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1 中 国 农 业 科 学 河 北 省 野 生 大 豆 天 然 群 体 中 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 蛋 白 的 多 态 性 王 克 晶 王 英 典 海 林 戴 昕 李 福 山 中 国 农 业 科 学 院 作 物 品 种 资 源 研 究 所 北 京 北 京 师 范 大 学 生 物 系 北 京 中 国 农 业 科 学 院 作 物 育 种 栽 培 研 究 所 北 京 摘 要 在 河 北 省 搜 集 了 东 北 部 山 区! 东 北 部 平 原! 白 洋 淀 湖 泊 区! 西 南 丘 陵 山 区 等 个 天 然 野 生 大 豆 群 体 的 份 植 株 种 子 样 本 调 查 其 型 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 蛋 白 的 形 态 及 蛋 白 位 点 在 野 生 大 豆 天 然 个 体 群 体 及 地 理 的 频 率 变 化 结 果 显 示 超 过 个 体 群 体 的 位 点 是 多 态 的 个 天 然 个 体 群 体 中 个 群 体 形 态 是 由 Τια 和 Τιβ 构 成 的 混 合 群 体 这 次 测 定 的 河 北 野 生 大 豆 中 没 有 发 现 Τιχ 形 态 存 在 在 个 混 合 群 体 中 个 群 体 发 现 存 在 Τια/ Τιβ 杂 合 种 子 约 占 调 查 群 体 的 在 野 生 大 豆 总 群 体 中 至 少 有 的 异 交 率 河 北 天 然 野 生 大 豆 Τια 基 因 频 率 约 占 Τιβ 约 地 理 上 东 北 部 山 区 和 平 原 生 态 区 比 南 部 的 白 洋 淀 和 西 南 丘 陵 山 地 生 态 区 有 较 高 的 Τιβ 频 率 无 论 在 南 部 或 北 部 山 区 生 态 区 Τιβ 频 率 高 于 平 原 生 态 区 同 时 山 区 生 态 区 内 的 个 体 群 体 间 的 基 因 频 率 差 异 变 化 程 度 高 于 平 原 群 体 间 的 变 化 个 体 群 体 的 基 因 频 率 没 有 看 到 与 地 理 距 离 有 相 关 性 白 洋 淀 湖 泊 生 态 区 虽 然 有 河 北 最 大 的 野 生 群 落 但 是 位 点 是 Τια 单 态 的 湖 内 和 湖 外 群 体 位 点 是 一 致 的 单 态 性 暗 示 白 洋 淀 区 域 野 生 群 体 间 受 湖 水 流 动 的 影 响 使 Τια 型 种 子 在 群 体 传 播 形 成 一 个 单 态 优 势 型 也 许 这 个 区 域 的 野 生 大 豆 遗 传 背 景 较 其 它 地 区 群 体 狭 窄 在 这 个 研 究 中 我 们 还 首 次 发 现 野 生 大 豆 的 蛋 白 缺 失 突 变 关 键 词 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 地 理 遗 传 分 化 野 生 大 豆 生 态 等 位 酶 频 率 2 2 ƒ 2 ( Ινστιτυτε οφ Χροπ Γερμ πλασμ Ρεσουρχεσ, Χηινεσε Αχαδε μ ψ οφ Αγριχυλτυραλ Σχιε νχεσ, Βειϕινγ Δεπαρτ μ εντ οφ Βιολογψ, Βειϕινγ Νορμ αλ Υνιϖερσιτψ, Βειϕινγ ; Ινστιτυτε οφ Χροπ Βρεεδινγ ανδ Χυλτιϖατιον, Χηινεσε Αχαδε μ ψ οφ Αγριχυλτυραλ Σχιενχεσ, Βειϕινγ ) 2 2 Τια Τιβ 2 ƒ 2 2 Τια Τιβ Τιβ Τιβ 收 稿 日 期 2 2 作 者 简 介 王 克 晶 2 男 辽 宁 丹 东 人 副 研 究 员 主 要 从 事 大 豆 品 种 资 源 研 究 2 ƒ 2 2 2

2 期 王 克 晶 等 河 北 省 野 生 大 豆 天 然 群 体 中 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 蛋 白 的 多 态 性 Τια Τια 2 大 豆 Γλψχινε μ αξ 和 野 生 大 豆 Γλψχινε σοϕα 的 种 子 含 有 几 种 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 蛋 白 它 们 能 够 抑 制 某 些 动 物 的 生 长 并 具 有 导 致 胰 脏 肥 大 化 的 可 能 性 所 以 这 些 蛋 白 被 认 为 是 未 经 高 温 处 理 过 的 大 豆 营 养 价 值 低 的 限 制 因 子 目 前 型 胰 蛋 白 抑 制 剂 被 相 继 发 现 几 个 多 态 Τια 和 Τιβ! Τιχ! Τιδ! 缺 失 体 τι! 个 微 小 突 变 Τια2σ, Τιβ2φ 和 Τιβ2σ 多 态 性 经 常 被 用 作 一 个 标 记 来 研 究 和 探 索 大 豆 的 起 源 和 传 播! 地 理 分 化! 种 间 亲 缘 相 关 野 生 大 豆 曾 发 现 个 变 异 Τια2σ! Τιβ2σ 保 存 在 国 家 种 质 库 的 野 生 大 豆 有 种 多 态 Τια!Τιβ 和 Τιχ 我 国 栽 培 和 野 生 大 豆 没 有 发 现 缺 失 现 象 年 前 我 国 进 行 了 全 国 范 围 的 野 生 大 豆 考 察 目 前 国 家 种 质 库 保 存 余 份 野 生 大 豆 资 源 虽 然 收 集 到 大 量 资 源 但 是 收 集 数 量 地 区 不 均 许 多 地 区 收 集 的 很 少 或 没 有 收 集 使 以 后 许 多 的 研 究 有 诸 多 不 便 河 北 省 是 国 家 种 质 库 中 资 源 保 存 数 量 极 少 的 地 区 之 一 为 了 解 野 生 大 豆 在 河 北 省 的 地 理 分 布 和 遗 传 变 异 合 理 地 收 集 和 正 确 整 理 与 评 价 野 生 大 豆 资 源 我 们 取 样 研 究 河 北 省 天 然 野 生 大 豆 群 体 的 多 态 分 布 1 材 料 与 方 法 1 1 材 料 在 河 北 省 个 天 然 野 生 群 体 取 样 纬 度 范 围 β χ β χ 考 虑 到 取 样 地 的 地 理 差 异 收 集 地 区 大 致 可 划 分 个 生 态 区 即 东 北 部 山 区 青 龙! 宽 城 县! 东 北 部 平 原 丰 润! 玉 田 县 和 迁 安 市! 白 洋 淀 湖 区 雄 县! 安 新 县 和 任 丘 市 和 西 南 部 丘 陵 赞 皇 和 临 城 年 在 这 些 地 方 收 集 个 样 品 白 洋 淀 是 华 北 地 区 最 大 的 湖 泊 流 域 面 积 约 是 本 次 收 集 的 野 生 大 豆 特 殊 湿 地 生 态 区 为 研 究 白 洋 淀 群 落 的 等 位 频 率 分 布 是 否 受 湖 水 流 的 影 响 在 两 个 湖 内 群 体! 两 个 湖 岸 群 体 和 个 陆 上 群 体 取 样 表 1 2 蛋 白 电 泳 按 方 法 从 种 子 中 提 取 蛋 白 质 样 使 用 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 2 结 果 与 讨 论 2 1 河 北 省 野 生 大 豆 电 泳 形 态 电 泳 结 果 显 示 图 测 定 的 野 生 大 豆 样 本 有 个 类 型 Τια 和 Τιβ 没 有 Τιχ 类 型 在 测 定 样 本 中 Τια 占 Τιβ 占 同 时 看 到 约 的 杂 合 体 表 这 个 比 率 与 我 们 以 前 测 定 日 本 野 生 大 豆 天 然 群 体 的 结 果 一 致 中 国 野 生 大 豆 至 今 发 现 存 在 Τια! Τιβ 和 Τιχ 类 型 李 福 山 报 告 国 家 种 质 库 β 纬 度 Τιβ 频 率 较 高 为 我 们 现 在 的 结 果 看 到 这 个 纬 度 带 Τιβ 频 率 倾 向 类 似 这 个 纬 度 带 的 河 北 省 的 Τιβ 频 率 为 而 Τια 频 率 为 在 这 个 纬 度 带 周 边 的 日 本 野 生 大 豆 天 然 群 体 Τια 频 率 约 是 韩 国 约 为 胡 志 昂 和 王 洪 新 测 定 北 京 地 区 个 天 然 群 体 的 结 果 几 乎 是 Τια 仅 有 两 个 群 体 存 在 低 于 的 Τιβ 频 率 研 究 结 果 显 示 北 京 和 河 北 省 虽 然 是 相 同 地 理 区 域 但 是 两 地 Τιβ 频 率 截 然 不 同 2 2 缺 失 现 象 在 本 研 究 中 测 定 到 份 材 料 缺 失 蛋 白 图 这 个 发 现 对 大 豆 营 养 改 良 和 研 究 在 植 物 体 内 的 机 能 具 有 极 大 意 义 野 生 大 豆 中 从 来 未 发 现 过 这 样 的 缺 失 体 这 是 首 次 看 到 野 生 大 豆 中 存 在 缺 失 突 变 这 暗 示 野 生 大 豆 蕴 藏 着 人 们 需 要 的 有 用 基 因 2 3 生 态 区 的 多 态 分 布 如 表 所 示 个 生 态 区 有 个 是 多 态 的 仅 个 是 单 态 的 东 北 东 北 部 山 区 和 平 原 两 个 生 态 区 比 南 部 白 洋 淀 和 西 南 部 丘 陵 两 个 生 态 区 有 较 高 的 Τιβ 频 率 Τιβ 频 率 在 东 北 部 山 区 最 高 为 平 原 为 其 次 西 南 部 丘 陵 为 白 洋 淀 湖 区 最 低 仅 为 河 北 省 南 北 都 是 山 区 或

3 中 国 农 业 科 学 卷 丘 陵 Τιβ 频 率 高 于 平 原 表 1 收 集 地 点 和 样 本 数 群 体 和 生 境 地 点 取 样 地 所 在 行 政 区 域 样 本 山 脚 下 路 边 大 石 门 青 龙 ± 山 脚 河 岸 前 庄 ± 青 龙 ± 苇 田 八 道 河 青 龙 ± 河 岸 路 边 下 坎 宽 城 河 岸 农 田 ƒ 板 城 宽 城 苇 塘 徐 流 营 迁 安 ± 苇 田 大 崔 庄 迁 安 ± 苇 田 郑 八 庄 丰 润 ƒ 苇 田 后 湖 定 府 玉 田 湖 岸 南 新 立 庄 雄 县 湖 边 田 地 ƒ 北 刘 庄 安 新 湖 内 刘 庄 安 新 湖 内 南 刘 庄 安 新 湖 岸 枣 林 庄 任 丘 水 库 山 坡 百 草 评 赞 皇 路 边 平 旺 赞 皇 河 岸 农 田 ƒ 南 关 镇 赞 皇 河 岸 西 竖 临 城 群 体 和 白 洋 淀 湖 水 边 靠 近 湖 边 陆 地 和 湖 内 2 和 有 类 似 的 较 高 的 Τιβ 频 率 约 群 体 和 有 类 似 低 的 Τιβ 频 率 一 些 同 工 酶 研 究 显 示 等 位 频 率 与 地 理 没 有 直 接 关 系 等 快 带 ƒτια 慢 带 Τιβ 图 1 河 北 省 野 生 大 豆 型 胰 蛋 白 抑 制 剂 电 泳 形 态 ƒ 各 地 理 群 体 的 频 率 变 化 在 表 中 可 见 除 白 洋 淀 生 态 区 外 群 体 间 频 率 的 高 低 几 乎 是 倾 向 性 随 机 分 布 显 示 与 地 理 距 离 没 有 相 关 性 在 东 北 部 山 区 群 体 和 相 距 约 的 距 离 但 是 两 群 体 Τιβ 频 率 有 明 显 的 差 异 群 体 Τιβ 频 率 为 而 群 体 为 尽 管 一 些 群 体 相 距 之 远 但 是 频 率 相 近 如 群 体! 左 边 号 显 示 缺 失 其 他 为 Τια Τια 图 2 缺 失 型 胰 蛋 白 抑 制 剂 的 电 泳 形 态 ƒ

4 期 王 克 晶 等 河 北 省 野 生 大 豆 天 然 群 体 中 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 蛋 白 的 多 态 性 表 2 河 北 省 野 生 大 豆 天 然 群 体 和 生 态 区 多 态 频 率 ƒ 生 态 区 群 体 样 本 Τια Τιβ Τια/ Τιβ 东 北 部 山 区 小 计 东 北 部 平 原 小 计 白 洋 淀 湖 小 计 西 南 部 丘 陵 小 计 总 计 的 研 究 显 示 在 日 本 野 生 大 豆 群 体 线 粒 体 ƒ 多 态 有 地 理 分 布 性 在 东 北 部 平 原 仅 个 群 体 群 体 的 Τια 频 率 略 低 为 其 他 个 群 体!! 有 较 高 的 Τια 频 率 为 西 南 部 丘 陵 生 态 区 个 群 体 中 仅 个 群 体 群 体 Τια 频 率 较 低 另 个 群 体!! 有 较 高 的 频 率 为 群 体!! 虽 然 是 同 一 个 县 但 是 群 体 有 高 的 Τιβ 频 率 总 体 上 平 原 群 体 白 洋 淀 和 东 北 部 平 原 间 的 频 率 差 异 与 山 区 群 体 相 比 较 为 缓 和 山 区 复 杂 的 地 理 条 件 可 能 会 较 平 原 地 区 易 分 割 成 多 样 的 地 理 隔 离 群 体 而 阻 碍 群 体 间 的 基 因 流 动 在 白 洋 淀 取 样 个 群 体 中 个 群 体 是 Τια 单 态 个 湖 边 群 体 有 低 的 Τιβ 频 率 这 个 结 果 说 明 白 洋 淀 地 区 野 生 大 豆 近 乎 都 是 Τια 类 型 推 断 可 能 是 由 于 原 本 在 白 洋 淀 频 率 较 高 的 Τια 类 型 野 生 大 豆 随 湖 水 的 移 动 而 扩 散 以 致 形 成 大 面 积 Τια 类 型 分 布 暗 示 白 洋 淀 群 体 遗 传 基 础 可 能 较 其 他 地 区 群 体 狭 窄 等 和 ƒ 等 研 究 日 本 的 河 岸 野 生 大 豆 群 体 发 现 其 遗 传 多 样 性 低 基 因 分 化 系 数 分 别 估 算 为 Γ ΣΤ 和 和 裴 颜 龙 等 研 究 南 朝 鲜 和 我 国 的 地 理 隔 离 野 生 大 豆 天 然 群 体 的 遗 传 多 样 性 时 看 到 其 遗 传 多 样 性 较 高 分 别 估 算 为 和 本 研 究 个 群 体 中 个 群 体 是 Τιβ / Τιβ 混 合 群 体 占 总 群 体 其 中 个 群 体 总 群 体 的 发 现 有 天 然 异 交 现 象 每 个 群 体 异 交 率 这 个 群 体 占 混 合 群 体 的 河 北 省 以 上 野 生 大 豆 群 体 在 位 点 是 多 态 的 群 体 总 异 交 率 约 在 河 北 省 野 生 大 豆 混 合 群 体 较 多 发 生 异 交 的 群 体 的 异 交 率 相 对 较 高 这 些 都 暗 示 天 然 异 交 是 经 常 发 生 的 群 体 内 的 异 交 对 野 生 大 豆 种 内 的 基 因 交 流 和 遗 传 进 化 的 作 用 是 不 可 忽 视 的 它 是 群 体 内 和 群 体 间 遗 传 变 异 的 重 要 来 源 之 一 2 2

5 中 国 农 业 科 学 卷 2 2 Γλψχινε σοϕα 2 Γλψχινε σο2 ϕα) 2 王 克 晶 等 等 电 点 在 电 泳 证 实 日 本 野 生 大 豆 中 的 一 个 型 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 新 变 异 作 物 学 报 (Γ. μαξ) 王 衍 桐 等 从 种 子 蛋 白 电 泳 分 析 看 我 国 大 豆 品 种 和 位 点 等 位 基 因 的 分 布 作 物 学 报 (Γ. σο2 ϕα) 徐 豹 等 中 国 野 生 大 豆 (Γ. σοϕα) 种 子 蛋 白 的 电 泳 分 析 和 个 等 位 基 因 频 率! 地 理 分 布 与 大 豆 起 源 地 问 题 大 豆 科 学 Γλψχινε μ αξ 2 Γλψχινε σοϕα 裴 颜 龙 等 野 生 大 豆 遗 传 多 样 性 研 究 大 豆 科 学 Γλψχινε 2 ƒ (Γ.σοϕα) 李 福 山 中 国 野 生 大 豆 资 源 研 究 进 展 北 京 中 国 农 业 出 版 社 全 国 野 生 大 豆 考 察 组 中 国 野 生 大 豆 考 察 报 告 中 国 农 业 科 学 王 克 晶 日 本 野 生 大 豆 资 源 概 况 及 我 国 野 生 大 豆 的 研 究 与 利 用 刍 议 作 物 品 种 资 源 (Γ.σοϕα) 胡 志 昂 等 北 京 地 区 野 生 大 豆 天 然 群 体 遗 传 结 构 植 物 学 报 ƒ 2 Γλψχινε σοϕα Γλψχινε σο2 ϕα ƒ

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