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1 药 学 学 报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (8): α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 维 力 波 糖 改 善 糖 尿 病 大 鼠 糖 脂 代 谢 紊 乱 及 肾 脏 病 变 刘 * 泉, 刘 率 男, 孙 素 娟, 申 竹 芳 ( 中 国 医 学 科 学 院 北 京 协 和 医 学 院 药 物 研 究 所, 天 然 药 物 活 性 物 质 与 功 能 国 家 重 点 实 验 室, 北 京 ) 摘 要 : 考 察 新 型 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 维 力 波 糖 对 糖 尿 病 大 鼠 的 糖 脂 代 谢 紊 乱 及 糖 尿 病 肾 病 的 改 善 作 用 链 脲 霉 素 糖 尿 病 大 鼠 饲 以 高 糖 饲 料 喂 养 后, 餐 后 血 糖 空 腹 血 糖 糖 化 血 清 蛋 白 以 及 尿 糖 含 量 显 著 高 于 正 常 大 鼠, 并 存 在 一 定 程 度 的 肾 脏 病 变 长 期 给 予 维 力 波 糖 后 能 够 显 著 降 低 糖 尿 病 大 鼠 的 空 腹 血 糖 餐 后 血 糖 糖 化 血 清 蛋 白 血 清 甘 油 三 酯 总 胆 固 醇 及 尿 糖 水 平, 改 善 多 食 多 饮 等 症 状 维 力 波 糖 还 能 够 显 著 降 低 血 清 N- 乙 酰 - β-d- 氨 基 葡 萄 糖 苷 酶 活 性 和 尿 素 氮 水 平, 降 低 该 模 型 的 肾 脏 指 数 结 果 表 明, 维 力 波 糖 通 过 有 效 控 制 餐 后 高 血 糖 改 善 了 糖 尿 病 大 鼠 的 糖 脂 代 谢 紊 乱, 同 时 也 一 定 程 度 改 善 了 糖 尿 病 大 鼠 的 肾 脏 病 变, 有 益 于 缓 解 糖 尿 病 微 血 管 并 发 症 的 发 生 和 发 展 关 键 词 : α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 ; 维 力 波 糖 ; 链 脲 霉 素 糖 尿 病 大 鼠 ; 糖 尿 病 肾 病 中 图 分 类 号 : R965 文 献 标 识 码 : A 文 章 编 号 : (2013) Valibose, an alpha-glucosidase inhibitor, ameliorates the metabolic disorder of glucose and lipids and the nephropathy in streptozotocin-induced diabetic rats LIU Quan, LIU Shuai-nan, SUN Su-juan, SHEN Zhu-fang * (State Key Laboratory of Bioactive Substances and Functions of Natural Medicines, Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing , China ) Abstract: This study is to evaluate the anti-diabetic effects of the alpha-glucosidase inhibitor valibose in a streptozotocin (STZ)-induced type 1 diabetes rat model. Diabetes was induced by a single dose of STZ (58 mg kg 1, ip) in SD rats, rats with elevated fasting blood glucose levels ( mg dl 1 ) were selected and divided into five groups (n = 10 in each). Another ten normal SD rats were chosen as normal group. Valibose mixed with the high sucrose diets (0.4, 1.0 and 2.5 mg 100 g 1 diets) or acarbose (30 mg 100 g 1 diets) was administrated in the diabetic rats for about 5 weeks. In all groups, fasting and postprandial plasma glucose, plasma lipids, glycosylated serum protein, N-acetyl-beta-D-glucosaminidase (NAG), creatinine (Cre), blood urea nitrogen (BUN) and urine sugar levels were determined during the treatment. At the end of the experiment, the morphological alterations in kidney were evaluated by hematoxylin-eosin (HE) staining. After 3-weeks administration, valibose significantly decreased postprandial and fasting blood glucose, urine glucose, and reduced the levels of serum fructosamine. Valibose also decreased plasma triglyceride and cholesterol levels after 4 weeks treatment. These results indicated that valibose ameliorated metabolic disturbance of glucose and 收 稿 日 期 : ; 修 回 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 重 大 新 药 创 制 科 技 重 大 专 项 资 助 项 目 (2012ZX ). * 通 讯 作 者 Tel / Fax: , shenzhf@imm.ac.cn

2 1228 药 学 学 报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (8): lipids in STZ-induced diabetic rats. In addition, valibose markedly reduced level of serum NAG and BUN, and decreased the weight index of kidney. HE staining showed reduced kidney pathological changes after valibose treatment. The findings of the present study indicate that valibose may be a novel α-glucosidase inhibitor for the prevention from hyperglycemia in STZ-induced type 1 diabetes rats. And valibose might have a potential role for protecting against diabetic nephropathy during hyperglycemia. Key words: α-glucosidase inhibitor; valibose; STZ-induced diabetic rat; diabetic nephropathy 空 腹 和 餐 后 血 糖 是 血 糖 控 制 的 重 要 组 成 部 分, 我 国 多 数 2 型 糖 尿 病 (2DM) 患 者 均 存 在 餐 后 高 血 糖 现 象 大 量 研 究 表 明, 2DM 患 者 的 餐 后 高 血 糖 是 导 致 大 血 管 及 微 血 管 并 发 症 的 重 要 危 险 因 素 [1, 2], 严 格 控 制 餐 后 高 血 糖 可 显 著 降 低 2DM 患 者 的 血 管 病 变 风 险 因 此, 糖 尿 病 的 治 疗 不 仅 限 于 降 低 空 腹 血 糖, 对 [3 5] 于 餐 后 血 糖 的 严 格 控 制 可 减 少 血 管 并 发 症 ( 如 冠 心 病 动 脉 粥 样 硬 化 和 糖 尿 病 肾 病 等 ) 的 发 生 发 展 近 年 来 大 量 实 验 研 究 表 明, 长 期 应 用 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 有 助 于 改 善 糖 尿 病 动 物 模 型 的 餐 后 血 糖 和 糖 化 血 红 蛋 白 水 平, 还 能 够 改 善 糖 脂 代 谢 延 迟 或 防 治 肾 视 网 膜 神 经 病 变 以 及 缺 血 性 心 肌 梗 死 的 发 生 和 发 展 [6, 7] 因 此, 选 择 以 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 为 基 础 的 治 疗 策 略, 不 仅 可 降 低 空 腹 及 餐 后 血 糖, 还 可 减 少 患 者 的 大 血 管 及 微 血 管 病 变 风 险, 降 低 糖 尿 病 并 发 症 的 发 病 率 和 死 亡 率 目 前, 国 内 糖 尿 病 药 物 市 场 中 应 用 的 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 主 要 是 进 口 药 物, 价 格 相 对 较 贵, 对 于 多 数 长 期 服 药 的 糖 尿 病 患 者, 经 济 压 力 较 大 因 此, 充 分 开 发 中 药 资 源 或 合 成 具 有 一 定 活 性 的 小 分 子 化 合 物, 寻 找 既 经 济 又 具 良 好 治 疗 效 果 的 国 产 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 类 药 物 势 在 必 行 本 实 验 室 通 过 优 化 体 外 酶 抑 制 剂 筛 选 体 系, 建 立 了 适 合 筛 选 大 量 样 品 对 蔗 糖 酶 麦 芽 糖 酶 及 α- 淀 粉 酶 抑 制 作 用 的 筛 选 模 型, 运 用 上 述 模 型 对 大 量 样 品 进 行 筛 选, 发 现 了 本 文 的 研 究 对 象 维 力 波 糖 具 有 较 强 的 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 作 用 [8] 从 化 学 结 构 上 分 析, 维 力 波 糖 [valibose, (+)- (1S, 2S, 3S, 4R, 5R)-1- 氨 基 -5- 羟 甲 基 -N-2-(1, 3- 二 羟 丙 基 )-2, 3, 4- 环 己 醇 ] 是 一 种 新 型 的 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 本 文 采 用 链 脲 霉 素 (STZ) 糖 尿 病 大 鼠, 评 价 维 力 波 糖 对 其 体 重 摄 食 量 饮 水 量 血 糖 血 脂 果 糖 胺 尿 糖 及 血 N- 乙 酰 -β-d 氨 基 葡 萄 糖 苷 酶 等 反 映 糖 尿 病 糖 脂 代 谢 和 微 血 管 病 变 的 敏 感 指 标 的 影 响, 考 察 维 力 波 糖 对 糖 尿 病 大 鼠 血 清 尿 素 氮 肌 酐 含 量 肾 脏 指 数 及 肾 脏 病 理 变 化 等 反 映 糖 尿 病 肾 脏 病 变 指 标 的 改 善 作 用 材 料 与 方 法 试 剂 和 仪 器 维 力 波 糖 (valibose), 纯 度 99.8%, 由 深 圳 太 太 药 业 有 限 公 司 提 供 阳 性 对 照 药 阿 卡 波 糖 (acarbose, 德 国 Bayer 公 司 ); 链 脲 霉 素 (Sigma 公 司 ); 甘 油 三 酯 总 胆 固 醇 肌 酐 和 尿 素 氮 测 定 试 剂 盒 ( 北 京 中 生 北 控 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 ); 游 离 脂 肪 酸 测 定 试 剂 盒 ( 日 本 第 一 化 学 药 品 株 式 会 社 ); 糖 化 血 清 蛋 白 试 剂 盒 ( 南 京 建 成 科 技 有 限 公 司 ) 其 他 试 剂 均 为 国 产 分 析 纯 μ-quant 酶 标 仪 ( 美 国 BIO-TEK 公 司 ); 3-18K 型 低 温 高 速 离 心 机 ( 德 国 Sigma 公 司 ); HZQ-C 空 气 浴 振 荡 器 ( 哈 尔 滨 东 明 医 疗 仪 器 厂 ) 实 验 动 物 及 分 组 正 常 雄 性 Sprague-Dawley (SD) 大 鼠, 体 重 180~200 g, 购 自 北 京 维 通 利 华 实 验 动 物 技 术 有 限 公 司, 许 可 证 编 号 SCXK ( 京 ) STZ 糖 尿 病 大 鼠 模 型 [9] : 大 鼠 禁 食 约 12 h, 腹 腔 注 射 STZ 溶 液 (58 mg kg 1 ), 72 h 后 预 测 血 糖, 选 取 血 糖 在 250~450 mg dl 1 的 大 鼠 用 于 实 验 依 照 血 糖 体 重 分 为 5 组, 分 别 为 模 型 对 照 组 (model) 阳 性 对 照 阿 卡 波 糖 组 维 力 波 糖 低 中 高 剂 量 组, 另 取 正 常 大 鼠 作 为 正 常 组 (normal), 每 组 10 只 正 常 组 动 物 饲 以 普 通 饲 料, 模 型 对 照 组 以 高 蔗 糖 饲 料 ( 蔗 糖 普 通 饲 料 = 1 1) 喂 养, 阳 性 对 照 药 组 饲 以 含 阿 卡 波 糖 (30 mg 100 g 1 料 ) 的 高 蔗 糖 饲 料, 其 余 3 组 分 别 饲 以 含 不 同 剂 量 维 力 波 糖 的 高 蔗 糖 饲 料 ( 及 2.5 mg 100 g 1 料 ) 实 验 设 计 实 验 期 间, 定 期 记 录 动 物 摄 食 量 和 饮 水 量, 于 第 6 天 第 18 天 取 血, 测 定 非 禁 食 和 禁 食 血 糖 水 平 ( 葡 萄 糖 氧 化 酶 法 ) 给 药 22 天 时, 测 定 血 中 糖 化 血 清 蛋 白 水 平 实 验 至 26 天 时, 取 血 测 血 脂 ( 血 甘 油 三 酯 血 胆 固 醇 和 血 游 离 脂 肪 酸 ) NAG 酶 活 性 血 清 尿 素 氮 及 肌 酐 含 量 等 给 药 31 天 时, 用 代 谢 笼 收 集 6 h 尿 液 并 测 定 尿 糖 含 量 给 药 34 天 时, 处 死 动 物, 称 取 并 记 录 动 物 体 重 肾 脏 重 量, 并 计 算 肾 脏 指 数 ; 以 10% 甲 醛 固 定 肾 脏, 石 蜡 包 埋, 常 规 切 片, HE 染 色, 光 镜 下 观 察 肾 脏 病 理 变 化

3 刘 泉 等 : α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 维 力 波 糖 改 善 糖 尿 病 大 鼠 糖 脂 代 谢 紊 乱 及 肾 脏 病 变 1229 检 验 结 果 统 计 学 分 析 数 据 以 x ± s 表 示, 组 间 比 较 采 用 t 1 维 力 波 糖 长 期 给 药 改 善 STZ 糖 尿 病 模 型 大 鼠 摄 食 量 饮 水 量 和 体 重 与 正 常 大 鼠 相 比, STZ 糖 尿 病 大 鼠 体 重 增 长 缓 慢, 摄 食 饮 水 量 增 多, 皮 毛 无 光 泽, 行 动 迟 缓, 反 应 较 迟 钝 维 力 波 糖 各 组 动 物 整 体 情 况 明 显 好 于 模 型 对 照 组, 摄 食 量 饮 水 量 随 给 药 时 间 的 延 长 显 著 减 少 (P < 0.001), 并 呈 较 好 的 剂 量 依 赖 关 系 其 中, 维 力 波 糖 在 2.5 mg 100 g 1 料 剂 量 下, 对 摄 食 和 饮 水 的 改 善 作 用 优 于 阳 性 对 照 药 阿 卡 波 糖 (30 mg 100 g 1 料 ) 组, 动 物 体 重 较 模 型 对 照 组 有 显 著 增 加 (P < 0.05), 作 用 与 阿 卡 波 糖 组 相 当 ( 表 1) Table 1 Effects of valibose on food intake, water intake and weight gain in STZ-induced hyperglycemic rats. n = 10, x ± s. * P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < vs model group Dose/ mg 100 g 1 diets Food intake /g d 1 Water intake /ml d 1 Weight gain/g Normal 23.7 ± 1.3 *** 42.7 ± 4.8 *** ± 27.2 *** Model 42.3 ± ± ± 3.8 Acarbose ± 3.8 *** 97.2 ± 18.6 *** 40.7 ± 2.4 ** Valibose ± 4.0 *** ± 20.9 *** 24.2 ± ± 3.6 *** ± 19.2 *** 23.0 ± ± 2.0 *** 77.6 ± 10.1 *** 34.7 ± 0.5 * 2 维 力 波 糖 对 STZ 糖 尿 病 模 型 大 鼠 血 糖 和 尿 糖 的 降 低 作 用 如 表 2 所 示, 给 药 第 6 和 18 天, 维 力 波 糖 能 降 低 STZ 糖 尿 病 大 鼠 非 禁 食 和 禁 食 血 糖, 并 呈 一 定 的 量 效 关 系 与 模 型 对 照 组 相 比, 维 力 波 糖 2.5 mg 100 g 1 料 剂 量 组 对 非 禁 食 血 糖 和 禁 食 血 糖 的 降 低 百 分 数 分 别 为 51.3% 35.6% 和 35.6% 30.4% (P < 或 P < 0.01), 稍 好 于 阿 卡 波 糖 (30 mg 100 g 1 料 ) 组 (28.6% 31.3% 和 28.8% 20.7%) 另 外, STZ 糖 尿 病 大 鼠 尿 糖 明 显 升 高, 维 力 波 糖 各 剂 量 组 大 鼠 在 给 药 31 天 后, 尿 糖 明 显 减 少 (P < 0.001), 且 呈 一 定 量 效 关 系 ( 图 1) Figure 1 Effects of valibose on urine sugar levels in STZinduced hyperglycemic rats treated for 31 days. n = 10, x ± s. *** P < vs model group 3 维 力 波 糖 对 STZ 糖 尿 病 模 型 大 鼠 糖 化 血 清 蛋 白 水 平 的 降 低 作 用 与 正 常 大 鼠 相 比, STZ 糖 尿 病 大 鼠 的 糖 化 血 清 蛋 白 水 平 显 著 升 高 (P < 0.001) 维 力 波 糖 各 剂 量 组 在 治 疗 22 天 后, 糖 化 血 清 蛋 白 水 平 较 模 型 对 照 组 分 别 降 低 了 8.4% 15.8% 和 17.4% (P < 0.01) 阳 性 对 照 组 的 糖 化 血 清 蛋 白 水 平 较 模 型 对 照 组 降 低 了 16.8% (P < 0.05) 见 表 3 4 维 力 波 糖 对 STZ 糖 尿 病 模 型 大 鼠 脂 质 代 谢 紊 乱 的 改 善 作 用 表 4 显 示, STZ 糖 尿 病 模 型 组 血 清 胆 固 醇 甘 油 三 酯 及 游 离 脂 肪 酸 水 平 均 显 著 高 于 正 常 对 照 组, 维 力 波 糖 各 剂 量 组 在 给 药 26 天 后, 均 能 显 著 降 低 STZ 糖 尿 病 大 鼠 血 清 甘 油 三 酯 水 平 (P < 0.05, P < 0.001), 且 具 有 一 定 剂 量 依 赖 关 系 维 力 波 糖 (1.0 和 2.5 mg 100 g 1 Table 2 Effects of valibose on fasting and non-fasting blood glucose in STZ-induced hyperglycemic rats. n = 10, x ± s. ** P < 0.01, *** P < vs model group * P < 0.05, Dose /mg 100 g 1 diets Blood glucose/mg dl 1 6 th day 18 th day Non-fasting Fasting Non-fasting Fasting Normal 92.7 ± 10.1 *** 99.8 ± 13.5 *** 85.1 ± 4.3 *** 91.8 ± 13.5 *** Model ± ± ± ± 65.1 Acarbose ± * ± 95.7 ** ± 92.7 *** ± 97.3 * Valibose ± ± ± 30.3 *** ± ± 68.6 * ± * ± 49.4 *** ± 35.0 * ± 70.9 *** ± 99.7 *** ± 38.7 *** ± 93.6 **

4 1230 药 学 学 报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (8): Table 3 Effect of valibose on glycosylated serum protein (GSP) levels in STZ-induced hyperglycemic rats treated for 22 days. n = 10, x ± s. * P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < vs model group Dose/mg 100 g 1 diets GSP/mmol L 1 Normal 2.07 ± 0.17 *** Model 3.22 ± 0.43 Acarbose ± 0.44 * Valibose ± ± 0.29 ** ± 0.25 ** 6 维 力 波 糖 对 STZ 糖 尿 病 模 型 大 鼠 肾 脏 指 数 和 肾 脏 病 理 形 态 的 影 响 与 正 常 大 鼠 相 比, STZ 糖 尿 病 大 鼠 肾 脏 指 数 明 显 增 加 ( 图 2), 提 示 糖 尿 病 动 物 的 肾 脏 受 损 维 力 波 糖 各 剂 量 组 及 阳 性 对 照 ( 阿 卡 波 糖 ) 组 均 能 降 低 肾 脏 指 数 (P < 0.001), 表 明 维 力 波 糖 与 阿 卡 波 糖 均 对 糖 尿 病 大 鼠 的 肾 脏 具 有 一 定 的 保 护 作 用 Table 4 Effect of valibose on blood dyslipidemia in STZinduced hyperglycemic rats treated for 26 days. n = 10, x ± s. * P < 0.05, *** P < vs model group Dose /mg 100 g 1 diets Triglyceride /mg dl 1 Cholesterol /mg dl 1 Free fatty acid /ueq L 1 Normal 44.1 ± 24.4 *** 21.9 ± 5.1 *** ± * Model 87.5 ± ± ± Acarbose ± ± ± Valibose ± 37.4 * 35.6 ± ± ± 35.3 * 29.3 ± 8.0 * ± ± 12.1 *** 29.4 ± ± 料 ) 能 够 降 低 STZ 大 鼠 血 清 胆 固 醇 水 平 (26.8% 和 26.5%) 维 力 波 糖 对 血 清 游 离 脂 肪 酸 未 见 降 低 作 用 5 维 力 波 糖 对 STZ 糖 尿 病 模 型 大 鼠 血 清 肾 功 能 相 关 指 标 的 改 善 血 清 NAG 酶 是 细 胞 溶 酶 体 内 的 酸 性 水 解 酶, 在 肾 单 位 近 曲 小 管 上 皮 细 胞 内 含 量 丰 富, 当 肾 小 管 损 伤 时, 血 清 NAG 增 多 结 果 ( 表 5) 表 明, STZ 糖 尿 病 大 鼠 血 清 NAG 酶 活 性 明 显 高 于 正 常 对 照 组, 维 力 波 糖 在 给 药 26 天 后, 能 使 STZ 糖 尿 病 大 鼠 血 清 NAG 酶 活 性 降 低 与 正 常 对 照 组 相 比, 模 型 对 照 组 的 血 清 肌 酐 显 著 升 高, 尿 素 氮 含 量 有 升 高 趋 势, 维 力 波 糖 各 剂 量 组 可 显 著 降 低 血 清 尿 素 氮, 对 肌 酐 水 平 有 降 低 趋 势 Figure 2 Effect of valibose on kidney index in STZ-induced hyperglycemic rats treated for 34 days. n = 10, x ± s. *** P < vs model group 肾 脏 组 织 病 理 (HE 染 色 ) 结 果 显 示, 正 常 大 鼠 肾 脏 皮 质 和 髓 质 分 界 清 楚, 皮 质 小 球 分 布 正 常 ( 图 3A) STZ 糖 尿 病 大 鼠 的 大 部 分 肾 小 球 囊 纤 维 样 渗 出, 近 端 小 管 直 部 上 皮 细 胞 浆 溶 解 或 空 泡 变 性, 全 部 动 物 肾 曲 管 上 皮 细 胞 浊 肿 ( 图 3B~E) 维 力 波 糖 2.5 mg 100 g 1 料 剂 量 组 ( 图 3F) 中, 肾 小 球 未 见 明 显 变 化, 上 皮 细 胞 空 泡 变 性 情 况 减 少 仅 少 数 动 物 (2/10) 近 端 小 管 直 部 出 现 灶 性 曲 管 上 皮 细 胞 浆 溶 解 或 空 泡 变 性, 部 分 动 物 肾 曲 小 管 扩 张 曲 管 上 皮 细 胞 浊 肿 结 果 表 明, 维 力 波 糖 (2.5 mg 100 g 1 料 ) 对 STZ 诱 发 的 糖 尿 病 大 鼠 肾 脏 病 变 有 一 定 的 保 护 作 用 Table 5 Effect of valibose on blood N-acetyl-beta-D-glucosaminidase (NAG), creatinine (Cre) and blood urea nitrogen (BUN) in STZ-induced hyperglycemic rats treated for 26 days. n = 10, x ± s. * P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < vs model group Dose /mg 100 g 1 diets NAG /U L 1 Cre /μmol L 1 BUN /mg dl 1 Normal 36.7 ± 5.8 *** 87.0 ± 10.0 * 25.0 ± 7.2 Model 73.1 ± ± ± 10.3 Acarbose ± ± ± 7.2 Valibose ± ± ± 5.9 ** ± 9.7 * 92.9 ± ± 7.5 * ± 5.4 *** 96.7 ± ± 6.6 * 讨 论 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 [10] ( 包 括 阿 卡 波 糖 米 格 列 醇 和 伏 格 列 波 糖 ) 目 前 已 被 作 为 单 纯 饮 食 控 制 不 佳 2 型 糖 尿 病 患 者 的 首 选 降 糖 药 物 及 1 型 糖 尿 病 患 者 在 使 用 胰 岛 素 治 疗 时 的 首 选 辅 助 药 物 近 年 大 量 临 床 调 查 研 究 表 明, α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 能 够 延 缓 糖 耐 量 异 常 患 者 向 2 型 糖 尿 病 转 化 的 进 程, 并 且 在 调 节 糖 脂 代 谢 提 高 胰 岛 素 敏 感 性 保 护 胰 岛 细 胞 功 能 及 改 善 糖 尿 病 血 管 并 发 症 等 方 面 具 有 更 广 阔 的 应 用 前 景 [11] 在 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 类 型 药 物 中 以 销 售 额 计

5 刘 泉等: α-葡萄糖苷酶抑制剂维力波糖改善糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱及肾脏病变 Figure 3 Histological changes detected by hematoxylin-eosin (HE) staining in kidney of STZ-induced hyperglycemic rats. group; B E: Model group; F: Valibose 2.5 mg 100g 1 diets group 1231 A: Normal 算, 进口药品阿卡波糖 (拜唐苹) 一直占据我国口服 并测定尿糖含量 结果表明, 维力波糖各剂量组可较 降糖药中最大的市场份额 目前, 国产的 经济且具 好地降低高血糖大鼠的尿糖含量 有良好治疗效果的 α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物研发 近年, 众多研究表明餐后高血糖是引发糖尿病 和上市还较少 维力波糖是一种全化学合成的小分子 大血管和微血管损伤, 导致糖尿病血管并发症的重 化合物 体外研究结果表明, 维力波糖对 α-蔗糖酶 要因素 有效控制餐后血糖水平的升高及血糖波动, α-麦芽糖酶有明显的抑制作用, 并且对 α-蔗糖酶抑 长期控制血糖维持在稳定水平, 能够降低糖尿病肾 制作用强于阿卡波糖; 但是, 维力波糖对 α-淀粉酶无 病 糖尿病神经病变及大血管并发症的发生率 [13] 抑制作用, 提示维力波糖发生肠胀气的副作用可能 糖化血清蛋白可反映 2 3 周的平均血糖水平, 是反 会小于阿卡波糖 本研究主要是考察维力波糖对糖尿 映药物短期血糖控制情况的一个良好指标 长期给予 病大鼠血糖 血脂及长期高血糖可能引起的糖尿病相 维力波糖能够显著改善糖尿病大鼠的糖代谢紊乱, 关并发症的改善作用, 评价维力波糖作为一种国产 其有效控制高糖大鼠的空腹血糖和餐后血糖, 给药 3 的 新型的 α-葡萄糖苷酶抑制剂新药的可能性及其 周后维力波糖对其糖化血清蛋白水平也有较好的控 作用特点 制作用 上述结果提示, 维力波糖对长期血糖可较好 SD 大鼠腹腔注射 STZ 后, 并长期给予高蔗糖饲 料, 形成血糖稳定的 1 型糖尿病实验模型 [12] 给予维 地调节糖尿病大鼠的糖代谢紊乱状态, 可能一定程 度延缓糖尿病血管并发症的发生发展 力波糖后, 在给药接近 1 周和 3 周时, 测定其对高血 临床研究显示, 拜唐苹不仅可以有效地控制患 糖大鼠空腹及非禁食血糖的影响 该时间点的选择主 者血糖水平, 还可以改善血脂异常 一般认为, 其降 要取决于 α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物的作用特点, 脂作用是通过改善血糖控制 提高胰岛素敏感性而达 该类药物主要通过延缓肠道碳水化合物的吸收而控 到的, 也有研究认为可能其降脂作用不依赖其降糖 制餐后高血糖, 进而缓解空腹血糖的升高 前期研究 途径, 另有其他作用环节 本研究中, 维力波糖也能 经验证实, 一般在给药 1 周左右即可显示较好的降糖 显著降低 STZ 大鼠血清高甘油三酯和高胆固醇水平, 效果 本研究中在给药第 6 天时, 观察到维力波糖 在调节高糖大鼠脂质代谢紊乱方面作用优于阿卡波 1 (1.0 和 2.5 mg 100 g 料) 能够显著降低其空腹以及 糖 作者判断, 维力波糖通过降低血糖 血脂 尿糖, 非禁食血糖 其中, 非禁食血糖一定程度体现了餐后 降低糖化血清蛋白水平等作用, 改善并延缓 STZ 诱 血糖状态 导的糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱, 但其确切作用机制 高血糖大鼠还伴有多食 多饮和多尿的特征, 在 给药前 2 周, 各组动物的多尿症状比较接近; 在给药 近 4 周左右, 观察到维力波糖 2.5 mg 100 g 1 还有待进一步探讨 糖尿病肾病 (DN) 是由于长期高血糖状态下, 料组 血管通透性增加, 血中氮质潴留 血尿素氮和肌酐开 的动物垫料湿度减低, 其尿量一定程度减少, 提示药 始升高 本研究显示: 在 STZ 诱导的糖尿病大鼠模 物可能对其尿糖也产生一定影响 因此, 在给药第 31 型中, 血清 NAG 酶活性和尿素氮水平显著增加, 肾 天时, 各组动物采用代谢笼各自收集其 6 h 的尿液, 脏指数明显升高, 这些变化在给予维力波糖后均得

6 1232 药 学 学 报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (8): 到 一 定 程 度 的 改 善 ; 在 肾 脏 组 织 形 态 学 观 察 中, 维 力 波 糖 给 药 组 的 肾 脏 与 模 型 对 照 组 相 比, 肾 小 球 近 曲 小 管 中 细 胞 浆 溶 解 或 空 泡 变 性 减 少, 肾 小 球 基 底 膜 增 生 减 轻, 该 作 用 与 已 报 道 阿 卡 波 糖 对 糖 尿 病 肾 病 的 缓 解 作 用 相 似 [14] 另 外, 血 浆 ET 和 Ang II 等 也 是 反 映 肾 脏 血 管 病 变 程 度 的 生 化 指 标 [15] 有 研 究 认 为 高 糖 引 起 的 氧 化 应 激 在 糖 尿 病 肾 病 的 发 生 发 展 中 十 分 重 要, 因 此, 肾 脏 中 的 SOD 和 MDA 含 量 也 可 以 一 定 程 度 反 映 肾 脏 的 损 伤 程 度 [16] 但 在 本 研 究 中, 并 未 对 这 些 指 标 进 行 逐 一 测 定, 在 后 续 研 究 中, 将 选 择 合 适 动 物 模 型, 在 重 点 考 察 维 力 波 糖 对 糖 尿 病 肾 病 的 改 善 作 用 时, 进 行 相 关 指 标 的 详 细 测 定 和 评 估 综 上 所 述, 维 力 波 糖 是 由 国 内 学 者 全 新 合 成 的 一 个 小 分 子 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂, 具 有 较 好 的 双 糖 酶 抑 制 活 性 ; 能 有 效 控 制 糖 尿 病 动 物 模 型 的 空 腹 及 餐 后 血 糖, 一 定 程 度 延 缓 并 改 善 长 期 高 糖 毒 性 导 致 糖 尿 病 肾 脏 病 变 因 此, 维 力 波 糖 可 能 成 为 一 种 新 的 降 糖 药 物, 用 于 糖 尿 病 的 治 疗 及 其 并 发 症 的 缓 解 和 改 善 References [1] Tanaka M. Relationship between fasting and 2-hour postprandial plasma glucose levels and vascular complications in patients with type 2 diabetes mellitus [J]. J Int Med Res, 2012, 40: [2] Perkins BA, Rabbani N, Weston A, et al. Serum levels of advanced glycation endproducts and other markers of protein damage in early diabetic nephropathy in type 1 diabetes [J]. PLoS One, 2012, 7: e [3] Ataoglu HE, Saler T, Uzunhasan I, et al. Additional value of carotid artery intima-media thickness in cardiovascular risk assessment by Framingham risk-score in type 2 diabetes: a retrospective cohort study [J]. J Diabetes, 2009, 1: [4] Hanefeld M, Schaper F. Acarbose: oral anti-diabetes drug with additional cardiovascular benefits [J]. Expert Rev Cardiovasc Ther, 2008, 6: [5] Emoto T, Sawada T, Hashimoto M, et al. Effect of 3-month repeated administration of miglitol on vascular endothelial function in patients with diabetes mellitus and coronary artery disease [J]. Am J Cardiol, 2012, 109: [6] Yamagishi S, Matsui T, Ueda S, et al. Clinical utility of acarbose, an alpha-glucosidase inhibitor in cardiometabolic disorders [J]. Curr Drug Metab, 2009, 10: [7] Uzu T, Yokoyama H, Itoh H, et al. Elevated serum levels of interleukin-18 in patients with overt diabetic nephropathy: effects of miglitol [J]. Clin Exp Nephrol, 2011, 15: [8] Liu Q. The Anti-diabetic Effects and its Mechanism of TD-01, a Novel α-glucosidase Inhibitor (α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 TD-01 的 抗 糖 尿 病 作 用 及 其 机 制 研 究 ) [D]. Beijing: Peking Union Medical College, [9] Somania R, Singhai AK, Shivgunde P, et al. Asparagus racemosus Willd (Liliaceae) ameliorates early diabetic nephropathy in STZ induced diabetic rats [J]. Indian J Exp Biol, 2012, 50: [10] Rosak C, Mertes G. Effects of acarbose on proinsulin and insulin secretion and their potential significance for the intermediary metabolism and cardiovascular system [J]. Curr Diabetes Rev, 2009, 5: [11] Standl E, Schnell O. Alpha-glucosidase inhibitors 2012 cardiovascular considerations and trial evaluation [J]. Diab Vasc Dis Res, 2012, 9: [12] Abdukerem K, Wei YY, Li X, et al. Effects of two different extracts of total saponins from Cicer arietinum on kidney of T2DM rats [J]. Acta Pharm Sin ( 药 学 学 报 ), 2012, 47: [13] Johnson EL. Glycemic variability in type 2 diabetes mellitus: oxidative stress and macrovascular complications [J]. Adv Exp Med Biol, 2012, 771: [14] Macedo CS, Lerco MM, Capelletti SM, et al. Reduction of podocytes number in late diabetic alloxan nephropathy: prevention by glycemic control [J]. Acta Cir Bras, 2007, 22: [15] Koka V, Wang W, Huang XR, et al. Advanced glycation end products activate a chymase-dependent angiotensin II-generating pathway in diabetic complication [J]. Circulation, 2006, 113: [16] Chen HY, Wang JH, Geng M, et al. Protective effect of extract of Apocynum venetum on kidneys of streptozotocininduced diabetic rats [J]. Acta Pharm Sin ( 药 学 学 报 ), 2010, 45:

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