第 * 卷第 期 年 月 - * = C 环!!境!!科!!学 +- 1+23456 +6+ 球形红假单胞菌对三苯基锡的降解性能研究 陈烁娜 叶锦韶 尹华! 彭辉 张娜 何宝燕 暨南大学环境工程系广州!* 广东省高校毒害性污染物防治与生物修复重点实验室广州!*# 摘要!以 株对三苯基锡 O: 2V2# 有高耐受性 的 球 形 红 假 单 胞 菌 23 4 14 + 4 # _ 为 对 象进 行 2V2 的微生物降解实验研究了 2& 4对 2V2降解特性结果表明2& 4对 2V2有 良 好 降 解 效 果*r 是 其 最 佳 生 长 温 度对 2V2的降解活性最大干重为 E# 4a 的 湿 菌 体在 *: 内 对 2V2的 降 解 率 为 * &h je #h在 双 蒸 水人 工 海 水培养基和江水等不同的降解介质中进行的实验表明天然 江 水 最 利 于 菌 体 对 2V2的 降 解江 水 中 的 土 著 微 生 物 对 其 降 解 2V2具有协同作用2& 4对 2V2的降解过程主要是通过菌体快速吸 附2V2进 入 细 胞 内靠 胞 内 酶 进 行 初 步 降 解之 后 菌体细胞将 2V2及其中间产物返回到细胞外靠胞外酶进一步降解E : 内菌体产生的胞外酶对 2V2的降解达到 Eh 关键词!球形红假单胞菌三苯基锡有机锡生物降解胞外酶 中图分类号!_!文献标识码!3!文章编号! ** # * -F& F & +1 X +* & F*F + +1 & 4 3 5 + # 6-45#6# 6#&##- 6\+5:> Y : Y \> V+Z\> [\3Z \+T W O F + F + ] X Z> : > * 6: ^ 4 C b 5 2 V > 6? T F? W O F +?> Z>? V Z> : > *6: # 3 & F! 2:C?? O: 2V2# C23 4 14 + 4Q? : >? 2: > >F? : 2& 4Q :C?? 2V22:F F>F F Q? Q: : Q : FO > 2& 4Q *r3 * : > : F * F 4a 2V2Q * &h E #h a > E# 4 C?? Q : # C F 2& 4 2: O F C?? 2V2Q? >? >C?? Q F>? Q > > F? >F? Q O 2: >? F? : Q Q O F :C?? :? >F F Q? : F 2V2+ > FO?>? C2& 4Q :?? 2V2? Eh 2V2Q??? C : Q Q : E : > 2: O F? : :C?? O 2V2 >?? C O C Q 2V2??? C > F : :2V2? F? O?> C I > C??? C > F I+& *!23 4 14 + 4 O: C?? > F!!有机锡化 合 物 26# 广 泛 应 用 于 V-6 的 稳 定 的微生物吸附降解 研 究对 修 复 被 该 类 污 染 物 污 染 剂杀虫剂特别是防 污 涂 料 中26作 为 防 污 涂 料 的生态环境并阐明其生物降解与转化机制具有重 可以防止海洋附着 生 物 如 海 草海 绵 水 螅 虫 等 软 体 要的意义目 前有 关 水 体 26的 研 究 涵 盖 了 26 动物对船体 海 洋 建 筑 及 钻 井 平 台 等 的 污 损但 是 的 检 测 + 区 域 分 布 + 迁 移 + * E 生 物 毒 26兼有重金属和持 久 性 有 机 污 染 物 的 特 性具 有 性 + 生 物 富 集 性 + E & 和 污 染 指 示 生 物 + # 等 高毒性持 久 性 和 生 物 富 集 性 已 导 致 包 括 软 体 动 内容但 是 有 关 水 体 26微 生 物 降 解 方 面 的 研 究 物鱼类和哺乳动物在内的物种发生性畸变行为改 鲜见报道 + 本课题组 筛 选 得 到 株 可 降 解 三 苯 变免疫力下降机 体 功 能 失 调并 会 通 过 食 物 链 的 基锡 2V2# 的 克 雷 伯 氏 菌 并 对 其 降 解 特 性 进 行 了 富集影响生态系统已 引 起 了 世 界 组 织 和 众 多 政 府 深入研究发现 菌体分 泌物胞内 酶 均 对 2V2有 良 的重视 + j 好降解作用 + * j 26在水体中的迁 移 转 化 途 径 包 括 光 解沉 积 本研究继续以三苯基锡 2V2# 作 为 代 表 性 26 物的吸附 与 解 吸 作 用 + 生 物 富 集 以 及 生 物 降 解 作 用在 这 些 途 径 中 只 有 光 解 和 生 物 降 解 能 将 26从环 境 中 去 除 而 那 些 不 暴 露 于 紫 外 线 下 的 26的去除主要靠微 生 物 作 用 + &# 因 此开 展 26 收稿日期# * 修订日期# E 基金项目#国家自然科学基金项目&&X#**# 作者简介#陈烁娜#& j# 女 硕 士 研 究 生 主 要 研 究 方 向 为 污 染 控制与环境污染的生物修复+ F!:H : K F F! :H KH >?>! 通讯联系人 +
期 陈烁娜等!球形红假单胞菌对三苯基锡的降解性能研究 * 污染物探讨了 株 球 形 红 假 单 胞 菌 对 其 生 物 降 解 Y甲 醇 wy水 wy h 三 氟 乙 酸 溶 液 nw Ew # 定容至 F4 特性同时考察其在不同水质体系中的降解情况以!检测方法 期为环境 26污 染 的 生 物 修 复 和 降 解 机 制 进 一 步 研究提供基础数据 F? >] O # 进 利用岛津高 效 液 相 色 谱 仪 5: 行检测色谱 柱 为 5: F O I -V W5 FF# 柱 温为 r流动相 流 速 为 F4 F a 进 样 量 K材料与方法 为 *4紫外检测波长为 F!实验试剂和材料 实验 菌 种!实 验 室 筛 选 驯 化 保 藏 的 株 球 形 红 假单胞菌命名为 _ K结果与分析 K降解时间对 2V2降解的影响 实验试剂!三 苯 基 氯 化 锡 2V2# 和 甲 醇 购 买 于 图 是 E# 4a 投 菌 量 干 重 # 在 短 时 间 5 F 3? : 公司 牛 肉 膏 蛋 白 胨 葡 萄 糖 6 内对 2V2的降 解情况从 图 可 知 j# F 内 E \ ^\ VE \E 6 1 5E 无 水 \V 菌 _ 对 2V2的降解速度缓慢# jf 内降解 5 E 等购买于广州化学试剂厂乙 酸 乙 酯 购 买 于 速度迅速 上 升 在 F 达 到 最 大 值 降 解 率 为 天津市富宇精细化工有限公司 E h之 后 则 变 得 稳 定 为 E h je #h 三 苯 基 氯 化 锡 储 备 液!用 甲 醇 溶 解 三 苯 基 氯 化 a 这说明 菌 _ 在 短 时 间 内 对 2V2的 降 解 是 一 个 快 锡配制成 4 的储备液Er保存待用 速的过程在 F 之 后 随 时 间 延 长 菌 对 2V2!培养基和培养条件 没有进一步降解 营养培养基!牛肉膏 * 蛋白胨 6 蒸馏水 F4O\为 E j 无机 盐 培 养 基 1# #! E\ & \V ^\ VE * 6 \E 6 1 5E E# 蒸馏水 F4 人工 海 水 +! 6E 1 6 \ * 蒸馏水 F4 5 E\ # 所有培养基均 r高压蒸汽灭菌 * F 培养条 件! 除 特 殊 说 明 外 均 *r 恒 温 摇 床 振 荡避光培养转速为 * F a 图 K降解时间对菌降解 2的影响 =!W? 2V2C 2& 4 F K菌株对 2V2的生物降解实验!胞外酶对 2V2的降解作用!菌悬液的制备 用已 灭 菌 的 接 种 环 挑 取 环 固 体 培 养 的 菌 体 为了考察 _ 胞外酶 对 2V2降 解 效 果 的 影 响 _ 以无菌 操 作 接 入 F4已 高 压 蒸 汽 灭 菌 的 营 按总体系 h接入菌悬液*r* F a 培 养 条 养 培养液中活化 E :离心 F a r# 件下活化 E :离 心取 上 清 液 F4进 行 2V2的 F 用缓 冲 液 洗 涤 次 每 支 离 心 管 加 入 F4的 降解实验实验结果表明其降解效果明显如图 所 1# 培养液制成菌悬液备用 示2V2的 降 解 率 随 时 间 的 延 长 而 提 高E : 达 到!2V2的生物降解 EEh之后其 增 长 速 度 趋 于 平 缓E&: 的 降 解 率 a 往 2V2浓 度 为 *F 4 的 培 养 液 中 接 入 F4 a 为 # h综合 节 的 实 验 结 果菌 体 细 胞 菌悬液使总体系为 F4* F *r 条件 下 对 2V2的降解在 : 达 到 最 大 值体 系 中 2V2残 余 恒温避光培养 浓度为 && F 4a 而胞 外 酶 在 : 对 2V2的 降!分析方法 解率较低可见 2V2在 : 内快速被菌体吸附并 可!样品的预处理 能作为碳源被微生物利用实现降 解之 后 随着 2V2 取出样品后加入 F 6 用 \6溶 液 调 + 积累过多不利于菌体生长微生物通过膜蛋白物质 萃 取 运输机 制主 动把 部分 2V2运 输 到 细胞 外体 系 中 的 液于 F Er 离 心 &F 上 清 液 加 无 水 2V2浓度随时 间逐渐增 多 : 为 F 4a 在 硫酸 钠 脱 水 后 于 Er 旋 转 蒸 发 至 干 用 流 动 相 胞外菌 体 依 靠 胞 外 酶 对 2V2进 一 步 降 解 溶 液 中 节样品 O\至 之后用乙酸 乙酯 萃取 次 a
*& 环!!境!!科!!学 2V2浓 度 在 : 之 后 快 速 降 低 E : 为 *& a F 4 实现 2V2的 生 物 解 毒 图 * 反 映 了 降 解 体 * 卷 菌体的胞外酶对比菌液的降解效果胞 外 酶 对 2V2 的降解周期延长了 系中 2V2含 量 随 时 间 的 变 化结 合 图 j* 可 以 推 断 2V2的降解主要 是 通 过 菌 体 快 速 吸 附2V2进 入 细胞内靠 胞 内 酶 进 行 初 步 降 解 之 后 菌 体 细 胞 将 2V2及其中间产 物 解 析 到 细 胞 外 靠 胞 外 酶 进 一 步 降解在这 个过程中胞内酶 主要是 降低了 2V2的 毒 性并有利 于 2V2及 其中 间产 物在菌 体细胞 外的 进 一步降解 图 K不同温度下菌体产生的胞外酶对 2的降解 = E!W? 2V2C > F O?>? >?? FO >!2V2初始浓度对菌降解 2V2的影响 从图 可以 看 出2V2在 实 验 设 置 的 浓 度 范 围 内最终都能被 菌 有 效 降 解 在 降 解 的 过 程 中# : 前 2V2的 浓 度 是 快 速 下 降 之 后 趋 于 平 缓不 同 初 图 K胞外酶随时间变化对 2的降解情况 =!W? 2V2C > F 2& 4 F 始浓度 的 2V2降 解 & : 后 剩 余 浓 度 不 同 当 2V2 初始浓度分别为 * F 4a 和 F 4a 时降解? 体系中 2V2残余浓度分别为 F 4a 和 * F 4a 而当 2V2初始浓度为 F 4a 时? 降解 后体系中残余浓度为 E F 4a 用下列动力 学 方 程 式 进 行 菌 _ 对 2V2的 生 物降解动力学分析! :6 #?!! :6 #?!# 6 : 图 K降解体系中 2含量随时间的变化 = *!6: 2V2 : F F! #?!# 式中 为污染物的初始浓 度 F 4a #!为 #时 刻 污染物已反应掉的 浓 度 污 染 物 初 始 浓 度 减 去 反 应 生 长 环 境 的 改 变会 使 微 生 物 的 生 理 特 性 发 生 后体系中污染物的浓度F 4a # 当 #n!n 时 变化因 为 菌 _ 细 胞 内 含 有 类 胡 萝 卜 素 培 养 温 计算结 果表 明菌 _ 对 2V2的 生 物 降 解 度改变使 菌 体 在 *r* F a 的 培 养 条 件 下 : 会在培养液中积累 有 颜 色 的 水 溶 性 代 谢 产 物为 了 过程符合二级反应动力学其分析结果如图 所示 验证胞外酶 提 取 液 中 水 溶 性 色 素 对 2V2降 解 是 否 动力 学 计 算 参 数 和 结 果 见 表 由 计 算 结 果 可 知 有影响做了另一组对比实 验!按 总 体 系 h 接 入 菌 2V2浓 度 为 F 4a 时 降 解 的 半 衰 期 最 短 实 验 a 悬液在 *r* F 培养条件下 在 此 温 度下 结果显 示较 高浓度 的 2V2有 利 于 菌 对其 的 降 解但 菌不 会 产 生 水 溶 性 色 素 # 活 化 E: 的 菌 液 离 心 取 是环 境 中 2V2的 含 量 通 常 很 低 一 般 不 超 过 上清液 F4同等条件下进行 2V2的降解实验实 4a 与 本 实 验 条 件 相 比 环 境 中 的 降 解 菌 与 F 验结果如图 E 所示说 明 胞 外 酶 提 取 液 中 的 水 溶 性 2V2接触的机会 较 小而 且 通 过 节 实 验 结 果 分 色素并不会 对 菌 体 的 胞 外 酶 降 解 2V2产 生 明 显 的 析2V2与菌体吸附后2V2还要通 过 跨 膜 运 输 进 入 影响在降 解体系中对 2V2具 有良好 降解 效果 的 是 细胞内被胞内酶初步降解之后再解析到细胞外由
期 陈烁娜等!球形红假单胞菌对三苯基锡的降解性能研究 *# 胞外酶进一步降 解上述 各 种因素 决定 了 2V2的 降 其生长从 实 验 结 果 可 以 看 出 菌 _ 可 以 较 好 地 解周期很长现有的 现 场 监 测 结 果 也 表 明 有 机 锡 的 利用 2V2作为碳源通过降解 2V2为细胞提供必要 半衰期长达数月在沉积物中的半衰期则更长可达 组成成分又为细胞 维 持 生 命 活 动 提 供 了 所 需 的 能 数年至数十年 + & # 源物质双蒸水不含有任何营养物质微生物单单依 靠 2V2作为碳 源 生 长 受 到 抑 制 因 此 2V2降 解 率 势必较低总之由于不同水中营养程度差异导致了 水中生 物量 的不同从而造 成 了 2V2生 物 降解 效 率 的差异 图 QK不同浓度的 2随时间变化的降解情况 =!+ 2V2?? 表 K降解动力学计算结果 2 C!^ d> 2V2?? 2V2初始浓度 F 4a 动力学方程 速率常数 半衰期 : : a 图!K菌体在不同水质中对 2的降解效果 相关系数 2# =!+ C>?? 2V2C 2& 4 n * #i * * & * #* & * n * #i * & * & n * #i * E ## & 为考察天然江水中土著微生物对降解菌降解 n * #i E * #& 2V2的影响分 * 种条件设置了对 比 实验!!往 定 量 K天然江水中土著微生物对 2V2降解的影响 天然江水中添加 2V2不加菌往灭 菌 的江 水 中 添 K降解介质对菌降解 2V2的影响 加 2V2和菌#往天然江水中添加 2V2和菌* 组实 K水中营养盐对 2V2降解的影响 验中 2V2 浓 度 均 为 * F 4a 投 菌 量 为 E# 采用不同类型的 水 质 进 行 : 的 2V2生 物 降 解 4a 并以灭菌的江水为对照实验结果显示土 著 实验实验结果显示 图 # 天然江水最有 利 于 菌对 微生物和降解 菌 联 合 作 用 : 内 对 2V2的 降 解 率 2V2的降解: 内 降 解 率 为 *#h1# 培 养 基 和 达到 *#h 单 独 依 靠 降 解 菌 : 的 降 解 率 为 灭菌的江水次之人工海水效果最差 EE h而 土 著 微 生 物 : 对 2V2的 降 解 只 有 不同类型的微生物具有不同的适应盐浓度的生 &h结果表明天然江水中土著微生物对降 解菌 理机制人工 海 水 中 含 有 较 高 浓 度 的 6 会导致 降解 2V2有 促 进 作 用 两 者 是 协 同 关 系在 协 同 作 较高的渗透压从而使微生物细胞发生质壁分离同 用过 程 中 土 著 微 生 物 将 难 降 解 的 2V2进 行 转 化 时营养吸收和 W3复制受到抑制阻碍了微生 物的 减少其对微生物的 毒 害 作 用使 其 成 为 更 容 易 被 降 生长进而抑制了微生物对污染物的降解江水采集 解 菌 利 用 的 物 质 从 而 促 进 了 降 解 菌 对 2V2的 于广东珠江不仅含 有 微 生 物 生 长 所 需 的 各 种 营 养 降解 物质而且通过 实 验 E 节 证 明 了 江 水 中 的 土 著 这里提到的协同作用是指在污染物完全氧化过 微生物跟 2V2降解菌 具有协同 作 用土著 微生物 的 程中有多种微生物 参 与有 些 污 染 物 不 能 作 为 微 生 存在有力地促进了菌 _ 对 2V2的 降 解灭 菌 的 江 物的唯一碳源和能 源 以 维 持 其 生 长它 们 只 是 在 微 水由于不含有微生物单独依靠降 解菌 来降解 2V2 生物利用生长基质 时被 微 生 物 产 生 的 酶 降 解 或 成 因此 2V2的 降 解 率 低 于 天 然 江 水1# 培 养 基 是 根 为不完全氧化产物这 种 不 完 全 氧 化 产 物 进 而 可 以 据微生物生长所必须营养物质而配制的无机盐培养 被别的微生 物 利 用 并 彻 底 降 解 + * 因 而在 纯 培 养 基里面含有微生 物 生 长 所 需 的 氮 源无 机 盐但 不 时不存 在 协 同 作 用 污 染 物 只 是 一 种 截 止 式 转 化 含碳源微生物需充 分 利 用 污 染 物 作 为 碳 源 来 维 持??? F #而在混合 培 养 和 自 然 环
E 环!!境!!科!!学 * 卷 境中这种转化可以 为 其 它 微 生 物 的 降 解 作 用 铺 平 胞结构和酶的活性最强 当温度在 j*r降解率随 道路以共代谢方 式 使 难 降 解 污 染 物 经 过 多 种 微 生 着温度的升高而升高然而到达 *r之后进一步升温 物的协同作用而得到彻底分解 + * QK温度对菌降解 2V2的影响 并不会带 来更 高 的降 解率但从 图 可 以 看出此 时 2V2的降解率仍然高于 rr的降解情况这说明 考虑 到 实 际 环 境 的 温 度 是 变 化 的为 找 到 菌 株 高温比低温更有利于菌株对 2V2的降解 对比图 中 最佳的 降 解 温 度 提 高 其 对 2V2的 降 解 率 同 时 为 种体系 2V2的降解效果又一次说明天然江水更有利 以后原位生物修复 提 供 参 考考 察 了 不 同 温 度 下 菌 于菌对 2V2的降解 株对 2V2的 降解情况由 于天 然水体 的温 度一般 不 会超过 *r所 以 将 菌 株 接 种 于 培 养 体 系 分 别 于 * 和 *r振荡培养 : 后 测 定 其 降 解 率并 在 种不同水质体系中进行对比实验 K结论 # 球 形 红 假 单 胞 菌 23 4 14 + 4 # 对 2V2有 良 好 的 降 解 效 果 E# 4a 的 温度对微生物的影响包括直接效应和间接效 菌体 干重# 在 * : 内对 2V2的降 解率 为 * &h j 应与 2V2的 微 生 物 降 解 密 切 相 关直 接 效 应 包 括 E #h2v2的 降 解 过 程 符 合 二 级 反 应 动 力 学 影响微生物的生长代谢酶活性细胞组成和营养需 *r是菌最佳生长温度对 2V2的降解活性最大 求等间接效应包括 影 响 降 解 体 系 中 溶 质 分 子 的 溶 # 2& 4产生的胞外酶对 2V2有良好的 解性离子的运输与扩散细胞膜渗透压及表面张力 降解作用E : 内对 2V2的降解达 到 Eh菌 体 等 + * 微生物体中发挥降解作 用的 酶是一 种 生 物催 对 2V2的降解 过 程 主 要 是 通 过 菌 体 快 速 吸 附 2V2 化剂酶分子的化学结构决定了其活性温度过高会 进入细胞内靠胞内酶进行初步降解之后菌体细胞 导 致 酶 构 象 的 破 坏 从 而 丧 失 其 原 有 的 生 物 活 将 2V2及其 中间 产物 返回 到 细胞 外靠 胞 外酶 进 一 性 + ** 因此其具 有 最 适 反 应 温 度当 环 境 温 度 低 于 步降解 最适温度时酶会 失 活无 法 发 挥 降 解 特 性此 时 升 *# 对比各种降解介质 中 菌 体 对 2V2的 降 解 效 温可以加快降解反应当温度过高时酶会变性而失 果发现 天 然 江 水 最 有 利 于 菌 体 对 2V2的 降 解营 活从而导致降解反应速度随温度升高而降低温度 4对 2V2的降解天 养物质的供给能促进 2& 不仅会对酶产生影 响还 会 影 响 微 生 物 细 胞 内 的 蛋 然江水中的 土 著 微 生 物 对 吸 附 降 解 菌 降 解 2V2具 白质温度过低会使菌体细胞内蛋白质的合成速率 有协同作用两者联合作 用 : 内 对 2V2的 降 解 率 降低进而影响了 微 生 物 的 生 长温 度 过 高又 会 使 达到 *#h 细胞内生物大分子发生热变性另外温度的变化还 会改变细胞膜的结 构进 而 影 响 了 细 胞 膜 对 营 养 物 质的运输 如图 所示温度对 2V2的微生物降解影响显著 实验结果表明 *r最有利于菌对 2V2的降解此时 : 降解率达到 E# *h综合前面的分析因为 *r是微 生物的最佳生长温度该温度下菌生物量最大各种细 参考文献# +!:: 5 b C1 1 >\1 C F C>? O: C : F? :>F : O F F + ] EE 3 : 2 * * #!*& +!Y e [: > e = 4 > ]Y T> FO >? F > F 6: T : Q =? 6: F E#! * E* + *!V Z 6: Q? : F b 1 4 W?? F O: FO >? + ] + V > *#! E + E!\ 4 \ = : 3 Z -? ]4 1 5 >? : >F> C>? O: FO >?? : C +# 31! >? F F C : 5 C : 2 + F C? + ] 5 T * #! # #& +!\> ]\ 5 :Q W 1 + FO >? O O?? F Z F + F V > E #! & 图 K不同温度&不同体系中菌对 2的降解 =!W? 2V2C 2& 4? Q >?? FO > +!- > > 4 ]= Q >??> C? + ] 5 :2 + F * #! ** *&
期 陈烁娜等!球形红假单胞菌对三苯基锡的降解性能研究 +!6 >3 6 2 5> >I5 & + + E +#!W} 5] + 3 C ] >????? C >F? F > C> 2T2# C>? Q Q F I FO >?? F F? 3 V > + ] 1 F 5O + ] + F T : C + F :! #! *# + &!W>C 5 ^ XT?? C> # C F C + ] 3OO?! F 6: F * #! * & + #!5 I 3 5 2: F? C 5 I >3 3 C C?? FO >?? >? C : + F V > * #! E*E E*& +!6: 5 5 6 5O C>? #! && & +![: > e = ] Z T 4 > ]Y3 >? : C> :6: F Q V > 1 # T# *! * #! E* 5 6: 5 +!1 ]W] >?351 3 ]1 6 FO >? C> QC : > 1 + Y # #! #E* #E# 2 +!2 6^4 > V52 =Y T?? O O: FO >?? F > O >? d>? + F V > C> C Q3?> >O?? d>? : F O: # ### Q * #! &# # O FF O F + ] ] > 6: F O: 3 T #! * E +!W>? 1 ] 2: >? Z W : 2 & 5O? FO >?Q : FC >F 6: F O: * Q #! * C +!袁东星钟树明杨东宁厦门 西 港 和 闽 江 口 表 层 沉 积 物 中 有 台湾海峡 #! # # 机锡含量分布+ ] +*!- I23 - : I 3 W 3 H ^ = F? >?? F? F? : FO : 5 :? > 2: :? # + F V >! #! # * +*!叶锦韶史一枝尹 华 等水 体 沉 积 物 中 三 苯 基 锡 的 高 效 液 相检测+ ] 暨 南 大 学 学 报 自 然 科 学 版 # # #!& && +E!叶锦韶史一枝尹 华 等三 苯 基 锡 吸 附 降 解 菌 的 分 离 及 特 环境科学# & #!E E 性研究+ ] +!叶锦韶史一枝尹 华 等克 雷 伯 氏 菌 对 三 苯 基 锡 的 酶 促 降 解特性+ ] 环境科学 #!E# EE +! 张 正 斌 刘 莲 生海 洋 物 理 化 学 + 1 北 京! 科 学 出 版 社 #&# & +!周公度主 编化 学 辞 典 + 1 北 京! 化 学 工 业 出 版 社E &* & +E!] >?=3 O 6 T : 6 6 2C 3T1 F>? > +&! W>C 5 ^ XT?? C> # 14 + >O>FO? Q : C> C F C + ] 3OO? F 6: F # 1# =+15 1 C 4 E #! E +!:: 5 b C1 1 >\1 C F C>? * #! * & +#!2 + 3F > >W 1 3 2 # T> C O: C : F? :>F : O F F + ]??? O :Q? FO F EE 3 : 2 * * #!*& :Q F? F + ] 5 : 2 +!V Z 6: Q? : F b 1 4 W?? + F TT * #!E ** O: FO >? + ] + F +*!夏淑芬微生物生态学+ 1 武汉!武汉大学出版社#&& V > * #! E +*!曹晓星多环 芳 烃 降 解 菌 的 共 代 谢 及 其 相 关 酶 的 研 究 + W +!6:? > 55 I 3 5 2: F? 5 W C> FO >? :C :3 5 Z + F #! * +&!W F > V 6 6 : ] 1 > \ 3 > 厦门! 厦门大学 +*!刘志恒现 代 微 生 物 学 + 1 第 二 版 # 北 京! 科 技 出 版 社 & +**!V : ] W1 64 O 5 ] > O C> :?? O: :? :? FO > FC F 3 C F 11# 4 FC + ] +?? C : > > + ] + F? 1 C 2 : & + F 5 * Q! * * #!