利用分子标记辅助选择培育和评价三种Bt基因（cry1Ac、cry1C和cry2A）抗虫水稻

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分子植物育种 ( 网络版 ), 2011 年, 第 9 卷, 第 1065-1070 页 Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2011, Vol.9, 1065-1070 http://mpb. chinese.sophiapublisher.

1 分子植物育种 ( 网络版 ), 2011 年, 第 9 卷, 第页 Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2011, Vol.9, chinese.sophiapublisher.com 研究报告 A Letter 雌雄异花甜瓜经 AgNO 3 诱导后的雄蕊发育和差异基因表达李晓明, 刘志勇, 冀瑞琴, 魏鹏, 冯辉沈阳农业大学园艺学院, 沈阳, 通讯作者 : fenghuiaaa@263.net; 分子植物育种, 2011 年, 第 9 卷, 第 10 篇收稿日期 :2010 年 09 月 17 日接受日期 :2010 年 12 月 28 日发表日期 :2011 年 01 月 30 日作者 doi: /mpb.cn 这是一篇采用 Creative Commons Attribution License 进行授权的开放取阅论文只要对本原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播引用格式 : 李晓明等, 2011, 雌雄异花甜瓜经 AgNO 3 诱导后的雄蕊发育和差异基因表达, 分子植物育种 Vol.9 No.10 (doi: /mpb.cn ) 摘要本研究利用 cdna-aflp 技术对 AgNO 3 诱导后的甜瓜雌雄异花系 RH107 mrna 进行指纹图谱分析,320 对引物组合共分离到差异表达的 TDF (transcription derived fragment, 转录衍生片段 ) 131 个对其中的 28 个 TDF 进行了克隆测序和序列分析研究结果表明, 在获得的 16 个有效序列中,6 个与 GenBank 中功能已知基因同源性在 72% 和 100% 之间, 其功能涉及信号传导转录调控和能量代谢等 ;5 个与功能未知蛋白的核苷酸序列或氨基酸序列有同源性 ;2 个与已知表达序列标签 (EST) 有同源性, 但功能未知 ;3 个未找到同源序列由此推断,Ag + 诱导表达差异片段可能分别参与了信号转导基因表达调控和能量代谢等过程, 从而参与调节花器官性别分化关键词甜瓜 (Cucumis melo L.); 性别分化 ; cdna-aflp 分析 ; TDF ( 转录衍生片段 ) Identification of Genes Differentially-Expressed in Sex Differentiation Induced by AgNO 3 in Monoecious Melon (Cucumis. melo L.) Li Xiaoming, Liu Zhiyong, Ji Ruiqin, Wei Peng, Feng Hui Department of Horticulture, Shenyang Agricultural University, Shenyang, , P.R. China Corresponding author, fenghuiaaa@263.net; Authors Abstract In the present study, the cdna-aflp technique was used to make mrna finger printing, after the female flowers were transformed to the bisexual flowers of the andromonoecious material under the AgNO 3 treatment. In the analysis, differentially-expressed 131 TDFs (transcription derived fragment) were segregated with 320 primer pairs. In the 131 TDFs, 28 differentially-expressed TDFs were cloned, sequenced and analyzed. The results showed that there were six sequences identified to be homologous to the previously-reported genes in the GenBank at 72% to 100% in the 16 obtained TDFs sequences. The functions of these genes cover such fields as signal transduction, gene regulation and energy metabolism, etc. Five TDFs were homologous to the nucleotide sequence and the amino acid sequence of the function-unknown proteins. Two were homologous to function-unknown ESTs. Three were unhomologous to any sequence. It was infered that the differentially-expressed fragments which were induced with Ag + might take part in such processes as signal transduction, gene expression regulation, and energy metabolism, which regulated the sex differentiation. Keywords Melon (Cucumis melo L.); Sex Differentiation; cdna-aflp Analysis; TDF (transcription derived fragment) 研究背景瓜类作物的性型表现多样, 遗传机制复杂, 易受环境条件影响, 一直是科研和生产上关注的热点 Owens 等 (Owens et al., 1980) 创制甜瓜新种质全雌系 WI998 时, 采用硝酸银处理幼苗诱雄, 用以解决自交留种问题此后,Ag + 成功诱导黄瓜苦瓜西葫芦等作物雌性系雄化 (Ando et al., 2001;, 2004; 戚艺军等, 2004), 逐渐成为一项亲本繁殖和种子生产的成熟技术甜瓜 ACC 合成酶基因 CmACS-7 的克隆, 揭示了该基因一处活跃位点上的 C-T 突变改变了氨基酸序列, 从而决定了雄蕊的发育与否 (Boualem et al., 2008) Ag + 处理能够诱导雄蕊发育, 达到雌性系自交留种的目的, 但是雌性系的后代依然保持了雌性系特征, 说明 Ag + 处理没有引起 CmACS-7 基因的突变, 却改变了雄蕊发育的最终结果因此推测,Ag + 必然是作用在了多基因协 1065

net; 分子植物育种, 2011 年, 第 9 卷, 第 10 篇收稿日期 :2010 年 09

2 同控制雄蕊发育的网络系统中的某一个或几个关键点上, 但是到底发生在性别决定基因的上游还是下游, 以及如何对雄蕊发育过程进行影响的, 目前这些机制尚不清楚近年差异表达基因研究方法不断丰富和完善, Northern 杂交实时定量 RT-PCR 表达序列标签 (Expressed sequence tags, ESTs) mrna 差异显示技术抑制差减杂交 (Suppression subtractive hybridization, SSH) 基因芯片 (Gene chip) 等等, 使得人们能够从转录水平对差异表达基因进行分离和功能鉴定 cdna-aflp 是以 AFLP 为基础的基于目的片段长度的 RNA 指纹分析技术, 合适的酶切组合几乎可以检测所有表达的基因, 具有重复性好假阳性率低等特点 (Bachem et al., 1996), 已被广泛用于差异表达基因的分离和鉴定基因表达特性等方面的研究, 在分离芥菜 (Fusco et al, 2005) 大麦 (Leymarie et al, 2007) 番茄 (Frank et al., 2009) 等作物发育和逆境响应相关基因方面发挥了巨大作用本部分试验以 AgNO 3 处理雌雄异花甜瓜生长点, 诱导甜瓜雌花雄蕊发育, 利用 cdna-aflp 基因差异表达技术分离与性别分化相关的特异表达转录衍生片段, 为进一步克隆相关基因揭示甜瓜性别分化分子机理奠定基础 1 结果与分析 1.1 AgNO 3 处理对甜瓜性型的影响雌雄异花试材 RH107 经 200 mg/l AgNO 3 处理后, 对性别表达产生影响, 表现为促雄作用, 即在基部的 1-4 朵雌花中生长了 3-5 枚雄蕊, 性别由雌花转变成两性花 ( 图 1) AgNO 3 处理对雄花数目和节位无显著影响 1.2 cdna-aflp 分析 320 个引物组合进行选择性扩增, 在处理池和对照池间所扩增出多态性片段为 131 个, 占 TDF 总数的 2.2%, 每对引物平均扩增出差异 TDF 为 0.40 个在差异 TDF 中增强表达 21 个, 占总数的 16.0%; 特异表达 37 个 ( 图 2), 占总数的 28.2% 另外 73 个 TDF 在 AgNO 3 诱导下表达被抑制, 占总数的 55.7% ( 图 3) 1.3 差异表达片段克隆测序及序列分析选取典型的特异表达和抑制表达 TDF 28 条进行回收和二次 PCR 扩增多数引物组合产物分子量图 1 雌花经 AgNO 3 诱雄后雄蕊发育注 : 1 对照 ; 2 处理 Figure 1 Morphology of the developed stamens in a female flower reduced with AgNO 3 Note: 1 Control; 2 Treatment 与预期结果相同, 而且为单一条带少数引物组合出现非特异性弱带, 此时切取主带回收, 通过 T-A 连接到 pgm-t 载体, 重组质粒转化大肠杆菌 TOP10 后, 经菌体 PCR 扩增后挑选阳性测序, 共得到 16 个有效序列利用 NCBI 的 BLAST 工具与 dbest 数据库, 进行特异表达基因同源性比较以及功能预测, 结果显示,6 个与已知生物学功能的片段具有较高同源性, 其中分别涉及代谢 (TDF2-12-3, TDF3-11-6, TDF3-4-2) 信号传导以及细胞膜运动 (TDF2-9-4, TDF3-9-1) 转录调控 (TDF4-13-6),7 个 TDF 具有较高同源性但缺少生物学功能,3 个在 NCBI 中未找到同源序列 ( 表 1) 1.4 RT-PCR 分析为进一步验证 cdna-aflp 结果的可靠性, 对部分差异表达的 TDF 进行了半定量 RT-PCR 验证结果表明,TDF 和 TDF 在 Ag + 作用下被诱导表达,RT-PCR 和 cdna-aflp 结果吻合 ( 图 4), 该方法所得结果可靠 2 讨论 Beyer 等 (1976) 认为 Ag + 是乙烯作用的竞争性抑制剂, 能抑制乙烯的部分氧化代谢途径, 进而抑制乙烯原初反应, 最终抑制黄瓜雌花产生汪俏梅戚艺军等 (1997; 2004) 认为 Ag + 作为乙烯生物活性抑制剂而抑制乙烯活性, 可能是通过竞争结合细胞上乙烯受体蛋白, 起到削弱或降低乙烯作用的效果, 从而诱导苦瓜性型雄化对于拟南芥乙烯受体研究 1066

功能鉴定 cdna-aflp 是以 AFLP 为基础的基于目的片段长度的 RNA 指纹分析技术, 合适的酶切组合几乎可以检测所有表达的基因, 具有重复性好假阳性率低等特点 (Bachem et al.

3 图 2 部分上调表达的片段注 : 箭头所指为抑制表达的 TDF, 前 2 个泳道为对照, 后 2 个为处理 Figure 2 Up-regulated fragments by cdna-aflp analysis Note: The Arrows indicated the up-regulated TDFs, the former 2 lanes are CKs, and the later 2 are treatments 图 3 部分下调表达的片段注 : 箭头所指为抑制表达的 TDF, 前 2 个泳道为对照, 后 2 个为处理 Figure 3 Down-regulated fragments by cdna-aflp analysis Note: The Arrows indicated the down-regulated TDFs, the former 2 lanes are CKs, and the later 2 are treatments 图 4 TDF 和 TDF 的 RT-PCR 验证注 : 左 : RT-PCR; 右 : cdna-aflp Figure 4 Identification of TDF and TDF Note: Left: result by RT-PCR; Right: result by cdna-aflp 表明, 位于内质网膜上的乙烯受体 ETR1 蛋白与乙烯结合必须依赖金属离子亚铜 (Cu + ) 作为辅因子才能结合乙烯 (Rodriguez et al, 1999), 引起一系列乙烯信号感知反应 Ag + 作为乙烯受体竞争性抑制剂, 能够替代亚铜与乙烯结合, 但是不能引起乙烯反应, 从而阻断乙烯的信号转导 (Schaller et al, 1995a, 1995b) Theresa (2002) 用 AgNO 3 和 Ag 2 S 2 O 3 分别处理雌雄异体植物白花蝇子草 (Silene latifolia Poiret subsp. alba) 的雌株, 发现这种植物虽然对外源 IAA CTK GA ETH 都不敏感, 却能分别被两种 Ag + 制剂诱导后促进雄蕊的发育, 在雌花上长出较长的花丝和较大的 1067

indicated the down-regulated TDFs, the former 2 lanes are CKs, and the later 2 are treatments 图 4 TDF 2-12-3 和 TDF 3-9-1 的 RT-PCR 验证注 : 左 : RT-PCR; 右 : cdna-aflp Figure 4 Identification of TDF

4 表 1 差异表达 TDF 的功能预测 Table 1 The predictive function of the differential expression TDFs TDF No. 比对 Blast 登录号 Accession E 值 E-value 一致性 (%) Similarity (%) 同源基因 Homologous sequence BlastX XP_ e Populus trichocarpa Integral membrane single C2 domain protein tblastx AY e Brassica rapa enolase mrna, complete cds Blastn EU e Synthlipsis greggii NADH dehydrogenase subunit F (ndhf) gene, partial cds Blastn EF e Cucumis sativus putative chloroplast ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit (rbcs) mrna, partial cds Blastx XP_ e Ricinus communis synaptotagmin, putative Blastn EU e Zea mays clone NAC domain-containing protein 67 mrna EST AM e Cucumis melo subsp. agrestis pat81 root 46 days after pollination healthy Cucumis melo subsp. agrestis cdna, mrna sequence. Function unknown tblastx XM_ e Populus trichocarpa predicted protein, mrna. Function unknown tblastx NM_ Oryza sativa (japonica cultivar-group) Os07g Function unknown tblastx AM e Vitis vinifera ( 葡萄 ) whole genome shotgun sequence, contig VV78X , clone ENTAV 115. Function unknown Blastx XP_ e Vitis vinifera Hypothetical protein. Function unknown EST BI e Cucumber ( 黄瓜 ) SSH cdna fragments Cucumis sativus cdna clone CsSE1a4, mrna sequence EST FG e Cucurbita maxima ( 笋瓜, winter squash) phloem cdna, mrna sequence No match No match No match 花药室, 并完成减数分裂产生小孢子, 只是花粉不能发育成熟 Theresa 又用乙烯受体抑制剂 1-MCP 乙烯生物合成抑制剂反式 - 环辛烯 AVG CoCl 2 不同浓度做进一步的试验证明, 这些制剂都能在白花蝇子草上发挥各自的抑制乙烯作用, 但却无一能像 Ag + 那样产生诱导雄蕊的作用因此得出结论 :Ag + 对于白花蝇子草的诱雄作用不能被解释为乙烯合成和信号传递受到抑制, 暗示了这种效应可能存在另外的机制本试验中采用 Ag + 作为甜瓜雌雄异花系的诱雄剂, 客观上起到了诱雄作用, 然而未能发现 Ag + 与乙烯相关基因表达或乙烯释放量之间的规律 ( 数据未列出 ), 但却发现一些与几类酶具有高度同源性的 TDF 被诱导而检测到差异表达, 与 Theresa 的研究结果存在某种类似长期以来 Ag + 被看做许多带有巯基的酶的活性抑制剂 (Snodgrass, 1960), 能够抑制质膜和线粒体膜上 ATPases 的活性 (Knee, 1992) Ag + 和巯基的密切关系对于酶活非常重要, 这也说明植物的许多生理过程能够为 Ag + 所修饰改变, 其中的某些过程可能涉及到雄蕊的发育 (Theresa, 2002) 王日升等 (2009) 采用 cdna-aflp 对 AgNO 3 诱导下纯雌系苦瓜花蕾发育的差异表达基因进行了分析, 获得一个与植物性别分化有关的细胞色素 P450 家族基因有高度同源性的片段 McCYP72A1 本文分离鉴定的差异表达 cdna 片段与几类代谢酶基因的核苷酸序列或氨基酸序列存在一定程度同源性, 推测 Ag + 处理后植物体很可能从非乙烯的其他途径对 Ag + 的诱导应答, 进而引发了一系列信号传递网络式反应, 无意间激活了某些雄蕊发育促进因子或者关闭了某些雄蕊发育抑制因子但是, 本文所获得的只是少部分差异片段而不是完整的 cdna, 有待于通过 RACE 等方法获得全长 cdna, 对其表达特性和功能进行分析和鉴定, 才有可能最终明确这些片段与雄蕊发育之间的确切关系 1068

tblastx AY307448 6e -31 98 Brassica rapa enolase mrna, complete cds 3-4-2 Blastn EU907365 7e -46 100 Synthlipsis greggii NADH dehydrogenase subunit F (ndhf) gene, partial cds 3-11-6 Blastn EF208124

5 3 试材与方法 3.1 试材及处理方法雌雄异花品系 RH107, 日光温室育苗 2~3 叶 1 心时, 用 200 μg/l AgNO 3 水溶液喷施全株喷施后和 72 h 分别取生长点, 液氮速冻后保存于 -80 备用以喷施蒸馏水为对照各时间点设 2 次重复植株开花后调查性型 3.2 RNA 提取及 cdna 合成 RNA simple Total RNA Kit (TIANGEN 公司, 离心柱型 ) 进行总 RNA 提取,RQ DNase I (Promega 公司 ) 消化残留的基因组 DNA 根据测得的 RNA 样品浓度, 将 RNA 分别等量混合, 构建 2 个对照池和 2 个处理池 M-MLV RTase cdna Synthesis Kit (TaKaRa 公司 ) 用于双链 cdna 的制备, 步骤参照说明书 3.3 cdna-aflp 分析使用 EcoR I 和 Mse I 两种限制性内切酶进行 cdna 双酶切后连接接头, 引物 E00 和 M00 用于预扩增, 接头为 EcoRⅠ 和 MseⅠAdaptor 选择性扩增引物 Mse I 30 个和 EcoR I20 个 ( 各带 3 个选择性碱基 ), 共计 320 个引物组合, 用于选择性扩增, 具体参照刘志勇等 (2008) 的方法 3.4 差异片段功能分析挖带回收, 加入 PCR 体系中, 利用相应的引物组合扩增差异条带, 进行二次 PCR 扩增切取目标条带,AxyPrepTM DNA Gel Extraction Kit (Axygen 公司 ) 回收特异片段, 连接转化, 上海生工测序对获得的序列结果, 应用在线 BLAST 程序, 在 GenBank 核酸序列数据库或 EST 数据库中搜寻同源序列, 进行可能的功能分析 3.5 RT-PCR 分析以内参基因 CMACTIN 作为对照, 选取 TDF 和 TDF 作为 RT-PCR 验证的片段, 设计合成特异性引物 ( 表 2), 由 Invitrogen 生物工程公司合成利用 Superscript (Invitrogen) 逆转录酶, 以 Oligo dt (18) 为逆转录引发引物, 逆转录合成 cdna 第一链表 2 用于 RT-PCR 的引物及序列 Table 2 Primers and their sequences used in semi-quantity RT-PCR 引物代号 Primer No. 序列 (5'-3') Sequences (5'-3') CMACTIN- F ATTCTTGCATCTCTAAGTACCTTCC 53 CMACTIN- R CCAACTAAAGGGAAATAACTCACC TDF L GAGTCCTGAGTAATGGAGG 50 TDF R GTGTTGCGGGACTGGTTG TDF L CTGCGTACCAATTCGAATC 50 TDF R GGGACTTACTCAGGACTCA 退火温度 ( ) Anneal temperature ( ) 作者贡献李晓明是实验设计和实验研究的执行人, 并主要负责论文写作 ; 刘志勇是实验设计人, 同时指导数据分析 ; 冀瑞琴指导数据分析并提供实验引物 ; 魏鹏参与论文写作 ; 冯辉是项目的构思者及负责人, 指导实验设计, 数据分析, 论文写作与修改全体作者都阅读并同意最终的文本致谢本研究由国家科技支撑计划 (2006BAD01A07) 辽宁省教育厅博士访学计划 ( 辽教发号 ) 资助作者感谢两位匿名的同行评审人的评审建议和修改建议本文中提到了我们实验中涉及的有关试剂供应商和测序服务商, 这并非我们为这些试剂供应商和测序服务商的产品和服务提供推荐或背书参考文献 Ando S., Sato Y., Kamachi S., and Sakai S., 2001, Isolation of a MADS-box gene (ERAF17) and correlation of its expression with the induction of formation of female flowers by ethylene in cucumber plants (Cucumis sativus L.), Planta, 213(6): Bachem C.W.B., Hoeven R.S., and Bruijn S.M., 1996, Visualization of differential gene expression using a novel method of RNA finger Printing based on AFLP: analysis of gene expression during potato tuber development, Plantjournal, 9: Beyer E., 1976, Silverion: a potent antiethylene agent in cucumber and tomato, HortScience, 11: Boualem A., Fergany M., Fernandez R., Troadec C., Martin A., 1069

6 Morin H., Marie-Agnes S., Fabrice C., Jonathan M.F., Michel P., Michael D., Purugganan, Catherine D., and Abdelhafid B., 2008, A Conserved mutation in an ethylene biosynthesis enzyme leads to andromonoecy in melons. Science, 321: Frank G., Pressman E., Ophir R., Althan L., Shaked R., Freedman M., Shen S., and Firon N., 2009, Transcriptional profiling of maturing tomato (Solanum lycopersicum L.) microspores reveals the involvement of heat shock proteins, ROS scavengers, hormones, and sugars in the heat stress response J. Exp. Bot., 60(13): Fusco N., Micheletto L., Dal Corso G., Borgato L., and Furini A., 2005, Identification of cadmium-regulated genes by cdna-aflp in the heavy metal accumulator Brassica juncea L., J. Exp. Bot., 56(421): Knee M., 1992, Sensitivity of ATPases to silver ions suggests that silver acts outside the plasma membrane to block ethylene action, Phytochemistry, 31: Leymarie J., Bruneaux E., Gibot-Leclerc S., Corbineau F., 2007, Identification of transcripts potentially involved in barley seed germination and dormancy using cdna-aflp, J. Exp. Bot., 58(3): Liu Z.Y., Du Y.C., Wang X.X, Guo Y.M., and Gao J.C., 2008, Identification of differentially expressed genes by cdna-aflp approach during heat stress in tomato leaves, Yuanyi Xuebao (Acta Horticulturae Sinica), 35(7): ( 刘志勇, 杜永臣, 王孝宣, 国艳梅, 高建昌, 2008, 高温胁迫下番茄叶片差异表达基因的 cdna-aflp 分析, 园艺学报, 35(7): ) Owens K.W., Peterson C.E., Tolla G.E., 1980, Induction of perfect flowers on gynoecious muskmelon by silver nitrate and amino-ethoxyvinylglycine, HortScience, 15(5): Qi Y.J, Cheng G.W., Wang C.S., and Wu L.J., 2004, The characteristics and chemical improvement of floral development of Cucurbita pepo L., Anhui Nongye Daxue Xuebao (Journal of Anhui Agricultural University), 31(4): ( 戚艺军, 程国旺, 王春生, 吴李君, 2004, 西葫芦花发育特性及其化学改良措施, 安徽农业大学学报, 31(4): ) Rodriguez F.I., Esch J.J., Hall A.E., Binder B.M., Schaller G.E., and Bleecker A.B., 1999, A copper cofactor for the ethylene receptor ETR1 from Arabidopsis, Science, 283: Schaller G.E., and Anthony B., 1995a, Ethylene-binding sites generated in yeast expressing the arabidopsis ETR1 gene, Bleecker Science, 270: 1809 Schaller G.E., Andrea N.L., Michael B.L., Spanbauer J.M., and Anthony B.B., 1995b, The ethylene response mediator ETR1 from arabidopsis forms a disulfide-linked dimer, J. Biol. Chem., 270: Snodgrass P.J., B.L. Vallee F.L., and Hockc, 1960, Effects of silver and mercurials on yeast alcohol dehydrogenase, Journal of Biological Chemistry, 235: Theresa F.L., Sabine L., and Sarah R.G.., 2002, Silver enhances stamen development in female white campion (Silene latifolia), American Journal of Botany, 89 (6): Wang Q.M., and Zeng G.W., 1997, The effect of phytohormones and polyamines on sexual differentiation of momordica charantia, Yuanyi Xuebao (Acta Horticulturae Sinica), 24(1): ( 汪俏梅, 曾广文, 1997, 激素和多胺对苦瓜性别分化的影响, 园艺学报, 24(1): 48-52) Wang R.S., Li Y.R., Zhou S.M., Zhang M., Fang F.X., and Yang L.T., 2009, Stamen development and gene expression of flower of male-induced bitter melon gynoecious line, Xibao Shengwuxue Zazhi (Chinese Journal of Cell Biology), 31(4): ( 王日升, 李杨瑞, 周生茂, 张曼, 方锋学, 杨丽涛, 2009, 纯雌系苦瓜花经 AgNO 3 诱雄后的雄蕊发育和基因表达, 细胞生物学杂志, 31(4): ) Yang Y., Tang Y.Q., and Sakamoto M., 2004, Effect of chemical application and temperature on sex expression in bitter gourd (Monordica charantia L.), Redai Zuowu Xuebao (Chinese Journal of Tropical Crops), 25(3): ( 杨唐燕琼, Sakaoto M., 2004, AgNO 3, GA3 和温度对苦瓜纯雌雄株系性别分化的影响, 热带作物学报, 25(3): 80-84) 1070

, and Firon N., 2009, Transcriptional profiling of maturing tomato (Solanum lycopersicum L.

说明为了反映教运行的基本状态, 为校和院制定相关政策和进行教建设与改革提供据依据, 校从程资源 ( 开类别开量规模 ) 教师结构程考核等维度, 对 2015 年春季期教运行基

说明为了反映教运行的基本状态, 为校和院制定相关政策和进行教建设与改革提供据依据, 校从程资源 ( 开类别开量规模 ) 教师结构程考核等维度, 对 2015 年春季期教运行基内部资料东北师范大教运行基本状态据报告 2015 年春季期教务处 2015 年 10 月 27 日说明为了反映教运行的基本状态, 为校和院制定相关政策和进行教建设与改革提供据依据, 校从程资源 ( 开类别开量规模 ) 教师结构程考核等维度,