266 江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 12 期 赵卫红, 於叶兵, 王资生, 等. 不同脂肪源饵料对日本沼虾抗氧化机能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影响 [J]. 江苏农业科学,2014,42(12):266-271. doi:10.15889/j.isn.1002-1302.2014.12.092 不同脂肪源饵料对日本沼虾抗氧化机能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影响 赵卫红, 於叶兵, 王资生, 吕 富, 吕林兰 ( 盐城工学院化学与生物工程学院, 江苏盐城 224051) 摘要 : 为研究几种植物油 ( 大豆磷酯 豆油 花生油 菜籽油 ) 和鱼油对日本沼虾抗氧化机能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影响, 在基础配合饲料中分别添加 6% 鱼油 大豆磷脂 豆油 花生油和菜籽油, 饲养雌性日本沼虾 (0.63~ 0.75g)40d 结果表明, 肌肉中超氧化物歧化酶 (SOD) 活力除鱼油组显著低于菜籽油组外, 其余各组之间差异不显著 ; 大豆磷脂组肝胰腺 SOD 活力显著低于其他各组 大豆磷脂组和菜籽油组肌肉过氧化氢酶 (CAT) 活力显著高于鱼油组 豆油组和花生油组, 大豆磷脂组 豆油组和菜油组肝胰腺 CAT 活力显著高于鱼油组和花生油组 肝胰腺和卵巢均检测到了饲料中未检测到的 C20 2n-6, 鱼油组显著低于其他各组 鱼油组肝胰腺和卵巢 EPA(C20 5n-3) 含量和 n-3/n-6 的值均显著高于其他各组,n-6 高不饱和脂肪酸 (PUFA) 含量显著低于其他各组 ; 大豆磷脂组卵巢亚油酸 (C18 2n-6) 含量显著高于鱼油组 花生油组和菜籽油组 ; 豆油组肝胰腺 n-6pufa 含量显著高于鱼油组 花生油组和菜籽油组 ; 花生油组卵巢 DHA(C22 6n-3) 含量和 n-3/n-6 的值仅次于鱼油组, 且均高于其他各组 ; 菜籽油组肝胰腺单不饱和脂肪酸含量显著高于其他各组 综上所述, 豆油和菜籽油可以一定程度上代替鱼油应用于日本沼虾饲料中 关键词 : 日本沼虾 ; 植物油 ; 超氧化物歧化酶 ; 过氧化氢酶 ; 脂肪酸 中图分类号 :S966.12 + 2 文献标志码 :A 文章编号 :1002-1302(2014)12-0266-06 日本沼虾 (Macrobrachiumnipponense) 别称青虾 河虾, 隶属于节肢动物门甲壳纲十足目游泳亚目长臂虾科沼虾属, 广泛分布于我国和东南亚地区, 其肉味鲜嫩, 营养丰富, 深受消费者的青睐 [1], 是我国重要的传统淡水养殖经济虾类之一 [2] 其养殖需要大量配合饲料, 其中鱼油作为优质脂肪源是必须添加的成分 [3] 鱼油由于加工资源所限, 全球鱼油产量近 10 年来一直徘徊不前 [4], 而水产养殖业对鱼油的需求逐年提升, 另一方面人们越来越关注鱼油所带来的益处, 使得对于直接供人类消费的鱼油需求增加, 因此, 鱼油一直处于供不应求的状态, 价格居高不下, 成为制约水产养殖效益的瓶颈 寻找一种物美价廉 来源广泛的脂肪源全部或部分代替鱼油将是水产养殖业发展的必然趋势 植物油原料广泛, 产量逐年升高, 菜籽油的年产量在近 10 年来增加了 18 倍 [5] 而且植物油由于价格低廉, 富含不饱和脂肪酸, 成为水产养殖的重要脂肪源 [5] 植物油代替鱼油已成功广泛运用于对脂类利用能力较高的鲑鳟鱼类 [6] 在虾蟹类养殖过程中也出现了采用亚麻籽油 豆油 菜籽油和花生油等植物油不同程度地取代鱼油且在生长和繁殖方面具有较好表现的报道 如亚麻籽油 加拿大菜籽油和豆油对斑节对虾 (Penaeusmonodon) 的促收稿日期 :2014-09-25 基金项目 : 国家自然科学基金 ( 编号 :31101887); 江苏省自然科学基金 ( 编号 :BK2011419 BK2012675); 江苏省企业博士聚集项目 作者简介 : 赵卫红 (1973 ), 女, 江苏东台人, 博士, 副教授, 硕士生导师, 从事水产动物繁殖 营养与免疫方面的教学与科研工作 Tel: (0515)88298190;E-mail:miszwh@163.com 生长作用显著高于鳕鱼肝油 [7] 豆油对提高中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis) 产卵力的效果优于鱼油 [8] 更多报道显示鱼油和植物油的混合作用更佳 [9] 脂肪源的营养价值在很大程度上取决于脂肪酸的不饱和程度及各种脂肪酸的比例 一般认为, 富含 n-6 和 n-3 系列的高度不饱和脂肪酸 (HU FA) 的海水鱼油及其与植物油的混合油对虾蟹类的营养价值要高于 HUFA 含量较低的动物油和植物油 [10] 有研究表明, 植物油对虾蟹类促生长作用与植物油中亚麻酸 (LNA) 和亚油酸 (C18 2n-6,LOA) 的含量有关, 冷水性的日本对虾 (MarsupenaeusjaponicusBate) [11] 和中国对虾 (Penaeuschinen sis) [12] [13] LNA 的作用优于 LOA, 而温水性的斑节对虾和印度对虾 (Penaeusindicus) [14] LOA 的作用优于 LNA 有关植物油在日本沼虾中的作用还未见报道 肝胰腺是甲壳动物脂肪吸收和储存的重要器官, 在甲壳动物免疫 繁殖等生理过程中发挥着重要作用 [15-16] 本试验通过检测饲喂不同植物脂肪源一段时间后的日本沼虾肝胰腺和卵巢中脂肪酸的含量, 并结合其肌肉和肝胰腺中超氧化物歧化酶 (SOD) 和过氧化氢酶 (CAT) 活力, 从免疫机能的角度筛选出适合日本沼虾的替选脂肪源, 为优化饲料配方 降低饲料成本提供理论基础 1 材料与方法 1.1 试验虾及其饲养 日本沼虾购江苏省盐城市海纯路菜市场 试验前于水族箱中暂养 7d, 暂养期间每天投喂 2 次 ( 分别为 08:00 和 14:00) 剪碎的蚬肉 选取附肢完整 活泼健康 大小一致
江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 12 期 267 (0 63~0.75g) 的雌虾 540 尾, 随机分成 6 组, 每组分 3 个小组, 每小组 30 尾, 每个小组 3 个重复, 分别放入 15 个玻璃水族箱 ( 长 32cm 宽 60cm 高 40cm, 水深 20cm) 内, 每天 08:00 和 14:00 投喂自制饲料, 每次投饲率为虾湿质量的 2% ~3%, 根据摄食情况适当调整投喂量 每天投饵 2h 后吸取残饵和粪便, 养殖期间每天换水 1/4 24h 充氧, 溶氧量 5.5mg/L, 加热棒控温, 水温 (25±2) 1.2 试验饲料 参照 SC/T1066 2003 罗氏沼虾配合饲料 水产行业标 [17-21] 准及日本沼虾营养需求相关文献设计基础饲料配方, 以优质进口鱼粉 豆粕和菜粕为主要蛋白源, 分别以鱼油 大豆磷脂 豆油 花生油和菜籽油为脂肪源, 油脂添加水平为质量的 6%, 配制 5 组试验饲料 饲料原料经粉碎过 60 目筛, 混合均匀后加工成颗粒饲料, 晾干并保存于冰箱中备用 基础饲料配方为 30% 鱼粉 20% 豆粕 10% 菜粕 14.3% 啤酒酵母 10% 淀粉 0.2% 胆固醇 1% 明胶 1.3% 磷酸二氢钙料 2% 食盐 1% 甜菜碱 4% 复合维生素和矿物质预混 ( 预混料为 1kg 饲粮提供维生素 E60mg 维生素 B 1 15mg 维生素 B 2 30mg 维生素 B 6 15mg 维生素 B 12 0.5mg 维生素 D 3 3000IU 维生素 K5mg 维生素 A15000IU 生物素 2.5mg 叶酸 5.0mg 泛酸钙 50mg 烟酸 75mg Cu3mg Fe25mg 肌醇 1000mg Mn15mg Zn700mg I0.6mg) 各试验组饲料脂肪酸组成见表 1 脂肪酸种类 表 1 日本沼虾饲料脂肪酸组成 脂肪酸含量 (%) 鱼油大豆磷脂豆油花生油菜籽油 C12 0 0.99 0.35 0.19 0.31 0.26 C14 0 4.17 5.43 4.72 5.34 5.85 C15 0 0.14 0.54 0.33 0.54 0.47 C16 0 14.22 27.84 22.94 26.98 22.41 C17 0 痕量 0.34 0.28 0.29 0.23 C18 0 2.49 7.34 7.95 8.27 7.48 C20 0 10.89 0.75 0.59 2.71 1.56 C22 0 痕量 0.62 0.51 3.53 1.05 C24 0 痕量 0.31 0.17 1.59 0.41 总饱和脂肪酸 32.9 43.52 37.68 49.56 39.72 C14 n-3 0.30 0.08 0.09 0.05 0.03 C16 n-9 6.21 8.61 5.76 8.59 6.83 C18 n-9 14.07 16.68 19.10 12.96 11.55 C20 n-9 3.67 3.68 3.89 4.02 7.78 C22 n-9 2.67 7.72 3.86 3.83 12.82 C24 n-9 0.20 0 0.30 0.41 0.75 总单不饱和脂肪酸 27.12 36.77 33.00 29.86 39.76 C16 3n-3 0.71 0.40 0.64 0.63 0.63 C20 5n-3 11.55 7.40 6.53 5.48 7.22 C22 6n-3 5.18 3.63 2.51 2.83 3.22 n-3 17.44 11.43 9.68 8.94 11.07 C18 2n-6 3.08 3.70 12.29 3.56 4.09 C20 4n-6 1.67 1.41 1.42 1.49 1.38 n-6 4.75 5.11 13.71 5.05 5.47 总多不饱和脂肪酸 22.19 16.54 23.39 13.99 16.54 未知脂肪酸 17.79 3.19 5.93 6.59 3.98 1.3 取样 饲养 40d, 取样前停食 24h, 每组随机挑选 10 尾虾解剖, 取其肌肉 肝胰腺和卵巢, 置于 -70 超低温冰箱中保存待测 1.4 SOD CAT 活力和总蛋白含量的测定 SOD CAT 的活力和总蛋白含量均采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定 SOD 活力单位定义 :1mg 组织蛋白在 1mL 反应液中 SOD 抑制率达 50% 时所对应的 SOD 量为 1 个 SOD 活力单位 ;CAT 活力单位定义 :1mg 组织蛋白 1s 分解 1mmol 的 H 2 O 2 的量为 1 个活力单位 按质量体积比加生理盐水制成 10% 的组织匀浆, 3000r/min 离心 10min, 然后取上清用生理盐水稀释, 肌肉组织按照 1 9 稀释成 1% 组织匀浆液, 肝胰腺组织按照 1 19 稀释成 0.5% 组织匀浆液, 用于测定 SOD CAT 活力和总蛋白含量 1.5 脂肪酸含量的测定脂肪酸含量的测定方法 : 参照文献 [22] 提取各组样品中的脂肪, 参照文献 [23] 对其油脂进行皂化及甲酯化 ; 分别吸取 1μL 脂肪酸甲酯样品进行气相色谱 - 质谱分析, 气相色谱 - 质谱仪为 ThermoQuestTraceGC/MS, 色谱柱采用 30m 0 25mm 0.25μmSUPELCOGC/MS 毛细管柱, 气化室温度与传输线温度分别为 250 280 ; 程序升温步骤为初温 50,10 /min 升高至 280, 保持 10min 分流比为 10 1, 进样量为 1μL; 质谱条件为 EI 电离源, 信增器电压为 1200V, 离子源温度为 230, 四极杆温度为 150 全扫描 (SCAN) 质量为 45~500mau; 将样品质谱图与 NIST 标准图库质谱图进行匹配, 确认样品中的脂肪酸类别, 采用归一化法计算组分的相对含量 1.6 数据处理和分析试验数据均以 平均值 ± 标准差 表示, 用 SPSS18.0 对数据进行单因素方差分析, 用 Duncan s 法进行多重比较 2 结果与分析 2.1 不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺 SOD 活力的影响不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺 SOD 活力的影响结果见表 2 菜籽油组肌肉和肝胰腺 SOD 活力均显著强于鱼油组, 花生油组肝胰腺 SOD 活力显著强于鱼油组和豆油组, 大豆磷脂组肝胰腺 SOD 活力显著低于其他各组 表 2 不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺 SOD 活力的影响 SOD 活力 (U/mg) 脂肪源肌肉肝胰腺鱼油 73.69±3.85b 78.45±2.74b 大豆磷脂 77.27±2.20ab 57.78±0.38c 豆油 78.89±7.16ab 79.74±3.05b 花生油 80.97±10.48ab 97.28±7.91a 菜籽油 91.54±5.24a 100.60±0.75a 注 : 同列数据后不同小写字母表示差异显著 (P<0.05) 表 3 同 2.2 不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺 CAT 活力的影响不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺 CAT 活力的影响结果见表 3 除鱼油组外, 日本沼虾肝胰腺 CAT 活力均高于肌肉 大豆磷脂组和菜籽油组肌肉中 CAT 活力显著高于鱼油组 豆油组和花生油组, 大豆磷脂组 豆油组和菜籽油组肝胰腺 CAT 活力显著高于鱼油组和花生油组
268 江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 12 期 表 3 不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺 CAT 活力的影响 脂肪源 CAT 活力 (U/mg) 肌肉肝胰腺 鱼油 2.53±0.10de 1.83±0.98b 大豆磷脂 8.69±0.36a 15.78±0.80a 豆油 2.39±0.24e 20.32±2.73a 花生油 3.30±0.56cd 6.65±0.65b 菜籽油 4.51±0.22b 14.16±2.24a 2.3 不同脂肪源对日本沼虾肝胰腺脂肪酸含量的影响 不同脂肪源对日本沼虾肝胰腺脂肪酸含量的影响结果见 表 4 饲喂不同脂肪源的日本沼虾肝胰腺脂肪酸种类的组成较一致, 饱和脂肪酸如 C12 0 C13 0 C19 0 和 C20 0 的含量差异不显著, 但不饱和脂肪酸的含量差异较大 鱼油组 EPA(C20 5n-3) 和 n-3 多不饱和脂肪酸含量均显著高于其他各组 ; 鱼油组 n-6pufa 含量显著低于其他各组 ; n-3/n-6 的值显著高于于其他各组 豆油组和大豆磷脂组 C18 2n-6 C20 2n-6 和多不饱和脂肪酸含量较高 菜籽油组饱和脂肪酸 (SFA) 含量最低, 而 C18 n-9 C22 n-9 和单不饱和脂肪酸总量显著高于其他各组 表 4 不同脂肪源对日本沼虾肝胰腺脂肪酸组成的影响 脂肪酸种类 肝胰腺脂肪酸含量 (%) 鱼油组大豆磷脂组豆油组花生油组菜籽油组 C12 0 0.19±0.10a 0.14±0.02a 0.15±0.05a 0.15±0.08a 0.13±0.12a C13 0 0.03±0.03a 0.03±0.01a 0.04±0.01a 0.03±0.03a 痕量 C14 0 8.69±0.64a 4.18±0.74b 4.24±0.13b 4.20±0.92b 3.21±0.84b C15 0 0.74±0.08a 0.54±0.20ab 0.35±0.33b 0.43±0.17ab 0.32±0.06b C16 0 17.69±1.34ab 18.44±1.97a 15.72±0.72bc 16.28±0.22abc 14.55±0.86c C17 0 0.39±0.09a 0.27±0.10a 0.27±0.06a 0.10±0.15b 0.06±0.02b C18 0 4.95±0.12b 6.12±0.79a 5.20±0.14ab 4.73±0.69b 3.38±0.25c C19 0 0.02±0.02a 0.02±0.02a 0.01±0.01a 0.02±0.02a 0.03±0.01a C20 0 0.27±0.05a 0.50±0.31a 0.51±0.35a 0.44±0.39a 0.55±0.47a C22 0 0.09±0.06b 0.14±0.11b 0.15±0.01b 0.57±0.33a 0.09±0.04b C24 0 0.03±0.03ab 0.03±0.04ab 0.02±0.03ab 0.16±0.14a 0.01±0.01b 总饱和脂肪酸 33.10±0.22a 30.43±2.69ab 26.65±1.01b 27.11±2.93b 22.30±1.82c C16 n-9 9.20±0.84a 5.08±0.91b 4.38±0.19b 5.14±0.54b 4.50±0.90b C18 n-9 26.98±1.94c 30.59±4.78c 29.27±2.12c 36.97±3.08b 46.30±1.55a C20 n-9 3.33±0.28a 1.98±0.18b 2.22±0.14ab 2.31±0.92ab 3.20±0.50a C22 n-9 1.78±0.19ab 1.24±0.07b 1.09±0.15b 1.25±0.95b 2.56±0.41a C24 n-9 0.15±0.06a 0.05±0.04a 0.05±0.06a 0.09±0.10a 0.05±0.03a 总单不饱和脂肪酸 41.46±1.06bcd 38.94±5.77cd 37.00±1.85d 45.76±1.98b 56.62±0.81a C20 5n-3 10.92±0.17a 6.36±1.65b 6.20±0.00b 4.93±1.14bc 3.49±0.32c C22 6n-3 3.60±0.39a 2.71±0.70a 2.83±0.45a 2.70±0.52a 1.09±0.25b n-3 14.52±0.52a 9.06±2.33b 9.03±0.45b 7.62±1.65b 4.59±0.47c C18 2n-6 4.77±0.77c 16.41±1.13ab 20.68±2.04a 13.99±1.64b 12.76±0.63b C20 2n-6 0.55±0.07c 2.32±0.81ab 2.92±0.57a 2.15±0.48ab 1.49±0.28bc C20 4n-6 1.04±0.55a 0.56±0.23ab 0.45±0.06b 0.38±0.12b 0.24±0.03b n-6 6.37±0.46c 19.29±1.98ab 24.03±1.41a 16.53±1.28b 14.49±0.82b 总多不饱和脂肪酸 20.89±0.82bc 28.35±8.05ab 33.05±0.96a 24.15±3.27bc 19.08±1.29c n-3/n-6 2.28±0.15a 0.75±0.17b 0.38±0.04b 0.50±0.25b 0.32±0.02b 未知脂肪酸 4.55±0.32 2.28±0.21 3.30±0.17 2.98±0.15 2.00±0.06 注 : 同行数据后不同小写字母表示差异显著 (P<0.05) 表 5 同 2.4 不同脂肪源对日本沼虾卵巢脂肪酸的影响不同脂肪源对日本沼虾卵巢脂肪酸含量的影响结果见表 5 不同脂肪源对日本沼虾卵巢 C12 0 C13 0 C19 0 和 C22 n-9 脂肪酸的含量影响不显著 (P>0.05) 鱼油组的亚油酸 C20 2n-6 含量及 n-6/n-3 比值均显著低于其他各组 (P<0.05),EPA 含量显著高于其他各组 (P<0.05) 大豆磷脂组亚油酸含量最高, 显著高于鱼油组 花生油组和菜籽油组 (P<0.05) 花生油组 C16 0 和 C22 0 均显著高于其他各组 (P<0.05) 鱼油组和花生油 DHA(C22 6n-3) 含量组差异不显著 (P>0.05), 且显著高于豆油组和菜籽油组 (P<0.05) 3 结论与讨论 3.1 不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺 SOD 和 CAT 活力的影响 SOD 是清除氧自由基的重要酶类, 也是机体内唯一以 O 2- 为底物的酶, 它的作用是催化 O 2- 歧化为过氧化氢和 O 2, 维持细胞内的氧自由基处于低量无害状态 [24] 本试验发现菜籽油肌肉和肝胰腺中 SOD 活力均显著高于鱼油组, 与斑 [25] 马鱼 (Daniorerio) 的研究结果一致 相关文献报道菜粕和花生粕代替鱼粉也能提高血清 肌肉或肝胰腺 SOD 活力, 且这种增加效益与添加量有关, 添加量越高,SOD 活力越强 [26-28]
江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 12 期 269 表 5 不同脂肪源对日本沼虾卵巢脂肪酸组成的影响 脂肪酸种类 卵巢脂肪酸含量 (%) 鱼油组大豆磷脂组豆油组花生油组菜籽油组 C12 0 0.16±0.01a 0.17±0.04a 0.16±0.08a 0.23±0.07a 0.24±0.06a C13 0 0.03±0.01a 0.03±0.01a 0.02±0.02a 0.03±0.02a 0.02±0.01a C14 0 5.48±0.04a 2.95±0.66b 2.77±0.91b 3.67±0.73b 3.66±0.82b C15 0 0.72±0.04ab 0.74±0.17a 0.44±0.14bc 0.58±0.19ab 0.24±0.08c C16 0 21.30±0.28b 19.60±0.82b 20.30±2.78b 24.49±0.73a 20.77±1.42b C17 0 0.80±0.01a 0.76±0.21a 0.56±0.11ab 0.78±0.19a 0.35±0.16b C18 0 6.98±0.01c 6.98±0.84c 7.38±0.18bc 7.97±0.45ab 7.34±0.22bc C19 0 0.05±0.01a 0.06±0.04a 0.03±0.01a 0.05±0.02a 0.03±0.02a C20 0 0.23±0.02c 0.29±0.04bc 0.23±0.07c 0.42±0.13ab 0.43±0.06a C22 0 0.02±0.01c 0.06±0.01b 0.02±0.01c 0.12±0.03a 0.04±0.02bc C24 0 痕量 0.02±0.01a 痕量 0.02±0.01a 痕量 总饱和脂肪酸 35.75±0.35a 31.64±2.84b 31.89±4.32b 38.36±3.52a 33.12±1.27b C16 n-9 8.31±0.04a 6.33±1.95ab 4.88±0.87bc 5.73±2.75abc 3.35±1.39c C18 n-9 23.89±0.81bc 22.34±2.87c 25.97±0.90abc 24.37±0.96bc 27.42±1.42ab C20 n-9 2.52±0.04a 1.57±0.49b 1.70±0.29b 2.08±4.75ab 2.50±0.31a C22 n-9 1.83±1.52a 0.56±0.23a 0.54±0.01a 0.67±0.13a 0.40±0.09a C24 n-9 0.05±0.03a 0.03±0.01a 痕量 0.04±0.00a 痕量 总单不饱和脂肪酸 36.59±0.64ab 30.81±0.16c 33.09±0.25bc 32.89±0.32c 33.67±0.46bc C20 5n-3 14.75±0.29a 8.59±1.56bc 8.82±1.77b 9.38±1.83b 6.38±1.59c C22 6n-3 5.57±0.39a 3.48±0.08b 2.32±0.72c 4.88±0.79ab 2.06±0.64c n-3 20.32±0.09a 12.07±1.48bc 11.14±2.49cd 14.26±1.07b 8.44±1.79d C18 2n-6 2.12±0.59c 18.48±0.13a 14.55±0.80ab 9.32±0.68b 10.36±0.53b C20 2n-6 0.62±0.11d 1.78±0.27bc 2.41±0.31a 2.28±0.33ac 2.10±0.63abc C20 4n-6 0.10±0.06a 0.54±0.72a 0.50±0.12a 0.39±0.17a 痕量 n-6 2.83±0.76c 20.81±0.58a 17.47±0.35ab 11.99±0.87b 12.46±1.03b 总多不饱和脂肪酸 23.15±0.86bc 32.88±2.07a 28.60±2.86ab 26.25±1.79bc 20.90±1.93c n-3/n-6 7.45±1.97a 0.59±0.05b 0.76±0.51b 1.17±0.18b 0.68±0.33b 未知脂肪酸 4.51±0.11 4.67±0.29 6.42±0.19 2.50±0.20 12.31±0.73 也有文献报道, 菜籽油与鱼油相比虽然可以提高异育银鲫 (Carasiusauratusgibelio) 血清 SOD 活力, 但是与鱼油组差异不显著 [29] 上述报道的差异可能与菜籽油的添加量不同有关 CAT 是一种含铁的氧化酶, 与产生 H 2 O 2 的酶类相偶联, 使 H 2 O 2 分解为水和分子氧 本试验发现, 与鱼油组比较, 大豆磷脂 豆油花生油和菜籽油均可以提高日本沼虾肝胰腺 CAT 活力, 且大豆磷脂 豆油 和菜籽油的作用显著, 与斑点 [30] 叉尾 (LctaluruspunctatusRafinesque) 中的研究结果一致 不同脂肪源的差异实质上就是脂肪酸组成及比例的差异, 本试验中几种植物油饲料中亚油酸含量均高于鱼油组, 而鱼油组饲料中 (EPA+DHA) 含量最高 杨鸢稢等发现, 在饲料中添加亚油酸组的黄鳝 (Monopterusalbus) 血清中 CAT 活力显著高于在饲料中添加 (EPA+DHA) 组的活力 [31] 这可能是本试验中植物油能提高肝胰腺 CAT 活力的原因 3.2 肝胰腺中 SOD CAT 活力与脂肪酸含量的关系 SOD 酶活力的增强, 会减少体内氧自由基的积累, 减少不饱和脂肪酸的氧化, 提高不饱和脂肪酸的含量 本试验中发现菜籽油组肝胰腺中 SOD 力最高, 其次为花生油组, 肝胰腺中不饱和脂肪酸也是在菜籽油组含量最高, 其次为花生油组 本试验肝胰腺中 SOD 和 CAT 活力出现了不对称性, 也就是说各脂肪源组肝胰腺中 SOD 和 CAT 活力没有出现同时 增强或减弱的现象 有学者认为, 这种不对称性会引起体内氧自由基的积累, 从而使不饱和脂肪酸的氧化, 降低不饱和脂肪酸的含量 [32-33] 本试验中除了发现肝胰腺中 SOD 活力和肝胰腺中单不饱和脂肪酸含量之间的正相关性, 并没有发现 SOD 和 CAT 的不平衡性和单不饱和脂肪酸含量之间具有相关性 此假说是基于 CAT 作用于 SOD 产物 H 2 O 2 理论基础上产生的, 即 SOD 活力越高, 分解的 O 2- 越多, 产生的 H 2 O 2 也越多, 因此机体会产生越多的 CAT 来清除 H 2 O 2, 但是体内参与清除 H 2 O 2 的酶不仅仅只有 CAT, 谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px) 也具有清除 H 2 O 2 的功能 [34], 所以本试验现象可能是由于不同试验组产生不同活力的 GSH -Px 所致 3.3 不同脂肪源对日本沼虾肝胰腺和卵巢脂肪酸组成的影响 本试验中豆油组的饲料与肝胰腺 PUFA 含量均最高, 鱼油组饲料与肝胰腺的 EPA 含量最高, 上述结果表明, 日本沼虾肝胰腺中 PUFA 的组成与其饲料密切相关 与 Deering 等 [7,35] 研究结果一致 饲料中所含脂肪酸是虾类体组织脂肪酸特别是必需脂肪酸的重要来源, 饲料脂肪含量及质量将影响体组织脂肪酸组成 [36] 饲料中未检测到 C20 2n-6, 但是在每组试验虾肝胰腺和卵中均检测到数量不等的 C20 2n-6 郭志峰等在对日本沼虾不同发育阶段卵巢中脂肪酸进行了测定和比较的时
270 江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 12 期 (r 2 =0.78), 这种相关性为上述结论提供了新的证据 本试验发现鱼油组 C20 2n-6 含量最低, 卵巢和肝胰腺中含量分别为 (0.55% ±0.07%) 和 (0.62% ±0.11%), 其他各组卵巢和肝胰腺中含量均较高 (1.49% ~2.92%), 造成这种差异及该脂肪酸在卵巢发育过程中的作用有待进一步研究 试验虾肝胰腺和卵巢中的含量最高的脂肪酸均为 C18 n-9, 肝胰腺中为 26.98% ~46.30%, 卵巢中为 22 34% ~29.88% 与郭志峰等对日本沼虾卵巢中脂肪酸的 [37] 测定结果一致 斑节对虾中也有类似的报道, 且斑节对虾卵巢发育过程中 C18 1n 在肝胰腺中不断积累 [38] 表明 C18 n-9 是日本沼虾卵巢发育的重要能源物质 EPA 和 DHA 是水产动物性腺发育所需的重要营养因子, 影响着生物体的卵巢发育 卵子孵化和幼体成活力 [39-41] 本试验结果显示, 鱼油组肝胰腺 EPA 含量和卵巢 DHA 含量显著高于其他各组 结果表明, 虾体肝胰腺和卵巢中的 EPA 和 DHA 与饲料中的含量差异不完全一致, 比如豆油饲料组 DHA 含量最少, 肝胰腺和卵巢中 DHA 含量均分别为菜籽油组含量最低 表明 EPA 与 DHA 的吸收不仅和其在饲料中的含量有关, 而且与饲料中各脂肪酸的配比有关 [4], 虾体具有合成少量 DHA 和 EPA 的能力 [42-43], 可能也是造成这种差异的原因之一 本试验中植物油组 ( 大豆磷脂 豆油 花生油和菜籽油 ) [44] 肝胰腺和卵巢亚油酸显著高于鱼油组, 与虹鳟的研究结果 一致 有学者认为, 植物油可以将鱼体内亚油酸延长并去饱和为 n-3pufa(epa 和 DHA) [45-46] 本研究发现植物油组 ( 大豆磷脂 豆油 花生油和菜籽油 ) 肝胰腺和卵巢中 EPA 显著低于鱼油,DHA 与鱼油组差异不显著, 本研究结果与虹鳟 (Oncorhynchusmykis) 和大西洋鲑鱼 (Salmosalar) 中的研究 [47-48] 结果一致 表明虾体内可能不具有将亚油酸延长并去饱和为 EPA 和 DHA 的作用, 也有可能因为日本沼虾卵巢发育需要较多的亚油酸 据相关文献报道, 在卵巢发育过程中, 日本沼虾卵巢和肝胰腺中 EPA 的含量逐渐下降, 而亚油酸含量逐渐上升 [38] 综上所述, 大豆磷脂可以提高卵巢亚油酸的含量, 豆油可以提高肝胰腺 n-6pufa 和卵巢亚油酸的含量, 花生油可以提高卵巢 DHA 和 n-3/n-6 的值, 菜籽油可以提高肝胰腺 MUFA 和卵巢 n-3mufa 含量 其中亚油酸 n-6pufa DHA 和 n-3pufa 对甲壳动物免疫机能和繁殖性能均具有一定的促进作用 [49-50] 因此, 大豆磷脂 豆油 花生油与菜籽油作为日本沼虾备选脂肪源均具有一定的积极作用, 其中大豆磷脂和豆油的作用相似, 但大豆磷脂会降低肝胰腺 SOD 活力, 花生油会降低肝胰腺 CAT 活力, 与此相反, 豆油可以提高肝胰腺 CAT 活力, 菜籽油可以提高肌肉和肝胰腺中 SOD 和 CAT 活力 因此, 豆油和菜籽油在日本沼虾饲料中可以一定程度上代替鱼油, 具体替代方案还需要结合日本沼虾生长等指标进一步研究阐明 候, 发现日本沼虾卵巢进入生长期开始出现 C20 2n-6 [37], 本试验虾卵巢发育处于 Ⅲ 期, 即为郭志峰等所指生长期 另外有研究表明, 日本沼虾肝胰腺是卵巢发育的重要营养源 [15-16], 本试验研究发现卵巢 (y) 和肝胰腺 (x) 中 C20 2n- 6 含量有着较强的相关性 :y=-0.257x 2 +1.562x-0.083 参考文献 : [1] 倪娟, 赵晓勤, 陈立侨, 等. 日本沼虾 4 种群肌肉营养品质的比较 [J]. 中国水产科学,2003,10(3):212-215. [2] 郭建林, 陈建明, 孙丽慧, 等. 日本沼虾幼虾对饲料中锌的需求量 [J]. 动物营养学报,2013,25(3):661-668. [3] 李爱杰. 水产动物营养与饲料学 [M]. 北京 : 中国农业出版社, 1996:36-46. [4]TurchiniGM,MailerRJ.Rapeseed(canolaoil)andothermonoun saturatedfatyacid-richvegetableoils[m]//turchinigm,ngw K,TocherDR.Fishoilreplacementandalternativelipidsourcesin aquaculturefeeds.bocaraton:crcpres,2010:161-208. [5]PackagedFacts.Globalomega-3marketsetforongoing15% ~ 20% growth:report[r/ol].[2014-07-20].htp://www.nu traingredients.com/consumer-trends/global-omega-3-market- set-for-ongoing-15-20-growth-report,2011. [6]TurchiniG M,TorstensenBE,NgW K.Fishoilreplacementin finfishnutrition[j].aquaculture,2009,1(1):10-57. [7]DeeringM J,FielderDR,HewitDR.Growthandfatyacidcompo sitionofjuvenileleaderprawns,penaeusmonodon[j].aquaculture, 1997,151:131-141. [8]WenXiaoBo,ChenLiQiao,ZhouZhongLiang,etal.Reproduction responseofchinesemiten-handedcrab(eriocheirsinensis) fed diferentsourcesofdietarylipid[j].comparativebiochemistryand Physiology-PartA:Molecular& IntegrativePhysiology,2002,131 (3):675-681. [9]DeshimaruO,KurokiK,YoneK.StudiesonapurifiedDietforprawn XV:thecompositionandlevelofdietarylipidappropriateforgrowthof prawn[j].buljpnsocscifish,1979,45:591-594. [10] 李超春, 周歧存, 刘楚吾. 虾蟹类脂类营养研究进展 [J]. 湛江海洋大学学报 : 自然科学版,2005,25(1):73-79. [11]AKanazaWa,TeshimaS,TokiwaS,etal.Esentialfatyacidsin thedietofprawn:Ⅱ.efectofdocosahexaenoicacidongrowth[j]. BulJpnSocSciFish,1979,45:1141-1153. [12]XuXL,JiW J,CastelJD,etal.Thenutritionalvalueofdietary n-3andn-6fatyacidsforthechineseprawnpenaeuschinensis [J].Aquaculture,1993,118:277-285. [13]GlencrosBD,SmithDM,TonksM L,etal.Areferencedietfor nutritionalstudiesoftheprawn,penaeusmonodon[j].aquaculture Nutrition,1999,5:33-40. [14]ReadGL.TheresponseofPenaeusindicus(Crustacea:Penocidea) topurifiedandcompounddietsofvaryingfatyacidcomposition[j]. Aquaculture,1981,24:245-256. [15] 高祥刚, 刘红, 徐佳念, 等. 日本沼虾卵黄蛋白原合成部位的初步研究 [J]. 生物技术通报,2006( 增刊 ):438-444. [16] 赵卫红. 日本沼虾卵黄蛋白原代谢相关基因的克隆和表达研究 [D]. 上海 : 华东师范大学,2010:30-31. [17] 俞冰如, 沈. 日本沼虾最适蛋白质, 脂肪含量及能量蛋白比的研究 [J]. 水产学报,1990,14(4):321-327. [18] 谢国驷, 蔡永祥, 徐维娜, 等. 饲料蛋白水平对日本沼虾生长 消化酶和免疫酶的影响 [J]. 江苏农业学报,2007,23(6):612-617. [19] 张凌燕, 叶金云, 王友慧, 等. 配合饲料中不同蛋白质水平对日本沼虾生长的影响 [J]. 上海水产大学学报,2008,17(6):668-673.
江苏农业科学 2014 年第 42 卷第 12 期 271 [20] 秦钦, 蔡永祥, 陈校辉, 等. 不同规格日本沼虾饲料蛋白最适含量研究 [J]. 饲料研究,2010(4):53-55. [21] 胡盼, 黄旭雄, 郭腾飞, 等. 玉米蛋白粉部分替代鱼粉对日本沼虾生长和肌肉组成的影响 [J]. 上海海洋大学学报,2011,20 (2):230-237. [22]GuaryJC,KayamaM,MurakamiY,etal.Theefectsofafatfree dietandcompoundeddietssupplementedwithvariousoilsonmolt growthandfatyacidcompositionofprawn,penaeusjaponicus[j]. Aquaculture,1976,7:245-254. [23]KanazawaA,TeshmiaS,TokwiaS.Nutritionalrequirementsof prawnvi.efectofdietarylipidsongrowth[j].buljpnsocsci Fish,1977,43:849-856. [24] 张亚娟. 几种化合物对虾类抗氧化酶系统的影响与毒性作用 [D]. 保定 : 河北大学,2003:8-10. [25] 何菲. 芥菜籽对斑马鱼动脉粥样硬化的预防作用 [D]. 广州 : 南方医科大学,2012. [26] 韩斌, 华雪铭, 周洪琪, 等. 玉米蛋白粉替代部分鱼粉对凡纳滨对虾抗病力及非特异性免疫力的影响 [J]. 安徽农业科学, 2009,37(8):3566-3569. [27] 伍代勇, 张宝彤, 郑石轩, 等. 棉籽粕和菜籽粕对凡纳滨对虾生长 非特异免疫力和体成分的影响 [J]. 水产养殖,2009(23): 27-30. [28] 张加润, 林黑着, 黄忠, 等. 饲料中用混合植物蛋白并添加氨基酸替代鱼粉对斑节对虾生长及免疫力的影响 [J]. 南方水产科学,2013,9(5):44-50. [29] 陈家林, 韩冬, 朱晓鸣, 等. 不同脂肪源对异育银鲫的生长 体组成和肌肉脂肪酸的影响 [J]. 水生生物学报,2011,35(6): 988-997. [30] 唐威. 不同脂肪源在斑点叉尾饲料中应用的研究 [D]. 长沙 : 湖南农业大学,2010:18-37. [31] 杨鸢稢, 邴旭文, 徐增洪. 不饱和脂肪酸对黄鳝部分非特异性免疫和代谢指标的影响 [J]. 中国水产科学,2008,15(4): 600-605. [32] 沈文飚, 叶茂炳, 徐朗莱, 等. 小麦旗叶自然衰老过程中清除活性氧能力的变化 [J]. 植物学报,1997,39(7):634-640. [33] 陈少裕. 膜脂过氧化对植物细胞的伤害 [J]. 植物生理学通讯, 1991,27(2):84-90. [34]WinstonG W,diGiulioR T.Prooxidantandantioxidantmecha nismsinaquaticorganisms[j].aquatictoxicology,1991,19:137-161. [35] 唐黎, 施晓丽, 安苗, 等. 不同脂肪酸含量及比例对黄颡鱼幼体组成影响的研究 [J]. 河北渔业,2010(10):1-4. [36] 高淳仁, 雷霁霖. 饲料中氧化鱼油对真鲷幼鱼生长存活及脂肪酸组成的影响 [J]. 上海水产大学学报,1999,8(2):125-130. [37] 郭志峰, 康现江, 蔺智强, 等. 日本沼虾卵巢发育过程中脂肪酸变化的研究 [J]. 分析化学,2003,31(4):433-436. [38] 黄建华, 周发林, 林黑着, 等. 池塘养殖斑节对虾卵巢发育过程 中的脂肪酸组成及变化 [J]. 上海水产大学学报,2007,16(4): 341-346. [39]IzquierdoM S,Fernández-PalaciosH,TaconA.Efectofbrood stocknutritiononreproductiveperformanceoffish[j].aquaculture, 2001,197(1/2/3/4):25-42. [40]LingS,KuahMK,MuhammadTT,etal.EfectofdietaryHUFAon reproductiveperformance,tisuefatyacidprofileanddesaturaseand elongasemrnainfemaleswordtailxiphpphorusheleri[j].aqua culture,2006,261:204-214. [41]ThompsonKR,BaileyTJ,MetsLS,etal.Growthresponseand fatyacidcompositionofjuvenileredclawcrayfish(cheraxquadricari natus)feddiferentsourcesofdietarylipid[j].aquaculturenutri tion,2010,16:604-615. [42]ReighRC,StickneyRR.Efectsofpurifieddietaryfatyacidson thefatyacidcompositionoffreshwatershrimp,macrobrachiumrosen bergi[j].aquaculture,1989,77(2/3):157-174. [43]KimYC,RomanoN,LeeKS,etal.Efectsofreplacingdietaryfish oilandsquidliveroilwithvegetableoilsonthegrowth,tisuefaty acidprofileandtotalcarotenoidsofthegiantfreshwaterprawn,macro brachiumrosenbergi[j].aquacultureresearch,2013,44:1731-1740. [44]AzarmHM,KenariAA,HedayatiM.Efectofdietaryphospholipid sourcesandlevelsongrowthperformance,enzymesactivity,cholecys tokininand lipoprotein fractionsofrainbow trout(oncorhynchus mykis)fry[j].aquacultureresearch,2013,44(4):634-644. [45]SargentJG,BelL,McevoyD,etal.Recentdevelopmentsinthe esentialfatyacidnutritionoffish[j].aquaculture,1999,177: 191-199. [46]HuangSSY,FuCHI,HiggsDA,etal.Efectsofdietarycanola oillevelongrowthperformance,fatyacidcompositionandionoregula torydevelopmentofspringchinooksalmonpar,oncorhynchustshaw ytscha[j].aquaculture,2008,274(1):109-117. [47]GreeneDS,SelivonchickDP.Efectsofdietaryvegetable,animal andmarinelipidsonmusclelipidandhematologyofrainbowtrout (Oncorhynchusmykis)[J].Aquaculture,1990,89:165-182. [48]Waagb R,SandnesK,TorisenOJ,etal.Chemicalandsensory evaluationoffiletsfromatlanticsalmon(salmosalar)fedthreelevel ofn-3polyunsturatedfatyacidsandtwolevelsofvitamin[j].food Chemistry,1993,46:361-366. [49]CavaliRO,LavensP,SorgeloosP.PerformanceofMacrobrachium rosenbergibroodstockfeddietswithdiferentfatyacidcomposition [J].Aquaculture,1999,179(1/4):387-402. [50]MaJJ,ShaoQJ,XuZR,etal.Efectofdietaryn-3highlyunsat uratedfatyacidsongrowth,bodycompositionandfatyacidprofiles ofjuvenileblackseabream,acanthopagrusschlegeli(bleeker)[j]. JournaloftheWorldAquacultureSociety,2013,44(3):311-325.