省 市 医院检验科 法国 HORIBA ABX PENTRA 120 RETIC 全自动血细胞分析仪 标准操作程序 为了促进实验室的规范管理, 本检验科特制定此标准操作程序 (SOP) 文件 实验室工作人员必须严格按照本 SOP 进行操作 本 SOP 的改动, 可由任一使用本仪器的工作人员提出, 并报经本实验室负责人 科主任签字批准方可通过 批准人 : 生效日 : 年 月 日 仪器名称 设备英文名称 型号 仪器体积 全自动血细胞分析仪 AUTOMATED HEMATOLOGY ANALZER PENTRA 120 RETIC 75.0 117.0 55.0cm 技术规格 仪器重量 110Kg 网织红细胞 : 荧光染色法 ; 白细胞 : 聚焦流阻抗法 + 化学染色测试原理法 ( 双鞘流技术 ); 红细胞和血小板 : 电阻抗法 ; 血红蛋白 : 比色法测试速度 120 测试 / 小时光源高能卤素钨灯 氩离子激光 系统温控 有 仪器序列号 国别制造商出厂日期设备到货日期设备到货状态设备使用条件 法国 HORIBA ABX 年 月 年 月 日新环境要求温度范围 :18 ~32 ; 相对湿度 : <95% 电源要求 115/230V(±10%) AC 50/60 Hz
设备验收情况 设备启用日期 受培训人员 合格 年 月 日 全体检验科工作人员 代理商 代理商维修工程师 维修工程师联系电话 / 手机 代理商联系地址 设备安放位置 设备当前状态 仪器说明书状态及存放处 良好 良好 / 血液室 主要负责人 使用人 第 1 节 PENTRA 120 Retic 全自动血细胞分析仪的性能指标 1 精密度 参数 CV% 范围 WBC < 2.0% 4-10x10 3 /μl RBC < 2.0% 3.6-6.2x10 6 /μl HGB < 1.0% 12-18 g/dl HCT < 2.0% 36-54% PLT < 5.0% 150-500x10 3 /μl 2 线性范围参数 线性范围 WBC(x10 3 /mm 3 ) 0-150 RBC(x10 6 /mm 3 ) 0-8.1 HGB(g/dl) 0-25 HCT(%) 0-80 PLT(x10 3 /mm 3 ) 0-2000 PLT(x10 3 /mm 3 ) 浓缩模式下 0-4500 3 携带污染率 项目名称 WBC RBC HGB HCT PLT 携带污染率 < 2.0% < 0.5% < 0.5% < 2.0% < 2.0%
第 2 节可报参数 临床意义和参考范围 可报参数 参考范围 临床意义 男性 女性 红细胞计数 红细胞计数作为单一参数, 诊断价值较小 (RBC) 10 6 /mm 3 症, 红细胞增多症或正常红细胞量, 必须 4.50-6.50 4.50-6.50 体内红细胞量的评价, 如鉴别红细胞减少 与血细胞比容相结合 血 红 蛋 白 浓 13.0-17.0 13.0-17.0 血红蛋白浓度的测定用于诊断贫血及观察 度 (HGB) g/dl 贫血的程度 红 细 胞 压 40.0-54.0 40.0-54.0 HCT 是诊断贫血的指标 若 HCT 降低, 积 (HCT)% 红细胞数量正常, 而血浆量增加, 为假性 贫血 ;HCT 增加可因红细胞量绝对增加所致, 如真性红细胞增多症或红细胞增多或血浆量减少细胞外液丢失 红细胞平均体积 (MCV)fL 80-100 80-100 贫血的分类基于 MCV MCH MCHC RDW 测量 MCV 可将红细胞按平均体积分成正细胞 小细胞和大细胞 MCV 反映了红细胞的水合作用, 即血浆渗透压和红细胞数量之比 红细胞平均血红蛋白量 (MCH) pg 27.0-32.0 27.0-32.0 贫血的分类基于 MCV MCH MCHC RDW MCH 常用于贫血分类 在大多数贫血中,MCH 与 MCV 相关 通常, 小细胞贫血与低色素相关, 正细胞与正色素相关 红细胞平均血红蛋 32.0-36.0 32.0-36.0 贫血的分类基于 MCV MCH MCHC RDW 白 浓 MCHC 反映红细胞量中血红蛋白的浓度, 常 度 (MCHC) 以单个红细胞血红蛋白含量与红细胞大小进行比较 MCHC 降低, 多见于铁 铜和维生素 B12 缺乏导致的贫血 ;MCHC 增高, 见于高滴度冷凝集素和遗传性球形红细胞增多症 红细胞分布宽度 (RDW) g/dl 11.0-16.0 11.0-16.0 贫血的分类基于 MCV MCH MCHC RDW RDW 用于评估病人红细胞是均一还是非均一 血小板计数 (PLT) 10 3 /mm 3 100-300 100-300 血循环中血小板来自于骨髓, 寿命为 7~10d, 然后被网状内皮系统巨噬细胞清除 正常人约 1/3 的血小板储存在脾脏, 其余出现在血循环中 为了血小板能达到止血的功能, 它们不仅必须具备完整功能, 而且数量也必须在一定范围内 如血小板减少症者, 血小板 <10*109/L 常伴出血危险 ; 血小板增多症者, 血小
板 >1000*109/L 常有血栓形成危险 血小板平均体积 (MPV)μm 3 6-11 6-11 MPV 和血小板分布宽度联合应用可鉴别血小板产生减少和血小板破坏增加的原因 血小板分布宽度 ( PDW)% MPV 和血小板分布宽度联合应用可鉴别血小板产生减少和血小板破坏增加的原因 血小板压积 (PCT)% 0.15-0.50 0.15-0.50 增高 : 骨髓纤维化 慢粒 脾切除 ; 降低 : 再障 血小板减少症 化疗等 白细胞计数 (WBC) 10 3 /mm 3 4-10 4-10 增高 : 发热 各种炎症 白血病 出血 溶血 肿瘤等, 如 >30 1011/L 有白血病的可能 ; 减少 : 流感 非典 伤寒 粒减 粒缺 脾亢 再障 长期 X 线照射等 中性粒细胞 (NEU% & #) 50-80 50-80 异常标本还包括中性杆状细胞及幼稚细胞等 增高 : 急性细菌性感染 组织损伤 大量血细胞破坏 急性大出血 中毒 恶性肿瘤等 ; 减少 : 某些传染病如伤寒 流感 造血功能障碍 脾亢 自身免疫性疾病 某些药物反应 慢性理化损伤等 淋巴细胞 (LYMH% & #) 25-50 25-50 异常标本还包括大 小淋巴细胞及异淋 增高 : 传染性疾病如百日咳 传单 麻疹 结核 肝炎 肿瘤等 ; 减少 : 长期 X 线照射 细胞免疫缺陷 传染病急性期 单核细胞 (MON% & #) 2-10 2-10 增高 : 某些感染如 EB 病毒感染 结核 伤寒 疟疾 沙门菌 弓形虫感染 亚急性心内膜炎 急性感染恢复期 粒缺恢复期 淋巴瘤 单核细胞白血病等 嗜酸粒细胞 (EOS% & #) 0-5 0-5 增高 : 支气管哮喘 过敏 湿疹 寄生虫病 慢粒 多发性骨髓瘤等 ; 减少 : 伤寒 副伤寒 应用糖皮质 促肾上腺激素 急性感染 手术后严重组织损伤等 临床症状明显 其不减少提示肾上腺皮质功能衰竭 如持续下降, 说明病情严重 术后及烧伤后其不降低提示预后不良 嗜碱粒细胞 (BASO% & #) 0-2 0-2 增高 : 慢粒 癌转移 铅中毒 变态反应 真性红细胞增多症 甲减 粘液性水肿等 巨大为成熟细胞 ( LIC% & #) 0-2 0-2 急性细菌性感染 组织损伤 大量血细胞破坏 急性大出血 中毒 恶性肿瘤等 ; 减少 : 某些传染病如伤寒 流感 造血功能障碍 脾亢 自身免疫性疾病 某些药物反应 慢性理化损伤等 异型淋巴细胞 (ALY% & #) 0-2 0-2 增高 : 传染性疾病如百日咳 传单 麻疹 结核 肝炎 肿瘤等 ; 减少 : 长期 X 线照
网织红细胞百分比 (RET%) 网织红细胞绝对数 (RET#) 0.5~2.5 % 0.5~2.5 % 23.2 ~ 23.2 ~ 137.0 137.0 10 9 /L 10 9 /L 射 细胞免疫缺陷 传染病急性期 1) 网织红细胞增加 (RET % 和 RET# 升高 ) 是对贫血的反应 网织红细胞数量超过参考范围可被看成是骨髓造血功能对贫血的正常反应 贫血的恢复是通过骨髓释放红细胞生成素 (EPO) 完成的, 通过网织红细胞计数可以敏感的反映出贫血原因是由于 RBC 生成减少还是失血造成 网织红细胞数量升高, 还应同时关注胆红素增高程度 红细胞破坏和血红蛋白丢失量等方面的实验结果 如溶血性贫血, 大量网织红细胞因骨髓受到缺氧和大量红细胞破坏后产物的刺激而增加, 并提前进入外周血, 增加程度常在 5% 以上, 严重时可达 20% 以上 ; 急性失血后网织红细胞可明显增加, 急性失血 5~10 天内网织红细胞可达高峰, 出血停止后 2 周可恢复正常, 临床上可应用此参数和特点来判别出血是否停止 其他因素导致的贫血, 如缺铁性贫血 巨幼细胞性贫血 放化疗后恢复期 无效造血但红系增生活跃等情况也可见网织红细胞轻度增加 2) 网织红细胞降低 (RET% 和 RET# 降低 ): 主要和正常造血功能减低有关, 典型病例为再生障碍性贫血 ( 再障 ) 溶血性贫血再生障碍危象 ; 此外还有急性自血病 类风湿关节炎 老年患者 慢性病 获得性红系再障 化疗和放疗引起的骨髓造血功能抑制或减退等 校正网织红细胞比例 (CRC) 低荧光强度网织红细胞比例 (RETL) 中荧光强度网织红细胞比例 (RETM) 0.75~ 2.30% 0.75~ 2.30% CRC% 是增生性贫血和非增生性贫血鉴别诊断的重要指标 65.0~97.0% 65.0~97.0% 主要的临床意义 : 1, 检测骨髓移植和化疗后骨髓造血功 0~40.0% 0~40.0% 能恢复情况 2, 检测机体毒性损伤后的恢复情况
高荧光强度网织红细胞比例 (RETH) 0~10% 0~10% 3, 监测新生儿输血反应 4, 在移植手术后恢复作为最灵敏的指标判断移植成功与否 平均荧光指数 (MFI) 5~30% 5~30% 代表网织红细胞的总体成熟水平 平均网织红细胞体积 (MRV) 90~120 fl 90~120 fl MRV( 平均网织红细胞体积 ) 该参数提示的 是红细胞生成的形态学信息 : 如果 MRV 高, 生成的 RBC 将是大细 胞 如果 MRV 正常, 生成的 RBC 将是正常 细胞 如果 MRV 低, 生成的 RBC 将是小细 胞 RBC 大小 : 7 µm 8,3 µm RET 大 小 : 8 µm 10 µm MRV 是小细胞型和大细胞型贫血的鉴别诊断的重要指标. 不成熟网织红细胞比例 (IRF) 0-0.06% 0-0.06% 1) 不成熟网织红细胞比例 (IRF) 为不成熟的网织红细胞数与总网织红细胞数的比值, 主要应用在 1 监控在化疗 骨髓移植 红细胞生成素干细胞移植后红细胞生成素的再生状况 ;2 监测叠氮胸苷治疗后药物给骨髓造成的毒性损害 ;3 监测肾衰竭 AIDS 婴儿脊髓发育不良综合征 ;4 贫血的分类 ;5 监测铁剂 维生素 B 叶酸等对贫血的治疗功效 幼稚红细胞的比例 (IMM) 0~0.5% 0~0.5% IMM 作为一个研究性参数, 常与 MRV 和 MFI 联合使用 第 3 节 仪器设备的安全使用措施 1 血细胞分析仪的环境要求 1. 空间安装要求仪器应安装在稳固工作台上 在仪器两侧及上方各保留至少 0.5m 的空间, 以方便维护和保养 后部的配电盘距离墙壁至少要有 0.20m, 以防止阻碍热气的排放 将 PENTRA 120 RETIC 血细胞分析仪安放在通风良好 灰尘少的地方 避免在过热或过冷以及日光直射的环境中使用 PENTRA 120 RETIC 血细胞分析仪 2. 运行条件 (1) 环境温度要求 :18~32 ( 最佳温度 :22~25 )
(2) 环境相对湿度要求 :<95% (3) 电源电压要求 :110±5/220±10V AC,50~60Hz (4) 仪器设备周围避免有电磁波的电子仪器干扰 : 如无线收发机和移动电话 有保护性接地 仪器附近没有发射高频的机械 ( 离心机 放电装置等 ) 2 血细胞分析仪的安全要求 在仪器设备上面和周围不要使用可燃性危险品, 避免引起火灾和爆炸 在电源开关处于 ON 状态下, 禁止打开仪器前上面 侧面及背面面板, 以免损害线路板 ; 禁止触摸 PENTRA 120 RETIC 血细胞分析仪外壳里面的电子元件, 触摸电子元件可能造成电击, 尤其是当用湿手触摸时 仪器设备使用前, 必须认真检查设备间之连接及外接线 ( 件 ) 是否正确 正常, 应核查电源插头是否正确插接, 检查设备是否处于正常状态 实验过程中如遇水 电故障或中断, 应立即关闭影响仪器设备安全的有关开关, 并实施安全保护措施 仪器设备的运输必须按 PENTRA 120 RETIC 血细胞分析仪操作手册规定进行搬运, 禁止鲁莽装卸, 应避免倾斜, 振动和碰撞 发出电磁波的仪器可能影响试验结果或导致分析仪故障, 因此在安装分析仪时不要在同一房间里操作以下仪器 : 移动电话 无线收发机 无线电话 其他能产生电磁波的电子仪器和远离离心机 如果标本 试剂溢出在分析仪上, 立即擦掉并且用消毒剂清洗 3 血细胞分析仪使用的人员安全 仪器设备中所有与患者的样品接触或有潜在性接触可能的表面与零件都应被作为污染物考虑 在操作 维护仪器设备时有必要穿戴保护性的外套和手套, 头发 衣物 手指等与所有的活动部件保持距离 在仪器运转过程中, 勿触及移动的所有装置, 避免人身伤害 禁止触摸 PENTRA 120 RETIC 血细胞分析仪密封面板内的电路 触摸电路是危险的, 可能会遭电击, 尤其是当用湿手触摸时 在处理废弃样本或组装 / 拆卸组合零件时不可触摸废弃物, 一定带手套和护目镜以避免直接接触 如果操作人员不小心接触血液 试剂 废弃物 皮肤或衣物上沾到了样品 试剂及废液时, 立即用清水冲洗被感染区域, 并消毒处理 ; 如果眼睛沾到样品 试剂及废液, 用大量清水冲洗并适当考虑必要的医疗措施
第 4 节仪器操作 质控及维护程序
定标键 : 按下 <CALIBRATION( 定标 )> 键, 输入操作者代码, 在窗口内显示下列功能 : 1- 显示结果列表, 进行质控分析 计算定标系数 ( 逐个或全部 ) 以及删除结果等功能 2- 在共 3 组, 每组 12 个选项的质控品 定标液和人血中选择或修改靶值 3- 变异系数上限 4- 定义定标液在样品架上的位置 5- 预定义 12 个注释, 用来解释分析结果 6- 手动修改定标系数 7- 显示定标结果 按下 <2> 键打开 < 靶值 > 窗口, 选择已经输入靶值的定标液批号 移动光标到所需批号, 按下 <Enter> 键选中 按下 <2> 键, 打开靶值列表窗口, 每组包含 12 个靶值批号, 移动光标到所需批号 按下 <F1> 键打开靶值输入窗口 再按 <F2> 键转移到第二个窗口, 输入随定标液发行的靶值和可接受范围
有必要时输入下列内容 : - 操作者代码 - 上一次修改靶值的日期 - 批号 - 该批号效期 - 注释 再次按 <F2> 键返回到第一个窗口, 按下 <Enter> 键保存上述内容
所用试剂 校准品 质控品列表 序 号名称货号注册证号规格有效期 1 ABX Diluent 稀释液 0901020 国食药监械 ( 进 )2005 第 2401061 号 ( 更 ) 20 L / 盒自生产之日起 12 个月 2 ABX Cleaner 清洗液 0903010 无 1L/ 瓶自生产之日起 12 个月 3 ABX Basolyse 嗜碱溶血剂 0204050 国食药监械 ( 进 )2005 第 3401319 号 ( 更 ) 5L/ 瓶自生产之日起 12 个月 4 ABX Alphalyse 溶血剂 ABX 5 Eosinofix 嗜酸溶血剂 ABX Minoclair 浓 6 缩清洗液 0902010 国食药监械 ( 进 )2005 第 3401279 号 ( 更 ) 1 L/ 瓶 自生产之日起 12 个月 02060 10 国食药监械 ( 进 )2005 第 3401309 号 ( 更 ) 1 L/ 瓶 自生产之日起 9 个月 0401005 无 0.5L/ 瓶 自生产之日起 12 个月 7 ABX 网织红细胞试剂 0904005 国食药监械 ( 进 )2006 第 3401892 号 0.5L/1L/ 瓶 自生产之日起 12 个月 ABX 8 MINOCAL 血细胞分析仪专 2032002 国食药监械 ( 进 )2006 第 3401141 号 2mL/ 盒 自生产之日起 1.5 个月 用校准品 ABX 9 DIFFTROL (2N) 血细胞分析仪专用质 2062203 国食药监械 ( 进 )2006 第 3401142 号 ( N:2x3mL) / 盒 自生产之日起 2.5 个月 控品 ABX 10 DIFFTROL (1L1H) 血细胞分析仪专用 2062204 国食药监械 ( 进 )2006 第 3401143 号 (L:1x3mL H: 1x3mL)/ 盒 自生产之日起 2.5 个月 质控品
第 5 节仪器的质量控制 日常使用和维修记录 一 PENTRA 120 RETIC 血细胞分析仪的质量控制记录 室内质量控制记录的内容主要包括测定日期 时间 结果 操作人签名, 保存的内容有每日质控测定仪器打印的结果 每月仪器打印的质控图和每月的质控记录表 如果某日质控结果失控, 还需要填写失控报告, 详细记录分析的失控原因 解决措施等内容, 并请科主任审核签字 上述这些材料需要每月装订后存档 室间质量考评记录内容主要包括每次质控标本测定日期 时间 结果 操作人签名, 保存的内容有每次质控测定仪器打印的结果 经科主任审核签字的检验中心回报的考评结果等 上述材料需要每年装订后存档 二 PENTRA 120 RETIC 血细胞分析仪日常使用和维修记录 日常使用记录的内容主要包括每日开机时间 开机人姓名 仪器工作状态 关机时间 关机人姓名 室内温度 湿度等 维修记录主要包括仪器发生故障的时间 故障现象 维修时间 维修工程师姓名 故障排除后仪器的鉴定结果等, 并保存仪器维修单 上述这些材料需要每月装订后存档