The Effects of Antibiotics on Maiculture Antioxidant Enzymes and Lipid Peroxidation in Sea Uchins as Model Organisms

Conference on Environmental Pollution and Public Health The Effects of Antibiotics on Maiculture Antioxidant Enzymes and Lipid Peroxidation in Sea Uchins as Model Organisms Jun DING, Xuefeng SUN, Bo ZHANG, Yaqing CHANG Dalian Ocean University, Key Laboratory of Mariculture Ministry of Agriculture Dalian, China, 116023 Email: dingjun1119@dlou.edu.cn Abstract: Sea urchin (Strongylocentrotus intermedius) was used to study the effect of four kinds of antibiotics most in use on the activity of CAT and SOD, and MDA which reflected the extent of peroxidation of membrane lipid. The results showed that: (1) under the experimental conditions, effects of different concentrations of various antibiotics on the sea urchin body fluid CAT, SOD activity were with the processing time first increased and then decreased, and achieved the maximum impact on the 9th day after treatment. (2) MDA content in each experimental group with the treatment time, showed a rising tendency and the "Homesis" phenomenon happened in the early stage of experiment; 15 days after treatment, only tetracycline hydrochloride and ampicillin of 1.5mg/L concentrations MDA content significantly higher than the rest at different times and different concentrations of MDA content compared with the control group. This research laid the foundation of biological monitoring of aquaculture water and the safety of using antibiotics for seafood production. Keywords: Strongylocentrotus intermedius; antibiotics; CAT SOD MDA 以海胆为模式生物的抗生素对海水养殖生物抗氧化酶及 膜脂质过氧化影响研究 丁 君 孙雪峰 张 勃 常亚青 大连海洋大学 农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室 大连 中国 116023 Email: dingjun1119@dlou.edu.cn 摘 要:本研究以虾夷马粪海胆 Strongylocentrotus intermedius 为实验材料 进行 4 种常见抗生 素四环素 硫酸链霉素 青霉素和氨苄青霉素对虾夷马粪海胆体腔液过氧化氢酶 CAT 超氧化物歧 化酶 SOD 活力 及反映膜脂过氧化程度的丙二醛 MDA 含量的影响研究 结果表明 1 实验条 件下 各抗生素不同浓度对海胆体腔液 CAT SOD 活性影响均随处理时间的延长呈现先上升后下降的趋 势 大体在处理后第 9 天达到最大值 抗生素对海胆免疫酶影响明显 2 各实验组 MDA 含量均随处 理时间的延长 呈现逐渐上升的趋势 实验初期出现 Homesis 现象 处理后 15 天 仅四环素盐酸 盐和氨苄青霉素的 1.5mg/L 浓度组 MDA 含量显著高于对照组 其余不同时间 不同浓度处理组的 MDA 含量较对照组变化均不显著 抗生素对海胆膜脂质过氧化作用影响不显著 本研究为分析评价 4 种抗生 素的环境安全性提供相应的毒理学资料 为利用模式生物监测抗生素对海洋生物的影响研究奠定基础 关键词: 虾夷马粪海胆 抗生素 CAT SOD MDA 物质及其衍生物 及用化学方法合成或半合成的化合 1 引言 物 它不仅能杀灭细菌 而且对霉菌 支原体 衣原 抗生素一般是指由细菌 霉菌或其它微生物在繁 体等其它致病微生物也有良好的抑制和杀灭作用 因 殖过程中产生的 能够杀灭或抑制其它微生物的一类 此 抗生素的发现与应用 在人类保健及动植物病虫 * 项目资助 国家海洋局开发研究基金 200906 辽宁省 百 千万 人才工程支持计划 辽宁省农业攻关计划 2007203004 害防治方面发挥着巨大作用 但随着其在生产中的大 310

量 应 用, 抗 生 素 污 染 问 题 变 得 越 来 越 严 重 ; 同 时, 抗 生 素 结 构 复 杂, 属 生 物 难 降 解 物 质, 具 有 较 强 的 抑 菌 和 灭 菌 作 用, 很 容 易 在 环 境 中 富 集, 诱 导 耐 药 菌 株 产 生, 对 环 境 微 生 态 造 成 严 重 的 影 响 [1] 抗 生 素 药 物 最 终 会 随 着 径 流 进 入 海 洋, 而 抗 生 素 对 海 洋 环 境 及 其 中 的 生 物 造 成 的 影 响 还 少 有 研 究 和 报 道 以 往 在 评 价 污 染 物 对 生 物 毒 性 效 应 时, 常 用 半 致 死 浓 度 (LC 50 ) 作 为 评 价 指 标 [2], 而 存 在 于 环 境 中 的 污 染 物 经 常 是 以 低 浓 度 长 时 间 作 用 于 生 物 体, 因 此 近 年 来, 生 态 毒 理 学 和 生 态 化 学 领 域 越 来 越 广 泛 地 把 生 物 体 内 各 种 酶 学 指 标 作 为 生 物 学 标 志, 以 评 估 受 试 化 学 品 对 生 物 的 生 态 毒 理 效 应 [3-4] 本 研 究 选 用 一 种 重 要 的 海 水 养 殖 棘 皮 动 物, 同 时 也 是 胚 胎 发 育 的 模 式 生 物 海 胆 (Strongylocentrotus intermedius) 为 研 究 对 象, 研 究 了 不 容 暴 露 浓 度 和 不 同 作 用 时 间 下,4 种 常 见 抗 生 素 四 环 素 硫 酸 链 霉 素 青 霉 素 和 氨 苄 青 霉 素 对 虾 夷 马 粪 海 胆 体 腔 液 过 氧 化 氢 酶 (CAT) 超 氧 化 物 歧 化 酶 (SOD) 活 力, 及 反 映 膜 脂 过 氧 化 程 度 的 MDA 影 响 研 究 本 研 究 为 分 析 评 价 这 四 种 抗 生 素 的 环 境 安 全 性 提 供 相 应 的 毒 理 学 资 料 研 究 为 分 析 评 价 这 4 种 抗 生 素 的 环 境 安 全 性 提 供 相 应 的 毒 理 学 资 料 ; 为 利 用 模 式 生 物 监 测 抗 生 素 对 海 洋 生 物 的 影 响 研 究 奠 定 基 础 2 材 料 与 方 法 2.1 材 料 海 胆 为 农 业 部 海 洋 水 产 增 养 殖 学 重 点 开 放 实 验 室 培 育 的 虾 夷 马 粪 海 胆, 壳 径 15 mm -20mm, 实 验 期 间 按 常 规 方 法 在 60L 塑 料 槽 中 培 育, 饵 料 为 新 鲜 海 带 (Laminariaja Ponica), 海 水 为 经 砂 滤 池 过 滤 的 新 鲜 海 水 2.2 方 法 2.2.1 样 品 的 制 备 实 验 用 抗 生 素 : 四 环 素 硫 酸 链 霉 素 青 霉 素 和 氨 苄 青 霉 素, 购 于 北 京 经 科 宏 达 生 物 技 术 有 限 公 司, 监 测 试 剂 盒 均 购 于 南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 将 抗 生 素 分 别 设 为 0.5 mg.l -1 1.0 mg.l -1 和 1.5mg.L -1 三 个 梯 度, 试 验 容 器 为 60mL 的 塑 料 水 槽, 每 组 投 放 30 个 受 试 虾 夷 马 粪 海 胆, 在 培 养 第 3 6 9 12 和 15d 后 抽 取 其 体 腔 液, 培 养 15d 后 进 行 恢 复 实 验, 3d 后 抽 取 体 腔 液 抽 取 的 体 腔 液 置 于 -80 冰 箱 中 保 存, 测 定 前 将 体 腔 液 匀 浆,-4 离 心 后 取 上 清 液 测 定 2.2.2 蛋 白 含 量 测 定 考 马 斯 亮 兰 蛋 白 法 测 定 体 腔 液 蛋 白 含 量, 反 应 体 系 为 305μl 体 腔 液 用 灭 菌 海 水 1:1 稀 释 后 取 5μl, 加 入 300μl 考 马 斯 亮 蓝 显 色 剂, 混 匀, 放 置 10 分 钟, 使 用 酶 标 仪 在 595nm 处 检 测 OD 值 计 算 公 式 : 蛋 白 含 量 (g/l)=( 测 定 管 OD 值 - 空 白 管 OD 值 ) /( 标 准 管 OD 值 - 空 白 管 OD 值 )* 标 准 蛋 白 液 浓 度 (g/l)* 稀 释 倍 数 2.2.3 过 氧 化 氢 酶 (CAT) 测 定 过 氧 化 氢 酶 活 性 测 定 采 用 钼 酸 铵 法, 体 腔 液 用 灭 菌 海 水 1:1 稀 释 后 测 定, 操 作 方 法 同 上, 实 验 设 置 3 个 空 白 对 照, 每 个 样 品 设 置 1 个 自 身 对 照,3 个 平 行, 酶 标 仪 405nm 处 检 测 计 算 公 式 : 体 腔 液 中 CAT 活 力 (U/mgHb)=[( 空 白 管 OD 值 + 自 身 对 照 管 OD 值 - 测 定 管 OD 值 )*271/(60* 加 样 量 )* 样 本 稀 释 倍 数 ]/ 体 腔 液 蛋 白 含 量 (mghb/ml) 2.2.4 超 氧 化 物 歧 化 酶 (SOD) 测 定 黄 嘌 呤 氧 化 酶 法 测 定 超 氧 化 物 歧 化 酶 及 Cu-Zn 过 氧 化 物 歧 化 酶 活 性, 每 个 样 品 设 置 3 个 对 照 管, 每 个 样 品 做 3 个 平 行, 酶 标 仪 550nm 处 检 测 计 算 公 式 : 总 SOD 活 力 (U/ml)= ( 对 照 管 OD 值 - 测 定 管 OD 值 )/ 对 照 管 OD 值 /50%* 反 应 体 系 的 稀 释 倍 数 * 样 本 测 试 前 的 稀 释 倍 数 2.2.5 丙 二 醛 (MDA) 测 定 TAB 法 测 定 体 腔 液 丙 二 醛 含 量, 加 完 试 剂 后 漩 涡 混 匀 器 混 匀, 管 口 用 保 鲜 膜 扎 紧, 用 针 头 刺 一 小 孔, 95 水 浴 40 分 钟, 取 出 后 流 水 冷 却, 将 等 量 反 应 液 转 移 到 96 孔 酶 标 板, 酶 标 仪 在 532nm 处 检 测 计 算 公 式 :MDA 含 量 (nmol/mg) = [( 测 定 管 OD- 测 定 空 白 管 OD)/( 标 准 管 OD- 标 准 空 白 管 OD)]* 标 准 品 浓 度 / 蛋 白 含 量 2.3 统 计 分 析 实 验 数 据 采 用 数 理 统 计 法 将 实 验 组 与 对 照 组 及 其 组 间 差 异 进 行 显 著 性 t- 检 验, 数 据 结 果 显 示 为 平 均 值 ± 标 准 误 差 (Mean ± SEM),P < 0.05 差 异 显 著,P < 0.01 差 异 极 显 著 311

3 结 果 与 分 析 3.1 4 种 抗 生 素 对 海 胆 CAT 的 影 响 不 同 浓 度 的 4 种 抗 生 素 在 不 同 处 理 时 间 下, 对 虾 夷 马 粪 海 胆 体 腔 液 CAT 活 性 变 化 影 响 见 图 1 硫 酸 链 霉 素 青 霉 素 钠 盐 氨 苄 青 霉 素 Figure 1. Effects of on CAT activity in coelomic fluid of sea S. intermedius Values are means±sd(n=3), *<0.05;**<0.01 图 1. 4 种 抗 生 素 对 海 胆 体 腔 液 CAT 活 性 的 影 响 处 理 第 3-12d,0.5mg/L 浓 度 对 CAT 活 性 起 到 诱 导 作 用 在 6-9d,CAT 活 性 被 极 显 著 诱 导 (P<0.01), 处 理 第 9d 达 到 最 大 值, 随 后 CAT 活 性 逐 渐 下 降 ;1.0mg/L 1.5mg/L 组 仅 在 第 9d 时 对 CAT 活 性 起 到 诱 导 作 用,1.0mg/L 组 CAT 活 性 极 显 著 高 于 对 照 组 (P<0.01) 其 余 各 时 间 均 对 CAT 活 性 起 抑 制 作 用 硫 酸 链 霉 素 处 理 第 3d 15d, 各 组 CAT 活 性 均 被 极 显 著 抑 制 (P<0.01) 处 理 第 6d,0.5mg/L 组 对 CAT 活 性 起 诱 导 作 用,1.5mg/L 组 CAT 活 性 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01) 处 理 第 9d, 各 组 对 CAT 活 性 均 起 极 显 著 诱 导 作 用 (P<0.01) 处 理 第 12d, 各 组 CAT 活 性 均 被 抑 制, 但 差 异 不 显 著 青 霉 素 钠 盐 处 理 第 9d,0.5mg/L 浓 度 组 可 诱 导 CAT 活 性, 其 含 量 显 著 高 于 对 照 组 (P<0.05),1.0mg/L 浓 度 组 CAT 活 性 稍 高 于 对 照 组, 其 余 各 组 均 起 抑 制 作 用 处 理 第 3d, 各 组 CAT 活 性 均 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01) 处 理 第 6 12d, 仅 1.5mg/L 组 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.05); 处 理 第 15d,1.0mg/L 组 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.05),1.5mg/L 组 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01) 氨 苄 青 霉 素 处 理 第 9d,0.5mg/L 组 对 CAT 活 性 起 诱 导 作 用, 其 余 各 组 均 为 抑 制 作 用 处 理 第 3d,0.5mg/L 组 CAT 活 性 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.05),1.0mg/L 1.5mg/L 组 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01) 处 理 第 6d, 1.0mg/L 1.5mg/L 组 CAT 活 性 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01) 处 理 第 12 d,0.5mg/l 组 CAT 活 性 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.05),1.0 mg/l 组 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01) 处 理 第 15d, 各 组 CAT 活 性 均 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01) 由 结 果 可 知, 各 实 验 组 CAT 活 性 均 随 着 处 理 时 间 的 延 长 大 体 呈 现 先 上 升 后 下 降 的 趋 势, 4 种 抗 生 素 各 浓 度 组 均 在 处 理 第 9d 诱 导 海 胆 体 腔 液 种 CAT 活 性 达 到 最 大 值 3.2 4 种 抗 生 素 对 海 胆 SOD 的 影 响 312

不 同 浓 度 的 4 种 抗 生 素 在 不 同 处 理 时 间 下, 对 虾 夷 马 粪 海 胆 体 腔 液 SOD 活 性 变 化 的 影 响 见 图 2 氨 苄 青 霉 素 Fig.2 Effects of on SOD activity in coelomic fluid of sea S. intermedius Values are means±sd(n=3), *<0.05;**<0.01 图 2. 各 抗 生 素 对 海 胆 体 腔 液 SOD 的 影 响 硫 酸 链 霉 素 青 霉 素 钠 盐 处 理 第 3d, 各 浓 度 组 抑 制 海 胆 体 腔 液 SOD 活 性, 与 对 照 组 相 比 差 异 极 显 著 (P<0.01), 随 后, 后 SOD 活 性 逐 渐 上 升 处 理 第 9d, 各 浓 度 组 对 SOD 活 性 起 诱 导 作 用, 并 且 达 到 最 大 值, 随 后 SOD 活 性 逐 渐 下 降 处 理 第 15d, 仅 有 0.5mg/L 浓 度 组 海 胆 体 腔 液 SOD 活 性 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01), 其 余 各 组 差 异 不 显 著 硫 酸 链 霉 素 整 个 实 验 过 程, 硫 酸 链 霉 素 对 海 胆 体 腔 液 SOD 活 性 均 产 生 抑 制 作 用 处 理 第 3 9d,1mg/L 浓 度 组 SOD 活 性 显 著 低 于 对 照 组, 随 后 各 组 呈 现 先 上 升 后 下 降 的 趋 势, 于 第 9d 天 达 到 最 大 值 青 霉 素 钠 盐 处 理 第 3d, 各 浓 度 组 对 SOD 活 性 产 生 抑 制 作 用, 且 与 对 照 组 相 比 差 异 极 显 著 (P<0.01), 随 后 SOD 活 性 开 始 逐 渐 上 升 ; 处 理 第 9d, 各 浓 度 组 对 SOD 活 性 表 现 为 诱 导 作 用, 各 组 SOD 活 性 上 升 达 到 最 大 值, 并 高 于 对 照 组 处 理 第 15d, 各 组 海 胆 体 腔 液 SOD 活 性 均 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01) 氨 苄 青 霉 素 处 理 第 3d, 氨 苄 青 霉 素 各 浓 度 对 SOD 活 性 产 生 抑 制 作 用, 与 对 照 组 相 比 差 异 极 显 著 (P<0.01), 随 后 SOD 活 性 逐 渐 上 升 处 理 第 6d, 仅 1.5mg/L 组 SOD 活 性 显 著 低 于 对 照 组 处 理 第 9d, 各 浓 度 组 对 SOD 活 性 表 现 为 诱 导 作 用, 各 组 SOD 活 性 均 达 到 最 大 值 处 理 第 15d, 各 组 海 胆 体 腔 液 SOD 活 性 下 降, 0.5mg/L 1.5mg/L 组 极 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.01),1.0 mg/l 组 显 著 低 于 对 照 组 (P<0.05) 由 实 验 结 果 可 知, 各 实 验 组 SOD 活 性 均 随 着 处 理 时 间 的 延 长 呈 现 先 上 升 后 下 降 的 趋 势, 且 各 抗 生 素 在 处 理 第 9dSOD 活 性 达 到 最 大 值 3.3 4 种 抗 生 素 对 海 胆 MDA 的 影 响 不 同 浓 度 的 4 种 抗 生 素 在 不 同 处 理 时 间 下, 对 虾 夷 马 粪 海 胆 体 腔 液 MDA 活 性 变 化 的 影 响 见 图 3 313

Fig.3 Effects of on MDA in coelomic fluid of sea S. intermedius Values are means±sd(n=3), *<0.05;**<0.01 图 3. 各 抗 生 素 对 海 胆 体 腔 液 MDA 含 量 的 影 响 硫 酸 链 霉 素 青 霉 素 钠 盐 氨 苄 青 霉 素 处 理 第 3d,0.5mg/L 组 脂 质 过 氧 化 作 用 极 显 著 减 弱 (P<0.01),1mg/L 浓 度 组 显 著 减 弱 (P<0.05), 随 后 各 组 脂 质 过 氧 化 作 用 逐 渐 增 强 ; 处 理 第 15d, 各 组 MDA 含 量 高 于 对 照 组, 且 达 到 最 大 值, 其 中 1.5mg/L 浓 度 组 脂 质 过 氧 化 作 用 极 显 著 增 强 (P<0.01) 硫 酸 链 霉 素 处 理 第 3d,0.5mg/L 浓 度 组 脂 质 过 氧 化 作 用 极 显 著 减 弱 (P<0.01),1.0mg/L 浓 度 组 脂 质 过 氧 化 作 用 显 著 减 弱 (P<0.05), 处 理 后 第 6d, 脂 质 过 氧 化 作 用 缓 慢 增 强 青 霉 素 钠 盐 处 理 第 3d,0.5mg/L 浓 度 组 脂 质 过 氧 化 作 用 显 著 减 弱 (P<0.01), 从 处 理 后 第 6d, 脂 质 过 氧 化 作 用 缓 慢 增 强, 且 高 于 对 照 组 氨 苄 青 霉 素 处 理 第 3d, 各 组 脂 质 过 氧 化 程 度 低 于 对 照 组, 从 处 理 后 第 6d, 脂 质 过 氧 化 作 用 缓 慢 增 强 处 理 第 15d,1.5mg/L 浓 度 组 脂 质 过 氧 化 作 用 显 著 增 强 (P<0.01) 由 图 3 可 知, 各 组 MDA 含 量 均 随 处 理 时 间 的 延 长, 大 体 呈 现 缓 慢 上 升 趋 势 处 理 后 一 段 时 间 内 有 MDA 含 量 低 于 对 照 组 的 现 象, 尤 其 是 处 理 后 3d, 即 有 Homesis 现 象 出 现 仅 在 处 理 第 15d, 四 环 素 盐 酸 盐 氨 苄 青 霉 素 1.5mg/L 浓 度 组 的 海 胆 体 腔 液 MDA 含 量 显 著 高 于 对 照 组, 其 余 各 时 间 与 对 照 组 相 比 较 差 异 不 显 著, 说 明 除 处 理 后 第 15d, 各 抗 生 素 未 对 海 胆 体 腔 液 产 生 显 著 的 脂 质 过 氧 化 作 用 4 讨 论 生 物 膜 的 膜 质 过 氧 化 会 降 低 膜 的 流 动 性 和 选 择 透 性, 导 致 生 物 膜 功 能 的 部 分 或 全 部 丧 失,MDA [5-7] 是 膜 脂 质 过 氧 化 的 主 要 产 物 之 一, 其 浓 度 的 变 化 既 可 用 作 脂 质 过 氧 化 程 度 的 衡 量 指 标, 也 可 间 接 反 映 机 体 活 性 氧 的 累 积 过 氧 化 氢 酶 超 氧 化 物 歧 化 酶 是 机 体 内 的 2 种 抗 氧 化 酶, 作 用 是 清 除 体 内 的 自 由 基, 防 止 自 由 基 对 细 胞 结 构 的 损 伤, 特 别 是 防 止 机 体 内 过 氧 化 脂 质 生 成 而 导 致 的 细 胞 膜 流 动 性 降 低, 核 酸 和 染 色 体 被 破 坏 [8] 脂 质 过 氧 化 与 抗 氧 化 防 御 系 统 的 变 化 相 结 合, 314

既 可 反 映 具 有 氧 化 还 原 活 性 污 染 物 的 暴 露, 也 可 反 映 生 物 受 到 氧 化 胁 迫 的 程 度 国 内 外 有 关 抗 生 素 对 生 物 体 内 抗 氧 化 酶 影 响 的 报 [9] 道 不 多, 区 炳 庆 等 报 道 了 多 黏 菌 素 对 雏 鸭 血 液 中 超 氧 化 物 歧 化 酶 活 性 及 丙 二 醛 含 量 的 影 响, 研 究 表 明 口 服 组 及 肌 肉 注 射 低 剂 量 组 给 药 2d 后, 雏 鸭 血 浆 中 SOD 活 性 明 显 升 高, 血 浆 中 MDA 含 量 于 给 药 后 4d 显 著 或 极 显 著 升 高 ; 肌 肉 注 射 中 高 剂 量 组 给 药 2d 后, 雏 鸭 血 浆 中 SOD 活 性 极 显 著 降 低, 而 血 浆 中 MDA 含 量 显 著 或 极 显 著 升 高, 随 后 各 处 理 组 雏 鸭 血 浆 中 SOD 活 性 均 极 显 著 下 降 表 明 机 体 在 给 予 多 黏 菌 素 刺 激 后, 引 起 组 [10] 织 细 胞 内 一 系 列 变 化, 产 生 一 定 量 的 自 由 基, 从 而 诱 导 S0D 合 成, 以 减 弱 自 由 基 对 膜 脂 质 过 氧 化 作 用, 使 血 浆 中 MDA 含 量 降 低, 随 着 时 间 的 延 长 及 给 药 剂 量 的 增 大, 自 由 基 过 量 产 生, 超 过 了 SOD 的 清 除 能 力, 引 起 血 浆 中 SOD 活 性 下 降 而 MDA 含 量 显 著 升 高 本 实 验 的 研 究 结 果 分 析, 海 胆 体 腔 液 在 抗 生 素 作 用 下 产 生 大 量 自 由 基,CAT SOD 活 性 随 之 升 高, 以 清 除 过 量 的 自 由 基, 因 此 出 现 CAT SOD 酶 活 性 在 处 理 后 第 6d 逐 渐 升 高, 处 理 后 第 9d, 各 组 CAT SOD 活 性 达 到 峰 值, 但 一 些 未 及 时 清 除 的 自 由 基 对 细 胞 产 生 了 伤 害,CAT SOD 酶 活 性 逐 渐 回 落 随 着 抗 生 素 对 海 胆 处 理 时 间 的 延 长, 海 胆 体 腔 液 脂 质 过 氧 化 程 度 逐 渐 增 强, 体 腔 液 中 CAT SOD 活 性 的 增 强 不 足 以 弥 补 抗 生 素 对 机 体 造 成 的 氧 化 损 伤,MDA 含 量 不 断 升 高, 处 理 15d 后, 和 氨 苄 青 霉 素 处 理 下 的 海 胆 体 腔 液 MDA 含 量 显 著 高 于 对 照 组,CAT SOD 活 性 与 MDA 含 量 呈 现 一 种 负 相 关 性, 显 示 机 体 中 MDA 含 量 的 增 加 可 能 与 机 体 CAT 和 SOD 活 性 的 下 降 有 关 本 研 究 显 示,CAT SOD 对 海 胆 伤 害 程 度 反 应 较 灵 敏, 在 处 理 3d 后 活 性 急 剧 下 降, 以 后 逐 渐 回 升, 处 理 9d 后 达 到 峰 值, 可 以 考 虑 将 海 胆 免 疫 酶 作 为 海 洋 抗 生 素 污 染 的 生 物 监 测 指 标 本 研 究 显 示, 海 胆 在 4 种 抗 生 素 处 理 3d 后 的 脂 质 过 氧 化 程 度 低 于 对 照 组, 随 后 缓 慢 上 升, 推 测 是 Homesis 现 象 [11-12] 近 年 来 Hormesis 现 象 成 为 毒 理 学 中 关 注 的 热 点, 它 是 指 化 学 物 对 生 物 体 在 高 剂 量 时 表 现 负 面 影 响, 但 在 低 剂 量 时 却 表 现 为 有 益 作 用 的 现 象 而 其 相 应 提 出 的 毒 物 兴 奋 模 型 也 成 为 一 种 新 的 剂 量 - 效 应 关 系 模 型, 并 在 环 境 医 学 公 共 卫 生 等 领 域 产 生 了 一 定 的 影 响 海 胆 对 4 种 抗 生 素 的 这 种 反 应 将 在 随 后 的 研 究 中 继 续 关 注 References ( 参 考 文 献 ) [1] Wanglan. Antibiotic pollution and environmental impact of microbial [J].Phamaceutical Biotechnology,2006,13(2):144-148. [2] Wang guoxiang. Monitoring of aquatic organisms in China revised specifications [J]. Environmental Science & Technology,1998,10 (3):21-25. [3]Zhong caigao,liu xinmin. Toxic effects of mercury on microbial[j]. Practical Preventive Medicine.1995,2(1):1-4. [4]Xiu ruiqin,xu yongxiang,gao shirong. Several environmental biotechnology research to test new technology[j]. Ecological Science,1992,2:18-22. [5] Zhang peiyu,tang xuexi,dong shuanglin. Anthracene on antioxidant enzyme activities in different tissues of different effects on membrane lipid peroxidation [J]. Marine Environmental Science,2007,6 (5):434-437. [6] Michele R, Pascal H, Ginette G..Mussel tansplantation and biomarkers as useful tools for assessing water quality in the NW Mediteranean[J]. Environ Pollut,2003,122:369-378. [7] Chenrong,Wei fengqin,wang chonggang. 0 # Diesel water-soluble components on the cucullata lipid peroxidation [J]. Fisheries Science,2005,29(2):150-153. [8] Hiramisu M,E. Danasur Moria. Free radicals,lipid peroxidation,sod activity,neurofransmiffers and choline acetyltransferase activity in the aged rat brain[j].exs,1992,62:213-218. [9] Qu bingqing,zhao haiquan. Polymyxin B on chicken blood SOD activity and MDA content[j]. Veterinary Technology,2004. [10] Sun cunshan,zhang jianzhong,duan shaojin. Introduction to Free Radical Biology[M].Heifei: Science and Technology University Press,1999. [11] Stebbing A R D. Hormesis the stimulation of growth by low leves of inhibitors[j]. Sci Tol Envir,1988,22(1):213-234. [12]Calabrese EJ, Baldwin LA. Hormesis as biological hypothesis[j]. Environ Health Perpec,1998,106(Supp 1):357-362. 315