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- 试缩 鄂
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6 中 国 医 药 工 业 杂 志 第 十 三 届 编 辑 委 员 会 EDITORIAL BOARD OF CHINESE JOURNAL OF PHARMACEUTICALS ( 以 姓 名 拼 音 为 序 ) 名 誉 主 编 (HONORARY EDITOR-IN-CHIEF) 桑 国 卫 (SANG Guowei) 顾 问 (CONSULTANT) 边 振 甲 (BIAN Zhenjia) 侯 惠 民 (HOU Huimin) 金 少 鸿 (JIN Shaohong) 李 惠 庭 (LI Huiting) 刘 怡 (LIU Yi) 沈 蓓 苓 (SHEN Beiling) 沈 士 林 (SHEN Shilin) 王 明 学 (WANG Mingxue) 王 其 灼 (WANG Qizhuo) 闻 韧 (WEN Ren) 于 明 德 (YU Mingde) 张 椿 年 (ZHANG Chunnian) 朱 春 宝 (ZHU Chunbao) 主 任 编 委 (EDITOR-IN-CHIEF) 朱 宝 泉 (ZHU Baoquan) 副 主 任 编 委 (ASSOCIATE EDITOR-IN-CHIEF) 白 骅 (BAI Hua) 陈 兵 (CHEN Bing) 陈 凯 先 (CHEN Kaixian) 丁 健 (DING Jian) 蒋 建 东 (JIANG Jiandong) 李 明 华 (LI Minghua) 刘 燕 刚 (LIU Yangang) 汤 立 达 (TANG Lida) 王 广 基 (WANG Guangji) 王 浩 (WANG Hao) 杨 胜 利 (YANG Shengli) 周 斌 (ZHOU Bin) 周 伟 澄 (ZHOU Weicheng) 周 燕 (ZHOU Yan) 编 委 (MEMBER OF THE EDITORIAL BOARD) 蔡 正 艳 (CAI Zhengyan) 岑 均 达 (CEN Junda) 柴 逸 峰 (CHAI Yifeng) 陈 代 杰 (CHEN Daijie) 陈 芬 儿 (CHEN Fener) 陈 钢 (CHEN Gang) 陈 桂 良 (CHEN Guiliang) 陈 庆 华 (CHEN Qinghua) 陈 少 欣 (CHEN Shaoxin) 程 卯 生 (CHENG Maosheng) 储 炬 (CHU Ju) 丁 锦 希 (DING Jinxi) 董 江 萍 (DONG Jiangping) 董 树 沛 (DONG Shupei) 杜 冠 华 (DU Guanhua) 方 浩 (FANG Hao) 冯 军 (FENG Jun) 傅 磊 (FU Lei) 傅 民 (FU Min) 甘 勇 (GAN Yong) 干 荣 富 (GAN Rongfu) 葛 庆 华 (GE Qinghua) 郭 文 (GUO Wen) 贺 浪 冲 (HE Langchong) 胡 海 峰 (HU Haifeng) 胡 又 佳 (HU Youjia) 黄 民 (HUANG Min) 黄 志 红 (HUANG Zhihong) 金 方 (JIN Fang) 金 拓 (JIN Tuo) 金 一 (JIN Yi) 孔 德 云 (KONG Deyun) 李 范 珠 (LI Fanzhu) 李 建 其 (LI Jianqi) 李 绍 顺 (LI Shaoshun) 李 新 发 (LI Xinfa) 李 志 敏 (LI Zhimin) 林 梅 (LIN Mei) 刘 浩 (LIU Hao) 刘 俊 义 (LIU Junyi) 刘 莉 (LIU Li) 刘 玲 玲 (LIU Lingling) 刘 新 泳 (LIU Xinyong) 陆 伟 根 (LU Weigen) 陆 伟 跃 (LU Weiyue) 吕 扬 (LÜ Yang) 马 璟 (MA Jing) 毛 振 民 (MAO Zhenmin) 梅 其 炳 (MEI Qibing) 闵 旸 (MIN Yang) 潘 卫 三 (PAN Weisan) 朴 虎 日 (PIAO Huri) 邵 蓉 (SHAO Rong) 沈 竞 康 (SHEN Jingkang) 孙 飘 扬 (SUN Piaoyang) 孙 小 强 (SUN Xiaoqiang) 孙 逊 (SUN Xun) 陶 建 生 (TAO Jiansheng) 陶 涛 (TAO Tao) 屠 鹏 飞 (TU Pengfei) 屠 永 锐 (TU Yongrui) 王 凤 山 (WANG Fengshan) 王 国 平 (WANG Guoping) 王 健 (WANG Jian) 王 建 新 (WANG Jianxin) 王 军 志 (WANG Junzhi) 王 旻 (WANG Min) 王 锐 (WANG Rui) 王 善 春 (WANG Shanchun) 王 彦 (WANG Yan) 王 永 祥 (WANG Yongxiang) 王 玉 成 (WANG Yucheng) 王 哲 清 (WANG Zheqing) 王 峥 涛 (WANG Zhengtao) 吴 春 福 (WU Chunfu) 吴 彤 (WU Tong) 吴 伟 (WU Wei) 吴 晓 明 (WU Xiaoming) 肖 旭 华 (XIAO Xuhua) 徐 文 方 (XU Wenfang) 徐 宇 虹 (XU Yuhong) 阎 超 (YAN Chao) 杨 美 成 (YANG Meicheng) 杨 明 (YANG Ming) 杨 苏 蓓 (YANG Subei) 杨 玉 社 (YANG Yushe) 易 八 贤 (YI Baxian) 殷 明 (YIN Ming) 尤 启 冬 (YOU Qidong) 俞 雄 (YU Xiong) 袁 哲 东 (YUAN Zhedong) 张 福 利 (ZHANG Fuli) 张 惠 展 (ZHANG Huizhan) 张 霁 (ZHANG Ji) 张 启 明 (ZHANG Qiming) 张 强 (ZHANG Qiang) 张 庆 文 (ZHANG Qingwen) 张 卫 东 (ZHANG Weidong) 张 志 荣 (ZHANG Zhirong) 赵 军 宁 (ZHAO Junning) 赵 文 杰 (ZHAO Wenjie) 镇 学 初 (ZHEN Xuechu) 郑 台 (ZHENG Tai) 钟 大 放 (ZHONG Dafang) 钟 倩 (ZHONG Qian) 钟 延 强 (ZHONG Yanqiang) 周 建 平 (ZHOU Jianping) 朱 辉 (ZHU Hui) 朱 家 文 (ZHU Jiawen) 朱 建 伟 (ZHU Jianwei) 朱 建 英 (ZHU Jianying) 朱 驹 (ZHU Ju) 朱 启 高 (ZHU Qigao) 祝 林 (ZHU Lin) 庄 武 (ZHUANG Wu) 邹 忠 梅 (ZOU Zhongmei) 中 国 医 药 工 业 杂 志 编 辑 部 成 员 (EDITORIAL STAFF) 总 编 辑 (Managing Editor): 周 伟 澄 (ZHOU Weicheng) 副 总 编 辑 (Associate Managing Editor): 沈 蓓 苓 (SHEN Beiling), 黄 志 红 (HUANG Zhihong), 刘 玲 玲 (LIU Lingling) 责 任 编 辑 (Editor): 刘 玲 玲 (LIU Lingling)( 兼 ), 王 盈 (WANG Ying), 吴 霖 萍 (WU Linping) 美 术 编 辑 (Art Editor): 沈 建 成 (SHEN Jiancheng), 陆 燕 玲 (LU Yanling), 钱 苗 苗 (QIAN Miaomiao) 编 辑 助 理 (Editorial Assistant): 韦 旭 华 (WEI Xuhua) 广 告 发 行 负 责 (Advertisement Manager): 吕 士 俊 (LÜ Shijun), 欧 阳 怡 (OUYANG Yi)
7 中 国 医 药 工 业 杂 志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(4) 424 右 哌 甲 酯 贴 剂 体 外 透 皮 特 性 的 考 察 张 成 豪, 罗 华 菲, 林 国 钡, 武 余 波, 王 浩 * ( 中 国 医 药 工 业 研 究 总 院 药 物 制 剂 国 家 工 程 研 究 中 心, 上 海 ) 摘 要 : 建 立 了 HPLC 法 测 定 体 外 透 皮 接 收 液 中 的 右 哌 甲 酯 浓 度 分 别 考 察 了 右 哌 甲 酯 在 不 同 ph 值 介 质 中 的 稳 定 性 和 饱 和 溶 解 度 结 果 表 明, 以 ph 4.5 磷 酸 盐 缓 冲 液 为 接 收 介 质 时, 右 哌 甲 酯 在 48 h 内 仅 降 解 0.17%, 且 满 足 漏 槽 条 件 进 一 步 考 察 了 不 同 种 属 皮 肤 和 不 同 种 类 促 透 剂 对 贴 剂 中 右 哌 甲 酯 体 外 透 皮 特 性 的 影 响 结 果 表 明, 使 用 大 鼠 和 裸 鼠 皮 肤 为 屏 障 时,9 h 已 有 70% 的 药 物 透 过, 因 此 选 用 最 难 透 过 的 巴 马 香 猪 皮 肤 ;1,3- 丙 二 醇 油 酸 月 桂 氮 酮 聚 乙 二 醇 400 和 N- 甲 基 吡 咯 烷 酮 在 5% 浓 度 下 均 能 略 增 强 右 哌 甲 酯 的 渗 透 性, 但 均 无 显 著 差 异 (P>5), 而 薄 荷 醇 呈 现 出 阻 碍 右 哌 甲 酯 渗 透 的 作 用 关 键 词 : 右 哌 甲 酯 ; 透 皮 贴 剂 ; 体 外 透 皮 ; 促 透 剂 中 图 分 类 号 :R944.9 文 献 标 志 码 :A 文 章 编 号 : (2016) DOI: /j.cnki.cjph Investigation of in vitro Characterization of Demethyphenidate Transdermal Patches ZHANG Chenghao, LUO Huafei, LIN Guobei, WU Yubo, WANG Hao* (National Pharmaceutical Engineering Research Center, China State Institute of Pharmaceutical Industry, Shanghai ) ABSTRACT: An HPLC method was established to determine the concentration of demethyphenidate in the receive liquid. The stability and saturation solubility of demethyphenidate in media with different ph values were investigated. The results showed that the degradation rate of demethyphenidate in ph 4.5 phosphate buffer was only 0.17% within 48 h and this medium could also maintain the sink conditions based on the results of solubility test. The effects of skin species and enhancer types on in vitro permeation behavior of demethyphenidate from the patches were further investigated. The results showed that the cumulative amount of demethyphenidate were both over 70% within 9 h with SD rat skin and nude mice skin as barriers. So, Bama miniature pig skin was chosen as the barrier because of its poor permeation. With 1,3-propanediol, oleic acid, azone, polyethylene glycol 400 or N-methylpyrrolidone as a enhancer at concentration of 5%, the cumulative amount of demethyphenidate were all slightly improved (P>5), while menthol at the same concentration obstruct the permeation of demethyphenidate. Key Words: demethyphenidate; transdermal patch; in vitro transdermal; enhancer 002) 收 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 重 大 新 药 创 制 科 技 重 大 专 项 (2014ZX 作 者 简 介 : 张 成 豪 (1990 ), 男, 硕 士 研 究 生, 专 业 方 向 : 透 皮 给 药 系 统 Tel: @163.com 通 信 联 系 人 : 王 浩 (1968 ), 男, 研 究 员, 从 事 新 型 药 物 制 剂 研 究 Tel: wanghao99@hotmail.com 盐 酸 哌 甲 酯 (methyphenidate hydrochloride) 是 治 疗 儿 童 注 意 力 缺 陷 和 多 动 障 碍 (attention-deficit/ hyperactivity disorder,adhd) 的 临 床 一 线 用 药, 通 过 阻 断 突 触 前 神 经 元 对 去 甲 肾 上 腺 素 和 多 巴 胺 的 再 摄 取, 增 加 ADHD 相 关 脑 区 的 单 胺 类 物 质 含 量 而 发 挥 作 用 [1] 盐 酸 哌 甲 酯 普 通 片 剂 半 衰 期 仅 2 ~ 3 h, 每 日 需 多 次 给 药 [2] 为 提 高 患 者 顺 应 性, 盐 酸 哌 甲 酯 缓 控 释 胶 囊 (OROS MPH, 美 国 Alza 公 司 )
8 425 中 国 医 药 工 业 杂 志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(4) 和 哌 甲 酯 贴 剂 (Daytrana, 美 国 Noven Therapeutics 公 司 ) 相 继 上 市, 每 日 仅 需 给 药 1 次 近 年 来 研 究 表 明, 其 右 旋 体 为 药 理 活 性 物 质, 且 随 手 性 分 离 技 术 的 进 步, 盐 酸 右 哌 甲 酯 缓 控 释 胶 囊 (Focalin XR, 美 国 Novartis Pharmaceuticals 公 司 ) 亦 获 得 FDA 上 市 批 准 Daytrana 采 用 经 皮 给 药 的 途 径, 便 于 吞 咽 困 难 的 口 服 患 者 使 用 ; 发 生 不 良 反 应 时 易 于 移 除 ; 可 防 止 该 中 枢 神 经 系 统 兴 奋 药 的 滥 用 [1,3,4] Focalin XR 可 减 少 给 药 量, 同 时 避 免 左 旋 体 的 潜 在 危 害 [4] 因 此, 开 发 右 哌 甲 酯 (demethyphenidate,1) 贴 剂 可 综 合 以 上 两 产 品 的 优 势, 为 ADHD 治 疗 提 供 更 优 良 的 制 剂 产 品 本 研 究 采 用 HPLC 法 测 定 1 透 皮 贴 剂 的 透 皮 吸 收 量, 方 法 简 便 快 速 准 确 此 外, 筛 选 了 接 收 介 质 体 外 皮 肤 模 型 和 常 用 促 透 剂, 为 后 期 制 剂 的 研 发 提 供 帮 助 1 仪 器 与 试 药 LC-20A 型 高 效 液 相 色 谱 仪 ( 日 本 Shimadzu 公 司, 包 括 LC-20AD 型 溶 剂 输 送 泵 SPD-20A 型 紫 外 - 可 见 检 测 器 SIL-20AC 型 自 动 进 样 器 和 LCsolution 色 谱 工 作 站 等 );TK- 20A 型 透 皮 扩 散 试 验 仪 ( 立 式 Franz 扩 散 池, 上 海 锴 凯 科 技 贸 易 有 限 公 司 ) 1 碱 基 原 料 药 ( 含 量 98.0%, 批 号 XLX ) 和 1 盐 酸 盐 对 照 品 ( 纯 度 99.80%, 光 学 纯 度 100%, 批 号 XLX130508)( 上 海 医 药 工 业 研 究 院 ); 溶 剂 型 丙 烯 酸 酯 压 敏 胶 DURO-TAK ( 德 国 Henkel 投 资 有 限 公 司 ); 薇 婷 脱 毛 膏 ( 英 国 利 洁 时 集 团 );N- 甲 基 吡 咯 烷 酮 (NMP, 国 际 特 品 香 港 有 限 公 司 ); 月 桂 氮 酮 (azone, 天 门 科 捷 制 药 有 限 公 司 );1,3- 丙 二 醇 (PG) 聚 乙 二 醇 (PEG)400 和 分 析 纯 的 磷 酸 二 氢 钾 磷 酸 氢 二 钾 氢 氧 化 钠 磷 酸 三 乙 胺 ( 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司 ); 薄 荷 醇 ( 上 海 新 华 香 医 料 工 贸 有 限 公 司 ); 油 酸 ( OA, 清 明 化 工 厂 ); 甲 醇 为 色 谱 纯, 水 为 纯 净 水, 其 他 试 剂 为 分 析 纯 雌 性 SD 大 鼠 [(220±10)g, 上 海 市 西 普 尔 - 必 凯 实 验 动 物 有 限 公 司, 许 可 证 号 SCXK( 沪 ) ]; 裸 鼠 [(20±2)g, 雌 雄 不 限, 上 海 斯 莱 克 实 验 动 物 有 限 公 司, 合 格 证 号 SCXK( 沪 ) ]; 雌 性 巴 马 小 香 猪 [(7±0.3) kg, 上 海 甲 干 生 物 科 技 有 限 公 司, 许 可 证 号 SCXK( 沪 ) ] 2 方 法 与 结 果 2.1 离 体 皮 肤 的 制 备 在 SD 大 鼠 背 部 确 定 脱 毛 区 域 先 将 受 试 动 物 固 定 好, 剪 短 脱 毛 部 位 毛 发, 然 后 均 匀 涂 抹 脱 毛 膏 3 ~ 5 min 后 用 温 水 将 脱 毛 部 位 的 皮 肤 擦 洗 干 净, 毛 巾 擦 干 脱 毛 后 观 察 12 h 皮 肤 发 红 破 损 脱 毛 不 完 全 的 个 体 剔 除 大 鼠 颈 椎 脱 臼 处 死, 取 下 背 部 皮 肤, 小 心 除 去 皮 下 脂 肪 组 织 和 黏 连 物, 用 生 理 盐 水 冲 洗 干 净, 无 纺 布 吸 干 皮 肤 表 面 水 分, 选 择 皮 肤 完 整 的 部 位 于 -20 保 存 备 用 取 健 康 裸 鼠 颈 椎 脱 臼 处 死, 立 即 剥 离 背 部 皮 肤, 小 心 除 去 皮 下 脂 肪 组 织 和 黏 连 物, 用 生 理 盐 水 冲 洗 干 净, 无 纺 布 吸 干 皮 肤 表 面 水 分, 选 择 皮 肤 完 整 的 部 位 于 -20 保 存 备 用 取 健 康 2 月 龄 巴 马 小 香 猪 处 死, 剔 除 毛 发 后, 分 离 背 部 皮 肤 并 小 心 除 去 皮 下 组 织, 用 生 理 盐 水 冲 洗 干 净, 无 纺 布 吸 干 皮 肤 表 面 水 分, 选 择 皮 肤 完 整 的 部 位 于 -20 保 存 备 用 2.2 贴 剂 的 制 备 精 密 称 取 1 碱 基 原 料 药 0.44 g, 加 入 无 水 乙 醇 适 量, 超 声 5 min 使 药 物 全 部 溶 解, 再 精 密 称 取 丙 烯 酸 压 敏 胶 4.8 g, 搅 拌 10 min, 至 体 系 混 合 均 匀 直 接 均 匀 涂 布 干 燥 后 得 对 照 组 贴 剂 40 贴 ; 加 入 各 种 促 透 剂, 继 续 搅 拌 5 min 后 均 匀 涂 布 干 燥 后 制 得 含 促 渗 剂 组 贴 剂 同 比 例 无 水 乙 醇 与 丙 烯 酸 压 敏 胶 混 合 均 匀 后, 直 接 涂 布 得 空 白 贴 剂 2.3 体 外 分 析 方 法 的 建 立 对 照 品 贮 备 液 配 制 精 密 称 取 1 盐 酸 盐 对 照 品 mg( 相 当 于 1 碱 基 mg), 置 10 ml 量 瓶 中, 用 少 量 甲 醇 溶 解 后, 加 甲 醇 定 容, 摇 匀, 配 制 成 浓 度 为 µg/ml 的 1 盐 酸 盐 对 照 品 贮 备 液, 置 4 冰 箱 中 避 光 保 存 临 用 前 恢 复 至 室 温, 再 用 甲 醇 稀 释 至 所 需 浓 度 体 外 透 皮 试 验 及 样 品 处 理 采 用 透 皮 扩 散 仪 进 行 试 验, 水 浴 温 度 32, 搅 拌 转 速 300 r/min, 透 皮 面 积 3.14 cm 2, 接 收 池 体 积 7 ml, 以 0.2 mol/l 磷 酸 盐 缓 冲 液 (PBS,pH 4.5)
9 中 国 医 药 工 业 杂 志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(4) 426 为 接 收 介 质 将 贴 剂 贴 于 皮 肤 角 质 层 面, 确 保 紧 密 接 触 无 气 泡 后 固 定 于 扩 散 池 于 规 定 时 间 取 样 0.3 ml, 补 加 同 温 同 体 积 新 鲜 接 收 液 并 排 除 接 收 室 中 气 泡 接 收 液 置 0.5 ml EP 管 中, 离 心 ( g)3 min, 取 上 清 液, 进 样 分 析 色 谱 条 件 色 谱 柱 Inertsil ODS-SP 柱 (4.6 mm 250 mm, 5 µm); 流 动 相 甲 醇 g/ml 磷 酸 二 氢 钾 水 溶 液 磷 酸 三 乙 胺 ( ); 检 测 波 长 210 nm; 流 速 1.0 ml/min; 柱 温 40 ; 进 样 量 20 µl 专 属 性 试 验 取 空 白 接 收 液 对 照 品 溶 液 贴 剂 体 外 透 皮 样 品, 按 项 下 条 件 进 样 分 析 结 果 表 明,1 的 保 留 时 间 为 15.8 min, 皮 肤 中 内 源 性 物 质 不 干 扰 样 品 测 定 线 性 试 验 及 定 量 限 精 密 量 取 1 盐 酸 盐 对 照 品 贮 备 液 适 量, 用 空 白 接 收 液 逐 级 稀 释, 配 制 成 1 碱 基 浓 度 分 别 为 和 µg/ml 的 对 照 品 溶 液 按 项 下 方 法 处 理 后 进 样 分 析, 以 峰 面 积 (Y) 为 纵 坐 标, 浓 度 (c) 为 横 坐 标 线 性 回 归, 得 回 归 方 程 为 Y= c ,r= 表 明 1 碱 基 在 0.23 ~ µg/ml 浓 度 范 围 内 线 性 关 系 良 好 本 法 定 量 限 (LOQ) 为 µg/ml(s/n 10) 精 密 度 试 验 以 空 白 接 收 液 配 制 含 1 碱 基 浓 度 分 别 和 µg/ml 的 对 照 品 溶 液, 各 5 份, 按 项 下 方 法 处 理, 同 1 d 内 不 同 时 间 测 定 ; 于 1 周 内 不 同 时 间 同 法 测 定 计 算 得 样 品 的 日 内 及 日 间 RSD 分 别 为 1.49% (n=9) 和 1.68% (n=9), 表 明 方 法 精 密 度 良 好 回 收 率 试 验 取 项 下 高 中 低 浓 度 样 品, 各 5 份, 经 µm 微 孔 滤 膜 过 滤, 按 项 下 方 法 处 理 后 进 样 测 定 由 标 准 曲 线 计 算 浓 度 计 算 得 样 品 平 均 回 收 率 为 98.40%,RSD 为 0.28% (n=15), 符 合 测 定 要 求 稳 定 性 试 验 将 接 收 液 样 品 分 别 于 室 温 和 4 下 存 放, 分 别 于 和 48 h 时 进 样 测 定, 记 录 色 谱 图 计 算 得 样 品 峰 面 积 的 RSD 为 0.75% 和 0.46% (n=5), 表 明 接 收 液 在 样 品 于 室 温 和 4 条 件 下 48 h 内 稳 定 mv( 100) A mv( 100) A: A: 空 白 空 白 裸 裸 鼠 鼠 皮 皮 肤 接 受 液,B: 空 白 大 鼠 皮 肤 接 受 液,C: 空 白 猪 皮 肤 接 受 液 液,D:,D: 空 白 空 白 PBS,E:1 E:1 盐 酸 盐 酸 盐 盐 对 对 照 照 品 品 溶 溶 液 (1 (1 碱 基 浓 度 为 µg/ml),f: 猪 皮 9 h 接 收 液 µg/ml),f: 透 猪 皮 9 h 接 收 液 B mv( 100) mv( 100) mv( 100) mv( 100) D 0.8 E 0.8 F 图 1 专 属 性 色 谱 图 Fig.1 Typical Chromatograms of Specificity Test C
10 A: 空 白 裸 鼠 皮 肤 接 受 液,B: 空 白 大 鼠 皮 肤 接 受 液,C: 空 白 猪 皮 肤 接 受 液,D: 盐 酸 盐 对 照 品 溶 液 (1 碱 基 浓 度 为 µg/ml),f: 透 猪 皮 9 h 接 收 中 国 医 药 工 业 杂 志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(4) 2.4 接 收 介 质 的 选 择 碱 基 在 接 收 介 质 中 的 稳 定 性 分 别 以 水 溶 液 及 ph 和 6.8 的 PBS 为 溶 剂, 配 制 1 碱 基 浓 度 为 100 µg/ml 的 溶 液, 置 32 水 浴 中, 于 和 48 h 时 取 出, 按 项 下 条 件 测 定 浓 度, 考 察 1 碱 基 在 不 同 溶 液 中 的 稳 定 性 结 果 ( 表 1) 表 明, 1 碱 基 随 着 ph 值 升 高, 稳 定 性 下 降, 在 ph 4.5 时 稳 定 性 最 好,48 h 内 仅 有 0.17% 降 解, 满 足 分 析 要 求, 选 择 此 溶 液 为 接 收 介 质 碱 基 在 接 收 介 质 中 的 饱 和 溶 解 度 取 过 量 的 1 碱 基 原 料 药 置 具 塞 试 管 中, 分 别 加 入 适 量 ph 和 6. 8 的 PBS 及 蒸 馏 水, 于 32 水 浴 振 摇 48 h 后 取 样, 经 µm 微 孔 滤 膜 过 滤, 以 甲 醇 稀 释 后 按 项 下 条 件 测 定, 计 算 得 1 碱 基 在 不 同 溶 媒 中 的 平 衡 溶 解 度 分 别 为 (40.12±0.37) (34.65±0.94) (28.78±0.14) (11.52±8) (6.00±6) (4.59±0.11) 和 (4.38± 0.16)mg/ml(n=3) 可 见, 随 ph 值 降 低, 其 饱 和 溶 解 度 升 高 已 上 市 哌 甲 酯 贴 剂 Daytrana 的 哌 甲 酯 含 量 为 2.2 mg/cm 2, 因 右 旋 体 为 药 理 活 性 物 质, 故 本 品 中 1 含 量 暂 设 计 为 1.1 mg/cm 2,1 碱 基 完 全 透 过 后, 药 物 浓 度 为 0.49 mg/ml, 所 以 各 接 收 介 质 均 满 足 漏 槽 条 件 2.5 体 外 透 皮 模 型 选 择 取 对 照 组 贴 剂 按 项 下 方 法 操 作, 分 别 于 和 24 h 定 时 取 样 按 项 下 条 件 测 定 4 h 后 的 样 品 需 稀 释 10 倍 后 分 析 采 用 外 标 法 计 算 单 位 面 积 累 积 透 过 量 (Q) 以 Q 对 时 间 t 进 行 线 性 回 归 ( 因 本 品 拟 设 计 为 缓 释 9 h, 所 以 采 用 前 9 h 数 据 进 行 线 性 回 归 ), 所 得 方 程 的 斜 率 即 为 药 物 稳 态 透 皮 速 率 J s, 同 时 计 算 滞 后 时 间 (t lag ) 及 相 关 系 数 (r 2 ) 考 察 了 不 同 皮 肤 种 属 对 本 品 中 1 渗 透 性 能 的 影 响, 结 果 见 表 2 和 图 2 结 果 表 明, 1 渗 透 的 难 易 顺 序 为 猪 皮 大 鼠 皮 裸 鼠 皮 使 用 大 鼠 皮 与 裸 鼠 皮 时, 在 9 h 已 有 超 过 70% 的 药 物 透 过 皮 肤, 对 处 方 优 化 的 区 分 力 度 较 差, 所 以 选 择 最 难 透 过 的 猪 皮 作 为 体 外 试 验 的 皮 肤 屏 障 Q/µg.cm t/h - 大 鼠 皮 ; - 裸 鼠 皮 ; - 猪 皮 图 2 1 在 不 同 种 属 皮 肤 中 的 累 积 渗 透 量 (n=4) Fig.2 Cumulative Permeation Amount of 1 from the Patches in Different Skin Species (n=4) 2.6 促 透 剂 筛 选 取 对 照 贴 剂 和 含 5% 不 同 种 类 促 透 剂 ( 分 别 为 月 桂 氮 酮 NMP 薄 荷 醇 OA PG 和 PEG 400) 贴 剂 (1.1 mg/cm 2 ) 按 项 下 方 法, 分 别 于 和 24 h 定 时 取 样 处 理 按 2.5 项 下 方 法 计 算 J s t lag 及 增 渗 比 (ER, 计 算 公 式 见 式 1 ) 比 较 各 促 透 剂 对 1 的 经 皮 促 透 介 质 表 1 不 同 ph 值 介 质 中 的 1 稳 定 性 结 果 /µg ml -1 (32, x - ± s, n=3) Tab.1 Results of Stability for 1 in Media with Different ph Values (32, x - ±s, n=3) t/h 水 104± ± ± ± ± ± ± ± ±1.37 ph 4.5 PBS 99.97± ± ± ± ± ± ± ± ±0.27 ph 5.0 PBS ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.98 ph 5.5 PBS ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.21 ph 5.8 PBS 107± ± ± ± ± ± ± ± ±1.04 ph 6.5 PBS ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.51 ph 6.8 PBS 99.93± ± ± ± ± ± ± ± ±0.44
11 中 国 医 药 工 业 杂 志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(4) 428 表 2 不 同 种 属 皮 肤 中 1 的 渗 透 动 力 学 参 数 (x - ± s, n=4) Tab.2 Permeation Parameters of 1 from the Patches in Different Skin Species(x - ±s, n=4) 皮 肤 种 属 J s /µg h -1 cm -2 t lag /h 线 性 方 程 r 2 猪 皮 30.52± Q= 30.52t 大 鼠 皮 90.71± Q = 90.71t 裸 鼠 皮 97.67±3.86 Q = 97.67t 效 果, 结 果 见 表 3 和 4 ER 值 结 果 表 明, 几 种 促 透 剂 在 9 h 内 的 促 透 作 用 次 序 为 :PG>OA> 月 桂 氮 酮 PEG 400>NMP> 薄 荷 醇 其 中, 含 薄 荷 醇 的 贴 剂 中 1 的 累 积 渗 透 量 相 比 对 照 贴 剂 有 所 降 低, 说 明 它 在 浓 度 5% 时 表 现 为 阻 碍 1 渗 透 的 作 用 但 与 对 照 贴 剂 组 相 比, 各 组 J s 值 和 ER 值 无 显 著 差 异 (P>5), 说 明 本 试 验 中 各 促 透 剂 对 1 的 渗 透 行 为 无 显 著 影 响 ; 除 OA 组 外,t lag 也 均 没 有 明 显 改 变 ER= J s, 1 /J s, 2 式 1 式 中,J s, 1 和 J s, 2 为 含 促 透 剂 贴 剂 组 及 对 照 贴 剂 组 中 药 物 透 皮 扩 散 稳 态 流 量 3 讨 论 3.1 哌 甲 酯 含 有 酯 键, 在 水 溶 液 中 易 发 生 水 解, 主 要 生 成 降 解 产 物 哌 甲 酸 在 体 外 透 皮 接 收 介 质 的 筛 选 中, 为 模 拟 人 体 体 液 环 境, 不 可 避 免 地 使 用 水 溶 液 作 为 接 收 介 质 目 前 未 见 关 于 哌 甲 酯 碱 基 在 水 溶 液 中 稳 定 性 的 报 道, 吴 娟 等 在 研 究 盐 酸 哌 甲 酯 缓 释 微 丸 时, 对 盐 酸 哌 甲 酯 在 各 介 质 中 的 稳 定 性 进 行 了 考 察, 报 道 其 在 水,pH 1.2 盐 酸,pH 和 7.5 的 PBS 中 24 h 内 相 对 稳 定, 但 随 ph 值 升 高 稳 定 性 下 降 [5] 本 研 究 表 明,1 碱 基 更 不 稳 定, 在 ph 值 高 于 5.5 后,24 h 内 有 明 显 降 解 3.2 裸 鼠 皮 大 鼠 皮 和 猪 皮 因 易 于 获 得 且 与 人 体 皮 肤 相 似, 经 常 用 于 透 皮 贴 剂 体 外 筛 选, 尤 以 猪 皮 与 人 体 最 为 相 近 [6] 皮 肤 种 属 比 较 结 果 表 明,1 碱 基 渗 透 的 难 易 顺 序 为 猪 皮 大 鼠 皮 裸 鼠 皮 1 贴 剂 设 计 为 9 h 给 药, 而 使 用 大 鼠 皮 与 裸 鼠 皮 在 9 h 已 有 超 过 70% 的 药 物 透 过 皮 肤, 对 于 处 方 优 化 的 区 分 力 度 较 差, 所 以 选 择 最 难 透 过 的 猪 皮 作 为 体 外 皮 肤 模 型 裸 鼠 皮 对 1 碱 基 的 通 透 性 是 猪 皮 的 3 倍, 与 王 鑫 等 对 他 克 莫 司 体 外 经 皮 渗 透 性 的 考 察 结 果 一 致 [7] 3.3 考 察 了 多 种 促 透 剂 对 1 碱 基 透 皮 的 促 透 作 用, 结 果 表 明 PG 的 促 透 效 果 最 好, 其 次 为 OA 和 月 桂 氮 酮 俞 媛 等 对 盐 酸 哌 甲 酯 透 皮 特 性 的 研 究 表 表 3 促 透 剂 种 类 对 贴 剂 中 1 累 积 渗 透 量 的 影 响 (x - ± s, n=3) Tab.3 Effect of Enhancer Type on the Cumulative Permeation Amount of 1 from the Patches(x - ±s, n=3) 促 透 剂 种 类 Q/µg cm h 0.5 h 1 h 2 h 4 h 6 h 9 h 24 h 无 0.37±4 1.38± ± ± ± ± ± ±78.67 月 桂 氮 酮 1.32± ± ± ± ± ± ± ±64.56 NMP 0.90± ± ± ± ± ± ± ± 薄 荷 醇 0.82± ± ± ± ± ± ± ±83.21 OA 0.37± ± ± ± ± ± ± ±97.77 PG 1.52± ± ± ± ± ± ± ±77.93 PEG ± ± ± ± ± ± ± ±74.03 表 4 促 透 剂 种 类 对 贴 剂 中 1 渗 透 动 力 学 参 数 的 影 响 (x - ± s, n=3) Tab.4 Effect of Enhancer Type on Permeation Parameters of 1 from the Patches(x - ±s, n=3) 促 透 剂 种 类 J s /µg h -1 cm -2 t lag /h 线 性 方 程 r 2 ER 无 33.94± Q=33.94t ±5 月 桂 氮 酮 35.76± Q=35.76t ±0.23 NMP 34.28± Q=34.28t ±0.31 薄 荷 醇 32.25± Q=32.25t ±0.19 OA 37.04± Q=37.04t ±0.15 PG 39.31± Q=39.31t ±0.12 PEG ± Q=35.72t ±0.14
12 429 中 国 医 药 工 业 杂 志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2016, 47(4) 明,5% PG 与 3% 月 桂 氮 酮 联 用 的 促 透 作 用 明 显 (P<5) [8] 后 期 需 要 考 察 促 透 剂 联 用 对 1 碱 基 的 促 透 效 果 参 考 文 献 : [1] Pierce D, Katic A, Buckwalter M, et al. Single- and multipledose pharmacokinetics of methylphenidate administered as methylphenidate transdermal system or osmotic-release oral system methylphenidate to children and adolescents with attention deficit hyperactivity disorder [J]. J Clin Psychopharmacol, 2010, 30(5): [2] May DE, Kratochvil CJ. Attention-deficit hyperactivity disorder: recent advances in paediatric pharmacotherapy [J]. Drugs, 2010, 70(1): [3] Bell GH, Novak AJ, Griffin WC 3rd, et al. Transdermal and oral dl-methylphenidate-ethanol interactions in C57BL/6J mice: transesterification to ethylphenidate and elevation of d-methylphenidate concentrations [J]. J Pharm Sci, 2011, 100(7): [4] Kowalik S, Minami H, Silva R. Critical assessment of the methylphenidate transdermal system [J]. Drugs Today (Barc), 2007, 43(8): [5] 吴 娟, 丁 雪 鹰, 高 静, 等. 盐 酸 哌 甲 酯 缓 释 微 丸 的 制 备 及 处 方 优 化 [J]. 第 二 军 医 大 学 学 报, 2007, 38(3): [6] Liu Y, Chen JY, Shang HT, et al. Light microscopic, electron microscopic, and immunohistochemical comparison of Bama minipig (Sus scrofa domestica) and human skin [J]. Comp Med, 2010, 60(2): [7] 王 鑫, 黎 绫, 田 娟, 等. 他 克 莫 司 软 膏 的 体 外 经 皮 渗 透 性 考 察 [J]. 中 国 医 药 工 业 杂 志, 2015, 46(4): [8] 俞 媛, 陈 琰, 张 智 艳, 等. 盐 酸 哌 甲 酯 的 经 皮 渗 透 特 性 研 究 [J]. 第 二 军 医 大 学 学 报, 2005, 26(2) : fffffffffffffffffffffffffffffffffffffffffffffffff 欢 迎 订 阅 2016 年 世 界 临 床 药 物 杂 志 原 名 国 外 医 药 合 成 药 生 化 药 制 剂 分 册 世 界 临 床 药 物 由 上 海 医 药 工 业 研 究 院 中 国 药 学 会 主 办, 为 中 国 科 技 核 心 期 刊 ; 中 国 科 技 论 文 统 计 源 期 刊 ; 中 国 学 术 期 刊 综 合 评 价 数 据 库 来 源 期 刊 ; 中 国 生 物 医 学 期 刊 数 据 库 入 选 期 刊 ; 中 文 科 技 资 料 目 录 医 药 卫 生 入 选 期 刊 ; 国 家 权 威 数 据 库 中 国 知 网 ( CNKI) 收 录 期 刊 ; 全 国 各 大 医 药 学 院 校 图 书 馆 馆 藏 期 刊 本 刊 关 注 全 球 医 药 研 发 进 展 涵 盖 临 床 各 科 用 药, 是 一 本 服 务 临 床 医 师 药 师, 面 向 医 药 行 业 及 医 疗 卫 生 从 业 人 员 的 综 合 性 药 学 学 术 期 刊 本 刊 聚 焦 药 物 临 床 应 用 研 发 进 展 和 市 场 管 理 等 各 个 环 节, 精 心 组 织 临 床 热 点 专 题 综 述, 兼 具 学 术 性 权 威 性 和 时 效 性 主 要 栏 目 : 医 药 专 论, 研 究 论 文, 综 述 评 论, 信 息 邮 局 汇 款 地 址 : 上 海 市 静 安 区 北 京 西 路 1320 号, 邮 编 : 银 行 汇 款 开 户 银 行 : 上 海 银 行 新 成 支 行 单 位 名 称 : 上 海 数 图 健 康 医 药 科 技 有 限 公 司 帐 号 : 月 刊, 大 16 开,72 页, 印 刷 装 帧 精 良 邮 发 代 号 4-302, 全 国 各 地 邮 局 均 可 订 阅 定 价 :26 元, 全 年 312 元 出 版 : 世 界 临 床 药 物 编 辑 部 ; 地 址 : 上 海 市 静 安 区 北 京 西 路 1320 号 ; 邮 编 : 编 辑 部 联 系 : 电 话 , 传 真 , 电 子 邮 箱 wcd@pharmadl.com 发 行 部 联 系 : 电 话 , 传 真 , 电 子 邮 箱 fxb@pharmadl.com
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