员 源 源 中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志 摇 园 园 允 怎 灶 ; 怨 ( ): 员 源 源 耀耀耀耀耀耀耀耀 员 源 远 悦 澡 蚤 灶 允 悦 葬 灶 糟 藻 则 月 蚤 燥 贼 澡 藻 则 [ 文 章 编 号 ] 摇 员 园 园 苑 鄄 猿 愿 缘 载 ( 园 园 ) 园 鄄 园 员 源 源 鄄 园 猿 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 治 疗 转 移 性 乳 腺 癌 的 研 究 进 展 宋 海 珠 综 述, 罗 荣 城 审 阅 ( 第 一 军 医 大 学 附 属 南 方 医 院 肿 瘤 科, 广 州 摇 缘 员 园 缘 员 缘 ) [ 摘 要 ] 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 是 一 种 针 对 匀 耘 砸 原 辕 灶 藻 怎 原 癌 基 因 产 物 的 人 源 化 单 克 隆 抗 体, 能 特 异 的 作 用 于 匀 耘 砸 鄄 受 体 过 度 表 达 的 乳 腺 癌 细 胞 临 床 研 究 已 评 价 了 其 药 代 动 力 学 临 床 治 疗 转 移 性 乳 腺 癌 的 客 观 疗 效 和 安 全 性 问 题 具 有 较 大 的 临 床 应 用 及 推 广 价 值 [ 关 键 词 ] 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 ; 单 克 隆 抗 体 ; 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 ; 乳 腺 癌 [ 中 图 分 类 号 ] 摇 砸 猿 怨 援 员 员 ; 砸 苑 猿 苑 援 怨 摇 摇 摇 摇 [ 文 献 标 识 码 ] 摇 粤 乳 腺 癌 是 女 性 中 最 常 见 的 恶 性 肿 瘤, 术 后 复 发 和 转 移 率 较 高 临 床 研 究 表 明 : 编 码 产 物 具 有 表 皮 生 长 因 子 受 体 ( 耘 郧 鄄 云 砸 ) 活 性 与 功 能 的 原 癌 基 因 藻 则 遭 月 鄄, 又 称 为 灶 藻 怎 或 匀 耘 砸 鄄 是 人 类 肿 瘤 中 发 生 改 变 频 率 最 高 的 癌 基 因 之 一 其 基 因 表 达 水 平 和 基 因 拷 贝 数 目 在 乳 腺 癌 细 胞 中 升 高 显 著, 是 乳 腺 癌 预 后 不 良 的 一 项 独 立 危 险 因 素 出 现 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 往 往 提 示 肿 瘤 恶 性 程 度 高, 进 展 迅 速, 化 疗 缓 解 期 短, 对 三 苯 氧 胺 [ 员 易 产 生 耐 药 性, 无 病 生 存 和 总 生 存 率 低 ] 匀 耘 砸 鄄 是 一 种 具 有 膜 外 位 点 结 构 的 跨 膜 癌 基 因 蛋 白, 因 此 可 以 作 为 抗 乳 腺 癌 治 疗 的 靶 抗 原, 即 以 匀 耘 砸 鄄 的 特 异 性 抗 体 对 乳 腺 癌 进 行 靶 向 治 疗 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 ( 主 要 成 分 栽 则 葬 泽 贼 怎 扎 怎 皂 葬 遭 ) 即 为 一 种 针 对 匀 耘 砸 鄄 受 体 的 高 纯 度 重 组 阅 晕 粤 衍 生 的 人 源 化 单 克 隆 抗 体, 由 美 国 旧 金 山 基 因 技 术 公 司 ( 郧 藻 灶 藻 灶 贼 藻 糟 澡 陨 灶 糟 ) 和 罗 氏 药 厂 ( 砸 燥 糟 澡 藻 ) 联 合 研 究 和 生 产, 员 怨 怨 愿 年 被 美 国 云 阅 粤 批 准 上 市 目 前 已 通 过 Ⅲ 期 临 床 试 验, 主 要 用 于 治 疗 已 发 生 转 移 的 乳 腺 癌, 并 取 得 [ 了 令 人 鼓 舞 的 疗 效 ] 员 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 作 用 机 制 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 ( 人 类 表 皮 生 长 因 子 受 体 蛋 白 ) 是 由 位 于 人 第 员 苑 号 染 色 体 择 员 员 鄄 位 的 原 癌 基 因 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 编 码 的 单 链 跨 膜 糖 蛋 白, 分 子 量 为 员 愿 缘 噪 阅, 因 而 又 称 孕 员 愿 缘 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 由 员 缘 缘 个 氨 基 酸 组 成, 包 括 信 号 肽 胞 外 [ 猿 区 跨 膜 区 和 胞 内 区 源 个 部 分 ] 由 于 具 内 在 酪 氨 酸 激 酶 活 性, 故 与 表 皮 生 长 因 子 受 体 ( 耘 郧 云 砸 ), 匀 耘 砸 鄄 猿, 匀 耘 砸 鄄 源 等 同 属 Ⅰ 类 受 体 酪 氨 酸 激 酶 ( 砸 栽 运 ) 超 家 族 它 与 耘 郧 云 砸 结 构 高 度 相 似, 约 缘 园 豫 氨 基 酸 残 基 同 源, 在 胞 内 氨 基 酸 激 酶 区 约 愿 园 豫 以 上 的 氨 基 酸 残 基 同 源, 被 认 为 可 能 是 一 种 未 明 确 的 生 长 因 [ 源 子 受 体 ] 原 癌 基 因 正 常 情 况 下 不 仅 不 会 引 起 肿 瘤, 相 反 还 具 有 重 要 生 理 功 能, 在 细 胞 进 行 生 命 活 动 中 必 不 可 少 一 旦 活 化 即 成 为 具 有 转 化 活 性 的 细 胞 癌 基 因, 过 度 表 达 则 可 导 致 细 胞 过 度 增 殖 和 表 型 向 恶 性 转 化 许 多 恶 性 肿 瘤 如 乳 腺 癌 卵 巢 癌 肺 癌 胃 癌 结 肠 癌 的 细 胞 常 可 检 测 到 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 基 因 扩 增 或 蛋 白 质 过 度 表 达, 提 示 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 过 度 表 达 与 肿 瘤 的 发 生 有 关 当 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 在 细 胞 表 面 过 度 表 达 时, 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 受 体 的 异 质 二 聚 体 形 成 数 量 增 加, 细 胞 信 号 传 递 系 统 过 度 活 化, 从 而 导 致 细 胞 增 殖 失 控, 发 生 癌 变 ] 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 位 于 细 胞 表 面, 易 被 抗 体 接 近, 因 而 可 以 制 备 针 对 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 的 单 克 隆 抗 体 以 阻 断 细 胞 增 殖 性 信 号 的 传 导 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 即 为 针 对 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 设 计 的 人 源 化 人 鼠 嵌 合 型 鼠 抗 体, 通 过 基 因 工 程 方 法 将 非 特 异 性 的 人 陨 早 郧 的 稳 定 区 与 鼠 的 抗 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 陨 早 郧 的 抗 原 决 定 簇 嵌 合 在 一 起, 不 仅 对 匀 耘 砸 鄄 受 体 有 高 度 亲 和 力, 还 同 时 解 决 了 鼠 源 性 抗 体 应 用 于 人 体 的 免 疫 原 性 问 题, 能 减 少 人 体 内 抗 体 ( 匀 粤 酝 粤 ) 的 产 生, 以 避 免 被 网 状 内 皮 系 统 清 除, 因 而 能 成 功 应 用 于 临 床 研 究 结 果 表 明 : 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 可 抑 制 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 与 砸 栽 运 超 家 族 的 其 它 成 员 发 生 交 联 形 成 异 质 二 聚 体 ; 减 噪 蚤 责 蚤 弱 细 胞 生 长 信 号 的 传 递 ; 还 可 通 过 诱 导 孕 苑 和 砸 月 相 关 蛋 白 孕 员 猿 园, 大 量 减 少 杂 期 细 胞 数 目 ; 下 调 细 胞 表 面 的 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 蛋 白 ; 减 少 血 管 内 皮 生 长 因 子 的 产 生 ; 介 导 对 过 度 表 达 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 肿 瘤 细 胞 的 抗 体 依 赖 性 细 胞 毒 作 用 ( 粤 阅 悦 悦 ) 等 机 制 来 抑 制 肿 瘤 生 长 ] 此 外, 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 可 能 介 导 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 受 体 的 内 吞 降 解 从 而 减 少 其 细 胞 表 面 密 度, 抑 制 肿 瘤 的 进 一 [ 远 步 生 长 ] 体 外 和 动 物 试 验 中 : 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 能 显 著 抑 制 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 的 乳 腺 癌 细 胞 和 卵 巢 癌 细 胞 的 增 殖, 但 对 无 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 的 乳 腺 癌 细 胞 和 肺 癌 细 胞 无 此 作 用 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 与 多 种 化 疗 药 物 有 相 加 或 协 同 作 用 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 与 阅 阅 孕 联 合, 对 肿 瘤 细 胞 的 杀 伤 作 用 提 高 个 数 量 级, 其 机 制 为 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 使 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 细 胞 对 阅 阅 孕 诱 导 的 阅 晕 粤 损 伤 的 修 复 减 少 猿 缘 豫 耀耀耀耀耀耀耀耀 源 园 豫, 从 而 增 强 阅 阅 孕 的 细 胞 毒 作 用, 被 称 为 受 体 增 [ 苑 强 的 化 疗 敏 感 性 ] 小 鼠 移 植 瘤 实 验 中, 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 与 紫 杉 醇 联 合 运 用, 抑 癌 率 从 单 药 的 猿 缘 豫 提 高 至 怨 猿 豫, 阿 霉 素 与 匀 藻 则 鄄 [ 远 糟 藻 责 贼 蚤 灶 联 合 也 明 显 提 高 抑 癌 率 ] 此 外, 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 明 显 增 强 紫 杉 特 尔 噻 替 派 足 叶 乙 甙 氨 甲 喋 呤 和 长 春 花 碱 的 抗 肿 瘤 [ 愿 作 用 ] 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 临 床 研 究 及 应 用 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 临 床 研 究 主 要 在 美 国 进 行, 业 已 完 成 Ⅰ 耀耀耀耀耀耀耀耀 Ⅲ 期 和 一 些 相 关 的 临 床 研 究, 评 价 了 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 单 药 或 与 化 疗
中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志 摇 园 园 允 怎 灶 ; 怨 ( ) 员 源 缘 药 物 联 合 治 疗 转 移 性 乳 腺 癌 的 疗 效 和 安 全 性 临 床 实 验 中 所 有 的 对 象 均 为 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 的 转 移 性 乳 腺 癌 患 者 Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ 期 临 床 试 验 均 进 行 了 药 代 动 力 学 的 研 究 Ⅰ 期 临 床 中, 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 按 不 同 剂 量 水 平 员 园 皂 早, 缘 园 皂 早, 缘 园 皂 早, 缘 园 园 皂 早 递 增, 单 剂 或 每 周 员 次 多 剂 给 药 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 药 代 动 力 学 呈 剂 量 依 赖 型, 非 线 性 特 点 大 多 数 病 人 的 药 代 动 力 学 符 合 一 室 模 型, 随 剂 量 增 加, 药 物 半 衰 期 延 长, 血 浆 清 除 率 下 降, 血 谷 和 峰 浓 度 增 加 单 药 为 首 次 负 荷 量 源 皂 早 辕 噪 早, 每 周 皂 早 辕 噪 早 维 持 的 给 药 方 法 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 平 均 半 衰 期 为 ( 缘 援 愿 猿 依 源 援 猿 园 ) 凿, 平 均 血 清 清 除 率 为 每 天 ( 缘 援 员 缘 依 援 源 缘 ) 皂 造 辕 噪 早, 血 清 谷 浓 度 于 治 疗 第 员 周 达 到 稳 态, 此 时 平 均 谷 浓 度 苑 园 μ 早 辕 皂 造 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 与 化 疗 联 合 每 周 员 次 给 药 时, 血 谷 浓 度 与 治 疗 后 第 园 耀耀耀耀耀耀耀耀 猿 周 达 稳 态 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 药 代 动 力 学 参 数 不 受 病 人 年 龄 肾 功 能 和 阅 阅 孕 联 合 用 药 的 影 响 Ⅱ 期 临 床 所 有 研 究 对 象 都 是 转 移 后 经 员 到 员 个 以 上 方 案 化 疗 后, 抗 拒 常 规 化 疗 的 乳 腺 癌 晚 期 患 者 研 究 表 明 : 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 单 药 治 疗 转 移 性 乳 腺 癌 有 效, 但 与 阅 阅 孕 联 用 的 疗 效 优 于 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 或 阅 阅 孕 单 药 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 剂 量 员 援 苑 皂 早 辕 噪 早 时 疗 效 优 于 低 剂 量 故 采 用 首 次 负 荷 剂 量 源 皂 早 辕 噪 早, 维 持 剂 量 每 周 皂 早 辕 噪 早 的 给 药 方 式 Ⅲ 期 临 床 试 验 为 随 机 开 放 多 民 族 多 中 心 参 与, 主 要 目 的 是 进 一 步 评 价 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 与 化 疗 联 合 治 疗 转 移 性 乳 腺 癌 的 疗 效 和 安 全 性 结 果 表 明 : 与 单 纯 化 疗 比 较, 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 与 阿 霉 素 环 磷 酰 胺 或 紫 杉 醇 联 合 治 疗 转 移 性 乳 腺 癌 明 显 提 高 疗 效 并 且 在 化 疗 第 猿 周 时 生 活 质 量 评 分 可 保 持 更 高 的 趋 [ 员 园 势 ] 大 量 Ⅱ 期 和 Ⅲ 期 临 床 试 验 已 经 分 别 验 证 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 作 为 二 线 或 三 线 单 药 使 用 及 作 为 一 线 药 物 与 化 疗 药 联 用 的 疗 效 及 安 全 性 美 国 最 近 将 员 员 源 名 患 者 随 机 分 为 组 进 行 匀 藻 则 鄄 糟 藻 责 贼 蚤 灶 一 线 单 药 治 疗 的 试 验 一 组 给 予 标 准 剂 量, 即 首 剂 源 皂 早 辕 噪 早, 每 周 皂 早 辕 噪 ( 早 蚤 援 增 援 ) 维 持 的 给 药 方 式 ; 另 一 组 给 予 大 剂 量, 即 首 剂 愿 皂 早 辕 噪 早, 每 周 源 皂 早 辕 噪 ( 早 蚤 援 增 援 ) 维 持 的 给 药 方 式 垣 垣 入 选 者 均 为 经 免 疫 组 化 ( 陨 匀 悦 ) 检 验 匀 耘 砸 鄄 或 猿 的 转 移 性 乳 腺 癌 患 者 组 耐 受 性 均 较 好, 除 大 剂 量 组 出 现 发 热 寒 颤 皮 疹 呼 吸 困 难 等 输 液 相 关 反 应 率 略 高 外, 总 反 应 无 明 显 差 别 ( 标 准 剂 量 组 源 豫, 大 剂 量 组 愿 豫, 平 均 反 应 率 远 豫 ) 垣 病 程 在 远 个 月 以 上 匀 耘 砸 鄄 猿 的 患 者 临 床 有 效 率 为 源 苑 豫, 中 位 生 存 期 为 源 援 源 个 月, 与 Ⅲ 期 临 床 试 验 的 缘 个 月 无 差 [ 员 员 异 ] 因 此, 对 于 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 的 乳 腺 癌 转 移 患 者, 匀 藻 则 鄄 糟 藻 责 贼 蚤 灶 作 为 一 线 药 物 单 药 治 疗 是 个 很 重 要 的 新 方 案, 既 可 减 少 化 疗 药 物 的 不 良 反 应, 减 少 耐 药 性, 又 可 减 轻 患 者 经 济 负 担, 而 疗 效 无 明 显 降 低 大 约 缘, 园 园 园 患 者 接 受 了 这 种 抗 匀 耘 砸 鄄 人 源 化 单 克 隆 抗 [ 员 体 的 治 疗 ] 苑 源 名 ( 即 园 援 猿 豫 ) 患 者 出 现 严 重 的 输 注 相 关 反 应, 且 大 多 数 出 现 在 首 次 输 注 时 或 输 注 后, 主 要 表 现 为 呼 吸 道 症 状, 如 发 热 寒 颤 等, 对 症 治 疗 后 可 缓 解 猿 猿 名 患 者 继 续 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 治 疗, 未 再 出 现 输 注 反 应 研 究 表 明 : 对 于 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 的 乳 腺 癌 转 移 患 者 单 药 耐 药 性 和 用 药 依 从 性 良 好, 很 少 出 现 化 疗 药 物 的 典 型 毒 性 反 应, 如 脱 发 黏 膜 炎 骨 髓 抑 制 或 肝 肾 功 能 损 害 心 脏 毒 性 和 输 注 相 关 反 应 是 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 两 大 主 要 副 作 用 回 顾 性 研 究 表 明 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 联 用 蒽 环 类 抗 癌 药 的 心 脏 毒 性 较 单 用 蒽 环 类 抗 癌 药 大 年 龄 蒽 环 类 药 物 史 心 脏 疾 病 史 为 心 脏 毒 性 反 应 的 三 大 危 险 因 素 大 多 数 患 者 经 相 应 治 疗 后 心 功 能 不 全 的 症 状 和 体 征 好 转 鉴 于 正 常 心 肌 组 织 不 表 达 匀 耘 砸 鄄 受 体, 目 前 尚 不 清 楚 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 对 [ 员 心 脏 的 毒 性 机 制 ] 因 此, 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 治 疗 过 程 中 需 定 期 监 测 心 功 能, 一 旦 出 现 典 型 症 状 即 需 停 药, 除 非 权 衡 患 者 情 况 利 大 于 弊 时 猿 摇 结 摇 语 目 前 手 术 仍 为 乳 腺 癌 的 主 要 治 疗 手 段, 辅 以 化 疗 及 其 他 治 疗 手 段 的 目 的 在 于 预 防 复 发, 清 除 手 术 残 留 的 微 小 病 灶, 提 高 中 晚 期 患 者 的 缘 年 生 存 率 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 作 为 匀 耘 砸 鄄 受 体 的 人 源 化 单 克 隆 抗 体, 克 服 了 鼠 源 性 抗 体 因 免 疫 原 性 强 半 衰 期 短 反 复 应 用 易 产 生 匀 粤 酝 粤 的 缺 点, 无 论 单 药 还 是 与 化 疗 药 物 合 用 治 疗 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 的 乳 腺 癌 均 取 得 了 明 显 疗 效 但 其 在 乳 腺 癌 综 合 治 疗 中 的 作 用 和 地 位 尚 应 做 进 一 步 的 全 面 评 价, 包 括 与 化 疗 药 物 联 用 的 具 体 方 案, 如 何 与 内 分 泌 治 疗 放 疗 等 治 疗 手 段 联 用 等 等 目 前 有 大 量 试 验 正 在 进 行 中 对 其 他 匀 耘 砸 鄄 过 度 表 达 的 上 皮 源 性 恶 性 肿 瘤, 如 胃 癌 卵 巢 癌 肺 癌 结 直 肠 癌 等 的 临 床 疗 效, 也 是 目 前 研 究 的 热 点 问 题 另 外, 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 安 全 性 问 题 及 对 生 活 质 量 的 影 响 需 进 一 步 评 价, 尤 其 是 对 心 脏 毒 性 机 制 预 防 和 降 低 措 施 尚 需 深 入 探 讨 [ 参 考 文 献 ] [ 员 ] 摇 周 爱 萍 援 乳 腺 癌 靶 向 治 疗 : 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 的 研 究 进 展 [ 允 ] 援 国 外 医 学 肿 瘤 学 分 册, 园 园 园, 愿 ( 源 ): 员 远 苑 鄄 员 苑 园 援 [ ] 摇 云 燥 则 灶 蚤 藻 则 酝, 耘 泽 贼 藻 增 葬 云 允, 杂 藻 蚤 凿 皂 葬 灶 粤 阅 援 栽 则 葬 泽 贼 怎 扎 怎 皂 葬 遭 蚤 灶 糟 燥 皂 遭 蚤 灶 葬 贼 蚤 燥 灶 憎 蚤 贼 澡 糟 澡 藻 皂 燥 贼 澡 藻 则 葬 责 赠 枣 燥 则 贼 澡 藻 贼 则 藻 葬 贼 皂 藻 灶 贼 燥 枣 皂 藻 贼 葬 泽 贼 葬 贼 蚤 糟 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 则 [ 允 ] 援 杂 藻 皂 蚤 灶 韵 灶 糟 燥 造, 园 园 园, 苑 ( 远 杂 怎 责 责 造 员 员 ): 猿 愿 鄄 源 缘 援 [ 猿 ] 摇 夏 梦 援 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 治 疗 妇 科 恶 性 肿 瘤 的 机 制 及 应 用 前 景 [ 允 ] 援 国 外 医 学 妇 产 科 学 分 册, 园 园 园, 苑 ( 源 ): 园 远 鄄 园 怨 援 [ 源 ] 摇 运 怎 则 藻 遭 葬 赠 葬 泽 澡 蚤 允 援 月 蚤 燥 造 燥 早 蚤 糟 葬 造 葬 灶 凿 糟 造 蚤 灶 蚤 糟 葬 造 泽 蚤 早 灶 蚤 枣 蚤 糟 葬 灶 糟 藻 燥 枣 匀 耘 砸 燥 增 藻 则 鄄 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 蚤 灶 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 [ 则 允 ] 援 月 则 藻 葬 泽 贼 悦 葬 灶 糟 藻 则, 园 园 员 ; 愿 ( 员 ): 源 缘 鄄 缘 员 援 ] 摇 匀 怎 灶 早 酝 悦, 蕴 葬 怎 再 运 援 月 葬 泽 蚤 糟 泽 糟 蚤 藻 灶 糟 藻 燥 枣 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 : 粤 则 藻 增 蚤 藻 憎 [ 允 ] 援 杂 藻 皂 蚤 灶 韵 灶 糟 燥 造, 员 怨 怨 怨, 远 ( 源 杂 怎 责 责 造 员 ): 缘 员 鄄 缘 怨 援 [ 远 ] 摇 月 葬 泽 藻 造 早 葬 允, 晕 燥 则 贼 燥 灶 蕴, 粤 造 遭 葬 灶 藻 造 造 允, 藻 贼 葬 造 援 砸 藻 糟 燥 皂 遭 蚤 灶 葬 灶 贼 澡 怎 皂 葬 灶 蚤 扎 藻 凿 葬 灶 贼 蚤 鄄 匀 耘 砸 葬 灶 贼 蚤 遭 燥 凿 赠 ( 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 ) 藻 灶 澡 葬 灶 糟 藻 泽 贼 澡 藻 葬 灶 贼 蚤 贼 怎 皂 燥 则 葬 糟 贼 蚤 增 蚤 贼 赠 燥 枣 责 葬 糟 造 蚤 贼 葬 曾 藻 造 葬 灶 凿 凿 燥 曾 燥 则 怎 遭 蚤 糟 蚤 灶 葬 早 葬 蚤 灶 泽 贼 匀 耘 砸 辕 灶 藻 怎 燥 增 藻 则 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 灶 早 澡 怎 鄄 皂 葬 灶 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 则 曾 藻 灶 燥 早 则 葬 枣 贼 [ 泽 允 ] 援 悦 葬 灶 糟 藻 则 砸 藻 泽, 员 怨 怨 愿, 缘 愿 ( 员 猿 ): 愿 缘 鄄 愿 猿 员 援 [ 苑 ] 摇 孕 蚤 藻 贼 则 葬 泽 砸 允, 云 藻 灶 凿 造 赠 月 酝, 悦 澡 葬 扎 蚤 灶 灾 砸, 藻 贼 葬 造 援 粤 灶 贼 蚤 遭 燥 凿 赠 贼 燥 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 遭 造 燥 糟 噪 泽 阅 晕 粤 则 藻 责 葬 蚤 则 葬 枣 贼 藻 则 糟 蚤 泽 责 造 葬 贼 蚤 灶 蚤 灶 澡 怎 皂 葬 灶 遭 则 藻 葬 泽 贼 葬 灶 凿 燥 增 葬 则 蚤 葬 灶 糟 葬 灶 糟 藻 则 糟 藻 造 造 [ 泽 允 ] 援 韵 灶 糟 燥 早 藻 灶 藻, 员 怨 怨 源, 怨 ( 苑 ): 员 愿 怨 鄄 员 愿 猿 愿 援 [ 愿 ] 摇 孕 则 燥 早 葬 皂 酝, 匀 泽 怎 杂, 蕴 藻 憎 蚤 泽 郧, 藻 贼 葬 造 援 陨 灶 澡 蚤 遭 蚤 贼 燥 则 赠 藻 枣 枣 藻 糟 贼 泽 燥 枣 糟 燥 皂 遭 蚤 灶 葬 鄄 贼 蚤 燥 灶 泽 燥 枣 匀 耘 砸 鄄 辕 灶 藻 怎 葬 灶 贼 蚤 遭 燥 凿 赠 葬 灶 凿 糟 澡 藻 皂 燥 贼 澡 藻 则 葬 责 藻 怎 贼 蚤 糟 葬 早 藻 灶 贼 泽 怎 泽 藻 凿 枣 燥 则 贼 则 藻 葬 贼 皂 藻 灶 贼 燥 枣 澡 怎 皂 葬 灶 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 则 泽 [ 允 ] 援 韵 灶 糟 燥 早 藻 灶 藻, 员 怨 怨 怨, 员 愿 ( 员 猿 ): 源 员 鄄 缘 员 援 [ 怨 ] 摇 月 葬 泽 藻 造 早 葬 允, 栽 则 蚤 责 葬 贼 澡 赠 阅, 酝 藻 灶 凿 藻 造 泽 燥 澡 灶 允, 藻 贼 葬 造 援 孕 澡 葬 泽 藻 Ⅱ 泽 贼 怎 凿 赠 燥 枣 憎 藻 藻 噪 造 赠 蚤 灶 贼 则 葬 增 藻 灶 燥 怎 泽 贼 则 葬 泽 贼 怎 扎 怎 皂 葬 遭 ( 匀 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 ) 蚤 灶 责 葬 贼 蚤 藻 灶 贼 泽 憎 蚤 贼 澡 匀 耘 砸 辕 灶 藻 怎 鄄 燥 增 藻 则 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 灶 早 皂 藻 贼 葬 泽 贼 葬 贼 蚤 糟 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 [ 则 允 ] 援 允 悦 造 蚤 灶 韵 灶 鄄 糟 燥 造, 员 怨 怨 远, 员 源 ( 猿 ): 苑 猿 苑 鄄 苑 源 源 援
员 源 远 中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志 摇 园 园 允 怎 灶 ; 怨 ( ): 员 源 远 耀耀耀耀耀耀耀耀 员 源 怨 悦 澡 蚤 灶 允 悦 葬 灶 糟 藻 则 月 蚤 燥 贼 澡 藻 则 [ 文 章 编 号 ] 摇 员 园 园 苑 鄄 猿 愿 缘 载 ( 园 园 ) 园 鄄 园 员 源 远 鄄 园 园 源 受 体 介 导 的 基 因 转 移 与 基 因 治 疗 任 常 春 综 述, 田 培 坤, 顾 健 人 审 阅 ( 上 海 市 肿 瘤 研 究 所 癌 基 因 及 相 关 基 因 国 家 重 点 实 验 室, 上 海 摇 园 园 园 猿 ) [ 摘 摇 要 ] 摇 基 因 治 疗 成 功 的 关 键 在 于 将 治 疗 基 因 靶 向 性 转 移 到 细 胞 或 组 织, 受 体 介 导 的 基 因 转 移 能 满 足 此 要 求, 很 有 发 展 潜 力 的 基 因 转 移 方 法 然 而, 要 将 这 种 转 移 方 法 用 于 基 因 治 疗, 与 转 移 系 统 有 关 的 万 分 的 化 学 特 性 与 物 理 反 应, 靶 细 胞 的 受 体 表 达 水 平, 阅 晕 粤 配 体 复 合 物 怎 样 逃 逸 溶 酶 体 的 降 解 以 及 包 含 在 复 合 物 中 的 外 源 基 因 的 表 达 等 都 是 至 关 重 要 的 本 文 综 述 了 受 体 介 导 的 基 因 转 移 的 基 本 原 理 阅 晕 粤 配 体 复 合 物 形 成 的 最 佳 条 件 与 性 质, 影 响 基 因 转 移 与 表 达 的 各 种 因 素 以 及 近 年 来 国 内 外 受 体 介 导 的 基 因 转 移 用 于 基 因 治 疗 取 得 的 进 展 [ 关 键 词 ] 摇 受 体 介 导 的 内 吞 作 用 ; 基 因 转 移 ; 细 胞 转 染 ; 基 因 治 疗 [ 中 图 分 类 号 ] 砸 苑 猿 援 猿 远 摇 摇 摇 摇 [ 文 献 标 识 码 ] 粤 摇 摇 受 体 介 导 的 基 因 转 移 ( 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 皂 藻 凿 蚤 葬 贼 藻 凿 早 藻 灶 藻 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 则 ) 是 利 用 细 胞 表 面 受 体 特 异 性 识 别 相 应 配 体 并 将 其 内 吞 的 机 理, 将 与 配 体 结 合 的 外 源 基 因 转 移 至 特 定 类 型 的 细 胞 理 论 上 受 体 介 导 的 基 因 导 入 系 统, 只 要 有 相 应 的 配 体 或 抗 体 便 可 以 将 外 源 基 因 导 入 任 何 具 有 特 异 性 受 体 的 细 胞 基 因 治 疗 是 将 外 源 基 因 导 入 特 定 的 哺 乳 动 物 细 胞, 通 过 对 致 瘤 基 因 的 抑 制 或 缺 陷 基 因 的 修 复 以 治 疗 疾 病 的 方 法 无 论 是 遗 传 性 疾 病 还 是 恶 性 肿 瘤 的 基 因 治 疗, 靶 向 性 是 非 常 重 要 的, 特 别 是 应 用 到 体 内 时, 既 要 考 虑 对 靶 细 胞 的 治 疗, 又 要 注 意 对 正 常 细 胞 的 保 护 受 体 介 导 的 基 因 转 移 系 统 与 目 前 应 用 于 基 因 治 疗 的 基 因 转 移 系 统 相 比 具 有 诸 多 优 势 : 相 对 靶 向 性 ; 阅 晕 粤 不 整 合 到 宿 主 细 胞 染 色 体, 不 需 要 导 入 细 胞 处 于 分 裂 期 ; 对 转 移 的 外 源 基 因 大 小 无 限 制, 可 同 时 携 带 多 种 基 因 或 靶 向 多 种 受 体 ; 导 入 系 统 本 身 无 潜 在 的 感 染 性 ; 并 具 安 全 性, 低 免 疫 原 性 而 其 劣 势 亦 很 明 显 : 瞬 时 表 达, 如 体 内 应 用, 需 重 复 注 射 ; 表 达 水 平 低, 因 为 被 细 胞 内 吞 的 复 合 体 可 能 在 内 吞 小 泡 与 溶 酶 体 融 合 后 被 降 解 而 影 响 外 源 基 因 的 表 达 但 某 些 病 毒 的 外 膜 蛋 白 质 具 有 使 内 吞 小 泡 破 裂 释 放 其 内 容 物 的 能 力 复 制 缺 陷 型 腺 病 毒, 流 感 病 毒 血 凝 素 的 膜 融 合 区 均 可 辅 助 外 源 基 因 逃 逸 溶 酶 体 的 降 解, 从 而 提 高 外 源 基 因 的 表 达 效 率 总 之 受 体 介 导 的 基 因 转 移 系 统 在 基 因 治 疗 中 较 有 优 势 和 发 展 前 景 员 摇 受 体 介 导 的 内 吞 作 用 受 体 介 导 的 内 吞 作 用 是 一 个 正 常 的 生 理 过 程, 真 核 细 胞 通 过 此 过 程, 从 其 外 环 境 中 获 取 各 种 不 同 的 分 子, 包 括 由 转 铁 蛋 白 和 蕴 阅 蕴 携 带 的 信 号 ( 生 长 因 子, 细 胞 因 子, 激 素 等 ), 以 及 一 些 将 在 细 胞 内 降 解 的 分 子 等 配 体 首 先 与 其 细 胞 膜 上 特 异 性 的 受 体 结 合, 结 合 位 置 的 细 胞 膜 即 内 陷 增 厚, 形 成 衣 被 小 凹, 配 体 原 受 体 复 合 物 内 吞 进 入 细 胞 质, 形 成 内 吞 小 体 当 内 吞 小 体 与 溶 酶 体 融 合 后, 酸 性 增 加, 溶 酶 体 水 解 酶 被 修 饰, 活 性 增 加, 将 配 体 降 解 摇 受 体 介 导 的 内 吞 作 用 与 基 因 转 移 基 因 治 疗 首 先 需 要 一 个 基 因 转 移 系 统, 将 完 整 的 外 源 治 疗 基 因 导 入 到 细 胞 核 内, 基 因 才 能 表 达 并 发 挥 治 疗 作 用 要 将 受 体 介 导 的 内 吞 作 用 用 于 基 因 转 移, 必 须 解 决 个 问 题 : 阅 晕 粤 不 是 天 然 的 配 体, 要 将 其 与 特 定 的 配 体 偶 联, 才 能 被 有 效 地 内 吞 ; 内 吞 的 分 子 可 再 循 环 到 细 胞 膜, 或 转 运 到 胞 浆, 或 运 到 溶 酶 体 降 解, 而 阅 晕 粤 分 子 极 有 可 能 被 运 到 溶 酶 体 因 此, 必 需 设 计 逃 逸 内 吞 小 体 原 溶 酶 体 降 解 的 成 份, 阅 晕 粤 才 能 [ 员 ] 有 效 地 转 移 到 核 悦 澡 藻 灶 早 等 首 先 提 出 受 体 介 导 的 基 因 转 移 并 将 α 巨 球 蛋 白 与 阅 晕 粤 共 价 连 接, 随 后 又 制 备 了 配 体 原 [ ] 阅 晕 粤 衍 生 物 郧 藻 燥 则 早 藻 与 悦 葬 贼 澡 蚤 灶 藻 宰 怎 首 次 利 用 去 唾 液 酸 糖 蛋 白 受 体 靶 向 性 介 导 外 源 基 因 进 入 肝 母 细 胞 瘤 ( 匀 藻 责 郧 ) 宰 怎 与 宰 怎 应 用 此 方 法 将 外 源 基 因 导 入 动 物 模 型 的 肝 脏, 用 以 治 疗 遗 传 性 疾 病 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 [ 基 金 项 目 ] 摇 国 家 自 然 科 学 基 金 ( 晕 燥 猿 园 员 苑 员 园 源 园 ) 资 助 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 [ 员 园 ] 杂 蚤 皂 燥 灶 阅, 蕴 藻 赠 造 葬 灶 凿 允 燥 灶 藻 泽 月, 杂 澡 泽 噪 杂, 藻 贼 葬 造 援 孕 澡 葬 泽 藻 Ⅲ 贼 则 蚤 葬 造 燥 枣 憎 藻 则 鄄 糟 藻 责 贼 蚤 灶 枣 燥 则 贼 澡 藻 贼 则 藻 葬 贼 皂 藻 灶 贼 燥 枣 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 则 [ 悦 ], 栽 澡 蚤 则 贼 赠 鄄 泽 藻 增 藻 灶 贼 澡 粤 灶 灶 怎 鄄 葬 造 酝 藻 藻 贼 蚤 灶 早, 园 园 员, 杂 葬 灶 云 则 葬 灶 糟 蚤 泽 糟 燥 悦 粤 援 园 园 员, 员 远 鄄 源 愿 猿 葬 援 [ 员 员 ] 灾 燥 早 藻 造 悦 蕴, 悦 燥 遭 造 藻 蚤 早 澡 酝 粤, 栽 则 蚤 责 葬 贼 澡 赠 阅, 藻 贼 葬 造 援 云 蚤 则 泽 贼 鄄 造 蚤 灶 藻 澡 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 皂 燥 灶 燥 贼 澡 藻 则 葬 责 赠 蚤 灶 皂 藻 贼 葬 泽 贼 葬 贼 蚤 糟 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 则 [ 允 ] 援 韵 灶 糟 燥 造 燥 早 赠, 园 园 员, 员 园 ( 远 员 杂 怎 责 责 造 杂 ): 猿 苑 鄄 源 援 [ 员 ] 悦 燥 燥 噪 鄄 月 则 怎 灶 泽 晕 援 砸 藻 贼 则 燥 泽 责 藻 糟 贼 蚤 增 藻 葬 灶 葬 造 赠 泽 蚤 泽 燥 枣 贼 澡 藻 泽 葬 枣 藻 贼 赠 燥 枣 澡 藻 则 糟 藻 责 贼 蚤 灶 蚤 皂 鄄 皂 怎 灶 燥 贼 澡 藻 则 葬 责 赠 蚤 灶 皂 藻 贼 葬 泽 贼 葬 贼 蚤 糟 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 则 [ 允 ] 援 韵 灶 糟 燥 造 燥 早 赠, 园 园 员, 员 园 ( 远 员 杂 怎 责 责 造 杂 ): 缘 愿 鄄 远 远 援 [ 收 稿 日 期 ] 摇 园 园 员 原 员 原 员 [ 修 回 日 期 ] 摇 园 园 原 园 猿 原 员 员
中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志 摇 园 园 允 怎 灶 ; 怨 ( ) 员 源 苑 援 员 阅 晕 粤 结 合 的 骨 架 受 体 介 导 的 基 因 转 移 的 配 体 一 般 与 多 聚 阳 离 子 多 肽 连 接, 多 聚 阳 离 子 同 时 作 为 阅 晕 粤 结 合 的 骨 架, 常 用 的 多 聚 阳 离 子 多 肽 为 孕 燥 造 赠 鄄 蕴 鄄 造 赠 泽 蚤 灶 藻, 它 包 含 的 ε 鄄 氨 基 酸 与 所 需 的 配 体 通 过 双 功 能 交 联 剂 杂 孕 阅 孕 [ 晕 鄄 泽 怎 糟 糟 蚤 灶 蚤 皂 蚤 凿 赠 造 鄄 猿 ( 鄄 鄄 责 赠 则 蚤 凿 赠 造 凿 蚤 贼 澡 蚤 燥 ) 孕 则 燥 责 蚤 燥 灶 葬 贼 藻 ] 共 价 连 接 转 铁 蛋 白 栽 枣 与 孕 燥 造 赠 鄄 蕴 鄄 造 赠 泽 蚤 灶 藻 连 接 形 成 的 栽 枣 鄄 孕 蕴 也 能 与 其 受 体 结 合, 并 转 运 铁 离 子, 只 是 效 率 稍 有 降 低, 说 明 栽 枣 鄄 孕 蕴 的 内 吞 途 径 与 栽 枣 一 致 鱼 精 蛋 白 ( 孕 则 燥 贼 葬 皂 蚤 灶 藻 ) 与 多 聚 赖 氨 酸 性 质 相 似, 也 常 用 作 阅 晕 粤 结 合 的 骨 架, 近 年 来 发 现 聚 乙 酰 胺 ( 责 燥 造 赠 藻 贼 澡 赠 造 藻 灶 蚤 皂 蚤 灶 藻, 孕 耘 陨 ) 是 一 种 有 效 的 凝 集 [ 猿 鄄 源 阅 晕 粤 并 与 质 粒 阅 晕 粤 结 合 的 多 聚 阳 离 子 骨 架 ] 援 阅 晕 粤 原 配 体 复 合 物 的 形 成 阅 晕 粤 与 配 体 原 孕 蕴 按 最 佳 配 比 在 无 磷 酸 盐 缓 冲 液 中 形 成 中 性 复 合 物, 形 成 的 复 合 物 颗 粒 可 用 载 鄄 射 线 衍 射 ( 悦 阅 ) 和 电 子 显 微 镜 检 测 适 宜 的 复 合 体 ( 构 型, 大 小 适 合 用 作 基 因 转 移 的 载 体 ) 的 制 备, 是 实 现 基 因 转 移 成 功 的 必 要 条 件 影 响 复 合 体 形 成 的 因 素 包 括 ( 员 ) 离 子 强 度 : 共 价 连 接 物 在 很 低 的 离 子 强 度 条 件 下 形 成 多 分 子 团 块 ( 酝 怎 造 贼 蚤 皂 燥 造 藻 糟 怎 造 葬 则 葬 早 早 则 藻 早 葬 鄄 贼 蚤 燥 灶 ) 若 离 子 强 度 过 大, 则 形 成 杆 状 ( 砸 燥 凿 鄄 造 蚤 噪 藻 ) 复 合 体 甚 至 沉 淀 只 有 在 低 离 子 强 度 条 件 下 方 可 形 成 状 单 分 子 复 合 体 ( 栽 燥 则 燥 蚤 凿 ) 而 且 此 时 对 阅 晕 粤 的 压 缩 亦 极 为 适 宜, 形 成 的 复 合 体 半 径 接 近 天 然 配 体 的 半 径 ( ) 阅 晕 粤 浓 度 及 碱 基 组 成 : 低 阅 晕 粤 浓 度 能 避 免 形 成 复 合 物 时 产 生 沉 淀, 一 般 不 足 猿 园 μ 早 辕 皂 造, 本 实 验 室 可 提 高 到 源 园 μ 早 辕 皂 造 富 含 郧 悦 的 阅 晕 粤 与 多 聚 赖 氨 酸 作 用 时 更 易 形 成 不 溶 性 复 合 体 ( 猿 ) 复 合 体 的 稳 定 性 : 适 宜 的 复 合 体 形 成 后 相 当 稳 定, 在 源 益 可 保 存 数 月 不 解 离 通 过 员 豫 凝 胶 电 泳 阻 抑 实 验 观 察 到 形 成 好 的 复 合 体, 阅 晕 粤 被 阻 滞 在 孔 中, 表 明 此 时 阅 晕 粤 被 完 全 包 裹 在 多 肽 原 多 聚 赖 氨 酸 中 稍 带 正 电 的 复 合 体 容 易 与 膜 上 受 体 结 合 并 内 吞, 因 细 胞 膜 是 带 负 电 的 可 溶 的 稳 定 的, 大 小 和 形 状 合 适 的 复 合 体, 才 能 达 到 高 效 的 基 因 导 入 体 内 实 验 对 复 合 体 颗 粒 大 小 要 求 较 高, 大 颗 粒 虽 易 胞 吞, 但 在 通 过 血 管 内 皮 细 胞 等 天 然 屏 障 时 受 到 限 制, 而 太 小 的 颗 粒 由 于 布 朗 运 动 很 难 沉 积 在 细 胞 表 面 并 与 受 体 结 合 实 验 证 明, 较 大 ( 不 小 于 员 园 园 灶 皂 ) 颗 粒 的 转 染 效 率 比 源 园 灶 皂 的 小 颗 粒 要 高 员 园 园 倍 本 实 验 室 制 备 的 复 合 物 能 保 持 一 定 的 构 型 和 大 小, 电 镜 观 察 直 径 为 员 园 园 耀耀耀耀耀耀耀耀 员 缘 园 灶 皂 的 非 病 毒 颗 粒 ] 援 猿 影 响 受 体 介 导 的 基 因 转 移 的 因 素 受 体 介 导 的 基 因 转 移 包 括 以 下 过 程 : 小 颗 粒 的 阅 晕 粤 辕 配 体 复 合 物 与 细 胞 膜 上 受 体 结 合 内 吞 ; 耐 受 核 酸 酶 的 降 解, 内 吞 小 体 与 溶 酶 体 融 合 ; 阅 晕 粤 辕 配 体 复 合 物 转 运 到 细 胞 核 ; 小 分 子 穿 过 核 孔 ( 源 园 灶 皂 ) 入 核 ; 基 因 保 留 在 核 中 并 表 达 基 因 转 移 的 效 率 与 外 源 基 因 表 达 水 平 的 高 低 受 诸 多 因 素 影 响 :( 员 ) 阅 晕 粤 原 配 体 复 合 物 的 稳 定 性 ;( ) 靶 细 胞 表 面 特 异 性 受 体 的 数 量 ;( 猿 ) 受 体 与 配 体 的 亲 和 力 ;( 源 ) 逃 逸 溶 酶 体 的 降 解 ; ( 缘 ) 阅 晕 粤 向 细 胞 核 转 运 的 效 率 ;( 远 ) 包 含 在 复 合 物 中 的 外 源 基 因 的 表 达 对 于 怎 样 逃 逸 溶 酶 体 的 降 解 研 究 得 较 多, 并 获 得 了 有 效 的 解 决 方 法 援 源 逃 逸 溶 酶 体 降 解 的 方 法 氯 喹 能 提 高 溶 酶 体 内 的 责 匀 值, 抑 制 其 水 解 酶 的 活 性, 减 少 降 解, 从 而 提 高 外 源 基 因 的 表 达, 但 由 于 细 胞 毒 性, 以 及 抑 制 受 体 从 内 吞 小 泡 再 循 环 到 细 胞 膜 的 过 程, 干 扰 有 效 的 基 因 转 移 而 限 制 了 其 应 用, 并 且 不 能 用 于 体 内 某 些 病 毒 例 如 腺 病 毒 和 流 感 病 毒, 能 通 过 受 体 介 导 的 内 吞 作 用 进 入 细 胞, 并 能 从 内 吞 小 泡 逃 逸, 从 而 避 免 溶 酶 体 的 降 解 最 初, 人 们 在 转 染 液 中 直 接 加 入 灭 活 的 腺 病 毒, 当 复 合 物 与 灭 活 的 腺 病 毒 被 内 吞 形 成 同 一 内 吞 小 泡, 则 病 毒 使 内 吞 小 泡 破 裂, 复 合 物 进 入 胞 浆 将 灭 活 的 腺 病 毒 与 多 聚 赖 氨 酸 通 过 链 霉 素 亲 合 素 鄄 生 物 素 ( 杂 贼 则 藻 责 贼 葬 增 蚤 凿 蚤 灶 鄄 遭 蚤 燥 贼 蚤 灶 ) 或 者 抗 体 桥 共 价 连 接, 腺 病 毒 鄄 多 聚 赖 氨 酸 ( 粤 凿 鄄 孕 蕴 ) 取 代 配 体 鄄 多 聚 赖 氨 酸 ( 蕴 蚤 早 葬 灶 凿 鄄 孕 蕴 ) 形 成 一 种 三 元 复 合 物 用 此 三 元 复 合 物 转 染 一 般 方 法 较 难 转 染 的 匀 藻 蕴 葬 细 胞, 得 到 高 水 平 的 基 因 表 达 用 粤 凿 鄄 孕 蕴 鄄 栽 枣 鄄 孕 蕴 鄄 阅 晕 粤 复 合 物 转 染 鼠 肝 癌 细 胞 系, 月 晕 蕴 悦 蕴 援, 基 因 表 达 的 百 分 比 从 使 用 氯 喹 的 园 援 豫 提 高 到 员 园 园 豫 杂 蚤 憎 燥 燥 利 用 去 唾 液 酸 糖 蛋 白 鄄 多 聚 赖 氨 酸 ( 粤 杂 韵 砸 鄄 孕 蕴 ) 与 粤 凿 鄄 孕 蕴 形 成 三 元 复 合 物 转 染 原 代 培 养 的 肝 细 胞, 基 因 表 达 的 水 平 从 使 用 粤 杂 韵 砸 鄄 孕 蕴 的 园 援 员 豫 提 高 到 员 园 园 豫, 但 四 元 复 合 物 颗 粒 大 约 在 园 园 灶 皂, 限 制 了 其 体 内 应 用 流 感 病 毒 血 凝 毒 素 ( 澡 藻 皂 葬 早 早 造 怎 贼 蚤 灶 蚤 灶, 匀 粤 ) 是 流 感 病 毒 的 外 膜 蛋 白, 组 成 匀 晕 晕 末 端 的 条 多 肽 链 之 一 具 有 膜 融 合 功 能, 引 起 内 吞 小 体 的 膜 破 裂, 从 而 逃 逸 到 细 胞 质 里 酝 蚤 凿 鄄 [ 远 ] 燥 怎 曾 在 用 乳 糖 化 多 聚 赖 氨 酸 向 肝 癌 细 胞 匀 藻 责 郧 转 基 因 时, 加 入 了 流 感 病 毒 匀 粤 晕 末 端 肽, 外 源 基 因 的 表 达 提 高 缘 园 园 倍 匀 粤 肽 也 可 以 与 多 聚 赖 氨 酸 连 接, 并 与 配 体 原 多 聚 赖 氨 酸 形 成 复 合 物, 栽 枣 鄄 孕 蕴 鄄 匀 粤 园 鄄 阅 晕 粤 复 合 物 应 用 于 多 种 细 胞 的 [ 苑 ] 基 因 转 移, 例 如 运 缘 远, 匀 藻 造 葬 和 月 晕 蕴 悦 蕴 援 孕 造 葬 灶 噪 等 构 建 了 一 个 合 成 配 体, 是 由 源 个 半 乳 糖 残 基 组 成 的 分 枝 肽, 称 为 四 天 线 半 乳 糖 配 体 这 种 配 体 不 但 体 积 小, 易 溶 解, 并 且 也 容 易 与 多 聚 赖 氨 酸 连 接, 包 含 此 配 体 的 复 合 物 可 联 合 腺 病 毒 或 匀 粤 鄄 孕 蕴, 用 于 转 移 基 因 到 月 晕 蕴 悦 蕴 援 细 胞 近 年 来 又 发 现 甘 油, 细 菌 溶 菌 素, 白 喉 毒 素 的 转 膜 区 域, 鼻 病 毒 相 关 区 域 的 合 成 肽 均 有 抑 制 溶 酶 体 酶, 提 高 转 染 效 率 的 作 用 猿 摇 受 体 介 导 的 体 内 外 基 因 转 移 受 体 介 导 的 基 因 转 移 目 前 已 发 展 了 多 种 受 体 原 配 体 系 统, 包 括 去 唾 液 酸 糖 蛋 白 半 乳 糖 化 蛋 白 转 铁 蛋 白 胰 岛 素 乳 糖 甘 露 糖 合 成 配 体 等, 归 纳 于 表 员 除 此 之 外, 还 发 展 了 靶 向 于 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子 ( 云 郧 云 ) 受 体 表 皮 生 长 因 子 [ 愿 ( 耘 郧 云 ) 受 体 及 抗 耘 则 月 鄄 悦 阅 猿 ] [ 怨 ] 悦 阅 缘, 悦 阅 员 员 苑 的 抗 体 等 虽 然 受 体 介 导 体 外 ( 细 胞 ) 基 因 转 移 非 常 高 效, 然 而 应 用 于 体 内 [ 员 园 ] 的 结 果 并 不 十 分 理 想 宰 怎 等 应 用 粤 杂 韵 砸 孕 蕴 包 裹 人 血 清 白 蛋 白 基 因 从 尾 静 脉 注 射 患 白 蛋 白 缺 乏 症 的 晕 葬 早 葬 泽 藻 则 葬 贼 泽, 随 后 进 行 部 分 肝 脏 切 除, 期 望 纠 正 大 鼠 的 白 蛋 白 缺 乏 症 然 而 [ 员 员 ] 基 因 表 达 的 水 平 不 足 以 产 生 治 疗 效 果 郧 葬 燥 等 将 栽 枣 鄄 责 蕴 鄄 粤 凿 鄄 孕 蕴 鄄 阅 晕 粤 三 元 复 合 物 直 接 用 于 手 术 切 开 的 气 管, 基 因 的 表 达 水 平 源 澡 达 高 峰, 苑 凿 后 消 失, 为 瞬 时 表 达 因 此, 需 要 重
员 源 愿 中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志 摇 园 园 允 怎 灶 ; 怨 ( ) 复 使 用 选 择 合 适 的 抗 原 原 抗 体, 也 可 用 作 受 体 介 导 的 基 因 转 移 抗 血 栓 素 单 克 隆 抗 体 与 血 栓 素 结 合 被 人 的 脐 静 脉 内 皮 细 胞 内 吞, 将 多 聚 赖 氨 酸 与 抗 体 形 成 复 合 体 靶 向 性 将 外 源 基 因 体 内 外 转 移 到 鼠 肺 表 皮 细 胞 摇 摇 本 实 验 室 自 员 怨 怨 远 年 以 来, 致 力 于 受 体 介 导 的 非 病 毒 载 体 的 研 究, 根 据 肿 瘤 细 胞 表 面 某 种 受 体 的 过 度 表 达, 已 成 功 构 建 了 分 别 针 对 胰 岛 素 样 生 长 因 子 受 体 陨 郧 云 Ⅰ 砸 及 陨 郧 云 Ⅱ [ 员 砸, 细 胞 表 面 表 皮 生 长 因 子 受 体 耘 郧 云 砸 ], 和 血 管 内 皮 生 长 [ 员 猿 鄄 员 源 ] 因 子 受 体 灾 耘 郧 云 砸 的 基 因 导 入 系 统, 体 外 实 验 证 实 猿 种 系 统 均 能 有 效 转 移 外 源 基 因 到 富 于 受 体 表 达 的 肿 瘤 细 [ 员 鄄 员 远 胞 ] 体 内 靶 向 性 转 移 基 因 到 肿 瘤 组 织, 将 细 胞 周 期 素 依 赖 的 蛋 白 激 酶 抑 制 物 基 因 责 员 体 外 导 入 人 肝 癌 细 胞, 显 著 抑 [ 员 远 制 肝 癌 细 胞 生 长, 并 诱 导 肝 癌 细 胞 凋 亡 ], 体 内 显 著 抑 制 荷 [ 员 苑 鄄 员 怨 瘤 裸 小 鼠 皮 下 肿 瘤 的 生 长 ] 靶 向 于 陨 郧 云 砸 与 耘 郧 云 砸 的 非 病 毒 基 因 导 入 系 统 耘 缘 基 因 导 入 系 统 与 郧 耘 苑 基 因 导 入 系 统, 分 别 与 外 源 质 粒 阅 晕 粤 形 成 稳 定 的 四 元 复 合 体 : 耘 缘 鄄 孕 悦 孕 辕 阅 晕 粤 辕 匀 粤 园 鄄 孕 悦 孕, 郧 耘 苑 鄄 孕 悦 孕 辕 阅 晕 粤 辕 孕 悦 孕 鄄 匀 粤 园, 复 合 体 大 小 为 员 园 园 耀耀耀耀耀耀耀耀 员 缘 园 灶 皂 对 于 该 导 入 系 统 的 入 膜 机 理 研 究 已 完 成 ] 应 用 郧 耘 苑 基 因 导 入 系 统 同 时 转 移 责 员 与 细 胞 因 子 基 因 郧 酝 鄄 悦 杂 云 ( 瘤 周 注 射 ) 到 荷 鼠 肝 癌 悦 缘 苑 月 蕴 辕 远 小 鼠 模 型, 动 物 肿 瘤 的 生 长 受 到 明 显 抑 制, 生 存 期 显 著 延 长, 小 鼠 脾 晕 运 和 悦 栽 蕴 细 [ 员 怨 胞 活 性 明 显 增 加 ] 表 员 受 体 介 导 的 体 内 外 基 因 转 移 受 体 靶 向 配 体 体 内 外 基 因 转 移 注 释 去 唾 液 酸 糖 蛋 白 ( 粤 泽 蚤 葬 造 燥 早 造 赠 糟 燥 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 ) 去 唾 液 酸 α 员, 酸 性 糖 蛋 白 ( 粤 泽 蚤 葬 造 燥 燥 则 燥 泽 燥 皂 怎 糟 燥 蚤 凿 ) 糖 异 生 蛋 白 ( 灶 藻 燥 早 造 赠 糟 燥 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 ) 半 乳 糖 基 ( 早 葬 造 葬 糟 贼 燥 泽 赠 造 葬 贼 藻 凿 ) ( 郧 葬 造 ) 源 合 成 配 体 分 子 匀 藻 责 郧 匀 怎 匀 鄄 苑 原 代 培 养 肝 细 胞 大 鼠 肝 细 胞 肝 肝 匀 藻 责 郧 联 合 腺 病 毒 或 腺 病 毒 原 多 聚 赖 氨 酸 ( 粤 凿 鄄 孕 蕴 ) 尾 静 脉 注 射 联 合 流 感 病 毒 匀 粤 肽 月 晕 蕴 援 悦 蕴 鄄 转 铁 蛋 白 受 体 转 铁 蛋 白 ( 栽 则 葬 灶 泽 枣 藻 则 则 蚤 灶 ) 运 缘 远 匀 藻 蕴 葬 月 晕 蕴 援 悦 蕴 鄄 匀 月 耘 棉 鼠 气 管 表 皮 联 合 粤 凿 鄄 孕 蕴 直 接 用 于 气 管 表 皮 胰 岛 素 受 体 胰 岛 素 ( 陨 灶 泽 怎 造 蚤 灶 ) 匀 藻 责 郧 孕 蕴 悦 辕 孕 砸 云 辕 缘 人 肝 癌 细 胞 系 单 克 隆 抗 体 ( 葬 灶 贼 蚤 鄄 贼 澡 则 燥 皂 燥 遭 燥 皂 燥 凿 怎 造 蚤 灶 ) α 鄄 血 栓 素 (α 鄄 贼 澡 则 燥 皂 遭 燥 皂 燥 凿 怎 造 蚤 灶 ) 鼠 肺 表 皮 细 胞 乳 糖 受 体 乳 糖 ( 蕴 葬 糟 贼 燥 泽 藻 ) 匀 藻 责 郧 乳 糖 特 异 性 凝 集 素 联 合 流 感 病 毒 匀 粤 肽 聚 合 的 免 疫 球 蛋 白 ( 责 燥 造 赠 皂 藻 则 蚤 糟 蚤 皂 皂 怎 灶 燥 早 造 燥 遭 怎 造 蚤 灶 ) 抗 分 泌 成 份 云 葬 遭 呼 吸 道 表 皮 肝 云 藻 则 噪 燥 造, 栽 援, 责 藻 则 葬 造 藻 泽, 允 援 悦 援, 运 葬 藻 贼 鄄 扎 藻 造, 悦 援 杂 援, 未 发 表 结 果 甘 露 糖 受 体 甘 露 糖 ( 酝 葬 灶 灶 燥 泽 藻 ) 巨 噬 细 胞 云 藻 则 噪 燥 造, 栽 援, 孕 藻 则 葬 造 藻 泽, 允 援 悦 援, 酝 葬 鄄 造 葬 则 燥, 云 援, 未 发 表 结 果 源 摇 存 在 的 问 题 与 应 用 前 景 为 了 更 好 地 将 受 体 介 导 的 基 因 转 移 应 用 于 临 床 基 因 治 疗, 有 很 多 需 要 解 决 的 问 题 在 体 内 应 用 时, 基 因 表 达 的 水 平 低, 持 续 时 间 短, 不 足 以 产 生 治 疗 作 用 一 个 称 为 位 点 控 制 区 ( 造 燥 糟 怎 泽 糟 燥 灶 贼 则 燥 造 则 藻 早 蚤 燥 灶 泽, 蕴 悦 砸 泽 ) 转 录 激 活 序 列, 可 以 加 入 到
中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志 摇 园 园 允 怎 灶 ; 怨 ( ) 员 源 怨 转 移 复 合 物 中, 蕴 悦 砸 泽 使 与 其 连 接 的 基 因 得 到 组 织 特 异 性 高 水 平 的 表 达 例 如 : 人 β 鄄 球 蛋 白, 人 悦 阅, 鸡 溶 酶 体 酶 和 鼠 酝 匀 悦 鄄 Ⅱ 提 高 治 疗 基 因 整 合 到 宿 主 细 胞 染 色 体 的 频 率, 甚 至 整 合 到 特 定 的 位 点, 亦 可 提 高 基 因 表 达 持 续 的 时 间 虽 然 栽 枣 鄄 责 蕴 鄄 粤 凿 鄄 责 蕴 鄄 阅 晕 粤 在 体 内 直 接 用 于 肺 的 气 管 表 皮 的 实 验 研 究 中 取 得 一 些 进 展, 但 静 脉 注 射 进 入 血 液 循 环 系 统 的 复 合 物 很 快 被 补 体 系 统 破 坏 另 外 复 合 物 颗 粒 过 大 难 于 通 过 小 的 毛 细 血 管 到 达 靶 器 官 因 此 复 合 物 必 须 进 一 步 改 造, 一 是 颗 粒 大 小 的 控 制 ; 二 是 降 低 使 用 剂 量 ; 三 是 不 被 免 疫 系 统 识 别 近 年 来, 人 们 致 力 于 制 备 更 小 的 转 移 复 合 物, 用 小 分 子 的 合 成 肽 [ 运 员 远 ] 取 代 多 聚 赖 氨 酸, 同 时 缩 短 配 体 的 氨 基 酸 序 列 ( 员 员 个 氨 基 酸 的 砸 郧 阅 ),[ 运 员 远 ] 砸 郧 阅 与 阅 晕 粤 形 成 靶 向 于 陨 灶 鄄 [ 园 贼 藻 则 早 则 蚤 灶 的 基 因 转 移 系 统, 即 是 一 个 成 功 的 例 子 ] 孕 造 葬 灶 噪 [ 员 ] 等 合 成 了 缘 段 不 同 长 度 的 分 枝 肽 作 为 多 聚 赖 氨 酸 的 替 代 物, 发 现 仅 需 远 耀耀耀耀耀耀耀耀 愿 个 氨 基 酸 即 能 包 裹 阅 晕 粤, 形 成 有 活 性 的 受 体 介 导 的 基 因 转 移 系 统 受 体 介 导 的 基 因 转 移 应 用 潜 力 很 大, 几 乎 员 园 园 豫 的 细 胞 都 能 用 加 入 灭 活 腺 病 毒 的 三 元 复 合 物 转 染 ; 毒 性 低, 对 被 转 染 细 胞 膜 几 乎 无 破 坏, 对 细 胞 的 损 伤 更 是 微 乎 其 微 ; 由 于 加 入 灭 活 腺 病 毒 或 病 毒 外 膜 多 肽, 相 对 安 全 ; 从 配 体 到 病 毒 外 膜 蛋 白 多 肽, 均 可 人 工 合 成, 便 于 大 量 制 备 ; 复 合 物 形 成 利 用 静 电 作 用, 因 此 既 可 结 合 阅 晕 粤 又 可 结 合 砸 晕 粤, 能 携 带 转 移 的 阅 晕 粤 长 度 可 达 源 愿 噪 遭 ; 可 根 据 需 要 选 择 配 体, 构 建 具 有 不 同 细 胞 特 异 性 的 靶 向 性 基 因 转 移 系 统 ; 应 用 于 体 内 时, 可 反 复 注 射 而 不 产 生 免 疫 反 应 对 受 体 介 导 的 基 因 转 移 的 分 子 机 理 的 研 究, 并 与 病 毒 性 载 体 基 因 转 移 系 统 转 移 阅 晕 粤 的 分 子 机 理 相 比 较, 进 一 步 模 拟 病 毒, 构 建 更 经 济 高 效 适 用 的 受 体 介 导 的 基 因 转 移 系 统, 将 为 基 因 治 疗 带 来 新 的 希 望 [ 参 考 文 献 ] [ 员 ] 摇 悦 澡 藻 灶 早 杂, 酝 藻 则 造 蚤 灶 燥 郧 栽, 孕 葬 泽 贼 葬 灶 蕴 匀 援 粤 增 藻 则 泽 葬 贼 蚤 造 藻 皂 藻 贼 澡 燥 凿 枣 燥 则 贼 澡 藻 糟 燥 怎 鄄 责 造 蚤 灶 早 燥 枣 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 贼 燥 阅 晕 粤 : 杂 赠 灶 贼 澡 藻 泽 燥 枣 α 鄄 皂 葬 糟 则 燥 早 造 燥 遭 怎 造 蚤 灶 鄄 阅 晕 粤 糟 燥 灶 躁 怎 鄄 早 葬 贼 [ 藻 允 ] 援 晕 怎 糟 造 藻 蚤 糟 粤 糟 蚤 凿 泽 砸 藻 泽, 员 怨 愿 猿, 员 员 : 远 缘 怨 鄄 远 远 怨 援 [ ] 摇 宰 怎 郧 再, 宰 怎 悦 匀 援 砸 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 鄄 皂 藻 凿 蚤 葬 贼 藻 凿 早 藻 灶 藻 凿 藻 造 蚤 增 藻 则 赠 葬 灶 凿 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 蚤 灶 增 蚤 增 燥 [ 允 ] 援 允 月 蚤 燥 造 悦 澡 藻 皂, 员 怨 愿 愿, 远 猿 : 员 源 远 员 鄄 员 源 远 源 援 [ 猿 ] 摇 运 蚤 则 糟 澡 藻 蚤 泽 砸, 运 蚤 糟 澡 造 藻 则 粤, 宰 葬 造 造 灶 藻 则 郧, 藻 贼 葬 造 援 悦 燥 怎 责 造 蚤 灶 早 燥 枣 糟 藻 造 造 鄄 遭 蚤 灶 凿 蚤 灶 早 造 蚤 早 葬 灶 凿 泽 贼 燥 责 燥 造 赠 藻 贼 澡 赠 造 藻 灶 蚤 皂 蚤 灶 藻 枣 燥 则 贼 葬 则 早 藻 贼 藻 凿 早 藻 灶 藻 凿 藻 造 蚤 增 藻 则 [ 赠 允 ] 援 郧 藻 灶 藻 栽 鄄 澡 藻 则, 员 怨 怨 苑, 源 : 源 园 怨 鄄 源 员 愿 援 [ 源 ] 摇 月 葬 噪 藻 则 粤, 杂 葬 造 贼 蚤 凿 酝, 蕴 藻 澡 则 皂 葬 灶 灶 匀, 藻 贼 葬 造 援 孕 燥 造 赠 藻 贼 澡 赠 造 藻 灶 蚤 皂 蚤 灶 藻 ( 孕 耘 陨 ) 蚤 泽 葬 泽 蚤 皂 责 造 藻, 蚤 灶 藻 曾 责 藻 灶 泽 蚤 增 藻 葬 灶 凿 藻 枣 枣 藻 糟 贼 蚤 增 藻 则 藻 葬 早 藻 灶 贼 枣 燥 则 糟 燥 灶 凿 藻 灶 泽 蚤 灶 早 葬 灶 凿 造 蚤 灶 噪 蚤 灶 早 责 造 葬 泽 皂 蚤 凿 阅 晕 粤 贼 燥 葬 凿 藻 灶 燥 增 蚤 则 怎 泽 枣 燥 则 早 藻 灶 藻 凿 藻 造 蚤 增 藻 则 [ 赠 允 ] 援 郧 藻 灶 藻 栽 鄄 澡 藻 则, 员 怨 怨 苑, 源 : 苑 苑 猿 鄄 苑 愿 援 ] 摇 砸 藻 灶 悦 悦, 蕴 蚤 允 允, 栽 蚤 葬 灶 孕 运, 藻 贼 葬 造 援 酝 燥 造 藻 糟 怎 造 葬 则 皂 藻 糟 澡 葬 灶 蚤 泽 皂 燥 枣 灶 燥 灶 鄄 增 蚤 则 葬 造 糟 葬 灶 糟 藻 则 早 藻 灶 藻 凿 藻 造 蚤 增 藻 则 赠 泽 赠 泽 贼 藻 皂 泽 贼 葬 则 早 藻 贼 蚤 灶 早 耘 郧 云 葬 灶 凿 陨 郧 云 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 [ 泽 允 ] 援 园 园,( 蚤 灶 责 则 藻 泽 泽 ) 援 [ 远 ] 摇 酝 蚤 凿 燥 怎 曾 孕, 酝 藻 灶 凿 藻 泽 悦, 蕴 藻 早 则 葬 灶 凿, 藻 贼 葬 造 援 杂 责 藻 糟 蚤 枣 蚤 糟 早 藻 灶 藻 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 则 皂 藻 凿 蚤 鄄 葬 贼 藻 凿 遭 赠 造 葬 糟 贼 燥 泽 赠 造 葬 贼 藻 凿 责 燥 造 赠 鄄 蕴 鄄 造 赠 泽 蚤 灶 藻 蚤 灶 贼 燥 澡 藻 责 葬 贼 燥 皂 葬 糟 藻 造 造 [ 泽 允 ] 援 晕 怎 糟 造 藻 蚤 糟 粤 糟 蚤 凿 泽 砸 藻 泽, 员 怨 怨 猿, 员 ( 源 ): 愿 苑 员 鄄 愿 苑 愿 援 [ 苑 ] 摇 孕 造 葬 灶 噪 悦, 在 葬 贼 造 燥 怎 噪 葬 造 运, 悦 燥 贼 贼 燥 灶 酝, 藻 贼 葬 造 援 郧 藻 灶 藻 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 则 蚤 灶 贼 燥 澡 藻 责 葬 贼 燥 鄄 糟 赠 贼 藻 泽 怎 泽 蚤 灶 早 葬 泽 蚤 葬 造 燥 早 造 赠 糟 燥 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 皂 藻 凿 蚤 葬 贼 藻 凿 藻 灶 凿 燥 糟 赠 贼 燥 泽 蚤 泽 燥 枣 阅 晕 粤 糟 燥 皂 责 造 藻 曾 藻 凿 憎 蚤 贼 澡 葬 灶 葬 则 贼 蚤 枣 蚤 糟 蚤 葬 造 贼 藻 贼 则 葬 鄄 葬 灶 贼 藻 灶 灶 葬 则 赠 早 葬 造 葬 糟 贼 燥 泽 藻 造 蚤 早 葬 灶 凿 [ 允 ] 援 月 蚤 燥 糟 燥 灶 躁 怎 早 葬 贼 藻 悦 澡 藻 皂, 员 怨 怨, 猿 ( 远 ): 缘 猿 猿 鄄 缘 猿 怨 援 [ 愿 ] 摇 月 怎 泽 糟 澡 造 藻 酝 援 悦 燥 贼 贼 燥 灶 酝, 运 蚤 则 造 葬 责 责 燥 泽 澡, 藻 贼 葬 造 援 砸 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 鄄 皂 藻 凿 蚤 葬 贼 藻 凿 早 藻 灶 藻 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 则 蚤 灶 贼 燥 栽 造 赠 皂 责 澡 燥 糟 赠 贼 藻 泽 增 蚤 葬 遭 蚤 灶 凿 蚤 灶 早 燥 枣 阅 晕 粤 辕 悦 阅 猿 葬 灶 贼 蚤 遭 燥 凿 赠 责 葬 则 鄄 贼 蚤 糟 造 藻 泽 贼 燥 贼 澡 藻 悦 阅 猿 栽 糟 藻 造 造 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 糟 燥 皂 责 造 藻 曾 [ 允 ] 援 匀 怎 皂 郧 藻 灶 藻 栽 澡 藻 则, 员 怨 怨 缘, 远 : 苑 缘 猿 鄄 苑 远 员 援 [ 怨 ] 摇 郧 怎 赠 允, 阅 则 葬 遭 藻 噪 阅, 粤 灶 贼 燥 灶 蚤 燥 怎 酝 援 阅 藻 造 蚤 增 藻 则 赠 燥 枣 阅 晕 粤 蚤 灶 贼 燥 皂 葬 皂 皂 葬 造 蚤 葬 灶 糟 藻 造 造 泽 遭 赠 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 鄄 皂 藻 凿 蚤 葬 贼 藻 凿 藻 灶 凿 燥 糟 赠 贼 燥 泽 蚤 泽 葬 灶 凿 早 藻 灶 藻 贼 澡 藻 则 葬 责 赠 [ 允 ] 援 酝 燥 造 月 蚤 燥 贼 藻 糟 澡 灶 燥 造, 员 怨 怨 缘, 猿 ( 猿 ): 猿 苑 援 [ 员 园 ] 宰 怎 郧 再, 宰 蚤 造 泽 燥 灶 允 酝, 杂 澡 葬 造 葬 遭 赠 云, 藻 贼 葬 造 援 砸 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 鄄 皂 藻 凿 蚤 葬 早 藻 灶 藻 凿 藻 造 蚤 增 鄄 藻 则 赠 蚤 灶 增 蚤 增 [ 燥 允 ] 援 允 月 蚤 燥 造 悦 澡 藻 皂, 员 怨 怨 员, 远 远 : 员 源 猿 猿 愿 鄄 员 源 猿 源 援 [ 员 员 ] 郧 葬 燥 蕴, 宰 葬 早 灶 藻 则 耘, 悦 燥 贼 贼 燥 灶 酝, 藻 贼 葬 造 援 阅 蚤 则 藻 糟 贼 蚤 灶 增 蚤 增 燥 早 藻 灶 藻 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 则 贼 燥 葬 蚤 则 憎 葬 赠 藻 责 蚤 贼 澡 藻 造 蚤 怎 皂 藻 皂 责 造 燥 赠 蚤 灶 早 葬 凿 藻 灶 燥 增 蚤 则 燥 怎 泽 鄄 责 燥 造 赠 造 赠 泽 蚤 皂 藻 阅 晕 粤 糟 燥 皂 责 造 藻 鄄 曾 藻 [ 泽 允 ] 援 匀 怎 皂 郧 藻 灶 藻 栽 澡 藻 则, 员 怨 怨 猿, 源 : 员 苑 鄄 源 援 [ 员 ] 田 培 坤, 任 圣 俊, 任 常 春, 等 援 一 种 新 的 以 细 胞 表 面 受 体 为 靶 向 的 基 因 导 入 系 统 [ 允 ] 援 中 国 科 学 ( 悦 辑 ), 员 怨 怨 愿, 愿 ( 远 ): 缘 缘 源 鄄 缘 缘 远 援 [ 员 猿 ] 蕴 蚤 允 酝, 匀 葬 灶 允 杂, 匀 怎 葬 灶 早 再, 藻 贼 葬 造 援 粤 灶 燥 增 藻 造 早 藻 灶 藻 凿 藻 造 蚤 增 藻 则 赠 泽 赠 泽 贼 藻 皂 贼 葬 则 鄄 早 藻 贼 蚤 灶 早 糟 藻 造 造 泽 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 灾 耘 郧 云 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 [ 泽 允 ] 援 悦 藻 造 造 砸 藻 泽, 员 怨 怨 怨, 怨 : 员 员 鄄 缘 援 [ 员 源 ] 韩 峻 松, 田 培 坤, 李 钧 敏, 等 援 血 管 内 皮 生 长 因 子 受 体 介 导 的 靶 向 性 非 病 毒 载 体 的 改 进 与 体 内 导 入 实 验 [ 允 ] 援 中 华 医 学 杂 志, 园 园 园, 愿 园 ( 缘 苑 ): 猿 苑 愿 鄄 猿 愿 援 [ 员 缘 ] 任 常 春, 李 锦 军, 赵 瑞 姣, 等 援 胰 岛 素 样 生 长 因 子 受 体 靶 向 性 基 因 导 入 系 统 的 体 外 体 内 导 入 瘤 谱 [ 允 ] 援 中 华 医 学 杂 志, 园 园 员, 愿 员 ( 员 愿 ): 员 员 员 猿 鄄 员 员 员 苑 援 [ 员 远 ] 任 常 春, 田 培 坤, 曲 淑 敏, 等 援 细 胞 周 期 素 依 赖 的 蛋 白 激 酶 抑 制 物 诱 导 肝 癌 细 胞 凋 亡 [ 允 ] 援 科 学 通 报, 员 怨 怨 苑, 源 ( ): 源 愿 鄄 源 猿 援 [ 员 苑 ] 任 常 春, 田 培 坤, 曲 淑 敏, 等 援 靶 向 于 胰 岛 素 样 生 长 因 子 受 体 的 基 因 导 入 系 统 [ 允 ] 援 肿 瘤 杂 志, 园 园 员, ( 远 ): 源 猿 员 鄄 源 猿 源 援 [ 员 愿 ] 韩 峻 松, 田 培 坤, 柳 湘, 等 援 靶 向 性 非 病 毒 载 体 介 导 责 员 宰 粤 云 鄄 员 基 因 对 肝 癌 细 胞 的 抑 制 作 用 [ 允 ] 援 中 国 科 学 ( 悦 缉 ), 园 园 园, 猿 园 ( 猿 园 ): 缘 猿 鄄 缘 苑 援 [ 员 怨 ] 蕴 蚤 怎 载, 栽 蚤 葬 灶 孕, 再 怎 再, 藻 贼 葬 造 援 耘 灶 澡 葬 灶 糟 藻 凿 葬 灶 贼 蚤 怎 皂 燥 则 藻 枣 枣 藻 糟 贼 燥 枣 耘 郧 云 砸 鄄 贼 葬 则 早 藻 贼 藻 凿 责 员 宰 粤 云 鄄 员 葬 灶 凿 郧 酝 鄄 悦 杂 云 早 藻 灶 藻 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 则 蚤 灶 贼 澡 藻 藻 泽 贼 葬 遭 造 蚤 泽 澡 藻 凿 皂 怎 则 蚤 灶 藻 澡 藻 责 葬 贼 燥 皂 葬 遭 赠 责 藻 则 蚤 贼 怎 皂 燥 则 葬 造 蚤 灶 躁 藻 糟 贼 蚤 燥 灶 [ 允 ] 援 悦 葬 灶 糟 藻 则 郧 藻 灶 藻 栽 澡 藻 则, 园 园, 怨 ( 员 ): 员 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