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1 载 脂 蛋 白 基 因 多 态 性 对 血 脂 康 胶 囊 抑 制 炎 症 作 用 的 影 响 蒋 卫 民 方 祝 元 朱 长 乐 唐 蜀 华 摘 要 目 的 探 讨 载 脂 蛋 白 - (--. ( /- 基 因 多 态 性 对 血 脂 康 胶 囊 抑 制 炎 症 作 用 的 影 响 方 法 采 用 基 因 测 序 法 检 测 例 高 脂 血 症 患 者 和 名 健 康 体 检 者 /- 基 因 多 态 性 和 血 清 肿 瘤 坏 死 因 子., 0(0 1,. - " 白 介 素 & (. ( & & 高 敏 反 应 蛋 白 ( 0 0(.( (.,.( -. ( 023 等 炎 症 因 子 表 达 并 检 测 血 脂 康 胶 囊 干 预 & 周 后 高 脂 血 症 患 者 " & 023 等 炎 症 因 子 的 变 化 分 析 /- 基 因 多 态 性 与 各 炎 症 因 子 变 化 值 之 间 的 关 系 结 果 健 康 体 检 者 4 基 因 型 &5 &4 显 著 高 于 高 脂 血 症 组 & 5 & 4 4 基 因 型 &5 &4 显 著 低 于 高 脂 血 症 组 & % 高 脂 血 症 组 治 疗 前 " & 023 水 平 明 显 高 于 健 康 体 检 组 3 6 % 型 " 高 于 4 型 3 6 % & 高 于 型 3 6 % 023 高 于 型 和 4 型 3 6 % 而 型 和 4 型 " & 023 三 者 比 较 差 异 均 无 统 计 学 意 义 血 脂 康 干 预 & 周 后 高 脂 血 症 组 " & 023 等 水 平 较 治 疗 前 均 显 著 降 低 3 6 % 但 " & 水 平 仍 显 著 高 于 健 康 体 检 组 3 6 % 但 型 4 型 和 型 组 " & 023 治 疗 前 后 差 值 比 较 差 异 均 无 统 计 学 意 义 3 8 % 结 论 /- 基 因 型 在 高 脂 血 症 患 者 和 健 康 人 群 间 分 布 存 在 差 异 高 脂 血 症 者 存 在 慢 性 炎 症 反 应 含 等 位 基 因 者 更 为 明 显 血 脂 康 具 有 抗 炎 作 用 但 /- 基 因 多 态 性 不 影 响 其 抗 炎 疗 效 关 键 词 高 脂 血 症 载 脂 蛋 白 基 因 多 态 性 血 脂 康 胶 囊 炎 症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基 金 项 目 江 苏 省 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目 "#$%& 作 者 单 位 江 苏 省 中 医 院 心 内 科 南 京 ' 江 苏 省 中 医 院 病 理 科 南 京 ' 通 讯 作 者 方 祝 元 % && 转 '' ( )* +&!,

2 中 国 中 西 医 结 合 杂 志 年 月 第 卷 第 期! " %!#.. * 0 0..(0.(, (11, ( " & 032 =.* ! /1. &* (..( 1 : ; ( " & 023 * * ( % = " & * 0.( ( , %! #.. * 0 0..(0.(, (11, (.,. 1 " & %!, 0( 0 (0. (=.( 1 /- - - (0 (0 (11. =.*. - (-( ( -.( ! (, ( 1.,.( 0 >(0. ( - (-( ( -.(.0 0-,( (. 0 *(.! : ; ( -0 0 *.(( 1. 11,.0 =. /- - - (0 (. 11,. (.0 11,.0! - (-( ( - (--. ( - - (0 : ; ( -0 ( 1.( 血 脂 康 是 临 床 广 泛 运 用 的 调 脂 中 药 其 中 除 含 有 少 量 洛 伐 他 汀 外 还 含 有 同 系 列 的 其 他 他 汀 天 然 复 合 他 汀 脂 肪 酸 氨 基 酸 及 微 量 元 素 等 现 有 研 究 表 明 血 脂 康 不 仅 具 有 明 确 的 调 脂 作 用 还 可 能 存 在 调 脂 外 效 应 其 中 抗 炎 作 用 已 被 多 项 临 床 及 基 础 研 究 所 证 实 载 脂 蛋 白 - (--. ( /- 作 为 脂 蛋 白 的 配 体 和 结 构 与 功 能 蛋 白 对 血 脂 代 谢 起 着 重 要 作 用 同 时 在 小 鼠 和 人 /- 启 动 子 序 列 内 还 探 测 到 炎 症 反 应 转 录 因 子 &2 #3 / 以 及 / 的 位 点 提 示 其 可 能 还 参 与 炎 症 反 应 为 探 讨 /- 基 因 多 态 性 对 血 脂 康 抑 制 炎 症 反 应 是 否 存 在 影 响 我 们 对 血 脂 康 治 疗 例 高 脂 血 症 患 者 的 抗 炎 作 用 及 不 同 /- 基 因 型 对 其 疗 效 的 影 响 进 行 了 研 究 现 将 结 果 报 告 如 下 资 料 与 方 法 临 床 资 料 诊 断 标 准 高 脂 血 症 诊 断 参 照 中 国 成 人 血 脂 异 常 防 治 指 南 制 订 联 合 委 员 会 年 中 国 成 人 血 脂 异 常 防 治 指 南 中 的 标 准 正 常 饮 食 情 况 下 周 内 次 血 标 本 血 清 检 查 总 胆 固 醇 % 4 或 甘 油 三 酯 9 4 或 高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 4 纳 入 及 排 除 标 准 纳 入 标 准 符 合 高 脂 血 症 诊 断 标 准 年 龄 岁 自 愿 参 加 并 签 署 知 情 同 意 书 排 除 标 准 继 发 性 高 脂 血 症 急 慢 性 感 染 免 疫 系 统 疾 病 严 重 肝 肾 功 能 损 害 等 一 般 资 料 例 高 脂 血 症 患 者 选 自 江 苏 省 中 医 院 心 内 科 年 月 年 & 月 门 诊 及 住 院 患 者 其 中 男 性 % 例 年 龄 岁 平 均 & 岁 女 性 例 年 龄 岁 平 均 % ' 岁 同 时 按 检 测 序 号 选 年 龄 性 别 相 匹 配 的 江 苏 地 区 无 血 缘 关 系 无 高 血 压 心 脏 病 脑 血 管 病 免 疫 系 统 疾 病 及 急 慢 性 感 染 等 健 康 汉 族 人 群 名 均 来 自 江 苏 省 中 医 院 体 检 中 心 其 中 男 性 % 名 女 性 名 平 均 年 龄 % % 岁 治 疗 方 法 例 高 脂 血 症 患 者 均 给 予 口 服 血 脂 康 胶 囊 北 大 维 信 生 物 科 技 有 限 公 司 提 供 批 号 && 4 粒 粒 4 次 次 4 日 共 服 用 & 周 全 部 入 选 病 例 均 未 服 用 抗 生 素 消 炎 镇 痛 药 及 其 他 可 影 响 血 脂 的 药 物 名 健 康 体 检 者 不 予 用 药 观 察 指 标 及 检 测 方 法 /- 基 因 检 测 采 用 全 序 列 基 因 测 序 法 检 测 /- 基 因 多 态 性 测 序 结 果 用 "/ 0?,( 0(0 % 软 件 自 动 分 析 原 始 测 序 数 据 获 得 测 序 电 泳 图 和 序 列 样 品 序 列 用 "/ 0. 0? 及 /# 0?0, - 软 件 与 标 准 序 列 进 行 比 对 具 体 方 法 参 照 我 们 既 往 报 道 的 方 法 % 炎 症 因 子 检 测 所 有 观 察 对 象 治 疗 前 后 分 别 于 空 腹 后 采 静 脉 血 测 定 " & 023 " & 测 定 采 用 双 抗 体 夹 心 法 ; ( 0 =. /00 0 / 试 剂 盒 来 源 于 上 海 森 雄 科 技 实 业 公 司 023 测 定 采 用 免 疫 散 射 比 浊 法 使 用 美 国 #, 公 司 的 /9 型 特 定 蛋 白 分 析 仪 测 定 血 清 含 量 统 计 学 方 法 采 用 3 统 计 软 件 进 行 处 理 /- 基 因 频 率 采 用 频 率 计 数 法 两 组 间 /- 基 因 型 及 等 位 基 因 频 率 的 比 较 采 用 检 验 多 组 间 干 预 前 后 血 脂 炎 症 因 子 等 相 关 指 标 比 较 采 用 方 差 分 析 计 量 资 料 以 > 0 表 示 3 6 % 为 差 异 有 统 计 学 意 义 结 果 高 脂 血 症 患 者 和 健 康 体 检 者 /- 表 型 及 等

3 位 基 因 分 布 比 较 例 高 脂 血 症 患 者 检 出 种 纯 合 子 分 别 为 例 5 & 例 & 5 和 例 '5 检 出 种 杂 合 子 分 别 为 ' 例 5 例 5 和 例 &5 健 康 体 检 者 只 检 出 & 例 &5 4 种 纯 合 子 和 例 5 4 例 5 4 & 例 &5 4 种 杂 合 子 根 据 ( = 平 衡 法 则 对 各 种 基 因 型 的 分 布 情 况 进 行 吻 合 度 检 验 分 布 符 合 法 则 说 明 各 组 实 验 数 据 分 布 具 有 群 体 代 表 性 健 康 体 检 者 4 型 &5 &4 显 著 高 于 高 脂 血 症 组 & 5 & 4 4 型 &5 &4 显 著 低 于 高 脂 血 症 组 & % 两 组 /- 基 因 表 型 分 布 与 国 内 汉 族 人 群 多 数 研 究 结 果 一 致 & 血 脂 康 干 预 前 后 炎 症 因 子 的 变 化 比 较 表 高 脂 血 症 组 治 疗 前 " & 023 等 炎 症 因 子 水 平 均 明 显 高 于 健 康 体 检 组 3 6 % 提 示 高 脂 血 症 患 者 也 存 在 亚 临 床 炎 症 血 脂 康 干 预 & 周 后 " & 023 等 水 平 较 治 疗 前 均 显 著 降 低 3 6 % 但 " & 仍 显 著 高 于 健 康 对 照 组 3 6 % 提 示 血 脂 康 具 有 明 确 的 抗 炎 作 用 与 文 献 报 道 结 果 一 致 表 血 脂 康 干 预 前 后 炎 症 因 子 变 化 比 较 > 0 组 别 例 数 时 间 " - 4 & 健 康 对 照 & & ' ' & 高 脂 血 症 治 疗 前 '& '& & ' 治 疗 后 & & ' % 注 与 健 康 对 照 组 比 较 3 6 % 与 本 组 治 疗 前 比 较 3 6 % 高 脂 血 症 患 者 不 同 /- 基 因 型 血 脂 康 治 疗 前 后 炎 症 因 子 变 化 比 较 表 因 某 些 /- 基 因 表 型 组 样 本 含 量 很 小 故 未 对 各 基 因 型 血 脂 康 抗 炎 作 用 进 行 单 独 分 析 参 照 国 外 文 献 常 将 意 义 相 近 的 基 因 型 合 并 分 析 的 情 况 我 们 也 将 4 型 和 4 型 合 并 4 型 和 4 型 合 并 再 与 4 型 进 行 组 比 较 除 外 未 纳 入 统 计 的 例 4 型 外 共 例 进 行 分 析 结 果 表 明 治 疗 前 型 " 显 著 高 于 4 型 3 6 % & 显 著 高 于 型 3 6 % 023 显 著 高 于 型 和 4 型 而 型 和 4 型 " & 023 三 者 比 较 差 异 均 无 统 计 学 意 义 提 示 含 等 位 基 因 者 型 存 在 更 为 明 显 的 炎 症 反 应 经 血 脂 康 干 预 后 虽 4 型 " 0 23 和 型 023 较 治 疗 前 显 著 降 低 3 6 % 但 组 " & 023 治 疗 前 后 差 值 值 比 较 差 异 均 无 统 计 学 意 义 3 8 % 表 高 脂 血 症 组 不 同 /- 基 因 表 型 血 脂 康 治 疗 前 后 炎 症 因 子 变 化 比 较 > 0 基 因 表 型 例 数 时 间 " - 4 & 治 疗 前 ' %% & 治 疗 后 % ' & 差 值 ' 治 疗 前 ' & ' & & 4 & 治 疗 后 % % ' 差 值 & ' & ' 治 疗 前 &' ' & 治 疗 后 ' ' &' 差 值 注 与 本 基 因 表 型 治 疗 前 比 较 3 6 % 与 基 因 表 型 同 期 比 较 3 6 % 与 4 基 因 表 型 同 期 比 较 3 6 % 差 值 A 治 疗 前 治 疗 后 讨 论 /- 作 为 脂 蛋 白 的 配 体 和 结 构 与 功 能 蛋 白 对 血 脂 代 谢 起 着 重 要 作 用 由 于 /- 结 构 基 因 上 位 半 胱 氨 酸 9 0 和 % 位 精 氨 酸 9 / 的 突 变 人 群 /- 具 有 显 著 的 遗 传 多 态 性 由 位 于 第 ' 号 染 色 体 长 臂 上 有 单 一 结 构 基 因 所 编 码 有 种 复 等 位 共 显 性 基 因 构 成 常 见 的 & 种 表 型 纯 合 子 和 杂 合 子 ' 各 /- 表 型 与 脂 蛋 白 受 体 的 结 合 能 力 存 在 差 异 因 此 /- 表 型 不 同 其 调 节 体 内 血 浆 脂 蛋 白 代 谢 的 作 用 也 不 同 近 年 来 的 研 究 更 进 一 步 显 示 /- 基 因 型 也 影 响 着 机 体 炎 症 反 应 由 于 /- 可 能 用 相 同 的 细 胞 表 面 受 体 作 为 细 胞 结 合 的 触 点 因 此 推 测 其 参 与 了 细 胞 炎 症 反 应 的 调 节 有 研 究 表 明 由 核 转 录 因 子 " # 介 导 的 炎 性 反 应 在 不 同 /- 基 因 型 星 形 胶 质 细 胞 间 存 在 明 显 差 异 携 带 等 位 基 因 的 胶 质 细 胞 损 伤 后 表 达 的 " # 明 显 强 于 携 带 者 推 测 磷 脂 类 是 许 多 第 二 信 使 前 体 其 作 用 涉 及 多 条 信 号 通 路 的 激 活 如 3 /3$ 等 /- 可 能 在 更 上 游 参 与 调 节 3 /3$ 炎 性 通 路 进 而 介 导 了 " # 表 达 的 差 异 /- 参 与 炎 症 反 应 的 证 据 还 体 现 在 颈 动 脉 粥 样 硬 化 和 肝 脏 # 感 染 的 研 究 中 在 颈 动 脉 粥 样 硬 化 研 究 中 发 现 不 同 的 /- 等 位 基 因 组 间 023 和 纤 维 蛋 白 原 # 存 在 显 著 性 差 异 3 6 % 含 等 位 基 因 者 023 # 及 & 的 值 最 大 同 时 颈 动 脉 中 膜 厚 度 值 也 最 大

4 中 国 中 西 医 结 合 杂 志 年 月 第 卷 第 期! " 提 示 含 等 位 基 因 者 体 内 存 在 慢 性 炎 症 状 态 这 些 炎 症 因 子 有 可 能 与 传 统 的 心 血 管 危 险 因 素 如 等 一 起 参 与 了 颈 动 脉 硬 化 的 发 生 和 发 展 在 肝 脏 # 感 染 者 中 进 行 的 研 究 显 示 /- 组 的 水 平 高 于 /- /- 组 % (0. & 等 认 为 /- 可 通 过 抑 制 依 赖 的 外 周 单 核 细 胞 和 淋 巴 细 胞 的 增 殖 分 化 来 调 节 免 疫 减 轻 炎 症 反 应 在 高 脂 血 症 患 者 中 进 行 的 本 研 究 结 果 也 显 示 含 等 位 基 因 者 较 含 等 位 基 因 者 存 在 更 为 明 显 的 慢 性 炎 症 反 应 炎 性 细 胞 及 炎 性 因 子 引 起 的 免 疫 异 常 不 仅 直 接 参 与 冠 状 动 脉 粥 样 硬 化 的 形 成 还 可 能 促 使 粥 样 斑 块 破 裂 炎 性 反 应 被 认 为 是 除 传 统 的 高 血 压 高 脂 血 症 糖 尿 病 吸 烟 等 危 险 因 素 外 最 重 要 的 心 血 管 机 制 之 一 在 高 脂 血 症 患 者 中 也 明 显 存 在 炎 性 反 应 在 急 性 应 激 或 慢 性 炎 症 环 境 下 炎 症 因 子 可 活 化 内 皮 细 胞 导 致 内 皮 酯 酶 释 放 增 加 水 解 造 成 其 水 平 下 降 抗 动 脉 粥 样 硬 化 的 作 用 减 弱 甚 至 转 而 发 生 致 动 脉 粥 样 硬 化 作 用 ' 本 研 究 表 明 高 脂 血 症 患 者 " & 023 等 炎 症 因 子 水 平 均 明 显 高 于 健 康 对 照 组 3 6 % 提 示 存 在 亚 临 床 炎 症 与 文 献 报 道 一 致 药 物 效 应 和 毒 性 的 差 异 源 于 药 物 代 谢 酶 转 运 蛋 白 药 物 受 体 和 其 他 药 物 作 用 靶 点 的 多 态 性 遗 传 药 理 学 -,.(,0 多 态 性 是 由 同 一 健 康 人 群 中 的 同 一 基 因 位 点 具 有 多 个 等 位 基 因 引 起 及 进 而 出 现 所 编 码 蛋 白 活 性 改 变 并 由 此 导 致 药 物 和 机 体 的 相 互 反 应 出 现 多 种 表 型 近 年 来 由 于 分 子 生 物 学 的 发 展 遗 传 药 理 学 取 得 了 巨 大 的 进 步 不 但 已 纯 化 了 主 要 的 药 物 代 谢 酶 细 胞 色 素 3 %,., 3 %@3 超 家 族 中 的 系 列 酶 并 且 发 现 了 大 量 的 特 异 性 底 物 更 重 要 的 是 从 基 因 水 平 上 初 步 阐 明 了 核 苷 酸 的 突 变 及 相 应 蛋 白 质 及 活 性 的 变 异 对 药 物 作 用 的 影 响 他 汀 类 调 脂 药 在 遗 传 药 理 学 方 面 的 研 究 是 近 年 来 的 热 点 但 多 限 于 对 调 脂 作 用 的 观 察 我 们 之 前 的 报 道 已 探 讨 了 中 药 调 脂 药 血 脂 康 的 调 脂 作 用 及 /- 基 因 多 态 性 对 其 的 影 响 本 研 究 则 观 察 了 /- 基 因 多 态 性 对 血 脂 康 抗 炎 作 用 的 影 响 结 果 表 明 血 脂 康 对 高 脂 血 症 患 者 具 有 明 确 的 抗 炎 作 用 但 不 同 /- 基 因 型 间 抗 炎 疗 效 差 异 无 统 计 学 意 义 提 示 与 影 响 血 脂 康 的 调 脂 作 用 不 同 /- 基 因 多 态 性 不 影 响 血 脂 康 的 抑 制 炎 症 作 用 但 其 机 制 尚 不 明 确 本 研 究 因 采 用 基 因 测 序 法 检 测 人 群 /- 基 因 多 态 性 成 本 较 高 大 样 本 研 究 尚 有 一 定 困 难 未 能 对 每 一 基 因 型 进 行 血 脂 康 抗 炎 作 用 疗 效 分 析 可 能 丢 失 了 某 些 信 息 因 此 本 研 究 的 结 论 也 存 在 一 定 局 限 性 有 待 进 一 步 证 实 参 考 文 献 ( $ 2.! # 1(,( ( -,. 1 : ; (, ( 0,.0. (. ( -. 0( -.(.0 *(. - ( 0, ( ( 1,.( 1 (, 3.(. 3! ( 3, ' ' ' '%&! 彭 艳 覃 数 刘 剑! 血 脂 康 对 心 力 衰 竭 患 者 炎 症 因 子 和 血 管 内 皮 功 能 的 影 响! 第 三 军 医 大 学 学 报 ' && &! ( ( $ =.( $ #.. /! /- (--. ( (.0 (.,.( *(.. (. ( (0 1,. 0,.(, -( ( (, 0. ( 0 1 / ; ( 0 (0 0! " =( / ( %% &% &&! 中 国 成 人 血 脂 异 常 防 治 指 南 制 定 联 合 委 员 会! 中 国 成 人 血 脂 异 常 防 治 指 南! 中 华 心 血 管 病 杂 志 % % '! % 蒋 卫 民 唐 蜀 华 赖 仁 胜 等! 载 脂 蛋 白 基 因 多 态 性 与 原 发 性 高 脂 血 症 中 医 辨 证 的 相 关 性 研 究! 中 国 中 西 医 结 合 杂 志 & &! & 钱 净 胡 大 春 赵 晓 丽 等! 昆 明 地 区 汉 族 人 群 载 脂 蛋 白 基 因 多 态 性 频 率 分 布 及 与 高 脂 血 症 患 者 关 系 的 研 究! 实 验 与 检 验 医 学! 田 英 龙 石 银 徐 燕 华 等! 型 高 脂 血 症 患 者 高 密 度 脂 蛋 白 亚 类 组 成 与 载 脂 蛋 白 基 因 多 态 性 关 系 的 研 究! 中 华 医 学 遗 传 学 杂 志 % '& '! ( ( ( # / #.! /00,(.( 1 - (--. ( - - (0 *(. (0, (, 0. ( ( 00 (0 0 (.0.(. 0 (-( 0!. = 0, (0 & & &&! ' (. 0 3 # *(.! 11, (0. (-( (.,.( 1 - (--. (! #( '! " #,?.! ( -., (--. (,,..( ( (.(. (.0, - - (0 (. ( ( ( (.( ( (-( /- -! 9. %! $(0.( $(0.(!.,.( 0 =.* / ; ( 0 (0 0, = (0, ( 1, 0 ( 1.(! # ( 2 0 # ( % %!

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