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1 第 26 卷 第 1 期 中 国 现 代 医 学 杂 志 Vol. 26 No 年 1 月 China Journal of Modern Medicine Jan 文 章 编 号 : (2016) 临 床 论 著 高 海 拔 地 区 进 展 期 胃 癌 切 除 修 复 交 叉 互 补 基 因 1 mrna 及 蛋 白 表 达 与 化 疗 疗 效 的 相 关 性 研 究 鄢 祁 玉 娟 1, 韩 静 绮 2, 才 保 加 2, 骆 玉 霜 2, 冀 保 妍 1, 袁 青 玲 1, 宋 晓 燕 1, 张 文 彦 1, 白 丽 艳 3, 刘 五 甲 3 (1. 青 海 省 人 民 医 院, 青 海 西 宁 ;2. 青 海 大 学 附 属 医 院, 青 海 西 宁 ; 3. 青 海 大 学, 青 海 西 宁 ) 摘 要 : 目 的 研 究 高 海 拔 地 区 进 展 期 胃 癌 切 除 修 复 交 叉 互 补 基 因 1(ERCC1)mRNA 和 蛋 白 表 达, 及 其 与 化 疗 疗 效 的 相 关 性 方 法 逆 转 录 - 聚 合 酶 链 反 应 (RT-PCR) 检 测 60 例 进 展 期 胃 癌 患 者 ERCC1 mrna 的 表 达, 免 疫 组 织 化 学 法 检 测 ERCC1 蛋 白 的 表 达 并 予 以 FOLFOX4 方 案 化 疗, 分 析 ERCC1 mrna 及 蛋 白 表 达 与 化 疗 客 观 反 应 率 (ORR) 和 无 进 展 生 存 期 (PFS) 的 相 关 性 结 果 进 展 期 胃 癌 ERCC1 mrna 的 表 达 与 化 疗 疗 效 (ORR) PFS 呈 负 相 关 ( =0.038 和 0.032);ERCC1 蛋 白 表 达 与 FOLFOX4 化 疗 疗 效 (ORR) 无 关 ( = 0.089), 与 PFS 呈 负 相 关 ( =0.039) 结 论 高 海 拔 地 区, 进 展 期 胃 癌 ERCC1 mrna 与 化 疗 疗 效 呈 负 相 关, ERCC1 蛋 白 表 达 与 化 疗 疗 效 无 关 ;ERCC1 mrna 及 蛋 白 表 达 与 PFS 呈 负 相 关 关 键 词 : 进 展 期 胃 癌 ; 切 除 修 复 交 叉 互 补 基 因 1; 化 疗 ; 高 海 拔 地 区 中 图 分 类 号 :R735.2 文 献 标 识 码 :A Correlation of ERCC1 mrna and protein expression in advanced gastric cancer with chemotherapy effect in high-altitude areas 鄢 Yu-juan Qi 1, Jing-qi Han 2,Bao-jia Cai 2, Yu-shuang Luo 2,Bao-yan Ji 1, Qing-ling Yuan 1, Xiao-yan Song 1,Wen-yan Zhang 1,Li-yan Bai 3, Wu-jia Liu 3 (1. Qinghai Provincial Peoples' Hospital, Xining, Qinghai , China; 2. The Affiliated Hospital of Qinghai University, Xining, Qinghai , China; 3. Qinghai University, Xining, Qinghai , China) Abstract: Objective To investigate the values of mrna and protein of excision repair cross-complemen 原 tation group 1 (ERCC1) in predicting the prognosis of advanced gastric cancer patients treated with FOLFOX4 regime in high-altitude areas. Methods Seventy patients with advanced gastric cancer were enrolled in this study, 60 patients were eligible for analysis. All patients received FOLFOX4 regime repeated every two cycles. RT-PCR was used for analysis of ERCC1 mrna; immunohistochemistry was used for analysis of ERCC1 pro 原 tein expression. The relationships of mrna and protein of ERCC1 with objective response rate (ORR) and progression-free survival (PFS) time were analyzed. Results ERCC1 mrna expression was negatively associated with objective response rate ( =0.038) and progression-free survival ( =0.032). ERCC1 protein expression was not correlated with ORR of FOLFOX4 treatment ( =0.089), but was negatively correlated with PFS ( = 0.039). Conclusions In high-altitude areas, the expression of ERCC1 mrna in advanced gastric cancer patients is negatively correlated with PFS and ORR of FOLFOX4 treatment; the expression of ERCC1 protein 收 稿 日 期 : 鄢 基 金 项 目 : 青 海 省 人 力 资 源 和 社 会 保 障 厅 2014 年 度 留 学 人 员 科 技 活 动 择 优 资 助 项 目 (No: 青 人 社 厅 函 ) 76

2 第 1 期 祁 玉 娟, 等 : 高 海 拔 地 区 进 展 期 胃 癌 切 除 修 复 交 叉 互 补 基 因 1 mrna 及 蛋 白 表 达 与 化 疗 疗 效 的 相 关 性 研 究 is not associated with ORR, but has correlation with PFS in advanced gastric cancer patients. Keywords: advanced gastric cancer; excision repair cross-complementation group 1; chemotherapy; highaltitude area 胃 癌 在 中 国 属 高 发 肿 瘤, 其 死 亡 率 占 所 有 恶 性 肿 瘤 的 23.02%, 青 海 宁 夏 甘 肃 3 省 的 胃 癌 死 亡 率 超 过 35/10 万 青 海 省 西 宁 市 海 拔 2295m, 地 处 西 北 地 区, 胃 癌 具 有 发 病 率 高 手 术 切 除 率 低 生 存 期 短 死 亡 率 高 等 特 点 大 部 分 患 者 就 诊 时 已 属 进 展 期, 无 手 术 机 会 ; 化 疗 是 胃 癌 治 疗 的 重 要 手 段 之 一, 是 [1] 胃 癌 综 合 治 疗 的 重 要 组 成 部 分 目 前 为 止, 铂 类 及 5- 氟 尿 嘧 啶 (5-fluorouracil,5-FU) 为 治 疗 胃 癌 的 基 本 用 药 本 研 究 探 讨 高 海 拔 地 区 进 展 期 胃 癌 切 除 修 复 交 叉 互 补 基 因 1(excision repair cross-complementation group 1,ERCC1)mRNA 和 蛋 白 表 达 水 平, 及 其 与 化 疗 疗 效 的 相 关 性 1 资 料 与 方 法 1.1 研 究 对 象 选 取 2010 年 12 月 年 12 月 本 院 经 病 理 学 检 查 确 诊 的 进 展 期 胃 癌 70 例 进 行 研 究 入 选 标 准 :1 经 证 实 具 有 可 测 量 肿 瘤 病 灶 ;2 距 离 最 后 一 次 放 化 疗 3 个 月 ;3 化 疗 前 血 常 规 肝 肾 功 能 在 正 常 范 围 内 ;4 心 电 图 正 常 ;5 美 国 东 部 肿 瘤 协 作 组 (Eastern Cooperative Oncology Group,ECOG) 评 分 2 分 排 除 标 准 :1ECOG 评 分 3 分 ;2 肿 瘤 病 灶 不 可 测 量 ;3 风 湿 瓣 膜 性 心 脏 病 及 器 质 性 心 脏 病 入 选 患 者 手 术 切 除 的 肿 瘤 组 织 置 于 -196 液 氮 中 保 存, 部 分 组 织 经 过 梯 度 酒 精 及 二 甲 苯 脱 水 后 包 埋 于 石 蜡 中, 制 备 组 织 的 石 蜡 标 本 所 有 患 者 有 CT B 超 及 MRI 证 实 的 可 测 量 肿 瘤 病 灶 其 中 4 例 失 访,3 例 不 能 按 规 定 评 估 疗 效,3 例 因 不 良 反 应 未 完 成 规 定 的 治 疗 方 案 最 终 60 例 患 者 符 合 标 准, 进 行 统 计 学 分 析 60 例 患 者 中, 男 性 39 例 (65%), 女 性 21 例 (35%); 年 龄 <55 岁 22 例 (36.7%), 55 岁 38 例 (63.3%); 体 力 评 价 :0 分 40 例 (66.7%),1 2 分 20 例 (33.3%) 病 理 类 型 : 腺 癌 46 例 (76.7%), 黏 液 癌 5 例 (8.3%), 印 戒 细 胞 癌 7 例 (11.7%), 其 他 2 例 ( 3.3%); 分 化 程 度 : 中 高 分 化 23 例 (38.3%), 低 分 化 34 例 (56.7%), 其 他 3 例 (5.0%); 民 族 : 汉 族 49 例 (81.7%), 回 族 6 例 (10%), 藏 族 3 例 (5%), 蒙 古 族 2 例 (3.3%) 所 有 患 者 系 长 期 居 住 高 海 拔 地 区 ( 海 拔 2200 m 左 右 ) 1.2 方 法 化 疗 方 案 和 疗 效 评 价 所 有 患 者 采 用 FOL- FOX4 方 案 治 疗 奥 沙 利 铂 ( 连 云 港 江 苏 恒 瑞 医 药 股 份 有 限 公 司, 商 品 名 : 艾 恒 )85 mg/m 2, 第 1 天 静 脉 滴 注 2h; 亚 叶 酸 钙 200 mg/m 2, 第 1 2 天 化 疗 前 静 脉 滴 注 2h;5- 氟 尿 嘧 啶 400 mg/m 2, 第 1 2 天 静 脉 冲 入 ; 5- 氟 尿 嘧 啶 600 mg/m 2, 第 1 2 天 静 脉 持 续 泵 入,14 d 为 1 个 周 期 治 疗 前 l 周 完 成 各 项 基 线 检 查 近 期 疗 效 的 评 价 按 照 实 体 瘤 的 疗 效 评 价 标 准 (response evaluation criteria in solid tumors,recist), 分 为 完 全 缓 解 (complete response,cr) 部 分 缓 解 (complete response,pr) 疾 病 稳 定 (stable disease,sd) 和 疾 病 进 展 (progressive disease,pd) 以 CR+PR 为 客 观 缓 解 率 (objective response rate,orr) 肿 瘤 无 进 展 生 存 期 (progress free survival,pfs) 从 治 疗 开 始 计 算, 终 止 日 期 为 局 部 区 域 复 发 / 远 处 转 移 或 末 次 随 访 日 每 两 个 周 期 评 价 疗 效 1 次, 若 出 现 可 能 为 病 情 进 展 的 临 床 表 现 可 提 前 评 价 疗 效 所 有 患 者 进 行 随 访 ERCC1 蛋 白 检 测 采 用 免 疫 组 织 化 学 链 霉 菌 抗 生 物 素 蛋 白 - 过 氧 化 物 酶 连 接 法 (streptavidinperosidase,sp) 检 测 胃 癌 石 蜡 切 片 组 织 中 ERCC1 的 表 达 ERCC1 鼠 抗 人 多 克 隆 抗 体 为 ab43( 美 国 Abcam 公 司 ) 组 织 切 片 经 高 压 处 理, 修 复 暴 露 抗 原 每 批 染 色 设 阳 性 和 阴 性 对 照, 以 已 知 阳 性 切 片 作 阳 性 对 照 组, 以 磷 酸 盐 缓 冲 溶 液 (phosphate buffer saline, PBS) 代 替 一 抗 作 空 白 对 照 组, 严 格 按 照 试 剂 盒 说 明 书 进 行 操 作, 二 氨 基 联 苯 胺 (Diaminobenzidine,DAB) [2] 显 色 免 疫 组 织 化 学 结 果 判 断 标 准 参 照 文 献, 采 用 二 级 评 分 法 进 行, 由 2 位 病 理 医 师 判 定 每 张 切 片 随 机 观 察 5 个 高 倍 镜 视 野, 每 个 视 野 计 数 100 个 癌 细 胞 按 显 色 强 度 分 为 4 级 : 阴 性 ( 不 着 色 ) 弱 阳 性 ( 着 淡 黄 色 ) 阳 性 ( 着 棕 黄 色 ) 及 强 阳 性 ( 着 棕 褐 色 或 者 出 现 粗 大 的 棕 褐 色 颗 粒 ),0 ~ 3 分 分 别 代 表 不 同 显 色 强 度 同 时 计 算 阳 性 肿 瘤 细 胞 百 分 数, 对 阳 性 肿 瘤 细 胞 比 例 评 分 ( 阳 性 细 胞 0% 为 0.0 分,1%~9% 为 0.1 分,10%~49% 为 0.5 分,>50% 为 1.0 分 ), 用 阳 性 强 度 评 分 乘 以 阳 性 肿 瘤 细 胞 比 例 评 分 得 到 最 后 的 半 定 量 H 值 来 衡 量 最 终 的 蛋 白 表 达 强 度 按 照 每 个 指 标 各 自 中 位 H 值 来 确 定 胃 癌 组 织 中 指 标 表 达 的 77

3 中 国 现 代 医 学 杂 志 第 26 卷 高 低 ERCC1 mrna 检 测 逆 转 录 - 聚 合 酶 链 反 应 (reverse transcription-polymerase chain reaction,rt-pcr) 检 测 ERCC1 mrna 的 表 达 Trizol 试 剂 一 步 法 提 取 胃 癌 组 织 总 RNA, 检 测 组 织 总 RNA 浓 度 及 完 整 度,cDNA 第 一 链 合 成,PCR 扩 增 ERCC1 和 内 参 基 因 β-actin ERCC1 正 向 引 物 :5'-GCCTCC GCTACCACAACCT-3', 反 向 引 物 :5'-TCTTCTCTTGA TGCGGCGA-3', 产 物 长 度 313bp;β-actin 正 向 引 物 : 5'-CGGGACCTGACTGACTACCTC-3', 反 向 引 物 :5'- TCGTCATACTCCTGCTTGCTG-3', 产 物 长 度 545 bp 引 物 由 上 海 英 骏 生 物 工 程 公 司 合 成 反 应 体 系 为 25μl, 其 中 2μl cdna 模 板, 正 反 向 引 物 各 1μl, 2 PCR Master Mix 12.5μl, 加 双 蒸 水 至 25μl 反 应 条 件 :95 预 变 性 2min,96 变 性 20 s,60 退 火 30 s,72 延 伸 30 s, 共 35 个 循 环,72 继 续 延 伸 10 min 反 应 结 束 后, 取 5μl PCR 反 应 产 物 加 1μl 加 样 缓 冲 液 在 1.5% 琼 脂 糖 凝 胶 上 电 泳 紫 外 光 下 观 察 电 泳 结 果, 使 用 凝 胶 成 像 系 统 拍 照 记 录 1.3 统 计 学 方 法 采 用 SPSS 17.0 统 计 软 件 进 行 数 据 分 析, 计 数 资 料 用 χ 2 检 验, 生 存 分 析 用 Kaplan-Meier 法, 各 因 素 水 平 的 比 较 用 Log-rank 法, <0.05 为 差 异 有 统 计 学 意 义 2 结 果 500 bp 250 bp 表 1 进 展 期 胃 癌 临 床 病 理 参 数 与 ERCC1 蛋 白 表 达 的 相 关 性 例 (%) 临 床 病 理 参 数 ERCC1 蛋 白 (+) ERCC1 蛋 白 (-) 值 年 龄 性 别 图 2 <55 岁 7(33.3) 15(38.5) 55 岁 14(66.7) 24(61.5) 男 13(61.9) 26(66.7) 女 8(38.1) 13(33.3) 行 为 状 态 评 分 部 分 胃 癌 组 织 ERCC1 RT-PCR 检 测 结 果 茁 -actin ERCC1 2.2 ERCC1 蛋 白 及 mrna 表 达 与 进 展 期 胃 癌 临 床 特 征 的 相 关 性 60 例 胃 癌 检 测 标 本 中,ERCC1 蛋 白 及 mrna 的 表 达 与 进 展 期 胃 癌 患 者 临 床 病 理 参 数, 如 不 同 年 龄 性 别 组 织 学 类 型 及 分 级 比 较, 差 异 无 统 计 学 意 义 ( >0.05) 见 表 进 展 期 胃 癌 ERCC1 蛋 白 与 mrna 表 达 青 海 地 区 60 例 进 展 期 胃 癌 患 者 中,ERCC1 蛋 白 阳 性 患 者 ERCC1 mrna 高 表 达 为 40%,ERCC 进 展 期 胃 癌 ERCC1 蛋 白 及 mrna 的 表 达 ERCC1 蛋 白 阳 性 表 达 定 位 于 肿 瘤 细 胞 核 内, 呈 棕 黄 色 或 棕 红 色 颗 粒, 偶 见 于 胞 浆 内 60 例 标 本 中, ERCC1 蛋 白 阳 性 表 达 率 为 35% 见 图 1 以 一 个 内 体 间 标 记 60 例 进 展 期 胃 癌 ERCC1 mrna 的 表 达 变 量,ERCC1/β-actin 比 率 为 0.160~ 0.821, 中 位 比 率 为 例 患 者 以 中 位 值 为 界, 分 为 ERCC1 mrna 高 低 表 达 两 组 进 展 期 胃 癌 组 织 ERCC1 mrna 与 β-actin 表 达 见 图 (71.4) 25(64.1) 1 2 6(28.6) 14(35.9) 分 化 程 度 高 分 化 1(4.8) 2(5.1) 中 分 化 5(23.8) 15(38.5) 低 分 化 14(66.6) 20(51.3) 未 分 型 1(4.8) 2(5.1) 病 理 类 型 腺 癌 15(71.4) 31(79.5) 黏 液 癌 2(9.5) 3(7.7) 印 戒 细 胞 癌 4(19.1) 3(7.7) 其 他 0(0.0) 2(5.1) 癌 胚 抗 原 <5 ng/ml 13(61.9) 23(59.0) 5 ng/ml 8(38.1) 16(41.0) 受 侵 器 官 图 1 进 展 期 胃 癌 组 织 中 ERCC1 阳 性 表 达 ( 免 疫 组 织 化 学 法 400) 1 14(66.7) 28(71.8) 2 7(33.3) 11(28.2)

4 第 1 期 祁 玉 娟, 等 : 高 海 拔 地 区 进 展 期 胃 癌 切 除 修 复 交 叉 互 补 基 因 1 mrna 及 蛋 白 表 达 与 化 疗 疗 效 的 相 关 性 研 究 续 表 1 临 床 病 理 参 数 ERCC1 蛋 白 (+) ERCC1 蛋 白 (-) 值 民 族 汉 族 18(85.7) 31(79.5) 回 族 2(9.5) 4(10.3) 藏 族 1(4.8) 2(5.1) 蒙 古 族 0(0.0) 2(5.1) 表 2 进 展 期 胃 癌 临 床 病 理 参 数 与 ERCC1 mrna 表 达 的 相 关 性 例 (%) 临 床 病 理 参 数 mrna( 高 ) mrna( 低 ) 值 年 龄 <55 岁 9(30.0) 13(43.3) 55 岁 21(70.0) 17(56.7) 性 别 男 18(60.0) 22(73.3) 女 12(40.0) 8(26.7) 行 为 状 态 评 分 0 17(56.7) 23(76.7) (43.3) 7(23.3) 分 化 程 度 高 分 化 1(3.3) 2(6.7) 中 分 化 7(23.3) 13(43.3) 低 分 化 20(66.7) 14(46.7) 未 分 型 2(6.7) 1(3.3) 病 理 类 型 腺 癌 24(80.0) 22(73.3) 黏 液 癌 3(10.0) 2(6.7) 印 戒 细 胞 癌 3(10.0) 4(13.3) 其 他 0(0.0) 2(6.7) 癌 胚 抗 原 <5 ng/ml 17(56.7) 19(63.3) 5 ng/ml 13(43.3) 11(36.7) 受 侵 器 官 1 22(73.3) 20(66.7) 2 8(26.7) 10(33.3) 民 族 汉 族 27(90.0) 22(73.3) 回 族 2(6.7) 4(13.3) 藏 族 1(3.3) 2(6.7) 蒙 古 族 0(0.0) 2(6.7) mrna 低 表 达 为 30%;ERCC1 蛋 白 与 mrna 的 阳 性 表 达 比 较 差 异 无 统 计 学 意 义 ( >0.05) 见 表 ERCC1 蛋 白 及 mrna 表 达 与 FOLFOX4 化 疗 疗 效 的 相 关 性 所 有 60 例 患 者 完 成 4 个 周 期 的 化 疗 后 进 行 疗 效 评 价 并 4 周 后 确 认 进 展 期 胃 癌 ERCC1 蛋 白 表 达 与 化 疗 疗 效 无 关 ( =0.089)( 见 表 4);ERCC1 蛋 白 阳 性 表 达 者 ORR 为 19.0%, 阴 性 者 为 43.6% ERCC1 mrna 高 表 达 ORR 为 20.0%, 低 表 达 为 50.0%,ERCC1 mrna 的 表 达 与 化 疗 疗 效 呈 负 相 关 ( =0.038)( 见 表 5) 2.5 进 展 期 胃 癌 ERCC1 蛋 白 及 mrna 表 达 与 FOLFOX4 治 疗 无 进 展 生 存 期 的 疗 效 分 析 对 完 成 化 疗 方 案 的 患 者 进 行 随 访 ERCC1 蛋 白 阳 性 表 达 者 无 进 展 生 存 期 (6.24 个 月 ) 较 阴 性 者 (7.23 个 月 ) 短, 差 异 有 统 计 学 意 义 ( =0.039) 以 ERCC1 mrna 表 达 水 平 中 位 值 为 界, 将 患 者 分 为 高 表 达 组 和 低 表 达 组 ERCC1 mrna 低 表 达 组 的 中 位 PFS 为 7.32 个 月, 与 高 表 达 组 的 6.3 个 月 比 较, 差 异 表 3 进 展 期 胃 癌 中 ERCC1 mrna 与 蛋 白 表 达 的 相 关 性 例 组 别 ERCC1(+) ERCC1(-) 值 ERCC1 mrna( 高 ) ERCC1 mrna( 低 ) 表 4 高 海 拔 地 区 进 展 期 胃 癌 化 疗 疗 效 与 ERCC1 蛋 白 表 达 的 相 关 性 例 (%) 组 别 ERCC1(+) ERCC1(-) 值 值 总 例 数 21(35.0) 39(65.0) ORR(CR+PR) 4(19.0) 17(43.6) CR 0(0.0) 1(2.6) PR 4(19.0) 16(41.0) SD 9(42.9) 12(30.8) PD 8(38.1) 10(25.6) 表 5 高 海 拔 地 区 进 展 期 胃 癌 化 疗 疗 效 与 ERCC1 mrna 表 达 的 相 关 性 例 (%) 组 别 ERCC1mRNA( 高 ) ERCC1mRNA( 低 ) 值 值 总 例 数 30(50.0) 30(50.0) ORR(CR+PR) 6(20.0) 15(50.0) CR 0(0.0) 1(3.3) PR 6(20.0) 14(46.7) SD 15(50.0) 9(30.0) PD 9(30.0) 6(20.0) 79

5 中 国 现 代 医 学 杂 志 第 26 卷 有 统 计 学 意 义 ( =0.032)( 见 图 3) Cox 比 例 回 归 模 型 将 年 龄 性 别 淋 巴 结 转 移 分 化 程 度 ECOG 评 分 等 可 能 影 响 的 因 素 进 行 多 步 骤 校 正 后 发 现,ERCC1 蛋 白 及 mrna 表 达 仍 然 与 PFS 有 关 ( <0.05) 图 3 3 讨 论 ERCC1-IHC(-)( =39) ERCC1-IHC(+)( =21) 无 进 展 生 存 期 / 月 ERCC1 mrna 0.290( =30) ERCC1 mrna>0.290( =30) 无 进 展 生 存 期 / 月 进 展 期 胃 癌 ERCC1 蛋 白 及 mrna 表 达 与 FOLFOX4 化 疗 后 PFS ERCC1 是 第 1 个 被 发 现 的 人 类 DNA 损 伤 修 复 基 因, 是 一 种 高 度 保 守 的 单 链 DNA 核 酸 内 切 酶 定 位 于 染 色 体 19q13.2~13.3, 包 含 10 个 外 显 子, 基 因 全 长 15 10bp, 编 码 含 297 个 氨 基 酸 的 蛋 白 质 [3] 化 学 药 物 造 成 的 DNA 损 伤 主 要 通 过 核 苷 酸 切 除 修 复 (nucleotide excision repair,ner) 途 径 修 复, 目 前 已 明 确 ERCC1 基 因 是 核 苷 酸 切 除 修 复 的 关 键 基 因 [4] 奥 沙 利 铂 是 第 3 代 铂 类 抗 癌 药 物, 其 形 成 的 铂 -DNA 复 合 物 体 积 更 大, 能 有 更 效 地 抑 制 DNA 合 成 然 而 肿 瘤 患 者 个 体 对 草 酸 铂 的 敏 感 性 迥 然 不 同, 耐 药 者 与 敏 感 者 比 较, 生 存 期 减 少 几 倍 甚 至 十 几 倍 [5] 铂 类 耐 药 是 因 DNA 的 修 复 能 力 造 成, 其 包 含 减 少 细 胞 毒 的 铂 -DNA 复 合 物 形 成, 以 及 与 铂 -DNA 要 机 制 肿 瘤 细 胞 的 DNA 损 伤 修 复 能 力 不 同 会 导 致 其 对 草 酸 铂 的 敏 感 性 差 异 Kwon 等 [8] 对 韩 国 进 展 期 胃 癌 患 者 接 受 奥 沙 利 铂 联 合 5- 氟 尿 嘧 啶 化 疗 的 研 究 显 示,ERCC1 蛋 白 阳 性 率 为 70.3%,ERCC1 蛋 白 阴 性 表 达 者 有 更 好 的 化 疗 反 应 率 及 长 的 无 进 展 总 生 存 期 ( =0.045 和 0.040) Yun 等 [9] 的 一 项 对 韩 国 进 展 期 胃 癌 患 者 行 一 线 铂 类 为 基 础 的 疗 效 及 生 存 研 究 提 示,ERCC1 阳 性 表 达 率 为 66%,ERCC1 阴 性 较 ERCC1 阳 性 患 者 有 更 高 的 治 疗 反 应 率 (44% vs 28%), 但 差 异 无 统 计 学 意 义 ( =0.420),ERCC1 的 表 达 与 总 生 存 期 无 关 ( = 0.570) 但 是 也 有 不 一 致 的 研 究,Baek 等 [10] 对 韩 国 > Ⅱ 期 胃 癌 患 者 行 铂 类 术 后 辅 助 化 疗 的 研 究 表 明, ERCC1 蛋 白 阳 性 组 的 无 病 生 存 期 和 总 生 存 期 明 显 较 阴 性 组 长 本 研 究 结 果 显 示,ERCC1 蛋 白 表 达 阳 性 率 为 35%; 进 展 期 胃 癌 ERCC1 蛋 白 表 达 与 化 疗 客 观 有 效 率 无 关, 与 无 进 展 生 存 期 呈 负 相 关 ; 青 海 地 区 ERCC1 蛋 白 阳 性 率 表 达 较 低, 其 治 疗 反 应 差 可 能 与 本 实 验 入 组 患 者 分 期 晚 及 低 分 化 腺 癌 比 例 较 高 有 关, 以 及 与 不 同 地 区 胃 癌 的 发 病 因 素 发 病 机 制 及 肿 瘤 的 异 质 性 相 关, 需 要 在 以 后 的 研 究 中 扩 大 病 例 分 层 分 析 黄 朝 晖 等 [11] 在 苏 州 地 区 用 半 定 量 RT-PCR 检 测 62 例 胃 癌 组 织 ERCC1 mrna 表 达 水 平 的 中 位 值 为 0.672;ERCC1 mrna 高 表 达 组 的 无 复 发 生 存 率 和 总 生 存 率 显 著 低 于 低 表 达 组 ( <0.05) 多 因 素 分 析 结 果 显 示,ERCC1 mrna 水 平 是 影 响 患 者 预 后 的 独 立 危 险 因 素 ( <0.05), 与 本 研 究 结 果 相 似, 没 有 显 示 区 域 的 差 异 Matsubara 等 [12] 报 道,140 例 进 展 期 胃 癌 患 者 中 43 例 接 受 铂 类 为 基 础 的 一 线 化 疗, 结 果 表 明,ERCC1 mrna 低 表 达 化 疗 反 应 率 为 55.6%, 高 表 达 化 疗 反 应 率 为 18.8%( =0.008), 所 有 患 者 多 变 量 生 存 分 析 显 示,ERCC1 mrna 高 表 达 可 预 测 不 良 预 后 本 研 究 显 示, 在 高 海 拔 地 区, 进 展 期 胃 癌 ERCC1 mrna 表 达 与 化 疗 客 观 有 效 率 PFS 呈 负 相 关 但 是 也 有 不 同 的 报 道,Huang 等 [13] 研 究 长 沙 地 区 实 施 DCF 方 案 化 疗 的 48 例 进 展 期 胃 癌 患 者,TUBB3 TS 和 ERCC1 mrna 采 用 多 通 路 Branched-DNA 液 态 芯 片 技 术 测 定,ERCC1 mrna 的 表 达 高 低 与 化 疗 反 应 率 中 位 [6] 复 合 物 形 成 后 防 止 细 胞 死 亡 其 通 过 NER 去 除 铂 疾 病 进 展 时 间 及 中 位 总 生 存 期 无 关 类 药 物 导 致 DNA 链 内 加 合 物 被 认 为 是 铂 类 药 物 耐 总 之, 本 研 究 探 讨 青 海 地 区 进 展 期 胃 癌 ERCC1 [7] 药 的 主 要 机 制,NER 增 强 是 导 致 顺 铂 耐 药 的 一 个 重 蛋 白 及 mrna 的 表 达, 分 析 其 与 化 疗 的 相 关 性, 发 现 80

6 第 1 期 祁 玉 娟, 等 : 高 海 拔 地 区 进 展 期 胃 癌 切 除 修 复 交 叉 互 补 基 因 1 mrna 及 蛋 白 表 达 与 化 疗 疗 效 的 相 关 性 研 究 其 与 国 内 外 研 究 的 不 同 之 处, 所 以 在 以 后 的 研 究 中, 既 要 扩 大 样 本 研 究, 又 要 将 不 同 民 族 不 同 分 期 进 行 分 析, 从 而 指 导 本 地 区 进 展 期 胃 癌 的 个 体 化 治 疗 参 考 文 献 : [1] Peter S. Adjuvant chemotherapy in gastric cancer[j]. World Journal of Surgery, 1987, 11(4): [2] Olaussen KA, Dunnant A, Fouret P, et al. DNA repair by ER- CC1 in non-small-cell lung cancer and cisplatin-based adjuvant chemotherapy[j]. N Engl JMed, 2006, 355(10): [3] Reed E. ERCC1 and clinical resistance to platinum-based therapy[j]. Clin Cancer Res, 2005, 11(17): [4] Olaussen KA, Mountzios G, Soria JC. ERCC1 as a risk stratifier in platinum-based chemotherapy for non-small-cell lung cancer[j]. Curr Opin Pulm Med, 2007, 13(4): [5] Kawakami K, Watanabe G. Identification and functional analysis of single nucleotide polymorphism in the tandem repeat sequence of thymidylate synthase[j]. Gene Cancer Res, 2003, 63(18): [6] Steven W, Johnson, James P, et al. Cancer: principles and practice of oncology[m]. 6th ed. Philadelphia: Lippincott Williams Wilkins, 2001: [7] Su D, Ma S, Liu P, et al. Genetic polymorphisms and treatment response in advanced non-small cell lung cancer[j]. Lung Cancer, 2007, 56(2): [8] Kwon HC, Roh MS, Oh SY, et al. Prognostic value of expression of ERCC1, thymidylate synthase, and glutathione S-transferase P1 for 5-fluorouracil/oxaliplatin chemotherapy in advanced gastric cancer[j]. Annals of Oncology, 2007, 18(3): [9] Yun J, Kim KM, Kim ST, et al. Predictive value of the ERCC1 expression for treatment response and survival in advanced gastric cancer patients receiving cisplatin-based first-line chemotherapy[j]. Cancer Res Treat, 2010, 42(2): [10] Seo BG, Kwon HC, Oh SY, et al. Comprehensive analysis of excision repair complementation group 1, glutathione S-transferase, thymidylate synthase and uridine diphosphate glucuronosyl transferase 1A1 polymorphisms predictive for treatment outcome in patients with advanced gastric cancer treated with FOLFOX or FOLFIRI[J]. Oncol Rep, 2009, 22(1): [11] 黄 朝 晖, 华 东, 李 莉 华, 等.ERCC1 mrna 表 达 及 基 因 多 态 性 对 胃 癌 辅 助 化 疗 预 后 的 影 响 [J]. 南 京 医 科 大 学 学 报,2008, 28(4): [12] Matsubara J, Nishiina T, Yamada Y, et al. Impacts of excision repair cross-complementing gene 1 (ERCC1), dihydropyrimidine dehydrogenase, and epidermal growth factor receptor on the outcomes of patients with advanced gastric cancer[j]. British Journal of Cancer, 2008, 98(4): [13] Huang J, Hu HB, Xie YC, et al. Effects of TUBB3, TS and ERCC1 mrna expressions on chemoresponse and clinical outcome of advanced gastric cancer by multiplex branched-dna liquid chip technology[j]. Translational Gastrointestinal Cancer, 2014, 3(1): ( 童 颖 丹 编 辑 ) 81

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