实用头孢分析手册6.12

Best Value Guaranteed Prduct Quality Innvatin t Benefit Custmers H N N S CH 3 H H N N S CH 3 博 纳 艾 杰 尔 科 技 BONNA-AGELA TECHNOLOGIES 头 孢 分 析 实 例 本 文 收 录 了 依 照 010 版 药 典 方 法 完 成 的 10 种 头 孢 菌 素 类 药 物 的 分 析 结 果, 重 点 介 绍 了 Innval AQ C18 用 于 头 孢 羟 氨 苄 分 析 和 Durashell C18-AM 用 于 注 射 用 头 孢 拉 定 分 析 的 研 究 成 果 Innval AQ C18 用 于 头 孢 羟 氨 苄 中 控 分 析 和 颗 粒 剂 分 析 时, 不 仅 很 好 地 解 决 了 分 离 和 峰 形 问 题, 其 使 用 寿 命 也 比 大 多 数 C18 色 谱 柱 高 -6 倍 Durashell C18-AM 不 仅 实 现 了 快 速 的 分 析 良 好 的 分 离 和 峰 形, 而 且 将 使 用 寿 命 提 高 了 5-10 倍, 甚 至 显 著 优 于 某 些 品 牌 的 耐 碱 色 谱 柱 官 方 微 信 400-606-8099 www.agela.cm.cn service@agela.cm.cn

Best Value Guaranteed Prduct Quality Innvatin t Benefit Custmers 这 两 个 案 例 均 按 照 色 谱 柱 筛 选 确 定 优 选 色 谱 柱 优 选 色 谱 柱 批 次 重 现 性 验 证 优 选 色 谱 柱 寿 命 测 试 客 户 验 证 的 思 路 和 流 程 得 以 完 成, 经 历 了 长 期 的 测 试 和 验 证, 因 此 具 有 一 定 的 参 考 价 值 和 较 高 的 实 用 性 在 未 来 的 工 作 中, 我 们 将 逐 步 扩 大 头 孢 品 种 的 研 究 范 围, 也 欢 迎 广 大 客 户 来 电 来 函 交 流 或 者 直 接 与 我 们 各 地 的 销 售 员 联 系 ( 客 服 邮 箱 :service@agela.cm.cn; 客 服 电 话 :400-606-8099) 最 新 的 研 究 成 果 将 在 服 务 平 台 和 仪 器 信 息 网 的 头 孢 专 栏 中 更 新 当 我 们 的 头 孢 应 用 积 累 到 一 定 数 量, 将 印 制 第 二 版, 以 飨 读 者 前 言 头 孢 菌 素 类 抗 生 素 一 般 由 微 生 物 发 酵 纯 化 精 制 以 及 化 学 修 饰 等 过 程 制 得, 与 一 般 化 学 合 成 药 物 相 比, 生 产 过 程 更 加 复 杂, 其 纯 度 一 般 也 较 化 学 药 品 低, 而 且 该 类 抗 生 素 本 身 并 不 稳 定, 多 种 条 件 ( 酸 碱 热 光 湿 等 ) 均 可 导 致 其 降 解, 形 成 一 系 列 的 降 解 物 因 此, 在 生 产 和 储 存 过 程 中, 对 头 孢 菌 素 类 抗 生 素 有 关 物 质 的 控 制 是 其 质 量 控 制 的 关 键 目 前 [1], 各 国 药 典 多 采 用 HPLC 法 测 定 其 有 关 物 质 010 版 中 国 药 典 二 部 中, 总 计 收 录 头 孢 菌 素 类 抗 生 素 7 种, 制 剂 48 种, 基 本 都 采 用 了 HPLC 方 法, 其 液 相 条 件 概 括 起 [] 来 有 以 下 特 点 : (1) 多 数 使 用 磷 酸 盐 缓 冲 液 系 统 作 流 动 相, 某 些 ph 值 较 高, 某 些 有 机 相 含 量 低 于 5%( 如 头 孢 羟 氨 苄 头 孢 唑 林 等 ); () 对 于 侧 链 中 含 有 碱 性 基 团 的 头 孢 菌 素, 流 动 相 中 常 添 加 有 机 胺 类 化 合 物 或 选 择 含 铵 盐 的 缓 冲 液 以 封 闭 固 定 相 表 面 残 余 硅 羟 基 ( 如 头 孢 丙 烯 头 孢 哌 酮 等 ); (3) 选 择 低 ph 醋 酸 盐 缓 冲 液 使 之 和 碱 性 基 团 形 成 离 子 对, 以 抑 制 固 定 相 表 面 残 余 硅 羟 基 和 有 机 碱 相 互 作 用 所 致 的 色 谱 峰 的 展 宽 和 拖 尾 ( 如 头 孢 呋 辛 头 孢 西 丁 等 ) 由 于 目 前 药 典 各 论 项 下, 未 规 定 或 推 荐 具 体 的 填 料 特 性 ; 兼 之 部 分 抗 生 素 品 种 对 色 谱 柱 的 选 择 性 要 求 较 高, 因 此, 面 [3] 对 形 形 色 色 的 C18 色 谱 柱, 实 验 人 员 常 常 难 以 迅 速 作 出 选 择, 从 而 在 挑 选 色 谱 柱 的 过 程 中 浪 费 大 量 的 时 间 精 力 和 物 力 此 外, 在 我 们 与 一 些 头 孢 生 产 厂 家 沟 通 的 过 程 中, 发 现 头 孢 品 种 在 中 控 及 某 些 剂 型 的 分 析 中 普 遍 存 在 色 谱 柱 使 用 寿 命 极 短 的 情 况, 有 些 甚 至 仅 能 耐 受 几 十 针 或 者 使 用 一 个 星 期 左 右 针 对 上 述 现 象, 为 保 证 广 大 使 用 者 实 验 的 顺 利 实 施, 减 少 实 验 人 员 在 色 谱 柱 选 择 上 花 费 的 时 间, 降 低 各 单 位 的 实 验 成 本, 我 们 开 展 了 针 对 头 孢 品 种 的 色 谱 柱 选 择 研 究 工 作, 并 着 重 解 决 批 次 重 现 性 使 用 寿 命 等 日 常 分 析 检 测 中 的 实 际 问 题 目 的 是 按 照 药 典 方 法 和 要 求, 解 决 头 孢 分 析 中 实 际 存 在 的 保 留 峰 形 分 离 和 使 用 寿 命 等 问 题, 为 实 验 人 员 推 荐 适 用 可 靠 耐 用 的 色 谱 柱 天 津 博 纳 艾 杰 尔 科 技 有 限 公 司 作 为 一 家 专 业 生 产 高 纯 硅 胶 改 性 填 料 和 色 谱 柱 的 厂 家, 针 对 头 孢 分 析 中 的 实 际 问 题 展 开 了 系 统 深 入 的 研 究 本 手 册 收 录 的 案 例, 都 是 我 们 联 合 一 些 头 孢 生 产 企 业 共 同 考 察 验 证 的 成 果, 并 将 在 我 们 的 应 用 网 站 和 后 续 出 版 物 中 持 续 更 新 其 它 头 孢 品 种 的 最 新 成 果 限 于 时 间 和 水 平, 本 文 难 免 有 不 当 之 处, 欢 迎 广 大 读 者 批 评 指 正 400-606-8099 www.agela.cm.cn service@agela.cm.cn

1. Innval AQ C18 分 析 头 孢 羟 氨 苄 头 孢 羟 氨 苄 分 析 结 果 含 量 测 定 流 动 相 :ph 5.0 的 磷 酸 二 氢 钾 - 甲 醇 (:), 等 度 洗 脱 ; 检 测 波 长 :30 nm; 柱 温 :30 ; 进 样 量 :10μl; 流 速 :1.0 ml/min 色 谱 柱 :Innval AQ C18, 5μm, 100Å,4.6 150mm 头 孢 羟 氨 苄 颗 粒 含 量 测 定 谱 图 有 关 物 质 测 定 流 动 相 : 流 动 相 A:pH 5.0 的 磷 酸 二 氢 钾, 流 动 相 B: 甲 醇, 梯 度 洗 脱 检 测 波 长 :30 nm; 柱 温 :30 ; 进 样 量 :0μl; 流 速 :1.0ml/min; 色 谱 柱 :Innval AQ C18, 5μm,100Å,4.6 150mm 备 注 : 洗 脱 梯 度 如 下 表 时 间 (min) 0 1 5 8 40 流 动 相 A(%) 70 流 动 相 B(%) 30 头 孢 羟 氨 苄 颗 粒 有 关 物 质 测 定 谱 图 不 同 批 次 验 证 结 果 头 孢 羟 氨 苄 颗 粒 分 析 的 寿 命 测 试 第 1 批 第 批 第 3 批 8.833 8.433 8.690 7.765 7.781 7.87 7.88 第 1 针 7.1 第 50 针 7.1 第 100 针 第 00 针 第 300 针 第 350 针

. Durashell C18-AM 分 析 注 射 用 头 孢 拉 定 注 射 用 头 孢 拉 定 分 析 结 果 流 动 相 : 以 含 0.07ml/L 辛 磺 酸 钠 的 0.07ml/L 磷 酸 氢 二 钠 溶 液 ( 磷 酸 调 ph 至 8.0)- 甲 醇 (75:5), 等 度 洗 脱 ; 检 测 波 长 :06 nm; 柱 温 :30 ; 进 样 量 :0μl; 流 速 :1.0ml/min; 色 谱 柱 :Durashell C18-AM,5μm,100Å,4.6 50mm 注 射 用 头 孢 拉 定 含 量 测 定 谱 图 名 称 0 头 孢 氨 苄 头 孢 拉 定 精 氨 酸 未 知 杂 质 保 留 时 间 /min0 4.9 6.695 10.868 1.669 理 论 塔 板 数 0 8970 9501 14837 1505 拖 尾 因 子 0 1.030 0.939 1.131 1.058 分 离 度 0 10.5 13.19 4.44 不 同 批 次 验 证 结 果

Best Value Guaranteed Prduct Quality Innvatin t Benefit Custmers 注 射 用 头 孢 拉 定 分 析 的 寿 命 测 试 6.36 第 1 针 6.40 第 50 针 4.134 10.080 4.135 10.073 11.403 11.399 6.60 第 100 针 6.46 第 150 针 4.144 10.093 4.136 10.110 11.417 11.430 6.48 第 00 针 6.65 第 80 针 4.136 10.10 4.141 10.157 11.443 11.487 结 论 头 孢 羟 氨 苄 的 分 析, 由 于 流 动 相 中 使 用 了 % 的 缓 冲 液, 传 统 C18 可 能 出 现 疏 水 塌 陷, 导 致 保 留 不 佳 亲 水 型 C18 虽 然 可 以 获 得 良 好 的 保 留 和 重 现 性, 又 常 常 出 现 使 用 寿 命 的 问 题, 尤 其 是 在 中 控 分 析 和 颗 粒 剂 分 析 中, 大 部 分 色 谱 柱 寿 命 大 约 在 50-150 针 之 间 Innval AQ 不 仅 实 现 了 快 速 的 检 测 和 良 好 的 峰 形, 还 获 得 了 优 异 的 使 用 寿 命, 可 以 使 用 300 针 以 上 注 射 用 头 孢 拉 定 的 分 析, 因 使 用 了 较 高 浓 度 的 离 子 对 试 剂 和 较 高 的 ph(8.0), 导 致 很 多 色 谱 柱 使 用 寿 命 不 到 50 针 就 出 现 主 峰 保 留 下 降 杂 质 分 离 度 下 降 等 问 题, 包 括 某 品 牌 耐 碱 柱 的 使 用 寿 命 也 不 超 过 80 针, 且 在 后 续 批 次 样 品 测 试 中, 出 现 保 留 时 间 和 柱 效 下 降, 杂 质 分 离 度 下 降 的 现 象, 一 般 到 第 3 批 样 品 测 试 就 不 能 再 使 用, 这 意 味 着 其 最 大 使 用 寿 命 不 到 150 针 而 Durashell C18-AM 则 表 现 出 优 异 的 峰 形 和 耐 用 性, 经 过 5 批 寿 命 测 试 后, 仍 有 稳 定 保 留 良 好 的 分 离 和 较 高 柱 效 参 考 文 献 1. 李 萍, 李 娅 萍, 胡 昌 勤 等. MEKC 与 HPLC 测 定 头 孢 菌 素 有 关 物 质 的 互 补 性 分 析 [J]. 药 物 分 析 杂 质, 011, 31(3):48. 刘 钐, 高 丹 玲. 抗 生 素 质 控 分 析 中 HPLC 色 谱 柱 的 选 择 [J]. 海 峡 药 学, 011, 3(1): 34-35 3. 李 娅 萍, 王 晨, 胡 昌 勤 等. 中 国 药 典 005 年 版 抗 生 素 品 种 色 谱 柱 推 荐 系 统 的 建 立 与 应 用 [J]. 药 物 分 析 杂 质, 008, 8(8): 1401 400-606-8099 www.agela.cm.cn service@agela.cm.cn

附 录 八 种 头 孢 初 步 筛 选 结 果 说 明 : 1. [1] 指 主 成 分 保 留 时 间, 下 同 ;. 本 表 数 据 非 最 终 筛 选 结 果 或 验 证 结 果, 仅 供 参 考 表 1 八 种 头 孢 类 抗 生 素 HPLC 分 析 结 果 名 称 结 果 概 要 推 荐 色 谱 柱 推 荐 理 由 头 孢 西 丁 钠 含 量 测 定 保 留 时 间 [1]6.083 分 钟, 柱 效 13477, Innval C18, 5μm, 100 Å, 分 析 速 度 快, 峰 形 良 好 拖 尾 因 子 1.358 4.6 50mm 1. 含 量 测 定 主 峰 保 留 时 间 1 分 钟, 柱 效 178, 头 孢 噻 吩 钠 拖 尾 因 子 1.310;. 有 关 物 质 主 峰 5.5 分 钟, 杂 质 对 最 小 分 离 度 Venusil XBP C18 (A), 5μm, 10 Å, 4.6 50mm 峰 形 良 好, 杂 质 分 离 度 高 3.86; 头 孢 泊 肟 酯 头 孢 泊 肟 酯 异 构 体 A 和 B 分 离 度 5.9, 最 末 峰 35 分 钟 Venusil XBP C18 (L), 5μm, 150Å, 4.6 50mm 杂 质 分 离 度 高 头 孢 呋 辛 钠 1. 有 关 物 质 保 留 时 间 15 分 钟 ;. 含 量 测 定 保 留 时 间 8 分 钟 Venusil ASB C8, 5μm, 150Å, 4.6 50mm 分 析 速 度 快, 峰 形 良 好 头 孢 丙 烯 1. 有 关 物 质 保 留 时 间 40 分 钟 ;. 含 量 测 定 保 留 时 间 6 分 钟 Venusil MP C18, 5μm, 100Å, 4.6 150mm 杂 质 分 离 度 高 头 孢 克 洛 颗 粒 1. 有 关 物 质 分 离 度 9.6;. 含 量 测 定 保 留 时 间 9 分 钟 Venusil MP C18, 5μm, 100Å, 4.6 150mm 分 析 速 度 快, 分 离 度 高, 峰 形 良 好 头 孢 克 肟 1. 含 量 测 定 保 留 时 间 13 分 钟, 理 论 塔 板 数 654, 拖 尾 因 子 1.086;. 有 关 物 质 杂 质 对 最 低 分 离 度 1.1 Venusil XBP C18 (), 5μm, 100Å, 4.6 150mm 分 析 速 度 快, 峰 形 良 好 头 孢 噻 肟 钠 有 关 物 质 测 定 保 留 时 间 18 分 钟 Venusil MP C18, 5μm, 100Å, 3.9 150mm 分 离 度 和 峰 形 较 好 中 国 总 部 地 址 : 武 汉 市 洪 山 区 东 湖 高 新 技 术 开 发 区 汤 逊 湖 北 路 38 号 光 谷 总 部 空 间 7--518 电 话 :07-87791410 传 真 :07-87791410 地 址 : 郑 州 市 岗 杜 北 街 9 号 汇 商 大 厦 313 室 电 话 :0371-6810506 地 址 : 南 京 市 经 济 技 术 开 发 区 恒 达 路 3 号 紫 金 高 通 科 技 创 业 楼 404 室 电 话 :05-58761060 传 真 :05-58761053 ABN:ZL-09108