实 验 研 究 孟 鲁 司 特 和 卡 介 苗 多 糖 核 酸 对 哮 喘 大 鼠 血 单 个 核 细 胞 中 # 和 %: 表 达 的 影 响 金 耀 建 宋 志 燕 胡 野 钱 旭 波 王 晓 杨 何 旭 瑛 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院 免 疫 学 教 研 室 浙 江 金 华 ) $ 金 华 市 中 医 院 浙 江 金 华 ) 摘 要 目 的 研 究 孟 鲁 司 特 和 卡 介 苗 多 糖 核 酸 对 哮 喘 大 鼠 血 单 个 核 细 胞 中 信 号 转 导 子 和 转 录 激 活 子 ' (' %( 和 白 细 胞 介 素 9:/9%( 的 转 录 表 达 的 影 响 方 法 只 体 重 为 9 - 清 洁 级!/./3@#1 雄 性 大 鼠 随 机 分 为 9 组 哮 喘 组 孟 鲁 司 特 组 卡 介 苗 多 糖 核 酸 组 和 正 常 对 照 组 用 卵 白 蛋 白 制 备 大 鼠 哮 喘 模 型 计 数 血 中 嗜 酸 性 粒 细 胞 5 应 用 双 抗 体 夹 心 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 测 定 血 浆 中 :/9 和 / 干 扰 素 &%/ 浓 度 采 用?55% 荧 光 实 时 定 量 法 测 定 (' %( 和 :/9 %( 的 相 对 表 达 量 结 果 哮 喘 组 血 单 个 核 细 胞 中 (' %( 和 :/9 %( 的 表 达 量 高 于 其 他 各 组 $ 在 孟 鲁 司 特 组 和 卡 介 苗 多 糖 核 酸 组 中 两 者 的 表 达 量 相 近 <$ 哮 喘 组 除 了 &%/ 水 平 低 外 其 余 无 论 是 (' %(:/9 %(5 绝 对 值 等 都 是 9 组 中 最 高 的 $ 除 哮 喘 组 外 其 余 组 的 各 项 指 标 相 近 <$ (' %( 表 达 量 与 :/9 %( 表 达 量 :/9 浓 度 5 绝 对 值 呈 正 相 关 $ 与 &%/ 浓 度 呈 负 相 关 $ 结 论 哮 喘 大 鼠 血 单 个 核 细 胞 中 (' %( 和 :/9 %( 的 表 达 增 强 且 呈 正 相 关 孟 鲁 司 特 和 卡 介 苗 多 糖 核 酸 可 以 下 调 (' %( 和 :/9 %( 的 表 达 可 能 为 其 抑 制 哮 喘 气 道 炎 症 形 成 的 重 要 机 制 之 一 ( * 关 键 词 哮 喘 孟 鲁 司 特 卡 介 苗 多 糖 核 酸 (' %(:/9 %( 大 鼠 中 图 分 类 号 $ )) 文 献 标 识 码 ( 文 章 编 号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收 稿 日 期 修 回 日 期 基 金 项 目 金 华 市 科 学 技 术 研 究 项 目 )99 作 者 简 介 金 耀 建 男 硕 士 副 教 授 主 攻 方 向 临 床 免 疫 学 研 究 ))
信 号 转 导 子 和 转 录 激 活 子 + +.*!+ *0!+2!+*!(+ 是 一 种 新 型 的 能 与 靶 基 因 调 控 区 3%( 结 合 的 转 录 因 子 家 族 近 年 的 许 多 研 究 表 明 ( 蛋 白 活 化 过 度 表 达 持 续 诱 导 骨 髓 中 的 多 能 造 血 干 细 胞 向 成 熟 的 5 分 化 增 殖 是 哮 喘 时 5 生 成 增 多 的 主 要 原 因 -) ( 在 细 胞 的 分 化 和 过 敏 性 气 道 炎 症 中 起 重 要 作 用 9 杨 玉 成 等 报 道 卡 介 苗 多 糖 核 酸 /#1/ +**!.*#* * * /% 治 疗 变 应 性 鼻 炎 病 人 后 外 周 血 单 个 核 细 胞 培 养 上 清 液 中 :/9:/ 粒 细 胞 / 巨 噬 细 胞 集 落 刺 激 因 子 6/ & 水 平 明 显 降 低 &%/ 含 量 显 著 升 高 冼 乐 武 等 报 道 孟 鲁 司 特 #. +6A 处 理 后 的 哮 喘 大 鼠 外 周 血 单 个 核 细 胞 培 养 液 中 :/9 水 平 升 高 而 &%/ 水 平 下 降 但 /% 和 6A 对 (' %( 和 :/9 %( 的 影 响 鲜 有 报 道 本 实 验 观 察 /% 和 6A 对 (' %( 和 :/9 %( 表 达 的 影 响 旨 在 从 基 因 调 控 水 平 上 探 讨 哮 喘 的 发 病 机 制 和 抗 哮 喘 药 物 的 作 用 机 制 材 料 和 方 法 $ 材 料 清 洁 级!./3@#13 雄 性 大 鼠 只 体 重 9 - 温 州 医 学 院 动 物 实 验 中 心 提 供 6A 杭 州 默 沙 东 制 药 有 限 公 司 产 品 规 格 ; 片 /% 浙 江 万 马 药 业 有 限 公 司 产 品 规 格 :; 支 $ 淋 巴 细 胞 分 离 液 上 海 华 精 生 物 高 科 技 有 限 公 司 产 品 5(5%%( 抽 提 剂 美 国 6 公 司 产 品 0!( 6 &!++! *3%(1++A 逆 转 录 *3%( 合 成 试 剂 盒 美 国 6&!+ 公 司 产 品?55%6 +! 67 荧 光 试 剂 盒 美 国 ( 公 司 产 品 仪 德 国 55%3& 公 司 规 格 6 +!1* )) 型 荧 光 定 量 仪 美 国 ( 公 司 产 品 低 温 高 速 离 心 机 美 国 5A6(% E:5 公 司 产 品 :/9 和 &%/ 测 定 用 5:( 试 剂 盒 购 自 上 海 轩 昊 科 技 发 展 有 限 公 司 美 国 公 司 生 产 进 口 分 装 $ 方 法 $$ 哮 喘 模 型 的 建 立 和 取 材 将 只 雄 性 3 大 鼠 按 照 随 机 数 字 表 法 分 为 哮 喘 组 6A 组 /% 组 和 正 常 对 照 组 每 组 ) 只 采 用 卵 白 蛋 白 "(" 级 公 司 产 品 制 备 模 型 哮 喘 )9 模 型 的 制 备 参 照 叶 乐 平 和 # + 等 的 方 法 略 作 修 改 分 致 敏 和 激 发 两 个 阶 段 哮 喘 组 6A 组 /% 组 分 别 于 第 天 和 第 天 每 只 大 鼠 给 予 $ : 含 "( 和 氢 氧 化 铝 凝 胶 的 无 菌 抗 原 液 分 处 注 射 四 肢 近 侧 端 内 侧 皮 下 各 注 射 $ : 腹 腔 注 射 $ : 正 常 对 照 组 用 不 含 "( 的 氢 氧 化 铝 凝 胶 代 替 抗 原 液 注 射 方 法 同 其 他 ) 组 第 天 开 始 将 哮 喘 组 6A 组 和 /% 组 大 鼠 分 别 置 于 自 制 的 密 闭 有 机 玻 璃 箱 9 *) * * 中 用 雾 化 器 德 国 百 瑞 公 司 产 品 将 含 "( 的 无 菌 生 理 盐 水 溶 液 雾 化 吸 入 每 日 次 每 次 正 常 对 照 组 用 无 菌 生 理 盐 水 代 替 方 法 同 上 6A 组 于 激 发 前 ) 第 9 天 用 6A 灌 胃 ; 每 日 次 第 天 开 始 每 日 激 发 前 $ 用 6A 灌 胃 剂 量 同 上 /% 组 于 激 发 前 第 天 给 予 腹 腔 注 射 /%$ ; 每 日 次 第 天 开 始 每 日 激 发 前 给 予 腹 腔 注 射 /% 剂 量 同 上 连 续 激 发 哮 喘 组 大 鼠 出 现 烦 躁 不 安 抓 鼻 呼 吸 急 促 继 而 俯 伏 不 动 口 唇 紫 绀 等 症 状 表 明 哮 喘 模 型 已 建 立 各 组 末 次 激 发 9 后 处 死 取 材 用 乌 拉 坦 溶 液 腹 腔 注 射 麻 醉 大 鼠 ) ; 腹 主 动 脉 采 血 9 - : 注 入 含 肝 素 抗 凝 剂 的 无 菌 试 管 内 混 匀 同 时 留 取 左 肺 中 下 段 肺 组 织 用 9 多 聚 甲 醛 溶 液 固 定 包 埋 切 片 9 厚 经 苏 木 精 / 伊 红 染 色 后 观 察 支 气 管 周 围 的 炎 症 病 变 $$ 血 中 :/9 和 &%/ 浓 度 的 测 定 和 5 绝 对 值 计 数 采 用 双 抗 体 夹 心 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 测 定 血 浆 中 :/9 和 &%/ 的 浓 度 测 定 方 法 按 说 明 书 进 行 操 作 5 绝 对 值 计 数 用 伊 红 染 色 液 手 工 计 数 $$) 总 %( 的 抽 提 和 逆 转 录 合 成 *3%( 取 单 个 核 细 胞 加 :5(5% 抽 提 剂 以 后 步 骤 按 说 明 书 操 作 最 后 将 抽 提 的 总 %( 溶 解 于 :35 处 理 水 中 在 含 总 %( 的 : 35 处 理 水 中 加 入 #!!$ ;: : 轻 轻 摇 匀 孵 育 加 入!* '. 2! 9 : '#* 6 '.*#+ '! E;: : 6%7 : 混 匀 ) 孵 育 最 后 加 入 0!( 6 6/6.:" 0!+!+*!+ E;: : 轻 轻 混 匀 置 扩 增 仪 9 维 持 然 后 维 持 取 出 保 存 $$9 荧 光 定 量 测 定 (' %( 和 :/9 %( 用?55% 作 为 荧 光 染 料 每 份
中国当代儿科杂志 第!! 卷第 " 期 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%% &'( ) *&+ )./ 01( 2 3 "##$ 年 " 月 标本同时测定 JK@K<9.?7@* 磷酸 W.?7@和 A 4+ 5 6!! 7+ 6 " 896 "##$ 甘油醛脱氢酶 ( ^@0QM).?7@% JK@K<9.?7@和 T2 3T( U (" [)!# *X( 终浓度为! [) $B Q7@模板 " *X$QS0&处理水 >6 = *X% 反应体系均为 "# *X% W.?7@ 的 相 对 表 达 量 分 别 用 公 式!$" )#$<m 变性!< $=#m 扩增条件&$<m预变性!#.( " ;( & & JK@K<9 ^@0QM) [! ### 和 " ;( & & W ^@0QM) [! ### 计 退火和延伸!.( )$W# 个循 环% 算得出% JK@K<9.?7@寡核苷酸引物序列&上游引!6 "6 <%统计学方法%%统计学分析采用 J0JJ!!6 < 物 <o ^@&K@&@@&@^&@K^K&&^K^K& $下游引 软件完成$所有数据均进行正态性检验% 数据以均 物 <o K&@@@&&@&K^&&@^@@@^K^K $ 产物长度 数 _标准差( K_F ) 表示# 多组样本均数比较采用单 := 9/ # W.?7@寡核苷酸引物序列&上游引物 <o 因素方差分析( ]) d2 I@7]4@) $ 方差齐者两两比 $ 下 游 引 物 <o &K^K&@&&&K^KK&K^&KKK&K& 2 3 较采用 J7e检验$ 两变量的相关性分析采用 0- K&^KK&K&&^K^^K^KK&&K $ 产 物 长 度!>< 9/# + ) 直线相关法% ^@0QM.?7@ 寡 核 苷 酸 引 物 序 列& 上 游 引 物 <o K&@@&K@&@K^^K&K@&@K^KK&&@^ $ 下游引物 #"结果 <o @^&^^^@K&K&^&K&&K^ $产物长度! 9/% 以上 引 物 均 由 上 海 基 康 生 物 有 限 公 司 合 成%!"组织病理学特点 JK@K<9.?7@和 W.?7@荧光定量 0&?反应体 哮喘组支气管痉挛收缩呈菊花状$ 管腔内有分 系如下&上游引物和下游引物各 A *X( 终浓度为 A## ).Y X) $ T2 3T( U( " [)!# *X( 终 浓 度 为 泌物$支气管和血管周围可见明显的炎性细胞浸润$! [) $ B Q7@ 模 板 " *X$ QS0& 处 理 水 >6W *X% ^@0QM.?7@荧光定量 0&?反应体系如下& 上游 以淋巴细胞和 S]J 为主#Te组和 N&^ 0J7组肺组 织炎性细胞浸润等病理改变与哮喘组比较明显减 轻#正常对照组肺组织正常( 图!) % 引物和下游引物各 " *X( 终浓度为 "## ).Y X) $ 伊红染色& `!??% "$&正常对照组大鼠肺组织切片# ]&哮喘组大鼠肺组织显示气道 ""图!"肺组织病理学切片图$ 苏木精X 0J7组肺组织气道周围可见炎性细胞浸润但较哮喘组为轻# 4&Te组肺组织显示气道周围少量 周围有大量的炎性细胞浸润# T&N&^ 炎性细胞浸润$较哮喘组明显减轻% #% #"- 组大鼠血中 :R5绝对值#\ -和\ +0X!水平 哮喘组 S]J 绝对值和 W 水平与 Te组*N&^ #% " 血 单 个 核 细 胞 中 5[$[.* O&0$ 和 \ O&0$的表达水平 哮喘组 JK@K<9.?7@的表达量显著高于 Te 0J7组和正常对照组相比显著升高$ 87 &水平明 ) #Te 显下降$差异均有非常显著性意义 (!\ 组*N&^ 0J7组及正常对照组之间的 S]J 绝对值* W和 87 &水平比较$差异无显著性意义( 表!) % %%表!"- 组大鼠血中 :R5绝对值#\ -和\ +0X!水平 的比较 组别 鼠数 ( K_F ) S]J 绝对值 (!# : Y X) W ( /LY.X) 87 & ( /LY.X) 正常对照组 A6 =W _"6!>6!: _=6 "< 哮喘组!!" _<6!# A=6 >< _!W6 >A!=6 W< _W6!" "<6 A> _=6!= N&^ 0J7组 <6 "= _"6 :<!$6 =" _$6 "A6 "W _W6 :: Te组 =6 #: _A6 :A " :: _$6 W= "!6 W" _W6 := L值 "$6 :! A!6 #W!!6!值 # # # W.?7@ 的 表 达 量 显 著 高 于 组和 正 常 对 照 组$ N&^ 0J7组和正常对照组$ 差异均有非常显著性意 义(!\ ) #哮喘组 JK@K<9.?7@的表达量高于 N&^ 0J7组$ W.?7@的表达量高于 Te组$ 差 异均有显著性意义 (!\#<) # Te组与 N&^ 0J7 组 JK@K<9.?7@和 W.?7@的表达量相近$ 差 异无显著性意义( 表 ") % -"相关性分析 W 血单个核细胞中 JK@K<9.?7@表达量与.?7@表达量* W 浓度*S]J 绝对值呈正相关 ( "k >A#$ =<#$ W\ ) $ 与 87 &浓度呈显 著负相关( "k;=w=$!\) % W.?7@的 ' <'
表 达 量 分 别 与 血 浆 中 的 :/9 浓 度 5 绝 对 值 呈 正 相 关 $$$ 与 血 浆 中 &%/ 浓 度 呈 负 相 关 $$ 表 组 大 鼠 血 中 单 个 核 细 胞 # 和 %: 表 达 结 果 的 比 较. 组 别 鼠 数 (' %( :/9 %( 正 常 对 照 组 ) $ $ $ 9$ 哮 喘 组 ) $9 99$) 9$ )$ /% 组 ) ))$ $) ' $ )$ ' 6A 组 ) $ $) * )$ 9$9 ' 值 $99 $ 值 $ $ 正 常 对 照 组 比 较 $ 与 哮 喘 组 比 较 ' $ *$ 讨 论 ( 属 于 信 号 转 导 子 和 转 录 激 活 子 家 族 的 一 员 在 细 胞 质 内 以 潜 伏 的 单 体 形 式 存 在 由 基 因 序 列 高 度 相 同 的 ( 和 (' 组 成 其 编 码 基 因 位 于 大 鼠 =)$ 两 者 紧 密 相 连 因 ( 和 (' 的 氨 基 酸 序 列 有 相 同 故 在 调 节 造 血 和 免 疫 细 胞 的 功 能 上 二 者 具 有 相 同 的 作 用 如 在 调 控 5 分 化 增 殖 的 信 号 传 导 上 ( 和 (' 的 功 能 是 相 同 的 李 国 平 等 在 研 究 中 发 现 "( 能 诱 导 哮 喘 小 鼠 脾 细 胞 增 殖 和 脾 细 胞 中 的 ( 磷 酸 化 增 加 ( 与 3%( 探 针 的 结 合 力 说 明 ( 信 号 途 径 在 "( 诱 导 的 哮 喘 发 病 过 程 中 起 重 要 作 用! 等 研 究 发 现 ( 对 于 阻 止 细 胞 凋 亡 促 进 细 胞 增 殖 是 必 须 的 如 在 5 分 化 过 程 中 早 期 (' 被 活 化 而 在 终 末 期 ( 也 被 活 化..+ 等 用 脐 带 血 的 3)9 8 细 胞 研 究 发 现 ( 在 5 分 化 增 殖 中 具 有 重 要 的 作 用 本 实 验 发 现 哮 喘 组 大 鼠 血 中 单 个 核 细 胞 (' %( 和 :/9 %( 的 相 对 表 达 量 高 于 正 常 对 照 组 且 呈 正 相 关 同 时 哮 喘 组 与 正 常 对 照 组 相 比 5 绝 对 值 和 :/9 水 平 明 显 增 高 &%/ 水 平 明 显 降 低 哮 喘 大 鼠 肺 组 织 光 镜 下 可 见 细 支 气 管 及 血 管 周 围 炎 性 细 胞 明 显 浸 润 以 5 和 淋 巴 细 胞 为 主 (' %( 和 :/9 %( 的 相 对 表 达 量 分 别 与 5 绝 对 值 :/9 水 平 呈 正 相 关 与 &%/ 水 平 呈 负 相 关 说 明 大 鼠 哮 喘 炎 症 反 应 时 (' 和 ) :/9 的 基 因 转 录 翻 译 水 平 皆 升 高. 等 和 9! 等 报 道 在 缺 乏 ( 的 情 况 下 ) ( 的 过 量 表 达 会 引 起 幼 稚 39 8 细 胞 向 39 8 细 胞 分 化 提 示 ( 在 3 9 8 细 胞 :/9 基 因 转 录 活 化 中 起 关 键 作 用 (' 的 高 表 达 可 能 进 一 步 诱 导 其 下 游 炎 症 基 因 :/9 等 型 细 胞 因 子 大 量 产 生 抑 制 &%/ 的 产 生 使 ; 比 例 失 衡 分 泌 :/9 和 :/ 通 过 调 节 5 产 生 和 肥 大 细 胞 嗜 碱 性 粒 细 胞 5 的 分 化 和 募 集 在 启 动 和 维 持 哮 喘 反 应 中 起 重 要 作 用 :/9 对 有 交 叉 调 节 作 用 且 能 使 细 胞 分 化 为 细 胞 抑 制 细 胞 分 化 为 细 胞 造 成 细 胞 和 细 胞 的 比 例 失 调 &%/ 水 平 下 调 6A 是 一 种 高 选 择 性 半 胱 氨 酰 白 三 烯 受 体 拮 抗 剂 它 可 抑 制 血 清 可 溶 性 :/ 受 体 :/9 可 溶 性 细 胞 间 黏 附 分 子 / 和 嗜 酸 性 粒 细 胞 阳 离 子 蛋 白 等 多 种 细 胞 因 子 及 炎 症 介 质 的 释 放 还 能 抑 制 炎 症 细 胞 的 游 走 聚 集 增 殖 和 活 化 /% 是 从 提 取 的 多 糖 核 酸 以 脂 多 糖 为 主 其 余 为 核 酸 成 分 具 有 多 种 免 疫 调 节 作 用 并 且 3%( 中 含 有 丰 富 的 结 构 具 有 较 强 的 刺 激 作 用 本 实 验 发 现 用 6A 和 /% 治 疗 的 哮 喘 大 鼠 细 支 气 管 周 围 的 炎 症 细 胞 5 和 淋 巴 细 胞 浸 润 明 显 减 轻 5 绝 对 值 :/9 水 平 明 显 下 降 &%/ 水 平 明 显 升 高 同 时 也 有 效 地 抑 制 了 单 个 核 细 胞 中 (' %( 和 :/9 %( 的 表 达 可 能 的 机 制 是 哮 喘 时 高 水 平 的 :/9 与 其 细 胞 膜 受 体 结 合 激 活 了 (A;( 信 号 通 路 磷 酸 化 的 ( 分 子 形 成 同 源 或 异 源 二 聚 体 然 后 二 聚 体 进 入 细 胞 核 起 转 录 因 子 的 作 用 促 使 细 胞 分 化 增 殖 相 关 基 因 的 表 达 -) 现 6A 和 /% 都 能 抑 制 型 细 胞 因 子 :/9 的 分 泌 促 进 型 细 胞 因 子 &%/ 的 分 泌 从 而 抑 制 (' %( 和 :/9 %( 的 表 达 达 到 了 治 疗 哮 喘 的 目 的 9 参 考 文 献..+6 #.+ :!+ 2! A! :$+.*! *0!2!+*! ( +!=.! 2!+#2! 2. *! '#/!0 3)9 8 *#+$# ) )9/9$ # 5 6! #' *! *E :/! $3%( '++#* 2!*!!*!+!0#+!!!20!!!* '++$6### )/9$ )!0 6. + :: + 6 :F0 # $!+#2#.*+! '+.*'!@+# *$.#! * /)9$ 9! %!+A A *. ( #$++'#2 /
*#2! *!@12# $./ # 9))9/)9$ 杨 玉 成 洪 苏 玲 黄 江 菊 王 琴 孙 荣 钱 迪 等 $ 卡 介 苗 多 糖 核 酸 对 变 应 性 鼻 炎 病 人 ; 失 衡 状 态 的 调 节 $ 第 三 军 医 大 学 学 报 /$ 冼 乐 武 梁 宗 安 刘 春 涛 $ 支 气 管 哮 喘 大 鼠 单 个 核 细 胞 ; 的 变 化 及 孟 鲁 司 特 的 干 预 作 用 $ 中 华 结 核 和 呼 吸 杂 志 ))/))$ 叶 乐 平 谢 丽 微 李 昌 崇 $ 布 地 奈 德 对 哮 喘 大 鼠 信 号 转 导 子 和 转 录 激 活 子 的 表 达 $ 中 华 微 生 物 学 和 免 疫 学 杂 志 /)$ # +5 " *!%.@#+( A+$52*2 /.* +!.*.!#!@1* + '!@ %!@1!+ $(+!!!6 /9$ :0 A * 3$( #1++2!#07!+ /.+!#/=. 0 /3#3# $6+ 99/9$..+6 #.+ :!+ 2! A! :$ +.*! *0!2!+*! ( +!=.! 2!+#2! 2. *! '#/!0 3)9 8 *#+$# ) )9/9$ 李 国 平 刘 志 刚 冉 丕 鑫 丘 劲 钟 南 山 $ 卵 白 蛋 白 诱 导 哮 喘 小 鼠 脾 细 胞 增 殖 中 ( 的 变 化 $ 细 胞 与 分 子 免 疫 学 杂 志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王 曼 芝 何 庆 南 袁 红 霞 刘 晓 亮 $:/9 :/ 及 5 在 儿 童 哮 喘 变 异 性 哮 喘 中 的 价 值 $ )/)9$ 李 光 赵 育 莹 曲 书 强 逮 晓 辉 刘 晨 唐 建 民 等 $ 支 气 管 哮 喘 模 型 大 鼠 :/9:/&%/ 的 检 测 $ 9 99/9$ 本 文 编 辑 吉 耕 中 )