M-NSG 小鼠 品系名称 :NOD-Prkdc scid Il2rg em1 /Smoc 目录号 :NM-NSG-1 基因型 :Male: Prkdc (-/-), IL2rg (-/Y) ; Female:Prkdc (-/-), IL2rg (-/-) 品系描述 M-NSG 重度免疫缺陷小鼠是

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1 M-NSG 重度免疫缺陷小鼠模型

2 M-NSG 小鼠 品系名称 :NOD-Prkdc scid Il2rg em1 /Smoc 目录号 :NM-NSG-1 基因型 :Male: Prkdc (-/-), IL2rg (-/Y) ; Female:Prkdc (-/-), IL2rg (-/-) 品系描述 M-NSG 重度免疫缺陷小鼠是南模生物自主研发的 NOD-Prkdc scid Il2rg null 小鼠, 缺失成熟 T 细胞 B 细胞和 NK 细胞, 可高效地植入人 CD34 + 造血干细胞 (HSC) 外周血单核细胞 (PBMC) 病人来源异种移植物 (PDX) 或成体干细胞及组织, 可以实现人类免疫系统的重建, 是研究人体免疫功能 传染病 糖尿病 肿瘤学和干细胞生物学的重要免疫缺陷小鼠, 是目前国际公认的免疫缺陷程度较高 较适合人源细胞或组织移植的工具小鼠 NOD 遗传背景 : 非肥胖性糖尿病 (non-obese diabetes) 小鼠模型, 其巨噬细胞对人源细胞吞噬作用弱, 先天免疫系统 ( 补体系统和树突状细胞 ) 功能降低 Prkdc scid 突变 :Prkdc (protein kinase, DNA-activated, catalytic polypeptide) 基因主要编码 DNA 依赖性蛋白激酶 (DNA-PK) 的催化亚基, 是参与双链 DNA 断裂修复 免疫球蛋白和 T 细胞受体可变 (V) 多样性 (D) 连接 (J) 区段重组的重要基因 Prkdc scid 突变代表严重的联合免疫缺陷, 表现为缺失 T B 细胞,NK 细胞活性低, 无法介导细胞和体液免疫, 没有溶血补体活性, 骨髓发育缺陷, 其血清免疫球蛋白 (Ig) 泄漏率非常低, 极为适合同种或异种肿瘤移植 IL2rg null 突变 :Interleukin-2 受体 gamma 链 (IL-2Rγc, 又称 CD132) 是具有重要免疫功能细胞因子 Il2 Il-4 Il-7 Il-9 Il-15 和 Il-21 的共同受体亚基, 该基因敲除后的小鼠机体免疫功能严重降低, 通过多种受体阻断细胞因子的信号传导, 导致功能性 NK 细胞缺陷 特性与应用 缺乏成熟的 T B 和 NK 细胞 对人源细胞和组织免疫排斥反应低 肿瘤细胞成瘤性好, 少量细胞即可成瘤 适用于人类造血干细胞移植, 人源化小鼠模型制备 适合用做异源细胞和组织移植的载体小鼠 可用于免疫学 肿瘤学 人类疾病感染模型等研究 人体细胞和组织移植存活率显著提高 M-NSG 重度免疫缺陷小鼠模型

3 验证数据 表型分析 C57BL/6 NOD-scid M-NSG CD19-APC (B cell) CD3e-PE (T cell) CD3e-PE (T cell) CD335-Pacific Blue (NK cell) 图 1. M-NSG 小鼠脾脏中 T B 和 NK 细胞完全缺失 取 C57BL/6 NOD-scid 和 M-NSG 小鼠的脾脏细胞, 并通过 FACS 对其中 T B 和 NK 细胞的组成进行分析 C57BL/6 NOD-scid M-NSG CD19-APC (B cell) Q CD3e-PE (T cell) CD3e-PE (T cell) CD335-Pacific Blue (NK cell) 图 2. M-NSG 小鼠血液中 T B 和 NK 细胞完全缺失 取 C57BL/6 NOD-scid 和 M-NSG 小鼠的外周血, 并通过 FACS 对其中 T B 和 NK 细胞的组成进行分析 基于 M-NSG 小鼠成功建立的 CDX 模型 Human tumor cell lines Cell lines A431 A549 Calu-6 HCT116 HepG2 MDA-MB-468 MSTO-211H Raji SH-SY5Y SW48 Tumor type Epidermoid carcinoma Lung carcinoma Lung carcinoma Colon carcinoma Hepatocellular carcinoma Mammary glandadenocarcinoma Biphasic Mesothelioma B-cell Lymphoma Neuroblastoma Colorectal adenocarcinoma M-NSG 重度免疫缺陷小鼠模型

4 CDX 模型的成瘤实验 Tumor volume for A549 (mm 3 ) C57BL/6 Balb/c Nude NOD-scid M-NSG Tumor volume of Raji (mm 3 ) C57BL/6 Balb/c Nude NOD-scid M-NSG Days after injection Days after injection 图 3. A549 肺肿瘤细胞在 M-NSG 小鼠上建立肿瘤模型 分别将 A549 细胞皮下接种到 C57BL/6 Balb/c Nude NOD-scid 和 M-NSG 小鼠中, 在不同的时间点测量肿瘤体积, 其中 M-NSG 小鼠效果最佳 图 4. Raji 淋巴瘤细胞细胞在 M-NSG 小鼠上建立肿瘤模型 分别将 Raji 细胞皮下接种到 C57BL/6 Balb/c Nude NOD-scid 和 M-NSG 小鼠中, 在不同的时间点测量肿瘤体积, 其中 M-NSG 小鼠效果最佳 CDX 模型的模拟药效实验 A549 wtih human PBMC in M-NSG Calu-6 tumor growth kinetic in M-NSG Tumor volume (mm 3 ) A549 alone A549:PBMC 3:1 A549:PBMC 4:1 A549:PBMC 5:1 A549:PBMC 6:1 Tumor volume (mm 3 ) Calu6 alone Calu6:PBMC 3:1 Calu6:PBMC 4:1 Calu6:PBMC 5:1 Calu6:PBMC 6: Days post tumor implantation Days post tumor implantation 图 5. A549 与 PBMC 以不同比例混合注射 M-NSG 小鼠, 在不同时间点观察肿瘤生长状况 A549 与 PBMC 以 3:1 混合时, 肿瘤抑制效果最好 图 6. Calu-6 与 PBMC 以不同比例混合注射 M-NSG 小鼠, 在不同时间点观察肿瘤生长状况 Calu-6 与 PBMC 以 3:1 混合时, 肿瘤抑制效果最好 M-NSG 重度免疫缺陷小鼠模型

5 饲养注意事项 环境 温度 :2 26, 日温差不超过 4 湿度 :4 7% 昼夜时长 :12h/12h 或 14h/1h 照度 : 小鼠照度 15 2 lux, 工作照度 2 lux 以上 噪音 : 低于 6 db 建议使用隔离包或独立通风的 IVC 笼具 IVC 环境对于免疫缺陷小鼠的饲养比较有利 饲料建议使用高脂肪低蛋白的饲料,M-NSG 小鼠的饲料需要蛋白质含量 18%, 脂肪含量 6%, 采用 Co6 辐照灭菌, 可以保证小鼠的健康生长繁殖 饮水如果在隔离包饲养, 可采用高压灭菌的纯水作为饮用水 如果在 SPF 级小鼠屏障系统中饲养, 建议采用酸化水 ( 用 HCl 调节 PH 至 ), 经高压灭菌后使用, 可有效预防假单胞菌和金黄色葡萄球菌的污染 笼具与垫料如不在隔离包饲养, 需要在超净工作台更换垫料, 且需要使用消毒过的镊子转移小鼠到新的笼盒, 在日常换笼过程中, 要在超净工作台中进行更换, 每换一笼时夹取小鼠的镊子要进行消毒, 避免用手直接接触小鼠, 每周都要更换笼具 其他在接收动物的时候, 免疫缺陷小鼠常常会和其它免疫系统正常的品系一起被送到动物房 这时, 不要随机地拆开运输箱, 而是根据笼内动物的免疫系统状态以及健康情况依次进行接收 : 首先接收免疫缺陷小鼠, 其次接收免疫健全同时健康状况良好的小鼠, 最后接收免疫健全且健康状况不佳的小鼠 动物房必须定期检测微生物指标, 确保环境的洁净程度 应将免疫缺陷小鼠与免疫健全小鼠隔离开来进行饲养, 免疫缺陷小鼠要饲养在动物房洁净等级最高的区域 对于实验动物操作人员, 最好有专人负责免疫缺陷小鼠品系的维持与管理 操作人员必须始终穿戴好个人防护 : 无菌服 手套 口罩 防护帽, 覆盖所有皮肤表面, 防止将细菌传播给小鼠 如果实验人员必须同时兼顾免疫缺陷和免疫健全小鼠, 那么应该按照先处理免疫缺陷小鼠, 后处理免疫健全小鼠的顺序进行操作, 而且不能再回到免疫缺陷小鼠区域, 以免交叉污染 M-NSG 重度免疫缺陷小鼠模型

6 我们的愿景是为全球 的生命科学研究者提 供全面 便捷 专业的 模式生物服务 让探索 生命奥秘的过程更简 单和高效 M-NSG 重度免疫缺陷小鼠模型

7 3 万专业屏障设施可容纳约 3 万只 SPF 级小鼠 南模生物 ( 上海南方模式生物科技股份有限公司 ) 成立于 2 年 9 月, 是一家专业从事模式生物研发 饲养繁育和分析检测的生物科技公司 我们拥有专业的技术团队, 先进的实验设施和完善的 SPF 级小鼠动物房 我们建立了分子克隆 干细胞培养 胚胎显微操作 模式生物基因组编辑 生理及病理分析等技术平台, 可为生命科学研究和药物研发提供优质的基因工程模式生物活体模型以及表型分析检测 模型品系保存 遗传育种及繁育等服务 我们始终保持对动物质量 动物福利 生物安全管理的高度重视, 获得国际实验动物评估和认可委员会 (AAALAC) 认证 4 累计建立了逾 4 例基因修饰小鼠模型 成立至今, 我们已累计建立了逾 4 种基因修饰小鼠模型 为全球知名高校 科研院所 医院 制药企业提供了高效的模式生物专业技术服务 我们的用户遍布中国大陆 香港 澳门 韩国 新加坡 欧洲 美洲和澳洲等国家和地区 资质 新三板挂牌上市公司, 证券代码 国家科技部 863 计划生物技术领域疾病动物模型研发基地 上海市高新技术企业 45 逾 45 种预制小鼠模型可供选择 上海市模式生物技术专业技术服务平台 上海市比较医学专业技术服务平台 上海模式动物工程技术研究中心 上海市小巨人培育企业 上海市小巨人企业 ( 在建 ) AAALAC 认证 更多产品与技术资料 成品小鼠模型资源库 即用型模型有效缩短实验周期 肿瘤抗体药物药效评价模型免疫检查点人源化小鼠 基因工程小鼠定制与繁育常见问题解答 全方位模式生物服务 小鼠 大鼠 斑马鱼 线虫 模型定制 成品模型 饲养繁育 表型分析 药物筛选 FAQ MOUSE MODELS CATALOG 基因敲除 基因敲入 人源化 工具鼠 M-NSG 重度免疫缺陷小鼠模型

8 模型定制 I-Sanger 生信云 三代测序 抗体芯片 GCBI 云平台 药物筛选 微生态研究 基因芯片 蛋白芯片 生信分析 饲养繁育 基因组测序 酵母文库 蛋白质谱 二代测序 全方位模式生物服务 模型定制 成品模型 饲养繁育 表型分析 药物筛选及评价 专业研发团队为你度身打造模型定制方案, 所想即所得 上百种成品模型, 有效缩短实验周期 一站式服务大大提高实验效率, 节省宝贵时间, 避免实验延期 饲养繁育交给我们, 再也不用担心动物房没笼位和病原体污染 小鼠 大鼠 斑马鱼 线虫 更多选择满足不同实验所需 上海南方模式生物科技股份有限公司 上海 北京 天津 济南 武汉 杭州 广州 重庆 成都 长沙 旧金山 上海总部 : 上海市浦东新区半夏路 178 号 2 号楼 info@modelorg.com 商标 : 南模生物,M-NSG 南模生物版权所有 SMOC1812-C 12/218

第一章 图 1 1 传染病的特征 9 T h1 T h2 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 T N Fα 和 IFNγ 可抑制放线菌的生长而 IL 6 的作用则 反之 IL 1 2 和 GM CSF 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 IL 1ra 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与

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