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1 第 49 卷第 4 期 2013 年 8 月 兰州大学学报 ( 自然科学版 ) Journal of Lanzhou University (Natural Sciences) Vol. 49 No. 4 Aug 文章编号 : (2013) 黄芪药材不同极性部位的指纹图谱 刘小花 1, 白仲梅 2, 梁瑾 1, 封士兰 1 1. 兰州大学药学院, 兰州 靖远煤业集团有限责任公司总医院药剂科, 甘肃白银 摘要 : 对黄芪药材不同极性部位进行指纹图谱对比研究. 采用 HPLC 法分别对 10 批黄芪药材的 5 个提取部位研究, 流动相乙腈 水溶液梯度洗脱. 建立 10 批不同产地黄芪中 5 种极性部位的模式指纹图谱. 首次鉴别 7 个主要指标成分. 方法准确可靠, 为全面控制药材质量提供了一种方法. 关键词 : 高效液相色谱 ; 指纹图谱 ; 质量控制 ; 黄芪中图分类号 : Q819 文献标识码 : A Chromatographic fingerprints of different polarities from Radix Astragali LIU Xiao-hua 1, BAI Zhong-mei 2, LIANG Jin 1, FENG Shi-lan 1 1. School of Pharmaceutics, Lanzhou University, Lanzhou , China 2. Pharmacy Department, General Hospital of Jingyuan Coal Industry Co Ltd, Baiyin , Gansu, China Abstract: The chromatographic fingerprints of different polarities from Radix Astragali and five extracts from 10 batches of Radix Astragali were studied. The mobile phase underwent ACN and H 2O, gradient elution and the mode was established for the fingerprints of the five extracts from the 10 batches of Radix Astragali and seven main index components were identified for the first time. The method was accurate and reliable and the study may contribute to the quality control of Radix Astragali. Key words: high performance liquid chromatography; fingerprint; quanlity control; Radix Astragali 黄芪 (Radix Astragali) 为豆科植物 (Astragalus membranaceus(fisch.) Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao) 或膜荚黄芪 (Astragalus membranaceus(fisch.) Bge 的干燥根, 具有补气固表 利尿托毒 排脓 敛疮生肌之功效 [1]. 现代药理研究表明黄芪具有增强免疫力 抗疲劳 降糖 抗病毒 降脂 改善神经内分泌因子分泌 利尿 强心 降压等多种作用. 黄芪不仅产量大, 年消耗量也高达 kg, 是中国药食两用的大宗药材品种之一. 目前国内外报道的关于黄芪药材指纹图谱研究的文献较多 [2 11], 但是指纹图谱研究所用的样品处理方法是采用单一溶剂, 如甲醇 乙醇或石油 醚, 然后用正丁醇萃取的方法, 只测定黄芪某一提取部位的指纹图谱, 对黄芪不同极性部位指纹图谱的研究尚属空白. 黄芪含有多种类型的化学成分, 如低极性化合物黄酮苷元类, 中等极性化合物黄芪皂苷类 黄酮苷类, 极性化合物腺苷 多糖类. 仅用一种溶剂处理样品, 研究的指纹图谱不够全面. 本文采用不同极性的溶剂提取黄芪药材, 得到 5 个极性部位 ( 总提取部位 石油醚部位 乙酸乙酯部位 乙醇部位和水部位 ), 测定了 10 个不同地区黄芪药材的高效液相色谱 (High performance liquid chromatography, HPLC) 的 5 种极性部位的指纹图谱, 建立 10 收稿日期 : ; 修回日期 : 基金项目 : 中央高校基本科研业务费专项资金项目 (lzujbky ); 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室开放基金项目 (ZDSYS-KJ ); 兰州市科技计划项目 ( ) 作者简介 : 刘小花 (1976 ), 女, 甘肃兰州人, 实验师, 博士研究生, liuxiaoh@lzu.edu.cn, 研究方向为药物分析学 ; 封士兰 (1957 ), 女, 甘肃兰州人, 教授, 博士研究生导师, fengshl@lzu.edu.cn, 研究方向为中药中化学成分分离分析及中药新药, 通信联系人.

2 第 49 卷 兰 州 大 学 学 报 自然科学版 574 个不同产地黄芪中 5 种极性部位的模式指纹图谱, 量瓶中, 定容至刻度, 摇匀, 即得供试品溶液. 用微 首次鉴别 7 个主要指标成分, 为全面评价黄芪药材 孔滤膜(0.45 µm)过滤后备用. 的质量提供了技术支持. 2.3 分别称取毛蕊异黄酮苷 毛蕊异黄酮 腺苷 仪器与试药 1 对照品溶液的制备 芒 柄 花 素 黄 芪 甲 苷 黄 芪 皂 苷 Ⅱ 黄 芪 皂 苷 Ⅲ Waters 2695 高 效 液 相 色 谱 仪, Millennum 32 工 作 站, 2771 自 动 进 样 器, 柱 温 箱, 2996 二 极 管 阵 列检测器, 蒸发光散射检测器(Alltech ELSD 2000); Hypersil ODS-1 C18 柱(250.0 mm 4.6 mm 5 µm) (大连依利特有限公司), SpursilTM C18 柱(250.0 mm 4.6 mm 5 µm)(北 京 迪 马 有 限 公 司). 乙 腈 为 色 谱 纯(德国默克), 水为超纯水. 数据处理软件: 中药色 谱 指 纹 图 谱 计 算 机 辅 助 相 似 性 评 价 系 统 软 件(版 适量, 用甲醇配制成质量浓度分别为 0.412, 0.425, 0.844, 0.437, 0.385, 0.281, mg/ml 的 对 照 品 溶液. 2.4 指纹图谱的建立[2 11] 黄芪药材总提取部位 HPLC-DAD 和 HPLCELSD 指纹图谱的建立 色谱条件: 色谱柱为 SpursilTM C18 柱(250.0 mm 4.6 mm 5 µm); 流 动 相 为 乙 腈 和 水, 梯 度 洗 脱 本 1.0, 中南大学提供). 黄芪药材为全国各地采集或购买的种植或野 (表 2); 进 样 量 为 20 µl, 柱 温 为 25 C, 检 测 波 长 生 黄 芪, 经 兰 州 大 学 药 学 院 生 药 学 研 究 所 马 志 刚 为 254 nm; 蒸 发 光 散 射 检 测 器 温 度 为 C, 载 鉴定为, 共 10 批, 见表 1. 对照 品 毛 蕊 异 气流速为 3.2 L/min. Table 1 表2 黄芪药材的来源与品种 表1 Origins and varieties of Radix Astragali 编号 来源 品种 编号 来源 品种 1 甘南野生 6 甘肃临洮 2 甘肃陇西 7 甘肃西和 3 甘肃岷县 1 8 内蒙 4 甘肃岷县 2 9 陕西 5 甘肃首阳 10 甘肃陇南 Table 2 总提取部位的梯度洗脱条件 Condition of gradient elution of the total extract T /min 流速/(mL/min) A 道乙腈/% B 道水/% 黄酮 芒柄花素 腺苷 毛蕊异黄酮苷 黄芪甲苷 取 总 提 取 部 位 供 试 品 溶 液 20 µl, 注 入 高 效 黄芪皂苷Ⅱ 黄芪皂苷Ⅲ, 均购于中国生物药品检 液 相 色 谱 仪 进 行 分 析. 所 得 10 批 药 材 总 提 取 部 定所. 位 HPLC-DAD 指纹图谱如图 1, HPLC-ELSD 指纹 图 谱 如 图 2, 模 式 指 纹 图 谱 如 图 3 4. 对 各 个 峰 方法与结果 样品制备 紫 外 光 谱 图 进 行 对 比 分 析, 10 批 药 材 总 提 取 部 位 HPLC-DAD 指纹图谱共找到 14 个共有峰, 其中 称取黄芪药材 300 g, 用 6 倍量的 95%乙醇回流 提 取; 提 取 3 次, 每 次 1 h, 合 并 提 取 液; 将 提 取 液 减 压 浓 缩 至 无 醇 味, 取 出 10 ml 做 为 总 提 取 部 位. 其余用石油醚萃取, 重复 3 5 次, 分出上层, 合并, 萃取液浓缩成浸膏, 得到石油醚部位; 下层萃取液 用乙酸乙酯萃取, 重复 3 5 次, 分出上层, 合并, 萃 取液浓缩成浸膏, 得到乙酸乙酯部位; 下层萃取液 浓缩至干, 加乙醇超声溶解 10 min, 得到乙醇部位; 乙醇不溶解部位加水溶解, 得水部位; 10 批药材样 品处理过程相同. 2.2 供试品溶液的制备 将总提取部位 石油醚部位 乙酸乙酯部位 乙 醇 部 位 水 部 位 5 个 部 位 的 浸 膏 干 燥, 分 别 取 0.5 g, 精 密 称 定, 加 甲 醇 溶 解 转 移 至 10 ml 容 12 毛蕊异黄酮; 14 芒柄花素 图 1 黄芪药材总提取部位 HPLC-DAD 指纹图谱(254 nm) Figure 1 HPLC-DAD chromatogram of the total extract of Radix Astragali (254 nm)

3 第 4 期刘小花, 等 : 黄芪药材不同极性部位的指纹图谱 毛蕊异黄酮苷 ; 5 黄芪甲苷 ; 6 黄芪皂苷 Ⅲ; 7 黄芪皂苷 Ⅱ Ⅱ. 采用夹角余弦法原理, 以共有峰的峰面积计算相似度, 10 个样品的相似度均大于 90%, 结果见表 3 4. 甘南野生 甘肃陇西 甘肃岷县 1 甘肃岷县 2 甘肃首阳 甘肃临洮 甘肃西和 内蒙 陕西 甘肃陇南的 HPLC-DAD 指纹图谱共有峰的相似度分别为 95.95%, 94.34%, 98.89%, 98.90%, 99.17%, 99.33%, 97.76%, 97.87%, 91.40%, 96.59%, HPLC- ELSD 指纹图谱共有峰的相似度分别为 98.51%, 99.92%, 96.49%, 98.57%, 99.20%, 97.78%, 99.64%, 98.80%, 93.87%, 94.91%. 图 2 黄芪药材总提取部位 HPLC-ELSD 指纹图 Figure 2 HPLC-ELSD fingerprint of the total extract of Radix Astragali 1 毛蕊异黄酮苷 ; 5 黄芪甲苷 ; 6 黄芪皂苷 Ⅲ; 7 黄芪皂苷 Ⅱ 12 毛蕊异黄酮 ; 14 芒柄花素图 3 黄芪药材总提取部位 HPLC-DAD 模式指纹图谱 (254 nm) Figure 3 HPLC-DAD model fingerprint of the total extract of Radix Astragali (254 nm) 12, 14 号峰分别与对照品毛蕊异黄酮和芒柄花素的保留时间和紫外光谱图相同, 鉴定为毛蕊异黄酮和芒柄花素. HPLC-ELSD 指纹图谱共找到 9 个共有峰, 通过与对照品保留时间的比较, 确定 1 号峰为毛蕊异黄酮苷, 5 号峰为黄芪甲苷 ( 黄芪皂苷 Ⅳ), 6 号峰为黄芪皂苷 Ⅲ, 7 号峰为黄芪皂苷 图 4 黄芪药材总提取部位 HPLC-ELSD 模式指纹图谱 Figure 4 HPLC-ELSD model fingerprint of the total extract of Radix Astragali 号黄芪药材总提取部位供试液, 进样 5 次, 每次进样量为 20 µl, 测定指纹图谱相似度的日内精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.98, RSD<1.0%. 连续 5 天每天进样 1 次, 测定指纹图谱相似度的日间精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.97, RSD<2.8%. 取 1 号黄芪药材总提取部位浸膏 5 份, 按供试品溶液制备方法制备样品溶液, 测定指纹图谱相似度的重复性, 计算得图谱的相似度大于 0.98, RSD<1.2%. Table 3 表 3 总提取部位 HPLC-DAD 指纹图谱共有峰的保留时间 Common peaks of retention time of the total extracts in HPLC-DAD fingerprint min

4 576 兰州大学学报 ( 自然科学版 ) 第 49 卷 表 4 总提取部位 HPLC-ELSD 指纹图谱共有峰的保留时间 Table 4 Common peaks of retention time of the total extracts in HPLC-ELSD fingerprint min 黄芪药材石油醚部位指纹图谱的建立 色谱条件 : 色谱柱为 Hypersil ODS-1 C18 柱 (250.0 mm 4.6 mm 5 µm); 流动相为乙腈和水, 梯 度洗脱 ( 表 5); 进样量为 20 µl, 柱温为 25 C, 检测 波长为 240 nm. Table 5 表 5 石油醚部位的梯度洗脱条件 Condition of gradient elution of the petroleum ether extract T/min 流速 /(ml/min) A 道乙腈 /% B 道水 /% 芒柄花素 图 5 黄芪药材石油醚部位 HPLC 指纹图谱 (240 nm) Figure 5 HPLC fingerprint of the petroleum ether extract of Radix Astragali (240 nm) 取石油醚部位供试品溶液 20µL, 进入高效液相色谱仪进行分析. 所得 10 批药材石油醚部位指纹图谱如图 5, 模式指纹图谱如图 6. 对各个峰紫外光谱图进行对比分析, 10 批药材石油醚部位指纹 图谱共找到 14 个共有峰, 其中 5 号峰与对照品芒柄花素的保留时间和紫外光谱图相同, 将其确定为芒柄花素 ( 表 6). 采用夹角余弦法原理, 以共有峰的峰面积计算相似度, 10 个样品的相似度均大于 90%. 甘南野生 甘肃陇西 甘肃岷县 1 甘肃岷县 2 甘肃首阳 甘肃临洮 甘肃西和 内蒙 陕西 甘肃陇南的石油醚部位指纹图谱共有峰的相似度分别为 93.86%, 93.95%, 91.82%, 90.76%, 92.08%, 98.26%, 94.98%, 91.1%, 94.71%, 96.57%. 号黄芪药材石油醚部位供试液, 进样 5 次, 每次进样量为 20 µl, 测定指纹图谱相似度的日内精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.96, RSD<1.2%. 连续 5 天每天进样 1 次, 测定指纹图谱相似度的日间精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.97, RSD<2.7%. 取 1 号黄芪药材石油醚部位浸膏 5 份, 按供试品溶 5 芒柄花素 图 6 黄芪药材石油醚部位 HPLC 模式指纹图谱 (240 nm) Figure 6 HPLC model chromatogram of the petroleum ether extract of Radix Astragali (240 nm) 液制备方法制备样品溶液, 测定指纹图谱相似度 的重复性, 计算得图谱的相似度大于 0.95, RSD< 1.5% 黄芪药材乙酸乙酯部位指纹图谱的建立 色谱条件 : 色谱柱为 Hypersil ODS-1 C18 柱 (250.0 mm 4.6 mm 5 µm); 流动相为乙腈和水, 梯 度洗脱 ( 表 7); 进样量为 20 µl, 柱温为 25 C, 检测 波长为 280 nm. 取乙酸乙酯部位供试品溶液 20µL, 进入高效 液相色谱仪进行分析. 所得 10 批药材乙酸乙酯部 位指纹图谱如图 7, 模式指纹图谱如图 8. 对各个

5 第 4 期刘小花, 等 : 黄芪药材不同极性部位的指纹图谱 577 表 6 石油醚部位 HPLC 指纹图谱共有峰的保留时间 Table 6 Common peaks of retention time of the petroleum ether extract in HPLC fingerprint min 表 7 乙酸乙酯部位的梯度洗脱条件 Table 7 Condition of gradient elution of the ethyl acetate extract T/min 流速 /(ml/min) A 道乙腈 /% B 道水 /% 毛蕊异黄酮 ; 7 芒柄花素图 7 黄芪药材乙酸乙酯部位 HPLC 指纹图谱 (280 nm) Figure 7 HPLC chromatogram of the ethyl acetate extract of Radix Astragali (280 nm) 峰紫外光谱图进行对比分析, 10 批药材乙酸乙酯部位指纹图谱共找到 8 个共有峰, 其中 4 号和 7 号峰分别与对照品毛蕊异黄酮和芒柄花素的保留时间和紫外光谱图相同, 鉴定为毛蕊异黄酮和芒柄花素 ( 表 8). 采用夹角余弦法原理, 以共有峰的峰面积计算相似度, 10 个样品的相似度均大于 90%. 甘南野生 甘肃陇西 甘肃岷县 1 甘肃岷县 2 甘肃首阳 甘肃临洮 甘肃西和 内蒙 陕西 甘肃陇南的乙酸乙酯部位指纹图谱共有峰的相似度分别为 98.35%, 99.29%, 99.34%, 90.28%, 90.96%, 95.68%, 97.63%, 92.33%, 94.20%, 92.60%. 号黄芪药材乙酸乙酯部位供试液, 进样 5 次, 每次进样量为 20 µl, 测定指纹图谱相似度的日内精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.96, RSD<0.8%. 连续 5 天每天进样 1 次, 测定指纹图谱相似度的日间精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.97, RSD<2.0%. 取 1 号黄芪药材乙酸乙酯部位浸膏 5 份, 按供试品溶液制备方法制备样品溶液, 测定指纹图谱相似度的重复性, 计算得图谱的相似度大于 0.94, RSD<1.5% 黄芪药材乙醇部位指纹图谱的建立 4 毛蕊异黄酮 ; 7 芒柄花素图 8 黄芪药材乙酸乙酯部位 HPLC 模式指纹图谱 (280 nm) Figure 8 HPLC model chromatogram of the ethyl acetate extract of Radix Astragali (280 nm) 色谱条件 : 色谱柱为 SpursilTM C18 柱 (250.0 mm 4.6 mm 5 µm); 流动相为乙腈和水, 梯度洗脱 ( 表 9); 进样量为 20 µl, 柱温为 25 C, 检测波长为 254 nm. 取乙醇部位供试品溶液 20 µl, 进入高效液相色谱仪进行分析. 所得 10 批药材乙醇部位指纹图谱如图 9, 模式指纹图谱如图 10. 对各个峰紫外光谱图进行对比分析, 10 批药材乙醇部位指纹图谱

6 578 兰州大学学报 ( 自然科学版 ) 第 49 卷 表 8 乙酸乙酯部位 HPLC 指纹图谱共有峰的保留时间 Table 8 Peaks of retention time of the ethyl acetate extract in HPLC spectrum min 表 9 乙醇部位的梯度洗脱条件 Table 9 Condition of gradient elution of the ethanol extract T/min 流速 /(ml/min) A 道乙腈 /% B 道水 /% 甘肃岷县 2 甘肃首阳 甘肃临洮 甘肃西和 内蒙 陕西 甘肃陇南的乙醇部位指纹图谱共有峰的相似度分别为 97.73%, 99.42%, 97.81%, 99.78%, 97.99%, 99.94%, 100%, 96.51%, 98.19%, 98.56%. 4 毛蕊异黄酮 ; 7 芒柄花素 图 10 黄芪药材乙醇部位模式 HPLC 指纹图谱 (254 nm) 4 毛蕊异黄酮 ; 7 芒柄花素图 9 黄芪药材乙醇部位 HPLC 指纹图谱 (254 nm) Figure 9 HPLC chromatogram of the ethanol extract of Radix Astragali(254 nm) 共找到 8 个共有峰 ( 表 10). 采用夹角余弦法原理, 以共有峰的峰面积计算相似度, 10 个样品的相似度均大于 90%. 甘南野生 甘肃陇西 甘肃岷县 1 Figure 10 HPLC model chromatogram of the ethanol extract of Radix Astragali(254 nm) 号黄芪药材乙醇部位供试液, 进样 5 次, 每次进样量为 20 µl, 测定指纹图谱相似度的日内精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.95, RSD<0.8%. 连续 5 天每天进样 1 次, 测定指纹图谱相似度的日间精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.96,RSD< 1.9%. 取 1 号黄芪药材乙醇部位浸膏 5 份, 按供试品溶液制备方法制备样品溶液, 测定指纹图谱相似度的重复性, 计算得图谱的相似度大于 0.97, RSD<1.5% 黄芪药材水部位指纹图谱的建立色谱条件 : 色谱柱为 Spursil TM C18 柱 (250.0 mm 表 10 乙醇部位 HPLC 指纹图谱共有峰的保留时间和相似度 Table 10 Peaks of retention time of the ethanol extract in HPLC spectrum min

7 第 4 期刘小花, 等 : 黄芪药材不同极性部位的指纹图谱 mm 5 µm); 流动相为乙腈和水, 梯度洗脱 ( 表 11); 进样量为 20 µl, 柱温为 25 C, 检测波长为 240 nm. 表 11 水部位的梯度洗脱条件 Table 11 Condition of gradient elution of the water extract 天每天进样 1 次, 测定指纹图谱相似度的日间精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.95, RSD<1.7%. 取 1 号黄芪药材水部位浸膏 5 份, 按供试品溶液制备方法制备样品溶液, 测定指纹图谱相似度的重复性, 计算得图谱的相似度大于 0.98, RSD<1.6%. T/min 流速 /(ml/min) A 道乙腈 /% B 道水 /% 取所得水部位供试品溶液 20µL, 进入高效液相色谱仪进行分析. 所得 10 批药材水部位指纹图谱如图 11, 模式指纹图谱如图 12. 对各个峰紫外光谱图进行对比分析, 10 批药材水部位指纹图谱共找到 7 个共有峰, 其中 2 号峰与对照品腺苷的保留时间和紫外光谱图一致, 确定其为腺苷 ( 表 12). 采用夹角余弦法的原理, 以共有峰的峰面积计算相似度, 10 个样品的相似度均大于 90%. 甘南野生 甘肃陇西 甘肃岷县 1 甘肃岷县 2 甘肃首阳 甘肃临洮 甘肃西和 内蒙 陕西 甘肃陇南的水部位指纹图谱共有峰的相似度分别为 99.40%, 99.86%, 98.76%, 99.98%, 99.98%, 99.64%, 99.82%, 94.43%, 97.14%, 92.35%. 号黄芪药材水部位供试液, 进样 5 次, 每次进样量为 20 µl, 测定指纹图谱相似度的日内精密度, 计算得图谱的相似度大于 0.96, RSD<0.9%. 连续 5 2 腺苷图 11 黄芪药材水部位 HPLC 指纹图谱 (260 nm) Figure 11 HPLC chromatogram of the water extract of Radix Astragali (260 nm) 4 毛蕊异黄酮 ; 7 芒柄花素图 12 黄芪药材水部位 HPLC 模式指纹图谱 (260 nm) Figure 12 HPLC model chromatogram of the water extract of Radix Astragali (260 nm) 表 12 水部位 HPLC 指纹图谱共有峰的保留时间 Table 12 Common peaks of retention time of the water extract in HPLC spectrum min 讨论对黄芪不同极性部位样品进行了 HPLC 分析, 对提取方法 流动相及洗脱梯度 检测波长等色谱条件进行了优化, 构建了黄芪药材 5 种极性部位 HPLC 指纹图谱, 运用各部位共有峰峰面积计算了 10 批黄芪药材各部位的相似度, 结果相似度均大于 90%. 以往指纹图谱评价中药质量, 都是仅 考察单一极性部位指纹图谱, 这样就掩盖了不同极性成分之间的差别. 本文通过建立不同极性部位的指纹图谱, 对各个部位逐一考察相似度, 从而更加全面地评价中药质量. 构建黄芪不同极性部位的指纹图谱在国内外尚未见文献报道, 本研究不仅具有理论意义, 而且具有实用价值. 10 批黄芪药材总提取部位 HPLC-DAD 指纹

8 580 兰州大学学报 ( 自然科学版 ) 第 49 卷 图谱确定 14 个共有峰, 标定了其中 2 个指纹峰的结构 ( 毛蕊异黄酮和芒柄花素 ). 总提取部位 HPLC- ELSD 指纹图谱确定 9 个共有峰, 标定了其中 4 个指纹峰的结构 ( 毛蕊异黄酮苷 黄芪甲苷即黄芪皂苷 Ⅳ 黄芪皂苷 Ⅲ 黄芪皂苷 Ⅱ). 10 批黄芪药材石油醚部位指纹图谱共确定 14 个共有峰, 标定了其中 1 个指纹峰的结构 ( 芒柄花素 ). 10 批黄芪药材乙酸乙酯部位指纹图谱共确定 8 个共有峰, 标定了其中 2 个指纹峰的结构 ( 毛蕊异黄酮和芒柄花素 ). 10 批黄芪药材乙醇部位指纹图谱共确定 8 个共有峰. 10 批黄芪药材水部位指纹图谱共确定 7 个共有峰, 标定了其中 1 个指纹峰的结构 ( 腺苷 ). HPLC-DAD 只能检测到有紫外吸收的物质, HPLC-ELSD 可以检测到无紫外吸收或有紫外末端吸收的物质, 故总提取部位共确定 23 个共有峰, 标定了其中 6 个指纹峰的结构, 而其他 4 个部位指纹峰只在 HPLC- DAD 检测到, 在 HPLC-ELSD 检测不到, 这与各成分含量及检测器灵敏度有关. 参考文献 [1] 国家药典委员会. 中国药典 2010 年版 : 一部 [S]. 北京 : 中国医药科技出版社, 2010: [2] 贾晓斌, 陈彦, 蔡宝昌, 等. 黄芪皂苷类成分的 HPLC 指纹图谱研究 [J]. 中医药学刊, 2004, 22(12): [3] 黄际薇, 李瑞珍, 刘杰, 等. 黄芪药材 HPLC 指纹图谱研究 [J]. 中成药, 2005, 27(11): [4] 白焱晶, 王智颖, 杜新刚, 等. 黄芪药材的 HPLC-UV 指纹图谱研究 [J]. 中草药, 2008, 39(7): [5] 石玉娟, 解军, 李桂兰. 山西省不同产地中黄芪药材的 HPLC 指纹图谱研究 [J]. 光明医药, 2010, 25(5): [6] 徐青, 王加宁, 肖红斌, 等. 黄芪药材的指纹图谱研究方法的建立 [J]. 分析测试学报, 2002, 21(2): [7] 管佳, 毕志明, 李萍. 黄芪皂苷注射液指纹图谱研究 [J]. 中国中药杂志, 2006, 31(10): [8] 王敏, 李翔, 王逢春. 黄芪及相关药材 HPLC-ELSD 色谱指纹图谱研究 [J]. 华北国防医药, 2010, 22(2): [9] 胡芳弟, 封士兰, 赵健雄, 等. 黄芪的高效液相色谱指纹图谱及主成分含量测定 [J]. 中药材, 2004, 27(11): [10] 赵庆芳, 周紫鹃, 陈建, 等. 四种植物不同溶剂浸提液对黄芪根腐病致病菌的抑制 [J]. 兰州大学学报 : 自然科学版, 2010, 46(1): [11] 赵庆芳, 陈建, 李巧峡, 等. 不同物质对黄芪根腐病致病菌的抑制作用 [J]. 兰州大学学报 : 自然科学版, 2011, 47(2): ( 责任编辑 : 王春燕 )

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Microsoft Word doc 黄芪药材利尿作用的谱效关系研究 刘小花 1,2, 蔺兴遥 1, 梁瑾 2, 陈亚丽 2, 任远 1*, 封士兰 学药学院, 兰州 730000) 2 (1. 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室, 兰州 730000;2. 兰州大 摘要 : 目的阐述黄芪的高效液相色谱 (HPLC) 图谱与利尿药效的相关性, 表征黄芪药材的药效物质基础 方法对不同产地的 10 批黄芪药材乙酸乙酯部位进行 HPLC 指纹图谱研究

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