《四川动物》2013年第32卷第4期

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1 四川动物 年 第 卷 第 期 S J Z V N DOI 7 鲈鲤的胚胎发育 王永明 岳兴建 长江上游鱼类资源保护与利用四川省重点实验室 内江师范学院生命科学学院 四川内江 摘要 年 月 对人工授精的鲈鲤受精卵发育过程进行连续观察 鲈鲤胚胎发育分为 7个阶段 个发育 ± 淡黄或金黄色 沉性 具弱粘性 卵膜遇水 膨胀达最大 直径 期 成熟卵直径 ± 在水温 7 ± 7 条件下 受精卵历时 孵出 初孵仔鱼全长 ± 肌节 对 胸鳍原基形成 血液循环明显 关键词 鲈鲤 胚胎发育 初孵仔鱼 中图分类号 Q Q 文献标志码 A 文章编号 7 E D P WANGY YUEX K L S P F C U U R Y R C L S N N U N S P C A T w P T P 7 T w w w k ± T x ± w T w w 7 ± 7 F w P w w w ± w K w P w 鲈鲤 P 隶属鲤形目 C 洛 耿毅等 鲁增辉等 马秀慧 鲤科 C " 亚科 B 鲈鲤属 P 等 相关基础资料缺乏 特别是其繁殖生物 国内学者 将 其 视 为 鲈 鲤 属 下 的 亚 种 P 学特性 如性腺发育规律 产卵条件 胚胎发育特性 崔桂华 褚新洛 丁瑞华 国外学者 亲鱼培育与受精卵质量鉴定等关键问题不清楚 人 认为应该为 P 独立的种 K 鲈 工繁殖过程中产卵率 孵化成活率低 本研究通过 鲤地方名为江鲤 花鲤 是长江上游特有鱼类 常见 对鲈鲤胚胎发育的连续观察 旨在掌握其胚胎发育 个体 k 最大个体可达 k 主要分布于四川 规律 为进一步开展其人工养殖和野生资源的保护 的岷江 青衣江 马边河 岷江支流 金沙江下段 提供基础资料和理论依据 雅砻江 重庆乌江等水系 是产区重要经济鱼类 丁 瑞华 鲈鲤肉质细嫩 肉味鲜美 是一种含 材料与方法 肉率高 高蛋白 低脂肪和营养价值较高的淡水鱼类 年 月 选取来自长江上游支流雅砻江中 刘必先等 朱玲等 近年来 由于过 发育良好的亲鱼进行人工催产 将干法授精获得的 度捕捞和水环境的破坏 鲈鲤资源急剧减少 个体小 受精卵置于网筛中使用山溪水流水孵化 每天分别 型 化 程 度 严 重 是 四 川 省 重 点 保 护 鱼 类 刘 军 于 测量水温 孵化期间水温 7 ± 目前对鲈鲤的研究进展缓慢 崔桂华 褚新 SMZ 数码显微镜对发育良好的胚 7 M 收稿日期 7 接受日期 基金项目 四川省教育厅项目 ZA 内江市科技支撑计划项目 四川省教育厅科技创新团队基金 KYTD 资助 作者简介 王永明 硕士 助教 研究方向 渔业生物学 E w 通讯作者 C 副教授 E

2 四川动物 2013 年第 32 卷第 4 期 SichuanJournalofZoology Vol 32 No 胎进行连续观察 拍照, 以 50% 个体发育进入某阶段作为该发育阶段的开始, 直至胚胎出膜时结束 MoticImagesPlus2 0 显微图像分析软件对图像进行测量分析 2 结果鲈鲤胚胎发育在 15 7 ±0 7 下历时 164h, 积温 h 初孵仔鱼全长 10 05mm±0 39mm 据其胚胎发育特点可分为受精卵 卵裂 囊胚 原肠胚 神经胚 器官系统发育和出膜 7 个阶段 32 个时期 2 1 受精卵鲈鲤成熟卵圆球形, 浅黄或金黄色, 沉性卵, 具弱粘性, 无油球, 卵径 2 61mm±0 05mm, 卵膜上有雪花状纹饰 受精后 10~15min 卵子吸水膨胀 受精后 1h40min 卵膜膨胀完毕, 直径达 3 51mm± 0 15mm( 封 4, 图版,1) 受精后 1h32min, 卵内的原生质明显向卵球一极移动集中形成隆起的小丘状胚盘, 高度约为卵黄径的 1/6( 图版,2), 胚盘颜色较其余部分深 受精后 2h2min, 胚盘隆起最高, 高度约为卵黄径的 5/9 ( 图版,3) 2 2 卵裂期受精后 4h15min 开始第 1 次卵裂, 在胚盘的中央凹陷形成卵裂沟, 卵裂沟逐渐清晰将胚盘分为两个部分, 此时为 2 细胞期 ( 图版,4) 受精 5h29 min 后, 开始第 2 次卵裂, 卵裂沟与第 1 次卵裂面垂直, 形成前后排列 大小相等的 4 个卵裂球, 即 4 细胞期 ( 图版,5) 受精后 7h48min, 第 3 次卵裂形成前后排列 大小相近的 8 个细胞, 即 8 细胞期 ( 图版, 6) 受精后 9h25min, 进行第 4 次卵裂, 形成 16 个呈排排列 大小相近的分裂球, 即 16 细胞期 ( 图版, 7) 受精后 10h20min, 进入 32 细胞期 ( 图版,8) 在受精后 11h25min, 分裂球重叠排列, 形成一个半球状的细胞团, 此时细胞界限不易分清, 为多细胞期 ( 图版,9) 2 3 囊胚期动物极细胞分裂 隆起, 在受精后 16h40min, 囊胚隆起最高, 高 1 30mm±0 23mm, 进入囊胚早期 ( 图版,10) 受精后 21h29min, 为囊胚中期, 囊胚细胞向外周迁移, 胚层逐渐下降, 高度 1 17mm± 0 07mm( 图版,11) 受精后 26h38min, 为囊胚晚期, 胚层逐渐扁平, 向卵黄贴近, 高度 1 06mm ± 0 13mm, 囊胚细胞下包, 与卵黄囊形成较光滑的连 接面 ( 图版,12) 2 4 原肠期受精后 39h25min, 受精卵进入原肠早期, 胚层继续下包, 达 2/5( 图版,13) 受精后 44h40min, 胚层下包至 1/2 处, 进入原肠中期 ( 图版,14) 受精后 49h8min, 胚层下包至卵径的 2/3, 进入原肠晚期 至此胚体雏形形成 ( 图版,15) 2 5 神经胚期受精后 56h38min, 原肠下包和内卷继续进行, 胚层细胞下包至卵径 4/5 以上时, 大量卵黄被包围, 外露卵黄形成大卵黄栓 ( 图版,16) 此时, 胚体形状清晰可见, 呈 C 字形匍匐在卵黄上, 头部两侧开始膨大, 胚胎发育进入神经胚期 受精后 59h51 min, 胚层进一步下包, 外露的卵黄进一步减少形成小卵黄栓 ( 图版,17, 去膜 ) 受精后 61h41min, 卵黄栓消失, 胚孔封闭, 此时卵黄囊为圆球形, 胚体围绕卵黄 1/2( 图版,18, 去膜 ) 2 6 器官系统发生阶段 肌节出现受精后 66h43min, 胚体中部形成 4 对肌节, 进入器官形成期 ( 图版,19, 去膜 ) 眼基出现期受精后 71h18min, 视泡出现, 肌节 12 对 ( 图版,20, 去膜 ) 眼囊出现期受精后 78h36min, 胚体头部两侧的中央形成椭圆形眼囊 ( 图版,21, 去膜 ), 肌节 17 对, 胚体约围绕卵黄的 2/ 晶状体出现受精后 80h43min, 眼囊凹陷呈杯状, 其中可见晶状体, 肌节增至 20 对 ( 图版,22, 去膜 ) 耳囊出现受精后 91h32min, 头部更加膨大, 后脑出现小泡状耳囊, 肌节 21 对 ( 图版,23, 去膜 ) 尾芽形成受精后 94h42min, 胚体尾部开始膨大, 与卵黄囊分离形成尾芽, 肌节 23 对 ( 图版, 24, 去膜 ) 尾泡形成受精后 97h45min, 尾泡形成, 肌节 26 对 ( 图版,25, 去膜 ) 尾芽游离受精后 99h42min, 尾芽逐渐游离, 尾泡消失, 肌节 28 对, 卵黄囊被拉长 ( 图版,26, 去膜 ) 肌肉效应期受精后 104h32min, 进入肌肉效应期, 肌节 30 对, 胚体间歇性地微弱收缩抖动 ( 图版,27, 去膜 ) 心脏原基出现受精后 110h4min, 在胚 531

3 四川动物 2013 年第 32 卷第 4 期 SichuanJournalofZoology Vol 32 No 体头部和卵黄囊之间出现心脏原基, 肌节 36 对 尾鳍清晰可见, 脑各部分分界明显 ( 图版,28, 去膜 ) 耳石形成受精后 118h45min, 耳囊内出现两粒耳石, 卵黄囊前端圆形, 后端棒状 身体摆动加快, 肌节 39 对 ( 图版,29, 去膜 ), 卵黄囊拉长呈, 状 嗅囊形成受精后 126h46min, 嗅囊形成, 肌节 42 对 ( 图版,30, 去膜 ) 胸鳍原基出现受精后 136h29min, 胸鳍原基出现, 肌节 45 对 ( 图版,31, 去膜 ) 心脏博动期受精后 140h42min, 心脏跳动,90~100 次 /min, 肌节 45 对 尾部摆动剧烈 2 7 出膜期受精后 164h, 胚胎在卵膜内剧烈翻滚, 卵膜破裂, 尾部先出, 孵化结束 初孵仔鱼身体淡黄, 全长 10 05mm±0 39mm, 肌节 37+14=51 对, 卵黄囊淡黄色, 胸腹部呈圆球形, 占 1/3, 后面细长, 占 2/3 眼径约 0 48mm±0 06mm, 耳囊 (0 33±0 03)mm (0 20±0 04)mm, 眼与耳囊相距 0 30mm ± 0 03mm, 眼球色素细胞未形成, 口裂未形成, 消化道尚未贯通, 心脏位于围心腔中, 血液循环明显 ( 图版,32 33) 初孵仔鱼活动能力较弱, 伏于水底, 偶尔上下窜游 胚胎发育时序见表 1 表 1 鲈鲤胚胎发育时序 (15 7±0 7) Table1 TimeofembryonicdevelopmentofPercocyprispingi(15 7±0 7) 阶段 Period 图版, 序 Code 时期 Stage 时间 Time 持续时间 Duration 受精卵 Fertilizedegg 卵裂期 Cleavagestage 囊胚期 Blastulastage 原肠胚期 Grastrulastage 神经胚期 Neurulastage 器官发生期 Organogenesisstage 1 受精 0h0min 胚盘形成 1h32min 1h32min 4 2 细胞 4h15min 2h43min 5 4 细胞 5h29min 1h14min 6 8 细胞 7h48min 2h19min 7 16 细胞 9h25min 1h37min 8 32 细胞 10h20min 55min 9 多细胞 11h25min 1h5min 10 囊胚早期 16h40min 5h15min 11 囊胚中期 21h29min 4h49min 12 囊胚晚期 26h38min 5h9min 13 原肠早期 39h25min 12h47min 14 原肠中期 44h40min 5h15min 15 原肠晚期 49h8min 4h28min 16 神经胚期 56h38min 7h30min 17 小卵黄栓期 59h51min 3h17min 18 胚孔封闭 61h41min 1h50min 19 肌节出现 66h43min 5h2min 20 眼基出现 71h18min 4h35min 21 眼囊出现 78h36min 7h18min 22 晶状体形成 80h43min 2h7min 23 耳囊出现 91h32min 10h49min 24 尾芽形成 94h42min 3h10min 25 尾泡出现 97h45min 3h3min 26 尾芽游离 99h42min 1h57min 27 肌肉效应 104h32min 4h50min 28 心脏原基出现 110h4min 5h32min 29 耳石形成 118h45min 8h41min 30 嗅囊形成 126h46min 8h1min 31 胸鳍原基出现 136h29min 9h43min 32 心脏搏动 140h42min 4h13min 出膜期 Incubationperiod 33 出膜期 164h 23h18min 532

4 四川动物 2013 年第 32 卷第 4 期 SichuanJournalofZoology Vol 32 No 项目 Item 表 2 鲈鲤与其它 亚科鱼类的胚胎发育特点比较 Table2 ComparisonsoftheembryonicdevelopmentcharacteramongtheBarbinaefishes 鲈鲤 Percocyprispingi 倒刺 Spinibarbus denticulatus denticulatus 光唇鱼 Acrosocheilus fasciatus 宽口光唇鱼 Acrosocheilus monticolus 白甲鱼 Onychostoma simus 瓣结鱼 Torbrevifilis brevifilis 卵径 Eggdiameter(mm) 2 61± ~ ~ ~ ~ ~1 9 粘性 Spherical 弱 弱 弱 弱 弱 粘性 吸水后膨胀卵径 Diameter afterabsorbingwater(mm) 3 51± ~ ~ ~ ~ ~2 7 水温 Watertemperature( ) 15 7±0 7 25±0 5 25±1 19 5~ ~ ~23 胚胎发育历时 Thetimefrom fertilizationtohatching(h) 肌节出现时间 Appearanceofmyomere 胚孔封闭后 胚孔封闭后 胚孔封闭后 胚孔封闭后 胚孔封闭前 胚孔封闭前 尾泡 Caudalvesicle 有 无 无 无 无 无 出膜方式 Paternofhatching 尾先出 尾先出 尾先出 尾先出 尾先出 头先出 初孵仔鱼全长 Lengthofnewly hatchedlarvae(mm) 10 05± ± ~ ~ 参考文献 References 本文易祖盛等,2004 张玉明, 闫家强,2010 严太明等,1999 李勇等,2006 谢恩义, 何学福, 讨论鱼类胚胎发育具有种的特异性, 主要受遗传因素的影响 ( 殷名称,1995) 鲈鲤成熟卵圆球形, 浅黄或金黄色, 为沉性卵, 初孵仔鱼全长 10 05mm± 0 39mm, 血液循环明显, 器官尚未发育完全 鲈鲤与同属于 亚科的白甲鱼 Onychostomasimus( 李勇等,2006) 光唇鱼 Acrosocheilusfasciatus 宽口光唇鱼 Acrosocheilusmonticolus( 严太明等,1999) 瓣结鱼 Torbrevifilisbrevifilis( 谢恩义, 何学福,1998) 倒刺 Spinibarbusdenticulatusdenticulatus( 易祖盛等, 2004) 等鱼类胚胎发育相比 ( 表 2), 有其独特的发育特点 :1) 卵径小于倒刺, 但初孵仔鱼全长最长 ;2) 发育温度较低, 历时较长 ;3) 鲈鲤胚体的肌节在胚孔封闭后出现 ;4) 发育过程中观察到明显的尾泡, 但存在时间较短 ;5) 肌节出现到视泡形成历时 4h35 min, 肌节增至 12 对 ;6) 晶状体在耳囊出现之前形成 ;7) 肌节 30 对时, 肌肉效应出现 ;8) 胸鳍原基在心脏搏动前出现 温度是鱼类胚胎发育以及后续个体发育过程中的重要因素 在适当的温度范围内, 卵的发育速率与水温呈正相关, 即发育时间随水温降低而延长 ( 殷名称,1995) 鲈鲤的胚胎发育特点是与环境相适应的结果 鲈鲤为冷水肉食性鱼类, 较低的水温使得鲈鲤胚胎发育相对于长江上游地区其他鱼类历时较长 不少研究证明, 孵化期的水温能够影响仔鱼的体长 卵黄囊大小 肌节 色素沉着和上下颌的分 化等, 而这些对于仔鱼孵出时迅速适应环境和存活十分重要 ( 殷名称,1995) 低温使得鲈鲤仔鱼延缓孵出, 加上卵径较大, 卵黄含量丰富, 有助于幼鱼度过不良环境 与此同时, 初孵仔鱼的体长增长, 发育较为完善, 使其游泳速度增快, 便于快速有效地捕食 尾泡 ( 又称克氏囊 ) 是硬骨鱼类胚胎特有的结构, 其出现的迟早因种类而异 福建纹胸鎣 Glypto thoraxfukiensis 的尾泡在受精后 45h5min 出现 ( 王志坚等,2000); 大菱鲆 Scophthalmusmaximus 的尾泡在受精后 59h35min 出现 ( 佟雪红等,2011); 宽体沙鳅 Botiarevesa 的尾泡在受精后 17h10min 出现 ( 岳兴建等,2011) 鲈鲤的尾泡出现在受精后 97h45min, 且持续时间较短 据 Brummet 和 Du mont(1978) 报道, 尾泡可以促进胚体对卵黄的吸收 类似的研究表明, 尾泡可以通过调节囊内液体的流动, 促进胚体左右对称轴的发育 (Kreilingetal, 2007) 4 参考文献 崔桂华, 褚新洛 鲤科鱼类鲈鲤的亚种分化和分布 [J]. 动物分类学报,15(1):118~123. 丁瑞华 四川鱼类志 [M]. 成都 : 四川科学技术出版社 :314 ~321. 耿毅, 陈德芳, 彭成卓 鲈鲤鳃霉病与车轮虫混合感染的诊治 [J]. 科学养鱼,3:58. 李勇, 张耀光, 谢碧文, 等 白甲鱼胚胎和胚后发育的初步观察 [J]. 西南师范学院学报 ( 自然科学版 ),31(5):142~147. 刘必先, 李建光, 李正友, 等 鲈鲤含肉率及营养成分的测定 533

5 四川动物 年 第 卷 第 期 与品质评价 贵州农业科学 7 刘军 长江上游特有鱼类受威胁及优先保护顺序的定量分析 中国环境科学 鲁增辉 李伟 石萍 等 养殖鲈鲤肠道优势菌群组成及来源 分析 淡水渔业 马秀慧 任爽 王志坚 鲈鲤幼鱼消化系统的组织学研究 贵州农业科学 7 7 佟雪红 马道远 徐世宏 等 大菱鲆胚胎发育的形态学和组 海洋与湖沼 织学研究 王志坚 张耀光 李军林 等 福建纹胸鎣的胚胎发育 上海水产大学学报 谢恩义 何学福 瓣结鱼的胚胎发育 怀化师范专科学校 学报 7 7 7 岳兴建 王芳 谢碧文 等 沱江流域宽体沙鳅的胚胎发育 四川动物 7 张玉明 闫家强 光唇鱼胚胎发育的研究 绍兴文理学院 学报 朱玲 刘必先 李正友 等 鲈鲤肌肉脂肪酸组成分析 贵州畜牧兽医 B AR D J N 7 K F T C K M F w V A k k w x V w E 严太明 何学福 贺吉胜 宽口光唇鱼的胚胎发育的研究 水生生物学报 易祖盛 陈湘 王春 等 倒刺"胚胎发育的研究 中 国水产科学 E A P R T W S D U B k K J A W G C R 7 A K 殷名 称 鱼 类 生 态 学 M北 京 中 国 农 业 出 版 社 檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵殝 S J Z V N D D 传播科学信息的媒介 开展学术交流的平台 欢迎订阅 年第 卷 杂志 杂志由四川省动物学会 成都大熊猫繁育研究基金会 四川省野生动植物保护协 会和四川大学联合主办 创刊于 年 系国内外公开发行的动物学学术性刊物 主要报道和交流动 物学及其分支学科和野生动物保护方面的基础研究 应用基础研究的成果 理论 经验和动态 普及与 提高相结合 基础性与应用性并重 先后为 中文核心期刊要目总览 年版 年版 年 版 核心期刊 中国科技核心期刊 中国科技论文统计源期刊 为中国科学引文数据库 中国学术期 刊综合评价数据库 中国生物学文摘数据库 中国学术期刊 光盘版 中国期刊网 中国知网 万方 数据系统 中国数字化期刊群 台湾中文电子期刊思博网等收录 檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵殝 檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵殝 主要栏目 研究报告 基础资料 野生动物保护与自然保护区 实验动物与动物实验 教学探索 综述与进展 读者对象 广大从事动物学 生物学和野生动物保护方面的科研 教学 管理 医卫等科技工作 者 有关院校师生和业余爱好者 开 每期 页 精印彩色封面 逢单月末出版 年全年 期国内定价 元 双月刊 大 每期 元 国外为每期 美元 全年 美元 订阅办法 从邮局汇款至本刊编辑部 写清订阅人姓名 地址 邮编 附言订阅数量即可 电话 传真 电子邮件 w w 邮局汇款 四川省成都市望江路 号四川大学生命科学学院内 四川动物 编辑部 邮政编码 银行汇款 开户银行 中国工商银行四川分行营业部东大支行 帐号 户名 四川省动物学会 檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵殝

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人工催产 干法授精 孵化 胚胎发育观察

人工催产 干法授精 孵化 胚胎发育观察 金万昆 俞 丽 杨建新 张慈军 高永平 赵宜双 王春英 人工催产 干法授精 孵化 胚胎发育观察 胚盘隆起 细胞期 细胞期 细胞期 细胞期 细胞期 多细胞期 囊胚早期 囊胚中期 囊胚晚期 原肠早期 原肠中期 原肠晚期 神经胚期 胚孔封闭期 眼泡出现期 尾芽期 晶体出现期 肌肉效应期 心脏搏动期 孵出期 日龄仔鱼 日龄仔鱼 日龄仔鱼 日龄仔鱼 感谢中国水产科学院黑龙江水产研究所沈俊 宝研究员的悉心指导

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第 8 节生殖与胚胎发育 8.1 精子的形态及发生男性的生殖系统 : 由内生殖器和外生殖器组成, 内生殖器包括睾丸 输精管道和附属腺体, 外生殖器包括阴囊和阴茎 其中, 睾丸是主要的生殖器官, 它可以产生精子和雄激素 除睾丸之外, 输精管道 附属腺体 阴囊和阴茎都是附属的生殖器官, 它们的作用是保护 第 8 节生殖与胚胎发育 8.1 精子的形态及发生男性的生殖系统 : 由内生殖器和外生殖器组成, 内生殖器包括睾丸 输精管道和附属腺体, 外生殖器包括阴囊和阴茎 其中, 睾丸是主要的生殖器官, 它可以产生精子和雄激素 除睾丸之外, 输精管道 附属腺体 阴囊和阴茎都是附属的生殖器官, 它们的作用是保护精子, 帮助精子运行到体外, 进入到女性的生殖道中 1 人的精子形态 : 特殊形态的细胞, 形状像蝌蚪,

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