National Institute of Diagnostics and Vaccine Development in Infectious Diseases & State Key Laboratory of Molecular Vaccinology and Molecular Diagnostics, Xiamen University The role of quantitative anti-hbc level in chronic HBV infection 慢 性 乙 肝 感 染 中 的 核 心 抗 体 水 平 厦 门 大 学, 公 共 卫 生 学 院 国 家 传 染 病 诊 断 试 剂 与 疫 苗 工 程 技 术 研 究 中 心 分 子 疫 苗 学 与 分 子 诊 断 学 国 家 重 点 实 验 室 袁 权 20150720
Global burden of HBV infection A B C Data from: A-B:http://www.who.int/csr/disease/hepatitis/en/. C: http://www.thecarexofoundation.org
Natural history of chronic HBV infection Nature Immunology, 2005 (5) modified
Clinically-used HBV diagnostic markers
Clinically-used HBV diagnostic markers 乙 肝 两 对 半 及 HBV DNA 商 品 化 检 测 试 剂 发 展 成 熟, 性 能 优 异, 已 广 泛 应 用 于 临 床 核 酸 检 测 及 测 序 的 发 展, 已 能 实 现 但 尚 不 普 及? 反 映 宿 主 免 疫 应 答 强 弱 的 临 床 指 标, 用 于 慢 乙 肝 感 染 者 的 管 理 及 指 导 临 床 治 疗??
HBV 感 染 中 的 Anti-HBc Anti-HBc 的 存 在 指 示 曾 经 或 正 被 HBV 感 染 低 流 行 区 用 于 血 液 安 全 筛 查 定 性 Anti-HBc 已 经 使 用 超 过 35 年 受 方 法 学 的 限 制,Anti- HBc 定 量 的 意 义 目 前 所 知 甚 少 从 定 量 角 度 对 Anti-HBc 进 行 再 认 识 的 意 义 NEJM, 2005
Hypothesis Liver Inflammation marker: ALT AST histology CD4+ T-Cell CD8+ T-Cell B-cell Virion load marker: qhbv DNA qhbsag qhbeag cccdna HBV HBV HBV HBV HBV HBV HBV Host response marker: Anti-HBs Anti-HBe Anti-HBc T-cell activity... Qualitative to Quantitative?
第 一 部 分. Anti-HBc 定 量 方 法 学 1.1 Anti-HBc 免 疫 检 测 的 三 种 原 理 1. 竞 争 抑 制 法 HBcAb presented in specimen will block the binding between conjugated anti-hbc and coated HBcAg, so reduced reaction will indicate positive result. HRP 2. 间 接 法 rhbcag coated in the wells will capture the HBcAb in the specimen,then conjugated anti-human Abs will indicate the any presented human Abs. HRP 3. 夹 心 法 Coated r HBcAg and conjugated rhbcag will bind to the HBcAb presented in the specimen. Then the conjugated signal (such as :HRP) will indicated any presented HBcAb. HRP Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Recombinant HBcAg Anti-Human Abs HRP Conjugated signal (such as HRP) HBcAb in specimen Anti-HBc Abs
1.2 Anti-HBc 免 疫 检 测 的 方 法 学 进 化 竞 争 法 灵 敏 度 较 低 重 现 性 不 佳 不 适 合 定 量 检 测 1 雅 培 Axysm 2 罗 氏 Elecsys 间 接 法 灵 敏 度 提 高 重 现 性 提 高 可 用 于 定 量 检 测 1 雅 培 Architect ( 无 定 量 检 测 模 式 ) 夹 心 法 灵 敏 度 / 特 异 性 更 佳 特 异 性 更 高 适 合 定 量 检 测 1 Our shbcab SFDA/2010/3401232
1.3 Anti-HBc 双 抗 原 夹 心 检 测 方 法 CpC cag 1mg/ml cag-hrp CpD 高 度 稳 定 的 重 组 核 心 抗 原, 标 记 后 仍 然 维 持 良 好 的 颗 粒 抗 原 性 是 实 现 双 抗 原 夹 心 法 检 测 HBcAb 的 基 础 Clin Vac Immno, Mar. 2010, p. 464 469
Anti-HBc 特 异 性 单 抗 Anti-HBe 特 异 性 单 抗 HBc/HBe 交 叉 反 应 单 抗 Clin Vac Immno, Mar. 2010, p. 464 469
Correlation between S-HBcAb and Abbott I2000 夹 心 法 Anti-HBc 试 剂 在 不 同 人 群 中 与 Abbott i2000 的 符 合 率 在 96.4~100% 两 者 不 符 合 的 标 本 经 单 抗 中 和 实 验 结 合 临 床 背 景 确 认, 证 实 夹 心 法 Anti-HBc 具 有 更 强 的 灵 敏 度 / 特 异 性 Clin Vac Immno, Mar. 2010, p. 464 469
Anti-HBc quantitative ELISA WT shbcab AxSYM Core Architect anti-hbc 1.0 IU/mL 20/20 20/20 20/20 0.5 IU/mL 20/20 20/20 20/20 0.25 IU/mL 20/20 20/20 0/20 0.125 IU/mL 20/20 9/20 0/20 0.0625 IU/mL 14/20 0/20 0/20 0 IU/mL 0/20 0/20 0/20
The quantifiable range of qanti-hbc ELISA at single testing 2 3 2 2 24 tests 2 1 Measurement signal (OD value) 2 0 2-1 2-2 2-3 2-4 2.50 IU/mL R 2 =0.99 Anti-HBc titer(iu/ml)= (Signal 0.825-0.012) 2-5 2-6 0.08 IU/mL D-fold 2-7 2-6 2-5 2-4 2-3 2-2 2-1 2 0 2 1 2 2 2 3 2 4 2 5 Anti-HBc titer (IU/mL)
Intra- and inter-assay reproducibility of qanti-hbc T 4 4 2 2.500 IU/mL 5.000 IU/mL 2 2.500 IU/mL 5.000 IU/mL Measurement signal (OD value) 1 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.03125 0.0625 0.156 IU/mL 0.125 0.312 IU/mL 0.25 0.625 IU/mL 0.5 1.250 IU/mL 1 Con.C(IU/mL) CV(%) 0.156 10.1 0.313 7.2 0.625 3.5 1.250 1.9 2.500 2.8 5.000 2.8 2 4 8 16 Measurement signal (OD value) 1 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.03125 0.0625 0.625 IU/mL Con.C(IU/mL) CV(%) 0.156 10.5 0.312 IU/mL 0.313 10.1 0.156 IU/mL 0.625 10.8 1.250 10.9 2.500 7.3 5.000 4.4 0.125 0.25 0.5 1.250 IU/mL 1 2 4 8 16 Anti-HBc titer (IU/mL) Anti-HBc titer (IU/mL) Intraassay CV Inter-assay CV
The producibility of two independent qanti-hbc T 6.0 5.5 Anti-HBc titer -Test1 log10(iu/ml) 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 y=0.9904x R 2 =0.988 104 份 临 床 标 本 两 次 独 立 定 量 一 致 性 R2>0.98, 平 均 定 量 偏 差 <10% 2.0 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 Anti-HBc titer - Test2 (log10 IU/mL)
第 二 部 分. 慢 性 HBV 感 染 自 然 历 史 过 程 中 的 Anti-HBc 水 平 Anti-HBc level in the natural history of HBV infection p=0.22 p=0.20 6.0 p<0.001 p<0.001 Anti-HBc level log10 (IU/mL) 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0.0 p<0.001-1.0 PBI OBI IT IC LR ENH Numbers: 535 56 108 209 148 133 HBsAg: negative negative positive positive positive positive HBeAg: negative negative positive positive negative negative Viral load: negative very low very high high low high ALT: normal normal normal elevated normal elevated
The viral antigens are the essential factors to stimulate and maintain the qanti-hbc 1.0 0.9 0.8 optimal cutoff: 89 IU/mL Frequency PBI N=350 CHB N=488 Sensitivity 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 AUROC=0.991(0.986-0.995) p<0.0001 Sensitivity: 95.8% Specificity: 98.0% 0.0 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1-Specificity
The qanti-hbc in occult HBV infection 1.0 0.9 0.8 0.7 Sensitivity 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 optimal cutoff: 6.6 IU/mL AUROC=0.723(0.651-0.795) p<0.0001 Sensitivity: 60.7% Specificity: 75.3% 0.0 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1-Specificity
The qanti-hbc is determined by the host immune status in CHB 1.0 Sensitivity 0.8 0.6 0.4 optimal cutoff: 7,400 IU/mL 84% 16%? 0.2 AUROC=0.918 p<0.0001 0.0 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1-specificity Sensitivity: 87.3% Specificity: 83.5% Anti-HBc 定 量 水 平 用 于 判 断 CHB 患 者 是 否 处 于 肝 炎 活 动 / 免 疫 激 活 状 态 的 诊 断 效 能
Anti-HBc level in the natural history of HBV infection The qanti-hbc correlates with ALT when ALT<5 ULN in CHB 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 3.8 3.6 3.4 3.2 3.0 2.8 p trend <0.001 p=0.95 Anti-HBc level log 10 (IU/mL) mean ± 95%CI ~29 folds 0.5 ULN(n=91) 0.5~1 ULN(n=171) 1~2 ULN(n=76) 2~5 ULN(n=99) 5~20 ULN(n=96) >20 ULN(n=65) ALT stratum Song LW, et al. Clin Microbiol Infect. 2015 Feb;21(2):197-203
ALT (U/L) HBs Ag log 10 (IU/mL) ALT (U/L) HBs Ag log 10 (IU/mL) 40 28 20 14 10 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 R=0.277 p<0.001 3.5 R=-0.268 p<0.001 3.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 Anti-HBc log10 (IU/mL) 40 28 20 14 A C Immune tolerance phase R=0.342 p<0.001 R=-0.123 p=0.206 Low-replicative phase 10 R=0.149 p=0.071 7 5.0 4.5 R=0.324 4.0 p<0.001 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 Anti-HBc log10 (IU/m L) 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 Anti-HBc log10 (IU/mL) R=0.212 p=0.010 40 28 20 14 5 10.0 9.0 8.0 7.0 6.0 56 40 28 20 14 10 7 4.0 3.0 2.0 1.0 R=-0.164 p=0.046 0.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 Anti-HBc log10 (IU/mL) AST (U/L) HBV DNA log10 (IU/mL) AST (U/L) HBV DNA log10 (IU/mL) ALT (U/L) ALT (U/L) 5120 2560 1280 HBs Ag log 10 (IU/mL) 640 320 160 80 40 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 R=0.314 p<0.001 R=0.381 p<0.001 11.0 10.0 8.0 7.0 4.0 1.0 R=-0.297 R=-0.141 3.0 p<0.001 p=0.041 0.0 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 2.0 Anti-HBc log10 (IU/mL) Anti-HBc log10 (IU/mL) 5120 2560 1280 HBs Ag log 10 (IU/mL) 640 320 160 80 40 6.0 5.0 4.0 B D R=0.300 p<0.001 Immune clearance phase HBeAg-negative hepatitis phase R=0.348 p<0.001 R=0.153 p=0.079 3.0 7.0 2.0 6.0 1.0 5.0 0.0 R=-0.047 4.0 p=0.588 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 3.0 Anti-HBc log10 (IU/mL) Anti-HBc log10 (IU/mL) 5120 2560 1280 640 320 160 80 40 9.0 6.0 5.0 2560 1280 640 320 160 80 40 20 10.0 9.0 8.0 AST (U/L) HBV DNA log10 (IU/mL) AST (U/L) HBV DNA log10 (IU/mL)
The longitudinal cohort for CHB natural course 多 因 素 GEE 分 析 显 示 qanti- HBc 与 ALT 呈 纵 向 正 相 关 免 疫 耐 受 期 患 者 ( 如 A) 的 qanti-hbc 可 长 期 低 水 平 在 肝 炎 活 动 时,ALT 与 Anti- HBc 几 乎 同 时 升 高, 前 者 通 常 比 后 者 早 3-8 周 达 到 峰 值, 但 在 某 些 情 况 下,Anti- HBc 也 可 能 先 于 或 与 ALT 同 时 达 到 峰 值 在 肝 炎 恢 复 期,Anti-HBc 在 ALT 复 常 后 12-20 周 方 能 回 到 基 线 水 平
Is qanti-hbc level a specific marker for HBV induced liver disease? HBV infection Liver desease Hepatitis Other factor induced liver damage metabolic disorder Drug Other hepatitis virus
Distribution of Total Anti-HBc and Anti-HBc IgM levels in the different groups of HBV carriers Total-Anti-HBc Anti-HBc-IgM 100 p=0.86 p=0.052 p=0.055 p<0.001 Anti-HBc-IgM (S/CO) 10 1 0.1 0.01 IC IT eag(+) CHB eag(-) CHB SVR EOF HDV HCC 1st d HCC ES Yuan Q, et al.plos One. 2015 Jun 26;10(6):e0130209.
Distribution of Total Anti-HBc and Anti-HBc IgM levels in the different groups of HBV carriers Total-Anti-HBc Anti-HBc-IgM
Correlation between αhbc, αhbc-igm and other parameters 100.00 IgMantiHBc S/CO 10.00 1.00 0.10 R² = 0.4173 0.01 10 100 1000 10000 100000 1000000 Anti HBc IU/ml Parameter Total-Anti-HBc Anti-HBc-IgM r p r p ALT 0.351 <0.001 0.185 0.008 HBsAg 0.305 <0.001 0.123 0.075 HBV DNA 0.654 <0.001 0.135 0.050
ROC analysis for distinguish HBV inactive carrier and CHB patients ROC analysis for distinguish end of treatment CHB patients with sustained response to antiviral therapy versus baseline untreated CHB AUC Cut off sensitivity specificity AUC Cut off sensitivity specificity Total- Anti-HBc 0.947 12000 81.2% 94.4% Total- Anti-HBc 0.928 11000 88.6% 83.3% Anti-HBc- IgM 0.915 0.2 77.3% 97.2% Anti-HBc- IgM 0.871 0.18 86.8% 80.3%
第 三 部 分. qanti-hbc 预 测 治 疗 应 答 的 研 究 Derivation cohorts 队 列 A: 阿 德 福 韦 酯 治 疗 队 列 49 例 治 疗 前 ALT>2 ULN 的 HBeAg(+) 病 人 ADV(10mg/day) 治 疗 96 周, 停 药 后 随 访 12 周 应 答 定 义 : 随 访 终 点 HBeAg 血 清 学 转 换 合 作 单 位 : 首 都 医 科 大 学 附 属 佑 安 医 院 队 列 B: 长 效 干 扰 素 治 疗 队 列 48 例 治 疗 前 ALT>2 ULN 的 HBeAg(+) 病 人 Pegasys, 180ug/week, 治 疗 24 周, 停 药 后 随 访 24 周 应 答 定 义 : 随 访 终 点 HBeAg 血 清 学 转 换 合 作 单 位 : 台 湾 大 学 附 属 医 院 Yuan Q, et al. Gut. 2013 Jan;62(1):182-4.
3.1.1 The Baseline Characteristics Cohort A Cohort B No 49 48 Treatment strategy ADV -96 weeks Pegasys -24 weeks Age, yrs, 35 (26~48) 35 (15~57) Gender, males/females 44/5 35/13 Genotype, B/C 11/38 29/19 ALT, U/L, 110 (44~402) 168 (32~626) HBV DNA, log10 copies/ml 7.58 (3.97~9.29) 7.55 (3.44~9.59) HBsAg, log10 IU/ml 4.44 (2.35~5.47) 4.06 (1.53~5.35) Anti-HBc-IgM, S/CO value 2.10(0.31~12.7) 1.78 (0.25~12.2) Anti-HBc, log10 IU/ml, 4.29 (3.08~5.11) 3.98 (2.41~5.36)
3.1.2 To predict SR using the baseline Characteristics ADV-cohort Characteristics SR(+) SR(-) Univariate p value Multivariate p value No. 9 40 -- -- Age, yrs 35±4 36±6 0.87 0.98 Gender, males/females 7/2 37/3 0.45 0.28 Genotype, B/C 2/7 9/31 0.99 0.81 ALT, U/L 170±88 137±79 0.28 0.41 Ns HBV DNA, log10 copies/ml 7.03±1.40 7.65±1.13 0.16 0.14 HBsAg, log10 IU /ml 4.32±0.16 4.39±0.65 0.78 0.59 Anti-HBc-IgM, S/CO value 3.13±1.39 2.51±2.49 0.47 0.90 Anti-HBc, log10 IU/mL 4.58±0.28 4.15±0.42 0.005 0.025
3.1.2 To predict SR using the baseline Characteristics Pegasys-cohort Characteristics SR(+) SR(-) Univariate p value Multivariate p value No. 23 25 -- -- Age, yrs 34±11 36±10 0.54 0.70 Gender, males/females 17/6 18/7 0.88 0.82 Genotype, B/C 15/8 14/11 0.52 0.69 ALT, U/L 198±129 213±149 0.71 0.37 Ns HBV DNA, log10 copies/ml 7.64±0.92 7.04±1.61 0.12 0.13 HBsAg, log10 IU /ml 4.01±0.42 3.92±1.07 0.70 0.13 Anti-HBc-IgM, S/CO value 3.38±2.85 2.72±3.43 0.47 0.64 Anti-HBc, log10 IU/mL 4.32±0.66 3.81±0.68 0.011 0.021
3.1.3 ROC analyses for predicting SR in derivation cohorts Sensitivity Sensitivity 1.0 0.8 0.6 0.4 optimal cutoff: 29000 IU/mL Anti-HBc AUROC Anti-HBc 0.811 0.004 ALT 0.589 0.225 HBV DNA 0.631 0.366 ALT HBsAg 0.597 0.409 0.2 HBV DNA HBsAg Anti-HBc-IgM 0.725 0.036 Anti-HBc-IgM 0.0 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.0 0.8 0.6 0.4 optimal cutoff: 9000 IU/mL Anti-HBc AUROC Anti-HBc 0.710 0.013 ALT 0.511 0.893 HBV DNA 0.603 0.223 ALT HBsAg 0.563 0.451 0.2 HBV DNA HBsAg Anti-HBc-IgM 0.617 0.164 Anti-HBc-IgM 0.0 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1-specificity ADV-cohort Pegasys-cohort p p 优 化 Cutoff 值 =29000 IU/mL 灵 敏 度 : 77.8% 特 异 性 : 77.5% 优 化 Cutoff 值 =9000 IU/mL 灵 敏 度 : 77.8% 特 异 性 : 77.5%
3.1.4 Predicting SR using baseline qanti-hbc ADV-cohort 无 论 ALT 是 否 >5 ULN, 基 线 Anti-HBc 较 高 的 病 人 接 受 ADV 治 疗 总 是 具 有 更 高 (RR=7.22) 的 治 疗 应 答 率
3.1.4 Predicting SR using baseline qanti-hbc Pegasys-cohort 无 论 ALT 是 否 >5 ULN, 基 线 Anti-HBc 较 高 的 病 人 接 受 Pegasys 治 疗 总 是 具 有 更 高 (RR=2.10) 的 治 疗 应 答 率
3.1.4 Predicting SR using baseline qanti-hbc
3.2 The Validation studies 143 例 HBeAg(+) 病 人 队 列 1: 长 效 干 扰 素 治 疗 队 列 长 效 干 扰 素 治 疗 治 疗 48 周, 停 药 后 随 访 24 周 应 答 定 义 : 随 访 终 点 SR VR CR 合 作 单 位 : 北 京 大 学 附 属 第 一 医 院, 王 贵 强 教 授 队 列 2: 长 效 干 扰 素 + 替 比 夫 定 治 疗 队 列 231 例 HBeAg(+) 病 人 接 受 PEG-IFN,560HBeAg(+) 病 人 接 受 NUC 长 效 干 扰 素 治 疗 48-96 周, 停 药 后 随 访 24 周 Ldt/ADV 治 疗 104 周, 停 药 后 随 访 24 周 应 答 定 义 : 随 访 终 点 SR VR 合 作 单 位 : 南 方 医 科 大 学 附 属 南 方 医 院, 侯 金 林 教 授 Hou FQ, et al.theranostics 2015; 5(3): 218-226. Fan R, et al. Gut 2015;0:1 8.
3.2.1 The Validation cohort 2 : Peg-IFN cohort (from Prof.Wang Guiqiang) 派 格 宾 90ug 0 week 12 week 24 week 48 week 72week 派 格 宾 135ug 派 格 宾 180ug 派 罗 欣 180ug 治 疗 应 答 定 义 : 治 疗 随 访 血 清 学 应 答 (SR) 随 访 终 点 HBeAg 血 清 学 转 换 病 毒 学 应 答 (VR) 随 访 终 点 HBV DNA<200 IU/mL 联 合 应 答 (CR) 随 访 终 点 HBeAg 阴 转 并 且 HBV DNA<2000 IU/mL
205 patients 3 patients excluded for HBeAg negative 2 patients excluded for without serum sample 8 patients excluded for HBV DNA<10 5 IU/mL 10 patients excluded for ALT<1.5 ULN 182 patients 38 patients excluded for without follow up at week 72 4 patients excluded for inadequate data at week 72 140 patients 不 同 治 疗 组 应 答 率 无 显 著 差 异, 因 此 将 这 四 组 治 疗 组 合 并 在 一 起 进 行 分 析
3.2.1 Associations of qanti-hbc and other HBV parameters
3.2.1 Associations of qanti-hbc and salt A B qanti-hbc (log 10 IU/mL) qanti-hbc (log 10 IU/mL) Baseline 8 r=0.28 7 p<0.001 6 5 4 3 2 1 0 6 7 8 9 10 11 ALT (log 2 U/L) Overall 8 7 r=0.42 p<0.0001 6 5 4 3 2 1 0 3 4 5 6 7 8 9 10 11 ALT (log 2 U/L) C HBV DNA (Log 10 IU/mL) HBsAg (Log 10 IU/mL) ALT (Log 2 U/L) 8 7 6 5 4 3 qanti-hbc ALT HBsAg HBV DNA HBeAg 0 week 12 week 24 week 48 week 72 week Parameters correlated with qanti-hbc during treatment and follow up using GEE(GeneralizedEstimation Equations) analysis Parameter Beta p ALT 0.174 <0.001 HBV DNA 0.044 0.056 HBsAg 0.031 0.334 HBeAg -0.044 0.200 5 4 3 2 1 HBeAg(log 10 S/CO) qanti-hbc(log 10 IU/mL)
3.2.1 Associations of baseline factors and treatment response SR VR CR Baseline Univariate Multivariate * Univariate Multivariate * Univariate Multivariate * parameters OR P OR P OR P OR P OR P OR P Gender, M/F 0.66 0.305 - - 0.47 0.083 - - 0.37 0.019 - - Age, yrs 0.96 0.130 - - 0.91 0.021 - - 0.94 0.066 - - HBsAg, Log 10 IU/mL 0.49 0.041 - - 0.32 0.004 0.38 0.017 0.34 0.005 0.40 0.019 HBV DNA, Log 10 IU/mL 0.74 0.188 - - 0.50 0.011 - - 0.49 0.008 - - HBeAg, Log 10 S/CO 0.24 <0.001 0.28 0.001 0.66 0.225 - - 0.44 0.013 - - Anti-HBc, Log 10 IU/mL 7.86 0.001 5.73 0.008 7.13 0.004 6.01 0.010 5.45 0.007 4.56 0.019 HBV genotype, B/C 1.24 0.579 - - 1.35 0.471 - - 1.00 0.993 - - ALT, U/L 1.01 0.016 - - 1.00 0.081 - - 1.00 0.08 - - ALT strata, /<5ULN 2.10 0.055 - - 2.36 0.04 - - 2.04 0.081 - - AST, U/L 1.01 0.008 - - 1.01 0.029 - - 1.01 0.028 - - Treatment group, 0.79 0.158 - - 0.77 0.146 - - 1.25 0.211
3.2.1 Treatment response v.s. qanti-hbc strata Rate % 60 50 40 30 20 10 7.7% (1/13) SR VR CR 18.2% (2/11) 9.1% (1/11) 18.2% (2/11) 21.2% (14/66) 15.2% (10/66) 41.9% (13/31) 32.3% (10/31) 38.7% (12/31) 52.6% (10/19) 47.4% (9/19) 42.1% (8/19) 0 < 0.5 0.5~1 1~3 3~5 >5 Baseline qanti-hbc(10000 IU/mL)
3.2.1 Baseline qanti-hbc predicts EOF SR A Baseline qanti-hbc <30,000 IU/mL N=90 N=17 (18.9%) 140 patients SR(+) Baseline qanti-hbc 30,000 IU/mL N=50 N=23 (46.0%) RR(95%CI): 1.00 2.44(1.44~4.11)*** B HBc-low N=66 N=11 (16.7%) Baseline ALT <5 ULN N=94 SR(+) 140 patients HBc-highHBc-low N=28 N=11 (39.3%) N=24 N=6 (25.0%) Baseline ALT 5 ULN N=46 SR(+) HBc-high N=22 N=12 (54.5%)
3.2.1 Baseline qanti-hbc predicts EOF VR C Baseline qanti-hbc <30,000 IU/mL N=90 N=12 (13.3%) 140 patients VR(+) Baseline qanti-hbc 30,000 IU/mL N=50 N=19 (38.0%) RR(95%CI): 1.00 2.85(1.51~5.38)** D HBc-low N=66 N=9 (13.6%) Baseline ALT <5 ULN N=94 VR(+) 140 patients HBc-highHBc-low N=28 N=7 (25.0%) N=24 N=3 (12.5%) Baseline ALT 5 ULN N=46 VR(+) HBc-high N=22 N=12 (54.5%)
3.2.1 Baseline qanti-hbc predicts EOF CR Baseline qanti-hbc <30,000 IU/mL N=90 N=13 (14.4%) 140 patients CR( BR(+) +) Baseline qanti-hbc 30,000 IU/mL N=50 N=20 (40.0%) RR(95%CI): 1.00 2.77(1.51~5.08)** HBc-low N=10 (15.2%) Baseline ALT <5 ULN N=94 N=66 N=28 CR( BR(+) +) 140 patients HBc-highHBc-low N=8 (28.6%) N=3 (12.5%) Baseline ALT 5 ULN N=46 HBc-high N=24 N=22 CR( BR(+) +) N=12 (54.5%)
不 同 基 线 qanti-hbc 水 平 病 人 病 毒 学 参 数 动 力 学 变 化
不 同 基 线 qanti-hbc 水 平 病 人 ALT 动 力 学 变 化
根 据 基 因 型 和 SR 分 组 后 的 病 毒 学 参 数 动 力 学 变 化
根 据 基 因 型 和 VR 分 组 后 的 病 毒 学 参 数 动 力 学 变 化
3.2.2 The predictive value of baseline qanti-hbc level in PEG-IFN and NUC therapy
3.2.2 The kinetics of qanti-hbc during therapy PEG-IFN LdT
3.2.2 Baseline qanti-hbc predict PEG-IFN treatment response Factors Univariate Multivariate Age 0.932 Gender 1.223 Genotype 1.403 Baseline ALT level 2.132 Baseline HBV DNA level 2.622 Baseline HBsAg level 2.320 Baseline HBeAg level 2.435 Baseline Anti-HBc level 3.077 Odd-ratio 95% CI P-Value 0.354-2.456 0.643-2.327 0.816-2.413 1.030-4.416 1.486-4.626 1.362-3.952 1.363-4.350 1.790-5.289 0.887 0.540 0.220 Oddratio 95% CI P- Value 0.041 2.378 1.096-5.159 0.028 0.001 2.448 1.344-4.458 0.003 0.002 0.003 <0.001 2.658 1.519-4.651 0.001
3.2.2 Baseline qanti-hbc predict LdT treatment response Univariate Multivariate Factors Odd-ratio 95% CI P-Value Oddratio 95% CI P- Value Age 1.924 1.050-3.527 0.034 1.964 1.061-3.636 0.032 Gender 1.637 1.029-2.603 0.037 Genotype 1.137 0.768-1.682 0.522 Baseline ALT level 1.514 0.901-2.545 0.118 Baseline HBV DNA level 1.930 1.267-2.939 0.002 1.762 1.148-2.706 0.010 Baseline HBsAg level 1.737 1.170-2.579 0.006 Baseline HBeAg level 1.251 0.846-1.851 0.262 Baseline Anti-HBc level 2.110 1.424-3.126 <0.001 1.994 1.336-2.975 0.001
3.2.2 Treatment response among subgroups of patients stratified by parameters alone or combined
Profiles of serum marker levels during the natural history of chronic hepatitis B virus infection Viral production Host response
Anti-HBc titer is determined by both viral Hypothesis: loads and host immune response Low anti-hbc Virus surge Infected hepatocyte Low ALT ADCC/CDC Effectors AP Release virus C and HBc Ag Uptake of viral Ag by APC T cell independent activation of B cells Release intrahepatic enzymes killing Activation Of cytotoxic T cells Activation Of Th cells Activation Of B cells ALT qanti HBc Core Ag ALT MHC I HBV TCR MHC II Cytokines complement ADCC: Ab-dependent cellular cytotoxicity; CDC: complement dependent cytotoxicity qanti HBc
Published paper derived this study Yuan Q, et al. Gut. 2013 Jan;62(1):182-4. Yuan Q, et al. PLoS One. 2015 Jun 26;10(6):e0130209 Song LW, et al. Clin Microbiol Infect. 2015 Feb;21(2):197-203. Hou FQ, et al. Theranostics. 2015 Jan 1;5(3):218-26. Jia W, et al. Medicine (Baltimore). 2014 Dec;93(29):e322. Fan R, et al. Gut. 2015 Jan 13. pii: gutjnl-2014-308546.
Acknowledgments National Taiwan University Prof. Per-Jer Chen Prof. Chien-Jen Chen Nanfang hospital of FIMMU Prof. Jin-Lin Hou Prof. Jian Sun First hospital of PKU Prof. Gui-Qiang Wang Xiamen Blood Service Director Chang-Rong Chen Dr. Shan-Hai Ou Capital Medical University Prof. Zhuo Li Zhongshan Hospital of XMU Prof. Ping-Guo Liu
谢 谢 大 家!