南模生物目前可以提供 * 种人源化小鼠 -BB CD FcRn OX TIM PD- & PD-L -BBL CD GITR OXL TNFA PD- & TIGIT B7-H CD7 ICOS PCSK9 TNFRSF PD- & TIM CD9 CD7 ICOSL PD- TNFSF PD-L

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肿瘤抗体药物药效评价模型 Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠肿瘤免疫治疗是当前癌症治疗领域最热门的研究方向之一与传统治疗方法相比, 抗体药物的作用靶点很明确, 通过作用于自身免疫系统来治疗肿瘤小鼠作为最常用的动物模型, 在药效评价中有着广泛的应用, 但由于普通小鼠的免疫检查点基因与对应人类基因的同源性只有 %

1 肿瘤抗体药物药效评价模型 Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠肿瘤免疫治疗是当前癌症治疗领域最热门的研究方向之一与传统治疗方法相比, 抗体药物的作用靶点很明确, 通过作用于自身免疫系统来治疗肿瘤小鼠作为最常用的动物模型, 在药效评价中有着广泛的应用, 但由于普通小鼠的免疫检查点基因与对应人类基因的同源性只有 % 左右, 一般作用于人源蛋白的抗体并不能识别小鼠体内的蛋白, 因此无法使用普通小鼠来进行抗体药物的药效评价上海南方模式生物构建了一系列免疫检查点人源化小鼠, 有效地解决了以上问题通过将小鼠对应的基因替换成人源基因, 从而使小鼠中只表达人源的免疫检查点蛋白多家知名医药企业与我们合作进行了验证, 结果显示这些模型是肿瘤抗体药物药效评价的理想模型

南模生物目前可以提供 * 种人源化小鼠 -BB CD FcRn OX TIM PD- & PD-L -BBL CD GITR OXL TNFA PD- & TIGIT B7-H CD7 ICOS PCSK9 TNFRSF PD- & TIM CD9 CD7 ICOSL PD- TNFSF PD-L & CTLA CD7 CD8 IDO PD-L VISTA PD-L & OX CD7 CD8

2 南模生物目前可以提供 * 种人源化小鼠 -BB CD FcRn OX TIM PD- & PD-L -BBL CD GITR OXL TNFA PD- & TIGIT B7-H CD7 ICOS PCSK9 TNFRSF PD- & TIM CD9 CD7 ICOSL PD- TNFSF PD-L & CTLA CD7 CD8 IDO PD-L VISTA PD-L & OX CD7 CD8 IL7A PSGL- OX & CTLA TIM & LAG CD CEACAM ILRA SEMAD PD- & CTLA CD8 CSFR KDR SIRPA PD- & LAG CDE CTLA LAG TIGIT PD- & OX * 部分品系正在研发中经过与多家知名医药企业合作进行验证, 结果显示这些模型是肿瘤抗体药物药效评价的理想模型更多品系详细数据请登录我们的官网 Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠

3 PD-L 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Cd7 em(hpd-l)/smoc 品系背景 :C7BL/J PD-L (programmed cell death ligand-, 又名 CD7) 是 PD- 两个配体之一, 主要表达于抗原递呈细胞激活 T 细胞及其他免疫细胞上 PD-L 在多种肿瘤中高表达, 与 PD- 相互作用后可以产生抑制性信号, 抑制 T 细胞增生, 造成免疫逃逸在 C7BL/J 遗传背景下, 将人源 PD-L 蛋白编码序列插入小鼠 Pd-l 基因的 ATG 位置, 在表达全人源 PD-L 蛋白的同时取代小鼠內源 Pd-l 的表达体内药效验证 PD-L antibody anti-tumor efficacy validation Body weight changes in anti-tumor validation Tumor volume ± SEM (mm ) human IgG mg/kg, qd x, i.p. anti-hpd-l antibody mg/kg. qd x, i.p. P<. TGI=7% Body weight ± SEM (g) higg mg/kg anti-hpd-l antibody mg/kg 7 Days after administration 7 Days after administration 图. PD-L 人源化小鼠 MC8 荷瘤模型体内抗肿瘤药效验证 PD-L 人源化纯合子小鼠接种 MC8 人源化结肠癌细胞系 ( 表达人源 PD- L, 不表达鼠源 PD-L), 肿瘤生长至约 mm 随机将动物分组为对照组和治疗组 (n=) 结果显示: 针对人的 PD-L 抗体有非常显著的抗肿瘤效果 (TGI: 抑瘤率, p<.), 证明 PD-L 人源化小鼠是一个很好的验证针对人 PD-L 抗体药效的体内模型 Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠

4 PD- 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Pdcd em(hpdcd)/smoc 品系背景 :C7BL/J PD-(programmed cell death-) 是一个重要的免疫抑制分子, 隶属 CD8 超家族, 主要表达于 T 细胞表面以 PD- 为靶点的免疫调节在抗肿瘤抗感染抗自身免疫系统疾病和器官移植存活等方面均有重要的意义上海南方模式生物构建的 PD- 人源化小鼠, 作为理想的体内药效验证模型, 适用于靶向 PD-/PD-L 通路的免疫疗法的研发和药物筛选在 C7BL/J 遗传背景下, 将人源 PDCD 蛋白编码区插入小鼠 Pdcd 基因的 ATG 位置, 在表达人源全长 PDCD 蛋白的同时, 取代小鼠內源 Pdcd 的表达 WT C7BL/ hpd KI C7BL/ Isotype, unstimulated CD+ cells Keytruda, unstimulated CD+ cells Keytruda, ConA ug/ml, CD+ cells hpd- expression in hours after ConA stimulation. FL-H FL-H 图. FACS 检测 PD- 人源化小鼠脾脏淋巴细胞 PD- 表达 PD- 人源化纯合子小鼠和野生型小鼠取脾脏 T 淋巴细胞, 体外 ConA 刺激小时后,FACS 检测人源 PD- 在 T 细胞表面表达结果显示 : ConA 体外刺激后, 在 PD- 人源化小鼠 T 细胞表面可以检测到人源 PD- 蛋白表达 ( 与 Genscript 合作完成 ) 体内药效验证 Tumor volume (mm ) Mean ± SEM Vehicle, ml/kg, biw, i.v. Key truda, mg/kg, biw, i.v. Days afger treatment 图. PD- 人源化小鼠 MC8 荷瘤模型体内抗肿瘤药效验证 PD- 人源化纯合子小鼠接种 MC8 结肠癌细胞系, 肿瘤生长至约 mm 随机将动物分组为对照组和治疗组 (n=8), 每周给药两次, 连续给药四次结果显示 : 针对人的 PD- 阳性药物 Keytruda 有非常显著的抗肿瘤效果 (p<.), 证明 PD- 人源化小鼠是一个很好的验证针对人 PD- 抗体药效的体内模型 ( 与 Genscript 合作完成 ) Tumor Volume (mm ) Tumor volume G PBS N/Amg/Kg b.i.w i.v G Anti-PD mg/kg b.i.w i.v G Anti-PD mg/kg b.i.w i.v 8 8 Day after Grouping Body Weight (g) Body weight. G PBS N/Amg/Kg b.i.w i.v. G Anti-PD mg/kg b.i.w i.v G Anti-PD mg/kg b.i.w i.v Day after Grouping 图. PD- 人源化小鼠 MC8 荷瘤模型体内抗肿瘤药效剂量验证 PD- 人源化纯合子小鼠接种 MC8 结肠癌细胞系, 肿瘤生长至约 9 mm 随机将动物分组为对照组和治疗组 (n=9) 结果显示: 针对人的 PD- 抗体有非常显著的抗肿瘤效果 (p<.), 且这种抗肿瘤效果呈现出剂量效应 ( 与 PharmaLegacy 合作完成 ) Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠

5 OX 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Tnfrsf em(htnfrsf)smoc 品系背景 :C7BL/J OX 又名 TNFRSF(Tumor necrosis factor receptor superfamily, member ), 主要表达于激活的 CD + 和 CD8 + T 细胞表面其配体 OXL 主要表达在 APC 细胞 NK 细胞和肥大细胞表面通过特异性 OX 抗体激动剂等途径激活 OX 信号通路可以增强 T 细胞的活性, 并抑制 Treg 细胞的功能在 C7BL/J 遗传背景下, 将人源 OX 胞外结构域和鼠源 Ox 跨膜及胞内结构域编码序列插入小鼠 Ox 基因的 ATG 位置, 在表达人源嵌合体蛋白的同时取代小鼠內源 Ox 的表达 Isotype Ctrl BL-H R - OX CD CD8 IgG-PE.79%.79% mox R - OX CD CD8 mox-pe.%.% BL-H hox R- OX CD CD8 hox-pe BL-A.9% 9.% Isotype Ctrl BL-A.7%.% CD-APC-H mox BL-A.99%.8% CD-APC-H Anti-mCD hox BL-A 8.77%.% CD8-APC-H R - OX CD CD8 IgG-PE R - OX CD CD8 mox-pe R - OX CD CD8 hox-pe.7%.% 9.8%.87%.97%.9% 8.% 7.%.97%.%.%.% CD8- CD8- CD8- 图. FACS 检测 OX 人源化小鼠脾脏淋巴细胞 OX 表达 OX 人源化杂合子小鼠脾脏淋巴细胞经 anti-cd 和 anti- CD8 刺激 8h 后收集细胞染色, 同时设立不刺激组,FACS 检测鼠源和人源 OX 表达结果显示 :OX 人源化杂合子小鼠活化的 CD + 和 CD8 + T 淋巴细胞中均可以检测到人源 OX 的表达, 并且人源 OX 和鼠源 Ox 表达趋势类似 Anti-mCD8 体内药效验证 Tumor volume (mm ) higg mg/kg qdx Anti-OX Ab mg/kg qdx OX positive Ab mg/kg qdx Days post implantation 图 7. OX 人源化小鼠 MC8 荷瘤模型体内抗肿瘤药效验证 OX 人源化杂合子小鼠接种 MC8 结肠癌细胞系, 肿瘤生长至约 8 mm 随机将动物分组为对照组和治疗组 (n=8) 结果显示 : 针对人的 OX 阳性抗体和测试抗体均有非常显著的抗肿瘤效果 (p<.), 证明 OX 人源化小鼠是一个很好的验证针对人 OX 抗体药效的体内模型 Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠

ICOS 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Icos em(hicos)smoc 品系背景 :C7BL/J ICOS(inducible T cell co-stimulator) 是 CD8 家族的一员, 表达于活化的 T 细胞表面,ICOS-ICOSL 共刺激信号对细胞免疫和体液免疫起调节作用在 C7BL/J 遗传背景下, 将人源 ICOS 胞外结构域和鼠源 Icos

6 ICOS 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Icos em(hicos)smoc 品系背景 :C7BL/J ICOS(inducible T cell co-stimulator) 是 CD8 家族的一员, 表达于活化的 T 细胞表面,ICOS-ICOSL 共刺激信号对细胞免疫和体液免疫起调节作用在 C7BL/J 遗传背景下, 将人源 ICOS 胞外结构域和鼠源 Icos 跨膜及胞内结构域编码序列插入小鼠 Icos 基因的 ATG 位置, 在表达人源嵌合体蛋白的同时取代小鼠內源 Icos 的表达 Isotype Ctrl BL-H R - ICOS CD CD8 IgG-PE.%.% 7.% 8.87% CD-APC-H hicos BL-H R - ICOS CD CD8 JTX.%.8%.9%.88% CD-APC-H Anti-mCD R - ICOS CD CD8 IgG-PE.9%.% R - ICOS CD CD8 JTX.%.% Isotype Ctrl BL-A 8.% 9.% CD8- hicos BL-A.9%.% CD8- 图 8. ICOS 人源化小鼠脾脏淋巴细胞活化后 FACS 检测 ICOS 表达 ICOS 人源化杂合子小鼠脾脏淋巴细胞经 anti-cd 和 anti-cd8 刺激 8h 后收集细胞染色, 同时设立不刺激组, 抗体染色后,FACS 检测人源 ICOS 表达结果显示 :ICOS 人源化杂合子小鼠活化的 CD + 和 CD8 + T 淋巴细胞中可以检测到人源 ICOS 的活跃表达 Anti-mCD Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠

CTLA 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Ctla em(hctla)/smoc 品系背景 :C7BL/J CTLA (cytotoxic T-lymphocyte associated protein ) 表达于活化的 CD + 和 CD8 + T 细胞, 与其配体 B7 分子结合后产生抑制性信号, 抑制 T 细胞激活, 从而导致肿瘤细胞免受 T 细胞的攻击在

8% 7.% PE-Cy7-A 7.8%.8% PE-Cy7-A.7%.97% Anti-CD.7% 7.% PE-Cy7-A 图 9.

淋巴细胞中可以检测到人源 CTLA 的表达体内药效验证 Tumor volume Body weight G HulgG mg/kg b.i.w. i.v. G Yervoy mg/kg b.i.w. i.v... G HulgG mg/kg b.i.w. i.v. G Yervoy mg/kg b.i.w. i.v. Tumor Volume (mm ) Body Weight (g).

7 CTLA 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Ctla em(hctla)/smoc 品系背景 :C7BL/J CTLA (cytotoxic T-lymphocyte associated protein ) 表达于活化的 CD + 和 CD8 + T 细胞, 与其配体 B7 分子结合后产生抑制性信号, 抑制 T 细胞激活, 从而导致肿瘤细胞免受 T 细胞的攻击在 C7BL/J 遗传背景下, 将人源 CTLA 蛋白编码序列插入小鼠 Ctla 基因的 ATG 位置, 在表达全人源 CTLA 蛋白的同时取代小鼠內源 Ctla 的表达 No treatment.%.97% Anti-CD/CD8 antibody treatment.%.77% WT Anti-hCTLA CTLA Homozygous.% 8.97% PE-Cy7-A.%.9%.8% 7.% PE-Cy7-A 7.8%.8% PE-Cy7-A.7%.97% Anti-CD.7% 7.% PE-Cy7-A 图 9. FACS 检测 CTLA 人源化小鼠脾脏淋巴细胞 CTLA 表达 CTLA 人源化纯合子和野生型小鼠脾脏淋巴细胞经 anti-cd 和 anti-cd8 刺激 8h 后收集细胞染色, 同时设立不刺激组, 分别用 anti-mcd-pe-cy7 和 anti-hctla--apc 抗体染色,FACS 检测人源 CTLA 表达结果显示 : 活化刺激后的 T 淋巴细胞中可以检测到人源 CTLA 的表达体内药效验证 Tumor volume Body weight G HulgG mg/kg b.i.w. i.v. G Yervoy mg/kg b.i.w. i.v... G HulgG mg/kg b.i.w. i.v. G Yervoy mg/kg b.i.w. i.v. Tumor Volume (mm ) Body Weight (g) Day after Grouping. 8 8 Day after Grouping 图. CTLA 人源化小鼠 MC8 荷瘤模型体内抗肿瘤药效验证 CTLA 人源化纯合子小鼠接种 MC8 结肠癌细胞系, 肿瘤生长至约 mm 随机将动物分组为对照组和治疗组 (n=9) 结果显示: 针对人的 CTLA 阳性药物 Yervoy 有非常显著的抗肿瘤效果 (p<.), 证明 CTLA 人源化小鼠是一个很好的验证针对人 CTLA 抗体药效的体内模型 ( 与 PharmaLegacy 合作完成 ) Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠

8 LAG 人源化小鼠品系名称 :B.9-Lag tm(hlag)/smoc 品系背景 :B.9 LAG(lymphocyte activating ) 表达于活化的 T 细胞 NK 细胞以及 NK 细胞表面, 主要与 MHC II 类分子相结合由于与 CD 在结构上具有一定的同源性,LAG 可以负向调节 CD + T 细胞的增殖和功能通过同源重组方式, 将小鼠內源 Lag 基因胞外区序列全部替换为人源 LAG 序列, 表达一个人源嵌合 LAG 蛋白 CD8+.% CD8a-PE CD+.7% hlag-+.% hlag-+.% CD8a-PE CD8+.% CD-FITC CD+.7% CD-FITC 8 No-staining hlag-+.% No-staining hlag--alexa Fluor 7 hlag--alexa Fluor 7 hlag+.78% 图. LAG 人源化小鼠肿瘤浸润淋巴细胞 FACS 检测 LAG 表达 LAG 人源化纯合子小鼠接种 MC8 结肠癌细胞, 待肿瘤生长至 mm, 分离肿瘤浸润淋巴细胞,FACS 检测 CD + CD8 + T 细胞人源 LAG 的表达结果显示 :LAG 人源化小鼠肿瘤浸润淋巴细胞中可检测到人源 LAG 的活跃表达, 其中 CD + 阳性细胞中有.% 人源 LAG 阳性细胞 ( 与 GenScript 合作完成 ) TIM 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Havcr em(hhavcr)/smoc 品系背景 :C7BL/J TIM 又名 HAVCR(hepatitis A virus cellular receptor ), 是 TIM 家族的一员, 主要表达于 Th 细胞表面, 负向调节 Th 细胞介导的免疫反应其配体包括 Gal-9 HMGB 和磷脂酰丝氨酸等在 C7BL/J 遗传背景下, 将人源 TIM 胞外结构域和鼠 T cells Myeloid cells 源 Tim 跨膜及胞内结构域编码序列插入小鼠 Tim 基因的 ATG 位置, 在表达人源嵌合体蛋白的同时取代小鼠內源 Tim 的表达 No staining htim--pe Q.% Q 7.% Q.% Q 7.%.% htim-+ cells within CD+ cells htim--pe Q.7% Q 7.% Q.89% Q 8.7%.% htim-+ cells within CDb+ cells CDe-APC CDb-APC 图. TIM 人源化小鼠肿瘤浸润淋巴细胞 FACS 检测 TIM 表达 TIM 人源化纯合子小鼠接种 MC8 结肠癌细胞, 待肿瘤生长至 mm, 分离肿瘤浸润淋巴细胞,FACS 检测 CD + CD8 + T 细胞人源 TIM 的表达结果显示 :TIM 人源化小鼠肿瘤浸润淋巴 htim- htim--pe Q.% Q 78.% Q.7% Q.%.% htim-+ cells within CD+ cells htim--pe Q.% Q 7.% Q.98% Q.%.7% htim-+ cells within CD+ cells 细胞中可检测到 TIM 阳性细胞 ( 与 GenScript 合作完成 ) CDe-APC CDb-APC Immuno-Hu Models 免疫检查点人源化小鼠

TIGIT 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Tigit em(htigit)smoc 品系背景 :C7BL/J

(PVR) 家族的一员, 主要表达于记忆 T 细胞 Treg 细胞和 NK 细胞表面, 在许多肿瘤组织中高表达, 通过与 NK

跨膜及胞内结构域编码序列插入小鼠 Tigit 基因的 ATG 位置, 在表达人源嵌合体蛋白的同时取代小鼠內源 Tigit 的表达

CD+hTigit Q.79% Q.87% Q 7.% Q 8.% Q.97% Q.% Q.% Q 8.% Q 9.8% Q.

FACS 检测 TIGIT 人源化小鼠极化 CD + T 细胞中人源 TIGIT 表达 Tigit 人源化杂合子小鼠分离脾脏 Naive

T 细胞人源 TIGIT 表达结果显示 : 在 TIGIT 人源化小鼠极化 CD + T 细胞中可以检测到人源 TIGIT

9 TIGIT 人源化小鼠品系名称 :C7BL/J-Tigit em(htigit)smoc 品系背景 :C7BL/J TIGIT(T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains) 是脊髓灰质炎病毒受体 (PVR) 家族的一员, 主要表达于记忆 T 细胞 Treg 细胞和 NK 细胞表面, 在许多肿瘤组织中高表达, 通过与 NK 细胞表面的 DNAM- 竞争结合受体来调控免疫活性在 C7BL/J 遗传背景下, 将人源 TIGIT 胞外结构域和鼠源 Tigit 跨膜及胞内结构域编码序列插入小鼠 Tigit 基因的 ATG 位置, 在表达人源嵌合体蛋白的同时取代小鼠內源 Tigit 的表达 Wild type unstain CD+CD CD+mTigit Q.8% Q.9% Q.98% Q 9.% Q.% Q.% Q 9.% Q.% CD Q.9% CD Q.% mtigit Q.98% CD Q.7% heterozygous humanized Tigit mouse unstain CD+CD CD+mTigit CD+hTigit Q.79% Q.87% Q 7.% Q 8.% Q.97% Q.% Q.% Q 8.% Q 9.8% Q.% CD Q.7% CD Q.% mtigit Q.% CD Q.7% htigit Q.8% CD Q 7.% 图. FACS 检测 TIGIT 人源化小鼠极化 CD + T 细胞中人源 TIGIT 表达 Tigit 人源化杂合子小鼠分离脾脏 Naive CD + T 细胞, 经细胞因子和抗体体外刺激激活扩增后, 再使用 PMA/ ionomycin 重刺激,FACS 检测极化后 CD + T 细胞人源 TIGIT 表达结果显示 : 在 TIGIT 人源化小鼠极化 CD + T 细胞中可以检测到人源 TIGIT 的活跃表达, 并且人源 TIGIT 和鼠源 Tigit 表达趋势类似上海南方模式生物科技股份有限公司上海北京天津广州重庆旧金山上海总部 : 上海市浦东新区半夏路 78 号号楼 info@modelorg.com SHMO7-C /8

我们的愿景是为全球的生命科学研究者提供全面便捷专业的模式生物服务, 让探索生命奥秘的过程更简单和高效上海南方模式生物科技股份有限公司 ( 南模生物 ) 成立于年 9 月, 是一家以模式生物技术为特色的专业从事人类基因组功能研究人类疾病发病机制探索和药物疗效评价的生物科技公司我们拥有专业

我们的愿景是为全球的生命科学研究者提供全面便捷专业的模式生物服务, 让探索生命奥秘的过程更简单和高效上海南方模式生物科技股份有限公司 ( 南模生物 ) 成立于年 9 月, 是一家以模式生物技术为特色的专业从事人类基因组功能研究人类疾病发病机制探索和药物疗效评价的生物科技公司我们拥有专业肿瘤抗体药物药效评价模型免疫检查点人源化小鼠我们的愿景是为全球的生命科学研究者提供全面便捷专业的模式生物服务, 让探索生命奥秘的过程更简单和高效上海南方模式生物科技股份有限公司 ( 南模生物 ) 成立于年 9 月, 是一家以模式生物技术为特色的专业从事人类基因组功能研究人类疾病发病机制探索和药物疗效评价的生物科技公司我们拥有专业的技术团队, 先进的实验设施和完善的 SPF 级小鼠动物房