧 盐 霉 素 等 聚 醚 类 抗 生 素 联 合 应 用 时 袁 可 导 致 中 毒 袁 使 鸡 生 长 迟 缓 尧 运 动 失 调 尧 麻 痹 瘫 痪 袁 甚 至 死 亡 遥 其 产 ( 参 考 文 献 12 篇, 刊 略, 需 者 可 函 索 ) 生 机 制 认 为 是 泰 妙 菌 素 可 以 影 响 肝 细 胞 色 素 P450 混 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected]) 58

59 资 源 开 发 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 碱 法 水 解 糖 蜜 酒 精 废 液 处 理 过 程 中 产 生 的 微 生 物 蛋 白 制 备 复 合 氨 基 酸 粉 的 研 究 赵 芯 朱 义 年 曾 鸿 鹄 张 学 洪 摘 要 以 微 生 物 蛋 白 为 原 料, 采 用 氢 氧 化 钠 水 解 法 制 备 复 合 氨 基 酸 粉, 通 过 正 交 试 验 确 定 最 佳 工 艺 参 数 为 水 解 温 度 90 益 反 应 时 间 2h 氢 氧 化 钠 溶 液 浓 度 40% 和 液 固 比 50 1 并 对 氨 基 酸 液 的 粗 制 品 采 用 盐 酸 中 和, 有 机 试 剂 乙 醇 沉 淀, 常 压 干 燥 等 方 法 进 行 精 制 经 本 工 艺 生 产 的 氨 基 酸 产 品 色 泽 为 乳 白 色, 香 气 正 常, 游 离 氨 基 酸 含 量 为 0.313%, 氨 基 酸 含 量 为 0.475% 试 验 结 果 可 为 废 水 处 理 过 程 中 产 生 的 微 生 物 蛋 白 资 源 化 利 用 提 供 试 验 依 据 关 键 词 碱 法 水 解 ; 微 生 物 蛋 白 ; 复 合 氨 基 酸 中 图 分 类 号 S 在 糖 蜜 酒 精 废 液 处 理 过 程 中 会 产 生 大 量 微 生 物 蛋 白 袁 其 粗 蛋 白 含 量 在 54% 左 右 遥 如 果 直 接 丢 弃 袁 不 仅 产 生 了 二 次 污 染 袁 还 浪 费 了 大 量 的 蛋 白 质 资 源 遥 将 其 水 解 并 提 取 氨 基 酸 袁 不 仅 为 废 弃 物 资 源 化 利 用 提 供 了 新 的 途 径 袁 制 取 的 氨 基 酸 还 可 作 为 饲 料 添 加 剂 袁 以 满 足 饲 料 行 业 对 饲 用 氨 基 酸 日 益 增 长 的 需 要 遥 蛋 白 质 水 解 通 常 有 酸 法 [13] 尧 碱 法 [45] 及 酶 法 [68] 袁 本 试 验 采 用 氢 氧 化 钠 水 解 法 袁 在 单 因 素 试 验 基 础 上 选 择 影 响 较 大 的 几 个 因 素 条 件 袁 通 过 正 交 试 验 确 定 工 艺 参 数 袁 同 时 对 氨 基 酸 液 的 粗 制 品 采 用 盐 酸 中 和 尧 常 压 浓 缩 的 方 法 进 行 精 制 袁 通 过 试 验 为 中 试 和 推 广 打 下 一 定 的 基 础 遥 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 微 生 物 蛋 白 渊 糖 蜜 酒 精 废 液 处 理 过 程 中 产 生 冤 尧 NaOH 渊 广 州 华 大 试 剂 厂 生 产 袁 分 析 纯 冤 遥 1.2 主 要 仪 器 与 设 备 数 显 快 速 恒 温 水 浴 箱 (HH60, 常 州 国 华 电 器 有 限 公 司 生 产 ) 尧 紫 外 分 光 光 度 计 (Lambda 袁 美 国 PE 公 司 生 产 ) 尧 电 热 鼓 风 干 燥 箱 (DHR 原 100SB 型 袁 广 东 医 疗 器 械 厂 生 产 ) 遥 1.3 试 验 步 骤 预 处 理 由 于 在 培 养 中 袁 糖 蜜 酒 精 废 液 中 焦 糖 及 一 些 代 谢 赵 芯, 桂 林 工 学 院 资 源 与 环 境 工 程 系,541004, 广 西 桂 林 市 建 干 路 12 号 朱 义 年 ( 通 讯 作 者 ) 曾 鸿 鹄 张 学 洪, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 绎 广 西 科 学 研 究 与 技 术 开 发 计 划 ( 桂 科 攻 , ) 和 广 西 科 学 基 金 ( 桂 科 自 , 桂 科 青 ) 项 目 59 产 物 吸 附 在 微 生 物 菌 体 上 袁 使 菌 体 泥 呈 浅 咖 啡 色 袁 微 生 物 菌 体 本 身 也 有 一 定 臭 味 袁 对 各 种 制 成 品 品 质 有 不 良 影 响 袁 必 须 通 过 预 处 理 将 其 去 除 遥 本 试 验 采 用 酸 碱 洗 涤 法 对 菌 体 蛋 白 泥 进 行 预 处 理 [9] 袁 方 法 为 院 在 菌 体 蛋 白 泥 中 加 入 2 倍 体 积 的 0.3 豫 氢 氧 化 钠 袁 离 心 分 离 得 到 碱 性 菌 体 蛋 白 泥 曰 在 碱 性 菌 体 蛋 白 泥 中 加 入 2 倍 体 积 的 0.4 豫 酒 石 酸 袁 离 心 分 离 得 弱 碱 性 菌 体 蛋 白 泥 曰 在 弱 碱 性 菌 体 蛋 白 泥 中 加 入 2 倍 体 积 纯 水 袁 离 心 分 离 得 到 干 净 菌 体 蛋 白 泥 袁 按 上 述 步 骤 往 复 2~3 次 再 经 过 脱 色 尧 脱 苦 处 理 后 的 菌 体 蛋 白 泥 呈 灰 白 色 袁 无 臭 味 遥 微 生 物 蛋 白 水 解 方 法 氢 氧 化 钠 水 解 方 法 将 预 处 理 后 的 菌 体 在 80 益 下 干 燥 袁 制 成 粉 末 遥 在 具 塞 聚 乙 烯 管 中 袁 精 确 称 取 0.1 g 粉 末 状 菌 体 袁 然 后 加 入 不 同 浓 度 的 NaOH 袁 在 恒 温 水 浴 箱 中 进 行 水 解 反 应 一 定 时 间 后 取 出 袁 测 定 氨 基 酸 含 量 遥 精 制 复 合 氨 基 酸 的 方 法 精 制 包 括 中 和 尧 脱 色 尧 干 燥 等 工 艺 遥 原 料 水 解 完 后 袁 在 水 解 液 中 加 入 盐 酸 进 行 中 和 袁 将 中 和 后 的 水 解 液 ph 值 调 节 为 5, 每 50 ml 加 入 活 性 炭 1.5 g, 在 55 益 脱 色 1h 袁 趁 热 过 滤 遥 再 利 用 有 机 试 剂 沉 淀 法 分 离 氨 基 酸,pH 值 为 5 袁 温 度 为 7 益 袁 V 无 水 乙 醇 V 水 解 液 =9 1 袁 沉 淀 时 间 30 min 袁 4000 r/min 离 心 10 min 袁 沉 淀 袁 在 恒 温 干 燥 箱 中 60 益 恒 温 干 燥 10 h 遥 1.4 分 析 方 法 86) 遥 水 分 测 定 院 在 105 益 下 烘 干 2h 后 称 重 (GB6435 要 氨 基 酸 含 量 测 定 院 采 用 茚 三 酮 法 [10] 遥 氨 基 酸 组 成 分 析 院 利 用 氨 基 酸 自 动 分 析 仪 渊 GB/ T18246 要 2000 冤 测 定 遥 2 结 果 与 讨 论

60 赵 芯 等 : 碱 法 水 解 糖 蜜 酒 精 废 液 处 理 过 程 中 产 生 的 微 生 物 蛋 白 制 备 复 合 氨 基 酸 粉 的 研 究 资 源 开 发 2.1 正 交 试 验 方 案 设 计 选 择 氢 氧 化 钠 浓 度 尧 液 固 比 尧 水 解 时 间 尧 水 解 温 度 等 不 同 因 素 进 行 正 交 试 验 袁 希 望 在 较 短 的 水 解 时 间 内 完 成 制 备 复 合 氨 基 酸 的 目 的 袁 试 验 因 素 设 计 见 表 1 遥 水 平 表 1 A 氢 氧 化 钠 浓 度 (%) 碱 水 解 试 验 因 素 水 平 B 液 固 比 正 交 试 验 结 果 ( 见 表 2) 实 验 号 K 1 K 2 K 3 k 1 k 2 k 3 R A 表 2 B C C 水 解 时 间 (h) 正 交 试 验 结 果 分 析 D D 水 解 温 度 ( 益 ) 氨 基 酸 产 生 量 (mg/g 干 菌 体 ) 由 表 2 可 知 袁 最 佳 的 试 验 条 件 为 A 3 B 2 C 2 D 3 袁 对 氨 基 酸 的 影 响 因 素 顺 序 是 水 解 温 度 > 水 解 时 间 > 液 固 比 > 氢 氧 化 钠 浓 度 袁 即 水 解 温 度 对 氨 基 酸 水 解 影 响 最 大 袁 水 解 时 间 和 液 固 比 对 氨 基 酸 水 解 有 一 定 的 影 响 袁 氢 氧 化 钠 浓 度 对 氨 基 酸 水 解 产 生 的 影 响 相 对 较 小 遥 通 过 级 差 分 析 确 定 采 用 氢 氧 化 钠 水 解 法 制 备 微 生 物 蛋 白 复 合 氨 基 酸 粉 的 最 佳 工 艺 参 数 为 院 氢 氧 化 钠 浓 度 为 40% 袁 液 固 比 为 50 1 袁 水 解 时 间 为 2h 袁 水 解 温 度 为 90 益 遥 2.3 产 品 氨 基 酸 含 量 分 析 通 过 最 佳 试 验 条 件 得 到 粗 制 氨 基 酸 水 解 液 袁 将 氨 基 酸 水 解 液 用 盐 酸 中 和 过 滤 袁 活 性 炭 脱 色 袁 有 机 试 剂 乙 醇 沉 淀 提 取 复 合 氨 基 酸 袁 常 压 干 燥 后 得 到 复 合 氨 基 酸 成 品 袁 产 品 色 泽 为 白 色 袁 香 气 正 常 袁 无 异 味 遥 将 制 得 的 复 合 氨 基 酸 成 品 送 至 广 西 分 析 测 试 研 究 中 心 进 行 检 测 袁 测 定 成 品 中 氨 基 酸 组 成 及 含 量 袁 结 果 见 表 3 遥 由 测 定 结 果 可 以 看 出, 采 用 氢 氧 化 钠 水 解 微 生 物 蛋 白, 并 用 盐 酸 进 行 中 和 尧 乙 醇 沉 淀 制 出 的 复 合 氨 基 酸 成 品 中, 未 检 出 游 离 脯 氨 酸 尧 脯 氨 酸 尧 游 离 缬 氨 酸 尧 游 离 异 亮 氨 酸 尧 异 亮 氨 酸 尧 游 离 亮 氨 酸 尧 游 离 组 氨 酸 尧 游 离 精 氨 酸 和 精 氨 酸 遥 游 离 氨 基 酸 在 成 品 氨 基 酸 中 的 含 量 为 0.313%, 氨 基 酸 在 成 品 氨 基 酸 中 的 含 量 为 0.475%, 游 离 氨 基 酸 占 氨 基 酸 总 量 的 65.89% 袁 说 明 产 品 中 游 离 氨 基 酸 含 量 相 对 较 多, 肽 的 含 量 为 34.11% 遥 复 合 氨 基 酸 成 品 中 含 量 较 高 的 氨 基 酸 有 谷 氨 酸 和 天 门 冬 氨 酸, 氨 基 酸 成 品 中 以 游 离 态 存 在 的 氨 基 酸 主 要 有 天 门 冬 氨 酸 尧 苏 氨 酸 尧 丝 氨 酸 尧 谷 氨 酸 尧 甘 氨 酸 和 丙 氨 酸, 其 余 检 测 出 的 氨 基 酸 在 成 品 中 主 要 以 肽 的 形 式 存 在 遥 表 3 成 品 氨 基 酸 组 成 及 含 量 氨 基 酸 种 类 天 门 冬 氨 酸 苏 氨 酸 丝 氨 酸 谷 氨 酸 脯 氨 酸 甘 氨 酸 丙 氨 酸 胱 氨 酸 缬 氨 酸 蛋 氨 酸 异 亮 氨 酸 亮 氨 酸 酪 氨 酸 苯 丙 氨 酸 赖 氨 酸 氨 组 胺 酸 精 氨 酸 合 计 缩 略 式 Asp Thr Ser Glu Pro Gly Ala Cys Val Met Ile Leu Tyr Phe Lys NH 3 His Arg 游 离 氨 基 酸 含 量 渊 % 冤 未 检 出 未 检 出 未 检 出 未 检 出 未 检 出 未 检 出 氨 基 酸 含 量 渊 % 冤 未 检 出 未 检 出 未 检 出 游 离 氨 基 酸 占 氨 基 酸 总 量 渊 % 冤

61 专 题 论 述 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 微 生 物 制 剂 降 低 胆 固 醇 研 究 进 展 王 峰 徐 子 伟 孙 建 华 胆 固 醇 是 人 类 生 存 所 必 需 的 袁 具 有 重 要 的 生 理 功 能 袁 但 体 内 过 量 时 会 造 成 危 害 遥 与 胆 固 醇 过 量 有 关 的 动 脉 粥 样 硬 化 尧 冠 心 病 尧 脑 中 风 等 心 脑 血 管 疾 病 已 严 重 威 胁 着 人 类 健 康 遥 随 着 人 们 生 活 水 平 的 提 高 和 膳 食 营 养 的 增 加 袁 人 们 往 往 因 不 合 理 膳 食 袁 过 多 摄 入 高 脂 肪 尧 高 胆 固 醇 食 品 袁 导 致 血 液 胆 固 醇 含 量 超 标 遥 因 此 袁 研 究 如 何 降 低 动 物 体 内 胆 固 醇 水 平 对 生 产 优 良 的 动 物 产 品 具 有 重 要 意 义 遥 近 年 来 袁 人 们 发 现 多 种 微 生 物 有 降 低 动 物 体 内 胆 固 醇 的 作 用 袁 一 些 化 学 益 生 素 渊 如 寡 糖 冤 也 能 通 过 调 节 肠 道 内 菌 群 活 性 袁 起 到 降 低 胆 固 醇 或 甘 油 三 酯 的 作 用 遥 本 文 对 几 类 微 生 物 制 剂 降 低 胆 固 醇 的 作 用 机 理 作 一 综 述 袁 对 微 生 物 制 剂 在 饲 料 产 业 中 的 应 用 提 出 了 展 望 遥 1 微 生 物 降 低 胆 固 醇 的 机 理 1.1 通 过 胆 固 醇 氧 化 酶 途 径 降 低 胆 固 醇 研 究 表 明, 多 种 微 生 物 具 有 通 过 氧 化 作 用 降 解 胆 固 醇 的 能 力, 如 节 细 菌 (Arthrobacter) 尧 短 杆 菌 (Brevibac 鄄 王 峰, 浙 江 省 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所,310021, 浙 江 省 杭 州 市 石 桥 路 198 号 徐 子 伟, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 孙 建 华, 浙 江 大 学 动 物 科 学 学 院 收 稿 日 期 : terium) 尧 棒 状 杆 菌 (Corynebacterium) 尧 诺 卡 氏 菌 (Nocar 鄄 dia) 尧 假 单 胞 菌 (Pseudomonas) 尧 红 球 菌 (Rhdococcus) 尧 裂 褶 菌 (Schizophyllum) 尧 沙 雷 氏 菌 (Serratia) 和 链 霉 菌 (Strep 鄄 tomyces) 等 遥 这 些 微 生 物 含 胆 固 醇 氧 化 酶 渊 Cholesterol Oxidase 袁 EC, 袁 COX 冤 袁 能 氧 化 降 解 胆 固 醇 及 其 同 系 物 遥 胆 固 醇 氧 化 酶 可 氧 化 产 生 的 胆 甾 4 烯 3 酮 是 胆 固 醇 (27C) 完 全 分 解 成 CO 2 和 H 2 O 的 一 系 列 过 程 中 的 关 键 前 期 中 间 产 物 袁 而 产 生 的 22C 羧 酸 又 可 能 是 侧 链 降 解 的 关 键 步 骤 袁 但 目 前 物 降 解 胆 固 醇 的 具 体 途 径 还 不 十 分 清 楚 遥 1.2 通 过 胆 固 醇 还 原 酶 途 径 降 低 胆 固 醇 一 些 厌 氧 菌 和 真 细 菌 产 生 的 胆 固 醇 还 原 酶 可 使 胆 固 醇 转 化 为 难 以 被 人 体 胃 肠 道 所 吸 收 的 粪 甾 醇 袁 是 益 生 菌 降 低 胆 固 醇 的 另 一 条 途 径 遥 而 粪 甾 醇 和 粪 甾 酮 等 类 固 醇 物 质 被 认 为 是 无 毒 尧 不 易 重 新 吸 收 和 代 谢 的 饱 和 甾 醇 遥 1991 年 袁 美 国 爱 荷 华 州 立 大 学 的 Freier 分 离 出 了 产 粪 甾 醇 真 细 菌 (Eubacterium Coprostanoligenes 袁 EC) 袁 并 将 它 定 性 为 一 种 个 体 微 小 尧 革 兰 氏 阳 性 尧 无 芽 孢 结 构 尧 具 有 胆 固 醇 还 原 性 质 的 厌 氧 性 球 杆 菌 (Coccobacil 鄄 lus) 遥 曾 有 人 利 用 放 射 性 标 记 [4 3 H 袁 4 14 C] 胆 固 醇 来 培 养 EC 袁 5d 内 90 豫 的 胆 固 醇 转 化 成 了 粪 甾 醇 曰 该 反 应 中 袁 EC 还 原 了 胆 固 醇 的 4 袁 5 反 式 双 键 袁 并 使 一 个 氢 从 4C 转 移 到 了 5C 上 遥 对 新 西 兰 白 兔 直 接 饲 喂 富 含 胆 固 3 小 结 采 用 氢 氧 化 钠 水 解 法 分 解 糖 蜜 酒 精 废 液 中 蛋 白 袁 其 最 佳 工 艺 参 数 为 院 氢 氧 化 钠 浓 度 为 40% 袁 液 固 比 为 50 1, 水 解 时 间 为 2h, 水 解 温 度 为 90 益 遥 经 本 工 艺 生 产 的 氨 基 酸 产 品 色 泽 为 乳 白 色 袁 香 气 正 常 遥 采 用 氢 氧 化 钠 水 解 微 生 物 蛋 白 获 得 的 复 合 氨 基 酸 产 品 中 游 离 谷 氨 酸 和 游 离 天 门 冬 氨 酸 含 量 较 其 它 种 类 游 离 氨 基 酸 高, 游 离 氨 基 酸 的 总 量 为 0.313% 曰 天 门 冬 氨 酸 和 谷 氨 酸 含 量 较 其 它 氨 基 酸 高, 氨 基 酸 的 总 量 为 0.475% 遥 参 考 文 献 1 张 寒 俊, 刘 大 川. 快 速 水 解 法 制 备 菜 籽 复 合 氨 基 酸 粉 的 工 艺 探 讨 [J]. 粮 食 与 饲 料 工 业,2005(8):20~21 2 赵 希 贤, 杨 抒 宁, 彭 澍. 珍 珠 母 水 解 提 取 氨 基 酸 工 艺 的 初 步 研 究 [J]. 北 京 中 医 药 大 学 学 报,2005,28(5): 54~ 路 亮, 张 学 俊, 熊 静. 酸 法 水 解 制 革 下 脚 料 提 取 混 合 氨 基 酸 的 工 艺 探 讨 [J]. 中 国 皮 革,2000,29(23):29~31 4 尹 国 强, 崔 英 德, 黎 新 明, 等. 碱 法 水 解 羽 毛 蛋 白 的 工 艺 条 件 研 究 [J]. 食 品 科 学,2005,26(9):347~349 5 张 国 治. 碱 法 水 解 大 豆 蛋 白 的 研 究 [J]. 食 品 工 业,1998(5): 12~13 6 汪 何 雅, 杨 瑞 金, 王 璋. 牡 蛎 的 营 养 成 分 及 蛋 白 质 的 酶 法 水 解 [J]. 水 产 学 报,2003,27(2):163~168 7 谭 斌, 丁 霄 霖. 牛 肉 蛋 白 水 解 物 的 酶 解 制 备 [J]. 无 锡 轻 工 大 学 学 报,2005,24(1):59~64 8 章 叶 江, 范 宗 泽, 杨 萍, 等. 双 酶 法 水 解 鲤 鱼 头 的 工 艺 条 件 探 讨 [J]. 食 品 科 技,2005(1):40~42 9 冯 霖. 啤 酒 废 酵 母 菌 体 变 温 法 自 溶 的 研 究 [J]. 资 源 节 约 和 综 合 利 用,1995(4):31~35 10 张 龙 翔, 张 庭 芳, 李 令 媛. 生 化 实 验 方 法 和 技 术 [M]. 北 京 : 高 等 教 育 出 版 社, ~142 ( 编 辑 : 高 雁,[email protected])

62 王 峰 等 : 微 生 物 制 剂 降 低 胆 固 醇 研 究 进 展 专 题 论 述 醇 的 饲 料 及 EC 袁 试 验 表 明 袁 EC 确 有 在 体 内 降 低 血 胆 固 醇 的 功 能 袁 而 且 喂 饲 了 该 活 体 菌 的 白 兔 消 化 道 内 的 粪 甾 醇 与 胆 固 醇 的 比 要 明 显 高 于 喂 饲 经 煮 沸 菌 的 白 兔 的 遥 沉 淀 袁 从 而 降 低 了 培 养 基 中 的 胆 固 醇 含 量 遥 Tarato (1997) 等 通 过 对 罗 伊 士 乳 杆 菌 (Lactobacillus reuteri) 降 胆 固 醇 作 用 的 体 外 研 究 表 明 袁 胆 盐 水 解 酶 活 性 是 胆 固 醇 降 低 的 关 键 所 在 遥 目 前 袁 乳 酸 菌 降 低 胆 固 醇 的 机 理 1.3 红 曲 霉 及 其 代 谢 产 物 的 降 胆 固 醇 作 用 机 理 红 曲 霉 是 一 类 腐 生 真 菌 袁 属 于 真 菌 门 红 曲 科 至 今 尚 没 有 定 论 遥 然 而 袁 一 些 研 究 者 认 为 实 际 上 小 肠 内 的 ph 值 略 高 于 中 性 值 袁 共 沉 淀 很 难 发 生 袁 因 此 乳 酸 (Monascaceae) 红 曲 霉 属 (Monascus) 袁 因 其 能 发 酵 产 生 大 量 天 然 红 色 素 而 著 称 遥 20 世 纪 70 年 代 末 袁 Akira Endo 等 从 收 集 的 泰 国 食 物 样 品 中 分 离 出 红 曲 霉 (Monaseus rubber No 援 1005) 袁 并 培 养 提 取 出 代 谢 产 物 莫 纳 可 林 (Monacolin) K 之 后 袁 国 内 外 科 学 家 才 开 始 重 视 对 红 曲 霉 药 用 生 理 功 能 的 探 讨 遥 80 年 代 中 期 袁 Akira Endo 等 又 从 红 曲 霉 中 分 离 到 了 与 莫 纳 可 林 K 结 构 相 类 似 的 其 它 活 性 物 质 要 莫 纳 可 林 J 尧 L 尧 M 尧 X 等 遥 大 量 研 究 已 证 明 袁 莫 纳 可 林 类 物 质 对 于 降 低 机 体 中 血 清 胆 固 醇 浓 度 具 有 显 著 的 效 果 遥 人 体 内 的 总 胆 固 醇 约 有 44 豫 和 23 豫 分 别 在 肝 脏 和 肠 内 合 成 遥 肝 脏 内 的 胆 固 醇 生 物 合 成 经 历 了 以 下 主 要 阶 段 院 醋 酸 ( 或 醋 酸 盐 尧 醋 酸 酯 ) 寅 3 羟 基 3 甲 基 戊 二 酸 单 酰 CoA(HMGCoA) 甲 羟 戊 酸 (MVA) 寅 3 异 戊 烯 焦 磷 酸 酯 寅 鲨 烯 寅 胆 固 醇 袁 包 括 近 30 步 复 杂 反 应 遥 其 中 的 HMGCoA 还 原 酶 (EC, ) 是 该 合 成 系 统 的 限 速 酶 袁 其 活 性 高 低 决 定 着 胆 固 醇 合 成 速 率 的 快 慢 遥 莫 纳 可 林 类 物 质 能 特 异 性 对 抗 抑 制 HMGCoA 还 原 酶 的 活 性 袁 并 通 过 增 高 载 脂 蛋 白 (apob 援 E) 受 体 活 性 袁 而 降 低 含 有 LDL( 低 密 度 脂 蛋 白 ) 尧 IDL( 中 密 度 脂 蛋 白 ) 及 VLDL( 极 低 密 度 脂 蛋 白 ) 的 血 浆 脂 蛋 白 浓 度, 代 偿 性 地 增 加 LDL 受 体 的 活 性, 促 进 血 浆 中 LDL 的 清 除, 从 而 达 到 降 低 血 胆 固 醇 浓 度 的 目 的 遥 研 究 表 明, 莫 纳 可 林 类 物 质 在 血 液 中 浓 度 只 要 达 到 耀 g/ml, 就 能 使 胆 固 醇 合 成 受 阻 遥 菌 在 体 内 所 表 现 出 的 降 血 脂 功 能 是 由 于 对 胆 固 醇 的 吸 收 同 化 作 用 或 菌 体 细 胞 表 面 对 胆 固 醇 的 吸 附 作 用 遥 尽 管 真 正 的 机 理 尚 无 定 论 袁 但 人 们 已 越 来 越 倾 向 于 活 体 乳 酸 菌 和 双 歧 杆 菌 通 过 吸 收 和 共 沉 淀 联 合 作 用 来 降 低 胆 固 醇 的 观 点 袁 而 且 不 同 的 生 长 环 境 影 响 着 细 菌 主 要 采 取 某 一 种 作 用 机 制 的 取 向 遥 Grill(2000) 等 对 食 淀 粉 乳 杆 菌 (Lactobacillus amylovorus 袁 La) 和 短 双 歧 杆 菌 (Bifidobacterium breve 袁 Bb) 在 厌 氧 条 件 尧 不 同 胆 盐 影 响 下 的 降 胆 固 醇 效 果 及 机 理 作 了 研 究 袁 发 现 在 含 牛 黄 胆 酸 的 高 胆 固 醇 培 养 基 中 袁 二 者 均 表 现 出 以 细 胞 吸 收 同 化 为 主 ( 约 50 豫 ) 的 吸 收 共 沉 淀 联 合 作 用 能 力 曰 而 在 含 同 浓 度 牛 胆 盐 的 高 胆 固 醇 培 养 基 中 袁 检 测 结 果 与 含 牛 黄 胆 酸 时 一 致 袁 但 Bb 却 倾 向 于 专 性 的 共 沉 淀 作 用 (68 豫 ) 袁 而 几 乎 无 吸 收 作 用 遥 根 据 试 验 结 果 推 测 袁 前 人 对 乳 酸 菌 降 胆 固 醇 作 用 机 制 所 持 的 不 同 观 点 可 能 仅 仅 是 基 于 不 同 的 反 应 条 件 所 得 袁 而 并 非 本 质 对 立 遥 但 这 仅 是 纯 培 养 条 件 下 的 试 验 结 果 袁 尚 未 经 动 物 试 验 研 究 袁 因 而 完 全 用 它 来 解 释 乳 酸 菌 降 低 人 体 血 清 胆 固 醇 的 机 理 是 不 充 分 的 遥 另 一 方 面 袁 有 人 对 乳 酸 菌 在 食 品 基 质 中 的 降 胆 固 醇 作 用 作 了 研 究 发 现 袁 在 既 没 有 额 外 加 入 游 离 胆 固 醇 也 没 有 添 加 胆 盐 等 物 质 的 奶 油 中 袁 大 部 分 菌 种 也 能 达 到 40 豫 以 上 的 胆 固 醇 吸 收 率 袁 尤 以 几 种 嗜 酸 乳 杆 菌 的 吸 收 同 化 能 力 最 强 曰 相 比 较 而 言 袁 乳 酸 菌 在 食 品 基 质 中 与 胆 固 醇 的 共 沉 淀 作 用 不 明 显 遥 因 此 袁 可 推 测 活 体 1.4 乳 酸 菌 的 降 胆 固 醇 作 用 机 理 许 多 研 究 表 明 袁 乳 酸 菌 在 体 内 和 体 外 对 胆 固 醇 均 乳 酸 菌 对 胆 固 醇 的 降 低 可 能 有 其 它 作 用 机 理 遥 另 外 袁 双 歧 杆 菌 有 形 成 烟 酸 的 作 用 袁 烟 酸 可 通 过 有 降 低 作 用 遥 为 此 袁 人 们 对 乳 酸 菌 降 低 胆 固 醇 的 机 理 进 行 了 广 泛 研 究 遥 Gilliland 等 (1985) 研 究 证 明 袁 在 体 外 厌 氧 条 件 下 袁 乳 酸 菌 在 含 胆 盐 的 高 胆 固 醇 培 养 基 中 生 长 时 袁 菌 体 细 胞 可 吸 收 同 化 介 质 中 的 胆 固 醇 袁 从 而 导 致 介 质 中 胆 固 醇 含 量 下 降 遥 Rasic(1992) 试 验 证 实 了 纯 抑 制 与 脂 肪 合 成 有 关 的 激 素 袁 从 而 降 低 脂 肪 蓄 积 量 遥 脂 肪 代 谢 受 神 经 内 分 泌 的 调 节 遥 研 究 表 明 袁 甲 状 腺 激 素 尧 皮 质 酮 等 都 参 与 生 长 中 禽 类 体 脂 蓄 积 遥 因 此 袁 双 歧 杆 菌 可 能 通 过 调 节 一 些 与 脂 肪 代 谢 有 关 的 激 素 ( 如 甲 状 腺 激 素 等 ) 的 浓 度 来 控 制 动 物 的 脂 肪 沉 积 遥 培 养 条 件 下 部 分 乳 酸 菌 和 双 歧 杆 菌 (Bifidobacterium bifidum) 对 胆 固 醇 的 吸 收 同 化 作 用 遥 但 是 袁 Klaver 和 2 寡 糖 降 低 胆 固 醇 的 机 理 低 聚 果 糖 渊 云 ructoo1igosaccharide 袁 简 写 为 FOS 冤 是 Valtder(1993) 认 为 袁 乳 酸 菌 和 双 歧 杆 菌 对 胆 固 醇 没 有 同 化 作 用 袁 而 是 在 ph 值 低 于 6.0 时 袁 由 于 乳 酸 菌 和 双 歧 杆 菌 的 胆 盐 共 轭 活 性 增 加 袁 使 胆 固 醇 与 胆 盐 形 成 了 在 蔗 糖 分 子 上 以 茁 1 袁 2 糖 苷 键 结 合 D 果 糖 所 形 成 的 寡 聚 糖 遥 低 聚 果 糖 降 血 脂 的 机 理 不 是 很 明 确, 可 能 与 肠 道 吸 收 的 改 变 尧 肠 道 或 胰 腺 的 激 素 分 泌 尧 脂 蛋 白 代 62

63 专 题 论 述 王 峰 等 : 微 生 物 制 剂 降 低 胆 固 醇 研 究 进 展 谢 尧 胆 汁 酸 代 谢 有 关 遥 低 聚 果 糖 可 被 结 肠 微 生 物 发 酵 为 短 链 脂 肪 酸, 如 乙 酸 尧 丙 酸 尧 丁 酸, 这 些 短 链 脂 肪 酸 基 本 上 被 完 全 吸 收, 在 大 肠 发 酵 产 生 的 丁 酸 大 部 分 被 肠 壁 利 用, 它 在 猪 肝 脏 中 的 主 要 代 谢 形 式 是 丙 酸 遥 Levrat 等 渊 1994 冤 研 究 报 道, 果 寡 糖 在 肝 脏 中 的 主 要 代 谢 形 式 是 丙 酸 遥 有 研 究 表 明, 丙 酸 盐 能 抑 制 大 鼠 肝 细 胞 中 胆 固 醇 的 合 成 遥 因 此 推 测, 低 聚 果 糖 降 胆 固 醇 的 可 能 作 用 机 理 和 其 发 酵 产 物 丙 酸 抑 制 肝 脏 胆 固 醇 合 成 有 关 遥 另 一 方 面 袁 低 聚 果 糖 为 一 种 水 溶 性 膳 食 纤 维 袁 其 自 身 有 一 定 吸 附 脂 类 的 能 力 袁 它 也 可 以 吸 附 肠 道 中 的 胆 汁 酸 遥 胆 汁 酸 既 有 亲 水 的 羟 基 袁 又 有 疏 水 的 烃 核 袁 能 降 低 油 尧 水 两 相 之 间 的 表 面 张 力 袁 有 利 于 胰 脂 酶 及 胆 固 醇 酯 酶 的 作 用 遥 胆 固 醇 酯 经 胆 汁 酸 盐 乳 化 与 酶 解 后 生 成 游 离 胆 固 醇 袁 它 与 胆 汁 酸 盐 尧 磷 脂 及 脂 肪 的 水 解 产 物 甘 油 一 酯 尧 脂 酸 等 结 合 成 混 合 微 团 袁 被 小 肠 粘 膜 吸 收 遥 吸 收 的 游 离 胆 固 醇 80% 耀 90% 在 肠 粘 膜 内 又 与 长 链 脂 肪 酸 袁 主 要 是 油 酸 结 合 成 胆 固 醇 酯 袁 后 者 大 部 分 渗 入 乳 糜 微 粒 袁 少 量 参 与 组 成 极 低 密 度 脂 蛋 白 袁 经 淋 巴 进 入 循 环 遥 未 被 吸 收 的 胆 固 醇 在 小 肠 下 段 及 结 肠 被 细 菌 还 原 为 粪 固 醇 随 粪 便 排 出 遥 因 此 袁 低 聚 果 糖 通 过 与 胆 汁 酸 盐 结 合 而 促 进 胆 汁 酸 盐 从 粪 便 排 出 袁 间 接 减 少 了 胆 固 醇 与 脂 肪 的 吸 收 遥 王 国 杰 研 究 发 现 袁 低 聚 果 糖 能 促 使 肠 道 双 歧 杆 菌 增 殖 袁 而 双 歧 杆 菌 有 形 成 烟 酸 的 作 用 袁 烟 酸 可 通 过 抑 制 与 脂 肪 合 成 有 关 的 激 素 袁 从 而 降 低 脂 肪 蓄 积 量 遥 另 外 袁 果 糖 能 使 鹌 鹑 血 液 中 T 3 浓 度 升 高 袁 因 此 认 为 袁 寡 果 糖 可 能 通 过 调 节 一 些 与 脂 肪 代 谢 有 关 的 激 素 ( 如 甲 状 腺 激 素 等 ) 的 浓 度 来 控 制 家 禽 的 脂 肪 沉 积 遥 3 展 望 利 用 微 生 物 相 关 方 法 降 低 食 品 和 动 物 体 内 的 胆 固 醇 是 近 20 多 年 来 随 着 人 们 对 营 养 与 健 康 的 要 求 逐 渐 提 高 才 发 展 起 来 的 一 项 新 研 究 课 题 遥 并 且 由 于 微 生 物 法 相 对 于 其 它 脱 胆 固 醇 的 方 法 具 有 优 势 袁 其 应 用 价 值 也 正 被 越 来 越 多 的 研 究 者 和 企 业 关 注 遥 目 前 袁 主 要 研 究 还 在 食 品 工 业 方 面 袁 在 饲 料 工 业 上 的 很 多 方 面 的 应 用 都 还 处 于 起 步 阶 段 遥 今 后 的 研 究 可 能 集 中 于 以 下 几 个 方 面 院 淤 进 一 步 探 明 利 用 胆 固 醇 氧 化 酶 尧 胆 固 醇 还 原 酶 尧 红 曲 霉 尧 乳 酸 菌 和 低 聚 糖 降 胆 固 醇 过 程 中 的 作 用 机 制 袁 以 更 好 地 发 挥 它 们 在 降 解 胆 固 醇 中 的 作 用 曰 于 寻 找 尧 开 发 利 用 具 有 降 胆 固 醇 功 能 的 其 它 微 生 物 及 其 酶 或 活 性 物 质 遥 如 寻 求 能 通 过 活 化 胆 汁 酸 合 成 63 限 速 酶 7 羟 化 酶 等 促 进 胆 固 醇 在 肝 脏 向 胆 汁 酸 转 化 的 微 生 物 曰 盂 结 合 分 子 生 物 学 技 术 构 建 高 效 降 解 胆 固 醇 的 转 基 因 菌 株 和 原 生 质 体 融 合 菌 株 曰 榆 深 入 研 究 降 低 胆 固 醇 微 生 物 的 高 效 发 酵 技 术 袁 为 其 在 饲 料 工 业 中 的 应 用 提 供 基 础 遥 参 考 文 献 1 卜 永 士, 郭 本 恒. 乳 酸 菌 对 胆 固 醇 降 低 作 用 的 研 究 [J]. 上 海 水 产 大 学 学 报,2004, 13(4):371 耀 洪 智 勇, 毛 宁 援 红 曲 霉 降 胆 固 醇 有 效 成 分 的 研 究 [J]. 中 国 调 味 品, 2002(6):6 耀 8 3 屠 友 金, 胡 彩 虹. 低 聚 果 糖 和 丙 酸 钠 对 肥 育 猪 胆 固 醇 代 谢 的 影 响 [J]. 中 国 粮 油 学 报,2005,20(1):65 耀 68 4 徐 进, 严 卫 星, 耿 桂 英, 等. 低 聚 果 糖 降 血 脂 作 用 的 动 物 研 究 [J]. 中 国 食 品 卫 生 杂 志,2001,13(4):7 耀 8 5 张 德 超, 王 素 英, 王 翠 英. 转 化 胆 固 醇 的 微 生 物 在 食 品 中 的 应 用 研 究 [J]. 食 品 科 技,2004(3):1 耀 4 6 张 佳 程, 骆 承 痒 援 乳 酸 菌 对 食 品 中 胆 固 醇 脱 除 作 用 的 研 究 乳 酸 菌 菌 种 ( 株 ) 的 筛 选 [J] 援 食 品 科 学,1998,19(3):20 耀 22 7 Freier T A 援 Isolation and characterization of unique cholesterol reducing anaerobe,ph 援 D dissertation [A]. Iowa State University Library,Ames,IA 援, Gilliland SE,Nelson CR, Maxwell C 援 Assimilation of cholesterol by lactobacillusacidophilus[j]. Applied andenvironmentalmicrobiology, 1985(49):377 耀 Grill JP,Cayuela C, Antoine JM, et al. Effects of Lactobacillus amylovorus Sand Bifidobacterium brave on cholesterol 援 Letters in Applied Microbiology,2000(31):154 耀 Klaver F A M,van der Meer R 援 The assumed assimilation of cholesterol by Lactobacilli and Bifidobaeterium bifidum is due to their bile saltdeconjugating activity 援 Applied and Environmental Microbiology,1993(59):1 120 耀 MacLachlan J,Wotherspoon ATL, Ansell RQ, et al. Cholesterol oxidase:sources,physical properties and analytical applications[j] 援 Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology,2000(72): 169 耀 Owen TW, Mason AN, Bilton RF 援 The degradation of cholesterol by pseudomonas species. NCIB under aerobic conditions [J]. Journal of Lipid Research, 1983(24):1 500 耀 Rasic J L,Vujicic L F, Skringer M, et al. Assimilation of cholesterol by some culture of lactic acid bacteria and bifidobacteria 援 Biotechnology Letters,1992(14):39 耀 Taranto M P,Sesma F 援 Bile salthydrolase plays a key role on cholesterol removal by Lactobacillus reuteri 援 Biotechnology Letters, 1997(19):845 耀 847 ( 编 辑 : 王 芳,[email protected])

64 饲 料 工 业 圆 园 园 7 年 第 28 卷 第 10 期 问 题 探 讨 饲 料 中 氟 超 标 及 动 物 氟 中 毒 宋 文 学 李 小 兵 谢 光 洪 张 志 刚 王 哲 1 氟 的 过 量 及 中 毒 氟 对 动 物 有 一 定 的 营 养 生 理 功 能 袁 但 动 物 对 氟 的 起 的 袁 主 要 造 成 骨 和 牙 齿 的 损 害 遥 高 浓 度 的 氟 被 吸 收 进 入 血 液 后 袁 氟 就 会 与 血 液 中 的 钙 尧 镁 离 子 结 合 袁 形 成 需 要 量 很 低 袁 生 产 中 很 少 会 出 现 缺 乏 或 不 足 袁 而 容 易 出 现 氟 中 毒 问 题 遥 一 般 情 况 下 袁 我 们 称 氟 为 有 毒 尧 有 害 元 素 袁 这 是 因 为 在 动 物 的 饲 粮 中 氟 含 量 超 过 一 定 限 度 时 会 导 致 动 物 中 毒 遥 氟 中 毒 的 主 要 病 变 在 骨 骼 和 牙 齿 袁 并 由 此 而 引 起 其 它 继 发 症 遥 生 产 中 以 未 脱 氟 或 脱 氟 不 完 全 的 磷 酸 氢 钙 作 为 饲 料 原 料 袁 常 会 导 致 配 合 饲 料 中 氟 含 量 过 高 而 引 起 氟 中 毒 遥 有 研 究 表 明 袁 动 物 对 氟 的 耐 受 量 受 动 物 的 种 类 尧 年 龄 袁 摄 入 氟 化 物 的 形 态 尧 期 限 尧 持 续 性 以 及 所 进 食 物 性 质 尧 数 量 和 基 础 日 粮 等 因 素 的 影 响 遥 一 般 小 牛 尧 奶 牛 尧 种 羊 尧 猪 尧 肉 鸡 和 蛋 鸡 氟 的 耐 受 量 分 别 为 40 尧 50 尧 60 尧 150 尧 300 和 400 mg/kg 袁 超 过 此 限 度 则 可 能 产 生 氟 中 毒 遥 不 溶 性 氟 化 物 而 使 血 液 中 的 钙 和 镁 浓 度 降 低 遥 为 补 充 血 液 中 的 钙 袁 骨 中 的 钙 就 会 不 断 的 释 放 出 来 袁 破 坏 了 骨 钙 和 血 钙 之 间 的 成 骨 和 破 骨 平 衡 袁 钙 磷 代 谢 受 影 响 从 而 导 致 骨 骼 钙 化 不 足 遥 低 血 钙 又 刺 激 甲 状 旁 腺 机 能 亢 进 袁 促 使 甲 状 旁 腺 素 分 泌 增 多 袁 从 而 使 骨 溶 解 速 度 加 快 袁 导 致 骨 质 疏 松 遥 氟 还 能 抑 制 骨 磷 酸 化 酶 的 活 性 袁 使 骨 中 钙 的 吸 收 与 蓄 积 减 慢 袁 从 而 引 起 骨 脱 钙 遥 由 于 氟 可 取 代 骨 骼 中 羟 磷 灰 石 的 羟 基 袁 变 成 氟 磷 灰 石 袁 使 骨 密 度 增 加 而 发 生 硬 化 遥 高 浓 度 的 氟 除 对 骨 造 成 损 害 外 袁 对 非 骨 质 也 有 一 定 的 损 害 遥 现 已 证 明 袁 与 Ca 尧 Mg 尧 Mn 尧 Fe 尧 Cu 尧 Zn 等 金 属 有 关 的 酶 都 容 易 受 氟 的 影 响 袁 这 是 由 于 氟 与 这 些 金 属 离 子 结 合 而 影 响 了 酶 的 生 成 和 活 性 袁 这 些 酶 活 性 的 降 1 援 1 急 性 氟 中 毒 当 大 量 的 氟 化 物 一 次 性 被 动 物 摄 食 后 袁 则 会 引 起 低 可 直 接 导 致 糖 代 谢 紊 乱 及 脂 肪 的 利 用 率 下 降 袁 由 此 使 机 体 产 生 一 系 列 病 理 过 程 遥 日 粮 中 某 几 种 矿 物 元 素 急 性 氟 中 毒 遥 氟 化 物 进 入 动 物 体 内 袁 和 胃 酸 反 应 产 生 氟 氢 酸 袁 强 烈 刺 激 胃 肠 而 引 起 急 性 胃 肠 炎 遥 氟 化 物 属 于 一 种 原 生 质 毒 物 袁 很 容 易 透 过 各 种 组 织 细 胞 壁 袁 与 原 生 质 结 合 从 而 破 坏 原 生 质 遥 大 量 的 氟 被 吸 收 后 迅 速 与 血 浆 中 的 钙 离 子 结 合 形 成 氟 化 钙 袁 从 而 出 现 低 血 钙 症 抽 搐 和 过 敏 袁 血 凝 障 碍 而 导 致 出 血 和 死 亡 遥 在 生 产 中 急 性 氟 中 毒 出 现 的 机 率 并 不 高 袁 因 为 骨 有 积 累 大 量 氟 的 能 力 袁 只 有 摄 入 的 氟 超 过 动 物 的 沉 积 能 力 时 袁 氟 才 会 进 入 软 组 织 袁 引 起 生 理 代 谢 紊 乱 或 功 能 异 常 遥 猪 正 常 骨 中 氟 含 量 可 达 3 耀 4mg/kg, 猪 对 氟 的 最 不 足 也 可 在 一 定 程 度 上 影 响 氟 中 毒 进 程 袁 加 重 氟 中 毒 程 度 或 出 现 一 些 与 某 种 矿 物 质 元 素 有 关 的 特 殊 病 变 遥 氟 可 以 抑 制 胆 碱 酯 酶 的 活 性 而 引 起 肌 肉 紧 张 曰 抑 制 乌 头 酸 酶 的 活 性 而 阻 碍 三 羧 酸 循 环 袁 使 氧 化 磷 酸 化 过 程 受 阻 遥 氟 中 毒 可 抑 制 吞 噬 细 胞 和 中 性 白 细 胞 的 活 性 袁 导 致 血 清 中 溶 菌 酶 和 抗 体 生 成 减 少 袁 接 种 后 免 疫 强 度 降 低 遥 氟 中 毒 还 会 引 起 甲 状 腺 肿 大 袁 影 响 肝 脏 代 谢 从 而 降 低 肝 脏 的 解 毒 功 能 遥 有 研 究 证 明 袁 氟 与 钙 有 特 殊 的 亲 和 力 袁 易 形 成 氟 化 钙 沉 淀 而 成 为 尿 结 石 的 核 心 袁 所 以 说 袁 氟 中 毒 与 尿 结 石 也 有 一 定 的 关 系 遥 大 耐 受 量 为 150 mg/kg, 若 超 过 这 一 剂 量 可 导 致 猪 的 氟 中 毒 遥 急 性 氟 中 毒 的 猪 主 要 表 现 为 胃 肠 炎 袁 呕 吐 尧 腹 痛 2 氟 中 毒 的 防 治 导 致 氟 中 毒 的 原 因 一 般 为 饲 料 中 氟 含 量 超 标 袁 饲 腹 泻 尧 粪 便 带 血 尧 食 欲 下 降 尧 肌 肉 震 颤 尧 呼 吸 困 难 尧 瞳 孔 扩 大 尧 感 觉 过 敏 尧 易 惊 恐 袁 随 后 可 能 出 现 虚 脱 和 死 亡 遥 料 中 含 氟 较 丰 富 的 原 料 有 磷 酸 盐 尧 鱼 粉 尧 石 粉 尧 骨 粉 遥 而 磷 酸 氢 钙 是 目 前 饲 料 中 氟 的 主 要 来 源 袁 我 国 规 定 添 1 援 2 慢 性 氟 中 毒 氟 的 慢 性 中 毒 主 要 是 因 长 期 摄 入 过 量 的 氟 而 引 宋 文 学, 吉 林 大 学 畜 牧 兽 医 学 院,130062, 长 春 市 西 安 大 加 剂 磷 酸 氢 钙 的 含 氟 量 不 应 超 过 0.18 豫 遥 如 果 生 产 中 由 于 磷 酸 氢 钙 脱 氟 不 够 或 并 未 经 过 脱 氟 而 导 致 的 动 物 饲 料 含 氟 量 过 高 造 成 氟 中 毒 袁 则 应 立 即 停 喂 该 饲 料 袁 并 更 换 氟 含 量 符 合 国 家 标 准 的 饲 料 遥 增 加 饲 料 中 蛋 白 质 供 给 量 袁 避 免 动 物 处 于 频 繁 的 应 激 状 态 袁 也 是 路 5333 号 李 小 兵 谢 光 洪 张 志 刚 王 哲, 单 位 及 通 讯 地 址 同 第 一 作 者 收 稿 日 期 : 预 防 发 生 本 病 的 较 为 有 效 的 措 施 遥 平 时 应 加 强 饲 养 管 理 袁 防 止 病 区 散 养 袁 加 强 饲 料 日 粮 及 饮 水 的 保 管 袁 防 止 氟 的 污 染 遥 氟 经 消 化 道 尧 呼 吸 道 和 皮 肤 进 入 体 内 袁 在 小 64

65 问 题 探 讨 宋 文 学 等 : 饲 料 中 氟 超 标 及 动 物 氟 中 毒 肠 前 段 吸 收 袁 而 钙 盐 和 铝 剂 可 拮 抗 小 肠 对 氟 的 吸 收 遥 目 前 袁 铝 复 合 物 已 用 于 减 轻 反 刍 动 物 氟 中 毒 遥 磷 酸 铝 尧 亚 硒 酸 铝 尧 硫 酸 铝 及 氧 化 铝 加 碳 酸 钙 已 被 成 功 地 用 于 减 轻 反 刍 动 物 氟 中 毒 遥 在 饲 料 中 添 加 氧 化 铝 可 增 加 粪 中 排 氟 量 袁 减 少 骨 组 织 中 氟 的 贮 存 遥 其 它 的 如 钙 盐 复 合 物 也 被 用 于 减 轻 氟 中 毒 袁 增 加 动 物 对 氟 的 耐 受 性 遥 试 验 表 明 袁 在 饲 料 中 添 加 乳 酸 钙 尧 硫 酸 钙 及 葡 萄 糖 酸 钙 袁 再 配 以 适 量 的 维 生 素 A 尧 维 生 素 B 尧 维 生 素 C 及 维 生 素 D 等 可 减 轻 氟 中 毒 的 症 状 遥 3 氟 在 生 产 中 的 应 用 及 检 测 氟 是 动 物 生 长 发 育 所 必 需 的 微 量 元 素, 但 在 生 产 上, 氟 不 需 要 单 独 作 为 一 种 添 加 剂 在 饲 料 中 添 加, 一 般 饲 料 中 添 加 的 骨 粉 尧 石 粉 尧 磷 酸 盐 等 原 料 所 含 的 氟 就 可 以 满 足 动 物 的 营 养 需 要 遥 生 产 上 由 于 饲 料 中 氟 的 含 量 过 高 而 导 致 动 物 中 毒 的 事 件 层 出 不 穷 遥 国 标 规 定 常 用 饲 料 中 氟 含 量 为 : 石 粉 臆 2000 mg/kg 尧 鱼 粉 臆 500 mg/kg 尧 磷 酸 盐 臆 2000 mg/kg 尧 骨 粉 臆 1800 mg/kg 遥 需 要 特 别 指 出 的 是 袁 工 业 化 生 产 的 磷 酸 氢 钙 含 氟 量 很 高 袁 用 作 动 物 饲 料 时 要 先 把 磷 酸 氢 钙 进 行 脱 氟 袁 未 脱 氟 或 脱 氟 不 完 全 的 磷 酸 氢 钙 袁 常 引 起 氟 中 毒 遥 目 前 国 内 外 主 要 用 湿 法 磷 酸 法 来 生 产 磷 酸 氢 钙 袁 由 于 湿 法 磷 酸 中 氟 主 要 呈 氟 硅 酸 形 式 存 在 袁 因 此 可 以 利 用 氟 硅 酸 的 特 性 袁 采 用 挥 发 法 及 沉 淀 法 使 氟 呈 气 态 和 沉 淀 态 从 磷 酸 中 分 离 出 来 达 到 脱 氟 目 的 遥 氟 作 为 动 物 体 中 一 种 必 需 的 微 量 元 素 袁 在 饲 料 生 产 上 有 重 要 的 作 用 袁 但 若 氟 过 量 袁 则 会 造 成 严 重 的 中 毒 事 件 袁 造 成 不 必 要 的 经 济 损 失 遥 所 以 袁 如 何 测 定 饲 料 中 氟 的 含 量 显 的 格 外 重 要 遥 生 产 中 用 氟 离 子 选 择 电 极 测 定 氟 含 量 袁 其 原 理 是 利 用 氟 离 子 选 择 电 极 的 氟 化 镧 单 晶 膜 对 氟 离 子 产 生 选 择 性 的 对 数 影 响 袁 氟 电 极 和 饱 和 甘 汞 电 极 在 被 测 溶 液 中 电 位 差 可 随 溶 液 中 氟 离 子 活 度 的 变 化 而 改 变 袁 电 位 变 化 规 律 符 合 能 斯 特 方 程 式 的 原 理 来 测 定 饲 料 中 氟 的 含 量 遥 ( 编 辑 : 徐 世 良,[email protected]) 窑 光 盘 推 荐 窑 品 名 定 价 ( 元 ) 品 名 定 价 ( 元 ) 品 名 定 价 ( 元 ) 中 国 牧 业 企 事 业 单 位 名 录 畜 牧 业 经 济 与 规 模 化 养 殖 场 经 营 管 理 高 致 病 性 禽 流 感 预 防 与 控 制 家 畜 生 理 学 兽 医 微 生 物 学 肉 鸡 饲 养 管 理 与 屠 宰 养 鸡 生 产 鸡 的 饲 养 雏 鸡 和 蛋 鸡 的 饲 养 与 管 理 农 村 养 鸡 1 50 海 狸 鼠 养 殖 技 术 麝 鼠 果 子 狸 养 殖 技 术 兰 狐 养 殖 养 鹿 中 国 对 虾 的 养 殖 兽 医 药 物 学 兽 医 学 良 种 肉 鸭 大 棚 饲 养 技 术 鸭 鹅 养 殖 技 术 罗 氏 沼 虾 大 口 鲶 鱼 的 养 殖 海 参 人 工 养 殖 秘 诀 瘦 肉 型 猪 的 繁 殖 与 饲 养 猪 的 养 殖 猪 病 防 治 养 牛 技 术 人 工 培 育 天 然 牛 黄 高 产 奶 牛 饲 养 技 术 鸭 病 防 治 养 鹅 蛋 鸭 的 放 牧 饲 养 管 理 四 季 鹅 的 养 殖 技 术 獭 兔 兔 病 防 治 家 兔 的 饲 养 与 管 理 50 珍 珠 的 养 殖 河 蟹 的 养 殖 实 用 养 鳖 新 技 术 塑 料 大 棚 控 温 快 速 养 鳖 甲 鱼 海 产 养 殖 致 富 经 50 肉 牛 养 殖 技 术 奶 牛 繁 育 技 术 南 方 梅 花 鹿 养 殖 养 牛 养 羊 学 奶 牛 的 饲 养 管 理 牛 羊 育 肥 技 术 波 杂 羊 繁 育 饲 养 技 术 中 华 土 元 养 殖 技 术 家 兔 繁 殖 与 兔 病 防 治 养 蝎 技 术 养 蛇 技 术 毒 蛇 饲 养 技 术 鹌 鹑 及 蜗 牛 的 养 殖 蜗 牛 的 室 内 养 殖 稻 田 养 鱼 河 蚌 育 珠 黄 鳝 鳗 鱼 福 寿 螺 养 殖 技 术 鲍 鱼 人 工 养 殖 秘 诀 流 水 养 鲟 药 用 虫 养 殖 技 术 观 赏 昆 虫 绵 羊 山 羊 养 殖 技 术 高 腿 小 尾 寒 羊 饲 养 秘 传 高 效 养 羊 技 术 50 蜗 牛 蚯 蚓 饲 养 肉 鸽 的 饲 养 肉 用 犬 养 殖 新 技 术 怎 样 办 好 一 个 养 鸽 场 怎 样 办 好 一 个 养 牛 场 怎 样 办 好 一 个 养 羊 场 邮 局 汇 款 地 址 院 沈 阳 市 金 沙 江 街 16 号 6 门 渊 本 社 发 行 部 收 冤 联 系 电 话 院 渊 024 冤 银 行 汇 款 单 位 院 辽 宁 省 农 牧 业 机 械 研 究 所 有 限 公 司 开 户 行 院 中 信 银 行 沈 阳 分 行 皇 姑 支 行 帐 号 院