- 畜 牧 兽 医 学 报 ( 卷 6%"$&&%$22'%*$%"$$%$22'%$"#&% ) "$%"$' &#$+#%#$##&% 2$ 2$"$$"$#%$2&'%&% $&$%#&;$%%&%#%"$)))***%2 $%"$'%2"%#$ 2$'$) +#%"$%%"$ $" #**"



Similar documents

生 物 技 术 通 报 相 关 载 体 及 试 剂 动 物 组 织 及 细 胞 培 养 总 的 提 取 及 反 转 录 内 蒙 古 白 绒 山 羊 基 因 的 分 子 克 隆 生 物 信 息 学 分 析

第 期 王 兴 涛 等 猪 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 种 猪 精 液 分 离 株 的 鉴 定 及 进 化 分 析 病 料 毒 株 及 细 胞 试 剂 引 物 设 计 提 取 及 基 因 克 隆 及 测 序

说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度, 对 2015 年 春 季 期 教 运 行 基

何 秋 琳 张 立 春 视 觉 学 习 研 究 进 展 视 觉 注 意 视 觉 感 知

0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 考 核 ( 扣 原 因 ) 考 评 得 3 安 全 生 产 目 30 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 无 轻 伤 责 任 事 故 无 重 大 质 量

供 试 材 料 试 验 试 剂 和 仪 器 基 因 组 提 取 分 析 方 法 反 应 体 系 最 佳 配 比 的 筛 选 退 火 温 度 对 扩 增 效 果 的 影 响

第 期 李 伟 等 用 方 法 对 中 国 历 史 气 温 数 据 插 值 可 行 性 讨 论


!!!!!!!!!!

中 国 软 科 学 年 第 期!!!

深圳市新亚电子制程股份有限公司

第 期 马 海 燕 等 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 材 料 与 方 法 臭 氧 水 的 制 取 臭 氧 水 处 理 超 声 波 处 理 超 声 波 和 臭 氧 水 协 同 处 理 对 照 处 理 邻 苯 二 胺 分 光 光 度 法 测

¹ º ¹ º 农 业 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 农 业 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个 月 及 以 上 的 流 动 人 口 非 农 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 非 农 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个

名 称 生 命 科 学 学 院 环 境 科 学 1 生 物 学 仅 接 收 院 内 调 剂, 初 试 分 数 满 足 我 院 生 物 学 复 试 最 低 分 数 线 生 命 科 学 学 院 生 态 学 5 生 态 学 或 生 物 学 生 命 科 学 学 院

一 从 分 封 制 到 郡 县 制 一 从 打 虎 亭 汉 墓 说 起

国债回购交易业务指引

2006年顺德区高中阶段学校招生录取分数线

抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 % # % % % ) % % # # + #, ) +, % % % % % % % %

评 委 : 李 炎 斌 - 个 人 技 术 标 资 信 标 初 步 审 查 明 细 表 序 号 投 标 单 位 投 标 函 未 按 招 标 文 件 规 定 填 写 漏 填 或 内 容 填 写 错 误 的 ; 不 同 投 标 人 的 投 标 文 件 由 同 一 台 电 脑 或 同 一 家 投 标 单


西 南 民 族 学 院 学 报 哲 学 社 会 科 学 版 第 卷 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 年 年 新 中 国 五 十 年 统 计 资 料 汇 编 中 国 人 口 统 计 年 鉴 年 数 据 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 中 国 统 计 出 版 社 年 版 资 料 来 源

( ) 信 号 与 系 统 Ⅰ 学 科 基 础 必 修 课 教 周 2016 年 06 月 13 日 (08:00-09:35) ( )

龚 亚 夫 在 重 新 思 考 基 础 教 育 英 语 教 学 的 理 念 一 文 中 援 引 的 观 点 认 为 当 跳 出 本 族 语 主 义 的 思 维 定 式 后 需 要 重 新 思 考 许 多 相 连 带 的 问 题 比 如 许 多 发 音 的 细 微 区 别 并 不 影 响 理 解 和

,,,,, :,, (.,, );, (, : ), (.., ;. &., ;.. &.., ;, ;, ),,,,,,, ( ) ( ),,,,.,,,,,, : ;, ;,.,,,,, (., : - ),,,, ( ),,,, (, : ),, :,


抗 日 战 争 研 究 年 第 期

<4D F736F F D20B2CEBFBC3232C6DAD1A7CFB0D3EBCBBCBFBCC4DAD2B3>

( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,

<433A5C C6B73625C B746F705CB9FABCCAD6D0D2BDD2A9D7A8D2B5B8DFBCB6BCBCCAF5D6B0B3C6C6C0C9F3C9EAC7EBD6B8C4CFA3A CDA8D3C3B0E6A3A92E646F63>

一 开 放 性 的 政 策 与 法 规 二 两 岸 共 同 的 文 化 传 承 三 两 岸 高 校 各 自 具 有 专 业 优 势 远 见 杂 志 年 月 日

<4D F736F F D D323630D6D0B9FAD3A6B6D4C6F8BAF2B1E4BBAFB5C4D5FEB2DFD3EBD0D0B6AF C4EAB6C8B1A8B8E6>

!!


人 工 抗 原 的 鉴 定

年 第 期 % %! & % % % % % % &


第 卷 第 辑 高 明 华 蔡 卫 星 曾 诚 股 权 结 构 与 信 息 披 露 质 量 来 自 证 券 分 析 师 盈 余 预 测 特 征 的 证 据!!

二 工 资 制 度 与 教 师 道 德 风 险 行 为

<433A5C446F63756D656E E E67735C41646D696E F725CD7C0C3E65CC2DBCEC4CFB5CDB3CAB9D3C3D6B8C4CFA3A8BCF2BBAFA3A95CCAB9D3C3D6B8C4CF31302D31392E646F63>

ETF、分级基金规模、份额变化统计

采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路 2

伊 犁 师 范 学 院 611 语 言 学 概 论 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 语 言 学 纲 要 笔 记, 由 考 取 本 校 本 专 业 高 分 研 究 生 总 结 而 来, 重 点 突 出, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 效

2014年中央财经大学研究生招生录取工作简报

马 克 思 主 义 公 正 观 的 基 本 向 度 及 方 法 论 原 则!! # #

课程类 别


简 报 要 点 ESI 共 有 22 个 学 科 门 类, 江 苏 高 校 目 前 只 有 16 个 学 科 门 类 进 入 了 世 界 1%, 分 别 是 一 般 社 会 科 学 临 床 医 学 农 业 科 学 分 子 生 物 学 和 遗 传 学 动 植 物 科 学 化 学 地 球 科 学 工 程

 编号:

上证指数

评 委 : 徐 岩 宇 - 个 人 技 术 标 资 信 标 初 步 审 查 明 细 表 序 号 投 标 单 位 投 标 函 未 按 招 标 文 件 规 定 填 写 漏 填 或 内 容 填 写 错 误 的 ; 不 同 投 标 人 的 投 标 文 件 由 同 一 台 电 脑 或 同 一 家 投 标 单

珠江钢琴股东大会

市 水 务 局 ( 海 洋 局 ) 上 海 市 水 务 局 ( 上 海 市 海 洋 局 ) 市 水 务 局 ( 海 洋 局 ) 上 海 市 水 务 局 ( 上 海 市 海 洋 局 ) 市 文 广 影 视 局 文 物 保 护 管 理

思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 思 想


第 一 批 本 科 文 科 代 码 学 校 投 档 线 校 线 差 最 低 排 位 投 档 线 校 线 差 最 低 排 位 投 档 线 校 线 差 最 低 排 位 控 制 分 数 线 北 京 大 学

目 录 1 全 国 水 泥 制 造 行 业 分 析 行 业 基 本 面 分 析 行 业 规 模 分 析 行 业 成 长 能 力 分 析 行 业 盈 利 能 力 分 析 行 业 偿 债 能 力 分

六 业 年 限 四 年 制 本 科,3~6 年 弹 性 制 七 授 予 位 工 士 八 毕 业 分 要 求 生 物 工 程 专 业 分 及 比 例 分 配 总 计 通 识 必 科 基 础 必 专 业 必 必 选 践 专 业 公 共 小 计 理 论 其 他 小 计 理 论 验 小 计 理 论 验 选

<4D F736F F D20B3D6B2D6CFDEB6EEB1EDB8F1D7EED6D52E646F63>

市 环 保 局 科 技 标 准 处 市 环 保 局 科 技 标 准 处 市 环 保 局 科 技 标 准 处

Microsoft Word - 文件汇编.doc

18 上 报 该 学 期 新 生 数 据 至 阳 光 平 台 第 一 学 期 第 四 周 至 第 六 周 19 督 促 学 习 中 心 提 交 新 增 专 业 申 请 第 一 学 期 第 四 周 至 第 八 周 20 编 制 全 国 网 络 统 考 十 二 月 批 次 考 前 模 拟 题 第 一 学

修改版-操作手册.doc


研 究 对 象 研 究 角 度 研 究 工 具 数 据 收 集 和 预 处 理 网 络 密 度 与 平 均 距 离 分 析

随着执业中医师资格考试制度的不断完善,本着为我校中医学专业认证服务的目的,本文通过对我校中医类毕业生参加2012年和2013年的中医执业医师考试成绩及通过率、掌握率进行分析,并与全国的平均水平进行差异比较分析,以此了解我校执业中医师考试的现状,进而反映我校中医类课程总体教学水平,发现考核知识模块教学中存在的不足,反馈给相关学院和教学管理部门,以此提高教学和管理水平。

!!!!!

浙 江 海 洋 学 院 417 普 通 生 态 学 与 鱼 类 学 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 基 础 生 态 学 笔 记, 此 笔 记 为 高 分 研 究 生 复 习 所 用, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 效 率, 把 握 报

上海证券交易所会议纪要

一 公 共 卫 生 硕 士 专 业 学 位 论 文 的 概 述 学 位 论 文 是 对 研 究 生 进 行 科 学 研 究 或 承 担 专 门 技 术 工 作 的 全 面 训 练, 是 培 养 研 究 生 创 新 能 力, 综 合 运 用 所 学 知 识 发 现 问 题, 分 析 问 题 和 解 决

Microsoft Word - 第7章 图表反转形态.doc

所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 具 有 肉 品 科 学 与 技 术 食 品 科 学 专 业 背 景, 熟 悉 畜 禽 屠 宰 副 产 物 加 工 领 域 科 学 发 展 前 沿, 在 海 外 取 得 博 士 学 位 或 有 3 年 以 上 国 外 博 士 后 科 研 工

21 业 余 制 -- 高 起 专 (12 级 ) 75 元 / 学 分 网 络 学 院 学 生 沪 教 委 财 (2005)49 号 江 西 化 校 工 科 22 业 余 制 -- 高 起 专 (12 级 ) 70 元 / 学 分 网 络 学 院 学 生 沪 教 委 财 (2005)49 号 吉

材 料 方 法 统 计 学 分 析 体 外 作 用 对 细 胞 增 殖 的 影 响

# 抗 日 战 争 研 究 年 第 期, 胊 县 多, # # # # # # # # # # # # # # # # # # # # #

春 天 来 了 静 悄 悄 的 没 有 鸟 语 没 有 花 香 到 处 死 一 样 的 沉 寂 雷 切 尔 卡 森

金 不 少 于 800 万 元, 净 资 产 不 少 于 960 万 元 ; (3) 近 五 年 独 立 承 担 过 单 项 合 同 额 不 少 于 1000 万 元 的 智 能 化 工 程 ( 设 计 或 施 工 或 设 计 施 工 一 体 ) 不 少 于 2 项 ; (4) 近 三 年 每 年

三武一宗灭佛研究

第 期 王 日 根 徐 士 林 与 清 初 福 建 汀 漳 道 的 社 会 治 理

2011年第三季度全国星级饭店统计公报

中 国 社 会 科 学 年 第 期!!!! ( ( ) % ) ) ) % % % %




导 数 和 微 分 的 概 念 导 数 的 几 何 意 义 和 物 理 意 义 函 数 的 可 导 性 与 连 续 性 之 间 的 关 系 平 面 曲 线 的 切 线 和 法 线 导 数 和 微 分 的 四 则 运 算 基 本 初 等 函 数 的 导 数 复 合 函 数 反 函 数 隐 函 数 以

现 场 会 议 时 间 为 :2016 年 5 月 19 日 网 络 投 票 时 间 为 :2016 年 5 月 18 日 年 5 月 19 日 其 中 通 过 深 圳 证 券 交 易 所 交 易 系 统 进 行 网 络 投 票 的 时 间 为 2016 年 5 月 19 日 9:30-

2.5 选 举 陈 晓 非 女 士 为 第 六 届 董 事 会 董 事 候 选 人 的 议 案 ; 2.6 选 举 卢 婕 女 士 为 第 六 届 董 事 会 董 事 候 选 人 的 议 案 ; 2.7 选 举 张 文 君 先 生 为 第 六 届 董 事 会 独 立 董 事 候 选 人 的 议 案

收 入 支 出 项 目 2016 年 预 算 项 目 2016 年 预 算 预 算 01 表 单 位 : 万 元 ( 保 留 两 位 小 数 ) 一 公 共 财 政 预 算 拨 款 一 人 员 经 费 一 般 财 力 人 员 支 出 成 品

测 谱 学 基 础 宽 波 段 遥 感

年 8 月 11 日, 公 司 召 开 2015 年 第 五 次 临 时 股 东 大 会, 审 议 通 过 了 关 于 公 司 <2015 年 股 票 期 权 激 励 计 划 ( 草 案 )> 及 其 摘 要 的 议 案 关 于 提 请 股 东 大 会 授 权 董 事 会 办 理 公


解 放 军 理 工 大 学 学 报 自 然 科 学 版


附 件 : 上 海 市 建 筑 施 工 企 业 施 工 现 场 项 目 管 理 机 构 关 键 岗 位 人 员 配 备 指 南 二 一 四 年 九 月 十 一 日 2

抗 战 时 期 国 立 中 学 的 创 办 及 其 意 义!!

<4D F736F F D20B9D8D3DAB0BABBAAA3A8C9CFBAA3A3A9D7D4B6AFBBAFB9A4B3CCB9C9B7DDD3D0CFDEB9ABCBBE C4EAC4EAB6C8B9C9B6ABB4F3BBE1B7A8C2C9D2E2BCFBCAE92E646F6378>

办 法 >( 修 订 稿 ) 的 议 案 关 于 提 请 任 子 行 网 络 技 术 股 份 有 限 公 司 股 东 大 会 授 权 董 事 会 办 理 公 司 限 制 性 股 票 激 励 计 划 相 关 事 宜 的 议 案 确 定 公 司 的 限 制 性 股 票 激 励 计 划 相 关 事 项 如

<4D F736F F D2033D4C2C6DAD4D3D6BEA3A8B6A8B8E5CEC4BCFEA3A92E646F63>

中 日 信 息 化 的 比 较 与 合 作 一 中 日 信 息 化 的 规 模 比 较

工 程 勘 察 资 质 标 准 根 据 建 设 工 程 勘 察 设 计 管 理 条 例 和 建 设 工 程 勘 察 设 计 资 质 管 理 规 定, 制 定 本 标 准 一 总 则 ( 一 ) 本 标 准 包 括 工 程 勘 察 相 应 专 业 类 型 主 要 专 业 技 术 人 员 配 备 技 术

Transcription:

畜 牧 兽 医 学 报 促 黄 体 素 基 因 多 态 性 及 其 与 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 的 关 系 狄 冉 梁 琛 储 明 星 刘 文 忠 方 丽 马 月 辉 李 奎 中 国 农 业 科 学 院 北 京 畜 牧 兽 医 研 究 所 农 业 部 畜 禽 遗 传 资 源 与 利 用 重 点 开 放 实 验 室 北 京 山 西 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院 太 谷 摘 要 为 了 解 促 黄 体 素 基 因 多 态 性 与 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 的 关 系 采 用 技 术 检 测 促 黄 体 素 亚 基!"#$%&$'' 基 因 调 控 区 和 个 外 显 子 在 高 繁 殖 力 济 宁 青 山 羊 中 等 繁 殖 力 波 尔 山 羊 和 低 繁 殖 力 山 羊 品 种 辽 宁 绒 山 羊 和 安 哥 拉 山 羊 中 的 单 核 苷 酸 多 态 性 同 时 研 究 该 基 因 对 济 宁 青 山 羊 高 繁 殖 力 的 影 响 结 果 表 明 山 羊 与 绵 羊 的 基 因 核 苷 酸 序 列 相 似 性 为 对 引 物 中 仅 引 物 和 扩 增 片 段 存 在 多 态 性 对 于 扩 增 片 段 在 ( 个 山 羊 品 种 中 均 检 测 到 )))* 和 ** 种 基 因 型 测 序 分 析 发 现 ** 与 )) 基 因 型 相 比 在 调 控 区 存 在 处 突 变 ) 和 + 济 宁 青 山 羊 种 基 因 型 之 间 产 羔 数 差 异 均 不 显 著 对 于 扩 增 片 段 在 济 宁 青 山 羊 中 检 测 到, 和,, 种 基 因 型 辽 宁 绒 山 羊 中 检 测 到 和, 种 基 因 型 波 尔 山 羊 和 安 哥 拉 山 羊 中 都 只 检 测 到 基 因 型 测 序 分 析 发 现,, 与 基 因 型 相 比 在 外 显 子 存 在 单 碱 基 突 变 (+ 济 宁 青 山 羊, 和,, 基 因 型 频 率 分 别 为 (( 和,, 和, 基 因 型 济 宁 青 山 羊 平 均 产 羔 数 分 别 比 基 因 型 的 多 和 - 只 济 宁 青 山 羊 在 两 个 座 位 上 都 处 于 哈 迪 温 伯 格 平 衡 状 态 座 位..(- 座 位..(( 关 键 词 山 羊 繁 殖 力 促 黄 体 素 亚 基 基 因 中 图 分 类 号 -/0(/ 文 献 标 识 码 ) 文 章 编 号 (-!"#$%&%'%$$#""%#$%$%()#*$#% +#!#$,&$ -%%'$#,4 4)56# 78 9"3" 48 :!#$ " ;)56 9) # 4!"!#$% %&'&# (!# )&*#%&+%!#)&&,-)++&)#%&! (. )&&/!0)+.#/#4 %#!"#$%&$'' "2 2"$%##"#%$22 "6%"$)22$%"$#2$$ "3%$%&%%"$2" 2$$&$%#& # %"$%%"$ 3$ 3$ 3$ $$" #"#%$22'%" 收 稿 日 期 基 金 项 目 国 家 计 划 ))1 国 家 现 代 肉 羊 产 业 技 术 体 系 建 设 专 项 农 科 教 发 号 国 家 自 然 科 学 基 金 项 目 ( --- 国 家 - 计 划 * 北 京 市 自 然 科 学 基 金 项 目 中 国 农 业 科 学 院 北 京 畜 牧 兽 医 研 究 所 家 畜 种 质 资 源 研 究 和 创 新 科 技 创 新 团 队 项 目 中 国 农 业 科 学 院 首 批 优 秀 科 技 创 新 团 队 专 项 资 助 作 者 简 介 狄 冉 - 女 山 东 泰 安 人 博 士 主 要 从 事 分 子 遗 传 学 研 究 +&%"%2$& 通 讯 作 者 储 明 星 &&32#

- 畜 牧 兽 医 学 报 ( 卷 6%"$&&%$22'%*$%"$$%$22'%$"#&% ) "$%"$' &#$+#%#$##&% 2$ 2$"$$"$#%$2&'%&% $&$%#&;$%%&%#%"$)))***%2 $%"$'%2"%#$ 2$'$) +#%"$%%"$ $" #**"$2$&%##))" $+#%2$#%!' %"$% $"2 " 6%"$;$%%&%#%"$,,,%2 " 6%"$$"$,%2 $"#&%"$$$ "$2 *$%) "$%"$2"%$" 2$ &$ (+3$ $" #,,"$2$&%##"$ 6$%2$,,, (( "6%"$% 2+#"6%$#"$,,$%,# $%- <&$%# #$#"$+##$##"6%"$ $$ 7%:'%"'%& $2..(-$2..(( 0$+("$%$22!"#$%&$''" 促 黄 体 素!"#$%&$7 是 由 动 物 垂 体 前 叶 嗜 碱 性 细 胞 合 成 和 分 泌 的 一 种 糖 蛋 白 类 促 性 腺 激 素 由 和 两 个 非 共 价 结 合 且 可 解 离 的 亚 基 组 成 其 中 亚 基 的 氨 基 酸 序 列 是 保 守 的 而 亚 基 则 具 有 特 异 性 作 为 功 能 亚 基 与 受 体 结 合 是 激 素 生 物 活 性 和 免 疫 活 性 的 决 定 因 素 7 在 动 物 卵 泡 发 育 和 卵 泡 优 势 化 过 程 中 起 重 要 作 用 高 浓 度 7 可 以 保 证 优 势 卵 泡 的 后 期 生 长 并 对 颗 粒 细 胞 进 行 调 节 促 进 排 卵 7 还 与 促 卵 泡 素 $ 2&"#$%&$;7 抑 制 素 #' 457 及 一 些 生 长 因 子 协 同 作 用 促 进 卵 泡 的 发 育 和 排 卵 在 动 物 的 生 殖 过 程 中 发 挥 重 要 作 用 研 究 表 明 应 用 7 处 理 能 有 效 提 高 绵 羊 的 情 期 受 胎 率 和 ( 总 受 胎 率 与 非 多 胎 母 羊 相 比 *$$%$$ 多 胎 母 羊 具 有 较 高 的 血 浆 7 浓 度 - 高 繁 殖 力 和 常 年 发 情 的 小 尾 寒 羊 全 年 各 月 份 ( 个 季 节 全 年 和 发 情 期 的 血 浆 7 平 均 浓 度 均 极 显 著 高 于 低 繁 殖 力 和 季 节 性 发 情 的 细 毛 羊 李 利 等 对 南 江 黄 羊 基 因 的 研 究 发 现 在 ( 位 点 存 在 一 个 突 变 6) 或 但 与 产 羔 数 没 有 显 著 相 关 等 将 基 因 定 位 到 绵 羊 ( 号 染 色 体 该 基 因 全 长 约 <' 由 个 外 显 子 和 个 内 含 子 组 成 编 码 ( 个 氨 基 酸 因 此 我 们 将 编 码 的 基 因 列 为 山 羊 高 繁 殖 力 的 候 选 基 因 据 中 国 羊 品 种 志 记 载 在 我 国 个 地 方 山 羊 品 种 中 大 多 数 山 羊 品 种 繁 殖 力 较 低 济 宁 青 山 羊 繁 殖 力 最 高 济 宁 青 山 羊 平 均 产 活 羔 数 为 ( 辽 宁 绒 山 羊 平 均 产 活 羔 数 为 波 尔 山 羊 平 均 产 活 羔 数 为 安 哥 拉 山 羊 平 均 产 活 羔 数 为 本 研 究 以 高 繁 殖 力 济 宁 青 山 羊 中 等 繁 殖 力 波 尔 山 羊 和 低 繁 殖 力 山 羊 品 种 辽 宁 绒 山 羊 和 安 哥 拉 山 羊 为 试 验 材 料 采 用 单 链 构 象 多 态 性 "%2$$%&$ $&$%#& 方 法 检 测 基 因 在 不 同 山 羊 品 种 中 的 单 核 苷 酸 多 态 性 " 2$$&$%#&5 并 对 具 有 多 态 性 的,5) 片 段 进 行 测 序 比 较 分 析 旨 在 寻 找 与 山 羊 产 羔 数 相 关 的 遗 传 标 记 为 山 羊 高 繁 殖 力 的 标 记 辅 助 选 择 提 供 科 学 依 据 材 料 与 方 法 1 材 料 随 机 选 择 于 年 产 羔 的 只 济 宁 青 山 羊 母 羊 记 录 其 胎 次 产 羔 月 份 和 产 羔 数 这 只 济 宁 青 山 羊 母 羊 血 样 采 自 农 业 部 济 宁 青 山 羊 保 种 基 地 山 东 省 嘉 祥 县 ( 只 辽 宁 绒 山 羊 母 羊 血 样 采 自 北 京 市 门 头 沟 区 清 水 镇 ( 只 波 尔 山 羊 母 羊 和 ( 只 安 哥 拉 山 羊 母 羊 血 样 均 采 自 山 西 省 沁 水 示 范 牧 场 颈 静 脉 采 血 所 采 血 样 均 为 & 只 用 柠 檬 酸 葡 萄 糖 抗 凝 = > 冻 存 用 酚 氯 仿 抽 提 法 提 取 基 因 组,5) 溶 于 + 缓 冲 液 &&$

期 狄 冉 等 促 黄 体 素 基 因 多 态 性 及 其 与 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 的 关 系 - +%7 7/ &&$,+) 7 /( > 保 存 近 些 年 来 对 济 宁 青 山 羊 的 产 羔 数 或 其 它 繁 殖 性 状 都 没 有 进 行 选 择 济 宁 青 山 羊 胎 次 的 划 分 是 实 际 第 胎.( 第 胎. 和 第 胎.( 分 别 作 为 个 胎 次 产 羔 季 节 的 划 分 是 产 羔 月 份 在 月 的 作 为 季 节 春 季. ( 在 月 的 作 为 季 节 夏 季. 在 月 的 作 为 季 节 秋 季.( 在 月 的 作 为 季 节 ( 冬 季. 1 主 要 试 剂 01,5) 聚 合 酶 5+69+ 载 体,5) 片 段 回 收 纯 化 试 剂 盒 质 粒 提 取 纯 化 试 剂 盒 等 均 购 自 北 京 天 根 生 物 技 术 有 限 公 司 1 引 物 设 计 和 * 扩 增 根 据 6 *< 发 表 的 绵 羊 基 因,5) 序 列 ( ( 用?"$ 设 计 对 引 物 扩 增 片 段 包 括 该 基 因 的 调 控 区 外 显 子 外 显 子 和 外 显 子 引 物 由 上 海 英 骏 生 物 技 术 有 限 公 司 合 成 引 物 序 列 见 表 表 山 羊 促 黄 体 素 亚 基 基 因 的 引 物 序 列 $$$"$%/$ '#"#$%&%'%$""%#'$%$ 引 物 引 物 序 列 扩 增 区 域 产 物 大 小 ' %&% %&%2 )&%"$ %$2! ;))6)+++66++6 )))6+6)6+)) ;)++6))6+)6+ 6))6))))66)6))6 调 控 区 ;+6)+++++6+)+) +6++)+)6+++)+)+6 ( ;)++)6+6+)66++)) +)+6+))+++ 调 控 区 和 外 显 子 ;+6)66)+66++6+ ))+6+6666)6+)6 外 显 子 ;)+66))))+))6+ ++)6)66))6)66)+6++6 外 显 子 -( ; 代 表 上 游 引 物 代 表 下 游 引 物 ;$%$%%%&%$%%%%&% 扩 增 体 系 为 包 括 &$ 引 物 @ 缓 冲 液 5+ 终 浓 度 为 &$ 01,5) 聚 合 酶 8 ",5) 模 板 引 物 所 用 的 9" A 终 浓 度 分 别 为 &&$ 其 余 用 7? 补 齐 引 物 ( 的 扩 增 程 序 > 预 变 性 & ( > 变 性 退 火 温 度 ( - >- > 延 伸 个 循 环 最 后 - > 延 伸 & ( > 保 存 引 物 和 的 扩 增 采 用 了 +$2#$ 程 序 的 +$2#$ 程 序 为 > 预 变 性 & ( > 变 性 退 火 温 度 从 -( > 开 始 每 个 循 环 降 > 降 至 - > 当 退 火 温 度 为 - > 时 设 置 个 循 环 退 火 时 间 各 循 环 - > 延 伸 最 后 - > 延 伸 & ( > 保 存 的 +$2#$ 程 序 为 > 预 变 性 & ( > 变 性 退 火 温 度 从 > 开 始 每 个 循 环 降 > 降 至 > 当 退 火 温 度 为 > 时 设 置 ( 个 循 环 退 火 时 间 各 循 环 - > 延 伸 最 后 -> 延 伸 & (> 保 存 产 物 用 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 检 测 1,, 分 析 / 产 物 和 上 样 缓 冲 液 去 离 子 甲 酰 胺 / 溴 酚 蓝 / 二 甲 苯 青 &&$,+)7 甘 油 混 匀 > 变 性 & 冰 浴 & 然 后 非 变 性 聚 丙 烯 酰 胺

-( 畜 牧 兽 医 学 报 ( 卷 凝 胶 室 温 电 泳 (# 银 染 显 色 引 物 所 用 的 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 交 联 度 )2%* 分 别 为 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 浓 度 分 别 为 电 压 分 别 为 ( B 最 后 拍 照 分 析 1 克 隆 测 序 将 不 同 基 因 型 纯 合 体 的 扩 增 产 物 用 柱 式 凝 胶 回 收 试 剂 盒 回 收 纯 化 回 收 后 的,5) 片 段 用 69+ 载 体 连 接 并 转 化 大 肠 杆 菌,7 菌 株 用 质 粒 提 取 试 剂 盒 提 取 质 粒 作 为 测 序 模 板 进 行 测 序 每 一 种 基 因 型 单 独 挑 个 克 隆 送 北 京 诺 赛 基 因 组 研 究 中 心 有 限 公 司 完 成 测 序 1 统 计 分 析 对 济 宁 青 山 羊 座 位 的 基 因 型 分 布 进 行 哈 迪 温 伯 格 平 衡 检 验 配 合 下 列 模 型 进 行 最 小 二 乘 方 差 分 析 比 较 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 在 各 基 因 型 之 间 的 差 异 对 和 的 基 因 型 单 独 进 行 分 析 1,, 检 测 对 对 引 物 扩 增 的 产 物 分 别 进 行 分 析 发 现 和 扩 增 片 段 存 在 多 态 性 其 余 ( 对 引 物 的 扩 增 片 段 均 不 存 在 多 态 性 扩 增 片 段 有 种 基 因 型 分 别 为 )))* 和 ** 图 扩 增 片 段 也 有 种 基 因 型 分 别 为, 和,, 图 )) 型 -)* 型 (** 型 ))"$-)*"$( **"$ 图 不 同 山 羊 品 种 扩 增 片 段 的,, 分 析 2'1,,% */#%"%'%( $ $%#'#$$(!C< C' < C< 其 中!C< 为 产 羔 数 的 记 录 值 为 群 体 平 均 值 为 第 个 产 羔 季 节 的 固 定 效 应.( C 为 第 C 个 胎 次 的 固 定 效 应 C.' < 为 基 因 第 < 种 基 因 型 的 固 定 效 应 <. C< 为 随 机 残 差 效 应 用 )B 的 69 过 程 完 成 结 果 1* 扩 增 所 设 计 的 对 引 物 用 于 扩 增 都 获 得 了 特 异 性 的 产 物 片 段 长 度 与 预 期 大 小 一 致 且 没 有 非 特 异 性 扩 增 条 带 可 以 直 接 进 行 分 析 对 引 物 的 扩 增 结 果 见 图 (- (9,5) &%<% 图 对 引 物 对 山 羊 的 * 扩 增 结 果 ( 型, 型 -,, 型 ("$,"$-,,"$ 图 不 同 山 羊 品 种 扩 增 片 段 的,, 分 析 2'1,,% */#%"%'%( $ $%#'#$$( 1 序 列 分 析 将 克 隆 测 序 各 片 段 经 *)+ 连 接 出 山 羊 基 因 调 控 区 和 个 外 显 子 的 全 长 共 ' 与 绵 羊 该 序 列 的 相 似 性 为 测 序 结 果 显 示 ** 与 )) 基 因 型 相 比 在 和 ' 处 分 别 有 ) 和 + 突 变 图 (,, 与 基 因 型 相 比 在 (' 处 有 个 + 的 单 碱 基 突 变 图 该 突 变 没 有 引 起 氨 基 酸 改 变 是 沉 默 突 变 1 基 因 在 不 同 山 羊 品 种 中 的 遗 传 多 态 性 ( 个 山 羊 品 种 中 基 因 对 引 物 扩 增 片 段 的 等 位 基 因 频 率 和 基 因 型 频 率 见 表 2'1*/#%$"# '#"%'3 $

期 狄 冉 等 促 黄 体 素 基 因 多 态 性 及 其 与 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 的 关 系 - 图 山 羊 引 物 中.. 基 因 型 和 处 突 变 的 测 序 峰 图 2'1,$"$%/$/% "##%#%(..%('$%#$ $%'#'$%$ 图 山 羊 引 物 中 44 基 因 型 处 突 变 的 测 序 峰 图 2'1,$"$%/$/% "##%# %(44'$%#$ $% '#'$%$ 表 个 山 羊 品 种 中 基 因 的 等 位 基 因 频 率 和 基 因 型 频 率 $.$$%('$%#$ $"$%/$ '$%$% "'#$$( 括 号 内 的 数 字 是 个 体 数 品 种 *% 济 宁 青 山 羊 " 6%"$ 辽 宁 绒 山 羊 $" #&%"$ 波 尔 山 羊 *$%"$ 安 哥 拉 山 羊 ) "$%"$ 数 量 5 ( ( ( 基 因 型 频 率 6$ %2 等 位 基 因 频 率 )%2 基 因 型 频 率 6$ %2 等 位 基 因 频 率 )%2 )) ( )* - ** ) -- - ( - * ( ( ( ( (, ((- -,, (, ( +# &'% #'%2<%# &'%$#'$"$#%2"$

- 畜 牧 兽 医 学 报 ( 卷 由 表 可 见 的 扩 增 片 段 在 ( 个 山 羊 品 种 中 都 检 测 到 )))* 和 ** 种 基 因 型 在 波 尔 山 羊 中 * 等 位 基 因 频 率 较 高 其 余 个 品 种 中 都 是 ) 等 位 基 因 频 率 较 高 的 扩 增 片 段 在 济 宁 青 山 羊 中 检 测 到, 和,, 种 基 因 型 在 辽 宁 绒 山 羊 中 检 测 到 和, 种 基 因 型 在 其 余 个 山 羊 品 种 中 都 只 检 测 到 基 因 型 经 检 验 济 宁 青 山 羊 在 两 个 座 位 上 都 处 于 哈 迪 温 伯 格 平 衡 状 态 座 位.. (- 座 位..(( 这 与 检 测 的 济 宁 青 山 羊 来 自 一 个 随 机 交 配 大 群 体 的 一 个 随 机 样 本 是 一 致 的 表 明 济 宁 青 山 羊 这 个 座 位 的 基 因 型 频 率 没 有 受 到 选 择 突 变 或 迁 移 等 因 素 的 影 响 1 固 定 效 应 对 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 的 影 响 对 于 扩 增 片 段 方 差 分 析 结 果 表 明 产 羔 季 节 和 胎 次 对 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 都 有 显 著 影 响 分 别 为. 和. 基 因 型 对 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 没 有 显 著 影 响. 对 于 扩 增 片 段 方 差 分 析 结 果 表 明 产 羔 季 节 胎 次 和 基 因 型 对 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 都 有 显 著 影 响 分 别 为.(. 和. 不 同 基 因 型 的 只 济 宁 青 山 羊 母 羊 产 羔 数 的 最 小 二 乘 均 值 及 标 准 误 见 表 表 不 同 基 因 型 的 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 的 最 小 二 乘 均 值 及 标 准 误 $!$#"$$%%(#%(($ #$&$ ( $$%#'$%#$%-%%'$'# 引 物 %&% 基 因 型 样 本 数 产 羔 数 %! 6$ 5$ )) D ) )* -D ) ** (D ) D *, - D ),, (D ) 同 一 对 引 物 具 有 相 同 字 母 肩 标 的 平 均 值 间 差 异 不 显 著 同 一 对 引 物 具 有 不 同 字 母 肩 标 的 平 均 值 间 差 异 极 显 著 %&##&%2%$%#&%$ %&%# $"2%2 % &##%%2%$%#&%$%&% %"2 由 表 可 见 对 于 扩 增 片 段 济 宁 青 山 羊 种 基 因 型 之 间 产 羔 数 差 异 均 不 显 著 对 于 扩 增 片 段,, 和, 基 因 型 济 宁 青 山 羊 平 均 产 羔 数 分 别 比 基 因 型 的 多 只 和 - 只 讨 论 5 基 因 的 多 态 性 促 黄 体 素 的 2,5) 已 从 人 猪 大 鼠 牛 绵 羊 等 几 个 物 种 中 分 离 和 鉴 定 已 知 的 基 因 总 的 片 段 长 度 大 约 为 <') "$*%% 等 使 用 大 鼠 2,5) 作 为 探 针 从 绵 羊 垂 体 *2,5) 文 库 中 分 离 出 包 含 绵 羊 亚 基 2,5) 的 克 隆 并 获 得 了 绵 羊 亚 基 完 整 的,5) 序 列 结 果 表 明 确 定 的 绵 羊 氨 基 酸 序 列 与 牛 有 的 相 似 性 与 猪 有 ( 的 相 似 性 与 大 鼠 有 的 相 似 性 与 马 属 动 物 有 -( 的 相 似 性 与 人 有 的 相 似 性 编 码 该 激 素 亚 基 基 因 的 突 变 往 往 会 使 动 物 的 生 殖 过 程 出 现 障 碍 基 因 突 变 的 研 究 目 前 主 要 集 中 在 人 类 生 殖 系 统 疾 病 方 面 在 羊 牛 猪 等 物 种 中 的 研 究 报 道 还 不 多 B$2 等 在 一 个 青 春 期 延 迟 的 男 性 患 者 中 发 现 基 因 的 一 个 错 义 突 变 6)3 造 成 7 不 分 泌 从 而 引 起 不 育 $%$$%$ 等 在 个 家 族 位 男 性 和 位 女 性 中 同 时 发 现 其 基 因 端 剪 切 位 点 的 纯 合 型 突 变 4BA6 该 突 变 破 坏 了 &5) 的 剪 切 造 成 7 不 分 泌 两 性 都 表 现 为 不 育 人 基 因 另 外 个 突 变 位 点 +%)%"4+#% 被 证 明 与 促 性 腺 激 素 不 足 型 性 腺 机 能 减 退 #$"$$%$2#$"$& 77 没 有 相 关 性 ( 王 爱 华 等 在 猪 基 因 的 个 外 显 子 以 及 调 控 区 内 都 没 有 发 现 任 何 突 变 位 点 仅 在 个 内 含 子 中 各 发 现 个 多 态 性 位 点 李 利 等 用 酶 切 的 方 法 对 南 江 黄 羊 基 因 的 研 究 发 现 在 ( 位 点 存 在 个 突 变 6) 或 与 产 羔 数 没 有 显 著 相 关 但 )) 基 因 型 母 羊 第 胎 后 产 羔 数 与 窝 重 有 增 加 的 趋 势 本 研 究 在 山 羊 基 因 调 控 区 发 现 处 突 变 ) 和 + 在 ( 个 山 羊 品 种 中 都 检 测 到 了 种 基 因 型 )))* 和 ** 在 外 显 子 的 (' 处 检 测 到 + 突 变 只 在 济 宁 青 山 羊 中 检 测 到 了 全 部 种 基 因 型, 和,, 辽 宁 绒 山 羊 中 没 有,, 基 因 型 而 在 波 尔 山 羊 和 安 哥 拉 山 羊 个 外 来 品 种 中 都 只 检 测 到 基 因 型 这 可 能

期 狄 冉 等 促 黄 体 素 基 因 多 态 性 及 其 与 济 宁 青 山 羊 产 羔 数 的 关 系 -- 是 由 国 内 外 品 种 在 该 位 点 的 差 异 所 致 1 基 因 与 繁 殖 性 能 的 关 系 &% 通 过 建 立 基 因 敲 除 小 鼠 模 型 阐 明 了 该 基 因 对 哺 乳 动 物 繁 殖 性 能 的 影 响 基 因 敲 除 小 鼠 能 够 存 活 但 出 生 后 性 腺 不 再 发 育 没 有 繁 殖 能 力 基 因 敲 除 的 雄 性 小 鼠 表 现 为 睾 丸 变 小 血 浆 和 睾 丸 内 的 睾 酮 水 平 降 低 精 子 发 育 全 部 停 留 在 精 原 细 胞 阶 段 基 因 敲 除 的 雌 性 小 鼠 表 现 为 性 腺 机 能 低 下 血 浆 中 雌 激 素 和 孕 激 素 的 水 平 降 低 卵 泡 不 发 育 黄 体 缺 失 这 表 明 基 因 对 哺 乳 动 物 的 性 成 熟 和 生 殖 能 力 起 着 至 关 重 要 的 作 用 此 外 还 发 现 多 种 转 录 因 子 如 孤 核 受 体 类 固 醇 生 成 因 子 早 期 生 长 应 答 蛋 白 等 通 过 与 基 因 启 - 动 子 区 直 接 结 合 而 对 该 基 因 的 表 达 进 行 调 控 该 基 因 其 它 区 域 是 否 存 在 调 控 位 点 尚 不 明 确 本 研 究 在 山 羊 基 因 调 控 区 检 测 到 了 处 突 变 尽 管 这 些 突 变 与 产 羔 数 没 有 显 著 相 关 但 调 控 区 很 可 能 存 在 某 种 转 录 因 子 的 识 别 位 点 这 些 位 点 可 能 与 转 录 因 子 结 合 从 而 直 接 影 响 基 因 的 表 达 因 此 不 同 品 种 之 间 7 表 达 量 的 差 异 可 能 与 该 区 域 的 多 态 性 有 关 这 有 待 进 一 步 研 究 证 实 另 外 本 研 究 在 山 羊 基 因 外 显 子 检 测 到 (+ 突 变 该 突 变 与 产 羔 数 极 显 著 相 关 虽 然 该 突 变 没 有 引 起 氨 基 酸 改 变 但 可 以 推 测 该 位 点 可 能 与 控 制 济 宁 青 山 羊 高 繁 殖 力 的 主 效 基 因 存 在 连 锁 关 系 本 研 究 虽 然 没 有 检 测 基 因 内 含 子 是 否 存 在 多 态 性 但 已 有 研 究 表 明 某 些 基 因 的 内 含 子 也 参 与 基 因 的 表 达 调 控 内 含 子 对 基 因 的 特 异 性 表 达 是 必 不 可 少 的 因 此 进 一 步 分 析 山 羊 基 因 内 含 子 序 列 检 测 是 否 存 在 5 位 点 以 及 这 些 突 变 位 点 是 否 会 影 响 基 因 的 表 达 量 同 样 具 有 很 高 的 价 值 由 于 本 研 究 检 测 的 品 种 数 和 样 本 数 较 少 所 获 得 的 结 论 只 是 初 步 的 值 得 增 加 山 羊 品 种 数 扩 大 样 本 数 进 行 标 记 与 产 羔 性 能 关 联 作 深 入 研 究 结 论 本 研 究 在 ( 个 山 羊 品 种 基 因 调 控 区 都 检 测 到 种 基 因 型 )))* 和 ** 发 现 处 突 变 ) 和 + 对 于 该 基 因 外 显 子 只 在 济 宁 青 山 羊 中 检 测 到 全 部 种 基 因 型, 和,, 辽 宁 绒 山 羊 中 没 有 检 测 到,, 基 因 型 而 在 波 尔 山 羊 和 安 哥 拉 山 羊 两 个 外 来 品 种 中 都 只 检 测 到 基 因 型 在 (' 处 检 测 到 + 突 变 且 该 突 变 与 产 羔 数 极 显 著 相 关 参 考 文 献 4 6)?5 + ;62$%$ #$% &$%2%2$ /, %(( )9* * ))98114:** $%$$%$2$&2$ #2 $ & %( 罗 文 祥 祝 诚 46;446; 结 合 蛋 白 和 7 受 体 &5) 在 卵 泡 闭 锁 中 的 表 达 调 控 中 国 科 学 辑 (-- (4)1?)?? 9*))6E5 9 2$7 &%$ #$ ;7 %$$%%"& $ $$ % &'%$%$2$ #%'%$#0 )&)!(- 95)++ 78,?5 575,?5 9,%2 "$$%$# 2$2% $%%$$6 7 ' *$$%$$#2#%#$&$!"$;;#% $!"$;A $2%%% A A$% &C$% "2"#%$$ % $--- ;945665:??,7)+7, ) 3%$ $"$$%$# '" ##%#$&$!"$2%%% $2%%% $#*$$%$$2";2 * $ - 7)+7, )),)5+ 995)++ $#' # &'%$&&$" "$$%$#&2$2%$$"$ $%$# ##$#;2* * " $-- 张 英 杰 刘 月 琴 储 明 星 小 尾 寒 羊 高 繁 殖 力 和 常 年 发 情 内 分 泌 机 理 的 研 究 畜 牧 兽 医 学 报 李 利 张 红 平 吴 登 俊 南 江 黄 羊 基 因 序 列 多 态 性 与 产 羔 数 的 相 关 分 析 吉 林 农 业 大 学 学 报 - 5+9?,),?,,6< "$7* 9)6$64$ #2#%$&$$& ((%%&'%( 中 国 羊 品 种 志 编 写 组 中 国 羊 品 种 志 9 上 海 上 海 科 学 技 术 出 版 社

- 畜 牧 兽 医 学 报 ( 卷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王 爱 华 李 宁 吴 常 信 猪 亚 基 基 因 的 单 核 苷 酸 多 态 性 研 究 遗 传 (( 89)+;2$$7'<$2< $&2(&+&&- ( -?)B46?)+)5?9?$ %$$%$" %2$%# ' # &$$ $!"#$%&$% $$< #&%&2$ $%#"%$ $#%$$%%" &)!((-- )4 8 *7)B??5 975 9 + %$$"22$% ;%"%$# %$%$ "%'"$%&%% "$$%$%"#$%&$%$& #%!"#$%&$'"%$&$% "%%$$%;(&&( ( 9)8,5)?1*?5;4,%$ %2#%$< &"$$%$% "#$%&$""$223%2% %"<%2%$$2 #!"#$%&$''"(& &- 74?4+4*7)* )?? 5 ) %$2$22$%$%"$ %$ #'#&$ $$&$#22#%$& $& $%##& &,'"%$ " (&+&,&---- 4494) 9? :2$$&%$$$ $%"$&2$$%2& --