小 组 成 员 : 陈 毅 庭 10300700141 王 盛 洲 10300700037 余 超 逸 10300700051 倪 洁 璐 10300700075 L 型 细 菌 苏 开 元 10300700077 陈 姣 凤 10300700131 新 一 代 隐 形 杀 手 一 什 么 是 L 型 细 菌? L 型 细 菌 (bacterial L-forms) 是 一 种 细 菌 细 胞 壁 缺 陷 型 (cell wall-deficient bacteria,cwdb) 在 自 然 界 长 期 进 化 中, 有 些 细 菌 形 成 了 无 细 胞 壁 的 原 核 生 物, 如 支 原 体 迄 今 已 知 几 乎 所 有 细 菌 以 及 多 种 螺 旋 体, 立 克 次 体 和 真 菌 都 有 L 型 存 在 另 外 在 实 验 室 中, 可 通 过 人 工 的 方 法 制 备 缺 壁 的 细 菌, 也 可 在 实 验 条 件 下 从 宿 主 体 内 分 离 到 细 胞 壁 缺 陷 型 的 细 菌, 被 称 为 L 型 细 菌, 原 生 质 体 (protoplast) 和 原 生 质 球 (spheroplast) L 型 细 菌 的 形 态 因 缺 失 细 胞 壁 而 呈 高 度 多 态 性, 大 小 不 一 有 球 形, 杆 型 和 丝 状 等 细 菌 L 型 的 丝 状 菌 落 二 L 型 细 菌 的 发 现 传 统 认 为 各 种 细 菌 均 有 一 定 形 态, 如 球 状 杆 状 或 螺 旋 状 等, 即 使 形 态 有 所 改 变, 差 别 也 不 会 太 大 但 Almguist 很 早 注 意 到 细 菌 形 态 是 可 以 改 变 的, 并 进 行 研 究 他 与 第 一 次 伤 寒 大 流 行 中 发 现 传 播 的 病 原 菌 在 食 物 或 水 中 可 呈 无 定 形, 进 入 机 体 后 有 回 复 成 典 型 杆 菌 L 型 细 菌 于 1935 年 在 英 国 Lister 研 究 院 1 的 Klieneberger 2 首 先 发 现, 故 以 其 首 字 母 L 而 得 名 当 时 她 发 现 一 株 念 球 状 链 杆 菌 ( Streptobacillus moniliformis) 发 生 自 发 突 变, Almguist
成 为 细 胞 膨 大 对 渗 透 敏 感 在 固 体 培 养 基 上 形 成 荷 包 蛋 状 的 小 菌 落, 经 研 究 证 实 是 一 种 细 胞 壁 缺 损 细 菌 在 发 现 珠 状 链 杆 菌 L 型 之 后 陆 续 发 现 几 乎 所 有 的 细 菌 某 些 螺 旋 体 和 真 菌 都 有 可 能 变 成 L 型 1954 年 Sharp 发 现 增 加 培 养 基 中 的 盐 份, 提 高 渗 透 压 对 链 球 菌 L 型 有 保 护 作 用, 使 其 能 继 续 繁 殖 并 发 现 Emmy Klieneberger(1892 1985) 在 培 养 基 中 加 入 动 物 血 清, 是 L 型 细 菌 生 长 的 必 要 条 件 三 L 型 细 菌 的 形 成 L 型 细 菌 的 形 成 与 细 菌 生 存 环 境 的 改 变 和 人 工 诱 导 作 用 有 关 人 工 诱 导 细 菌 变 成 L 型 细 菌 的 因 素 如 下 : (1) 抗 生 素, 如 青 霉 素 先 锋 霉 素 万 古 霉 素 ;(2) 酶 类, 如 溶 菌 酶 脂 酶 ;(3) 机 体 的 一 些 免 疫 因 素, 如 抗 体 补 体 吞 噬 细 胞 ;(4) 物 理 因 素, 如 紫 外 线 ;(5) 化 学 因 素, 如 去 氧 胆 酸 盐 一 般 认 为 其 形 成 可 能 与 临 床 有 密 切 关 系 : (1) 抗 生 素 使 用 不 规 范 : 作 用 于 革 兰 阳 性 球 菌 的 青 霉 素 类 有 效 浓 度 不 够, 疗 程 不 足, 造 成 细 菌 未 被 彻 底 杀 死, 部 分 细 菌 细 胞 壁 无 法 合 成, 但 菌 体 顽 强 的 生 存 下 来, 成 为 L 型 细 菌 (2) 抗 生 素 联 合 应 用 不 合 理 : 如 杀 菌 的 青 霉 素 与 抑 菌 的 四 环 素 红 霉 素 类 合 用, 使 抗 生 素 抗 菌 能 力 下 降, 有 效 浓 度 不 足, 从 而 使 L 型 细 菌 的 形 成 成 为 可 能 (3) 宿 主 机 体 的 代 谢 原 因 : 酸 中 毒 及 厌 氧 条 件 ( 深 部 感 染 ) 细 菌 因 生 存 环 境 改 变 而 导 致 L 型 细 菌 的 形 成 (4) 宿 主 机 体 抗 感 染 免 疫 系 统 及 免 疫 物 质 宿 主 机 体 抗 感 染 免 疫 系 统 的 不 完 全 吞 噬 作 用 及 宿 主 机 体 体 液 中 各 种 抗 感 染 免 疫 物 质, 如 溶 菌 酶 乙 型 溶 素 等 对 细 菌 的 不 完 全 作 用 四 L 型 细 菌 的 生 物 学 特 性 革 兰 氏 阴 \ 阳 细 菌 的 细 胞 壁 结 构 简 介 革 兰 氏 阴 性 菌 细 胞 壁 革 兰 氏 阳 性 菌 与 阴 性 菌 细 胞 壁 结 构 对 比 细 胞 壁 革 兰 氏 阳 性 菌 革 兰 氏 阴 性 菌 主 要 结 构 肽 聚 糖, 磷 壁 酸 外 膜, 肽 聚 糖 强 度 较 坚 韧 较 疏 松 厚 度 20 80nm 10 15nm 肽 聚 糖 结 构 含 5 肽 交 联 桥 ; 三 维 直 接 交 联 ; 二 维 网 状 立 体 肽 聚 糖 层 数 可 多 达 50 层 1 2 层 肽 聚 糖 含 量 占 细 胞 壁 干 重 占 细 胞 壁 干 重 50% 80% 5% 20% 糖 类 含 量 约 45% 15% 20% 脂 类 含 量 1% 4% 11% 22% LPS - + 孔 蛋 白 - + 壁 磷 酸 + - 外 膜 - + 周 浆 间 隙 - + 革 兰 氏 阳 性 菌 细 胞 壁 L 型 细 菌 与 普 通 细 菌 的 区 别 : (1) 嗜 高 渗 性 : 只 有 在 高 渗 环 境 中 才 能 生 长, 在 普 通 的 培 养 基 上 不 生 长 (2) 返 祖 性 : 当 抑 制 破 坏 菌 壁 的 因 素 去 除 后,L 菌 又 恢 复 了 完 整 的 细 胞 壁, 变 回 亲 本 菌 株, 又 有 了 亲 本 菌 株 的 特 性, 这 就 是 返 祖 性 (3) 弱 抗 原 性 :L 菌 可 长 存 于 宿 主 的 体 内, 并 抗 拒 宿 主 的 防 卫 机 制 ;
五 何 为 L 型 陷 阱? (1) 由 于 L 型 细 菌 的 嗜 高 渗 性 导 致 其 在 普 通 培 养 基 上 很 容 易 胀 裂 死 亡, 使 细 菌 的 分 离 培 养 结 果 为 阴 性, 即 常 说 的 革 兰 氏 假 阴 性 在 体 内 高 渗 环 境 中, 这 些 L 型 细 菌 仍 可 存 活, 形 成 感 染, 从 而 导 致 对 细 菌 感 染 诊 断 的 误 判 (2) 通 常 亲 本 菌 株 由 于 菌 壁 含 有 多 糖 类 物 质, 可 起 趋 化 作 用, 故 感 染 后 外 周 白 细 胞 会 增 多, 而 L 菌 无 菌 壁, 也 即 无 多 糖 类 物 质 存 在, 故 感 染 后 外 周 白 细 胞 仍 在 正 常 范 围 内, 常 致 误 诊 (3) L 型 细 菌 常 使 作 用 与 细 胞 壁 的 抗 菌 药 物 (β- 内 酰 胺 类 抗 生 素 等 ) 治 疗 失 效, 而 某 些 L 型 仍 保 留 一 定 的 致 病 力, 引 起 慢 性 感 染, 如 尿 路 感 染 骨 髓 炎 心 内 膜 炎 等 (4) β- 内 酰 胺 类 诱 导 的 L 菌, 其 致 病 性 及 其 毒 力 均 较 为 薄 弱, 以 致 症 状 较 为 缓 和 / 或 有 所 缓 解, 但 停 药 后,L 菌 又 返 祖 为 亲 本 菌 株, 毒 力 增 加, 症 状 又 显 化 起 来, 此 即 所 谓 反 跳 各 部 位 的 感 染, 并 反 复 发 作 致 疾 病 慢 性 化 机 理 ( 以 金 黄 色 葡 萄 球 菌 L 型 对 猴 肾 细 胞 致 病 变 作 用 为 例 ): 结 果 : (2000 年 中 华 微 生 物 学 与 免 疫 杂 志 夏 佩 莹 刘 勇 等 报 道 ) 图 1 正 常 猴 肾 单 层 细 胞 (100 ): 正 常 对 照 的 细 胞 生 长 良 好, 细 胞 呈 梭 形, 无 病 变, 无 脱 落, 核 仁 清 晰 图 2 金 葡 菌 细 菌 型 感 染 24 h 后 猴 肾 细 胞 (100 ): 金 葡 菌 细 菌 型 感 染 的 细 胞 12 h 后 已 有 部 分 细 胞 坏 死 脱 落 ; 24 h 后 细 胞 大 部 分 脱 落, 残 存 细 胞 胞 浆 疏 松 变 淡, 核 仁 不 清, 部 分 细 胞 核 图 3 金 葡 菌 L 型 感 染 24 h 后 的 猴 破 碎 肾 单 层 细 胞 (100 ): 金 葡 菌 L 型 感 染 的 细 胞 24 h 后 细 胞 形 态 基 本 正 常, 未 见 细 胞 脱 落 ( 图 3); 48 h 后 细 胞 有 少 量 脱 落, 细 胞 体 积 较 正 常 增 大, 部 分 胞 浆 内 出 现 空 泡, 细 胞 浆 内 可 见 L 型 细 菌 圆 球 体 (1998 年 海 峡 预 防 医 学 杂 志 林 成 水 陈 亢 川 报 道 ) 特 点 : (1) 间 质 性 炎 症 : 粒 细 胞 水 平 正 常, 促 进 淋 巴 或 单 核 细 胞 分 裂 (2) 可 与 体 细 胞 融 合 进 入 胞 质 或 核 内 导 致 细 胞 恶 变 (3) 失 去 原 菌 的 特 征 性 病 变 : 不 刺 激 巨 噬 细 胞 转 变, 但 同 样 引 起 病 理 学 特 征 (4) 致 病 性 一 般 比 细 菌 轻 : 失 去 镶 嵌 在 细 胞 壁 上 的 致 病 因 子 (5) 易 回 复 : 一 定 条 件 下, 编 码 原 有 的 致 病 因 子 的 基 因 被 激 活 肺 泡 隔 毛 细 血 管 扩 张 充 血 六 L 型 细 菌 的 致 病 性 ( 一 ) 致 病 机 理 及 特 点 L 型 细 菌 的 毒 力 要 比 亲 本 菌 株 低, 故 常 无 急 性 过 程, 菌 株 长 期 保 存 于 宿 主 体 内, 使 患 者 成 为 持 久 的 传 染 源 可 引 起 人 类 伴 有 大 量 淋 巴 细 胞 和 单 核 巨 噬 细 胞 浸 润, 肺 泡 隔 明 显 增 宽, 肺 泡 腔 几 乎 无 渗 出 物 或 仅 含 少 许 浆 液 肺 内 小 血 管 周 围 常 有 淋 巴 细 胞 呈 套 状 浸 润
很 多 的 尿 道 炎 患 者, 尿 标 本 普 通 培 养 阴 性, 在 改 用 高 渗 透 压 培 养 基 后, 即 培 养 到 了 L 型 致 病 菌, 现 在 用 溶 血 法 培 养 检 出 率 大 为 提 高 ;L 菌 培 养 阳 性 多 见 于 病 程 的 缓 解 期 ; 在 一 定 条 件 下, L 菌 株 会 返 祖 为 亲 本 菌 株, 于 是 不 断 复 发, 继 而 转 为 慢 性 尿 道 炎 心 肌 非 特 异 性 间 质 性 炎 症 :L 型 菌 感 染 对 心 肌 有 轻 度 损 害, 引 起 心 肌 细 胞 浊 肿, 偶 见 有 空 泡 变 住 心 肌 间 质 充 血 水 肿 有 不 等 量 淋 巴 细 胞 和 单 核 巨 噬 细 胞 呈 灶 性 或 弥 漫 性 浸 润 ( 二 ) 常 见 复 发 性 疾 病 与 L 型 细 菌 L 型 细 菌 不 仅 可 返 祖 成 为 原 菌 株 后 具 有 致 病 性, 某 些 L 菌 本 身 也 能 致 病,Domingue 发 现 L 型 细 菌 能 引 起 特 发 性 血 尿 L 型 细 菌 尤 易 形 成 一 些 慢 性 感 染 已 经 证 实 : L 型 细 菌 与 某 些 慢 性 和 反 复 感 染 有 关, 如 尿 路 葡 萄 球 菌 感 染 布 鲁 氏 菌 病 沙 门 氏 菌 感 染 结 核 病 等 从 临 床 材 料 如 脓 血 骨 髓 脑 脊 液 等 都 证 明 有 L 型 存 在 L 型 细 菌 的 致 病 特 征 为 间 质 性 炎 症, 与 病 毒 支 原 体 等 无 壁 微 生 物 引 起 的 感 染 相 似 目 前 已 从 败 血 症 流 脑 伤 寒 布 氏 菌 病 肺 炎 关 节 炎 骨 髓 炎 子 宫 内 膜 炎 宫 颈 糜 烂 心 内 膜 炎 和 肺 结 核 等 患 者 的 相 关 标 本 中 分 离 到 了 L 菌, 且 多 呈 慢 性 过 程 2. 慢 性 宫 颈 炎 与 子 宫 内 膜 炎 慢 性 宫 颈 炎 中,L 菌 最 高 占 80.0%~82..4%, 是 宫 颈 炎 持 久 不 愈 的 重 要 原 因 子 宫 内 膜 炎 也 可 为 L 菌 所 致, 并 引 起 不 育 症 ; 其 基 底 层 血 管 丰 富, 有 利 于 L 菌 长 期 生 存 繁 殖, 致 内 膜 长 期 不 规 则 地 出 血 有 报 道 发 现 功 能 性 子 宫 出 血 者 也 屡 见 L 菌 感 染 ; 因 为 子 宫 出 血 易 并 发 感 染, 故 多 用 抗 生 素 预 防 性 给 药, 这 就 导 致 了 L 菌 的 产 生 ; 一 旦 宿 主 免 疫 力 低 下,L 菌 便 返 祖 成 为 亲 本 菌 株, 毒 力 大 增, 以 致 反 复 出 现 临 床 症 状 ; 子 宫 内 膜 炎 表 层 可 因 脱 落 刮 宫 后 而 清 除 或 致 炎 症 减 轻, 但 基 底 层 感 染 却 难 以 消 失, 其 所 感 染 的 亲 本 菌 株 常 于 抗 生 素 或 宿 主 因 素 诱 导 下 转 变 为 L 菌, 并 感 染 于 间 质 层 3. 胃 肠 道 感 染 : 分 离 出 Hp L 型, 并 在 扫 描 电 镜 下 呈 海 欧 状 选 入 胃 黏 膜 认 为 其 细 胞 毒 是 黏 膜 抵 抗 力 下 降, 继 而 在 胃 酸 与 蛋 白 酶 的 侵 袭 下 造 成 溃 疡 (1999 年 中 国 消 化 杂 志 郑 鹏 远 唐 芙 爱 等 报 道 ) 1. 肾 盂 肾 炎 : 由 于 肾 髓 质 高 渗, 且 尿 素 可 破 坏 细 胞 壁, 有 利 于 L 型 的 长 期 存 活 标 本 临 床 诊 断 数 肾 盂 肾 炎 731 急 性 期 慢 性 期 尿 路 感 染 172 尿 路 感 染 318 慢 性 肾 盂 肾 炎 慢 性 肾 盂 肾 炎 尿 路 感 染 细 菌 及 L 型 培 养 检 出 率 119 单 细 菌 型 78 (23%) 56 (17.61%) 29 (29.6%) 80 8(10.0%) 阳 性 数 细 菌 型 伴 T 型 137 (40.02%) 25 25 尿 路 感 染 100 (25.0%) (25.0%) 单 T型 111 (34.04%) 17.48% 6.44% 10.43% 31.06% 1% 33.74% 92 80 (53.49%) (43.51%) 124 (38.99%) 64 (65.3%) 17 (21.3%) 10 (10.0%) 幽 门 螺 杆 菌 NCTC11637 螺 旋 状 体 (A) 及 圆 球 体 (B)2% 磷 钨 酸 负 染 色, 放 大 倍 数 分 别 为 16,000 及 18,000 (2006 年 蚌 埠 医 学 院 学 报 林 特 夫, 黄 谷 良 报 道 )
4. 结 核 结 核 菌 在 宿 主 免 疫 力 增 强 和 药 物 作 用 下 可 被 消 灭 或 转 变 为 L 菌, 致 使 临 床 症 状 缓 解 ; 找 不 到 致 病 菌 的 复 发 型 结 核 病, 有 可 能 是 L 菌 所 致 ; 有 学 者 认 为 如 果 分 离 到 结 核 菌 的 L 型, 便 可 拟 诊 为 结 核 病, 且 处 于 活 动 期 MTB 变 异 为 L 型 后 随 着 细 胞 壁 的 缺 失, 细 胞 膜 可 代 偿 性 的 增 厚 ; 这 可 能 与 L 型 抵 抗 力 加 大 耐 药 性 增 强 有 关 MTB 可 侵 犯 人 体 任 何 部 位, 除 脑 膜 炎 发 病 急 易 引 起 重 视 外, 当 其 变 为 L 型 感 染 时, 症 状 不 典 型, 往 往 易 被 忽 视 气 管 旁 琳 巴 结 肿 大, 内 有 大 块 干 酪 样 坏 死, 其 边 缘 有 大 过 单 核 巨 噬 细 胞 浸 润 未 见 郎 罕 氏 巨 细 胞 类 上 皮 细 胞 及 结 核 结 节 坏 死 物 涂 片 见 膨 大 的 抗 酸 杆 菌 墙 养 见 有 小 的 抗 酸 颗 粒 5. 其 他 L 型 细 菌 感 染 所 致 其 他 脏 器 病 变 感 染 间 质 间 质 间 质 慢 性 慢 性 淋 巴 总 数 性 肝 性 肾 性 心 肠 炎 脑 膜 结 干 炎 炎 肌 炎 脑 炎 酪 样 坏 死 伤 寒 7 7 0 3 4 0 菌 L 型 结 核 4 1 1 1 1 菌 L 型 隐 球 4 4 0 0 4 3 0 菌 L 型 骨 髓 炎 关 节 炎 :L 型 与 正 常 的 金 葡 菌 一 样 能 引 起 人 静 脉 内 皮 细 胞 的 凋 亡, 导 致 组 织 的 损 伤 脑 膜 炎 : 脑 膜 炎 双 球 菌 的 L 型 及 其 返 祖 的 亲 本 菌 株, 均 可 引 起 非 典 型 性 化 脓 性 脑 膜 炎 在 抗 生 素 用 于 临 床 前 的 年 代 里, 在 风 湿 性 患 者 的 血 液 中 常 分 离 到 溶 血 性 链 球 菌, 但 当 今 则 否, 在 部 分 此 种 患 者 的 血 液 中 分 离 到 的 则 是 此 菌 的 L 型 下 呼 吸 道 感 染 : 这 些 感 染 下 呼 吸 道 的 细 菌 因 长 期 使 用 抗 生 素 而 变 为 L 型, 也 是 对 抗 生 素 产 生 多 耐 难 治 的 原 因 这 也 与 环 境 污 染 导 致 医 院 感 染 不 无 关 系 L 型 细 菌 也 是 医 院 内 感 染 的 重 要 致 病 菌 之 一 据 一 组 报 道 从 1870 例 住 院 患 者 的 血 尿 胸 水 胆 汁 和 脑 脊 液 做 细 菌 常 规 培 养, 均 阴 性, 而 做 L 菌 培 养 却 分 离 到 427 株 L 菌, 检 出 率 为 22.8%, 菌 种 达 11 种 之 多, 说 明 L 菌 医 院 内 感 染 的 严 重 性 七 应 对 措 施 L 型 细 菌 的 治 疗 建 议 ( 一 ) 体 外 分 离 培 养 L 型 细 菌 感 染 的 诊 断 必 须 依 据 细 菌 学, 因 其 生 长 缓 慢, 故 细 菌 学 诊 断 较 为 困 难, 培 养 前 必 须 为 其 选 择 好 适 宜 的 培 养 基, 创 造 好 良 好 的 条 件 大 多 数 细 菌 的 L 型 需 经 外 界 因 素 的 诱 导 而 产 生 可 诱 导 的 因 素 很 多 大 致 有 : (1) 影 响 细 胞 壁 合 成 的 抗 菌 药 物, 如 内 酰 胺 类 抗 生 素 磷 霉 素 万 古 霉 素 等 ; (2) 裂 解 细 胞 壁 的 因 素, 如 溶 菌 酶 胆 汁 噬 菌 体 等 ; (3) 机 体 的 免 疫 因 素, 如 抗 体 补 体 巨 噬 细 胞 等 培 养 基 成 分 :L 型 细 菌 难 以 培 养, 其 营 养 要 求 基 本 与 原 菌 相 似, 但 需 在 高 渗 低 琼 脂 含 血 清 的 培 养 基 中 生 长, 即 必 须 补 充 3%--5%NaCl 溶 液 10%--20% 蔗 糖 或 7% 聚 乙 烯 吡 咯 烷 酮 (PVP) 等 稳 定 剂, 以 提 高 培 养 基 的 渗 透 压 同 时 还 需 要 加 10%--20% 人 或 马 血 清 制 备 固 体 培 养 基 时, 可 在 液 体 培 养 基 中 加 入 0.8%--1.0% 的 少 量 琼 脂, 使 L 型 在 生 长 时 可 以 琼 脂 为 支 架 ( 二 )L 型 细 菌 缺 壁 增 殖 机 制 L- 型 细 胞 非 常 难 生 长 和 操 纵, 因 而 难 以 研 究 这 种 情 况 现 在 有 可 能 改 变, 因 为 研 究 人 员 找 到 了 培 养 常 见 模 型 生 物 B. subtilis 168 的 可 通 过 基 因 手 段 跟 踪 的 L 型 细 胞 的 一 个 途 径 关 于 这 一 新 系 统 的 早 期 发 现 证 实,L 型 细 胞 的 复 制 并 不 需 要 细 胞 壁 合 成, 也 不 需 要 正 常 细 胞 分 裂 机 制 相 反,L 型 细 胞 利 用 一 个 extrusion-resolution 机 制 来 增 殖, 通 过 一 个 步 骤 生 成 多 种 后 代 这 些 发 现 在 演 化 方 面 可 能 具 有 一 定 意 义 细 胞 壁 普 遍 见 于 各 种 细 菌, 所 以 很 可 能 存 在 于 这 些 古 生 物 的 最 后 共 同 祖 先 内 L 型 细 胞 所 采 用 的 这 一 新 颖 的 复 制 过 程, 有 可 能 为 了 解 细 胞 壁 出 现 之 前 的 增 殖 模 式 提 供 一 个 窗 口 ( 三 ) 抗 菌 药 物 的 选 择 1. 适 当 选 抗 菌 药 物 亲 本 菌 株 变 成 L 菌 株 后, 其 药 敏 性 也 随 之 发 生 很 大 的 变 化,
因 此 要 针 对 L 菌 的 特 点 来 选 用 抗 菌 药 物 因 为 菌 壁 缺 如 或 残 缺 不 全, 故 不 能 采 取 作 用 于 细 菌 壁 的 药 物, 如 青 霉 素 类 等 这 些 抗 生 素 只 能 破 坏 其 亲 本 菌 株, 而 对 已 失 去 菌 壁 变 成 L 菌 株 者 无 效, 且 会 继 续 诱 生 出 L 菌 株 来, 致 使 病 情 迁 延 不 愈 ; 对 此 可 选 取 对 菌 壁 及 胞 浆 膜 均 有 效 的 抗 生 素, 如 万 古 霉 素 绿 霉 素 和 新 生 霉 素 等 ; 可 选 取 作 用 于 胞 浆 膜 和 干 扰 蛋 白 质 合 成 的 抗 生 素, 如 阿 米 卡 星 庆 大 霉 素 妥 布 霉 素 和 小 诺 霉 素 等 氨 基 糖 甙 类 抗 菌 药 物, 它 们 对 L 菌 株 的 杀 灭 作 用 要 比 对 亲 本 菌 株 更 强, 特 别 是 前 者 对 大 多 数 氨 基 糖 甙 钝 化 酶 稳 定, 尽 管 临 床 使 用 频 率 高, 也 不 易 产 生 耐 药 ; 也 可 选 用 大 环 内 酯 类 和 四 环 素 类, 分 别 如 红 霉 素 罗 红 霉 素 螺 旋 霉 素, 和 多 西 霉 素 美 满 霉 素 等, 这 些 抗 生 素 均 可 抑 制 细 菌 蛋 白 质 的 形 成 ; 喹 诺 酮 类, 如 氧 氟 沙 星 左 氧 氟 沙 星 等 均 是 抑 制 致 病 菌 的 核 酸 的 核 成, 从 而 发 挥 杀 菌 效 应 的 ; 不 宜 选 择 作 用 于 胞 浆 膜 上 的 磷 脂 的 抗 菌 药 物, 如 多 黏 菌 素 B 等, 因 G+ 细 菌 的 菌 壁 及 胞 浆 膜 均 缺 乏 磷 脂, 故 这 些 抗 生 素 对 L 菌 株 及 其 亲 本 菌 株 是 无 效 的 2. 药 敏 的 变 迁 L 型 细 菌 的 药 敏 常 有 别 于 亲 本 菌 株, 它 可 产 生 抗 药 性, 原 来 用 的 抗 菌 药 物 的 种 类 及 剂 量 会 失 效 能, 必 须 更 换 药 物, 加 大 剂 量, 才 能 有 效 ; 由 于 其 会 发 生 反 跳, 故 治 疗 必 须 长 期, 尤 其 是 对 于 败 血 症 亲 本 细 菌 耐 药 的 菌 株 转 变 为 L 菌 株 后, 细 胞 壁 上 的 耐 药 R 质 粒 通 常 会 因 菌 壁 缺 损 而 丢 失, 返 祖 后 耐 药 性 不 能 恢 复 ; 但 R 质 粒 丢 失 与 否 要 看 菌 壁 损 失 的 程 度, 当 编 码 耐 药 的 DNA 还 结 合 存 在 时, 耐 药 性 就 会 继 续 存 在 3. 联 合 用 药 通 常 在 应 用 抗 生 素 时, 要 采 用 兼 顾 疗 法, 既 对 L 菌, 又 对 其 亲 本 菌 株 用 药 这 是 因 为 抗 生 素 作 用 于 亲 本 菌 株 可 诱 导 其 变 为 无 菌 壁 的 L 菌 株, 但 同 期 中 L 菌 株 也 可 返 祖 为 有 菌 壁 的 亲 本 菌 株, 或 两 型 菌 株 同 时 存 在 八 L 型 细 菌 临 床 治 疗 实 例 我 院 3 门 诊 和 住 院 部 1993~1996 年 确 诊 尿 路 L 型 细 菌 感 染 223 例, 其 中 48 例 曾 被 误 诊, 误 诊 率 21.52% ( 赵 德 纯 王 珊. 尿 路 L 型 细 菌 感 染 48 例 误 诊 分 析. 临 床 误 诊 误 治. 1997,11(1):35-36) 一 般 资 料 : 男 10 例, 女 38 例 ; 年 龄 16~62 岁, 平 均 33.2 岁 误 诊 时 间 2 周 至 38 年 临 床 表 现 不 规 则 发 热 222 双 睑 轻 度 水 肿 15 膀 胱 刺 激 征 30 尿 道 口 灼 热 感 18 肉 眼 血 尿 10 腰 部 胀 痛 25 临 床 表 现 : 不 规 则 发 热 222 例 (45.83%), 双 睑 轻 度 水 肿 15 例 (31.25% ); 膀 胱 刺 激 征 30 例 (62.50%), 尿 道 口 灼 热 感 18 例 ( 37.50%); 肉 眼 血 尿 10 例 (20.83%); 腰 部 胀 痛 25 例 (52.08% ) 误 诊 情 况 及 典 型 病 例 尿 道 综 合 征 20 慢 性 肾 小 球 肾 炎 普 通 型 8 肾 结 核 8 原 因 不 明 的 肾 积 水 7 慢 性 盆 腔 炎 5 误 诊 情 况 及 典 型 病 例 : 误 诊 为 尿 道 综 合 征 20 例 (41.67%); 误 诊 为 慢 性 肾 小 球 肾 炎 普 通 型 8 例 (16.67%); 误 诊 为 肾 结 核 8 例 (16.67%); 误 诊 为 原 因 不 明 的 肾 积 水 7 例 (14. 58%); 误 诊 为 慢 性 盆 腔 炎 5 例 (10.42%) 九 L 型 细 菌 的 研 究 进 展 (1) 20 世 纪 70 年 代 前, 我 国 L 型 的 临 床 分 离 和 基 础 研 究 仅 有 零 星 报 道,80 年 代 初 我 们 在 开 展 临 床 检 验 中, 常 遇 到 不 少 发 热 患 者 分 离 不 出 病 原, 考 虑 可 能 由 于 某 些 作 用 于 细 胞 壁 抗 生 素 的 广 泛 使 用 及 诸 多 因 素 的 影 响, 导 致 细 菌 变 异 为 L 型 (2) 1985 年 起, 蚌 埠 医 学 院 举 办 了 18 期 全 国 L 型 学 习 班 (3) 1990 年 经 中 华 医 学 会 微 生 物 学 和 免 疫 学 会 批 准 成 立 了 全 国 L 型 细 菌 学 组, 由 蚌 埠 医 学 院 承 办 了 全 国 第 一 期 L 型 细 菌 会 议 (4) 中 华 医 学 会 第 二 次 全 国 L 型 细 菌 学 术 会 议 于 1993 年 11 月 8~10 日 在 武 汉 召 开 会 上, 陈 秀 珠 教 授 作 了 L 型 细 菌 研 究 某 些 进 展 的 学 术 报 告, 黄 谷 良 教 授 对 第 一 次 全 国 L 型 细 菌 学 术 会 议 以 来 L 型 细 菌 研 究 进 展 作 了 综 述 报 告 (5) 至 2001 年, 共 举 办 了 全 国 L 型 学 术 会 议 5 次, 自 第 3 次 会 议 ( 1995, 贵 阳 ) 起 L 型 细 菌 学 组 已 由 中 华 医 学 会 微 生 物 学 和 免 疫 学 会 与 中 华 预 防 医 学 会 微 生 态 分 会 联 合 领 导
(6) 第 二 届 感 染 性 疾 病 检 测 新 进 展 研 讨 班 暨 第 七 次 全 国 L 型 细 菌 学 术 会 议 由 厦 门 市 第 一 医 院 承 办 医 院 采 访 医 生 对 L 型 细 菌 治 疗 现 状 的 看 法 采 访 人 : 王 盛 洲 采 访 对 象 : 沈 宇 清 ( 主 任 中 医 师 ; 泰 州 中 医 药 学 会 理 事 内 科 专 业 委 员 会 秘 书 ; 姜 堰 市 医 学 会 常 务 副 会 长 ) 采 访 内 容 : (1) 现 在 的 L 型 细 菌 基 本 上 是 依 靠 体 外 培 养 才 能 检 测 出 来, 而 大 部 分 医 院, 尤 其 是 基 层 的 医 院, 缺 乏 必 要 的 培 养 仪 器 和 培 养 方 法 (2) 大 多 数 医 院 缺 乏 对 L 型 细 菌 的 认 识 和 了 解, 检 测 手 段 落 后 现 在 的 多 数 医 生 往 往 是 经 验 用 药, 缺 乏 针 对 病 原 生 物 学 的 了 解 (3) 综 上, 对 于 L 型 细 菌 治 疗 的 现 状, 医 院 普 遍 缺 乏 研 究 技 术 和 设 备 条 件, 最 关 键 的 是 医 务 人 员 对 其 认 识 不 够 (4) 抗 生 素 的 规 范 与 限 制 将 有 利 于 改 善 L 型 细 菌 治 疗 效 果, 众 多 医 院 也 开 始 增 加 对 病 原 生 物 的 重 视 程 度 十 存 在 问 题 与 展 望 20 世 纪 80 年 代 以 后, 我 国 L 型 研 究 蓬 勃 发 展, 对 疾 病 的 发 病 机 制 诊 断 治 疗 及 病 原 追 踪 等 做 了 不 少 工 作 有 的 省 市 在 临 床 检 验 中 已 将 L 型 检 查 定 为 常 规, 但 也 有 一 些 问 题 尚 有 待 解 决 : (1) L 型 细 菌 诊 断 标 准 和 药 敏 试 验 还 不 够 统 一 规 范 特 别 是 结 核 菌 的 药 敏 试 验 比 较 繁 琐, 一 般 市 级 医 院 大 多 不 开 展 而 一 些 难 治 性 结 核 病 大 多 又 与 其 L 型 的 耐 药 有 关 简 便 有 效 的 药 敏 检 测 方 法 亟 待 解 决 (2) L 型 免 疫 的 研 究 国 内 外 关 注 较 少 临 床 与 动 物 试 验 均 表 明 L 型 存 留 在 体 内 的 时 间 长, 其 原 因 及 清 除 机 制 值 得 研 究 (3) L 型 有 细 胞 壁 缺 陷, 呈 可 塑 性, 能 通 过 除 菌 滤 器 其 原 生 小 体 与 病 毒 大 小 相 当, 在 红 细 胞 内 很 像 包 涵 体, 已 知 能 通 过 胎 盘 引 起 垂 直 感 染 生 殖 异 常 与 胎 儿 畸 形 等 对 于 这 些 现 象 尚 有 待 进 一 步 研 究 (4) 肿 瘤 患 者 材 料 与 动 物 实 验 已 初 步 证 实 L 型 与 肿 瘤 的 发 生 有 关, 为 肿 瘤 的 病 因 研 究 开 拓 了 一 条 新 途 径 进 一 步 应 当 考 虑 如 何 在 基 因 水 平 上 研 究 肿 瘤 的 诊 断 和 治 疗 问 题 L 型 细 菌 的 出 现 都 发 生 在 临 床 用 药 治 疗 之 后, 并 且 有 一 定 的 耐 药 性, 说 明 用 药 剂 量 不 足 或 用 药 不 当 是 产 生 L 型 细 菌 的 重 要 原 因 之 一 L 型 细 胞 的 产 生 是 对 于 临 床 用 药 的 考 验, 抗 生 素 的 滥 用 与 L 型 细 胞 产 生 有 直 接 的 关 系, 对 于 L 型 细 胞 的 研 究 能 够 推 动 对 于 抗 药 性 的 研 究 宿 主 的 免 疫 功 能 抵 御 不 良 环 境 所 采 取 的 重 要 措 施, 待 条 件 适 合 时 卷 土 重 来 看 来 若 要 为 消 灭 各 种 感 染 性 疾 病 而 与 细 菌 进 行 斗 争, 清 除 L 型 细 菌 是 一 个 不 可 忽 视 的 环 节 生 存 发 生 了 进 化, 这 也 许 是 未 来 医 疗 的 研 究 方 向 但 同 时 警 醒 着 我 们 勿 让 抗 生 素 害 了 自 己, 不 要 让 人 类 医 学 的 成 就 难 倒 自 己 努 力 消 灭 前 者 这 么 简 单 L 型 细 菌 正 是 在 人 类 活 动 作 用 下 渐 渐 发 展 起 来 的 新 一 类 病 原 生 物 通 过 对 这 一 课 题 的 探 究, 我 深 深 感 受 到 L 型 细 菌 离 我 们 其 实 很 近, 甚 至 随 时 有 可 能 感 染 我 们 使 我 们 患 病 我 们 想 利 用 这 一 课 题 的 展 示, 唤 起 人 们 对 于 L 型 细 菌 更 多 的 认 识 了 解, 更 重 要 的 是 希 望 人 类 能 够 反 思 自 己 的 行 为, 反 思 自 己 采 取 的 措 施 在 对 抗 病 原 生 物 时, 效 果 是 否 适 得 其 反 1 李 成 立 于 1891 年, 是 英 国 第 一 所 医 学 研 究 慈 善 机 构 2 E 发 现 命 名 了 L 型 细 菌 3 指 十 一 结 语 应 当 理 解 L 型 细 菌 变 异 可 以 说 是 细 菌 为 了 生 存 竞 争 逃 避 抗 生 素 的 滥 用 是 L 型 细 菌 产 生 的 重 要 原 因, 可 见 细 菌 为 了 病 原 生 物 与 人 类 的 关 系, 并 不 仅 仅 是 前 者 危 害 后 者, 后 者 组 长 & 筹 划 : 陈 毅 庭 编 写 : 陈 毅 庭 陈 姣 凤 余 超 逸 王 盛 洲 倪 洁 璐 整 理 编 辑 : 苏 开 元 李 斯 特 预 防 医 学 研 究 所 (The Lister Institute of Preventive Medicine): Emmy Klieneberger(1892-1985): 德 国 犹 太 微 生 物 学 家, 于 1935 年 指 四 川 省 遂 宁 市 人 民 医 院