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1 分子生物学 第二章染色体与 DNA 2.1 染色体 2.2 DNA 的结构 9/13/2017

2 2 目录 染色体 染色体概述 真核细胞染色体的组成 基因组 DNA 的结构 DNA 的一级结构 DNA 的二级结构

3 3 染色体概述 染色体 遗传物质的主要载体 亲代将 DNA 以染色体的形式传给子代 染色体 :DNA+ 蛋白质 同一物种内每条染色体所带 DNA 的量一定 组成染色体的蛋白质种类和含量稳定

4 4 染色体的发现 19 世纪中叶, 光学显微镜观察到细胞 真核细胞分裂的全过程 细胞质与细胞核之间的界限 细胞核中的棒状可染色结构 染色体 (chromosome)

5 5 真核生物染色体和染色质的位置 核质 核膜 核孔 核仁 染色体 染色质

6 6 真核细胞 真核生物包括植物 真菌 原生生物 藻类和动物 植物和藻类多为绿色, 含叶绿体, 细胞壁中含有多糖 真菌有细胞壁, 但无叶绿体, 包括酵母 霉菌 蘑菇和导致皮肤病 皮藓的真菌 原生生物是单细胞的 动物, 多细胞, 无细胞壁

7 7 植物细胞

8 8 动物细胞

9 9 拥有三位家长基因的孩子 父亲 : 细胞核 母亲 : 细胞核 捐赠者 : 线粒体 DNA 母亲 父亲 捐赠者

10 10 原核细胞的结构 原核细胞包括细菌和古生菌 细菌 5% 致病,95% 分解死的有机体古生菌通常生长在极端环境中 没有核膜包覆的细胞核结构没有线粒体 叶绿体 高尔基体和内质网含有 DNA 和酶, 能新陈代谢

11 11 大肠杆菌

12 12 原核细胞和真核细胞特征分析 特征原核细胞真核细胞 体积 1~10 μm 5~100 μm 基因组 DNA 与非组蛋白结合在类核中 DNA 与组蛋白及非组蛋白结合, 成染色体 细胞分裂方式裂殖或出芽 有丝分裂和减数分裂 外膜包被的细胞器 - 线粒体 叶绿体 内质网 高尔基体等 能量代谢 在细胞质膜上 在线粒体中 细胞骨架 - 微管 中间纤维和肌动纤维构成 细胞间运动 - 原生质体流动或胞饮

13 13 真核细胞染色体 vs 原核细胞染色体 外观结构不同 细胞内存在方式不同 细菌染色体 : 染色体外裹着稀疏的蛋白质 真核细胞染色体 : DNA 和蛋白质完全融合在一起 位置 原核生物 : 类核体 真核生物 : 细胞核 数量 原核生物 : 一般只有一个, 单倍体 真核生物 : 多倍体

14 14 目录 染色体 染色体概述 真核细胞染色体的组成 基因组 DNA 的结构 DNA 的一级结构 DNA 的二级结构

15 15 染色体的特征 分子结构相对稳定 能自我复制 能指导蛋白质合成 能产生可遗传的变异

16 16 真核细胞染色体的组成 蛋白质 组蛋白 (histone) : 结构蛋白 非组蛋白 DNA

17 17 组蛋白 含有大量的赖氨酸和精氨酸, 根据凝胶电泳性质可分为 : H1 富含赖氨酸 Mw=21000 H2A H2B H3 富含精氨酸 H4 富含精氨酸 介于 H 1 和 H 3 H 4 之间 Mw=14500 Mw=13800 Mw=15300 Mw=11300

18 18 电泳 电泳淌度 (electrophoretic mobility) 是指单位电场强度下粒子运动的速度粒子的带电量 电泳淌度 粒子的尺寸 电泳淌度

19 19 核酸凝胶电泳技术 带电量多 分子量小的 DNA 电泳淌度大

20 20 核酸凝胶电泳技术

21 21 组蛋白的特性 进化上极端保守特别是 H 3 和 H 4 无组织特异性例外鸟类 鱼类及两栖类红细胞染色体不含 H 1 而带有 H 5 肽链上氨基酸分布不对称碱性氨基酸集中在 N 端 组蛋白的修饰作用甲基化 乙基化 磷酸化 H 5 富含赖氨酸 与红细胞染色质失活有关

22 22 非组蛋白 (nonhistone) 高速泳动蛋白 (high mobility group protein) 相对分子量小, 电泳迁移快 DNA 结合蛋白 和 DNA 结合紧, 可能与 DNA 的复制和转录有关 A24 非组蛋白 酸性两个 N 端, 一个 C 端

23 23 DNA C 值 (bp) 一种生物单倍体基因组 DNA 的总量 C 值反常现象某些两栖类比哺乳动物的大 DNA 序列 不重复序列一个或几个拷贝结构基因基本上是 中度重复序列 10~10 4 rrna, trna, 某些结构基因 高度重复序列 ( 卫星 DNA) 许多位于着丝粒不转录

24 24 染色质和核小体 染色质纤维细丝是由许多核小体连成的念珠状结构 : 染色质 DNA 的 T m 值高 染色质 DNA 复制和转录活性低 DNA 酶 I 对染色质 DNA 的消化远慢于对纯 DNA 的消化 念珠状结构 10 nm 球状体

25 核小体的结构 25

26 26 DNA 的压缩 DNA 总压缩比 : 核小体 7 蛋白 6 DNA 2 nm 核小体 10 nm 螺旋管 10/30 nm 染色体 0.84 μm 40 染色体 5

27 27 目录 染色体 染色体概述 真核细胞染色体的组成 基因组 DNA 的结构 DNA 的一级结构 DNA 的二级结构

28 28 原核生物基因组 结构简练 DNA 的大部分都用来转录 存在转录单元 功能相关的 RNA 和蛋白质基因, 丛集在一个或几个特定部位, 形成转录单元 可被一起转录成含有多个 mrna 的分子, 称为多顺反子 mrna 有重叠基因 一个基因完全在另一个基因里 部分重叠 只有一个碱基对的重叠

29 29 真核生物和原核生物的基因组比较 真核生物基因组 存在大量重复序列 90% 以上为非编码序列 转录产物为单顺反子 断裂基因, 有内含子结构 原核生物基因组 大部分是编码序列 转录产物为多顺反子 ( 转录单元 ) 重叠基因 存在大量顺式作用元件 存在大量 DNA 多态性 端粒结构

30 30 目录 染色体 染色体概述 真核细胞染色体的组成 基因组 DNA 的结构 DNA 的一级结构 DNA 的二级结构

31 DNA 的一级结构 31

32 32 碱基 核苷和核苷酸 碱基 核苷 核苷酸 RNA DNA 腺嘌呤 腺苷 腺苷酸 AMP damp 鸟嘌呤 鸟苷 鸟苷酸 GMP dgmp 胞嘧啶 胞苷 胞苷酸 CMP dcmp 胸腺嘧啶 胸苷 胸苷酸 dtmp 尿嘧啶 尿苷 尿苷酸 UMP HO-P(O)-O- Base Base

33 DNA 的一级结构 33

34 34 目录 染色体 染色体概述 真核细胞染色体的组成 原核生物基因组 DNA 的结构 DNA 的一级结构 DNA 的二级结构

35 35 DNA 双螺旋 B-DNA 小沟 1.2 nm 大沟 2.2 nm 周期 3.4 nm 直径 2.0 nm 大沟 C A G T 小沟

36 36 三种双螺旋结构 A B Z A B Z 碱基间距 0.26 nm 螺旋直径 2.6 nm 0.34 nm 2.0 nm 0.37 nm 1.8 nm 每轮碱基数 右手螺旋 右手螺旋 左手螺旋

37 37 DNA 的变性 变性 : 升温时 DNA 链间的 非共价键破坏熔点 :DNA 链变性 1/2 时的温度 C A G T

38 38 DNA 的熔点 存在线性关系 GC 含量, 熔点 C A G T

39 Application of DNA double helix: NP assembly 39 Scale bars, 50 nm Nat Nano 2014, 9 (2),

40 Application of DNA double helix: mirna detection 40 Analytical Chemistry 2017, 89 (11),

41 41 小结 染色体的组成 组蛋白的八聚体结构 C 值 断裂基因 DNA 的压缩 DNA 的结构 DNA 的一级 二级结构 熔点

42 42 思考题 写出 AMP 和 TMP 的结构式, 并标出 5 和 3 的位置 用自己的语言描述 DNA 是如何一步步地组装到染色体中的

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