期高桂玲 等 雨生红球藻和虾青素的研究 ## ' 的首选色素 虾青素还可以促进生长繁殖及家禽的产蛋率 总之 虾青素具有巨大的市场潜力 A 图 虾青素的 种结构 A *$$&!&$.$# 生产方式虾青素分子有 " 个旋光异构体 即 和 " 种结构形态 在天然的虾青素源和水生动物中都以 存在 而人工合成

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1 第 卷第 期!" 年 月 # 水 # 产 # 学 # 报!!" 文章编号! $ %!&!" $ ' $ "! " #$!!!""% 综述 雨生红球藻和虾青素的研究 高桂玲 # 成家杨 # 马 # 炯 北京大学深圳研究生院 环境与能源院 广东深圳 #&! && 摘要 介绍了虾青素的生产方法及生物活性的最新研究进展情况 对目前工业化采用的生产方法及技术特点进行了具体的阐述和对比总结 如从水产品的废弃物 雨生红球藻和红发夫酵母中提取 而雨生红球藻是自然界中天然虾青素含量最高的生物来源 介绍了虾青素的诸多生物活性及应用概况 如抗氧化 抗炎抗感染 抗肿瘤 抗疲劳 预防骨质疏松的作用等 随着对虾青素药理毒理活性的进一步研究 虾青素不仅用作珍贵水产动物养殖的饵料添加剂 在食品 药品 化妆品和高级营养保健品等领域也将得到广泛的应用 具有巨大的市场潜力 对利用雨生红球藻生产天然虾青素的机制 现状进行总结及展望 对进一步研究雨生红球藻具有深远的意义 关键词 雨生红球藻 虾青素 应用 综述中图分类号 +'"'' '%####### 文献标志码 ## 虾青素是一种重要的类胡萝卜素 不仅具有抗氧化性 而且生物学功能显著 具有广泛的应用价值 不仅可以用作水产养殖的饲料添加剂和人类食品添加剂 在药品 化妆品和营养保健品等领域也具有很大的应用潜力 雨生红球藻 是天然虾青素含量最高的生物 在特定条件下 雨生红球藻可以积累占其干重!** 以上的虾青素 且所含虾青素的结构与养殖对象所需一致 被公认为天然虾青素的最好生物来源! 利用雨生红球藻生产虾青素已成为国内外虾青素研究的热点!# 虾青素 虾青素及其应用 虾青素 '.'' 学名为 % 二羟基一 ""% 二酮基一胡萝卜素 是一种非维生素 ' 原的类胡萝卜素 属于酮式类胡萝卜素 晶体为褐红 $ 色 虾青素分子有很长的共轭双键 图! 等 有羟基和在共轭双键链末端的不饱和酮 其中 羟基和酮基构成羟基酮 这一结构特点使其具有较活泼的电子效应 能提供电子或吸引自由基的未配对电子 极易起抗氧化作用 研究表明 虾青素是具有抗氧化活性的类胡萝卜素 与胡萝卜素及维生素 等相比 虾青素具有更强的生物活性 是属于人体安全的物质 " 虾青素的抗氧化活性比 % 胡萝卜素高约! 倍 比维生素 高约 & 倍 虾青素已被认为是 超级维生素 & 目前国际市场的价格为每千克 & 美元 全球每年有 亿美元以上的市场容量 % 虾青素在很多方面具有独特的作用与用途 能够阻止脂质过氧化 保护机体免受伤害 预防癌症发生 还能促进人体免疫球蛋白的产生 具有很高的免疫调节活性 对紫外线引起的皮肤癌有很好的治疗效果 对由糖尿病引起的眼病也有较好的防治作用 在功能食品和医药方面有广泛的应用前景 虾青素进入动物体后可以不经修饰或生化转化而直接贮存于组织中 使一些水生动物的皮肤和肌肉出现健康而鲜艳的颜色 因此虾青素是鱼类饲料中 收稿日期!%%!'### 修回日期!%! %! 资助项目 中国博士后科学基金!/&! % 中国博士后特别资助!4% & 通信作者 马 # 炯 %&'-&-&'(&

2 期高桂玲 等 雨生红球藻和虾青素的研究 ## ' 的首选色素 虾青素还可以促进生长繁殖及家禽的产蛋率 总之 虾青素具有巨大的市场潜力 A 图 虾青素的 种结构 A *$$&!&$.$# 生产方式虾青素分子有 " 个旋光异构体 即 和 " 种结构形态 在天然的虾青素源和水生动物中都以 存在 而人工合成的虾青素是以 形态存在的 对映体之间除生理效能有强弱和与其他旋光性物质反应时表现不同的速度外具有相同的物质性质 而非对映体之间的物质性质却非常不同 所以人工合成的虾青素的 功能与天然虾青素的功能具有很大差异 ' 虾青素的生产方法主要有天然提取和化学合成等 天然提取 ## 天然的虾青素常存在于某些动物 藻类及微生物体内 特别是虾 蟹 鱼和鸟类的羽毛 表! 使用安全并具有环境友好性 有广阔的发展前景 其生产可分为从动物及其副产品中提取 或从藻类中提取和采用酵母培养生产 来源.,(. 表 天然虾青素的来源 '*&!#$&$.$# 优点 '''- 缺点.'''- 甲壳纲水产品废弃物 (,.'('.' '. 真菌 -. 红发夫酵母也被认为是较适宜的虾青素来源 " "!#.'. '-.,( 产量低 纯度差 成本高 尚未形成生产规模,(,- (.'.,&.(',( 技术要求高 生产工艺复杂 天然的红发夫酵母中虾青素平均含量低 - ((',;,&. &,(,(.. ('.''. 藻类 '-' 废弃物 '. 细菌!'(,' 雨生红球藻是所有己知的虾青素合成生物体中培养耗时长 虾青素存在于厚壁孢子中的提取率低 积累量最高的物种产率低 连续性差 不利于大规模培养 '((&' '.''. - (,,,'(,'.,( -...,. &'..(, 纯度不高 生产成本高,- (. 生物量小 色素含量低量 生长速度慢 &'!&'..-& (. -,,' ## 通过以上各种生产来源的比较发现 雨生红球藻细胞内天然虾青素的含量相对较高! 年 根据 & 中华人民共和国食品安全法 ' 和 & 新资源食品管理办法 ' 规定 批准雨生红球藻作为新资源食品 开发雨生红球藻培养生产虾青素技术! 具有巨大的商业及经济价值 化学合成及其他方法 # # 目前 由于生物来源的虾青素含量还不够高 化学合成的虾青素仍 具有一定的竞争优势 但合成比较困难 而且大多为顺式结构 美国 " 食品和药品管理局 仅批准反式结构的虾青素用作水产养殖的添加剂 因此 人工合成的反式虾青素价格昂贵 现国际市场价约 美元 #-!! 在生产过程中可能被其他有害物质污染 产品中含有非天然的异构体 &'%'( 公司于 世纪 年代末以 %% 乙酸基 %"% 氧代 %% 紫罗酮为原料化学合

3 555 /3 水5产5学5报 / 卷 成了反 式 虾 青 素" 商 品 名 为 + /LH; L,"虾 青 素的含量为 8B=3B"是目前市场上鲑鱼 饲料 的 主要来源( 德国 的 J&*(公 司 以 /7 甲 基7 87 # 1"7" 77 三甲 基7 /7 氧7 羟 基7 37 环 己 烯 基$7 1"47 戊二烯三 二 甲 基7 1"4"77 三十八烯二醛 芳基磷酸 盐 和 1"7 反应合成 7B至 B 的 全 反 式 虾 青 素 & 31' ( 除 天 然提取)化学合成等 1 种生产虾青素的方 法外"还 可利 用 细 菌) 原 生 动 物) 农 作 物 体 内 的 &7 胡萝卜 素作为前体物 质"通 过 转 基 因 技 术 将 合 成 虾 青 素 的酶转入相 应 农 作 物 中 合 成 虾 青 素( 但 目 前" 这 种生产虾青素的方法仅仅处于实验研究中 & 3/' ( 图 $#雨生红球藻细胞 15雨生红球藻 *+," $#C1 ; ; 83<-71 (B % "1 % & 雨生红球藻 是 天 然 虾 青 素 含 量 最 高 的 生 物" 合成相关的酶 & 14' "其中油脂蛋白和油体 钙 蛋 白 这 在特定 条 件 下" 雨 生 红 球 藻 可 以 积 累 占 其 干 重 两种表面蛋白 是 植 物 油 滴 结 构 的 主 要 成 分"油 脂 3B以上的虾青素"且所含虾青素的结构与 养殖 对 蛋白至今未在微藻中发现 & 18 ' "油 体钙蛋 白 与 细 胞 象所需虾青素 结 构 一 致"被 公 认 为 天 然 虾 青 素 最 质膜的 合 成 有 关 & ' " 广 泛 分 布 在 高 等 植 物 细 好的生物 来 源 & 34 ' ( 红 球 藻 是 一 种 很 有 开 发 前 途 胞( 质体球滴结 构 具 有 储 存 作 用"并 参 与 相 关 物 的微藻"成为继螺旋藻)盐藻之后的另一种高经 济 质的代谢 过 程 & 1' ( 在 植 物 的 代 谢 以 及 抗 逆 过 程 价值的微藻 & 38 ' ( 中有重要的作 用"并 作 为 质 体 中 很 多 不 同 代 谢 的 雨生红球藻在分类学上属于绿藻门"绿藻 纲" 载体 & 1 ' ( 在雨 生 红 球 藻 含 虾 青 素 的 球 滴 中 发 现 团藻目"红球藻科"红球藻属( 细胞由广卵形到 广 了 一 个 特 异 的 蛋 白 +"I6# H 8 / / =/ 椭圆形"宽 3 =83 #8"长 1 =7/ #8"自养生 活" E /3= L / $ # 图 / $ 而 没 有 发 现 质 体 球 滴 结 ( 尽管雨生 构 & / ' ( 这个蛋 白 基 因 的 转 录 水 平 与 雨 生 红 球 藻 红球藻是 单 细 胞 生 物" 但 是 其 生 活 史 却 很 复 杂( 在胁迫条件下积累虾青素的量成正 比 & /3' "它 的 合 通常公认其生活史中存在游动和不动二个阶 段(1 成可能是环境胁迫的一种响应 & /1 6// ' "通过观察发 正常条件下"游动细胞生长发育"以有丝分裂的 方 现在眼点区域和叶绿体中都有一排大小均一的嗜 式无性生 殖"多 产 生 并 释 放 1 或 4 个 或 个 子 细 锇球滴结构# 图 /$ ( 通过与其他高等植物及藻类 胞# 或孢子 $ " 不 管 几 个 都 能 观 察 到 鞭 毛 的 存 在" 比较"在雨生红 球 藻 叶 绿 体 中 发 现 的 大 小 均 一 的 并能自由游 动"属 于 游 动 孢 子( 雨 生 红 球 藻 暴 露 嗜锇球滴结构 即 是 质 体 球 滴 结 构"而 雨 生 红 球 藻 在高光强及缺氮的胁迫环境后游动细胞转变 成不 虾青素的合成 和 积 累 分 别 存 在 于 质 体 和 胞 质 中" 动细胞"细胞 形 态 呈 圆 形" 无 鞭 毛" 不 会 游 动 # 图 质体球滴中的 +6I6蛋白和胞质中的虾青素球滴 1$ ( 不动细 胞 时 间 可 持 续 数 月" 在 此 期 问" 细 胞 的 +"I6蛋 白 分 别 是 两 个 不 同 阶 段 的 主 要 结 构 仍可缓慢增 殖 个 体"并 逐 渐 增 大 体 积( 多 数 细 胞 蛋白"在虾青素 合 成 过 程 的 过 膜 阶 段 存 在 着 功 能 除具增厚的新 壁 外"不 再 保 留 原 有 的 细 胞 壁 和 周 的对接( 用单细胞 的 孢 子 或 合 子 进 行 生 殖 & 3' 质 空 间" 细 胞 内 含 物 也 由 绿 褐 色 转 变 为 深 桔 红色 & ' ( $"!#质体球滴结构 通过对 +"I6的分 离 及 分 析 发 现"虾 青 素 是 分 布 在 球 滴 内 的 唯 一 色 素" 三 酯 酰 甘 油 # ;E ; / $ 是主要的油脂#占总脂肪酸的 在大多数植物 中"类 胡 萝 卜 素 类 物 质 积 累 于 B以上$ "在球滴 中 有 条 蛋 白 质 条 带"他 们 可 /E /3= $结 叶绿体或者有色体的质 体球 滴 # L 能是与球滴的合成有关( 一些单细胞微藻的油脂 & 3 61/ ' ( 植物中 类 胡 萝 卜 素 代 谢 和 储 存 的 重 球 滴 富 含 油 脂" 一 些 油 脂 甚 至 占 细 胞 干 重 的 要场所是质体 球 滴 结 构"它 除 了 含 有 脂 质 及 次 生 7B"油脂的 富 集 与 细 胞 生 长 有 关 & /4 6/7 ' " 但 是 微 代 谢产物 外 "还 含有许 多蛋 白 质 和 次 生 代 谢 产 物 藻油 脂 球滴 中蛋 白 质 的 组 成 及 作 用 还 未 见 报 道 ( 构中!" " #!!$$$%& ' ( )* +, -%'.

4 1期 55 /33 高桂玲"等!雨生红球藻和虾青素的研究 图 %#经过 &U =光照胁迫后的雨生红球藻透射电镜图片 白色箭头所示为 L /E /3= 结构% 黑色箭头所示为胞质中 类 似 6 /E /3= 结 构 的 嗜 锇 球 滴% &图 中 无 尾 箭 头 所 示 为 嗜 锇 眼 点% G 1线粒体% -H 1叶绿体% RH;1类囊体% &I1虾青素球滴 *+," %#/.58 A ; 1 6 / 5A+ / 8 7 3<-71 (B % "1 % & /&U =?/ 8; +,=68 6 / UH /P H/P HL /E /3= = = % J W /P H/P / /LH / 8 =8 3? /L 8 / L /E /3= = = ; /L 8% ) M E= &"/ /P H/P H / /LH / 8 =8 ; L/ %G 1)? 8 / H/? % -H 1)? H / /L % RH;1 )? RH; W/?% &I1? H3? /L/M X H 对于雨生红球 藻 而 言"虾 青 素 的 积 累 与 油 脂 的 富 成 ) 46( 所有的类胡萝 卜 素 均 通 过 类 异 戊 二 烯 化 合 "油脂的积累又依赖于脂肪酸的合 46是该途 径 的 前 体 物或萜类化合物途径合成( ) "在氮胁迫 下"虾 青 素 和 脂 肪 酸 分 别 占 细 胞 46在 ) 46异 构 酶 作 用 下 生 成 4G&66# 二 物质") 集有 关 & /7 ' & /7 ' & / ' " 与 其 他 微 生 物 一 样" 雨 生 甲基丙 烯 基 二 磷 酸 $ " 然 后 再 与 / 个 ) 46缩 合 依 红球藻质体球蛋白与细胞质膜的合成有关( 雨 生 次生成 I46#? 牛 儿 基 二 磷 酸 $ ) (46# 法 尼 基 二 干重的 4B 和 4B 红球藻是研究 油 脂 球 体 合 成 的 惟 一 生 物"因 为 只 磷酸$ )II66#? 牛 儿 基? 牛 儿 基 二 磷 酸 $ ( 1 个 有在雨生红球藻细胞中油脂和色素是在同一 区域 II66在 6*T# 八氢番茄红素合成酶$ 作用下形成 合成( 通过对质 体 球 蛋 白 的 分 离 与 分 析" 进 而 研 第一个无色的类胡萝卜素777八氢番茄红素( 八 究其起源及作 用 将 是 下 一 步 研 究 的 方 向"另 一 方 氢番茄红素经过连续的脱氢反应"共轭双键延长" 面由于雨生红 球 藻 质 体 球 蛋 白 富 含 脂 肪 酸"也 为 直至形成链 孢 红 素)番 茄 红 素( 番 茄 红 素 在 不 同 生物柴油的制备提供了生物源"有待进一步研究( 环 化 酶 的 作 用 下 分 别 生 成 *7 胡 萝 卜 素) &7 胡萝 $" %#雨生红球藻中虾青素可能合成途径 卜素( 虾青素是一种次生类胡萝卜素"在微生物细胞 第二阶段由 &7 胡萝 卜 素 合 成 虾 青 素 的 过 程( 内的合成步骤较多且较复杂"最初对类胡萝卜素合 即从 &7 胡萝 卜 素 氧 化 # 酮 基 化 $ 开 始" 经 过 海 胆 成途径的研究是从细菌 和海洋细 菌开始 的( 近年 酮)鸡油菌黄 质"4"4Z 7 二 酮 基7 /7 羟 基7 胡萝卜素 &7 来"通过使用特异性 抑制剂"已 经阐明了 红球 藻中 等中间物质合成虾青素( 虾青素的生物合成途径"并克隆了途径中的关键酶 基因( 虾青素的合成基本上可将其分为两个阶段" 第一阶段是 合成 &7 胡萝 卜素"第二 阶 段 是 &7 胡萝 卜素经氧化# 酮基化$ 和羟基化形成虾青素 & /' ( $/H8 等 由于雨生红 球 藻 特 殊 的 生 物 学 性 质"其 生 长 繁殖和虾青素的积累明显分为两个截然不同的生 第一阶段即 &7 胡萝卜素的 合成过程"3/ 年 & / ' /5雨生红球藻生产虾青素的产业化现状 理阶段"因此"如 何 提 高 营 养 细 胞 的 生 长 密 度"又 用 -7 3/7 %G$标记 实 验 发 现 在 细 菌 如何促使不动细胞快速)大量积累虾青素"是提高 细胞中异戊烯焦磷酸# ) 46$ 可以由 /7 磷酸 甘油 醛 虾青素生产效率)降低成本的技术关键"这已成为 和丙酮酸 两 种 前 体 物 质 合 成" * HP? 等 & 4' 和 目前国际上应用研究的热点( 细胞生物量和虾青 ' H H 又分别发 现 绿 藻 和 植 物 细 胞 也 是 素累积量与培养基)培 养 条 件 以 及 藻 种 # 品 系 $ 有 通过非甲羟 戊 酸 途 径 合 成 ) 46" 即 以 丙 酮 酸 为 起 关 & 41 64/ ' ( 雨生红球 藻 营 养 生 长 的 适 宜 条 件 与 虾 始物"经 过 与 /7 磷 酸 甘 油 醛 # I&6$ 反 应 而 合 成 青 素 累 积 所 需 条 件 不 同" 在 某 些 方 面 甚 至 相 & 43 '!" " #!!$$$%& ' ( )* +, -%'.

5 ###! 水 # 产 # 学 # 报 卷 反 "" 虾青素的大量积累总是发生在不适于生物量积累的营养或环境胁迫条件下 虾青素积累与生物量积累之间的矛盾是限制利用雨生红球藻生产虾青素的根本问题 目前 国内外利用雨生红球藻生产天然虾青素的研究趋势是两步培养法 即第一阶段优化培养条件 获得较高的藻细胞生物量 第二阶段进行诱导调控 使游动细胞转化为不动细胞 从而大量合成虾青素 国内雨生红球藻的培养技术尚处于实验室研究阶段 主要集中在高产藻株筛选 高密度培养条件优化和诱导调控手段多样化等方面 诱变育种就是方法之一 即利用紫外线和 / 诱变高产藻 "& 株 等用 / 成功诱变 株快速生长的藻株 然后将其中一株用紫外线处理后 发现其总生物量 单细胞虾青素产量和虾青素总产量分 "% 别增加 %** 和! *$- 等也证明利用紫外线和 / 诱变是一种筛选高产藻株的有 " 效方法 &- 等分别以 和 / 为诱变剂 以 羟 % 甲基 $ 戊二酰辅酶 /1% 还原酶抑制剂 细胞内固醇类物质合成过程中的限速酶 (&'( 为筛选剂 获得 /%!/%!& 两个突变株 结果发现突变株不仅积累虾青素量是出发株的!" 倍 其 /1 酶活性也比出发株显著增高 说明可以从调节类异戊二烯合成水平上控制虾青素的合成 目前 由于生长缓慢 自养周期长 易被其他杂藻和微生物污染 且生长需要光照 生产场所在一定程度上受到限制 并且藻类破壁释放虾青素困难 红球藻细胞的培养仍然不很理想 难以建立可控的稳定的培养系统 不能达到高密度培养 成为限制工程规模放大和开发该生物资源的瓶颈 我们综合考虑了影响雨生红球藻生长及虾青素积累的因素如温度 光照 氮源等并进行了单因素试验 初步结果显示 ) 较低浓度 & - # 的硝酸氮以及低光照! 较适宜该藻营养生长 氨氮容易造成对藻体的毒害而抑制早体正常生长 而低浓度! - # 硝酸氮高温 ) 高光照 较适宜虾青素的积累 未来将通过正交试验综合考虑各因素共同对雨生红球藻生长及虾青素积累的影响 并进行自养培养 异养培养 混合营养生长对比来寻求雨生红球藻高密度生长的最佳营养生长方式 及自养胁迫和异养胁迫对比来寻求雨生红球藻积累虾青素的最佳胁迫方式 打 破生产瓶颈 为虾青素的开发提供技术依据 "# 结论及展望虾青素是一种重要的次生类胡萝素 它广泛存在于生物界 特别是鱼 虾 蟹等水生生物之中 由于虾青素重要的生理功能及经济价值 近年来受到国内外的广泛研究 雨生红球藻是目前首选的天然虾青素合成物 雨生红球藻在多种不适宜生长的外界环境条件下都会在细胞核周围的细胞质基质中加速积累次生类胡萝卜素 其中 * 以上为虾青素及其酯类 雨生红球藻中虾青素的积累量可高达细胞干质量的 "* 随着人们对雨生红球藻虾青素积累条件 生理生化过程 酶学基础和基因表达水平等认识的逐步清晰 以及基因工程手段的逐步成熟 对雨生红球藻的研究重点应该放在以下 " 点! 调控优化生活史 在探索基础生物学特性的基础上 综合考虑影响雨生红球藻生长的各个因素 优化其生长条件并充分利用该藻两阶段生活史的特性 实现两级串养方式 在高密度培养的基础上大量积累虾青素 动力学研究 现在的研究大都偏重环境因子影响方面 应加大细胞生长和虾青素积累的动力学研究 为接种及采收提供基础 防治污染 雨生红球藻对环境变化非常敏感 指数生长期短 在营养生长期内抵抗细菌和原生动物污染的能力很差 因此应该在优化藻种的基础上寻求减少污染的技术措施 " 虾青素的高效提取 由于雨生红球藻壁厚且存在胶质 给虾青素的提取带来不便 而且目前虾青素的提取方法众多 但是提取效率不高 所以寻求简便高效的提取方法是实现雨生红球藻规模化生产必须解决的问题 相信随着人们对雨生红球藻虾青素积累条件 生理生化过程 酶学基础以及基因表达水平等认识的逐步清晰以及基因工程手段的逐步成熟 打破雨生红球藻高密度生长瓶颈 实现规模化为期不远 参考文献! #'. 8 '' ','' * '(& (',.! &' '.,.. ( (',- ( -. &'.,.,( 4(-

6 期高桂玲 等 雨生红球藻和虾青素的研究 ##! ''! %% $% #".. /(,!',( -,' -&. (- % ""! $! #/', 1' ',,.!(', '.''4.',' &., '!(','.% '., /(,!' '(,.!!!% #!"& $&' $ $ " #- - / ' -.$,.',&.'.'' $ ' & #,4..1&&,('', &(,'-' '.' ','.,( '.'' 4,. (-! "!% $!% % # $ (& " / '!( -,- ',.!(-(',( (',. &(,,-'.&. /(,!- ' (- %! $! $!! #' 5$,,.' & '.'' '%' '' &('., % '! $ 范荣新 虾青素的性质与开发 海 湖盐与化工 %'! $ #7'- ".',(,-,.. ',' -& '.'' ' &('4,'!! 王丹 天然色素虾青素的研究进展 中国化工贸 易!! ' #' 5$,,.' & '.'' '%' '' &('., % '! $ 范荣新 虾青素的性质与开发 海 湖盐与化工 '%! $!'! #3'- + 1' 8- + '.'' '((&'!,,(,'.,&','3 '-,. -,(, ((.!!% %" $% 张睿钦 管斌 孔 青 等 雨生红球藻异养转化产虾青素的条件研 究 浙江大学学报 农业与生命科学版!! % %" $%!!# ',.4 " ''.' 8.' '.'',,(- &'. " "!# (-,.!''!'! ' $!!!#7,'( ',(' ',' '.'' " '- 3 '-,. 吴彩娟 天然虾青素提取和纯化工艺研究 杭州 浙江大学材料与化学学院!#3'- / 5 3' 1.',(,-,..'& ' '!,' '.'','.,! % $ 张明祥 赵建国 国外虾青素的研究进展 粮食与饲料! % $!"#+ (%% 4. &.,& $,..,'.'../(','/(,!- " $ 邱昌恩 %% 对平菇和香菇菌丝体两种同工酶的影响 微生物学杂志 " ' $'!&# 6 8"- 6 (( ' '((&' '.'',' $(-!''" ""& $""'!%#3'-,'.,(,'.,(.. '.'' '((&' 7,.,.. (,'. (, /(,.( (!'! $!" 庄惠如 卢海声 雨生红球藻 在胁迫条件下累积虾青素过程的超微结构研究 电子显微学报!'! $!"!# 1 6- / 6. ( (( ('-' &-'('!!"& $!"' 刘建国 殷明焱 雨生红球藻的细胞周期初探 海洋与湖沼!!"& $!"'!#",?, &, " ',- *!, '..&! ' (',, '((&' (,&'..'&,.,'&(',,.,(,. $'!''"%!!!' $!!'#8' &? $(.' ' (','(,' ', '..(' (', -!. '-'%!7 $' $.-!''&! "!%& $!%%" #.. / '. / ' * /(',(- '(',%'..(',,& &-. -. (',.;.,' (,&'.. $','!''%! %!!!! $!!!!#$ ' '' 1 *!;. '. - - $$ (. ' &',, (&!,(,&'.. $'$.-!''!!&!!& $!!'" #&'... 1,$ ',',%!'. &,,(- (,'.,'..',(''-.. $, ((!'''& ' $'" #8.., ( "! 1 (',.'..(' '.-!..',&

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