遵义医学院学报 35 卷 尿道下裂是临床常见的先天性生殖系统发育异常疾病之一, 其主要原因是由于包皮前表面及阴茎的尿道发育停止, 从而使尿道发生畸形而不能于正常位置开口, 常并发阴茎弯曲 [1,2] 尿道下裂发病原因目前尚未完全明确, 多认为是环境与基因改变共同导致 [3,4] 虽然手术治疗作为尿道
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- 旗卷谦 褚
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1 第 35 卷第 4 期 2012 年 8 月 遵义医学院学报 ACTAACADEMIAEMEDICINAEZUNYI Vol.35 No.4 Aug.2012 氟他胺对胚胎期尿道下裂大鼠 PCNA AR 表达的影响 白晓燕, 李 岩 ( 遵义医学院公共卫生学院, 贵州遵义 ) [ 摘要 ] 目的观察氟他胺 (Flu) 对胚胎期 SD 大鼠尿道及睾丸间质细胞增殖细胞核抗原 (PCNA) 雄激素受体 (AR) 表达水平的影响, 探讨其引起尿道下裂机制 方法将孕鼠于第 12~17 天连续皮下注射 Flu(6.0546mg/kg d) 染毒造模, 在第 20 天行破宫产取子代雄鼠的尿道生殖结节和睾丸, 用免疫组化检测大鼠尿道生殖结节 间充质细胞 尿道细胞及睾丸间质细胞 PCNA AR 表达变化,RT-PCR 技术检测睾丸间质细胞 PCNA ARmRNA 表达变化 结果免疫组化显示 PCNA 在 Flu 染毒组大鼠生殖结节 间充质细胞 尿道细胞及睾丸间质细胞中蛋白表达明显低于对照组 (P<0.05),AR 在 Flu 染毒组尿道细胞及睾丸间质细胞表达与对照组无差异 (P>0.05);RT- PCR 显示 :PCNAmRNA 在 Flu 染毒组大鼠睾丸间质细胞中蛋白表达明显低于对照组 (P<0.05),ARmRNA 在 Flu 染毒组睾丸间质细胞表达与对照组无差异 (P>0.05) 结论 Flu 引起尿道下裂不是通过改变 AR 水平实现, 可能是通过降低睾酮激素水平或与雄激素竞争性结合 AR 而导致尿道下裂的发生 [ 关键词 ] 尿道下裂 ; 氟他胺 ; 细胞增殖细胞核抗原 (PCNA); 雄激素受体 (AR) [ 中图法分类号 ]R [ 文献标识码 ]A [ 文章编号 ] (2012) EfectsofflutamideonPCNAandARexpresionsinhypospadiasembry onicrats Baixiaoyan,Liyan (SchoolofPublicHealth,ZunyiMedicalColege,GuizhouZunyi563099,China) [Abstract]ObjectiveToobservetheefectsofflutamide(Flu)onexpresionsofproliferatingcelnu clearantigen(pcna)andandrogenreceptor(ar)intheurethralandleydigofembryonicsdrats. MethodsFromgestationdays(GD)12to17,Fluwasinjectedsubcutaneously(sc)atthedoseof mg/kg/ d,whilecontrolgroupwasadministratedwithnormalsaline(ns).atgd20,themale embryoswerecolected.proteinexpresionsofpcnaandaringenitaltubercle,mesenchymalcels, urethracelsandleydigcelsweredetectedbyimmunohistochemistryandmrnaexpresionsofpcna andarinleydigcelsweremeasuredviart-pcrasay.resultsimmunohistochemicalanalysisindi catedpcna expresionswassignificantlydecreasedingenitaltubercle,mesenchymalcels,urethra celsandleydigcelsofflu-treatedgroupcomparedwiththecontrolgroup(p<0 05);Therewasno significantdiferenceofarexpresioninurethracelsandleydigcelsbetweenflu-treatedgroupand controlgroup(p>0 05);RT-PCRasayshowedthatPCNAmRNAexpresionsinleydigcelsofFlu -treatedgroupwaslesthanthatinthecontrolgroup(p<0 05).However,therewasnosignificant diferenceofarmrnaexpresioninleydigcelsbetweenflu-treatedgroupandcontrolgroup(p> 0 05).ConclusionFlucouldinducehypospadiasandthemechanismsmightberelatedtothedecreased testosteronelevelorthecompetitivebindingofar. [Keywords]hypospadias;fluamide;proliferatingcelnuclearantigen;androgenreceptor [ 基金项目 ] 贵州省科技厅自然科学基金 (NO:C-341); 贵州省教育厅重点课题 (NO:C-413); 贵州省省长基金 (NO:C- 351); 遵义医学院博士启动基金项目 (NO:F-205) [ 通信作者 ] 李岩, 男, 教授, 硕士生导师, 研究方向 : 环境毒理学与生殖毒理学 E mail:liyan067321@sina.com 271
2 遵义医学院学报 35 卷 尿道下裂是临床常见的先天性生殖系统发育异常疾病之一, 其主要原因是由于包皮前表面及阴茎的尿道发育停止, 从而使尿道发生畸形而不能于正常位置开口, 常并发阴茎弯曲 [1,2] 尿道下裂发病原因目前尚未完全明确, 多认为是环境与基因改变共同导致 [3,4] 虽然手术治疗作为尿道下裂重要的治疗方法取得不断发展, 但手术并发症较多, 并且由于工业发展带来的环境污染的加重使其发生率也成明显上升趋势 [5], 因此对尿道下裂发病机制进一步研究以对其预防及治疗提供指导均有重要意义 氟他胺 (flutamide,flu) 是一种用于制造尿道下裂动物模型的常用非类固醇类抗雄激素药物, 在其作用下, 尿道生殖结节显示有敞开的 连续的尿道生殖沟, 尿生殖褶融合受到影响, 尿道生殖褶亦受到影响而不能向阴茎腹侧中线融合, 以上原因共同导致尿道开口的位置异常, 成为引起尿道下裂的重要原因 已有研究显示给予一定剂量的 Flu, 子代雄鼠尿道生殖结节和睾丸组织中相关凋亡基因的表达将受到影响, 引起尿道下裂 [6,7], 但究竟是通过直接与受体竞争性结合还是直接降低雄激素受体 (androgenreceptor,ar) 表达目前尚未明确 我们在相关研究基础上, 通过 Flu 染毒建立尿道下裂动物模型, 观察染毒后子代雄性大鼠增殖细胞核抗原 (proliferatingcelnuclearantigen,pcna) 以及 AR 表达变化, 进一步探讨 Flu 引起尿道下裂的机制, 现报道如下 1 材料与方法 1.1 对象 实验动物及分组 SpragueDawley 大鼠 (SPF 级, 约 8 周龄 )30 只 ( 受孕雌鼠 20 只, 雄性 10 只, 四川大学华西实验动物中心提供 ), 体重 230 ~250g 适应性饲养一周后雌 雄均随机分为 2 组 ( 对照组和 Flu 染毒组各 15 只 ) 试剂氟他胺 ( 江苏第一药业, 批号 : 03012);I 抗 :PCNA 鼠抗大鼠 BM0104 及 AR 兔抗大鼠 BA0004( 武汉博士德 );I 抗 SP9000 羊抗兔 IgG( 上海起发实验试剂公司 );DBA 显色剂 ZLI9032( 北京中杉金桥生物工程有限公司 ) 封闭用正常山羊血清工作液 ( 上海起发实验试剂公司 ), 生物素化二抗工作液 ( 北京中杉金桥生物工程有限公司 ), 辣根酶标记链霉素卵白素工作液 272 ( 北京中杉金桥生物工程公司 ) 样本组织 mrna 提取和纯化试剂盒 ( 美国,Clontech);Trizol TM RNA IsolationReagent( 美国,Gibco);RevertAid TM First StrandcDNASynthesisKit( 立陶宛,MBI) 仪器显微镜 (OLYMPUS, 日本 ) Mias- 200 图像分析仪 Leitz-1515 轮转式手摇切片机 (Heraeus, 西德 );GeneAmpPCR System 9600PE ( 美国,PerkinElmer) FTC2000 型荧光定量 PCR 仪 低温高速台式离心机 ( 德国,Heraeus) 电泳仪及凝胶成像系统 ( 美国,Bio-rad) 1.2 方法 染毒方法将 30 只大鼠按雄性与雌性比例为 1 2, 于 合笼后, 第二日 8 00 观察雌鼠阴栓, 如发现有阴栓为孕第 0 天 染毒组孕鼠在第 12~17 天连续 6d, 每天 8 00 腹部皮下注射用生理盐水配制的 Flu(6.0546mg/kg), 对照组给予等量 NS 标本采集于孕 20d(gestationdays, GD20) 解剖孕鼠, 取出染毒组和对照组雄性仔鼠双侧睾丸, 置于装有 RNA 保存液的冻存管中液氮低温保存 经鉴定各组样本 mrna 提取质量鉴定各项指标符合实验要求, 同时取出雄性仔鼠生殖结节 免疫组化染色标本石蜡包埋 连续切片 脱蜡至水 3% H 2 O 2 阻断内源性过氧化物酶, 蒸馏水洗 ; 将切片浸入 PCNA AR 使用 0.01M 枸橼酸缓冲液,pH6.0, 高压加热 4min, 后自然冷却 20,min 至室温 PBS 漂洗后滴加山羊血清工作液, 室温孵育 10~15min 滴加适量一抗(PCNA 稀释度 1 50;AR 稀释度 1 100),4 孵育过夜 滴加二抗, 室温下 1h, 以上两步均需用 0.01mol/LPBS 漂洗,DBA 显色, 显微镜观察后自来水终止显色, 苏木素轻度复染 脱水 透明后中性树胶封片, 棕黄色颗粒为阳性反应 滴加新鲜配置的 DBA 显色剂, 控制染色后自来水冲洗, 终止显色反应 ; 苏木素轻度复染后水洗 RT-PCR RT-PCR 反应引物 PCNA 及 AR 列 ( 见表 1), 反应体系总体积 50μl(Bufer5 μl MgCl25μl 上下引物各 2μl TaqDNA Poly merse0.3μl cdna 模板 5μl DEPC-H2O29μl 反映条件 :94 预变性 3min,94 30s,55 30 s,72 1min 共 35 循环 标准模板样品每毫升的初始拷贝数为
3 ４期 白晓燕等 氟他胺对胚胎期尿道下裂大鼠 ＰＣＮＡ ＡＲ表达的影响 表 １ ＲＴ ＰＣＲ反映引物序列 ＰＣＮＡ及 ＡＲ序列 引物 １ ４ １ｂ ＰＮＣＡ ２ ４ｂ ＡＲ １ ７ ３ｂ １ ３ 统计分析 ＧＧＡＣＡＴＧＣＧＴＴＴＧＧＡＣＡＧＴＡ ３ ＣＴＴＣＡＴＣＴＴＣＧＡＴＣＴＴＧＧＧＡ ３ ＡＡＧＡＧＧＡＡＧＣＴＧＴＧＴＣＣＡＴＡＧＡ ３ ＡＣＴＴＣＴＧＴＴＴＣＣＣＴＴＣＣＧＣＡ ３ ＧＧＡＣＡＴＧＣＧＴＴＴＧＧＡＣＡＧＴＡ ３ ＡＣＴＴＣＴＧＴＴＴＣＣＣＴＴＣＣＧＣＡ ３ 免疫组化图像分析采用 Ｓｉ ｍｐ ＰＣＩ图像分析仪 灰度值比较采用 ＰＥＭＳ软件 ＲＴ ΔΔＣＴ ＰＣＲ采用 ２ ２ 指标检测结果 １ ＰＣＮＡ ＧＤ２ＰＣＮＡ在 Ｆ ｕ组与对照组在 法对目的基因进行定量分析 生殖结节 间充质细胞和尿道细胞及睾丸间充质细 荧光定量 ＰＣＲ结果以 ΔＣＴ值表示 计算 ΔＣＴ ＣＴ ｔ ａ ｒ ｇ ｔｇ ｎ ＣＴ 引物 ΔΔＣＴ ΔＣＴ 实 胞中的表达见图 １ ４ 免疫组化图像灰度分析结 ΔΔＣＴ 果见表 ２ ＲＴ ＰＣＴ结 果 显 示 Ｆ ｕ组 与 对 照 组 表示各实验组目 验组! ΔＣＴ 对照组 ２ 珋±ｓ表示 两组 的基因相对表达量 所有数据以 ｘ ５ ＰＣＮＡ在 ΔＣＴ比较差异有统计学意义 Ｐ Ｆ ｕ染毒组睾丸间质细胞的活性较对照组表达降 均数比较用 ｔ检验 除灰度值外用 ＳＳ ＰＳ１８ 进行 低了 ３７ ２ ２ ＣＴ ６２８± １５ 数据分析 检验水准 α ５ ２ ＡＲ ＧＤ２ＡＲ在 Ｆ ｕ组与对照组尿道细 胞与睾丸间质细胞表达见图 ５ ６ ＡＲ免疫组化图 像灰度分析结果见表 ２ ＲＴ ＰＣＲ结果显示 Ｆ ｕ ２ 结果 尿道下裂的发生率均为 Ｆ ｕ雄性子代表现出性 组与对 照 组 ΔＣＴ比 较 差 异 无 统 计 学 意 义 Ｐ ５ ＡＲ在 Ｆ ｕ染毒组睾丸间质细胞的活性较 分化 和 性 发 育 异 常 染 毒 组 尿 道 下 裂 的 发 生 率 ９７６± ８ ６ 对照组无明显变化 ２ ＣＴ １ 一般情况 对照组雄性子代发育未见异常 １ 提示 Ｆ ｕ组染毒成功 ７ 图１ Ａ ＰＣＮＡ在对照组生殖结节中的阳性表达 ５ 图１ Ｂ Ｐ ＣＮＡ在 Ｆ ｕ组生殖结节中的阳性表达 ５ 图２ Ａ 对照组间充质细胞中 Ｐ ＣＮＡ阳性表达 ４ 图２ Ｂ Ｆ ｕ染毒组间充质细胞中ｐ ＣＮＡ阳性表达 ４ ２７３
4 遵 义 医 学 院 学 报 图３ Ａ 对照组尿道细胞中 ＰＣＮＡ表达情况 ４ 图４ Ａ ＰＣＮＡ在对照组睾丸间质细胞中的阳性表达 ４ 图 ５Ａ 对照组尿道细胞中 ＡＲ表达情况 ４ 图６ Ａ ＡＲ在对照组睾丸间质细胞中的阳性表达 ４ ２７４ ３ ５卷 图３ Ｂ Ｆ ｕ染毒组尿道细胞中 Ｐ ＣＮＡ表达情况 ４ 图４ ＢＰＣＮＡ在 Ｆ ｕ染毒组睾丸间质中的阳性表达 ４ 图５ Ｂ Ｆ ｕ染毒组尿道细胞中 ＡＲ表达情况 ４ 图６ Ｂ ＡＲ在 Ｆ ｕ染毒组睾丸间质中的阳性表达 ４
5 4 期白晓燕等 氟他胺对胚胎期尿道下裂大鼠 PCNA AR 表达的影响 表 2 PNCA 及 AR 表达图像灰度分析结果 ( x±s) 珋 标记物 检测组织 对照组 Flu 染毒组 生殖结节细胞 ± ±1.620 PNCA 间充质细胞 ± ±4.261 尿道细胞 ± ±1.005 睾丸间质细胞 ± ±0.917 AR 尿道细胞 ± ±1.974 睾丸间质细胞 ± ±2.163 注 : 与对照组比较,P<0.05, 差异有统计学意义 表 3 PNCA 及 ARrt-PCR CT 值及 2 - CT 法分析结果 ( x±s) 珋 标记物 检测组织 对照组 CT 值 Flu 染毒组 CT 值 2 - CT 值 PCNA 睾丸间质细胞 7.200± ± ±0.105 AR 睾丸间质细胞 7.540± ± ±0.086 注 : 与对照组比较,P<0.05, 差异有统计学意义 3 讨论 PCNA 是一种稳定的细胞周期核蛋白, 作为 DNA 聚合酶 δ 的辅助因子,PCNA 与细胞 DNA 合 成关系密切, 在细胞增殖发挥重要作用, 因此 PC NA 的表达可反映局部细胞的增生状态 [8] 本研究发现在胚胎 20d 可观察到 Flu 染毒组 PCNA 在生殖结节 间充质细胞 尿道细胞及睾丸间质细胞中表达减少 ( 见图 1~4); 图像灰度值在生殖结节 间充质细胞 尿道细胞及睾丸间质细胞中低于对照组, 两样本均数的比较具有统计学差异 (P<0.05, 表 1),RT-PCR 分析显示 PCNAmRNA 在 Flu 染毒组明显减少, 这提示 Flu 能够降低睾丸间质细胞中合成睾酮代谢相关基因 PCNA 表达,Flu 染毒后, 睾丸间质细胞中合成睾酮代谢酶的活性受到抑制, 睾丸间质细胞增殖受到影响, 导致其增生减少, 将引起睾酮合成分泌量下降 ; 并且在形成尿道的过程中,Flu 也将导致间充质细胞 尿道细胞 生殖结节等完整尿道形成所必须的细胞增殖同样受到影响, 在很大程度上也促进了尿道下裂的发生发展 AR 在尿道发育过程中有重要作用 [9], 与雄激素受体结合后,AR 可促进胎鼠整个尿道板由背侧向腹侧开始融合, 此过程也存在尿生殖褶的融合, 它们共同形成有管的尿道 [10] 图 5~6 可见,Flu 染毒后, 在 GD20 尿道细胞及睾丸间质细胞的 AR 表达与对照组相比并无明显变化 图像灰度值分析 ( 表 1) 显示 AR 在尿道细胞及睾丸间质细胞中比较无统计学差异 (P>0.05);RT-PCR 分析也显示 ARmR NA 在 Flu 染毒组与对照组无明显变化, 提示 Flu 染毒后并未引起雄激素受体量的改变,Flu 在尿道下裂的作用机制, 可能主要是通过影响雄激素合成代谢来改变雄激素水平,Flu 导致拮抗雄激素的作用, 主 要表现为通过与雄激素竞争结合 AR, 对 AR-DNA 以及雄激素依赖基因转录进行阻断, 相应的细胞功能受到影响, 从而阻碍了性分化和性发育 [ 参考文献 ] [1]BorkoS,MartaB,MarkoM,etal.PenileCurvatureIncidence inhypospadias:canitbedetermined?[j].advurol, 2011,Onlinepublished:[doi: /2011/813205]. [2]KalfaN,SultanC,BaskinLS.Hypospadias:etiologyand curentresearch[j].urolclinnortham,2010,37(2): [3]KalfaN,PhilibertP,BaskinLS,etal.Hypospadias:inter actionsbetweenenvironmentandgenetics[j].molcel Endocrinol,2011,335(2): [4] 黄朝辉, 郝加虎, 陶芳标. 环境内分泌干扰物与尿道下裂关系研究进展 [J]. 中国公共卫生,2009,25(3): [5]MansonJM,CarMC.Molecularepidemiologyofhypospadias: reviewofgeneticandenvironmentalriskfactors[j].birthde fectsresaclinmolteratol,2003,67(10): [6] 李岩, 张浩, 王文冬, 等. 小剂量的氟他胺影响大鼠性分化的实验研究 [J]. 四川大学学报 ( 医学版 ),2006, 37(2): [7] 韩华, 李岩. 氟他胺对尿道下裂相关凋亡基因表达影响 [J]. 中国公共卫生,2008,24(11): [8]PanM,KelmanLM,KelmanZ.ThearchaealPCNApro teins[j].biochemsoctrans,2011,39(1): [9]BennetNC,GardinerRA,HooperJD,etal.Molecular celbiologyofandrogenreceptorsignaling[j].intjbio chemcelb,2010,42(6): [10] 李岩, 张浩, 吴德生. 氟他胺对 F1 雄性大鼠睾酮分泌的影响机制 [J]. 遵义医学院学报,2007,30(1):1-3. [ 收稿 ; 修回 ] ( 编辑 : 谭秀荣 ) 275
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河南农业科学,2013,42(2):123-127 JournalofHenanAgriculturalSciences PCR PRRSV CSFV PCV2,, (, 450011) : 根据 TaqMan 复合荧光探针设计原则, 应用 Primer5.0 和 Oligo6.0 软件设计检测猪繁殖 与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 猪瘟病毒 (CSFV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 的特异性引物和探针,
第一章 图 １ １ 传染病的特征 ９ Ｔ ｈ１ Ｔ ｈ２ 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 Ｔ Ｎ Ｆα 和 ＩＦＮγ 可抑制放线菌的生长而 ＩＬ ６ 的作用则 反之 ＩＬ １ ２ 和 ＧＭ ＣＳＦ 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 ＩＬ １ｒａ 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与
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（精校版）陕西省语文卷文档版（含答案）-2011年普通高等学校招生统一考试.doc
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浅 谈 塑 料 袋 与 社 会 福 利 北 京 大 学 经 济 学 院 朱 千 帆 [ 关 键 词 ] 塑 料 袋 组 成 及 性 质 社 会 福 利 经 济 学 一 塑 料 袋 的 发 明 及 其 益 处 1902 年 10 月 24 日, 奥 地 利 科 学 家 马 克 斯 舒 施 尼 发 明 了 塑 料 袋 这 种 既 轻 便 又 结 实 的 包 装 物 的 出 现 在 当 时 无 异 于 一
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第 期 李 伟 等 用 方 法 对 中 国 历 史 气 温 数 据 插 值 可 行 性 讨 论
李 伟 李 庆 祥 江 志 红 使 用 插 值 方 法 对 已 经 过 质 量 控 制 和 均 一 化 的 年 月 年 月 中 国 全 部 基 本 基 准 站 气 温 资 料 逐 月 进 行 空 间 插 值 通 过 站 点 的 实 际 序 列 与 插 值 后 格 点 序 列 进 行 比 较 针 对 相 关 系 数 和 线 性 趋 势 等 多 个 量 来 检 验 方 法 对 气 候 资 料 插 值 的
2010年全国执业兽医资格考试大纲
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郑 长 德 教 育 的 发 展 人 力 资 源 的 开 发 是 决 定 西 部 民 族 地 区 未 来 发 展 的 关 键 因 素 之 一 是 实 施 西 部 大 开 发 战 略 提 高 其 经 济 竞 争 力 和 综 合 实 力 的 重 要 保 障 本 文 从 西 部 民 族 地 区 教 育 发 展 的 现 状 入 手 指 出 中 华 人 民 共 和 国 成 立 多 年 来 西 部 民 族 地 区
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103 學 年 度 技 術 校 院 四 年 制 與 專 科 學 校 二 年 制 統 一 入 學 測 驗 衛 生 與 護 理 類 ( 專 一 ) 試 題 試 題 分 析 : 今 年 衛 護 類 專 一 ( 基 礎 生 物 ) 部 分, 考 題 概 念 簡 單, 選 項 敘 述 也 不 繁 瑣, 且 大 部 分 皆 為 考 古 題 相 關 概 念, 要 拿 高 分 甚 至 滿 分 都 不 是 太 困 難
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巩 雪 宿 燕 岗 潘 文 志 崔 洁 潘 翠 珍 王 蔚 柏 瑾 秦 胜 梅 葛 均 波 舒 先 红 中华临床医师杂志 ( 电子版 ) 2011年 1 月第 5卷第 2期 370 Ch in J C lin icins( E lectron ic Ed ition ), Jnury 15, 2011, V o.l 5, N o. 2 12例, 有效率 61% ( 43 / 70) 术前一般情况如年龄
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梁 运 文 霍 震 刘 凯 本 文 利 用 奥 尔 多 中 心 的 调 查 数 据 从 三 个 方 面 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 状 况 进 行 了 详 细 的 实 证 分 析 首 先 刻 画 了 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 的 总 体 统 计 特 征 然 后 从 财 产 构 成 出 发 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 进 行 了 结 构 分 解 最 后 通
如何迎接 临床基因诊断实验室 验收
如 何 迎 接 临 床 基 因 诊 断 实 验 室 验 收 江 苏 省 临 床 检 验 中 心 许 斌 质 量 管 理 的 历 史 质 量 控 制 (Quality Control,QC) 良 好 实 验 室 实 践 准 则 (Good Laboratory Practice,GLP), 质 量 保 证 (Quality assurance, QA) 质 量 体 系 认 证 及 实 验 室 认 可
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生物真题+模拟卷（14）.FIT)
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2017年全国射箭重点体校锦标赛.xls
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中国科学技术大学 材料工程 05 校外调剂 0870 化学工程 吉林大学 应用化学 05 校外调剂 0870 化学工程 四川大学 制药
045700000787 东北大学 07030 分析化学 05 校外调剂 07030 无机化学 68 66 94 04 34 063700000004 沈阳药科大学 07030 分析化学 04 校内跨专业调剂 070303 有机化学 73 56 9 00 30 0007008903 北京大学 0780Z 药学类 05 校外调剂 070303 有机化学 75 67 09 8 4 085750830 苏州大学
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農 業 群 專 業 科 目 ( 二 ) 1. 有 關 生 命 現 象 之 配 對, 下 列 何 者 錯 誤? (A) 光 合 作 用 - 新 陳 代 謝 (B) 金 蟬 脫 殼 - 繁 殖 (C) 趨 光 性 - 感 應 (D) 狗 急 跳 牆 - 運 動 2. 下 列 何 者 是 膜 狀 構 造 的 胞 器? (A) 粒 線 體 (B) 核 糖 體 (C) 中 心 粒 (D) 染 色 體 3. 下
食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷 列入我国 的植物多酚黄酮抗氧剂 防治高血脂和心血管疾病
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 植物多酚黄酮抗氧化剂与人体健康 尤新 中国食品添加剂和配料生产应用工业协会 北京 主要综述了对植物多酚黄酮类物质的生物活性和安全性 其内容包括 茶多酚 甘草黄酮 竹叶黄酮 大豆异黄酮以及从各种鲜果提取物的功能成分 如葡萄提取物 杨梅提取物 橄榄提取 物 乌饭树果提取物等 介绍了植物多酚黄酮的国际市场信息及相关的研究机构和生产单位 多酚 黄酮 健康 食 品 与
19-3 聚合物
( 一 ) 聚 合 物 的 通 論 A 定 義 : 1. 有 機 聚 合 物 是 由 許 多 單 元 體 重 複 鏈 結, 組 合 成 的 巨 大 分 子 例 如 : 石 墨 鑽 石 石 英 澱 粉 蛋 白 質 DNA... 等 物 質 2. 聚 合 物 的 分 子 量 非 常 大, 通 常 含 有 數 千 個 到 數 十 萬 個 原 子 ; 並 且 聚 合 物 不 一 定 是 有 機 化 合 物,
南通大学杂志社 南通大学学报 医学版. */(& 0 1&( () (' / ' '-& -' (- 评价血清 %'8$ 在肝细胞肝癌诊断中的作用 张 玉 邵建国 陈 琳 卞兆连 管海涛 南京中医药大学 南京 江苏省南通市第三人民医院肝病研究所 摘 要 目的 探讨血清 %'8$ 作为一种新的生物标志
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南通大学学报 社会科学版 第 卷 第 期 双月刊 年 月出版!"# " < ABC DE c AB ^ " M F GE PQ M ""# = 摘要! "#$ %&' (!)*+,!-*.# /.01 # $ 89 :; /.012 # ' $ <= ABCD E /.01 F
南通大学学报 社会科学版 第 卷 第 期 双月刊 年 月出版 " < ABC DE c AB ^ " M F GE PQ M ""# = 摘要! "#$ %&' (!)*+,!-*.# /.01 # 234 567$ 89 :; /.012 # ' $ ?@ ABCD E /.01 F >GH >? I'J K ABCD > LMNO > > 0PQ RI'7 > S. KTUVW XY EN
第 05 期 董房等 : 一种卫星遥测在线状态监测及分析系统的设计 WEB 1 2 总体功能及组成 2.1 总体功能 1 2 3Web 2.2 结构组成 Web WEB WEB 2.3 系统各模块接口关系
电子科学技术 Electronic Science & Technology 电子科学技术第 02 卷第 05 期 2015 年 9 月 Electronic Science & Technology Vol.02 No.05 Sep.2015 年 一种卫星遥测在线状态监测及分析系统的设计 董房 1,2, 刘洋 2, 王储 2 2, 刘赞 (1. 上海交通大学, 上海,200240; 2. 上海卫星工程研究所,
粤 卫 办 2014 47 号 各 地 级 以 上 市 及 顺 德 区 卫 生 计 生 局 ( 委 ), 部 属 省 属 驻 穗 医 药 院 校 附 属 医 院, 委 直 属 各 单 位 : 为 进 一 步 加 强 我 省 登 革 热 患 者 诊 疗 救 治, 保 障 人 民 群 众 健 康, 结
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甘 组 通 2016 68 号 关 于 在 全 州 党 员 中 开 展 正 反 典 型 学 习 教 育 活 动 的 通 知 各 县 ( 市 ) 委, 州 委 各 部 委, 州 级 各 部 门 党 组 ( 党 委 党 工 委 ), 省 州 属 行 政 企 事 业 单 位 党 委 ( 党 组 ): 为 深 入 推 进 全 州 两 学 一 做 学 习 教 育, 教 育 引 导 全 州 党 员 以 身 边
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度定生老病死
溫度決定生老病死作者: 馬悅淩 江蘇文藝出版社 1 受寒涼的途徑 我遇到的許多患癌症或其他重病的人 都有受寒涼的經歷 一位 44 歲的女士 患有肺癌 骨癌 腎癌 該女士總是發低熱 常規治 療一個月後效果不明顯 CT 檢查發現肺部有兩個腫塊 又繼續做進一步檢查 結果令所有人大吃一驚 腫瘤已全身轉移 3 個月後去世 家人不能理解 說 她身體一向不錯 很少生病 只是這一兩年身體弱一些 怎麼會突然得這麼重
按 照 卫 计 委 的 规 划, 对 于 县 级 医 院 主 要 做 一 下 工 作 加 强 临 床 重 点 专 科 建 设, 提 升 县 级 医 院 医 疗 技 术 水 平, 并 配 备 与 专 科 建 设 目 标 一 致 的 适 宜 设 备 1. 县 医 院 除 了 将 健 全 一 级 诊 疗
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专科疾病诊治（二十四）
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改 觀 王 碧 雲 顏 面 麻 痺, 臉 腫 如 水 月, 雙 目 無 神, 左 眼 圓 瞠 暴 突, 右 眼 凹 陷 崩 垂, 下 顎 頦 部 鬆 弛 右 傾, 笑 起 來 嘴 歪 眼 斜, 兩 頰 連 接 頸 項 一 帶 猶 有 灼 傷 過 的 痕 跡 一 張 令 人 見 識 過 後 猶 帶 了 個 揮 之 不 去 的 夢 魘 般 的 鬼 臉, 正 張 牙 舞 爪 地 衝 擊 著 我 乍 然 回
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何 祚 庥 : 中 医 理 论 的 核 心 是 伪 科 学 环 球 人 物 记 者 路 琰 何 祚 庥 曾 经 有 言 : 中 国 传 统 文 化 有 90% 是 糟 粕 这 句 话 曾 引 起 的 一 场 笔 战 这 段 时 间, 一 些 学 者 发 布 告 别 中 医 的 言 论 再 次 引 起 了 何 祚 庥 对 中 医 的 关 注 开 始 谈 话 之 前, 他 手 里 拿 着 两 份 资 料
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目 录 第 一 章 认 识 亚 健 康 (1) 第 二 章 亚 健 康 状 况 (19) 第 三 章 与 亚 健 康 相 关 的 疾 病 (57) 第 四 章 防 治 亚 健 康 (65) 第 五 章 新 森 田 疗 法 (112) 摆 脱 亚 健 康 的 困 扰 第 一 章 认 识 亚 健 康 第 一 节 亚 健 康 的 症 状 亚 健 康 状 态 涉 及 的 内 容 很 广 泛, 各 种 内 脏
把生命托付给谁？
把 生 命 托 付 给 谁? 一 个 癌 症 患 者 的 重 生 感 悟 本 报 首 席 评 论 徐 迅 雷 2012-11-11 癌 症, 不 等 于 绝 症 癌 症, 不 等 于 死 亡 著 名 作 家 记 者 凌 志 军, 将 自 己 5 年 抗 癌 的 经 历, 写 成 重 生 手 记 一 个 癌 症 患 者 的 康 复 之 路 一 书, 日 前 出 版 在 有 个 购 书 网 站 上, 我
4 0 50 2 30 56 1957 527 1960 1961 1961 1957 20 50 527 19611966 10 10 0 05 2 0 30 0 20 30 50 0 30 0 20 0 10 40 50 0 500 80 1 20 0 20 5 100 10 155 6 1 0
1873 20 1909 56 20 14 1925 1 31 6 1 2 4 25 5 12 1 5 15 15 24 26 O 515 25 525 2 25 2 2 2 2 5 2 25 2 5 520 2 2 5 25 5 130 220 510 25 16 1950 X 30 0 04 0 02 0 10 0 05 1954 0 15 0 10 0 70 0 30 0 30 0 70 0
《中老年男性养生保健》
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二 工 资 制 度 与 教 师 道 德 风 险 行 为
义 务 教 育 学 校 绩 效 工 资 改 革 的 经 济 学 分 析 李 萍 盘 宇 章 吕 荣 西 南 财 经 大 学 成 都 本 文 利 用 委 托 代 理 理 论 对 义 务 教 育 学 校 绩 效 工 资 改 革 中 教 师 行 为 和 地 方 政 府 行 为 分 别 进 行 了 分 析 研 究 发 现 绩 效 工 资 的 最 优 设 计 是 工 资 函 数 中 包 含 一 个 固 定 支
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
河北医科大学硕士学位论文 Survivin 与 PTEN PCNA 在宫颈病变组织中的表达及临床意义姓名 : 徐韶杰申请学位级别 : 硕士专业 : 病理学与病理生理学指导教师 : 董稚明 20090301 Survivin 与 PTEN PCNA 在宫颈病变组织中的表达及临床意义
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2013年省局年报 最终.FIT)
河 南 省 知 识 产 权 局 年 报 荫 2013 第 一 章 会 议 材 料 翌 领 导 讲 话 徐 济 超 副 省 长 2013 河 南 省 知 识 产 权 宣 传 周 活 动 网 络 致 辞 同 志 们 袁 朋 友 们 院 按 照 全 国 知 识 产 权 宣 传 周 活 动 组 委 会 的 统 一 部 署 袁 我 们 坚 持 野 勤 俭 节 约 袁 务 求 实 效 冶 原 则 袁 利 用 网
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考生编号政治政治分外语外语分科目 1 科目 1 分科目 2 科目 2 分总分专业代码专业名称考试方式报名号 思想政治理论缺考英语一 45 生物综合 38 生理学缺考 药理学全国统考 思想政治理论
100019008910001 思想政治理论缺考英语一 45 生物综合 38 生理学缺考 83 078006 药理学全国统考 110190172 100019008910002 思想政治理论 61 英语一缺考药学综合 ( 缺考生理学 51 112 078006 药理学全国统考 110199187 100019008910003 思想政治理论缺考英语一缺考生物综合缺考 生物化学与分子生物学 缺考 --
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第 卷 第 辑 高 明 华 蔡 卫 星 曾 诚 股 权 结 构 与 信 息 披 露 质 量 来 自 证 券 分 析 师 盈 余 预 测 特 征 的 证 据!!
第 卷 第 辑 年 月 产 业 经 济 评 论 高 明 华 蔡 卫 星 曾 诚 本 文 利 用 年 中 国 股 上 市 公 司 的 相 关 数 据 使 用 证 券 分 析 师 盈 余 预 测 特 征 作 为 信 息 披 露 质 量 的 代 理 变 量 从 股 权 集 中 和 股 权 制 衡 的 角 度 探 讨 了 股 权 结 构 与 信 息 披 露 质 量 之 间 的 关 系 我 们 的 研 究 发
药 学 实 践 杂志 年第 卷第 期 药理 学 大 承 气 汤 改 善 家 兔 实 验 性 肺 水 肿 及 多脏 器 损 害 的 病 理 学 研 究 摘要 目的 研 究 大 承 气 汤 改 善 阳 明 腑 实喘 满 证 中 肺通 气 功 能 和 肺组 织 病 变 的 机 制 朱 晓梅 时照 组 章 忱 陈列平 李 玉梅 曾兆 麟 和 大承 气汤 组 治 疗组 卫洪昌 上 海中 医 药 大 学病理教研
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中国商人必胜宝典--各地商人性格特征剖析
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國立中山大學學位論文典藏.PDF
國 立 中 山 大 學 中 國 文 學 系 ( 暑 期 專 班 ) 碩 士 在 職 專 班 碩 士 論 文 漢 初 異 姓 諸 侯 王 研 究 研 究 生 : 林 裕 斌 撰 指 導 教 授 : 劉 文 強 教 授 中 華 民 國 97 年 5 月 摘 要 本 篇 論 文 探 究 的 對 象 是 漢 朝 初 年 八 位 異 姓 諸 侯 王, 並 涵 蓋 與 操 縱 他 們 興 盛 殞 落 息 息 相
商 周 三 代 年 代 學 的 研 究 經 過 近 五 年 的 努 力, 完 成 夏 商 周 年 表 本 大 事 概 覽 中 夏 商 周 三 代 的 大 事 紀 年, 即 採 用 夏 商 周 斷 代 工 程 的 考 論 成 果 對 於 無 法 考 證 年 份 的 史 事 或 發 生 在 史 前 時
中 外 歷 史 大 事 概 覽 編 者 說 明 : 1. 傳 說 時 代 與 夏 商 周 年 表 : 人 類 在 未 有 文 字 記 事 之 前, 口 耳 相 傳 的 神 話 傳 說, 是 先 民 對 自 然 變 化 的 體 驗 與 歷 史 經 歷 的 口 述 這 些 傳 說, 或 者 存 有 誇 張 和 穿 鑿, 隨 著 考 古 文 物 的 出 土 與 歷 史 學 家 的 努 力, 汰 偽 存 真,
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校 发 2015 28 号 北 京 科 技 大 学 实 验 室 技 术 安 全 管 理 规 定 第 一 章 总 则 第 一 条 为 加 强 学 校 实 验 室 安 全 管 理, 防 止 实 验 室 安 全 事 故 发 生, 保 障 教 职 工 及 学 生 的 人 身 财 产 安 全, 促 进 学 校 各 项 事 业 健 康 稳 定 发 展, 根 据 国 家 相 关 法 律 法 规, 结 合 学 校
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2015 年 全 国 硕 士 研 究 生 入 学 考 试 佛 山 科 学 技 术 学 院 自 命 题 考 试 科 目 考 试 大 纲 ( 科 目 名 称 : 农 业 知 识 综 合 二 科 目 代 码 :340 ) 一 考 查 目 标 农 业 知 识 综 合 二 侧 重 于 动 物 生 产 类 综 合 知 识 的 考 查 考 试 内 容 应 主 要 涵 盖 动 物 遗 传 学 动 物 生 理 学 动
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臺 北 縣 立 樟 樹 國 中 96 學 年 度 第 二 學 期 區 域 性 自 然 科 學 領 域 資 賦 優 異 教 育 方 案 實 施 計 劃 一 依 據 : ( 一 ) 特 殊 教 育 法 第 二 十 九 條 ( 二 ) 特 殊 教 育 法 施 行 細 則 第 四 條 第 二 項 ( 三 ) 身 心 障 礙 及 資 賦 優 異 學 生 鑑 定 標 準 二 目 的 : ( 一 ) 推 廣 資
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