AlphaLISA-不需要洗涤的ELISA

AlphaLISA 不需洗涤的 ELISA 非常灵敏 10-17 mol / 孔 线性范围为 3-5 logs 向所有的洗涤步骤 说 BYE

AlphaLISA 技术原理 AlphaLISA 技术主要依赖于 Alpha 供体微珠和受体微珠的相互作用 当生物反应使供体微珠和受体微珠相互接近时, 激光激发级联反应, 从而产生极大放大的信号 具体来说, 在 680nm 的激光照射下, 供体微珠上的光敏剂将周围环境中的氧气转化为更为活跃的单体氧 单体氧扩散至受体微珠, 产生一系列的化学发光反应, 最后将能量传递到铕, 发射波长为 615nm 在生物分子不存在特异的互相作用时, 单体氧无法扩散到受体微珠, 则不会有信号的产生 长波长的激发光确保生物分子和实验成分的干扰非常少 单体氧分子在溶液中可扩散 200nm, 可检测非常大的生物分子 供体微珠含有高密度的光敏剂, 每个微珠每秒可产生多达 60000 个单体氧分子, 极大地扩增了信号, 从而使检测灵敏度达到 attomole 水平 受体微珠上含有二甲噻吩衍生物, 同单体氧反应, 产生一系列化学发光反应, 最后将能量转移到 615nm 该反应的半衰期为 0.3 秒, 可使用时间分辨的方法检测 AlphaLISA 技术的优势生物大分子和复杂互相作用的检测 供体和受体的距离可达 200nm Alpha 供体微珠和受体微珠在小于 200nm 的范围内都可被检测到, 可以检测完整蛋白质 酶复合体 噬菌体等非常复杂的复合物和相互作用 而其它均相技术, 例如时间分辨荧光 (TR-FRET) 荧光偏振(FP), 供体和受体之间的距离为 10nm, 仅限于小分子的检测 灵敏度高操作简单 该技术不需洗涤, 灵敏度为 10-17 摩尔 / 孔 AlphaLISA 是目前灵敏度最高的检测技术, 可达 attomole (10-17 ) 水平 而且, 该实验无需洗涤, 操作非常简便 背景低, 抗淬灭能力强 时间分辨荧光的检测模式, 可检测血清等复杂样品 AlphaLISA 长波长激发, 短波长发射, 不会有来自荧光的背景 其检测模式为时间分辨荧光, 进一步降低了背景, 确保结果的真实性 而且,AlphaLISA 发射波长为 615nm, 非常尖锐, 基本没有来自样品的淬灭干扰, 是进行复杂样品检测的理想选择, 如血清和血浆等 检测方式灵活多样 可进行多种形式的实验 Alpha 技术非常灵活, 可进行多种形式的实验, 包括竞争性实验 结合实验 解聚实验 检测实验等 可以使用直接检测的方式, 也可以选择间接检测的方式 AlphaLISA 与 ELISA 的比较 AlphaLISA 技术是无需洗涤的 ELISA 技术, 与传统 ELISA 相比, 具有不可比拟的优势 传统的 ELISA AlphaLISA 特异性 高 高 灵敏度 10-10 摩尔 / 孔 10-17 摩尔 / 孔 检测性质 非均相 : 需要至少 6 个步骤洗涤 均相 : 无需洗涤 高通量 96 孔板 96/384/1536/3456 孔板均可 抗体要求 需要高亲和力抗体 高 / 低亲和力抗体均可应用 样品体积 大,25-50µL 小,5µL 检测范围 2 个数量级 3-5 个数量级 所需仪器 标准微孔板读数议 EnVision Alpha 或 Enspire Alpha 2

AlphaLISA 的检测 : Alpha 微孔板和读板仪 AlphaLISA 可以在 PerkinElmer 公司的 EnSpire Alpha 检测仪或 EnVision 多标记检测仪上进行检测, 其装备了专用的激光用于激发光, 并有适宜的温控体系 HTS 模块的设计使检测器直接在样品上读数, 进一步提高检测灵敏度 同时,PerkinElmer 公司提供多种微孔板进行 AlphaLISA 技术的检测, 包括 OptiPlate TM AlphaPlate TM ProxiPlate TM 1/2 Area Plate 或 CulturPlate TM 微孔板等, 可达到最高的灵敏度和可靠性 AlphaLISA 作为科学研究的通用平台 AlphaLISA 是进行科学研究通用平台建设的良好选择 利用 AlphaLISA, 可以方便地实现低亲和力相互作用检测 可以灵敏地检测到低丰度的生物标志物 可以在短时间内建立起表观基因组学检测的平台... 一般情况下, 我们推荐选择亲和素标记的供体微珠, 被检测的成分用生物素标记即可 受体微珠可以与一抗偶联, 也可以利用物种特异性的二抗偶联的受体微珠或抗融合蛋白偶联的受体微珠 受体微珠也可以与特定的结合蛋白偶联 AlphaLISA 整个偶联过程不需亲和柱纯化, 只需要离心就可将偶联蛋白和未偶联蛋白分离 EnVision 多标记检测仪 EnSpire Alpha /AlphaPLUS Y - 亲和素或其它结合蛋白 A/B - 蛋白 多肽 抗体 寡核苷酸 X - 抗体, 结合蛋白 微孔板 : 种类齐全, 应用特异 PerkinElmer 提供以下的微孔板, 全部经过验证, 可进行 Alpha 技术的检测 : 1/2 AreaPlates 相同的孔深, 一半的面积, 可减少 50% 的试剂容量 是专门为 1/2 AreaPlate 广大科研用户设计的, 可有效节省样品 试剂和细胞 可用于 AlphaScreen 和 AlphaLISA 检测 仅提供 96 孔板的形式 AlphaPlate 浅灰色板可以减少交叉干扰,1536 孔板可减少 17 倍 有 384 和 1536 孔板可供选择 专用于 Alpha 检测 OptiPlate 白色聚苯乙烯微孔提供了极佳的光反射和最高的能量利用率, 并且背景较低, 可用于荧光和化学发光检测 有 24 孔到 1536 孔的形式可供选择 可用于 AlphaScreen 和 AlphaLISA 检测 ProxiPlate 浅孔设计使试剂与探测器的距离更近, 从而增强信号, 而且大大减少试剂的用量 可用于 AlphaScreen 和 AlphaLISA 检测 有 96 和 384 孔板可供选择 AlphaLISA 免疫检测试剂盒 PerkinElmer 提供几十种无需洗涤的 AlphaLISA 免疫检测试剂盒, 帮您实现复杂的或者丰度很低的 Biomarker 的检测, 为您提供更灵敏更准确的检测方法, 同时省时省资源 与繁复的洗涤步骤告别! 每个 AlphaLISA 试剂盒包含以下 5 个组份 : 偶联有分析物抗体的 AlphaLISA 受体微珠亲和素包被的 Alpha 供体微珠生物素化的抗分析物抗体冻干的分析物 AlphaLISA 免疫检测缓冲液试剂盒可用于 96,384 或 1536 孔板试剂盒检测原理如下 : 1.Alpha 供体微珠 ( 蓝色 ) 表面覆盖了亲和素, 可以捕获生物素化的抗体 2. 受体微珠 ( 红色 ) 偶联有抗分析物抗体 3. 通过与分析物的结合, 供体微珠和受体微珠相互接近 4. 当受到 680nm 的激光激发时,Alpha 供体微珠激发释放单体氧, 单体氧扩散到附近的受体微珠, 产生 615nm 的发射光 CulturPlate 经过优化的专用于基于细胞的实验, 无菌包装, 可用于细胞培养 有 24 孔至 1536 孔板可供选择, 可用于 AlphaScreen 和 AlphaLISA 检测 www.perkinelmer.com.cn 3

AlphaLISA 人 TNFα 研究免疫检测试剂盒肿瘤坏死因子 α 是一个多功能促炎细胞因子, 主要由有核血细胞合成, 是一个 233aa 的 II 型跨膜蛋白, 由 ADAM17 在第 76-77 个氨基酸残基切开, 形成一个可溶性同源三聚体复合物 TNFα 参与脂类代谢, 凝固和内皮功能, 并且与癌症, 感染和炎症 ( 包括炎性肠病 ), 缺血 / 再灌注损伤和心力衰竭以及胰岛素抗药性均有关系 这个试剂盒用于定量测定人类血清 血浆 缓冲液或细胞培养基中的 TNFα 在 AlphaLISA 免疫检测缓冲液中检测 : 低检测限 2.2 pg/ml 动态范围 : 2.2-30,000 pg/ml 在去除检测物的血清中检测 : 低检测限 (LDL): 3.6 pg/ml 动态范围 : 3.6-30,000 pg/ml AlphaLISA HIV-p24 研究免疫检测试剂盒 HIV-p24 是 1 型人类免疫缺陷病毒衣壳的含有 230aa 的磷酸化蛋白, 用于形成病毒的圆锥体核心, 包入基因组 RNA 核衣壳复合体 P24 是 Gag 多聚蛋白 (aa132-133, aa363-364) 的病毒蛋白酶裂解产物, 多用于在急性 HIV 血清转化 新生儿感染和监测抗病毒药物治疗反应时的 HIV 检测, 样品可以是血液 血清和其它体液 这个试剂盒用于定量测定缓冲液或细胞培养基中的 HIVp24 在 AlphaLISA 免疫检测缓冲液中检测 : 低检测限 : 525 pg/ml 动态范围 : 0.525-3,000 ng/ml 典型结果对数坐标 典型结果 对数坐标 线性坐标 线性坐标 特异性 AlphaLISA TNFα 检测试剂盒检测过如下物质 被测物 交叉反应 人 TNFβ 0% 小鼠 TNFα 0% 大鼠 TNFα 0% 牛 TNFα 0% 特异性 未用 AlphaLISA HIV-p24 检测试剂盒进行过其它物质的检测 4

AlphaLISA 人类淀粉样蛋白 β 1-40 和淀粉样蛋白 β 1-42 研究免疫检测试剂盒 淀粉样蛋白多肽来源于淀粉样蛋白的前体蛋白 (APP) 的裂解 APP 在神经组织中表达, 是一个 I 型跨膜蛋白, 有一个 695aa 的剪接变体 β 内分泌酶在 aa671-672 处裂解 APP, 然后继续在跨膜区 aa713-714 处裂解, 得到 Aβ40, 如果在 aa715-716 处裂解则得到 Aβ42( 偶尔合成 -39 和 43mers) 在生理环境下, 这两种主要形式的比例 Aβ40/Aβ42 大约为 10:1 现在很多人认为当这个比例上升到 5:1 时会导致肽类在细胞膜表面的聚集和蚀斑的形成, 这些均与阿尔茨海默病有关 这些试剂盒用于定量测定缓冲液或细胞培养基中的人类淀粉样蛋白 β 1-40 或者淀粉样蛋白 β 1-42 也可以检测其它物种中的 amyloid β 1-40 和 amyloid β 1-42 在 AlphaLISA 免疫检测缓冲液中检测 Amyloid β 1-40: 低检测限 :0.088 ng/ml (88 pg/ml) 动态范围 :0.088-100 ng/ml 在 AlphaLISA 免疫检测缓冲液中检测 Amyloid β 1-42: 低检测限 :0.3 ng/ml (300 pg/ml) 动态范围 :0.3-300 ng/ml 典型结果 对数坐标 典型结果 对数坐标 线性坐标 线性坐标 特异性 AlphaLISA Amyloid β 1-40 检测试剂盒检测过如下物质被测物交叉反应小鼠 Amyloid β 1-40 94% 大鼠 Amyloid β 1-40 94% 人 Amyloid β 1-42 0% 注 : 未对来源于牛 猪 狗 兔子 黑猩猩和猩猩的 Amyloid β 1-40 进行检测, 但是其氨基酸序列与人 Amyloid β 1-40 序列相同 特异性 AlphaLISA Amyloid β 1-42 检测试剂盒检测过如下物质被测物交叉反应小鼠 Amyloid β 1-42 110% 大鼠 Amyloid β 1-42 110% 人 Amyloid β 1-40 0.1% 注 : 未对来源于牛 猪 狗 兔子 黑猩猩和猩猩的 Amyloid β 1-42 进行检测, 但是其氨基酸序列与人 Amyloid β 1-42 序列相同 www.perkinelmer.com.cn 5

AlphaLISA 试剂盒订购信息 Kits 代谢类生物标志物 AlphaLISA Adiponectin Kit 500 assay points AL209C 5,000 assay points AL209F AlphaLISA human Adiponectin, lyophylized 1 µg AL209S AlphaLISA Growth Hormone kit 500 assay points AL214C 5,000 assay points AL214F AlphaLISA human Growth Hormone, lyophylized 0.3 µg AL214S AlphaLISA GLP-1 (7-36 amide) kit 500 assay points AL215C 5,000 assay points AL215F AlphaLISA human GLP-1 (7-36 amide), lyophylized 0.1 µg AL215S AlphaLISA insulin immunoassay kit 500 assay points AL203C 5,000 assay points AL204F AlphaLISA human Insulin, lyophylized 0.01IU AL204S AlphaLISA Leptin kit 500 assay points AL225C 5,000 assay points AL225F AlphaLISA human Leptin, lyophylized 0.3 µg AL225S AlphaLISA Prolactin kit 500 assay points AL227C 5,000 assay points AL227F AlphaLISA human Prolactin, lyophylized 1 µg AL227S 免疫类生物标志物 AlphaLISA p24 immunoassay kit 500 assay points AL207F 5,000 assay points AL207C AlphaLISA HIV p24, lyophylized 10 µg AL207S AlphaLISA COMP kit 500 assay points AL211C 5,000 assay points AL211F AlphaLISA human COMP, lyophylized 1.5 µg AL211S AlphaLISA G-CSF kit 500 assay points AL213C 5,000 assay points AL213F AlphaLISA human G-CSF, lyophylized 1 µg AL213S AlphaLISA GM-CSF kit 500 assay points AL216C 5,000 assay points AL216F AlphaLISA human GM-CSF, lyophylized 0.03 µg AL216S AlphaLISA IFN-g kit 500 assay points AL217C 5,000 assay points AL217F AlphaLISA human IFN-g, lyophylized 0.3 µg AL217S AlphaLISA IL10 kit 500 assay points AL218C 5,000 assay points AL218F AlphaLISA human IL10, lyophylized 0.3 µg AL218S AlphaLISA IL17 kit 500 assay points AL219C 5,000 assay points AL219F AlphaLISA human IL17, lyophylized 1 µg AL219S AlphaLISA IL1b kit 500 assay points AL220C 5,000 assay points AL220F AlphaLISA human IL1b, lyophylized 0.1 µg AL220S AlphaLISA IL2 kit 500 assay points AL221C 5,000 assay points AL221F AlphaLISA human IL2, lyophylized 0.3 µg AL221S AlphaLISA IL3 kit 500 assay points AL222C 5,000 assay points AL222F AlphaLISA human IL3, lyophylized 0.3 µg AL222S AlphaLISA IL6 kit 500 assay points AL223C AlphaLISA human IL6, lyophylized 0.1 µg AL223S AlphaLISA IL8 kit 500 assay points AL224C 5,000 assay points AL224F AlphaLISA human IL8, lyophylized 0.1 µg AL224S AlphaLISA TNF Alpha immunoassay kit 500 assay points AL208C 5,000 assay points AL208F AlphaLISA human TNFalpha, lyophylized 0.1 µg AL208S 神经退行性疾病类生物标志物 AlphaLISA Amyloid β 1-40 immunoassay kit (Aβ1-40) 500 assay points AL202C 5,000 assay points AL202F AlphaLISA human Amyloid β 1-40, lyophylized 0.3 µg AL202S AlphaLISA Amyloid β 1-42 immunoassay kit (Aβ1-42) 500 assay points AL203C 5,000 assay points AL203F AlphaLISA human Amyloid β 1-42, lyophylized 1 µg AL203S 6

心血管疾病类生物标志物 AlphaLISA EPO immunoassay kit 5,000 assay points AL206F 500 assay points AL206C AlphaLISA human EPO, lyophylized 30 IU AL206S AlphaLISA TNF Alpha immunoassay kit 500 assay points AL208C 5,000 assay points AL208F AlphaLISA human TNFalpha, lyophylized 0.1 µg AL208S AlphaLISA VEGF immunoassay kit 500 assay points AL201F 5,000 assay points AL201C AlphaLISA human VEGF, lyophylized 0.3 µg AL201S 肿瘤类生物标志物 AlphaLISA EGFR kit, 500 assay points 500 assay points AL212C 5,000 assay points AL212F AlphaLISA human EGFR, lyophylized 1 µg AL212S AlphaLISA EPO immunoassay kit 5,000 assay points AL206F 500 assay points AL206C AlphaLISA human EPO, lyophylized 30 IU AL206S AlphaLISA PSA kit 500 assay points AL228C 5,000 assay points AL228F AlphaLISA human PSA, lyophylized 3 µg AL228S AlphaLISA TNF Alpha immunoassay kit 500 assay points AL208C 5,000 assay points AL208F AlphaLISA human TNFalpha, lyophylized 0.1 µg AL208S 生物类检测 AlphaLISA human IgG immunoassay kit 500 assay points AL205F 5,000 assay points AL205C AlphaLISA human IgG, lyophylized 3 µg AL205S AlphaLISA CHO-P kit 500 assay points AL210C 5,000 assay points AL210F AlphaLISA CHO-P, lyophylized 0.5 µg AL210S AlphaLISA NS0-P kit 500 assay points AL226C 5,000 assay points AL226F AlphaLISA NS0-P, lyophylized 1 µg AL226S AlphaLISA Tools 利用各种标记或未标记的微珠, 可以实现免疫分析 相互作用检测 表观基因组学检测等各种实验目的 供体微珠 Unconjugated Donor Beads( 未标记的供体微珠 ) 1 mg 6762013 5 mg 6762011 50 mg 6762012 Streptavidin Donor beads( 亲和素标记的供体微珠 )) 1 mg 6760002S 5 mg 6760002 50 mg 6760002B Glutathione Donor beads( 谷胱甘肽标记的供体微珠 ) 1 mg 6765300 5 mg 6765301 25 mg 6765302 Nickel Chelate Donor beads( 镍螯合物标记的供体微珠 ) 1 mg AS101D 5 mg AS101M 25 mg AS101R 受体微珠 AlphaLISA Unconjugated Acceptor Beads( 未标记的受体微珠 ) 1 mg 6772001 5 mg 6772002 50 mg 6772003 Protein A AlphaLISA Acceptor Beads( 蛋白 A 受体微珠 ) 250 µg AL101C 5 mg AL101M 25 mg AL101R Protein G AlphaLISA Acceptor Beads( 蛋白 G 受体微珠 ) 250 µg AL102C 5 mg AL102M 25 mg AL102R Anti-human IgG (Fc specific) AlphaLISA Acceptor Beads( 抗人抗体标记的受体微珠 ) 250 µg AL103C 5 mg AL103M 25 mg AL103R www.perkinelmer.com.cn 7

Anti-rabbit IgG (Fc specific) AlphaLISA Acceptor Beads( 抗兔抗体标记的受体微珠 ) 250 µg AL104C 5 mg AL104M 25 mg AL104R Anti-mouse IgG (Fc specific) AlphaLISA Acceptor Beads( 抗小鼠抗体标记的受体微珠 ) 250 µg AL105C 5 mg AL105M 25 mg AL105R Anti-rat IgG (Fc specific) AlphaLISA Acceptor Beads( 抗大鼠抗体标记的受体微珠 ) 250 µg AL106C 5 mg AL106M 25 mg AL106R Anti-goat IgG (Fc specific) AlphaLISA Acceptor Beads( 抗山羊抗体标记的受体微珠 ) 250 µg AL107C 5 mg AL107M 25 mg AL107R Nickel Chelate AlphaLISA Acceptor Beads( 镍螯合物标记的受体微珠 ) 250 µg AL108C 5 mg AL108M 25 mg AL108R Glutathione AlphaLISA Acceptor Beads( 谷胱甘肽标记的受体微珠 ) 250 µg AL109C 5 mg AL109M 25 mg AL109R Anti-GST AlphaLISA Acceptor Beads( 抗 GST 抗体标记的受体微珠 ) 250 µg AL110C 5 mg AL110M 25 mg AL110R Anti-c-myc AlphaLISA Acceptor Beads( 抗 c-myc 抗体标记的受体微珠 ) 250 µg AL111C 5 mg AL111M 25 mg AL111R Anti-FLAG AlphaLISA Acceptor Beads( 抗 FLAG 抗体标记的受体微珠 ) 250µg AL112C 5 mg AL112M 25 mg AL112R Anti-DIG AlphaLISA Acceptor Beads( 抗 DIG 抗体标记的受体微珠 ) 250 µg AL113C 5 mg AL113M 25 mg AL113R Buffers AlphaLISA Universal Buffer 5X (10 ml) AL001C 5X (100 ml) AL001F AlphaLISA Immunoassay Buffer 10X (10 ml) AL000C 10X (100 ml) AL000F AlphaLISA HiBlock Buffer, 10X (10 ml) 10 ml AL004C 100 ml AL004F 珀金埃尔默仪器 ( 上海 ) 有限公司 中国技术中心上海总公司地址 : 上海张江高科技园区李冰路 67 弄 4 号楼电话 :021-38769510 传真 :021-50791316 邮编 :201203 北京分公司地址 : 北京市朝阳区建国路 93 号万达广场西区 8 号楼 6 层 608 室电话 :010-5820 8166 传真 :010-5820 8155 邮编 :100022 成都分公司地址 : 成都市新华大道文武路 42 号新时代广场 19 楼 H 座电话 :028-86782887 86782662 86783530 传真 :028-86782522 邮编 :610017 武汉分公司地址 : 武汉武昌中南路 7 号中商广场 B 座 2511 室电话 :027-87322732 87128756 87322826 传真 :027-87322685 邮编 :430071 沈阳分公司地址 : 沈阳市沈河区北站路 51 号新港澳国际大厦 13 层 G 座电话 :024-22566158 传真 :024-22566153 邮编 :110013 广州分公司地址 : 广州市建设六马路 33 号宜安广场 2612 室销售部电话 :020-8363 3179 传真 :020-8363 3579 维修部电话 :020-8363 3176 传真 :020-8363 3196 邮编 :510060 中文网址 :www.perkinelmer.com.cn 英文网址 :www.perkinelmer.com 客户服务电话 :800 820 5046 2009 年月印刷