104 年 度 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 訓 練 課 程 台 灣 醫 事 檢 驗 學 會 2015/7/5 2015/8/23 1
孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 流 行 病 學 培 養 檢 體 處 理 及 常 在 菌 群 介 紹
大 綱 乙 型 鏈 球 菌 (GBS) 篩 檢 臨 床 意 義 流 行 病 學 及 陽 性 率 乙 型 鏈 球 菌 (GBS) 篩 檢 方 法 流 程 演 進 乙 型 鏈 球 菌 (GBS) 培 養 流 程 檢 體 採 集 與 接 種 方 式 Enriched broth 常 在 菌 群 介 紹 3 3
乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 流 行 病 學 及 篩 檢 方 法 演 進 4
乙 型 鏈 球 菌 30% 健 康 者 有 此 共 生 菌 於 生 殖 泌 尿 道 及 腸 胃 道 乙 型 鏈 球 菌 (Group B Streptococcus, or Streptococcus agalactiae; 簡 稱 GBS) 是 造 成 孕 婦 周 產 期 嚴 重 感 染 之 主 要 致 病 菌 造 成 產 婦 : 早 產 早 期 破 水 絨 毛 羊 膜 炎 產 後 感 染 造 成 新 生 兒 : 敗 血 症 腦 膜 炎 肺 炎 神 經 系 統 後 遺 症 早 發 型 感 染 (EOD): 在 出 生 時 一 週 內 發 病, 早 產 兒 在 生 後 6~12 hs 發 病, 足 月 兒 則 晚 至 24 hs 以 後 晚 發 型 感 染 (LOD): 發 生 於 生 後 一 週 ~3 個 月 內 美 國 1970 年 代 新 生 兒 GBS 感 染 致 死 率 >50% 1980s: 懷 孕 婦 女 GBS(+):GBS(-) 引 起 新 生 兒 早 發 型 感 染 之 比 率 為 >25 倍 5 5
Global incidence of group B streptococcal invasive disease in infants An overall incidence of 0.53 per 1000 live births. Incidence was highest in Africa (1.21/1000) followed by the Americas (0.67/1000) and Europe (0.57/1000). A low incidence of neonatal invasive diseases was reported in Japan. A nationwide surveillance study between 2004 and 2010 showed that the incidence of EODandLODwas008and 0.08 010per 0.10 1000 live births, respectively. 取 自 Therapeutic Advances in Vaccines 2015 Review : Group B Streptococcus vaccine 6
美 國 GBS 相 關 流 行 病 學 1970s 新 生 兒 GBS 感 染 致 死 率 >50% 1980s 產 程 預 防 性 抗 生 素 治 療 可 預 防 EOD 早 發 型 感 染 1990s 早 發 型 新 生 兒 感 染 率 :1.8/1000 新 生 兒 GBS 感 染 致 死 率 : 下 降 至 4% CDC: Prevention of Perinatal Group B Streptococcal 1996 Disease 推 行 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 及 產 程 給 予 藥 物 治 療 (IAP)--1999 早 發 型 新 生 兒 感 染 率 :0.5/1000 2002 修 訂 全 面 性 施 行 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 及 IAP 規 範 2010 修 訂 Prevention of Perinatal Group B Streptococcal Desease- Revised Guidelines from CDC, 2010 7
1996 Consensus Guidelines for GBS Prevention Screening-based approach: ( 有 做 GBS 篩 檢 ) Vaginal-rectal culture at 35-37 wks IAP( 產 程 給 予 藥 物 治 療 ) for GBS carriers Risk-based approach :( 沒 有 做 GBS 篩 檢, 高 危 險 群 ) No vaginal-rectal culture IAP for preterm deliveries(<37wks), membrane rupture (>18 hours), or intrapartum fever (T>38 C) IAP to women with: ( 上 一 胎 或 此 次 懷 孕 期 間 尿 液 +) ) GBS bacteriuria during pregnancy Previous infant with GBS disease 8
2002 GBS Guidelines: Key Changes 35-37 wks 孕 婦 全 面 GBS 篩 檢 對 penicillin-allergic 的 產 婦 IAP 使 用 : Cefazolin( 可 達 高 羊 水 濃 度 ). 0.7% 4.0% 對 penicillin 產 生 過 敏 約 10% penicillin-allergic 產 婦 為 Cefazolin 高 風 險 過 敏 者 剖 婦 產 -GBS can cross intact amniotic membranes. 早 產 孕 婦 IAP 治 療 : 4 hours before delivery to women delivering at <37 weeks gestation, antibiotic prophylaxis was 78% effective in preventing early-onset tgbsdi disease (CDC, 2009). 檢 體 採 檢 時 間 (NPV 5 weeks before delivery is 95% 98%;) 部 位 (both the lower vagina and rectum) 及 處 理 ( stored at 4 C before culture and processed within 24 hours of collection) 9
孕 婦 GBS(+) rate 2000-2010 懷 孕 婦 女 GBS(+) 於 產 道 或 直 腸 10 30%, 尿 液 2-7% (a marker for heavy genital tract colonization). 2003 2004, among screened women, 24.2% were documented as GBS-positive. 此 GBS 移 生 狀 態 可 能 是 暫 時 性 間 歇 性 或 永 久 性 Colonization early in pregnancy is not predictive of early- onset GBS disease. 此 帶 菌 率 從 1970s 至 今 未 曾 下 降 新 生 兒 約 1% 會 造 成 GBS 感 染 目 前 尚 未 有 取 得 證 照 的 GBS 疫 苗 問 世 美 國 CDC 於 2010 年 公 告 GBS 預 防 規 範 修 訂 版 10
2010 Revised Guidelines:key changes 擴 展 GBS 鑑 定 方 法 孕 婦 尿 液 培 養 GBS 須 明 確 註 明 菌 量 更 新 未 足 月 生 產, 早 產 兒 及 胎 膜 早 破 等 篩 檢 程 序 及 IAP 治 療 程 序 帶 菌 孕 婦 於 生 產 前 產 程 開 始 或 胎 膜 破 水 開 始 提 供 預 防 性 藥 物 治 療 藥 物 治 療 的 劑 量 及 對 penicillin illi 過 敏 者 藥 方 更 新 新 生 兒 預 防 GBS 早 發 型 感 染 流 程 更 新 11
CDC 2010 Revised Guidelines: Recommendations 確 認 產 程 給 予 預 防 性 藥 物 治 療 之 對 象 全 面 GBS 篩 檢 陽 性 <37 週 早 產 GBS 檢 體 採 集 及 傳 送 應 於 懷 孕 35-37 週 間 採 檢 一 支 Vaginal & Rectal 檢 體 應 種 入 增 菌 培 養 液 18-24 小 時 正 確 結 果 比 時 效 重 要 尿 液 檢 體 須 註 明 懷 孕 " 鑑 定 方 法 增 加 如 : 由 增 菌 液 取 出 直 接 種 入 產 色 培 養 基, 或 直 接 做 NAAT (PCR), 要 作 品 管 對 Penicillin 具 有 高 風 險 過 敏 者 務 必 做 藥 敏 試 驗, 當 藥 敏 結 果 為 E(R), Clinda(S) 時, 務 必 做 D-zone test ( 檢 測 inducible Clindamycin Resistance). 若 是 尿 液 檢 體, 實 驗 室 發 報 告 時 須 註 明 GBS 菌 量 及 是 否 單 一 菌 種 或 兩 種 以 上 監 測 施 行 結 果 12
GBS 抗 藥 性 penicillin, ampicillin, and first generation cephalosporins 持 續 有 效 clindamycin( 13% to 20% ), erythromycin ( 25% to 32% ), 抗 藥 性 增 加 (2006-2009) 13
Early-onset GBS Disease in the U.S. : 2010 MMWR,2010, Nov.19 14 14
總 結 : 美 國 GBS 相 關 流 行 病 學 施 行 孕 婦 GBS 篩 檢 及 IAP 後, 新 生 兒 感 染 致 死 率 由 >50% (1970s) 4% (1990s) 新 生 兒 感 染 率 早 發 型 :1.8/1000 (1990s) 0.5/1000 (1999) ( 下 降 78%) 0.3-0.4/1000 (2002 全 面 GBS 篩 檢 之 後 ) ( 再 下 降 20-40%) 15 15
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台 灣 GBS 現 況 及 問 題 17
國 健 署 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 補 助 服 務 方 案 台 灣 孕 婦 產 道 帶 有 乙 型 鏈 球 菌 之 帶 菌 率 約 20%, 新 生 兒 感 染 率 約 1, 新 生 兒 感 染 致 死 率 為 10% 至 13%, 感 染 後 神 經 系 統 後 遺 症 者 為 15%, 且 需 長 期 提 供 醫 療 照 護 99 年 起, 優 先 提 供 低 收 入 戶 孕 婦 接 受 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 費 用 補 助 100 年 起 擴 大 補 助 對 象 至 中 低 收 入 戶 設 籍 山 地 原 住 民 地 區 離 島 偏 遠 地 區 之 孕 婦 101 年 4 月 15 日 起, 全 面 提 供 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 補 助 服 務 方 案 實 施 方 法 : 本 國 籍 懷 孕 婦 女 於 妊 娠 第 35 週 至 37 週, 至 特 約 醫 事 服 務 機 構 接 受 孕 婦 GBS 篩 檢 1 次 GBS(+), 投 與 產 程 中 預 防 性 抗 生 素 18
篩 檢 時 機 GBS 的 移 生 是 短 暫 的 陰 性 預 測 值 95-98% N=826 Yancey et al., OB GYN 1996;88:811-5. 35 to 37 懷 孕 週 數 19
各 國 孕 婦 GBS 篩 檢 之 時 程 國 家 產 檢 時 程 美 國 美 國 CDC 準 則 建 議 妊 娠 35-37 週 加 拿 大 妊 娠 35-37 週 日 本 妊 娠 33-3737 週 英 國 妊 娠 33-37 週 台 灣 妊 娠 第 三 期 (35-37 週 ) 若 孕 婦 於 尚 未 接 受 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 前, 出 現 早 期 子 宮 收 縮 或 胎 膜 早 破 現 象 而 住 院 者, 除 接 受 常 規 治 療 外, 亦 應 於 住 院 時, 依 醫 師 專 業 意 見 接 受 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 20 20
102 年 ~104 年 各 醫 療 單 位 GBS 陽 性 率 醫 學 中 心 區 域 醫 院 地 區 醫 院 檢 驗 所 2013 年 1-6 月 16.7%-23.9% 11.8%-29.7% 12.8%-31.4% 16.3%-28.2% 2013 年 7-12 月 16.0%-28.9 % 11.5%-33.8% 18.2%-27.4% 15.6%-34.5% 2014 年 1-6 月 17.3%-26.7 % 14.8%-29.0 % 14.2%-29.1% 29.1% 15.1%-34.7 % 2014 年 7-12 月 14.9%-27.4% 9.3%-31.0% 11.9%-26.6% 17.6%-34.1% 2015 年 1-5 月 18.1%-31.5 % 10.3%-32.6% 14.6%-41.7% 13.5%-32.7% 根 據 國 民 健 康 署 孕 婦 產 前 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 申 報 資 料, 執 行 孕 婦 產 前 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 檢 驗 機 構 平 均 陽 性 率 約 為 20%, 但 部 分 檢 驗 機 構 陽 性 率 低 於 15% 21
2013 年 ~2015 年 5 月 各 醫 療 單 位 GBS 陽 性 率 GBS 檢 測 量 及 陽 性 率 平 均 : 20.7% 100000 80000 60000 40000 20000 0 2013.1~6 2013.7~12 2014.1~6 2014.7~12 2015.1~5 (+) 15530 16793 17103 20022 13880 總 數 77572 82633 83229 92959 66534 陽 性 率 20.0% 20.3% 20.5% 21.5% 20.9% 22
GBS 培 養 檢 體 處 理 及 生 殖 道 的 常 在 菌 群
影 響 GBS 培 養 陽 性 率 檢 體 採 檢 部 位 不 適 當 採 檢 容 器 錯 誤 採 檢 後 傳 送 及 保 存 方 式 錯 誤 培 養 方 式 錯 誤 人 員 經 驗 不 足 可 參 閱 醫 檢 學 會 網 頁 http://www.labmed.org.tw/upfiles/test_5a/201451611 t /U /T t 467.pdf 24 24
GBS 偽 陽 性 與 偽 陰 性 對 臨 床 影 響 GBS 偽 陽 性 : 臨 床 醫 師 判 讀 錯 誤 而 使 用 抗 生 素 GBS 偽 陰 性 : 臨 床 醫 師 無 預 防 性 用 藥, 易 造 成 新 生 兒 感 染 25 25
生 殖 道 的 常 在 菌 叢 Clin Infect Dis 2001; 32:e69 77 26 26
培 養 皿 上 有 多 種 細 菌, 不 容 易 找 出 GBS 27 27
培 養 方 法 : 增 菌 Total No tested No.(+) by No.(+) by No. (+) Time Direct Lim broth Plating (%) (%) A 952 168 (17.6) 86 (9) 166 (17.4) B 639 128 (20%) 24 63 (9.8) 125 (19.5) 48 101 (15.8) A. Diagn Microbiol Infect Dis. 1994 Mar;18(3):141-4. B. Path Lab Med 2003 Jun;127(6):718-20. 28 28
29 29
結 論 - 對 於 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 的 篩 檢, 正 確 的 結 果 比 時 效 重 要 約 有 ~50% 的 孕 婦 如 未 經 18-24 小 時 增 菌 培 養 可 能 有 陰 性 的 結 果 拭 子 可 以 直 接 接 種 培 養 皿, 但 不 可 取 代 增 菌 培 養 步 驟 所 以 增 菌 培 養 是 作 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 的 篩 檢 最 關 鍵 的 步 驟 30 30
2014 年 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 檢 驗 機 構 調 查 彙 總 ( 回 覆 家 數 :140 家 ) 檢 體 採 集 與 接 收 回 覆 家 數 百 分 比 附 註 有 131 93.6 有 否 提 供 採 檢 須 知 給 無 7 5.0 使 用 者 未 回 覆 2 1.4 Stuart's t 12 8.6 其 他 : 無 菌 棉 棒 Cary-C Amies 121 86.4 使 用 何 種 採 檢 拭 子? Blair 尚 未 接 過 test 其 他 3 2.1 未 回 覆 1 07 0.7 一 支 拭 子, 陰 道 + 肛 門 部 位 125 89.3 實 驗 室 接 收 檢 體 數 目 二 支 拭 子, 區 分 肛 門 與 陰 道 檢 體 22 15.7 其 他 : 尚 未 收 過 檢 體 其 他 2 1.4 未 回 覆 2 1.4 冰 箱 4 79 56.4 未 接 種 檢 體 保 存 方 式 室 溫 60 42.8 未 回 覆 3 2.1 31 31
乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 培 養 流 程 32
33 33
使 用 運 送 培 養 基 執 行 採 檢 採 檢 的 時 機 : 35-37 週 的 孕 婦 使 用 Amies 或 Sturat s 的 運 送 培 養 基 執 行 檢 體 採 集 採 集 部 位 : 陰 道 - 肛 門 拭 子 正 確 標 示 病 患 資 料 檢 體 於 24 小 時 內 盡 速 送 檢, 並 4 保 存 34 34
陰 道 肛 門 拭 子 可 使 用 一 支 或 二 支 棉 棒 不 要 使 用 speculum 35 35
台 灣 目 前 常 用 增 菌 培 養 基 LIM broth (10 ug/ml 的 cloistin 及 15 ug/ml 的 nalidixic acid 之 Todd-Hewitt 培 養 液 ) Strep B carrot broth TM ( 含 Granada medium 可 偵 測 溶 血 型 GBS 菌 株 ) 36 36
將 檢 體 拭 子 接 種 於 增 菌 培 養 基 - LIM broth 放 入 檢 體 拭 子, 並 沿 管 壁 攪 動 拭 子 以 確 保 膠 狀 成 份 乳 化 小 心 折 斷 拭 子 35 溫 箱 培 養 6-24 小 時 37 37
將 檢 體 拭 子 接 種 於 增 菌 培 養 基 - Strep B carrot broth TM 使 用 前 先 反 轉 管 子 一 次 以 混 合 管 中 成 份 接 種 前 加 入 紙 錠, 確 認 紙 錠 完 全 浸 潤 於 培 養 基 30 分 鐘 內 完 成 接 種 38 38
將 檢 體 拭 子 接 種 於 增 菌 培 養 基 - Strep B carrot broth TM 放 入 檢 體 拭 子, 並 沿 管 壁 攪 動 拭 子 以 確 保 膠 狀 成 份 乳 化 小 心 折 斷 拭 子 蓋 緊 蓋 子, 以 確 保 管 底 的 無 氧 環 境 35 溫 箱 培 養 6-24 小 時 橘 紅 色 液 體 或 橘 紅 色 點 狀 菌 落 39 39
將 增 菌 培 養 基 放 在 35-37 培 養 箱 培 養 6-24 小 時 針 對 β- 溶 血 性 乙 型 鏈 球 菌 可 產 生 肉 眼 可 見 的 顏 色, 可 直 接 鑑 別 GBS 的 存 在, 不 需 另 行 操 作 鑑 定 試 驗 GBS 陽 性 產 生 橘 色 色 素 LIM broth carrot broth TM 40 40
Strep B carrot broth TM 判 讀 (-) (-) (-) (-) (+) (+) (+) (+) 橘 色 液 體 或 點 狀 或 顆 粒, 皆 可 判 讀 為 GBS 陽 性 41 41
Carrot broth(-) 或 LIM broth 皆 必 需 次 培 養 於 適 當 的 培 養 基 Blood agar plate (BAP) Columbia colistin-nalidixic acid agar (CNA) ChromID TM Strepto B agar GBS Detect TM medium 42 42
培 養 基 培 養 條 件 接 種 前 培 養 皿 需 先 回 溫 BAP, CNA :35-37 37 CO2 溫 箱 ChromID TM Strepto B agar, GBS Detect TM medium : 35-37 3 一 般 溫 箱 培 養 18-24 小 時 觀 察 如 果 没 長, 再 放 18-24 小 時 43 43
COH 即 為 BAP Strepto B ID - chromogenic agar: 5 false(-),2 false(+) Strepto B agar: 2 false(-) Tazi et al. 2008. J Microbiol Methods 73:263-5 培 養 基 放 48 小 時 敏 感 度, 由 69-84% 增 加 至 85-94%, 再 加 上 增 殖 培 養 液 可 增 至 100% 44 44
三 區 劃 法 檢 體 種 在 A 區 或 用 已 滅 菌 的 接 種 環 在 A 區 劃 開 滅 菌 的 接 種 環 並 冷 卻 由 A 區 拉 出 2-3 條 線 後 在 B 區 劃 開 滅 菌 的 接 種 環 並 冷 卻 由 B 區 拉 出 2-3 條 線 後 在 C 區 劃 開 再 劃 至 D 區 45 45
GBS (BAP) 觀 察 BAP 上 灰 色 半 透 明 菌 落 ( 窄 型 β 溶 血 ) 46 46
GBS-r (BAP) 觀 察 BAP 上 灰 色 半 透 明 菌 落 ( 不 溶 血 或 γ- 溶 血 ) 47 47
BAP GBS GBS-r Enterococcus SA GAS 48 48
GBS (CNA) GBS GBS-r 49 49
CNA GBS GBS-r Enterococcus SA GAS 50 50
ChromID TM Strepto B agar GBS GBS-r GBS 產 生 粉 紅 或 紅 色 菌 落 可 偵 測 所 有 溶 血 與 非 溶 血 的 GBS 可 抑 制 大 部 份 其 他 菌 株 以 顏 色 清 楚 區 分 GBS 與 其 他 菌 株 51 51
ChromID TM Strepto B agar GBS GBS-r E.faecalis E.faecium GAS 52 52
ChromID TM Strepto B agar 依 照 試 劑 說 明 書 執 行 2-8 暗 室 保 存 不 可 使 用 過 期 及 呈 粉 紅 色 之 培 養 基 GBS 產 生 粉 紅 或 紅 色 菌 落 菌 落 再 用 生 化 反 應 或 凝 集 法 確 認 干 擾 菌 : S.pyogenes, S. porcinus 53 53
GBS Detect TM medium 54 54
GBS Detect TM medium GBS GBS-r Enterococcus SA (NG) GAS 55 55
GBS Detect TM medium 依 照 試 劑 書 明 說 執 行 2-8 暗 室 保 存 ( 對 光 及 溫 度 敏 感 ) 不 可 使 用 過 期 培 養 基 GBS 產 生 透 明, 大 溶 血 圏 的 菌 落 菌 落 再 用 生 化 反 應 或 凝 集 法 確 認 干 擾 菌 : S.pyogenes 56 56
檢 體 範 例 由 LIM broth 次 培 養 35-3737 CO2 溫 箱 培 養 培 養 24 小 時, 未 懷 疑 GBS, 再 培 養 24 小 時 ( 共 48 小 時 ) 57 57
檢 體 A- 48 小 時 GBS(+) BAP CNA ChromID GBS Detect 58 58
檢 體 B- 48 小 時 GBS(-) BAP CNA ChromID GBS Detect 59 59
檢 體 C- 48 小 時 GBS-r(+) BAP CNA ChromID GBS Detect 60 60
檢 體 D-GBS + (BAP) 將 培 養 皿 對 着 光 觀 察 所 有 疑 似 溶 血 皆 需 作 確 認 61 61
檢 體 D- GBS+ (CNA) 將 培 養 皿 對 着 光 觀 察 62 62
檢 體 D-GBS+ ChromID TM GBS agar GBS Detect TM medium 63 63
2014 年 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 檢 驗 機 構 調 查 彙 總 ( 回 覆 家 數 :140 家 ) 接 種 回 覆 家 數 百 分 比 附 註 LIM broth 116 82.9 使 用 增 菌 培 養 液 種 類 TransVag broth 1 07 0.7 StrepB carrot broth 24 17.1 BAP 115 82.1 CNA 55 39.3 使 用 之 培 養 基 種 類 ( 可 複 ChromID TM Strepto B 選 agar ) 21 15.0 GBS Detect TM medium 14 10.0 檢 體 接 種 之 順 序 為 何? 次 培 養 後 培 養 基 觀 察 時 間 未 回 覆 1 0.7 先 接 種 平 板 培 養 基, 再 將 拭 子 置 入 增 菌 培 養 液 50 35.7 拭 子 直 接 置 入 增 菌 培 養 液 93 66.4 24 小 時 41 29.3 48 小 時 99 70.77 3 家 兩 者 皆 做 64 64
孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 檢 驗 作 業 Q & A 65
Q & A (1) Q : 何 時 最 適 合 作 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢? A : 研 究 證 實 在 生 產 前 5 週 內 作 作 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 可 以 到 最 正 確 的 結 果 此 時 期 的 陰 性 預 測 值 (negative predictive value) 95-98%, 陽 性 預 測 值 (positive predictive value ) 87-100% 如 果 檢 測 時 間 離 生 產 超 過 6 週, 陽 性 預 測 值 降 至 43% 所 以 規 範 要 求 採 檢 的 時 間 點 為 懷 孕 35-37 37 週 66
Q & A (2) Q : 如 果 在 第 35 週 作 孕 婦 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢, 結 果 為 陰 性, 此 孕 婦 41 週 才 生 產 ( 離 培 養 已 超 過 5 週 ), 是 否 需 再 作 一 次 篩 檢? A : 不 需 要 因 為 孕 婦 在 35-37 週 作 乙 型 鏈 球 菌 篩 檢 培 養, 如 為 陰 性, 是 不 需 要 再 作 篩 檢 然 而, 如 果 孕 婦 在 35 週 前 作 篩 檢, 她 應 該 在 5 週 後 再 作 篩 檢 67
Q & A (3) Q : GBS 陽 性 率 除 了 醫 檢 師 細 心 外, 醫 師 之 檢 體 採 集 配 合 度 也 很 重 要, 可 否 透 過 婦 產 科 學 會 等 針 對 醫 師 採 集 在 教 育 及 宣 導 (103 年 增 修 ) A : 將 會 轉 由 國 健 署 發 文 68
Q & A (4) Q: 作 孕 婦 GBS 篩 檢, 應 該 採 檢 1 支 vaginal 拭 子 1 支 rectal 拭 子 或 二 種? A : 目 前 根 據 美 國 CDC 的 規 範, 應 該 採 檢 vaginalrectal 拭 子, 因 為 vaginal-rectal 拭 子 比 單 一 vaginal 拭 子 或 rectal 拭 子, 有 較 高 的 敏 感 度 採 檢 方 式 為 請 孕 婦 平 躺 雙 腳 弓 起, 將 採 檢 拭 子 置 放 入 孕 婦 陰 道 口 內 約 2 公 分 處, 採 集 黏 膜 分 泌 物 ( 勿 使 用 窺 陰 器 ) 使 用 同 一 採 檢 拭 子, 置 放 入 孕 婦 肛 門 口 內 約 2.5 公 分 處, 以 旋 轉 之 方 式 採 集 檢 體 將 採 檢 拭 子 放 回 採 集 容 器 中 可 使 用 同 一 支 或 分 二 支 拭 子 採 檢 69
Q & A (5) Q : 可 接 受 含 有 charcoal 的 傳 送 培 養 基 嗎? A : Charcoal 不 會 影 響 乙 型 鏈 球 菌 的 生 長, 採 檢 拭 子 應 放 在 非 營 養 性 的 傳 送 培 養 基 ( 如.Stuart s 和 Amies), 可 以 添 加 或 無 添 加 charcoal 但 如 使 用 產 色 增 菌 液, 應 確 認 原 廠 建 議 是 否 可 使 用 含 有 charcoal 的 傳 送 培 養 基 70
Q & A (6) Q : GBS 檢 體 收 件 後, 若 無 法 立 即 操 作 應 如 何 保 存? 可 否 保 存 於 37?? (103 年 增 修 104 年 增 修 ) A :1. 培 養 棒 應 盡 速 送 檢 或 接 種, 若 無 法 馬 上 送 檢 或 接 種, 應 置 4 下 可 保 存 檢 體 應 在 採 檢 後 四 天 內 接 種 完 畢 不 可 保 存 於 37 2. 運 送 條 件 : 委 外 檢 體 運 送 應 控 制 在 15 以 下 24 小 時 內 送 達 71
Q & A (7) Q : 實 驗 室 可 以 直 接 將 拭 子 檢 體 接 種 於 瓊 脂 平 板 上 嗎? A : 可 以, 但 陰 道 / 直 腸 拭 子 直 接 接 種 於 瓊 脂 平 板 後 仍 需 要 再 將 拭 子 放 入 選 擇 性 增 菌 培 養 液 接 種, 增 加 乙 型 鏈 球 菌 檢 出 率 註 : 這 種 產 前 篩 檢 結 果 的 正 確 性 比 快 速 得 到 結 果 重 要 72
Q & A (8) Q : 被 推 薦 使 用 於 GBS 篩 檢 有 那 些 增 菌 培 養 液? A:LIM broth TransVag 或 為 一 種 偵 測 產 色 素 乙 型 鏈 球 菌 的 選 擇 性 增 菌 培 養 液, 如 Carrot broth 73
Q & A (9) Q: LIM broth 培 養 後 如 果 没 有 混 濁 應 如 何 處 理? (103 年 增 修 ) A:LIMbroth 可 抑 制 部 分 GRAM(-) 細 菌, 所 以 加 入 vaginal-rectal 拭 子 的 LIM broth 一 定 會 混 濁, 如 果 没 有 混 濁, 可 能 是 未 採 到 檢 體, 應 該 重 新 送 檢 74
Q & A (10) Q : 如 果 使 用 產 色 增 菌 培 養 液 沒 有 產 色, 可 以 發 出 乙 型 鏈 球 菌 陰 性 報 告 嗎? A : 不 可 以, 大 部 分 的 產 色 增 菌 培 養 液 都 是 偵 測 會 產 生 β 溶 血 的 菌 株, 在 最 近 的 研 究 中, 約 4% 引 起 新 生 兒 侵 入 性 早 發 性 感 染 的 乙 型 鏈 球 菌 菌 株 屬 於 非 β 溶 血 性, 不 會 產 生 顏 色 變 化 所 有 不 產 色 的 肉 湯 應 以 適 當 的 瓊 脂 平 板 進 行 次 培 養, 以 確 定 是 否 存 在 乙 型 鏈 球 菌 75
Q & A (11) Q : 有 需 要 尋 找 非 溶 血 性 乙 型 鏈 球 菌 嗎? A : 是 的, 產 色 增 菌 培 養 液 和 一 些 產 色 培 養 基 只 檢 測 溶 血 的 乙 型 鏈 球 菌, 在 最 近 的 研 究 中, 約 4 % 的 引 起 新 生 兒 侵 入 性 早 發 性 感 染 的 乙 型 鏈 球 菌 株 屬 於 非 β 溶 血 性 在 羊 血 瓊 脂 培 養 基 (BAP), β 溶 血 可 能 並 不 明 顯, 因 此, 如 果 疑 似 GBS 的 灰 白 色 半 透 明 菌 落, 應 該 進 一 步 測 試 76
Q & A (12) Q : 非 β 溶 血 GBS 不 易 鑑 定, 是 否 有 推 薦 的 鑑 別 方 式?(103( 年 增 修 ) A : 接 種 時 建 議 不 要 使 用 BAP bi-plate, 只 要 有 懷 疑 的 菌 落, 皆 應 挑 出 來 鑑 定 確 認 ; 判 斷 非 β 溶 血 GBS 菌 落 需 要 經 驗, 學 會 能 力 試 驗 有 提 供 過 菌 株, 可 作 為 人 員 教 育 訓 練 材 料 目 前 市 面 上 已 有 商 品 化 培 養 基 如 ChromID TM Strepto B agar 和 GBS Detect TM medium 可 進 行 鑑 定 77
Q & A (13) Q : 使 用 ChromID TM StreptoB agar 培 養 出 紅 色 或 粉 紅 色 菌 落, 是 否 可 以 直 接 發 出 陽 性 報 告? A : 不 行, 依 據 原 廠 使 用 說 明 書, 培 養 出 紅 色 或 粉 紅 色 菌 落 等 疑 似 菌 落, 應 需 進 行 相 關 鑑 定 試 驗, 以 避 免 偽 陽 性 78
Q & A (14) Q : 可 用 核 酸 增 幅 放 大 試 驗 法 (nucleic acid amplification test) 直 接 測 拭 子 檢 體 的 乙 型 鏈 球 菌 嗎? A : 所 有 陰 道 直 腸 拭 子 必 須 先 接 種 於 選 擇 性 增 菌 培 養 液 ( 例 如,TransVag broth,lim broth), 培 養 18-24 小 時 之 後 再 進 行 核 酸 增 幅 放 大 試 驗 根 據 文 獻, 直 接 偵 測 敏 感 度 較 差 但 是 可 用 於 不 知 乙 型 鏈 球 菌 狀 況, 無 危 險 因 子, 但 即 將 要 分 娩 的 孕 婦 檢 體 79
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