中 南 大 学 学 报 医 学 版! 无 排 卵 性 功 能 失 调 性 子 宫 出 血 患 者 血 清 标 志 物 的 筛 选 鉴 定 及 其 在 月 经 血 中 的 表 达 包 珊 杨 舒 盈 王 历 海 南 省 人 民 医 院 妇 产 科 海 口 摘 要 目 的 筛 选 并 鉴 定 无 排 卵 性 功 能 失 调 性 子 宫 出 血 (8/,(*-+/ (,/!*!,!!- 患 者 血 清 中 的 蛋 白 标 志 物 并 检 测 被 筛 选 蛋 白 标 志 物 在 患 者 月 经 血 中 的 表 达 探 讨 其 与 的 相 关 性 方 法 采 集 : 例 患 者 例 月 经 正 常 妇 女 对 照 组 的 血 液 标 本 分 离 血 清 同 时 收 集 她 们 的 月 经 血 分 离 上 清 应 用 5 蛋 白 芯 片 进 行 蛋 白 质 检 测 采 用 (*.!*(*- 软 件 分 析 检 测 结 果 应 用 *!44 7 胶 分 离 质 谱 鉴 定 和 免 疫 共 沉 淀 对 检 测 到 有 差 异 的 蛋 白 质 峰 进 行 蛋 白 质 鉴 定 然 后 采 用 %&42752 和!!* 印 迹 检 测 被 筛 选 标 志 蛋 白 在 患 者 月 经 血 上 清 中 的 表 达 结 果 筛 选 到 个 有 差 异 的 蛋 白 质 峰 其 中 患 者 组 在 :. 的 蛋 白 质 峰 强 度 值 明 显 大 于 对 照 组 在. 的 蛋 白 质 峰 强 度 值 明 显 低 于 对 照 组 两 组 在 蛋 白 质 峰 为 : 和. 的 强 度 值 差 异 没 有 统 计 学 意 义 F :. 的 蛋 白 质 峰 被 鉴 定 为 血 清 淀 粉 样 蛋 白 4. 的 蛋 白 质 峰 被 鉴 定 为 血 管 内 皮 细 胞 生 长 因 子 C 在 患 者 月 经 血 上 清 中 4 表 达 显 著 高 于 对 照 组 而 C 的 表 达 明 显 低 于 对 照 组 结 论 成 功 筛 选 和 鉴 定 出 与 相 关 的 两 个 血 清 蛋 白 标 志 物 4 和 C 患 者 4 表 达 上 调 而 C 表 达 下 调 这 是 病 因 或 疾 病 发 生 结 果 还 有 待 进 一 步 证 实 关 键 词 无 排 卵 性 功 能 失 调 性 子 宫 出 血 蛋 白 标 志 物 血 清 淀 粉 样 蛋 白 血 管 内 皮 细 胞 生 长 因 子 表 面 加 强 激 光 解 析 离 子 化 飞 行 时 间 质 谱 中 图 分 类 号 2 文 献 标 识 码 文 章 编 号 :! (!!! 4( 4/ %!"*(! +&"& ( &&!(!! "!! *+(*!! (- -!+!!*/ (*.!*+(8/,(*-+/ (, /!*!,!!- -!!*!!!*! +(*.!**!!!+(!(- 8!(!!*!,(!!! (-!(*.!**!, 4/>!,/-!- : (!(- (!(!- *, *(,!!*!*/ (- /!* ((+!!!*!,!!- (- *!- +*/!(":!-+!*!(,*!!!*/ +! */!*!-!!!- 5 (- ((,!- (*.!*(*- +(*!!!-+!*!(,*!!*!-!+!- *!447!,!(*(!*!*-!+( 收 稿 日 期 " " 作 者 简 介 包 珊 硕 士 副 主 任 医 师 主 要 从 事 妇 科 内 分 泌 疾 病 的 研 究 通 讯 作 者! 包 珊 (,((( 基 金 项 目 "! 海 南 省 自 然 科 学 基 金 *. (/*!-!(/*!4!!/ -( +6(( 7*8! 725(
无 排 卵 性 功 能 失 调 性 子 宫 出 血 患 者 血 清 标 志 物 的 筛 选 鉴 定 及 其 在 月 经 血 中 的 表 达 包 珊 等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功 能 失 调 性 子 宫 出 血 -+/ (,/!*!,!!- 简 称 功 血 是 妇 科 常 见 病 是 指 丘 脑 下 部 " 垂 体 " 卵 巢 轴 神 经 内 分 泌 失 调 所 致 的 子 宫 异 常 出 血 其 中 无 排 卵 性 功 血 (8/,(* -+/ (,/!*!,!!- 占 : = 排 卵 型 功 血 8/,(* -+/ (, /!*!,!!- 占 = 近 年 来 致 病 机 制 的 研 究 无 突 破 性 进 展 本 研 究 采 用 蛋 白 质 组 学 的 新 技 术 4%& 对 患 者 和 正 常 妇 女 血 清 中 的 标 志 蛋 白 进 行 筛 选 同 时 采 用 *!44 7 胶 分 离 质 谱 鉴 定 和 免 疫 共 沉 淀 对 检 测 到 有 差 异 的 蛋 白 质 峰 进 行 蛋 白 质 鉴 定 并 采 用 %&4 2752 和!!* 印 迹 进 一 步 验 证 被 鉴 定 的 蛋 白 质 在 患 者 和 正 常 妇 女 月 经 血 中 的 表 达 旨 在 筛 选 的 标 志 蛋 白 初 步 探 讨 的 病 理 机 制 / 对 象 与 方 法 对 象 患 者 : 例 来 自 : 年 月 至 : 年 月 在 海 南 省 人 民 医 院 妇 产 科 确 诊 的 住 院 病 人 或 门 诊 病 人 无 其 他 疾 病 年 龄 : : 岁 其 中 :? 岁 组 人? 岁 组 人? 岁 组 人? 岁 组 人? 岁 组 : 人? 岁 组 人 例 对 照 者 为 同 期 来 该 医 院 做 健 康 体 检 月 经 正 常 的 妇 女 无 其 他 疾 病 年 龄 岁 其 中 :? 岁 组 人? 岁 组 人? 岁 组 人? 岁 组 人? 岁 组 人? 岁 组 人 组 和 对 照 组 年 龄 差 异 无 统 计 学 意 义 F 主 要 试 剂 和 仪 器 5 膜 购 自 瑞 典!*( 公 司 7*!!(- *!( 5674,!*, 75 等 购 自 美 国 4( 公 司 各 种 抗 体 均 购 自 美 国 2.,(- 公 司 2752 试 剂 盒 购 自 美 国 7*!( 公 司 %&4 试 剂 盒 购 自 美 国 % 公 司 *, 购 自 公 司 ( 酶 (*.!* 蛋 白 质 (*.!* 购 自 (.(*( 宝 生 物 工 程 大 连 有 限 公 司 引 物 在 上 海 生 物 工 程 有 限 公 司 合 成 74 &5 型 蛋 白 芯 片 阅 读 仪 购 自 美 国 5!*! 公 司 -!, 酶 标 仪 凝 胶 图 像 分 析 系 统 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 仪 和 转 膜 装 置 购 自 美 国 2(- 公 司 42 质 谱 仪 购 自 美 国 & 公 司 7!*,. 扫 描 仪 购 自 美 国 ( 公 司 -! 近 红 外 双 色 激 光 成 像 系 统 购 自 美 国 基 因 有 限 公 司 方 法 标 本 采 集 和 处 理 无 菌 采 集 研 究 对 象 月 经 期 % 抗 凝 血 室 温
: 中 南 大 学 学 报 医 学 版! 下 静 置 * 离 心 取 血 清 分 装 ": 保 存 备 用 无 菌 条 件 下 采 集 % 抗 凝 月 经 血 室 温 下 静 置 * 离 心 取 上 清 分 装 ": 保 存 备 用 尽 量 避 免 采 集 月 经 血 块 5 蛋 白 芯 片 检 测 将 65,,% % 加 在 5 蛋 白 芯 片 : 个 点 6 的 表 面 湿 盒 中 放 置 去 离 子 灭 菌 水 洗 遍 然 后 将 芯 片 安 装 于 生 物 处 理 器 上 在 每 一 点 上 先 加 % 结 合 缓 冲 液 振 荡 重 复 次 每 点 加 血 清 % 室 温 下 振 荡 孵 育 弃 样 品 每 点 加 % 结 合 缓 冲 液 振 荡 洗 涤 次 每 次 最 后 每 点 再 用 %674,% 6 洗 涤 次 待 芯 片 表 面 自 然 晾 干 后 每 点 加 %47 重 复 次 用 蛋 白 质 芯 片 阅 读 机 进 行 蛋 白 质 谱 分 析 阅 读 芯 片 时 参 数 设 置 如 下 信 噪 比 为 激 光 能 量 为 检 测 器 敏 感 度 为 每 个 样 本 收 集 次 最 佳 检 测 的 分 子 质 量 范 围 为? / 仪 器 采 用 已 知 的 肽 或 蛋 白 混 合 物 5!*! 进 行 分 子 量 的 校 准 为 减 少 误 差 所 有 样 品 同 时 进 行 4%& 检 测 分 析 *!44 7 胶 分 离 和 质 谱 鉴 定 将 等 量 处 理 的 血 清 进 行 *!44 7 凝 胶 电 泳 C 考 马 斯 亮 蓝 染 色 成 像 切 下 差 异 蛋 白 质 带 用 灭 菌 水 洗 次 脱 色 直 到 胶 块 透 明 每 管 加 入 = 5 待 胶 块 变 白 缩 小 后 吸 出 5 胶 块 干 燥 后 加 入 = * 消 化 肽 段 混 合 液 经 5: 除 盐 后 用 (4& 源 427/,(*& 质 谱 仪 进 行 分 析 蛋 白 质 的 鉴 定 采 用 肽 质 量 指 纹 谱 技 术 7 和 肽 序 列 标 签 技 术 74 使 用 搜 索 引 擎 ( (*!! 在 5& 数 据 库 中 搜 索 最 终 确 定 蛋 白 质 的 相 关 信 息 免 疫 印 迹 等 量 样 品 用 = 的 44 7 胶 进 行 分 离 后 转 移 到 硝 化 纤 维 膜 上 用 = 的 脱 脂 奶 粉 4 封 闭 加 入 被 筛 选 蛋 白 质 的 多 克 隆 抗 体 孵 育 =!! 4 洗 膜 次 每 次 加 入 碱 性 磷 酸 酶 标 记 的 抗 兔 & 孵 育 =!! 4 洗 膜 次 每 次 用 5&7 作 为 显 色 剂 显 色 免 疫 沉 淀 取 % 蛋 白 珠 子 于 7 管 74 洗 次 取 % 被 筛 选 蛋 白 质 的 抗 体 用 免 疫 沉 淀 缓 冲 液 以 稀 释 后 与 洗 过 的 珠 子 混 匀 缓 慢 颠 倒 结 合 室 温 下 放 置 * 离 心 去 上 清 用 74 洗 次 每 次 洗 后 * 离 心 取 % 标 本 用 免 疫 沉 淀 缓 冲 液 以 稀 释 混 匀 后 加 入 上 述 珠 子 中 混 合 过 夜 次 日 用 74 洗 反 应 后 珠 子 次 后 珠 子 的 一 半 用 有 机 洗 脱 缓 冲 液 洗 脱 用 于 蛋 白 芯 片 阅 读 机 的 分 析 另 一 半 用 E44 上 样 缓 冲 液 煮 沸 去 除 上 清 用 于 44 7 胶 分 离 用 等 体 积 的 74 代 替 被 筛 选 抗 体 或 代 替 品 作 为 阴 性 对 照 74 本 身 作 为 系 统 的 空 白 对 照 %&4 检 测 用 直 接 %&4 法 检 测 标 本 中 被 筛 选 到 的 蛋 白 质 的 含 量 测 定 值 以 值 表 示 样 品 以 包 被 缓 冲 液 稀 释 每 孔 加 入 % 稀 释 样 品 包 被 过 夜 次 日 每 孔 用 % 洗 涤 缓 冲 液 洗 遍 封 闭 液 封 闭 % 洗 涤 缓 冲 液 洗 涤 并 立 即 弃 掉 被 筛 选 蛋 白 质 抗 体 用 74 以 稀 释 % 孔 孵 育 74 洗 次 加 入 用 74 稀 释 的 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 的 抗 兔 & % 孔 孵 育 74 洗 遍 用 邻 苯 二 胺 7 显 色 后,% 硫 酸 终 止 反 应 采 用 -!, 型 酶 标 仪 在 处 检 测 和 数 据 采 集 每 个 样 品 做 次 平 行 试 验 2752 提 取 总 2 网 上 查 阅 待 检 基 因 的 基 因 序 列 并 设 计 待 检 基 因 的 752 扩 增 引 物 根 据 逆 转 录 试 剂 盒 操 作 说 明 合 成 第 一 链 以 逆 转 录 合 成 的 为 摸 板 752 扩 增 目 的 基 因 :!!* 印 迹 检 测 取 % 从 月 经 血 中 分 离 的 上 清 于 % 离 心 管 中 * 离 心 将 上 清 转 移 到 一 新 的 离 心 管 中 取 : % 上 清 与 % 的 E 变 性 / +!* 混 合 煮 沸 冰 上 冷 却 后 分 装 保 存 于 " 取 % 处 理 好 的 样 品 上 样 块 44 7 胶 一 般 只 能 上 个 左 右 的 样 品 C 电 泳 转 膜 5 膜 将 膜 在 74 中 润 湿 几 分 钟 -! 封 阻 液 封 阻 膜 用 -! 封 阻
无 排 卵 性 功 能 失 调 性 子 宫 出 血 患 者 血 清 标 志 物 的 筛 选 鉴 定 及 其 在 月 经 血 中 的 表 达 包 珊 等 液 稀 释 一 抗 室 温 下 孵 育 一 抗 或 更 长 时 间 并 缓 慢 摇 动 用 足 够 的 抗 体 溶 液 覆 盖 整 张 膜 室 温 下 用 足 量 的 74 加 =!! 溶 液 轻 柔 洗 膜 次 每 次 用 -! 封 阻 液 稀 释 红 外 染 料 标 记 的 二 抗 室 温 条 件 下 轻 摇 孵 育 二 抗? 避 光 操 作 室 温 下 用 足 量 的 74 加 =!! 溶 液 轻 柔 洗 膜 次 每 次 避 光 操 作 用 74 冲 洗 去 除!! 膜 扫 描 成 像 蛋 白 质 谱 图 分 析 蛋 白 质 谱 图 *! *+,! 进 行 归 一 化 处 理 后 采 用 (*.!*(*- 软 件 进 行 分 析 参 数 设 置 如 下 峰 的 信 噪 比 为 最 低 出 现 频 率 阀 值 为 = 5,/!* 质 量 偏 差 为 = 次 级 标 峰 阀 值 的 信 噪 比 为 统 计 学 处 理 数 据 库 建 立 统 计 学 分 析 和 统 计 图 表 制 作 均 使 4744 软 件 包 计 量 资 料 的 统 计 学 分 析 采 用 方 差 分 析 计 数 资 料 的 统 计 学 分 析 采 用 检 验 为 差 异 有 统 计 学 意 义 结 果 标 志 物 的 筛 选 结 果 在 患 者 和 对 照 者 的 血 清 中 筛 选 到 个 有 差 异 的 蛋 白 质 峰 其 中 组 在 :. 的 蛋 白 质 峰 强 度 值 明 显 大 于 对 照 组 图 在 :. 的 蛋 白 质 峰 强 度 值 明 显 小 于 对 照 组 图 两 组 在 蛋 白 质 峰 : 和. 的 强 度 值 差 异 无 统 计 学 意 义 F 图 %&!" %&!" %%((*+,- " 图 / 筛 选 6 血 清 标 志 物 的 结 果 5 芯 片 示 组 和 对 照 组 在 蛋 白 峰 :: 和. 的 强 度 值 条 图 示 组 和 对 照 组 在 蛋 白 峰 :: 和. 的 平 均 强 度 值 与 *, 比 较 "/%!! 6.4%&!*( *!!(.(: :(-. 5 6*(+!8(,/!+*(8!*!!(.5(*!- *, 4 和 C 在 血 清 中 的 表 达 *!44 7 胶 分 离 和 质 谱 鉴 定 结 果 在 患 者 的 血 清 中 出 现 条. 左 右 的 蛋 白 质 条 带 在 对 照 组 的 血 清 中 出 现 条. 左 右 的 蛋 白 质 条 带 切 下 这 两 条 蛋 白 质 条 带 经 胶 内 酶 解 和 质 谱 鉴 定 发 现 分 别 与 血 清 淀 粉 样 蛋 白!*/ (,- *! 4 和 血 管 内 皮 生 长 因 子 8(/,(*!-!,(,* +(* C 的 相 似 性 最 高 图
中 南 大 学 学 报 医 学 版! %!!!" 图 &78 胶 分 离 蛋 白 质 以 及 质 谱 鉴 定 结 果 *!447 胶 分 离 结 果. 蛋 白 质 质 谱 分 析 结 果 及 其 与 4 比 较 5. 蛋 白 质 质 谱 分 析 结 果 及 其 与 C 比 较 画 线 部 分 表 示 具 有 相 同 的 氨 基 酸 "%!.&78 *!44 7!,!,!**! 5(!,/!(+*(- *,!*(!-+!*!(,!*!!- (-!!!! */!*!( (-.(- -!+!- (4(- C (-!(!*!*!*(+!!-! (:.(- ((-!/!!+4(-! (!-!-!!/!!(*!/ -!*,!- 5(-!(! *!*!*(+!!-!(. (- ((-!/!!+C(-! (!-!-!!/!!(*! / -!*,!-!/ -!*,!!-!(!+(!*!*(- 4 C 免 疫 共 沉 淀 鉴 定 结 果 用 4 多 克 隆 抗 体 和 C 多 克 隆 抗 体 分 别 从 患 者 和 对 照 者 血 清 中 检 测 4 和 C 在 患 者 的 血 清 中 检 测 到 4 而 在 对 照 者 血 清 中 未 检 测 到 C 图 4 和 C 在 患 者 和 对 照 者 月 经 血 中 的 表 达 %&4 检 测 结 果 对 本 研 究 中 : 例 患 者 例 对 照 者 月 经 血 的 上 清 进 行 %&4 检 测 发 现 组 4 水 平 明 显 高 于 对 照 组 图 而 对 照 组 C 水 平 明 显 高 于 组 图 图 免 疫 共 沉 淀 结 果 4 抗 体 洗 脱 74 4 抗 体 洗 脱 患 者 血 清 4 抗 体 洗 脱 对 照 者 血 清 C 抗 体 洗 脱 患 者 血 清 C 抗 体 洗 脱 对 照 者 血 清 C 抗 体 洗 脱 74 " %!.! 4 74!,/! 4!*/!,/! 4 *,!*/!,/! C!*/!,/! C *,!*/!,/! C 74!,/!!"% & " 图 检 测 6 患 者 和 正 常 妇 女 月 经 血 上 清 中 和 8" 的 表 达 结 果 与 对 照 组 比 较 " ( 8" 5(*!- *,
6"M 无排卵性功能失调性子宫出血患者血清标志物的筛选,鉴定及其在月经血中的表达!包珊等 " /% /"! PNJ USP检 测 结 果 的 表 达 &FF在 Y?9e患 者 中 的 表 达 高 而 KLI 随 机 选 择 6 份 Y?9e患 者 和 6 份 对 照 者 的 月 在对照组的表达高! 图 5" + 经 血 的 上 清 采 用 PNJ USP检 测 &FF和 KLIPZY +! " * ( & %!!!!" +! " * ( & %!!!!" 6789 5/24 """"""""""""""""",-./24! 图 PH6!T,患者和正常妇女月经血上清中 %%和 &(的 78 U7 检测结果 Y&FF的 PNJ USP检测结果%eKLI的 PNJ USP检测结果+ M c6对照者% cm"y?9e患者%>5 >@ F 条带自上至下分别为 5 % " M 5 M 55%M -*+ 4* -KPH57I6? * %+%&%%"+2&(* +5 + %&( " "+2( %+ %>2 ( 2=/ 78 U7KY PNJ USP G CRYY%e PNJ USP G CgI[Q/M c6s 2 % cm"y?9e*@ 2 %>5 >@ F -@ 2E ( O E 5 % " M 5M 55%M -* C * - / " /% /%! \ 2 印迹检测结果 2 印迹 克 隆 抗 体 和 gi[q单 克 隆 抗 体 进 行 \ 从 上 述 6 例 Y?9e患 者 和 6 例 对 照 者 中 各 随 机 选 择 % 例 将 它 们 的 月 经 血 上 清 分 别 用 RYY单 & % "! 检 测 蛋 白 质 水 平 的 表 达 RYY 在 Y?9e的 表 达 水 平 高 而 gi[q在 对 照 组 的 表 达 水 平 高! 图 6 " + & % "! 24 (( *+,-./ *+,-./! """""""" +印迹检测结果 Y RYY单克隆抗体检测月经血中的 图 QH6!T,患者和正常妇女月经上清中 66 和 \V4的 ` RYY表达%egI[Q单克隆抗体检测月经血中的 gi[q表达+ M c%y?9e患者%& c6对照者+ 4* -K QHU % * +? * %+%&66"+2\V4* +5 + %&( " "+2( %+ %>F*.` +=> % KY RYY, * 2 E E O ( % e gi[q, * 2 E E O ( gi[q 2 2@ @ 2 - E. + M c% Y?9e *@ 2 % & c6 RYY 2 2@ @ 2 - E. S 2 / 中 PZY丰 度 与 蛋 白 质 丰 度 的 相 关 性 并 不 好 如 MH讨HH论 生殖器支原 体 蛋 白 质 组 的 测 序 结 果 与 根 据 基 因 组 测 序 结 果 推 测 的 全 部 蛋 白 质 相 差 很 大 &MMJM" + 因 蛋 白 质 组! * " 指 ( 一 种 基 因 组 所 表 达 此对蛋白质结构和功能的 研 究 将 直 接 阐 明 生 命 的全套蛋白 质 或 一 种 生 物, 一 种 细 胞! 组 织" 在生理或病理条件下的变化机制+ 目前蛋白质 &5J X &J M + 理论 组 学 的 研 究 方 法 很 多 &M% 其 中 差 异 蛋 白 质 组 学 上 从?ZY PZY 蛋 白 质 至 少 存 在 % 个 层! E C C 2 @ * " 相 对 于 ( 完 全 蛋 白 质 组 次的调控即 转 录 水 平 调 控, 翻 译 水 平 调 控 和 翻 学并不要求捕获 ( 全 部 蛋 白 质 而 重 在 找 出 有 译后水平调控以往功能基 因 组 研 究 中 所 采 用 的 意义的差异蛋白所以在技 术 上 有 更 高 的 可 实 现 策 略 如 基 因 芯 片!?ZY @ @.", 基 因 表 达 序 性 &M&JM5 + RI7?8技 术 是 目 前 差 异 蛋 白 质 组 学 研 究 列分 析! @ @ 2@. C= 2, * 2 RY[I" 的 一 种 新 技 术 应 用 很 广 &M6JM + 本 研 究 应 用 RI7J 等 都 是 从 PZY 的 角 度 来 推 测 蛋 白 质 功 能 不?8技 术 在 国 内 外 首 次 筛 选 Y?9e的 血 清 蛋 白 质 能全面代表蛋白质表达水平+ 实验也证明组织 标志物并筛 选 到 两 个 差 异 蛋 白 质 峰 进 一 步 采 所表达的全套蛋白质 具有时空性
中 南 大 学 学 报 医 学 版! 用 *!44 7 胶 分 离 质 谱 鉴 定 和 免 疫 共 沉 淀 将 它 们 鉴 定 为 4 和 C 通 过 %&4 2752 和!!* 印 迹 检 测 确 证 4 在 患 者 的 月 经 中 表 达 上 调 而 C 在 正 常 妇 女 的 月 经 中 表 达 上 调 与 4%& 技 术 筛 选 的 结 果 以 及 蛋 白 质 鉴 定 结 果 一 致 人 类.. 基 因 位 于 号 染 色 体 短 臂 上 其 表 达 的 蛋 白 质 存 在 于 血 浆 中 是 一 类 与 阿 朴 脂 蛋 白 相 关 联 的 高 密 度 脂 蛋 白 家 族 由 几 个 相 关 的 蛋 白 家 族 4? 组 成.. 和.. 的 基 因 基 本 相 同 编 码 分 子 质 量 大 小 为?. 的 蛋 白 质 4 在 正 常 人 的 血 清 中 的 含 量 很 低 但 是 当 机 体 受 到 损 伤 感 染 和 外 伤 时 作 为 一 类 应 激 蛋 白 血 浆 中 4 的 浓 度 往 往 比 正 常 高 出? 倍 左 右 因 此 目 前 许 多 研 究 表 明 4 可 以 作 为 多 种 癌 症 的 标 志 物 功 能 失 调 性 子 宫 出 血 一 般 患 病 时 间 在 半 年 以 上 长 期 无 规 律 的 子 宫 出 血 会 给 机 体 造 成 较 大 的 损 伤 可 能 导 致 4 表 达 过 高 然 而 也 有 研 究 认 为 4 与 应 激 反 应 无 关 : 子 宫 出 血 与 子 宫 内 膜 生 长 修 复 关 系 密 切 子 宫 内 膜 生 长 修 复 包 括 上 皮 再 生 与 血 管 再 生 子 宫 内 膜 血 管 的 发 生 意 义 在 于 促 进 子 宫 内 膜 的 增 殖 脱 落 修 复 为 子 宫 内 膜 提 供 良 好 的 血 供 使 增 殖 期 内 膜 转 化 为 分 泌 期 保 证 正 常 的 月 经 C 为 近 年 来 发 现 的 促 进 血 管 内 皮 生 长 的 细 胞 因 子 可 促 进 内 皮 细 胞 增 殖 迁 移 加 速 新 血 管 形 成 与 血 管 发 生 有 密 切 关 系 子 宫 内 膜 腺 上 皮 细 胞!-!*(,,(-/,(*!!,(,!, 5 和 基 质 细 胞!-!*(,*(,!, 45 可 以 分 泌 C 因 此 它 可 能 参 与 月 经 周 期 的 调 控 4+*! 等 的 研 究 发 现 C 水 平 在 子 宫 内 膜 的 中 增 殖 期 晚 增 殖 期 及 分 泌 期 比 增 殖 早 期 升 高 因 此 正 常 情 况 下 月 经 正 常 的 妇 女 雌 孕 激 素 可 能 参 与 调 节 子 宫 内 膜 C 的 产 生 导 致 C 水 平 升 高 促 进 血 管 生 成 修 复 子 宫 内 膜 但 是 异 常 情 况 下 患 者 雌 激 素 水 平 的 持 续 升 高 可 能 会 瓶 颈 式 导 致 C 降 低 而 且 由 于 患 者 持 续 失 血 可 能 导 致 C 从 经 血 中 丢 失 C 的 降 低 导 致 血 管 生 成 障 碍 不 能 及 时 修 复 子 宫 内 膜 但 是 功 血 乃 功 能 失 调 性 疾 病 因 此 本 研 究 所 检 出 的 蛋 白 质 表 达 差 异 暂 时 不 能 排 除 系 疾 病 发 生 后 导 致 的 结 果 所 以 4 和 C 与 的 确 切 关 系 还 有 待 进 一 步 研 究 参 考 文 献 @*6 @(,(.!*+/ (,/!*!,!!-!,!( ((!!(- *!(! 9 6(*!+/( : : : ( @ % (!(,!/!+ 2&,!*(!- *! /*+(!!(!-,(!*-!* ( 4%& ((, 9 7*!! 4 (( 5!!* ((!(,7*! -!! -*!-,- /*+(!!(!-,(!*-!* (! + +, (!*!* 4%& 4 9,!(! : 2!!, G,!*9 8!,!(,7*!- + *!(,(,*(+*!>! /*(**! ((,/7*!5 *( /*+(!!(!-,(!*-!* (!++,(!*!* 9 *, (, 2 5( *!!(*!*+- *!!+**! (- 9 (/*! : 庞 涛 陈 婉 蓉 蛋 白 质 芯 片 9 生 物 学 教 学 : 7 ( 56 (* 7*! 9,!( : 李 民 周 宗 灿 蛋 白 质 芯 片 9 生 命 的 化 学 %& 6 (7*! 9 %+!5! * : 崔 振 玲 黄 静 谢 芳 等 蛋 白 质 芯 片 技 术 研 究 进 展 9 生 物 学 通 报 5&!, 6 9 &(!(,-8(! *!!, 9,/,! 6/!*4 % 5*-!,4 9,(.. 7!(, 7*!!*!!(*,!!(*(-,( *!!!2 (- *,- 9,!**! : : 5*-!,4 9 (!(, 9 >!,8!(,5(*(!* ( +(*!+* 4*,((!,+!*/ / 8!,,!- 6 *(-! 9,!**! : : : : : (,(/*((( 4 4!-!*!*!!(,7*!+,((!(,/ -!+( (- (*(!*( +/ ( (!- (- ((,*! ((,-!,!! 9 /,!-2! : : (!*C 5 7,(. 9 6/!*4 &!*!!+,((!(,/ 5(,/,!!
无 排 卵 性 功 能 失 调 性 子 宫 出 血 患 者 血 清 标 志 物 的 筛 选 鉴 定 及 其 在 月 经 血 中 的 表 达 包 珊 等 9 /*9! : 曾 亮 曹 亚 亚 细 胞 蛋 白 质 组 学 9 生 命 的 化 学 %( 5 ( 4/!,/,(**! 9 %+! 5!* 7(!,!5 7 *. 7! (!!(,7*!(!* +,!(*(!+,/-(!- 4%&! (,+*!(*.!*(-!-(+*!((!* 9 (*.!* 7 5 9 797*!!((,(- (!-8!*+!*,(,/*(*.!* 9 5, 5 ( C!,C (8!6 %(%!(,/!! +*-! /,!- 7*!5 (*(!,! (,( (!**!!(* 9! /! 游 运 辉 范 学 工 刘 萍 等 胃 癌 及 慢 性 胃 炎 幽 门 螺 杆 菌 的 蛋 白 质 组 学 研 究 9 中 南 大 学 学 报 医 学 版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辛 志 敏 谢 青 贞 曹 路 敏 等 放 置 宫 内 节 育 器 对 子 宫 内 膜 血 管 内 皮 生 长 因 子 及 其 激 酶 受 体 表 达 及 微 血 管 密 度 变 化 的 影 响 9 中 华 妇 产 科 杂 志 & &! 5 %/!(,!8(*! +!*!+.(!*!!*(- *8!!,-!!!-!*/ +!!(*& 9 5!!9/*(, +!*(-!, 4+*! 9%!9 (,/-!. 59!(,8(*(!* - *!/,( +8(/,(*!-!,(,* +(*!/ (!-!*/,( +* (!! -/*!!*/(,,!(-!(!!+!-!* 9 95, -*,!( : : : 6-!*4 6/(95 ((!(,2!/,( +8( /,(*!-!,(,* +(*!*!!*! (- *! 9 8* 6!(, 7!*! : 4/, : 本 文 编 辑 郭 征