ZEN2010 ZEN 1 1. 2 2. 6 3. 7 4. 8 5. 12 6. 19 7. 3D 23 8. 25 9. 28 10. 31 11. 37 1. 2. 3. - 1 -
ipjtnm=l=tum=wbk= 1. システムの起動 1-1. システムの起動 下記手順に従いシステムを起動します 1-1-1. 卓上電源パネルのスイッチを入れる 1-1-2. パソコンの電源を入れ Windows を起動する 1-1-3. 蛍光光源 ( 水銀ランプ ) の電源を入れる 1-1-4. Ar レーザを発振させる 1-1-5. NLO 用レーザ ( オプション ) を発振させる 1-1-1. 卓上電源パネルのスイッチを入れる 1 Main Switch を ON にします 2 レーザセーフティの鍵が ON になっていることを確認します 3 SYSTEM/PC と COMPONENTS を ON にします SYSTEM/PC : PC とモニターの主電源 COMPONENTS : 上記以外の電源 PC のみ使用する場合 1 及び3の SYSTEM/PC のみを ON にします 3 1-1-2. パソコン本体の電源を ON にする PC のパネル正面にある電源スイッチを ON にします モニターの指示に従ってWindowsを正常に起動します LSM Userでログインして下さい 1-1-3. 蛍光光源 ( 水銀ランプ ) の電源を ON にする 備え付けの水銀ランプ電源を ON にします 仕様により蛍光光源は異なりますので 取扱い説明時にご確認下さい - 2 -
ipjtnm=l=tum=wbk= 1-1-4. Ar レーザを発振させる 1 Ar 電源本体のスイッチ (Power Enable) を ON にします 2 キースイッチを I の方向に回します この時点で発振を開始します レーザの発振が安定するまで ウォーミングアップのため 5 分ほどお待ちください 3 ディップスイッチを idle( 下 ) から run( 上 ) に上げます 4ウォーミングアップが完了し レーザが安定発振していると 緑の LED が点灯します Power ダイヤルを 9~10 時の方向に回し LED が赤くならない程度に出力を調整します ( レーザチューブの電流値が高くなりすぎると LED が赤く点灯します その状態で長時間使用すると劣化の原因になりますのでご注意ください ) 3 と 4 は個別に手元でコントロールしている場 合があります 取扱説明時に御確認下さい 1 3 4 2 Fig.1 レーザ電源 1-1-5. NLO レーザ ( オプション ) を発振させる コヒレント社製 Chameleon レーザ電源ユニット正面のキースイッチを Standby から ON に回します Chameleon レーザ電源 チラー電源は常時 ON にしておいてください 1-2. オペレーティングソフトの起動 ZEN 2010 アイコンをダブルクリックして オペレーティングソフトを起動すると 下記ウインドウが現れますので Start System を選択して下さい Fig.2 ソフト起動直後の画面 Start System : 画像取得時に選択します ソフトウェアとハードウェアを初期化して起動します Image Processing : ソフトウェアのみ起動します 取得済みの画像を扱うときに選択します Image Processing で起動すると画像の取り込みは出来ません Boot status (Fig3. ) をクリックすると 起動状態の確認をすることができます - 3 -
ZEN 3 Fig.3-,, Fig.3 -,, 3 Fig.3 ZEN ZEN (30 24 ) ZEN Show manual tools Show manual tools Setup Manager Light Path Fig.4 Fig.4 Show manual tools - 4 -
Show all Show all Fig.5 Show all On/Off Fig.6 ZEN Workspace Configuration 2-5 -
1. 2. 3. 4. 2. Setup ManagerLaserON ON/OFF Fig.7 Blue Diode 405 405nm COMPONENTS ON Argon458/488/514nm (Page 2 ) DPSS (561nm)HeNe (543nm594nm633nm) ON NLO MaiTai Chameleon ON NLO Laser Properties 1015-6 -
3. Ocular Online On/Off // Fig.8 Axio Observer. Z1 Fig.9 Fig.9-7 -
4. Offline Acquisition 4-1. Smart Setup Smart Setup Configure your experiment SearchDyes Recent Fig.10 Acquisition Fig.11 Smart Setup FastestBest SignalBest Compromise 3 Apply Fastest (Simultaneous) Best Signal (Sequential) Fastest Best Compromise (Sequential) Fastest - 8 -
4-2. Configuration Configuration (Fig.13) Recent Configurations Search Ex 488 1 Ex 488/555/639 2 Fig.12 Configuration Fig13. Configurations Show manual tools Fig.14 Show manual tools Imaging SetupLight Path Fig.15 Imaging Setup Simultaneous Sequential - 9 -
Imaging SetupLight Path Imaging Setup Track Light Path Fig.16 Light Path Configuration MBS Vis InVis Ch1,Ch2 1nm PMT Dyes - 10 -
2 Simultaneous- Sequential- 2 Simultaneous Sequential - 11 -
5. Live Channels Track 1 Airy Unit Fig.17 Track Fig.17 Channels - 12 -
Auto Exposure Master Gain Digital Offset Auto Exposure 100% [ ] Fig.18 Auto Exposure Fig.19 Live Live ) LiveContinuous Auto Exposure Master Gain Z Master Gain 1 Averaging Live Continuous - 13 -
Merge Dimension Merge On/Off Fig.20 Split - Channels Laser Lasers Gain (Master) Digital Offset Digital Gain Fig.21 Master Gain Digital Offset Digital Offset 0() Lasers 488nm 1-5 - 14 -
Range Indicator Master Gain/Digital Offset Range Indicator Dimensions Ch () Range Indicator Fig.22 Dimensions Range Indicator Master Gain / Digital Offset Fig.23 Range Indicator 1Airy Fig.17 Master Gain 8001000 ( Fig.21) Channel (Fig.21) - 15 -
Acquisition Mode Fig.24 Acquisition Mode Frame Size 512 512 Optimal Optimal Speed Speed Pixel Dwell Scan Time 10 89 7 Bit Depth Bit Depth 16bit (65,536 )12bit4,096 8bit256-16 -
Averaging Averaging (Fig.25) Fig.25 Acquisition Mode Line 4 Mode Method Number LineFrame MeanSum Scan Area Scan Area Show all Fig.26 Fig.26 Scan Area - 17 -
13Live Live - 18 -
6. 6-1. 2D Fig.27 Fig. 27 ZEN / 2 1).lsm ZEN Light Edition Windows OShttp://www.microimaging.zeiss.co.jp/ 2) Export 2.lsm - 19 -
1).lsm Save Image Fig.28 New Image File Save Save as Fig.28 Fig.29) Fig.29 LSM (*.lsm) LSM Save C/DLSM D - 20 -
2) Export TIFF/JPEG File - Export Select file name and save Save Fig.30 Export Format Data Raw data Contents of image window Ortho Full resolution image window Z single plane 1 series Movie Compress - 21 -
6-2. File Open New File Browser New File Browser File - New File Browser Fig.31 File Menu File Browser HDD Fig.32 New File Browser Reuse New File Browser Re-use Fig.33 Re-use - 22 -
7. 3D Z 3D 3D 1 Z-Stack 2 3 4 Z Z-Stack Z-Stack Z-Stack First / Last Fig.34 Application 1 2 Set First Z Fig.35 Z-stack 3 Set Last Z 4 Stop - 23 -
Optimal Optimal Optical Slice Fig.36 Optical Start Experiment Z Averaging Fig.37 Application Z 8-24 -
8. 2D3D4D 8-1. 2D Fig.38 2D (2 Z ) 3DTime SeriesMode Dimension Player 1 8-2. Split Dimension Merge On/Off Fig.39 Split 8-3. Gallery 3D4D Gallery -Stack Time Series Fig.40 Gallery - 25 -
8-4. Ortho Z / Contents ~ Export 8-5. Cut Z Fig.41 Ortho Cut 8-6. 3DZ 3 Fig.42 Cut Z-Stack 3 3D 9-5. Series Fig.43 3D 8-7. Histo Histogram Fig.44 Histogram - 26 -
8-8. Co-localization Co-localization Fig.45 Co-localization 8-9. Profile Profile Spline Fig.46 Profile 8-10. Information Fig.47 Information - 27 -
9. 3D Show all 9-1. Dimensions Zoom Channels Fig.48 Dimension (3ch ) Merge/Single Ch on/off On/Off Crop Reuse 92. Display 93. Player Z Fig.49 Display Fig.50 Player - 28 -
94. Overlay Fig.51 Overlay Angle Delete/ Cut region Coordinate Z Hide Number Measure /.ovl - 29 -
95. Series 3D 3D 3D 3D Fig.52 3D Series X, Y Render series X,Y Total frames 360 Difference angle Panorama Fig.53 Apply Player Player 9-3 - 30 -
10. Axio Observer. Z1 Axio Observer. Z166 TFT - 31 -
Microscope Objectives Reflector TL Illumination On Off RL Illumination On Off - 32 -
1 2 () *¹ 3 L:/() 4 () 5 6 7 () 8 (1.2 ) 9 *¹ 10 25mm 11 / 12 13 LM set 14 X/Y 15 16 L:/() 17 () 18 On/Off :. 2, 3200 19 On/Off : 20 TFT 21 : 22 23 24 25 26 :, 27-33 -
ipjtnm L TUM=wbk= 10-1. 明視野検鏡 1) 顕微鏡 / レーザ光路切り換えを行い顕微鏡 (Ocular) モードにあることを確認して下さい 2) 鏡基のボタンもしくはTFTパネルから透過光シャッターボタン (HAL On/Off) を押し 透過光をONの状態にします 3) コンデンサーターレットを動かしHのポジションにします 4) 光量調節などを行って観察します 注 ) サンプルの見えが悪いときは ケーラー照明の調整を行って下さい 1 フォーカシングノブ 2 輝度調整トグルスイッチ 3 視野絞り 4 コンデンサ上下動ハンドル 5 コンデンサセンタリングノブ ( 左右同位置にあります ) 6 LD コンデンサ 7 開口絞りダイヤル 透過像と蛍光像を同時に取得するには透過像 ( 微分干渉像 位相差像など ) と蛍光像を同時に取得するには Smart set upや Configurationから光路設定を行った後 Light PathツールにてT-PMTにチェックを入れます (10ページ Fig.16 参照 ) その後 Gainの調整を行ってください - 34 - Fig.16 Light Path ツール
10-2. (~200m ), DIC DIC 2 PC DICDIC DIC DIC 40 40 / DICDICDIC 1)() LSM - 35 -
10-3. Ph13 10-4. ON,,, *¹, 1 (HBO) 2 (Field Stop ) 3 (Aperture Stop ) 4 FL P&C 5 6 7 8-36 -
ipjtnm=l=tum=wbk= 11. システムの終了 ( 電源の OFF) 11-1. レーザをOFF にします 1 DPSS レーザ (561nm) HeNe レーザ (543nm, 594nm, 633nm) NLO 用レーザ : 左ツールエリアの Setup Manager から Laser ツールを開き Off にします 2 コヒレント社製 Chameleon(NLO 用レーザ ):Chameleon レーザ電源ユニット正面のキースイッチを ON から Standby に回します 3 Argon レーザ (458/488/514nm): ダイヤルを最小値まで下げてから ディップスイッチを idle( 下 ) にします 次に鍵を 0 の方向に回し 冷却ファンが停止するまで待ちます ( 約 5 分 ) ファンが停止したことを確認して 最後に Ar 本体の電源スイッチを OFF にします Ar の冷却ファンが回っている間は 11-6-2Main Switch を OFF にしないでください その他のレーザは 11-6 の電源に連動しています 11-2. 水銀ランプの電源を OFF にします 11-3. 液浸用対物レンズのクリーニングを行い 最も低倍率のポジションに戻します 11-4. ZEN ソフトウェアを終了します File - Exit を選択します 11-5. Windows を終了します スタートメニューから Shut Down を選択し 終了します 数秒後に PC の電源も自動的に OFF になります 11-6. 卓上の電源パネルを操作します 1 SYSTEM/PC と COMPONENTS を OFF にします 2 Main Switch を OFF にします 終了後 油浸レンズ 水浸レンズを使用した場合は油及び水をふき取っておいてください ( クリーニング液の組成 : n-ヘキサン 85% イソプロパノール 15%) レーザ及び水銀ランプの再点灯は少なくとも 15 分以上時間を置いてから行ってください - 37 -