Real-time PCR 原理
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- 潢 邶
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1 Real-time PCR Xiao Jin Applied Specialist Molecular & Cellular Biology
2 Real-time PCR 原 理 数 学 原 理 化 学 原 理 Real-time PCR 应 用 绝 对 定 量 相 对 定 量 等 位 基 因 分 型 阴 阳 性 判 定 microrna
3 荧 光 定 量 PCR 数 学 原 理 基 线 阈 值 Ct 值 [DNA] 0
4 同 时 扩 增 96 的 相 同 样 品 的 结 果 由 于 PCR 扩 增 效 率 的 差 异 使 得 相 同 的 样 品 扩 增 结 果 存 在 很 大 的 差 异
5 扩 增 曲 线 : 四 个 阶 段 线 性 图 谱 对 数 图 谱 平 台 期 线 性 增 长 期 指 数 增 长 期 基 线 期 平 台 期 线 性 增 长 期 指 数 增 长 期 基 线 期
6 基 线 阈 值 Ct 值 [DNA] 0 什 么 是 基 线? 基 线 就 是 扩 增 曲 线 中 的 水 平 部 分 线 性 图 谱 对 数 图 谱
7 基 线 阈 值 Ct 值 [DNA] 0 什 么 是 阈 值? 1. 基 线 ( 空 白 ) 信 号 的 产 生 是 由 于 测 量 的 偶 然 误 差 引 起 的 2. 偶 然 误 差 的 结 果 满 足 对 数 分 布 3. 阈 值 = 基 线 ( 背 景 ) 信 号 标 准 偏 差 x 由 于 测 量 的 偶 然 误 差 而 导 致 测 得 的 荧 光 信 号 大 于 阈 值 的 概 率 小 于 当 荧 光 信 号 大 于 阈 值 时, 可 以 肯 定 是 由 于 PCR 的 扩 增 使 得 荧 光 强 度 得 以 测 量
8 什 么 是 C T 值? 基 线 阈 值 Ct 值 [DNA] 0 从 基 线 到 指 数 增 长 的 拐 点 所 对 应 的 循 环 次 数 线 性 图 谱 对 数 图 谱 C T 值 C T 值
9 为 什 么 C T 值 [DNA] 0? N = N 0 x (1+e) n N: 产 物 分 子 数 ;N 0 : 起 始 分 子 数 e: 扩 增 效 率 ; n: 循 环 次 数 PCR 理 论 方 程 只 在 指 数 期 成 立 线 性 期 lg [DNA] 指 数 期 y = x(1+e) n 循 环 数
10 为 什 么 C T 值 [DNA] 0? R n = R B + X 0 (1+ e) n R s 第 n 次 PCR 循 环 时 的 荧 光 信 号 强 度 (R n ) 等 于 背 景 信 号 强 度 (R B ) 加 上 每 个 分 子 的 荧 光 强 度 ( 即 单 位 荧 光 强 度,R S ) 与 分 子 数 目 的 乘 积 设 n=c T, 则 : R CT = R B + X 0 (1+ e) CT R s lg (R CT -R B ) = lg X 0 + C T lg (1+ e) + lg R s C T lg (1+ e) = - lg X 0 + lg (R CT -R B ) lgr s C T = log X O log(1 + E X ) + log( R T R B log(1 + E ) log R X ) S 即 C T = - k lg X 0 + b ( 线 性 方 程 )
11 标 准 曲 线 :C T 值 对 [DNA] 0 作 图 C T 值 C T = - k lgx 0 + b lg [ 起 始 DNA]
12 成 功 的 定 量 PCR
13 荧 光 定 量 PCR 化 学 原 理
14
15 SYBR Green I 作 用 机 理
16 数 量 关 系 1. 每 形 成 一 个 DNA 双 链, 就 有 一 定 数 量 的 染 料 结 合 上 去 2. 染 料 一 结 合, 就 产 生 荧 光 信 号 3. 信 号 强 度 与 DNA 分 子 总 数 目 成 正 比
17 TaqMan 探 针 的 FRET TaqMan Probe E R E Q E E R Q
18 TaqMan 作 用 机 理
19 数 量 关 系 3 上 游 引 物 R TaqMan 探 针 Q 下 游 引 物 R 3 5 Q 每 产 生 一 条 DNA 链, 就 切 断 一 条 探 针 2. 每 切 断 一 条 探 针, 就 产 生 一 个 单 位 信 号 3. 信 号 强 度 与 结 合 探 针 的 DNA 分 子 数 成 正 比
20 Real-time PCR 应 用
21 绝 对 定 量 (Absolute Quantification,AQ) 病 原 体 检 测 转 基 因 食 品 检 测 基 因 表 达 研 究 相 对 定 量 (Relative Quantification,RQ) 基 因 在 不 同 组 织 中 的 表 达 差 异 药 物 疗 效 考 核 耐 药 性 研 究 等 位 基 因 分 型 (Allelic Discrimination,AD) 基 因 突 变 分 析 SNP 研 究 物 种 鉴 定 菌 株 鉴 定 阴 性 阳 性 鉴 定 (Plus/Minus with IPC,+/-)
22 实 时 PCR 分 析 绝 对 定 量 相 对 定 量 根 据 标 准 曲 线 提 供 数 量 测 量 提 供 精 确 的 起 始 材 料 相 对 数 量 差 异
23 绝 对 定 量 与 相 对 定 量 的 定 义 绝 对 定 量 分 析 用 于 确 定 未 知 样 本 中 某 个 核 酸 序 列 的 绝 对 量 值, 即 通 常 所 说 的 拷 贝 数 相 对 定 量 用 于 测 定 一 个 测 试 样 本 中 目 标 核 酸 序 列 与 校 正 样 本 中 同 一 序 列 表 达 的 相 对 变 化 校 正 样 本 可 以 是 一 个 未 经 处 理 的 对 照 或 者 是 在 一 个 时 程 研 究 中 处 于 零 时 的 样 本
24 绝 对 定 量 : 从 荧 光 到 拷 贝 数 The well contains 400 target copies Y= mx+b Ct s Ct values Log copy number
25 相 对 定 量 : 参 照 因 子 Calibrator 用 以 比 较 结 果 的 基 准 t =0 t=12 t=24 t=48 time total RNA total RNA total RNA total RNA cdna cdna cdna cdna
26 相 对 定 量 : 内 对 照 Endogenous Control 用 以 标 准 化 样 品 操 作 t =0 t=12 t=24 t=48 time total RNA total RNA total RNA total RNA cdna cdna cdna cdna
27 IL-2 18S ΔC t ΔΔC t 2 -ΔΔCt T=0 (calibrator) T=1hr T=6hr T=24hr Relative Quantity of Expression t = 0 t = 1 h t = 6 h t = 24 h 0
28 相 对 定 量 研 究 软 件 同 时 分 析 多 达 10 块 反 应 板 的 基 因 表 达 数 据 多 至 960 个 数 据 点 的 单 击 分 析 数 据 直 观 通 过 ΔΔC T ( 比 较 Ct) 法 完 全 自 动 分 析 数 据 无 须 将 数 据 导 出 至 电 子 数 据 表 或 多 次 数 据 导 出
29 终 点 检 测 等 位 基 因 分 型 阴 性 阳 性 鉴 定 突 变 的 存 在 形 式 目 标 序 列 的 有 无
30 等 位 基 因 分 型 定 义 : 等 位 基 因 分 型 (AD) 分 析 是 一 种 多 重 ( 每 个 反 应 包 括 一 个 以 上 的 引 物 和 探 针 对 ) 终 点 ( 在 PCR 过 程 的 终 点 收 集 数 据 ) 分 析 实 验, 用 于 检 测 某 个 核 酸 序 列 的 变 异 每 个 反 应 中 包 括 两 个 引 物 和 探 针 对, 允 许 在 一 个 目 标 模 板 序 列 的 单 核 苷 酸 多 态 性 (SNP) 位 点 上 出 现 两 个 可 能 的 变 异 基 因 型 目 标 序 列 的 实 际 量 不 确 定
31 正 常 与 突 变 探 针 在 同 一 管 里 反 应 的 点 突 变 检 测
32 基 因 分 型 检 测 FAM VIC Homozygote for FAM-specific allele VIC FAM Homozygote for VIC-specific allele FAM VIC Heterozygote for both alleles
33 等 位 基 因 自 动 识 别 软 件 加 速 数 据 分 析 等 位 基 因 分 组 识 别 每 一 个 孔 的 质 量 评 分 用 户 自 定 义 的 质 量 评 分 标 准 基 于 每 一 个 标 记 的 识 别 限 制 用 户 的 主 观 干 扰
34 阴 性 阳 性 鉴 定 定 义 : 阳 性 / 阴 性 实 验 是 一 种 终 点 分 析, 它 可 以 确 定 某 个 样 本 中 是 ( 阳 性, 用 加 号 表 示 ) 否 ( 阴 性, 用 减 号 表 示 ) 存 在 一 个 特 异 性 目 标 序 列 在 终 点 分 析 中, 数 据 是 在 PCR 过 程 结 束 时 获 得 的 什 么 是 IPC?IPC 是 一 种 阳 性 内 对 照, 它 被 用 在 阳 性 / 阴 性 实 验 中, 用 于 监 测 PCR 过 程 并 确 定 阴 性 结 果 不 是 因 为 PCR 失 败 而 造 成,IPC 包 括 一 个 模 板 一 组 引 物 和 一 个 荧 光 标 记 (VIC) 的 探 针, 被 加 到 反 应 板 的 每 一 个 孔 中
35 阴 性 结 果 示 例
36 阳 性 结 果 示 例
37 microrna MicroRNA(miRNA) 是 一 种 22 个 碱 基 左 右 的 内 源 性 单 链 小 分 子 RNA 由 带 茎 环 结 构 的 双 链 RNA 前 体 剪 切 而 成 具 有 高 度 保 守 性 时 序 性 和 组 织 特 异 性 通 过 与 特 异 mrna 结 合, 抑 制 目 标 基 因 表 达 或 降 解 mrna
38 mirna Expression 1. Transcription 2. Hairpin release in the nucleus 3. Export to cytoplasm 4. Dicer processing 5. Strand selection by RISC 6. Translational repression *mature active strand
39 Mechanisms of Small RNA-Induced Gene Regulation
40 为 何 研 究 mirna? mirna 已 被 确 认 为 一 类 新 的 基 因 调 控 因 子, 参 与 了 细 胞 的 发 育 分 化 和 联 络 对 mirna 功 能 的 研 究 将 有 助 于 设 计 sirna 干 扰 实 验 mirna 有 可 能 成 为 新 的 生 物 分 子 标 记 有 重 要 的 临 床 应 用 价 值
41 mirna 分 析 的 技 术 挑 战 Northern Blot ( 杂 交 法 ) Homegrown technology and easy to access ( 易 于 操 作 ) Large sample amount requirement (ug scale) ( 需 大 量 样 品 ) Low dynamic range (two orders of magnitude) ( 可 测 范 围 低 ) Mismatch hybridization often cannot distinguish well between mirnas that only have small sequence differences ( 错 配 杂 交 问 题 ) Precursor mirna Mature mirna Microarrays ( 芯 片 法 ) High throughput ( 高 产 出 ) Improved dynamic range ( 可 测 范 围 较 宽 ) Large sample RNA requirement, approximately 5 µg per array ( 需 大 量 样 品 ) Difficult or impossible to distinguish between the Pre-miRNA and mirna ( 很 难 区 分 前 体 mirna and 成 熟 mirna) Do not distinguish well between mirnas that have only small differences in sequence. ( 对 类 似 结 构 的 mirna 分 辨 率 差 ) Quantitative Real-Time PCR ( 实 时 定 量 PCR) Dramatically less sample requirement ( 只 需 微 量 样 品 ) Significantly wide dynamic range (7 logs) ( 非 常 宽 的 可 测 范 围 ) High sensitivity and specificity ( 高 灵 敏 度, 高 特 异 性 ) However, how to design a TaqMan real-time PCR assay on a ~22 base polynucleotide fragment? ( 但 是, 如 何 设 计 这 样 一 个 靶 物 只 有 22 个 碱 基 TaqMan real-time PCR?) Solution: TaqMan MicroRNA PCR Assays
42 Workflow mirvana mirna Isolation Kit TaqMan MicroRNA RT kit TaqMan MicroRNA Assays TaqMan Universal Master Mix,No UNG
43 Five Fully Integrated Systems for Real-Time PCR Applied Biosystems 7900HT Fast Real-Time PCR System Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System Applied Biosystems StepOne Real-Time PCR System Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System
44 mirvana mirna Isolation Kit 专 业 高 效 回 收 小 分 子 RNA 富 集 小 于 200 nt RNA, 提 高 下 游 试 验 灵 敏 度 方 便 快 捷,30 分 钟 完 成 整 个 过 程 理 想 的 mirna, sirna, shrna, and snrna 分 析 试 剂 盒 适 合 各 种 组 织 和 细 胞 材 料
45 mirna cdna Forward primer RT primer Step 1: Stem-loop RT Step 2: Real-time PCR TaqMan MicroRNA Assays Four oligos per mirna 1. RT primer 2. Forward primer 3. Reverse primer 4. TaqMan probe Two enzymes required 1. Reverse transcriptase 2. AmpliTaq Gold DNA Polymerase Q F TaqMan probe Reverse primer
46 发 夹 状 引 物 的 反 转 录 mirna 分 析 高 度 的 重 现 性 mir-16 let-7a mir-20 mir mirnas 个 样 本,16 个 重 复, 2 名 操 作 者 的 实 验 中 平 均 标 准 方 差 : 0.1 定 量 结 果 偏 差 : 0.6%
47 TaqMan Universal Master Mix 实 验 证 明 可 以 达 到 7 个 数 量 级 的 线 性 范 围
48 TaqMan Array Human MicroRNA Panel New release 快 速, 高 效 的 mirna 分 析 方 法 同 时 检 测 多 达 365 个 mirna
49 mirna 定 量 PCR 相 关 应 用 转 录 后 基 因 调 控 研 究 细 胞 分 化 及 神 经 信 号 传 导 临 床 应 用 : 疾 病 诊 断 及 治 疗 耐 药 性 研 究 基 因 疾 病 治 疗 新 生 物 标 志 的 发 现
50 Primer Express 目 前 世 界 上 唯 一 专 业 用 于 设 计 定 量 引 物 和 探 针 的 软 件 随 机 配 送
51
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54 TaqMan Gene Expression Assays Over 700,000 assays designed to Human Arabidopsis Mouse Drosophila Rat C. elegans Canine Rhesus Macaque A single tube contains Forward Primer Reverse Primer TaqMan probe Optimized at a 20x concentration
55 代 客 设 计 合 成 TaqMan 基 因 表 达 试 剂 盒 对 于 任 何 物 种 或 生 物 体 适 用 用 户 确 定 目 标 序 列 以 方 便 的 单 管 形 式 供 货
56 SNP 基 因 分 型 分 析 试 剂 盒 超 过 4,500,000 个 预 先 设 计 好 的 人 和 小 鼠 的 全 基 因 组 试 剂 盒, 代 客 合 成 MicroRNA 分 析 试 剂 盒 人 小 鼠 大 鼠 拟 南 芥 果 蝇 和 线 虫 药 物 代 谢 分 析 试 剂 盒 2,400 个 药 物 代 谢 相 关 的 高 多 态 性 位 点, 涵 盖 220 个 药 物 代 谢 酶 转 运 蛋 白 基 因
57 病 原 体 检 测 试 剂 盒 沙 门 氏 杆 菌 单 核 细 胞 增 多 性 李 斯 特 菌 李 斯 特 杆 菌 大 肠 杆 菌 流 感 病 毒 检 测 试 剂 盒 流 感 病 毒 A 型 /H5 亚 型 检 测 试 剂 盒 转 基 因 检 测 试 剂 盒 大 豆 和 玉 米 的 转 基 因 检 测 试 剂 盒
58 谢 谢! ABI Real-time PCR
说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度, 对 2015 年 春 季 期 教 运 行 基
内 部 资 料 东 北 师 范 大 教 运 行 基 本 状 态 据 报 告 2015 年 春 季 期 教 务 处 2015 年 10 月 27 日 说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度,
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附 件 1 国 际 中 药 专 业 高 级 技 术 职 称 评 审 条 件 及 报 名 材 料 一 系 列 ( 一 ) 中 1 高 级 专 科 ( 副 ) 高 级 专 科 ( 副 ) 1 取 得 中 专 科 职 称 后, 独 立 从 事 中 临 床 实 践 5 年 以 上 2 取 得 中 博 士 学 位 后, 临 床 实 践 2 年 以 上 3 取 得 中 硕 士 学 位 后, 临 床 实 践 7
导 数 和 微 分 的 概 念 导 数 的 几 何 意 义 和 物 理 意 义 函 数 的 可 导 性 与 连 续 性 之 间 的 关 系 平 面 曲 线 的 切 线 和 法 线 导 数 和 微 分 的 四 则 运 算 基 本 初 等 函 数 的 导 数 复 合 函 数 反 函 数 隐 函 数 以
2015 年 考 研 数 学 二 考 试 大 纲 考 试 科 目 : 高 等 数 学 线 性 代 数 考 试 形 式 和 试 卷 结 构 一 试 卷 满 分 及 考 试 时 间 试 卷 满 分 为 150 分, 考 试 时 间 为 180 分 钟. 二 答 题 方 式 答 题 方 式 为 闭 卷 笔 试. 三 试 卷 内 容 结 构 高 等 教 学 约 78% 线 性 代 数 约 22% 四 试 卷
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工 程 硕 士 数 学 考 试 大 纲 与 要 求 ( 包 括 高 等 数 学 和 线 性 代 数 ) 一 函 数 极 限 与 连 续 第 一 部 分 : 高 等 数 学 考 试 内 容 函 数 的 概 念 及 表 示 法 函 数 的 有 界 性 单 调 性 周 期 性 和 奇 偶 性 复 合 函 数 反 函 数 分 段 函 数 和 隐 函 数 基 本 初 等 函 数 的 性 质 及 其 图 形 初
龚 亚 夫 在 重 新 思 考 基 础 教 育 英 语 教 学 的 理 念 一 文 中 援 引 的 观 点 认 为 当 跳 出 本 族 语 主 义 的 思 维 定 式 后 需 要 重 新 思 考 许 多 相 连 带 的 问 题 比 如 许 多 发 音 的 细 微 区 别 并 不 影 响 理 解 和
语 音 语 篇 语 感 语 域 林 大 津 毛 浩 然 改 革 开 放 以 来 的 英 语 热 引 发 了 大 中 小 学 英 语 教 育 整 体 规 划 问 题 在 充 分 考 虑 地 区 学 校 和 个 体 差 异 以 及 各 家 观 点 的 基 础 上 遵 循 实 事 求 是 逐 级 定 位 逐 层 分 流 因 材 施 教 的 原 则 本 研 究 所 倡 导 的 语 音 语 篇 语 感 语 域
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马 克 思 主 义 公 正 观 的 基 本 向 度 及 方 法 论 原 则 马 俊 峰 在 社 会 公 正 问 题 的 大 讨 论 中 罗 尔 斯 诺 齐 克 哈 耶 克 麦 金 泰 尔 等 当 代 西 方 思 想 家 的 论 述 被 反 复 引 用 和 申 说 而 将 马 克 思 恩 格 斯 等 经 典 作 家 的 观 点 置 于 一 种 被 忽 视 甚 至 被 忘 却 的 状 态 形 成 这 种
李 一 博 孙 立 瑛 靳 世 久 邢 菲 菲 杜 刚 基 于 大 型 常 压 立 式 金 属 储 罐 底 板 在 线 声 发 射 检 测 及 定 位 的 原 理 针 对 声 发 射 检 测 过 程 中 因 声 源 性 质 不 明 确 导 致 的 罐 底 完 整 性 评 价 结 果 不 准 确 的 问 题 采 用 小 波 分 析 方 法 对 罐 底 声 发 射 信 号 进 行 了 分 解 通 过 提
文 化 记 忆 传 统 创 新 与 节 日 遗 产 保 护 根 据 德 国 学 者 阿 斯 曼 的 文 化 记 忆 理 论 仪 式 与 文 本 是 承 载 文 化 记 忆 的 两 大 媒 体 在 各 种 仪 式 行 为 中 节 日 以 其 高 度 的 公 共 性 有 组 织 性 和 历 史 性 而 特 别 适 用 于 文 化 记 忆 的 储 存 和 交 流 节 日 的 文 化 功 能 不 仅 在 于
第 期 李 伟 等 用 方 法 对 中 国 历 史 气 温 数 据 插 值 可 行 性 讨 论
李 伟 李 庆 祥 江 志 红 使 用 插 值 方 法 对 已 经 过 质 量 控 制 和 均 一 化 的 年 月 年 月 中 国 全 部 基 本 基 准 站 气 温 资 料 逐 月 进 行 空 间 插 值 通 过 站 点 的 实 际 序 列 与 插 值 后 格 点 序 列 进 行 比 较 针 对 相 关 系 数 和 线 性 趋 势 等 多 个 量 来 检 验 方 法 对 气 候 资 料 插 值 的
0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 考 核 ( 扣 原 因 ) 考 评 得 3 安 全 生 产 目 30 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 无 轻 伤 责 任 事 故 无 重 大 质 量
0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 3 无 轻 伤 责 任 事 故 目 标 30 及 事 无 重 大 质 量 工 作 过 失 故 管 无 其 他 一 般 责 任 事 故 理 在 公 司 文 明 环 境 创 建 中, 无 工 作 过 失 及 被 追 究 的
中 国 软 科 学 年 第 期!!!
山 寨 模 式 的 形 成 机 理 及 其 对 组 织 创 新 的 启 示 山 寨 模 式 的 形 成 机 理 及 其 对 组 织 创 新 的 启 示 陶 厚 永 李 燕 萍 骆 振 心 武 汉 大 学 经 济 与 管 理 学 院 武 汉 大 学 中 国 产 学 研 合 作 问 题 研 究 中 心 湖 北 武 汉 北 京 大 学 经 济 研 究 所 光 华 天 成 博 士 后 工 作 站 北 京 本
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关 于 2015-2016 学 年 第 二 学 期 期 末 周 内 考 试 时 间 地 点 安 排 选 课 课 号 班 级 名 称 课 程 名 称 课 程 性 质 合 考 人 数 实 际 人 数 考 试 教 室 考 试 段 考 试 时 间 (2015-2016-2)-0006178-04247-1 130101 测 试 技 术 基 础 学 科 基 础 必 修 课 35 35 1 教 401 17 周
抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 % # % % % ) % % # # + #, ) +, % % % % % % % %
抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 王 红 曼 抗 战 时 期 国 民 政 府 为 适 应 战 时 经 济 金 融 的 需 要 实 行 由 财 政 部 四 联 总 处 中 央 银 行 等 多 家 机 构 先 后 共 同 参 与 的 多 元 化 银 行 监 理 体 制 对 战 时 状 态 下 的 银 行 发 展 与 经 营 安 全 进 行 了 大 规 模 的 设 计 与
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2006年顺德区高中阶段学校招生录取分数线
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¹ 改 革 开 放 年 来 人 口 流 动 规 模 持 续 增 加 对 我 国 社 会 经 济 的 持 续 发 展 起 到 了 重 要 作 用 为 全 面 了 解 我 国 流 动 人 口 生 存 状 况 准 确 把 握 流 动 人 口 发 展 规 律 和 趋 势 不 断 加 强 流 动 人 口 服 务 管 理 引 导 人 口 有 序 流 动 合 理 分 布 国 家 人 口 计 生 委 于 年 月 启
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第 一 部 分 : 股 票 模 拟 操 作 部 分 1. 登 录 与 主 界 面 1.1 登 录 学 生 在 桌 面 上, 打 开 世 华 文 件 夹, 直 接 双 击 文 件 夹 中 的 快 捷 图 标, 系 统 弹 出 世 华 财 讯 模 拟 股 票 交 易 系 统 ( 客 户 端 ) 窗 口, 如 图 1.1 所 示 图 1.1 请 输 入 登 录 名 称 及 密 码, 单 击 确 认 登 录
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HSK( 一 级 ) 考 查 考 生 的 日 常 汉 语 应 用 能 力, 它 对 应 于 国 际 汉 语 能 力 标 准 一 级 欧 洲 语 言 共 同 参 考 框 架 (CEF) A1 级 通 过 HSK( 一 级 ) 的 考 生 可 以 理 解 并 使 用 一 些 非 常 简 单 的 汉 语
新 汉 语 水 平 考 试 HSK 为 使 汉 语 水 平 考 试 (HSK) 更 好 地 服 务 于 汉 语 学 习 者, 中 国 国 家 汉 办 组 织 中 外 汉 语 教 学 语 言 学 心 理 学 和 教 育 测 量 学 等 领 域 的 专 家, 在 充 分 调 查 了 解 海 外 实 际 汉 语 教 学 情 况 的 基 础 上, 吸 收 原 有 HSK 的 优 点, 借 鉴 近 年 来 国
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评 委 : 徐 岩 宇 - 个 人 技 术 标 资 信 标 初 步 审 查 明 细 表 序 号 投 标 单 位 投 标 函 未 按 招 标 文 件 规 定 填 写 漏 填 或 内 容 填 写 错 误 的 ; 不 同 投 标 人 的 投 标 文 件 由 同 一 台 电 脑 或 同 一 家 投 标 单
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抗 日 战 争 研 究 年 第 期
田 子 渝 武 汉 抗 战 时 期 是 国 共 第 二 次 合 作 的 最 好 时 期 在 国 共 合 作 的 基 础 上 出 现 了 抗 日 救 亡 共 御 外 侮 的 局 面 这 个 大 好 局 面 的 出 现 与 中 共 长 江 局 的 丰 功 伟 绩 是 分 不 开 的 但 长 期 以 来 由 于 有 一 个 王 明 的 右 倾 错 误 直 接 影 响 了 对 它 的 全 面 科 学 准 确
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第二讲 数列
Togisu XueD Persolized Eduio Developme Ceer 高 考 中 不 等 式 问 题 的 解 决 方 法 通 润 达 久 王 力 前 言 : 近 年 来 不 等 式 问 题 正 越 来 越 多 的 出 现 在 调 研 题 和 高 考 试 题 中 而 且 大 多 出 现 在 江 苏 高 考 的 填 空 压 轴 题 中 是 高 考 考 察 的 重 点 和 难 点 由 于
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正 规 培 训 达 规 定 标 准 学 时 数, 并 取 得 结 业 证 书 二 级 可 编 程 师 ( 具 备 以 下 条 件 之 一 者 ) (1) 连 续 从 事 本 职 业 工 作 13 年 以 上 (2) 取 得 本 职 业 三 级 职 业 资 格 证 书 后, 连 续 从 事 本 职 业
1. 职 业 概 况 1.1 职 业 名 称 可 编 程 师 1.2 职 业 定 义 可 编 程 师 国 家 职 业 标 准 从 事 可 编 程 序 控 制 器 (PLC) 选 型 编 程, 并 对 应 用 进 行 集 成 和 运 行 管 理 的 人 员 1.3 职 业 等 级 本 职 业 共 设 四 个 等 级, 分 别 为 : 四 级 可 编 程 师 ( 国 家 职 业 资 格 四 级 ) 三
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一 六 年 级 下 册 教 科 书 总 体 说 明 ( 一 ) 教 学 内 容 本 册 教 科 书 一 共 安 排 了 5 个 教 学 单 元, 其 中 前 4 个 单 元 为 新 知 识, 第 五 单 元 是 对 整 个 小 学 阶 段 所 学 数 学 知 识 系 统 的 整 理 和 复 习
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国 家 职 业 标 准 1 可 编 程 序 控 制 系 统 设 计 师 国 家 职 业 标 准 1. 职 业 概 况 1.1 职 业 名 称 可 编 程 序 控 制 系 统 设 计 师 1.2 职 业 定 义 从 事 可 编 程 序 控 制 器 (PLC) 选 型 编 程, 并 对 应 用 系 统 进 行 设 计 集 成 和 运 行 管 理 的 人 员 1.3 职 业 等 级 本 职 业 共 设 四
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企 业 培 训 师 国 家 职 业 标 准 1. 职 业 概 况 1.1 职 业 名 称 企 业 培 训 师 1.2 职 业 定 义 指 能 够 结 合 经 济 技 术 发 展 和 就 业 要 求, 研 究 开 发 针 对 新 职 业 ( 工 种 ) 的 培 训 项 目, 以 及 根 据 企 业 生 产 经 营 需 要, 掌 握 并 运 用 现 代 培 训 理 念 和 手 段, 策 划 开 发 培
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有 限 理 性 动 物 精 神 及 市 场 崩 溃 对 情 绪 波 动 与 交 易 行 为 的 实 验 研 究 林 树 俞 乔 资 本 市 场 的 经 验 表 明 市 场 参 与 主 体 投 资 者 的 情 绪 波 动 对 资 产 交 易 与 价 格 决 定 产 生 了 不 可 忽 视 的 影 响 但 是 现 有 文 献 尚 缺 乏 对 这 一 重 要 因 素 的 研 究 因 此 本 文 的 目 的
工 程 勘 察 资 质 标 准 根 据 建 设 工 程 勘 察 设 计 管 理 条 例 和 建 设 工 程 勘 察 设 计 资 质 管 理 规 定, 制 定 本 标 准 一 总 则 ( 一 ) 本 标 准 包 括 工 程 勘 察 相 应 专 业 类 型 主 要 专 业 技 术 人 员 配 备 技 术
住 房 和 城 乡 建 设 部 关 于 印 发 工 程 勘 察 资 质 标 准 的 通 知 建 市 [2013]9 号 各 省 自 治 区 住 房 和 城 乡 建 设 厅, 北 京 市 规 划 委, 天 津 上 海 市 建 设 交 通 委, 重 庆 市 城 乡 建 设 委, 新 疆 生 产 建 设 兵 团 建 设 局, 总 后 基 建 营 房 部 工 程 局, 国 务 院 有 关 部 门 建 设 司,
第 期 马 海 燕 等 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 材 料 与 方 法 臭 氧 水 的 制 取 臭 氧 水 处 理 超 声 波 处 理 超 声 波 和 臭 氧 水 协 同 处 理 对 照 处 理 邻 苯 二 胺 分 光 光 度 法 测
第 卷 第 期 年 月 食 品 与 生 物 技 术 学 报 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 马 海 燕 张 慜 孙 金 才 食 品 科 学 与 技 术 国 家 重 点 实 验 室 江 南 大 学 江 苏 无 锡 海 通 食 品 集 团 股 份 有 限 公 司 浙 江 慈 溪 由 于 速 冻 蔬 菜 加 工 过 程 中 的 热 烫 处 理 对
18 上 报 该 学 期 新 生 数 据 至 阳 光 平 台 第 一 学 期 第 四 周 至 第 六 周 19 督 促 学 习 中 心 提 交 新 增 专 业 申 请 第 一 学 期 第 四 周 至 第 八 周 20 编 制 全 国 网 络 统 考 十 二 月 批 次 考 前 模 拟 题 第 一 学
1 安 排 组 织 全 国 网 络 统 考 九 月 批 次 网 上 考 前 辅 导 第 一 学 期 第 一 周 统 考 考 前 半 个 月 2 下 发 全 国 网 络 统 考 九 月 批 次 准 考 证 第 一 学 期 第 一 周 导 出 下 半 年 成 人 本 科 学 士 学 位 英 语 统 一 考 试 报 考 3 信 息 第 一 学 期 第 一 周 4 教 学 计 划 和 考 试 计 划 上 网,
所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 具 有 肉 品 科 学 与 技 术 食 品 科 学 专 业 背 景, 熟 悉 畜 禽 屠 宰 副 产 物 加 工 领 域 科 学 发 展 前 沿, 在 海 外 取 得 博 士 学 位 或 有 3 年 以 上 国 外 博 士 后 科 研 工
中 国 农 业 科 学 院 农 产 品 加 工 研 究 所 2016 年 青 年 英 才 计 划 人 才 招 聘 岗 位 和 应 聘 条 件 所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 熟 悉 粮 油 加 工 品 质 学 植 物 蛋 白 质 工 程 活 性 短 肽 与 多 糖 等 研 究 领 域, 在 海 外 获 得 博 士 学 位 或 获 得 博 油 料 加 工 与 品 粮 油 加
深圳市新亚电子制程股份有限公司
证 券 代 码 :002388 证 券 简 称 : 新 亚 制 程 公 告 编 号 :2016-053 深 圳 市 新 亚 电 子 制 程 股 份 有 限 公 司 2016 年 第 二 次 临 时 股 东 大 会 决 议 公 告 本 公 司 及 董 事 会 全 体 成 员 保 证 公 告 内 容 真 实 准 确 和 完 整, 不 存 在 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 者 重 大 遗 漏 特
微 积 分 ( 二 ) 教 学 大 纲 2 (2010 版 ) 课 程 编 码 :110861 课 程 名 称 : 微 积 分 学 时 / 学 分 :36/2 先 修 课 程 : 初 等 数 学 立 体 几 何 平 面 解 析 几 何 微 积 分 ( 一 ) 适 用 专 业 : 人 力 资 源 管
微 积 分 ( 二 ) 教 学 大 纲 2 (2010 版 ) 课 程 编 码 :110861 课 程 名 称 : 微 积 分 学 时 / 学 分 :36/2 先 修 课 程 : 初 等 数 学 立 体 几 何 平 面 解 析 几 何 微 积 分 ( 一 ) 适 用 专 业 : 人 力 资 源 管 理 等 专 业 开 课 教 研 室 : 大 学 数 学 教 研 室 执 笔 : 庄 乐 森 审 定 :
金 不 少 于 800 万 元, 净 资 产 不 少 于 960 万 元 ; (3) 近 五 年 独 立 承 担 过 单 项 合 同 额 不 少 于 1000 万 元 的 智 能 化 工 程 ( 设 计 或 施 工 或 设 计 施 工 一 体 ) 不 少 于 2 项 ; (4) 近 三 年 每 年
工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 一 总 则 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 ( 一 ) 为 了 加 强 对 从 事 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 企 业 的 管 理, 维 护 建 筑 市 场 秩 序, 保 证 工 程 质 量 和 安 全, 促 进 行 业 健 康 发 展, 结 合 建 筑 智 能 化 工 程 的 特 点, 制 定 本 标
2009—2010级本科课程教学大纲与课程简介格式
机 电 传 动 控 制 A 教 学 大 纲 ( 一 ) 课 程 基 本 信 息 1. 课 程 代 码 :20134146 2. 课 程 名 称 ( 中 文 / 英 文 ): 机 电 传 动 控 制 /Mechatronic Control System 3. 课 程 类 别 : 专 业 主 修 课 4. 课 程 学 分 :2.5 5. 课 程 学 时 :48( 其 中, 授 课 学 时 :32; 实
公 开 刊 物 须 有 国 内 统 一 刊 (CN), 发 表 文 章 的 刊 物 需 要 在 国 家 新 闻 出 版 广 电 总 局 (www.gapp.gov.cn 办 事 服 务 便 民 查 询 新 闻 出 版 机 构 查 询 ) 上 能 够 查 到 刊 凡 在 有 中 国 标 准 书 公 开
杭 教 人 2014 7 杭 州 市 教 育 局 关 于 中 小 学 教 师 系 列 ( 含 实 验 教 育 管 理 ) 晋 升 高 级 专 业 技 术 资 格 有 关 论 文 要 求 的 通 知 各 区 县 ( 市 ) 教 育 局 ( 社 发 局 ), 直 属 学 校 ( 单 位 ), 委 托 单 位 : 为 进 一 步 规 范 杭 州 市 中 小 学 教 师 系 列 ( 含 实 验 教 育 管