ANCA( 抗 中 性 粒 细 胞 胞 浆 抗 体 ) ANCA = Anti-Neutrophil Cytoplasm Autoantibodies 血 管 炎 中 的 自 身 抗 体 :ANCA canca: 胞 浆 型 中 性 粒 细 胞 panca: 核 周 型 两 种 ANCA 荧 光 染 色 两 种 ANCA 荧 光 染 色 成 因 核 周 型 ANCA(pANCA) 细 胞 核 周 围 呈 现 平 滑 的 带 状 荧 光, 细 胞 核 阴 性 胞 浆 型 ANCA(cANCA) 细 胞 浆 呈 现 不 均 匀 的 颗 粒 样 荧 光, 有 时 形 成 小 团 块 或 粗 大 颗 粒, 核 分 叶 处 有 荧 光 增 强 1
受 累 血 管 部 位 ANCA- 相 关 小 血 管 炎 (according to Chapel Hill Consensus Conference, 1994) 韦 格 纳 氏 肉 芽 肿 (c-anca) 显 微 多 动 脉 炎 (p-anca) Churg-Strauss 综 合 症 ( 变 应 性 肉 芽 肿 性 脉 管 炎 ) 肾 脏 局 限 型 : 特 发 性 坏 死 性 新 月 体 肾 炎 Jennette JC, N Engl J Med 337:1512-1523 (1997) ANCA 临 床 意 义 (1): 原 发 性 系 统 性 小 血 管 炎 ANCA 临 床 意 义 (2):IBD/ALD/CTD 相 关 疾 病 IIF 染 色 型 特 异 性 靶 抗 原 抗 体 韦 格 纳 氏 肉 芽 肿 (WG) c, p( 少 见 ) PR3(85%),MPO(10%) 显 微 型 多 动 脉 炎 (MPA) c, p PR3(30%),MPO(70%) 坏 死 性 新 月 体 肾 小 球 肾 炎 p, c( 少 见 ) PR3(25%),MPO(65%) (NCGN) 过 敏 性 肉 芽 肿 性 血 管 炎 (CSS) p, c( 少 见 ) PR3(10%),MPO(60%) 结 节 性 多 动 脉 炎 (PAN) 低 阳 性 率 PR3( 5%),MPO(15%) 抗 肾 小 球 基 底 膜 疾 病 p MPO(30%) ( 抗 GBM 病 ) 相 关 疾 病 IIF 染 色 型 特 异 性 靶 抗 原 抗 体 炎 症 性 肠 病 溃 疡 性 结 肠 炎 (UC, 60-80%) p, a BPI, lamina? 其 它 克 罗 恩 病 (Crohn s 病, 10-20%) p, a BPI, lamina? 其 它 自 身 免 疫 性 肝 病 原 发 性 硬 化 性 胆 管 炎 (PSC, 70-88%) p, a actin? BPI, 其 它 原 发 性 胆 汁 性 肝 硬 化 (PBC, 3-18%) p, a actin? BPI, 其 它 自 身 免 疫 性 肝 炎 (AIH) p, a actin? BPI, 其 它 结 缔 组 织 病 系 统 性 红 斑 狼 疮 (SLE) p, a LF, CG,MPO( 少 见 ) 类 风 湿 性 关 节 炎 (RA) p, a LF, CG,MPO ( 少 见 ) Felty 综 合 征 p, a LF, CG,MPO( 少 见 ) 2
ANCA 临 床 意 义 (3): 药 物 性 / 感 染 性 疾 病 相 关 疾 病 IIF 染 色 型 特 异 性 靶 抗 原 抗 体 药 物 性 ANCA 阳 性 血 管 炎 药 物 性 狼 疮 (DIL) p MPO ( 常 见 ) LF,HEL 甲 状 腺 功 能 亢 进 (PTU 治 疗 ) p, a MPO,LF,HEL,BPI, 其 它 呼 吸 系 统 炎 性 疾 病 囊 性 纤 维 化 (CF) a, p BPI(91%) 原 发 性 支 气 管 扩 张 症 a, p BPI, 其 它 原 发 性 支 气 管 扩 张 a, p BPI, 其 它 感 染 性 疾 病 细 菌 ( 心 内 膜 炎 呼 吸 道 感 染 ) a, p BPI,CG, 其 它 病 毒 (HIV 感 染 ) a, p 不 明 真 菌 ( 着 色 真 菌 病 ) a, p 不 明 原 虫 ( 急 性 疟 疾 侵 袭 性 阿 米 巴 感 染 ) a, p CG,PR3 阴 性 ANCA 检 测 : 推 荐 方 案 ANCA 检 测 和 报 告 的 国 际 共 识 (Savige, van der Woude, Wiik et al., 1999) 最 优 检 测 最 低 检 测 IIFT 阳 性 单 特 异 性 ELISA 检 测 结 果 IIF 检 测 ANCA ANCA 筛 查 : 免 疫 荧 光 IIF 是 检 测 ANCA 的 经 典 方 法 敏 感 性 高, 半 定 量, 是 区 分 canca 和 panca 的 基 础, 为 检 测 ANCA 的 参 考 方 法 或 标 准 方 法 IIF 测 定 的 是 总 ANCA, 不 能 区 分 靶 抗 原, 需 要 确 认 实 验 作 为 补 充 粒 细 胞 ( 乙 醇 固 定 ) 粒 细 胞 ( 甲 醛 固 定 ) 猴 肝 HEp-2 3
canca canca canca: 靶 抗 原 canca: 相 关 疾 病 蛋 白 酶 3 (PR3) 杀 菌 性 / 通 透 性 增 强 蛋 白 (BPI; CAP57) 其 它 未 知 抗 原 韦 格 纳 肉 芽 肿 (WG) - 典 型 的 WG: 可 逐 渐 发 展 成 为 肾 小 球 肾 炎 >90% - 局 限 性 的 WG: 可 不 累 及 肾 小 球 70% 显 微 镜 下 多 动 脉 炎 (MPA) up to 30% 变 应 性 肉 芽 肿 性 血 管 炎 (Churg-Strauss 综 合 征 ) 10-20% 结 节 性 多 动 脉 炎 (PAN) 5-10% 4
注 意 区 分 ANA 对 荧 光 模 型 的 干 扰 抗 溶 酶 体 抗 体 ANA homogen Nuclear dots Centromere ANA nucleolar Scl-70 Sm/RNP SS-A/SS-B Nuclear memb. Ribosomes Mitochondria Golgi apparat. Lysosomes Actin Vimentin panca ( 甲 醛 抗 性 ) panca 5
panca( 甲 醛 敏 感 ) panca: 靶 抗 原 髓 过 氧 化 物 酶 (MPO; 甲 醛 固 定 ) 乳 铁 蛋 白 弹 性 蛋 白 酶 组 织 蛋 白 酶 G 杀 菌 性 / 通 透 性 增 强 蛋 白 (BPI; CAP57) - 烯 醇 化 酶 - 葡 萄 糖 醛 酸 酶 溶 菌 酶 Azurocidine (CAP37)... panca: 相 关 疾 病 注 意 区 分 ANA 对 荧 光 模 型 的 干 扰 原 发 性 血 管 炎 (MPA) 显 微 镜 下 多 动 脉 炎 42-70% 变 应 性 肉 芽 肿 性 血 管 炎 18-60% 结 缔 组 织 病 SLE 9-25% 类 风 湿 性 关 节 炎 3-20% 慢 性 炎 症 性 肠 病 溃 疡 性 结 肠 炎 76% 克 隆 恩 氏 病 7% ANA homogen Nuclear dots Centromere ANA nucleolar Scl-70 Sm/RNP SS-A/SS-B Nuclear memb. Ribosomes Mitochondria Golgi apparat. Lysosomes Actin Vimentin 自 身 免 疫 性 肝 病 原 发 性 硬 化 性 胆 管 炎 87% AIH type 1 / PBC? 6
ANA + panca 与 ANA 均 质 型 ANA 的 干 扰 ANA + panca ANA ANA + panca( 甲 醛 抗 性 ) ANA + panca ( 甲 醛 敏 感 ) 7
靶 抗 原 确 认 实 验 ANCA 谱 ELISA ELISA 欧 蒙 印 迹 法 canca panca canca panca ANCA 检 测 注 意 事 项 ANCA 检 测 方 法 的 合 理 选 择 ANCA 检 测 方 法 的 合 理 选 择 ANA 对 IIF 检 测 ANCA 的 影 响 ANCA 的 定 量 或 半 定 量 检 测 单 独 使 用 IIF 法 或 特 异 性 ELISA 法 是 不 完 善 的, 应 提 倡 两 种 方 法 联 合 使 用, 可 提 高 ANCA 临 床 应 用 价 值 对 于 怀 疑 原 发 性 小 血 管 炎 患 者 提 倡 应 用 IIF 法 和 特 异 性 ELISA 法 同 时 检 测, 约 5%IIF 法 ELISA 法 + 8
ANA 对 IIF 法 检 测 ANCA 的 影 响 ANCA 的 定 量 或 半 定 量 检 测 应 用 IIF 法 检 测 SLE 中 的 ANCA, 国 内 外 报 道 的 阳 性 率 从 16% 到 69%, 差 异 很 大, 主 要 为 panca 这 些 研 究 大 部 分 仅 采 用 乙 醇 固 定 抗 原 片 检 测,ANA 对 ANCA 检 测 干 扰 可 能 很 大 我 们 检 测 发 现,SLE 中 单 独 采 用 乙 醇 固 定 抗 原 片 检 测 ANCA, 由 于 ANA 干 扰 可 产 生 31.2% 的 假 阳 性 结 果, 主 要 为 均 质 型 的 ANA( 占 77.8%) IIF 法 检 测 ANCA 提 倡 应 用 组 合 抗 原 片 ( 甲 醛 固 定 片 乙 醇 固 定 片 Hep-2 细 胞 片 等 ), 综 和 判 断 结 果, 避 免 ANA 干 扰, 提 高 ANCA 临 床 应 用 价 值 抗 PR3 及 MPO 抗 体 滴 度 与 病 情 活 动 一 致, 在 原 发 性 小 血 管 炎 患 者, 常 被 作 为 判 断 疗 效 估 计 复 发 的 指 标, 从 而 指 导 临 床 治 疗 CTD 患 者 等 非 血 管 炎 患 者, 可 偶 见 抗 MPO 抗 体 且 效 价 较 低, 而 高 滴 度 的 抗 MPO 抗 体 更 多 见 于 原 发 性 小 血 管 炎 临 床 常 规 检 测 ANCA 应 报 告 定 量 或 半 定 量 检 测 结 果 IIF 法 : 将 血 清 作 倍 比 稀 释 后 (1:10 1:100), 再 进 行 检 测 抗 体 滴 度 ELISA 法 : 应 选 择 可 定 量 或 相 对 定 量 的 检 测 试 剂 盒 Thank you! 9