2116年2期OK

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3 目 录 2016 年 第 二 期 ( 总 第 一 二 七 期 ) 临 床 指 南 抗 菌 药 物 临 床 应 用 指 导 原 则 (2015 年 版 ) 连 载 ( 三 ) (1) 抗 菌 药 物 合 理 应 用 贵 州 省 人 民 医 院 2016 年 第 一 季 度 临 床 常 见 细 菌 及 多 重 耐 药 菌 监 测 报 告 (10) 2015 年 全 国 细 菌 耐 药 监 测 报 告 (14) 原 创 论 文 心 肌 细 胞 培 养 方 法 改 良 剂 抗 肿 瘤 药 物 心 肌 毒 性 评 价 (20) HPLC 同 时 测 定 人 血 清 中 茶 碱 及 其 代 谢 物 1,3- 二 甲 基 尿 酸 的 浓 度 (27) 药 品 不 良 反 应 药 品 不 良 反 应 信 息 通 报 ( 第 70 期 ) (33) 药 物 警 戒 药 物 警 戒 快 讯 2016 年 第 1 期 ( 总 第 153 期 ) (35) 简 讯 2016 年 中 国 医 院 协 会 药 事 管 理 专 业 委 员 会 临 床 药 师 技 能 培 训 班 圆 满 举 行 (37) 贵 州 省 人 民 医 院 2016 年 抗 菌 药 物 临 床 应 用 指 导 原 则 (2015 版 ) 专 项 培 训 简 讯 (38) 贵 州 省 人 民 医 院 2016 年 麻 醉 精 神 药 品 专 项 培 训 简 讯 (38) 参 与 紫 禁 城 国 际 药 师 论 坛 交 流, 展 现 我 院 药 师 风 采 (39) 药 剂 支 部 开 展 主 题 党 日 活 动 (39) 第 九 届 亚 太 地 区 循 证 医 学 研 讨 会 药 剂 科 论 文 壁 报 交 流 获 优 秀 壁 报 奖 (40) 药 剂 科 运 动 健 儿 参 加 省 医 第 一 届 职 工 运 动 会 (41) 药 剂 科 ( 省 药 事 管 理 质 控 中 心 )2016 质 量 行 (42) 岗 位 练 兵, 展 药 师 风 采 (42) 1

4 会 讯 贵 州 省 药 学 会 医 院 药 学 专 业 委 员 会 第 六 届 年 会 暨 第 十 届 现 代 医 院 药 学 模 式 与 临 床 药 学 发 展 研 讨 会 (44) 第 二 届 全 国 医 院 药 学 信 息 化 建 设 专 题 学 术 研 讨 会 (45) 2

5 临 床 指 南 抗 菌 药 物 临 床 应 用 指 导 原 则 (2015 年 版 ) 连 载 ( 三 ) 第 三 部 分 各 类 抗 菌 药 物 的 适 应 证 和 注 意 事 项 青 霉 素 类 青 霉 素 类 可 分 为 :(1) 主 要 作 用 于 革 兰 阳 性 菌 的 青 霉 素, 如 青 霉 素 G 普 鲁 卡 因 青 霉 素 苄 星 青 霉 素 青 霉 素 V (2) 耐 青 霉 素 酶 青 霉 素, 如 苯 唑 西 林 氯 唑 西 林 氟 氯 西 林 等 (3) 广 谱 青 霉 素, 包 括 :1 对 部 分 肠 杆 菌 科 细 菌 有 抗 菌 活 性, 如 氨 苄 西 林 阿 莫 西 林 ;2 对 多 数 革 兰 阴 性 杆 菌 包 括 铜 绿 假 单 胞 菌 具 抗 菌 活 性, 如 哌 拉 西 林 阿 洛 西 林 美 洛 西 林 适 应 证 1. 青 霉 素 : 青 霉 素 适 用 于 A 组 溶 血 性 链 球 菌 肺 炎 链 球 菌 等 革 兰 阳 性 球 菌 所 致 的 感 染, 包 括 血 流 感 染 脑 膜 炎 肺 炎 咽 炎 扁 桃 体 炎 中 耳 炎 猩 红 热 丹 毒 等, 也 可 用 于 治 疗 草 绿 色 链 球 菌 和 肠 球 菌 心 内 膜 炎, 以 及 破 伤 风 气 性 坏 疽 炭 疽 白 喉 流 行 性 脑 脊 髓 膜 炎 李 斯 特 菌 病 鼠 咬 热 梅 毒 淋 病 雅 司 回 归 热 钩 端 螺 旋 体 病 奋 森 咽 峡 炎 放 线 菌 病 等 青 霉 素 尚 可 用 于 风 湿 性 心 脏 病 或 先 天 性 心 脏 病 患 者 进 行 某 些 操 作 或 手 术 时, 预 防 心 内 膜 炎 发 生 普 鲁 卡 因 青 霉 素 的 抗 菌 谱 与 青 霉 素 G 基 本 相 同, 供 肌 内 注 射, 对 敏 感 细 菌 的 有 效 浓 度 可 持 续 24 小 时 适 用 于 敏 感 细 菌 所 致 的 轻 症 感 染 苄 星 青 霉 素 的 抗 菌 谱 与 青 霉 素 G 相 仿, 为 长 效 制 剂, 肌 内 注 射 120 万 单 位 后 血 中 低 浓 度 可 维 持 4 周 本 药 用 于 治 疗 A 组 溶 血 性 链 球 菌 咽 炎 及 扁 桃 体 炎, 预 防 A 组 溶 血 性 链 球 菌 感 染 引 起 的 风 湿 热 ; 本 药 亦 可 用 于 治 疗 梅 毒 青 霉 素 V 对 酸 稳 定, 可 口 服 抗 菌 作 用 较 青 霉 素 G 为 差, 适 用 于 敏 感 革 兰 阳 性 球 菌 引 起 的 轻 症 感 染 2. 耐 青 霉 素 酶 青 霉 素 类 : 本 类 药 物 抗 菌 谱 与 青 霉 素 G 相 仿, 但 抗 菌 作 用 较 差, 对 青 霉 素 酶 稳 定 ; 因 产 酶 而 对 青 霉 素 耐 药 的 葡 萄 球 菌 对 本 类 药 物 敏 感, 但 甲 氧 西 林 耐 药 葡 萄 球 菌 对 本 类 药 物 耐 药 主 要 适 用 于 产 青 霉 素 酶 的 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌 感 染, 如 血 流 感 染 心 内 膜 炎 肺 炎 脑 膜 炎 骨 髓 炎 皮 肤 及 软 组 织 感 染 等 肺 炎 链 球 菌 A 组 溶 血 性 链 球 菌 或 青 霉 素 敏 感 葡 萄 球 菌 感 染 则 不 宜 采 用 3. 广 谱 青 霉 素 类 : 氨 苄 西 林 与 阿 莫 西 林 的 抗 菌 谱 较 青 霉 素 G 为 广, 对 革 兰 阳 性 球 菌 作 用 与 青 霉 素 G 相 仿, 对 部 分 革 兰 阴 性 杆 菌 亦 具 抗 菌 活 性 本 类 药 物 适 用 于 敏 感 细 菌 所 致 的 呼 吸 道 感 染 尿 路 感 染 胆 道 感 染 皮 肤 及 软 组 织 感 染 脑 膜 炎 血 流 感 染 心 内 膜 炎 等 氨 苄 西 林 为 肠 球 菌 李 斯 特 菌 感 染 的 首 选 用 药 哌 拉 西 林 阿 洛 西 林 和 美 洛 西 林 对 革 兰 阴 性 杆 菌 的 抗 菌 谱 较 氨 苄 西 林 为 广, 抗 菌 作 用 也 较 强 除 对 部 分 肠 杆 菌 科 细 菌 外, 对 铜 绿 假 单 胞 菌 亦 有 良 好 抗 菌 作 用, 适 用 于 肠 杆 菌 科 细 菌 及 铜 绿 假 单 胞 菌 所 致 的 呼 吸 道 感 染 尿 路 感 染 胆 道 感 染 腹 腔 感 染 皮 肤 及 软 组 织 感 染 等 注 意 事 项 1. 对 青 霉 素 G 或 青 霉 素 类 抗 菌 药 物 过 敏 者 禁 用 本 品 2. 无 论 采 用 何 种 给 药 途 径, 用 青 霉 素 类 抗 1

6 临 床 指 南 菌 药 物 前 必 须 详 细 询 问 患 者 有 无 青 霉 素 类 过 敏 史 其 他 药 物 过 敏 史 及 过 敏 性 疾 病 史, 并 须 先 做 青 霉 素 皮 肤 试 验 3. 青 霉 素 钾 盐 不 可 快 速 静 脉 注 射 4. 青 霉 素 可 安 全 地 应 用 于 孕 妇 ; 少 量 本 品 可 经 乳 汁 排 出, 哺 乳 期 妇 女 应 用 青 霉 素 时 应 停 止 哺 乳 5. 老 年 人 肾 功 能 呈 轻 度 减 退, 本 品 主 要 经 肾 脏 排 出, 故 治 疗 老 年 患 者 感 染 时 宜 适 当 减 量 应 用 头 孢 菌 素 类 头 孢 菌 素 类 根 据 其 抗 菌 谱 抗 菌 活 性 对 β- 内 酰 胺 酶 的 稳 定 性 以 及 肾 毒 性 的 不 同, 目 前 分 为 四 代 第 一 代 头 孢 菌 素 主 要 作 用 于 需 氧 革 兰 阳 性 球 菌, 仅 对 少 数 革 兰 阴 性 杆 菌 有 一 定 抗 菌 活 性 ; 常 用 的 注 射 剂 有 头 孢 唑 啉 头 孢 拉 定 等, 口 服 制 剂 有 头 孢 拉 定 头 孢 氨 苄 和 头 孢 羟 氨 苄 等 第 二 代 头 孢 菌 素 对 革 兰 阳 性 球 菌 的 活 性 与 第 一 代 相 仿 或 略 差, 对 部 分 革 兰 阴 性 杆 菌 亦 具 有 抗 菌 活 性 ; 注 射 剂 有 头 孢 呋 辛 头 孢 替 安 等, 口 服 制 剂 有 头 孢 克 洛 头 孢 呋 辛 酯 和 头 孢 丙 烯 等 第 三 代 头 孢 菌 素 对 肠 杆 菌 科 细 菌 等 革 兰 阴 性 杆 菌 具 有 强 大 抗 菌 作 用, 头 孢 他 啶 和 头 孢 哌 酮 除 肠 杆 菌 科 细 菌 外, 对 铜 绿 假 单 胞 菌 亦 具 较 强 抗 菌 活 性 ; 注 射 品 种 有 头 孢 噻 肟 头 孢 曲 松 头 孢 他 啶 头 孢 哌 酮 等, 口 服 品 种 有 头 孢 克 肟 和 头 孢 泊 肟 酯 等, 口 服 品 种 对 铜 绿 假 单 胞 菌 均 无 作 用 第 四 代 头 孢 菌 素 常 用 者 为 头 孢 吡 肟, 对 肠 杆 菌 科 细 菌 作 用 与 第 三 代 头 孢 菌 素 大 致 相 仿, 其 中 对 阴 沟 肠 杆 菌 产 气 肠 杆 菌 柠 檬 酸 菌 属 等 部 分 菌 株 作 用 优 于 第 三 代 头 孢 菌 素, 对 铜 绿 假 单 胞 菌 的 作 用 与 头 孢 他 啶 相 仿, 对 革 兰 阳 性 球 菌 的 作 用 较 第 三 代 头 孢 菌 素 略 强 适 应 证 1. 第 一 代 头 孢 菌 素 : 注 射 剂 代 表 品 种 为 头 孢 唑 啉 主 要 适 用 于 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌 A 组 溶 血 性 链 球 菌 和 肺 炎 链 球 菌 等 所 致 的 上 下 呼 吸 道 感 染, 尿 路 感 染, 血 流 感 染, 心 内 膜 炎, 骨 关 节 感 染 及 皮 肤 及 软 组 织 感 染 等 ; 亦 可 用 于 流 感 嗜 血 杆 菌 奇 异 变 形 杆 菌 大 肠 埃 希 菌 敏 感 株 所 致 的 尿 路 感 染 以 及 肺 炎 等 头 孢 唑 啉 常 作 为 外 科 手 术 预 防 用 药 头 孢 拉 定 头 孢 氨 苄 等 口 服 制 剂 的 抗 菌 作 用 较 头 孢 唑 啉 为 差, 主 要 适 用 于 治 疗 敏 感 菌 所 致 的 轻 症 病 例 2. 第 二 代 头 孢 菌 素 : 注 射 剂 代 表 品 种 为 头 孢 呋 辛 主 要 用 于 治 疗 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌 链 球 菌 属 肺 炎 链 球 菌 等 革 兰 阳 性 球 菌, 以 及 流 感 嗜 血 杆 菌 大 肠 埃 希 菌 奇 异 变 形 杆 菌 等 中 的 敏 感 株 所 致 的 呼 吸 道 感 染 尿 路 感 染 皮 肤 及 软 组 织 感 染 血 流 感 染 骨 关 节 感 染 和 腹 腔 盆 腔 感 染 用 于 腹 腔 感 染 和 盆 腔 感 染 时 需 与 抗 厌 氧 菌 药 合 用 头 孢 呋 辛 也 是 常 用 围 手 术 期 预 防 用 药 物 头 孢 克 洛 头 孢 呋 辛 酯 头 孢 丙 烯 等 口 服 制 剂, 主 要 适 用 于 上 述 感 染 中 的 轻 症 病 例 3. 第 三 代 头 孢 菌 素 : 主 要 品 种 有 头 孢 噻 肟 头 孢 曲 松 头 孢 他 啶 头 孢 哌 酮 适 用 于 敏 感 肠 杆 菌 科 细 菌 等 革 兰 阴 性 杆 菌 所 致 严 重 感 染, 如 下 呼 吸 道 感 染 血 流 感 染 腹 腔 感 染 肾 盂 肾 炎 和 复 杂 性 尿 路 感 染 盆 腔 炎 性 疾 病 骨 关 节 感 染 复 杂 性 皮 肤 及 软 组 织 感 染 中 枢 神 经 系 统 感 染 等 治 疗 腹 腔 盆 腔 感 染 时 需 与 抗 厌 氧 菌 药 ( 如 甲 硝 唑 ) 合 用 头 孢 噻 肟 头 孢 曲 松 尚 可 用 于 A 组 溶 血 性 链 球 菌 草 绿 色 链 球 菌 肺 炎 链 球 菌 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌 所 致 的 各 种 感 染 头 孢 他 啶 头 孢 哌 酮 尚 可 用 于 铜 绿 假 单 胞 菌 所 致 的 各 种 感 染 第 三 代 口 服 头 孢 菌 素 主 要 用 于 治 疗 敏 感 菌 所 致 轻 中 度 感 染, 也 可 用 于 经 第 三 代 头 孢 菌 素 注 射 剂 治 疗 后 的 序 贯 治 疗 ; 但 需 注 意 第 三 代 口 服 头 孢 菌 素 均 不 宜 用 于 铜 绿 假 单 胞 菌 和 其 它 非 发 酵 菌 的 感 染 2

7 临 床 指 南 4. 第 四 代 头 孢 菌 素 : 抗 菌 谱 和 临 床 适 应 证 与 第 三 代 头 孢 菌 素 相 似, 可 用 于 对 第 三 代 头 孢 菌 素 耐 药 而 对 其 敏 感 的 产 气 肠 杆 菌 阴 沟 肠 杆 菌 沙 雷 菌 属 等 细 菌 所 致 感 染, 亦 可 用 于 中 性 粒 细 胞 缺 乏 伴 发 热 患 者 的 经 验 治 疗 所 有 头 孢 菌 素 类 对 甲 氧 西 林 耐 药 葡 萄 球 菌 肠 球 菌 属 抗 菌 作 用 均 差, 故 不 宜 选 用 于 治 疗 上 述 细 菌 所 致 感 染 注 意 事 项 1. 禁 用 于 对 任 何 一 种 头 孢 菌 素 类 抗 菌 药 物 有 过 敏 史 及 有 青 霉 素 过 敏 性 休 克 史 的 患 者 2. 用 药 前 必 须 详 细 询 问 患 者 既 往 有 否 对 头 孢 菌 素 类 青 霉 素 类 或 其 他 药 物 的 过 敏 史 有 青 霉 素 类 其 他 β- 内 酰 胺 类 及 其 他 药 物 过 敏 史 的 患 者, 有 明 确 应 用 指 征 时 应 谨 慎 使 用 本 类 药 物 在 用 药 过 程 中 一 旦 发 生 过 敏 反 应, 须 立 即 停 药 如 发 生 过 敏 性 休 克, 须 立 即 就 地 抢 救 并 予 以 肾 上 腺 素 等 相 关 治 疗 3. 本 类 药 物 多 数 主 要 经 肾 脏 排 泄, 中 度 以 上 肾 功 能 不 全 患 者 应 根 据 肾 功 能 适 当 调 整 剂 量 中 度 以 上 肝 功 能 减 退 时, 头 孢 哌 酮 头 孢 曲 松 可 能 需 要 调 整 剂 量 4. 氨 基 糖 苷 类 和 第 一 代 头 孢 菌 素 注 射 剂 合 用 可 能 加 重 前 者 的 肾 毒 性, 应 注 意 监 测 肾 功 能 5. 头 孢 哌 酮 可 导 致 低 凝 血 酶 原 血 症 或 出 血, 合 用 维 生 素 K 可 预 防 出 血 ; 本 药 亦 可 引 起 戒 酒 硫 样 反 应, 用 药 期 间 及 治 疗 结 束 后 72 小 时 内 应 戒 酒 或 避 免 摄 入 含 酒 精 饮 料 头 霉 素 类 头 霉 素 类 品 种 包 括 头 孢 西 丁 头 孢 美 唑 头 孢 米 诺 等 其 抗 菌 谱 和 抗 菌 作 用 与 第 二 代 头 孢 菌 素 相 仿, 但 对 脆 弱 拟 杆 菌 等 厌 氧 菌 抗 菌 作 用 较 头 孢 菌 素 类 强 头 霉 素 类 对 大 多 数 超 广 谱 β- 内 酰 胺 酶 (ESBLs) 稳 定, 但 其 治 疗 产 ESBLs 的 细 菌 所 致 感 染 的 疗 效 未 经 证 实 适 应 证 1. 肺 炎 链 球 菌 及 其 它 链 球 菌 属 甲 氧 西 林 敏 感 金 黄 色 葡 萄 球 菌 大 肠 埃 希 菌 等 肠 杆 菌 科 细 菌 流 感 嗜 血 杆 菌 以 及 拟 杆 菌 属 引 起 的 下 呼 吸 道 感 染, 血 流 感 染, 骨 关 节 感 染, 以 及 皮 肤 及 软 组 织 感 染 2. 大 肠 埃 希 菌 等 肠 杆 菌 科 细 菌 所 致 的 尿 路 感 染 3. 大 肠 埃 希 菌 等 肠 杆 菌 科 细 菌 拟 杆 菌 属 等 厌 氧 菌 引 起 的 腹 腔 感 染 4. 大 肠 埃 希 菌 淋 病 奈 瑟 菌 拟 杆 菌 属 等 厌 氧 菌 以 及 B 组 链 球 菌 所 致 的 盆 腔 感 染, 疑 有 沙 眼 衣 原 体 感 染 者 应 合 用 抗 衣 原 体 药 5. 也 可 用 于 胃 肠 道 手 术 经 阴 道 子 宫 切 除 经 腹 腔 子 宫 切 除 或 剖 宫 产 等 手 术 前 的 预 防 用 药 注 意 事 项 1. 禁 用 于 对 头 霉 素 类 及 头 孢 菌 素 类 抗 菌 药 物 有 过 敏 史 者 2. 有 青 霉 素 类 过 敏 史 患 者 确 有 应 用 指 征 时, 必 须 充 分 权 衡 利 弊 后 在 严 密 观 察 下 慎 用 如 以 往 曾 发 生 青 霉 素 休 克 的 患 者, 则 不 宜 再 选 用 本 品 3. 有 胃 肠 道 疾 病 病 史 的 患 者, 特 别 是 结 肠 炎 患 者 应 慎 用 本 品 4. 不 推 荐 头 孢 西 丁 用 于 <3 月 的 婴 儿 5. 使 用 头 孢 美 唑 头 孢 米 诺 期 间, 应 避 免 饮 酒 以 免 发 生 戒 酒 硫 样 反 应 β- 内 酰 胺 类 β- 内 酰 胺 酶 抑 制 剂 目 前 临 床 应 用 的 主 要 品 种 有 阿 莫 西 林 克 拉 维 酸 氨 苄 西 林 舒 巴 坦 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 替 卡 西 林 克 拉 维 酸 和 哌 拉 西 林 他 唑 巴 坦 阿 莫 西 林 克 拉 维 酸 氨 苄 西 林 舒 巴 坦 对 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌, 粪 肠 球 菌, 流 感 嗜 血 杆 菌, 卡 他 莫 拉 菌, 淋 病 奈 瑟 菌, 脑 膜 炎 奈 瑟 菌, 大 肠 埃 希 菌 沙 门 菌 属 等 肠 杆 菌 科 细 菌, 脆 弱 拟 杆 菌 梭 杆 菌 属 等 厌 氧 菌 具 有 良 好 抗 菌 作 用 3

8 临 床 指 南 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 替 卡 西 林 克 拉 维 酸 和 哌 拉 西 林 他 唑 巴 坦 对 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌, 流 感 嗜 血 杆 菌, 大 肠 埃 希 菌 克 雷 伯 菌 属 肠 杆 菌 属 等 肠 杆 菌 科 细 菌, 铜 绿 假 单 胞 菌 以 及 拟 杆 菌 属 等 厌 氧 菌 具 有 良 好 抗 菌 活 性 氨 苄 西 林 舒 巴 坦 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 对 不 动 杆 菌 属 具 有 抗 菌 活 性 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 替 卡 西 林 克 拉 维 酸 对 嗜 麦 芽 窄 食 单 胞 菌 亦 具 抗 菌 活 性 适 应 证 1. 本 类 药 物 适 用 于 因 产 β- 内 酰 胺 酶 而 对 β- 内 酰 胺 类 药 物 耐 药 的 细 菌 感 染, 但 不 推 荐 用 于 对 复 方 制 剂 中 抗 菌 药 物 敏 感 的 细 菌 感 染 和 非 产 β- 内 酰 胺 酶 的 耐 药 菌 感 染 2. 阿 莫 西 林 克 拉 维 酸 口 服 制 剂 适 用 于 : 流 感 嗜 血 杆 菌 和 卡 他 莫 拉 菌 所 致 鼻 窦 炎 中 耳 炎 和 下 呼 吸 道 感 染 ; 大 肠 埃 希 菌 克 雷 伯 菌 属 和 肠 杆 菌 属 所 致 的 尿 路 生 殖 系 统 感 染 ; 甲 氧 西 林 敏 感 金 黄 色 葡 萄 球 菌 大 肠 埃 希 菌 和 克 雷 伯 菌 属 所 致 皮 肤 及 软 组 织 感 染 阿 莫 西 林 克 拉 维 酸 和 氨 苄 西 林 舒 巴 坦 注 射 剂 除 上 述 适 应 证 的 较 重 病 例 外, 还 可 用 于 上 述 细 菌 所 致 腹 腔 感 染, 血 流 感 染 和 骨 关 节 感 染 3. 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 哌 拉 西 林 他 唑 巴 坦 和 替 卡 西 林 克 拉 维 酸 适 用 于 : 肠 杆 菌 科 细 菌 铜 绿 假 单 胞 菌 敏 感 株 和 甲 氧 西 林 敏 感 金 黄 色 葡 萄 球 菌 所 致 血 流 感 染 下 呼 吸 道 感 染 皮 肤 及 软 组 织 感 染 尿 路 感 染 腹 腔 感 染 盆 腔 感 染 和 骨 关 节 感 染 4. 氨 苄 西 林 舒 巴 坦 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 尚 可 用 于 不 动 杆 菌 属 所 致 感 染 5. 舒 巴 坦 可 与 其 他 药 物 联 合 治 疗 多 重 耐 药 不 动 杆 菌 属 所 致 感 染 注 意 事 项 1. 应 用 阿 莫 西 林 克 拉 维 酸 氨 苄 西 林 舒 巴 坦 替 卡 西 林 克 拉 维 酸 和 哌 拉 西 林 他 唑 巴 坦 前 必 须 详 细 询 问 药 物 过 敏 史 并 进 行 青 霉 素 皮 肤 试 验, 对 青 霉 素 类 药 物 过 敏 者 或 青 霉 素 皮 试 阳 性 患 者 禁 用 对 以 上 复 合 制 剂 中 任 一 成 分 过 敏 者 亦 禁 用 该 复 合 制 剂 2. 有 头 孢 菌 素 类 或 舒 巴 坦 过 敏 史 者 禁 用 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 有 青 霉 素 类 过 敏 史 的 患 者 确 有 应 用 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 的 指 征 时, 必 须 在 严 密 观 察 下 慎 用, 但 有 青 霉 素 过 敏 性 休 克 史 的 患 者, 不 可 选 用 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 3. 应 用 本 类 药 物 时 如 发 生 过 敏 反 应, 须 立 即 停 药 ; 一 旦 发 生 过 敏 性 休 克, 应 就 地 抢 救, 并 给 予 吸 氧 及 注 射 肾 上 腺 素 肾 上 腺 皮 质 激 素 等 抗 休 克 治 疗 4. 中 度 以 上 肾 功 能 不 全 患 者 使 用 本 类 药 物 时 应 根 据 肾 功 能 减 退 程 度 调 整 剂 量 碳 青 霉 烯 类 碳 青 霉 烯 类 抗 菌 药 物 分 为 具 有 抗 非 发 酵 菌 和 不 具 有 抗 非 发 酵 菌 两 组, 前 者 包 括 亚 胺 培 南 西 司 他 丁 ( 西 司 他 丁 具 有 抑 制 亚 胺 培 南 在 肾 内 被 水 解 作 用 ) 美 罗 培 南 帕 尼 培 南 倍 他 米 隆 ( 倍 他 米 隆 具 有 减 少 帕 尼 培 南 在 肾 内 蓄 积 中 毒 作 用 ) 比 阿 培 南 和 多 立 培 南 ; 后 者 为 厄 他 培 南 亚 胺 培 南 美 罗 培 南 帕 尼 培 南 比 阿 培 南 等 对 各 种 革 兰 阳 性 球 菌 革 兰 阴 性 杆 菌 ( 包 括 铜 绿 假 单 胞 菌 不 动 杆 菌 属 ) 和 多 数 厌 氧 菌 具 强 大 抗 菌 活 性, 对 多 数 β- 内 酰 胺 酶 高 度 稳 定, 但 对 甲 氧 西 林 耐 药 葡 萄 球 菌 和 嗜 麦 芽 窄 食 单 胞 菌 等 抗 菌 作 用 差 厄 他 培 南 与 其 他 碳 青 霉 烯 类 抗 菌 药 物 有 两 个 重 要 差 异 : 血 半 衰 期 较 长, 可 一 天 一 次 给 药 ; 对 铜 绿 假 单 胞 菌 不 动 杆 菌 属 等 非 发 酵 菌 抗 菌 作 用 差 近 年 来 非 发 酵 菌 尤 其 是 不 动 杆 菌 属 细 菌 对 碳 青 霉 烯 类 抗 菌 药 物 耐 药 率 迅 速 上 升, 肠 杆 菌 科 细 菌 中 亦 出 现 部 分 碳 青 霉 烯 类 耐 药, 严 重 威 胁 碳 青 霉 烯 类 抗 菌 药 物 的 临 床 疗 效, 必 须 合 理 应 用 这 类 抗 菌 药 物, 加 强 对 耐 药 菌 传 播 的 防 控 适 应 证 1. 多 重 耐 药 但 对 本 类 药 物 敏 感 的 需 氧 革 兰 4

9 临 床 指 南 阴 性 杆 菌 所 致 严 重 感 染, 包 括 肺 炎 克 雷 伯 菌 大 肠 埃 希 菌 阴 沟 肠 杆 菌 柠 檬 酸 菌 属 粘 质 沙 雷 菌 等 肠 杆 菌 科 细 菌 铜 绿 假 单 胞 菌 不 动 杆 菌 属 等 细 菌 所 致 血 流 感 染 下 呼 吸 道 感 染 肾 盂 肾 炎 和 复 杂 性 尿 路 感 染 腹 腔 感 染 盆 腔 感 染 等 ; 用 于 铜 绿 假 单 胞 菌 所 致 感 染 时, 需 注 意 在 疗 程 中 某 些 菌 株 可 出 现 耐 药 厄 他 培 南 尚 被 批 准 用 于 社 区 获 得 性 肺 炎 的 治 疗 2. 脆 弱 拟 杆 菌 等 厌 氧 菌 与 需 氧 菌 混 合 感 染 的 重 症 患 者 3. 病 原 菌 尚 未 查 明 的 免 疫 缺 陷 患 者 中 重 症 感 染 的 经 验 治 疗 4. 美 罗 培 南 帕 尼 培 南 倍 他 米 隆 则 除 上 述 适 应 证 外, 尚 可 用 于 年 龄 在 3 个 月 以 上 的 细 菌 性 脑 膜 炎 患 者 注 意 事 项 1. 禁 用 于 对 本 类 药 物 及 其 配 伍 成 分 过 敏 的 患 者 2. 本 类 药 物 不 宜 用 于 治 疗 轻 症 感 染, 更 不 可 作 为 预 防 用 药 3. 本 类 药 物 所 致 的 严 重 中 枢 神 经 系 统 反 应 多 发 生 在 原 本 患 有 癫 痫 等 中 枢 神 经 系 统 疾 病 患 者 及 肾 功 能 减 退 患 者 未 减 量 用 药 者, 因 此 在 上 述 基 础 疾 病 患 者 应 慎 用 本 类 药 物 中 枢 神 经 系 统 感 染 患 者 不 宜 应 用 亚 胺 培 南 西 司 他 丁, 有 指 征 可 应 用 美 罗 培 南 或 帕 尼 培 南 倍 他 米 隆 时, 仍 需 严 密 观 察 抽 搐 等 严 重 不 良 反 应 4. 肾 功 能 不 全 者 及 老 年 患 者 应 用 本 类 药 物 时 应 根 据 肾 功 能 减 退 程 度 减 量 用 药 5. 碳 青 霉 烯 类 抗 菌 药 物 与 丙 戊 酸 或 双 丙 戊 酸 联 合 应 用, 可 能 导 致 后 两 者 血 药 浓 度 低 于 治 疗 浓 度, 增 加 癫 痫 发 作 风 险, 因 此 不 推 荐 本 品 与 丙 戊 酸 或 双 丙 戊 酸 联 合 应 用 青 霉 烯 类 青 霉 烯 类 抗 菌 药 物 目 前 临 床 应 用 仅 有 口 服 品 种 法 罗 培 南 法 罗 培 南 对 链 球 菌 属 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌 流 感 嗜 血 杆 菌 卡 他 莫 拉 菌 和 大 肠 埃 希 菌 克 雷 伯 菌 属 等 多 数 肠 杆 菌 科 细 菌 具 有 良 好 抗 菌 活 性, 对 不 动 杆 菌 属 铜 绿 假 单 胞 菌 抗 菌 活 性 差, 对 拟 杆 菌 属 等 厌 氧 菌 亦 有 良 好 抗 菌 活 性 法 罗 培 南 对 超 广 谱 β- 内 酰 胺 酶 等 多 数 β- 内 酰 胺 酶 稳 定 适 应 证 适 用 于 敏 感 链 球 菌 属 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌 等 革 兰 阳 性 菌, 流 感 嗜 血 杆 菌 肠 杆 菌 科 细 菌 和 拟 杆 菌 属 等 厌 氧 菌 所 致 的 急 性 细 菌 性 鼻 窦 炎 慢 支 急 性 细 菌 性 感 染 加 重 社 区 获 得 性 肺 炎 以 及 单 纯 性 皮 肤 及 软 组 织 感 染 注 意 事 项 禁 用 于 对 青 霉 烯 类 药 物 过 敏 者 单 环 β- 内 酰 胺 类 单 环 β- 内 酰 胺 类 对 肠 杆 菌 科 细 菌 铜 绿 假 单 胞 菌 等 需 氧 革 兰 阴 性 菌 具 有 良 好 抗 菌 活 性, 对 需 氧 革 兰 阳 性 菌 和 厌 氧 菌 无 抗 菌 活 性 该 类 药 物 具 有 肾 毒 性 低 免 疫 原 性 弱 以 及 与 青 霉 素 类 头 孢 菌 素 类 交 叉 过 敏 少 等 特 点 现 有 品 种 为 氨 曲 南 适 应 证 适 用 于 敏 感 需 氧 革 兰 阴 性 菌 所 致 尿 路 感 染 下 呼 吸 道 感 染 血 流 感 染 腹 腔 感 染 盆 腔 感 染 和 皮 肤 软 组 织 感 染 用 于 治 疗 腹 腔 和 盆 腔 感 染 时 需 与 甲 硝 唑 等 抗 厌 氧 菌 药 物 合 用, 用 于 病 原 菌 未 查 明 患 者 的 经 验 治 疗 时 宜 联 合 抗 革 兰 阳 性 菌 药 物 本 品 尚 可 与 其 他 药 物 联 合 治 疗 产 金 属 β- 内 酰 胺 酶 革 兰 阴 性 菌 感 染, 但 应 注 意 细 菌 可 能 同 时 产 水 解 氨 曲 南 的 β- 内 酰 胺 酶 可 用 于 替 代 氨 基 糖 苷 类 药 物 与 其 他 抗 菌 药 物 联 合 治 疗 肾 功 能 损 害 患 者 的 需 氧 革 兰 阴 性 菌 感 染 ; 并 可 在 密 切 观 察 情 况 下 用 于 对 青 霉 素 类 头 孢 菌 素 类 过 敏 的 患 者 注 意 事 项 禁 用 于 对 氨 曲 南 过 敏 的 患 者 氧 头 孢 烯 类 氧 头 孢 烯 类 对 肠 杆 菌 科 细 菌 流 感 嗜 血 杆 5

10 临 床 指 南 菌 脑 膜 炎 奈 瑟 菌 链 球 菌 属 甲 氧 西 林 敏 感 葡 萄 球 菌 和 拟 杆 菌 属 等 厌 氧 菌 具 有 良 好 抗 菌 活 性, 但 对 铜 绿 假 单 胞 菌 活 性 较 弱 现 有 品 种 为 拉 氧 头 孢 和 氟 氧 头 孢 适 应 证 适 用 于 敏 感 菌 所 致 的 血 流 感 染 细 菌 性 脑 膜 炎 下 呼 吸 道 感 染 腹 腔 感 染 盆 腔 感 染 和 尿 路 感 染 拉 氧 头 孢 有 N- 甲 基 四 氮 唑 侧 链, 可 导 致 凝 血 酶 原 缺 乏 血 小 板 减 少 和 功 能 障 碍 而 引 起 出 血, 并 可 出 现 戒 酒 硫 样 反 应, 很 大 程 度 限 制 了 其 临 床 应 用 氟 氧 头 孢 无 N- 甲 基 四 氮 唑 侧 链, 未 发 现 致 凝 血 功 能 障 碍 和 戒 酒 硫 样 反 应 注 意 事 项 本 类 药 物 禁 用 于 对 氧 头 孢 烯 类 药 物 过 敏 的 患 者, 对 头 孢 菌 素 类 药 物 过 敏 者 慎 用 应 用 拉 氧 头 孢 期 间 应 每 日 补 充 维 生 素 K 以 减 少 凝 血 功 能 障 碍 和 出 血 等 不 良 反 应, 并 应 在 治 疗 期 间 及 治 疗 结 束 后 1 周 内 禁 酒 氨 基 糖 苷 类 临 床 常 用 的 氨 基 糖 苷 类 抗 菌 药 物 主 要 有 : (1) 对 肠 杆 菌 科 和 葡 萄 球 菌 属 细 菌 有 良 好 抗 菌 作 用, 但 对 铜 绿 假 单 胞 菌 无 作 用 者, 如 链 霉 素 卡 那 霉 素 等 其 中 链 霉 素 对 葡 萄 球 菌 等 革 兰 阳 性 球 菌 作 用 差, 但 对 结 核 分 枝 杆 菌 有 强 大 作 用 (2) 对 肠 杆 菌 科 细 菌 和 铜 绿 假 单 胞 菌 等 革 兰 阴 性 杆 菌 具 强 大 抗 菌 活 性, 对 葡 萄 球 菌 属 亦 有 良 好 作 用 者, 如 庆 大 霉 素 妥 布 霉 素 奈 替 米 星 阿 米 卡 星 异 帕 米 星 小 诺 米 星 依 替 米 星 (3) 抗 菌 谱 与 卡 那 霉 素 相 似, 由 于 毒 性 较 大, 现 仅 供 口 服 或 局 部 应 用 者 有 新 霉 素 与 巴 龙 霉 素, 后 者 对 阿 米 巴 原 虫 和 隐 孢 子 虫 有 较 好 作 用 此 外 尚 有 大 观 霉 素, 用 于 单 纯 性 淋 病 的 治 疗 所 有 氨 基 糖 苷 类 药 物 对 肺 炎 链 球 菌 A 组 溶 血 性 链 球 菌 的 抗 菌 作 用 均 差 本 类 药 物 为 浓 度 依 赖 性 杀 菌 剂 适 应 证 1. 中 重 度 肠 杆 菌 科 细 菌 等 革 兰 阴 性 杆 菌 感 染 2. 中 重 度 铜 绿 假 单 胞 菌 感 染 治 疗 此 类 感 染 常 需 与 具 有 抗 铜 绿 假 单 胞 菌 作 用 的 β- 内 酰 胺 类 或 其 他 抗 菌 药 物 联 合 应 用 3. 治 疗 严 重 葡 萄 球 菌 属 肠 球 菌 属 或 鲍 曼 不 动 杆 菌 感 染 的 联 合 用 药 之 一 ( 非 首 选 ) 4. 链 霉 素 或 庆 大 霉 素 亦 可 用 于 土 拉 菌 病 鼠 疫 及 布 鲁 菌 病, 后 者 的 治 疗 需 与 其 他 抗 菌 药 物 联 合 应 用 5. 链 霉 素 阿 米 卡 星 和 卡 那 霉 素 可 用 于 结 核 病 联 合 疗 法 6. 口 服 新 霉 素 可 用 于 结 肠 手 术 前 准 备, 或 局 部 用 药 7. 巴 龙 霉 素 可 用 于 肠 道 隐 孢 子 虫 病 8. 大 观 霉 素 仅 适 用 于 单 纯 性 淋 病 注 意 事 项 1. 对 氨 基 糖 苷 类 过 敏 的 患 者 禁 用 2. 氨 基 糖 苷 类 的 任 何 品 种 均 具 肾 毒 性 耳 毒 性 ( 耳 蜗 前 庭 ) 和 神 经 肌 肉 阻 滞 作 用, 因 此 用 药 期 间 应 监 测 肾 功 能 ( 尿 常 规 血 尿 素 氮 血 肌 酐 ), 严 密 观 察 患 者 听 力 及 前 庭 功 能, 注 意 观 察 神 经 肌 肉 阻 滞 症 状 一 旦 出 现 上 述 不 良 反 应 先 兆 时, 须 及 时 停 药 需 注 意 局 部 用 药 时 亦 有 可 能 发 生 上 述 不 良 反 应 3. 氨 基 糖 苷 类 抗 菌 药 物 对 社 区 获 得 上 下 呼 吸 道 感 染 的 主 要 病 原 菌 肺 炎 链 球 菌 A 组 溶 血 性 链 球 菌 抗 菌 作 用 差, 又 有 明 显 的 耳 肾 毒 性, 因 此 对 门 急 诊 中 常 见 的 上 下 呼 吸 道 细 菌 性 感 染 不 宜 选 用 本 类 药 物 治 疗 由 于 其 耳 肾 毒 性 反 应, 本 类 药 物 也 不 宜 用 于 单 纯 性 上 下 尿 路 感 染 初 发 病 例 的 治 疗 4. 肾 功 能 减 退 患 者 应 用 本 类 药 物 时, 需 根 据 其 肾 功 能 减 退 程 度 减 量 给 药, 并 应 进 行 血 药 浓 度 监 测, 调 整 给 药 方 案, 实 现 个 体 化 给 药 5. 新 生 儿 应 尽 量 避 免 使 用 本 类 药 物 确 有 应 用 指 征 时, 应 进 行 血 药 浓 度 监 测, 根 据 监 测 6

11 临 床 指 南 结 果 调 整 给 药 方 案 婴 幼 儿 老 年 患 者 应 慎 用 该 类 药 物, 如 确 有 应 用 指 征, 有 条 件 亦 应 进 行 血 药 浓 度 监 测 6. 妊 娠 期 患 者 应 避 免 使 用 哺 乳 期 患 者 应 避 免 使 用 或 用 药 期 间 停 止 哺 乳 7. 本 类 药 物 不 宜 与 其 他 肾 毒 性 药 物 耳 毒 性 药 物 神 经 肌 肉 阻 滞 剂 或 强 利 尿 剂 同 用 与 注 射 用 第 一 代 头 孢 菌 素 类 合 用 时 可 能 增 加 肾 毒 性 8. 本 类 药 物 不 可 用 于 眼 内 或 结 膜 下 给 药, 因 可 能 引 起 黄 斑 坏 死 四 环 素 类 四 环 素 类 抗 菌 药 物 包 括 四 环 素 金 霉 素 土 霉 素 及 半 合 成 四 环 素 类 多 西 环 素 美 他 环 素 和 米 诺 环 素 四 环 素 类 具 广 谱 抗 菌 活 性, 对 葡 萄 球 菌 属 链 球 菌 属 肠 杆 菌 科 ( 大 肠 埃 希 菌 克 雷 伯 菌 属 ) 不 动 杆 菌 属 嗜 麦 芽 窄 食 单 胞 菌 等 具 有 抗 菌 活 性, 且 对 布 鲁 菌 属 具 有 良 好 抗 菌 活 性 适 应 证 1. 四 环 素 类 作 为 首 选 或 可 选 药 物 用 于 下 列 疾 病 的 治 疗 :(1) 立 克 次 体 病, 包 括 流 行 性 斑 疹 伤 寒 地 方 性 斑 疹 伤 寒 洛 矶 山 热 恙 虫 病 柯 氏 立 克 次 体 肺 炎 和 Q 热 ;(2) 支 原 体 感 染 如 支 原 体 肺 炎 解 脲 脲 原 体 所 致 的 尿 道 炎 等 ;(3) 衣 原 体 属 感 染, 包 括 肺 炎 衣 原 体 肺 炎 鹦 鹉 热 性 病 淋 巴 肉 芽 肿 宫 颈 炎 及 沙 眼 衣 原 体 感 染 等 ;(4) 回 归 热 螺 旋 体 所 致 的 回 归 热 ;(5) 布 鲁 菌 病 ( 需 与 氨 基 糖 苷 类 联 合 应 用 );(6) 霍 乱 ;(7) 土 拉 弗 朗 西 斯 杆 菌 所 致 的 兔 热 病 ;(8) 鼠 疫 耶 尔 森 菌 所 致 的 鼠 疫 2. 四 环 素 类 亦 可 用 于 对 青 霉 素 类 抗 菌 药 物 过 敏 患 者 的 破 伤 风 气 性 坏 疽 雅 司 梅 毒 淋 病 和 钩 端 螺 旋 体 病 的 治 疗 3. 也 可 用 于 炎 症 反 应 显 著 的 痤 疮 治 疗 4. 近 年 来, 鲍 曼 不 动 杆 菌 对 各 类 抗 菌 药 的 耐 药 性 高, 治 疗 困 难, 米 诺 环 素 可 作 为 治 疗 多 重 耐 药 鲍 曼 不 动 杆 菌 感 染 的 联 合 用 药 之 一 注 意 事 项 1. 禁 用 于 对 四 环 素 类 过 敏 的 患 者 2. 牙 齿 发 育 期 患 者 ( 胚 胎 期 至 8 岁 ) 使 用 四 环 素 类 可 产 生 牙 齿 着 色 及 牙 釉 质 发 育 不 良, 故 妊 娠 期 和 8 岁 以 下 患 者 不 可 使 用 该 类 药 物 3. 哺 乳 期 患 者 应 避 免 应 用 或 用 药 期 间 暂 停 哺 乳 4. 四 环 素 类 可 加 重 氮 质 血 症, 已 有 肾 功 能 损 害 者 应 避 免 应 用 四 环 素, 但 多 西 环 素 及 米 诺 环 素 仍 可 谨 慎 应 用 5. 四 环 素 类 可 致 肝 损 害, 肝 病 患 者 不 宜 应 用, 确 有 指 征 使 用 者 减 少 剂 量 甘 氨 酰 环 素 类 替 加 环 素 为 甘 氨 酰 环 素 类 抗 菌 药 物, 通 过 抑 制 细 菌 蛋 白 质 合 成 发 挥 抗 菌 作 用 替 加 环 素 对 葡 萄 球 菌 属 ( 甲 氧 西 林 敏 感 及 耐 药 株 ) 糖 肽 类 中 介 金 黄 色 葡 萄 球 菌 粪 肠 球 菌 屎 肠 球 菌 和 链 球 菌 属 具 高 度 抗 菌 活 性 棒 状 杆 菌 乳 酸 杆 菌 明 串 珠 菌 属 单 核 细 胞 增 生 李 斯 特 菌 等 其 它 革 兰 阳 性 菌 也 对 替 加 环 素 敏 感 对 大 肠 埃 希 菌 肺 炎 克 雷 伯 菌 等 肠 杆 菌 科 细 菌 具 有 良 好 的 抗 菌 作 用, 对 鲍 曼 不 动 杆 菌 嗜 麦 芽 窄 食 单 胞 菌 体 外 具 抗 菌 活 性, 但 铜 绿 假 单 胞 菌 和 变 形 杆 菌 属 对 其 耐 药 对 碳 青 霉 烯 类 耐 药 肠 杆 菌 科 细 菌 和 不 动 杆 菌 具 有 良 好 抗 菌 活 性 对 于 拟 杆 菌 属 产 气 荚 膜 梭 菌 以 及 微 小 消 化 链 球 菌 等 厌 氧 菌 有 较 好 作 用 对 支 原 体 属 快 速 生 长 分 枝 杆 菌 亦 具 良 好 抗 菌 活 性 适 应 证 本 品 适 用 于 18 岁 以 上 患 者 由 敏 感 菌 所 致 各 类 感 染 的 治 疗 1. 肠 杆 菌 科 细 菌 粪 肠 球 菌 ( 仅 限 于 万 古 霉 素 敏 感 菌 株 ) 金 黄 色 葡 萄 球 菌 ( 包 括 MRSA) 咽 颊 炎 链 球 菌 族 拟 杆 菌 属 产 气 荚 膜 梭 菌 和 微 小 消 化 链 球 菌 等 所 致 复 杂 性 腹 腔 感 染 2. 大 肠 埃 希 菌 粪 肠 球 菌 ( 仅 限 于 万 古 霉 素 7

12 临 床 指 南 敏 感 菌 株 ) 金 黄 色 葡 萄 球 菌 ( 包 括 MRSA) B 组 链 球 菌 咽 颊 炎 链 球 菌 族 A 组 溶 血 性 链 球 菌 以 及 脆 弱 拟 杆 菌 所 致 复 杂 性 皮 肤 和 软 组 织 感 染 3. 青 霉 素 敏 感 肺 炎 链 球 菌 ( 包 括 合 并 菌 血 症 者 ) 流 感 嗜 血 杆 菌 (β- 内 酰 胺 酶 阴 性 株 ) 以 及 嗜 肺 军 团 菌 所 致 社 区 获 得 性 肺 炎 注 意 事 项 1. 对 替 加 环 素 过 敏 者 禁 用, 对 四 环 素 类 抗 菌 药 物 过 敏 的 患 者 慎 用 2. 轻 至 中 度 肝 功 能 损 害 患 者 无 需 调 整 剂 量, 重 度 肝 功 能 损 害 患 者 慎 用 替 加 环 素, 必 须 使 用 时 首 剂 剂 量 不 变, 维 持 剂 量 减 半, 并 密 切 监 测 肝 功 能 3. 使 用 替 加 环 素 后 怀 疑 引 发 胰 腺 炎 者 应 停 药 4. 本 品 属 美 国 FDA 妊 娠 期 用 药 D 类, 孕 妇 患 者 避 免 应 用 5.18 岁 以 下 患 者 不 推 荐 使 用 本 品 6. 替 加 环 素 能 轻 度 降 低 地 高 辛 的 血 药 浓 度, 可 能 使 华 法 林 血 药 浓 度 增 高, 导 致 口 服 避 孕 药 作 用 降 低 氯 霉 素 近 年 来 由 于 常 见 病 原 菌 对 氯 霉 素 的 耐 药 性 增 加 及 其 骨 髓 抑 制 等 严 重 不 良 反 应, 氯 霉 素 在 国 内 外 的 应 用 普 遍 减 少 但 氯 霉 素 具 良 好 组 织 体 液 穿 透 性, 易 透 过 血 - 脑 血 - 眼 屏 障, 并 对 伤 寒 沙 门 菌 立 克 次 体 等 细 胞 内 病 原 菌 有 效, 仍 有 一 定 临 床 应 用 指 征 适 应 证 1. 细 菌 性 脑 膜 炎 和 脑 脓 肿 : 氯 霉 素 可 用 于 氨 苄 西 林 耐 药 流 感 嗜 血 杆 菌 脑 膜 炎 奈 瑟 菌 及 肺 炎 链 球 菌 所 致 的 脑 膜 炎 青 霉 素 与 氯 霉 素 合 用 可 用 于 需 氧 菌 与 厌 氧 菌 混 合 感 染 引 起 的 耳 源 性 脑 脓 肿 2. 伤 寒 : 成 人 伤 寒 沙 门 菌 感 染 的 治 疗 以 氟 喹 诺 酮 类 为 首 选, 氯 霉 素 仍 可 用 于 敏 感 伤 寒 沙 门 菌 所 致 伤 寒 的 治 疗 3. 厌 氧 菌 感 染 : 氯 霉 素 对 脆 弱 拟 杆 菌 具 较 强 抗 菌 活 性, 可 与 其 他 抗 菌 药 物 联 合 用 于 需 氧 菌 与 厌 氧 菌 所 致 的 腹 腔 和 盆 腔 感 染 4. 其 他 : 氯 霉 素 对 Q 热 等 立 克 次 体 感 染 的 疗 效 与 四 环 素 相 仿 注 意 事 项 1. 对 氯 霉 素 有 过 敏 史 的 患 者 禁 用 本 药 2. 用 药 期 间 定 期 监 测 周 围 血 象, 如 外 周 血 细 胞 显 著 降 低, 应 及 时 停 药, 并 作 相 应 处 理 避 免 长 疗 程 用 药 3. 禁 止 与 其 他 骨 髓 抑 制 药 物 合 用 4. 妊 娠 期 患 者 避 免 应 用 哺 乳 期 患 者 避 免 应 用 或 用 药 期 间 暂 停 哺 乳 5. 早 产 儿 新 生 儿 应 用 本 药 后 可 发 生 灰 婴 综 合 征, 应 避 免 使 用 氯 霉 素 婴 幼 儿 患 者 必 须 应 用 本 药 时 需 进 行 血 药 浓 度 监 测 6. 肝 功 能 减 退 患 者 避 免 应 用 本 药 大 环 内 酯 类 大 环 内 酯 类 有 红 霉 素 麦 迪 霉 素 乙 酰 麦 迪 霉 素 螺 旋 霉 素 乙 酰 螺 旋 霉 素 交 沙 霉 素 柱 晶 白 霉 素 等 沿 用 大 环 内 酯 类 和 阿 奇 霉 素 克 拉 霉 素 罗 红 霉 素 等 新 大 环 内 酯 类 该 类 药 物 对 革 兰 阳 性 菌 厌 氧 菌 支 原 体 及 衣 原 体 等 具 抗 菌 活 性 阿 奇 霉 素 克 拉 霉 素 罗 红 霉 素 等 对 流 感 嗜 血 杆 菌 肺 炎 支 原 体 或 肺 炎 衣 原 体 等 的 抗 微 生 物 活 性 增 强 口 服 生 物 利 用 度 提 高 给 药 剂 量 减 小 不 良 反 应 亦 较 少 临 床 适 应 证 有 所 扩 大 适 应 证 1. 红 霉 素 ( 含 琥 乙 红 霉 素 依 托 红 霉 素 乳 糖 酸 红 霉 素 ) 等 沿 用 大 环 内 酯 类 : (1) 作 为 青 霉 素 过 敏 患 者 的 替 代 药 物, 用 于 以 下 感 染 :1A 组 溶 血 性 链 球 菌 肺 炎 链 球 菌 敏 感 株 所 致 的 咽 炎, 扁 桃 体 炎, 鼻 窦 炎, 中 耳 炎 及 轻 中 度 肺 炎 ;2 敏 感 溶 血 性 链 球 菌 引 起 的 猩 红 热 及 蜂 窝 织 炎 ;3 白 喉 及 白 喉 带 菌 者 ;4 8

13 临 床 指 南 气 性 坏 疽 ;5 梅 毒 李 斯 特 菌 病 ;6 心 脏 病 及 风 湿 热 患 者 预 防 细 菌 性 心 内 膜 炎 和 风 湿 热 (2) 军 团 菌 病 (3) 衣 原 体 属 支 原 体 属 等 所 致 的 呼 吸 道 及 泌 尿 生 殖 系 统 感 染 (4) 其 他 : 口 腔 感 染 空 肠 弯 曲 菌 肠 炎 百 日 咳 等 麦 迪 霉 素 乙 酰 麦 迪 霉 素 螺 旋 霉 素 乙 酰 螺 旋 霉 素 及 交 沙 霉 素, 主 要 用 于 革 兰 阳 性 菌 所 致 呼 吸 道 皮 肤 及 软 组 织 眼 耳 鼻 喉 及 口 腔 等 感 染 的 轻 症 患 者 2. 新 大 环 内 酯 类 : 除 上 述 适 应 证 外, 阿 奇 霉 素 克 拉 霉 素 尚 可 用 于 流 感 嗜 血 杆 菌 卡 他 莫 拉 菌 所 致 的 社 区 获 得 性 呼 吸 道 感 染, 与 其 他 抗 菌 药 物 联 合 用 于 鸟 分 枝 杆 菌 复 合 群 感 染 的 治 疗 及 预 防 克 拉 霉 素 与 其 他 药 物 联 合, 可 用 于 治 疗 幽 门 螺 杆 菌 感 染 注 意 事 项 1. 禁 用 于 对 红 霉 素 及 其 他 大 环 内 酯 类 过 敏 的 患 者 2. 红 霉 素 及 克 拉 霉 素 禁 止 与 特 非 那 丁 合 用, 以 免 引 起 心 脏 不 良 反 应 3. 肝 功 能 损 害 患 者 如 有 指 征 应 用 时, 需 适 当 减 量 并 定 期 复 查 肝 功 能 4. 肝 病 患 者 和 妊 娠 期 患 者 不 宜 应 用 红 霉 素 酯 化 物 5. 妊 娠 期 患 者 有 明 确 指 征 用 克 拉 霉 素 时, 应 充 分 权 衡 利 弊, 决 定 是 否 采 用 哺 乳 期 患 者 用 药 期 间 应 暂 停 哺 乳 6. 注 射 用 乳 糖 酸 红 霉 素 使 用 时 必 须 首 先 以 注 射 用 水 完 全 溶 解, 加 入 生 理 盐 水 或 5% 葡 萄 糖 溶 液 中, 药 物 浓 度 不 宜 超 过 0.1%~0.5%, 缓 慢 静 脉 滴 注 林 可 酰 胺 类 林 可 酰 胺 类 有 林 可 霉 素 及 克 林 霉 素, 克 林 霉 素 的 体 外 抗 菌 活 性 优 于 林 可 霉 素, 临 床 使 用 克 林 霉 素 明 显 多 于 林 可 霉 素 该 类 药 物 对 革 兰 阳 性 菌 及 厌 氧 菌 具 良 好 抗 菌 活 性, 目 前 肺 炎 链 球 菌 等 细 菌 对 其 耐 药 性 高 适 应 证 克 林 霉 素 及 林 可 霉 素 适 用 于 敏 感 厌 氧 菌 及 需 氧 菌 ( 肺 炎 链 球 菌 A 组 溶 血 性 链 球 菌 及 金 黄 色 葡 萄 球 菌 等 ) 所 致 的 下 列 感 染 :1 下 呼 吸 道 感 染 包 括 肺 炎 脓 胸 及 肺 脓 肿 ;2 皮 肤 及 软 组 织 感 染 ;3 妇 产 科 感 染 如 子 宫 内 膜 炎 非 淋 球 菌 性 卵 巢 输 卵 管 脓 肿 盆 腔 炎 阴 道 侧 切 术 后 感 染 ;4 腹 腔 感 染 如 腹 膜 炎 腹 腔 脓 肿, 妇 产 科 及 腹 腔 感 染 需 同 时 与 抗 需 氧 革 兰 阴 性 菌 药 物 联 合 应 用 ;5 静 脉 制 剂 可 用 于 上 述 感 染 中 的 较 重 症 患 者, 也 可 用 于 血 流 感 染 及 骨 髓 炎 注 意 事 项 1. 禁 用 于 对 林 可 霉 素 或 克 林 霉 素 过 敏 患 者 2. 使 用 本 类 药 物 时, 应 注 意 抗 生 素 相 关 腹 泻 和 假 膜 性 肠 炎 的 发 生, 如 有 可 疑 应 及 时 停 药 3. 本 类 药 物 有 神 经 肌 肉 阻 滞 作 用, 应 避 免 与 其 他 神 经 肌 肉 阻 滞 剂 合 用 4. 前 列 腺 增 生 老 年 男 性 患 者 使 用 剂 量 较 大 时, 偶 可 出 现 尿 潴 留 5. 不 推 荐 用 于 新 生 儿 6. 妊 娠 期 患 者 确 有 指 征 时 慎 用 哺 乳 期 患 者 用 药 期 间 应 暂 停 哺 乳 7. 肝 功 能 损 害 患 者 尽 量 避 免 使 用 该 类 药 物, 确 有 应 用 指 征 时 宜 减 量 应 用 8. 肾 功 能 损 害 患 者, 林 可 霉 素 需 减 量 ; 严 重 肾 功 能 损 害 时, 克 林 霉 素 也 需 调 整 剂 量 9. 静 脉 制 剂 应 缓 慢 滴 注, 不 可 静 脉 推 注 9

14 抗 菌 药 物 合 理 应 用 贵 州 省 人 民 医 院 2016 年 第 一 季 度 临 床 常 见 细 菌 及 多 重 耐 药 菌 监 测 报 告 医 院 感 染 管 理 科 细 菌 中 心 实 验 室 一 2016 年 第 一 季 度 临 床 标 本 病 原 体 培 养 情 况 :2015 年 12 月 21 日 至 2016 年 03 月 20 日 期 间, 通 过 院 感 实 时 监 控 系 统 监 测 统 计 常 见 细 菌 与 真 菌, 共 分 离 1993 株 ( 去 除 重 复 菌 株 ), 其 中 革 兰 阴 性 杆 菌 911 株 (51.50%), 革 兰 阳 性 菌 为 691 株 (39.06%), 真 菌 167 株 (9.44%) 前 十 位 的 病 原 体 分 别 为 大 肠 埃 希 氏 菌 283 株 金 黄 色 葡 萄 球 菌 181 株 肺 炎 链 球 菌 150 株 肺 炎 克 雷 伯 氏 菌 128 株 白 色 假 丝 酵 母 菌 113 株 鲍 曼 不 动 杆 菌 104 株 流 感 嗜 血 杆 菌 86 株 铜 绿 假 单 胞 菌 71 株 屎 肠 球 菌 65 株 粪 肠 球 菌 55 株, 构 成 依 次 为 16.00% 10.23% 8.48% 7.24% 表 年 第 一 季 度 临 床 标 本 病 原 体 分 离 培 养 情 况 病 原 体 革 兰 氏 阴 性 菌 大 肠 埃 希 菌 肺 炎 克 雷 伯 菌 流 感 嗜 血 杆 菌 鲍 曼 不 动 杆 菌 铜 绿 假 单 胞 菌 阴 沟 肠 杆 菌 卡 他 布 兰 汉 菌 嗜 麦 芽 窄 食 单 胞 菌 产 酸 克 雷 伯 氏 菌 其 它 阴 性 杆 菌 革 兰 氏 阳 性 菌 金 黄 色 葡 萄 球 菌 肺 炎 链 球 菌 屎 肠 球 菌 粪 肠 球 菌 凝 固 酶 阴 性 葡 萄 球 菌 其 他 阳 性 球 菌 真 菌 白 色 假 丝 酵 母 热 带 假 丝 酵 母 克 柔 假 丝 酵 母 其 他 真 菌 株 数 百 分 比 (%)

15 抗 菌 药 物 合 理 应 用 6.39% 5.88% 4.86% 4.01% 3.67% 3.11% 2.25% 详 见 表 1 二 2016 年 第 一 季 度 临 床 标 本 中 主 要 革 兰 阴 性 细 菌 分 离 情 况 ( 包 括 医 院 获 得 性 (HA-) 社 区 获 得 性 (CA-)) 2016 年 第 一 季 度 分 离 培 养 出 革 兰 氏 阴 性 菌 911 株 前 六 位 为 大 肠 埃 希 氏 菌 283 株 肺 炎 克 雷 伯 氏 菌 128 株 鲍 曼 不 动 杆 菌 104 株 流 感 嗜 血 杆 菌 86 株 铜 绿 假 单 胞 菌 71 株 阴 沟 肠 杆 菌 43 株, 构 成 依 次 为 16.00% 7.24% 5.88% 4.86% 4.01% 3.67% 2.43% 耐 药 率 见 统 计 表 2 表 2 主 要 革 兰 氏 阴 性 细 菌 对 抗 菌 药 物 的 耐 药 率 (%) 主 要 革 兰 氏 阴 性 菌 抗 菌 药 物 大 肠 埃 希 氏 菌 n=283 肺 炎 克 雷 伯 氏 菌 n=128 鲍 曼 氏 不 动 杆 菌 n=104 铜 绿 假 单 胞 菌 n=71 流 感 嗜 血 杆 菌 n=86 阴 沟 肠 杆 菌 n=43 美 洛 培 南 亚 胺 培 南 氨 苄 西 林 哌 拉 西 林 头 孢 唑 啉 头 孢 克 洛 头 孢 呋 辛 7.06 头 孢 曲 松 头 孢 他 啶 头 孢 噻 肟 头 孢 吡 肟 哌 拉 西 林 他 唑 巴 坦 阿 莫 西 林 克 拉 维 酸 氨 苄 西 林 舒 巴 坦 头 孢 哌 酮 舒 巴 坦 氨 曲 南 庆 大 霉 素 阿 米 卡 星 氯 霉 素 左 氧 氟 沙 星 环 丙 沙 星 复 方 新 诺 明 四 环 素 米 诺 环 素 替 加 环 素 阿 奇 霉 素 多 粘 菌 素 B 注 : 提 示 细 菌 对 抗 菌 药 物 天 然 耐 药, 表 示 未 进 行 该 抗 菌 药 物 检 测 11

16 抗 菌 药 物 合 理 应 用 三 2016 第 一 季 度 临 床 标 本 中 主 要 革 兰 阳 性 球 菌 分 离 情 况 ( 包 括 HA-CA-) 2016 第 一 季 度 临 床 标 本 检 出 革 兰 阳 性 球 菌 为 691 株, 前 4 位 为 金 黄 色 葡 萄 球 菌 181 株 肺 炎 链 球 菌 150 株 屎 肠 球 菌 65 株 粪 肠 球 菌 55 株, 构 成 比 依 次 为 :10.23% 8.48% 3.67% 3.11% 耐 药 率 见 统 计 表 3 四 2016 年 第 一 季 度 临 床 标 本 中 主 要 真 表 3 主 要 革 兰 氏 阳 性 细 菌 对 抗 菌 药 物 的 耐 药 率 主 要 革 兰 氏 阳 性 菌 抗 菌 药 物 金 黄 色 葡 萄 球 菌 n=181 肺 炎 链 球 菌 n=150 屎 肠 球 菌 n=65 粪 肠 球 菌 n=55 青 霉 素 氨 苄 西 林 苯 唑 青 霉 素 头 孢 西 丁 庆 大 霉 素 庆 大 霉 素 ( 高 浓 度 ) 环 丙 沙 星 左 氧 氟 沙 星 四 环 素 替 加 环 素 克 林 霉 素 红 霉 素 利 福 平 复 方 新 诺 明 替 考 拉 宁 7.32 万 古 霉 素 利 奈 唑 胺 呋 喃 妥 因 磷 霉 素 头 孢 曲 松 2.03 头 孢 噻 肟 0.67 注 :1. 当 葡 萄 球 菌 对 苯 唑 青 霉 素 或 头 孢 西 丁 耐 药 时, 为 耐 甲 氧 西 林 的 葡 萄 球 菌, 对 所 有 β- 内 酰 类 药 物 耐 药 2. 屎 肠 球 菌 粪 肠 球 菌 对 高 浓 度 庆 大 霉 素 敏 感 时, 敏 感 的 青 霉 素 类 药 物 或 万 古 霉 素 可 以 和 氨 基 糖 苷 类 药 物 联 合 用 药 否 则, 不 能 联 合 用 药 3. 呋 喃 妥 因 只 统 计 尿 液 标 本 4. 提 示 细 菌 对 抗 菌 药 物 天 然 耐 药, 表 示 未 进 行 该 抗 菌 药 物 检 测 12

17 抗 菌 药 物 合 理 应 用 菌 分 离 情 况 本 季 度 主 要 分 离 培 养 的 真 菌 共 计 167 株 主 要 分 离 培 养 药 敏 的 真 菌 为 : 白 色 假 丝 酵 母 菌 113 株, 构 成 比 分 别 为 6.39% 真 菌 耐 药 率 见 统 计 表 4 五 2016 年 第 一 季 度 临 床 送 检 标 本 多 重 耐 药 菌 目 标 性 监 测 分 离 情 况 ( 包 括 CA-\HA-\ 定 植 菌 ) 本 季 度 临 床 标 本 多 重 耐 药 菌 目 标 性 监 测 绝 对 分 离 株 为 198 株, 包 括 耐 甲 氧 西 林 金 黄 色 葡 萄 球 菌 (MRSA)79 株 耐 碳 青 霉 烯 类 鲍 曼 不 动 杆 菌 (CR-AB)53 株 多 重 耐 药 铜 绿 假 单 胞 菌 (MDR-PA)45 株 耐 碳 青 霉 烯 类 肠 杆 菌 科 细 菌 (CRE)19 株 耐 万 古 霉 素 肠 球 菌 (VRE)2 株, 详 见 下 表 5 表 4 抗 菌 药 物 氟 康 唑 伊 曲 康 唑 伏 立 康 唑 氟 胞 嘧 啶 两 性 霉 素 B 主 要 真 菌 对 抗 菌 药 物 的 耐 药 率 白 假 丝 酵 母 菌 (n=167) 表 5 多 重 耐 药 菌 构 成 比 (HA-CA- 定 植 菌 ) 细 菌 名 称 MRSA 金 黄 色 葡 萄 球 菌 VRE 肠 球 菌 CRAB 鲍 曼 不 动 杆 菌 MDR-PA 铜 绿 假 单 胞 菌 CRE 肠 杆 菌 科 绝 对 分 离 株 数 多 重 耐 药 菌 构 成 比 43.65% 1.67% 50.96% 63.38% 3.30% 注 :1. 多 重 耐 药 菌 构 成 比 指 的 是 某 种 多 重 耐 药 菌 占 同 种 细 菌 的 比 例 2.CA- 表 示 社 区 获 得 性,HA- 表 示 医 院 获 得 性 13

18 抗 菌 药 物 合 理 应 用 2015 年 全 国 细 菌 耐 药 监 测 报 告 国 家 卫 生 计 生 委 合 理 用 药 专 家 委 员 会 全 国 细 菌 耐 药 监 测 网 2015 年 全 国 细 菌 耐 药 监 测 网 (CARSS) 成 员 单 位 共 有 1427 所 医 院, 其 中 上 报 数 据 医 院 共 1338 所 上 报 数 据 的 成 员 单 位 中 二 级 医 院 359 所, 三 级 医 院 979 所 ; 经 过 数 据 审 核, 纳 入 数 据 分 析 的 医 院 共 有 1143 所, 其 中 二 级 医 院 272 所, 占 纳 入 数 据 分 析 医 院 总 数 的 23.8%, 三 级 医 院 871 所, 占 76.2% 2015 年 度 监 测 时 限 为 2014 年 10 月 至 2015 年 9 月, 此 期 间 上 报 非 重 复 细 菌 总 数 为 株, 其 中 革 兰 阳 性 菌 株 ( 占 28.9%), 革 兰 阴 性 菌 株 ( 占 71.1%) 革 兰 阳 性 菌 排 前 五 位 的 是 : 金 黄 色 葡 萄 球 菌 株 ( 占 32.2%), 表 皮 葡 萄 球 菌 株 ( 占 12.8%), 粪 肠 球 菌 株 ( 占 9.7%), 肺 炎 链 球 菌 株 ( 占 9.3%) 和 屎 肠 球 菌 株 ( 占 8.9%) 革 兰 阴 性 菌 排 前 五 位 的 是 : 大 肠 埃 希 菌 株 ( 占 29.9%), 肺 炎 克 雷 伯 菌 株 ( 占 19.8%), 铜 绿 假 单 胞 菌 株 ( 占 12.9%), 鲍 曼 不 动 杆 菌 株 ( 占 10.7%), 阴 沟 肠 杆 菌 株 ( 占 4.3%) 位 居 前 三 位 标 本 来 源 的 分 别 为 痰 标 本 株 ( 占 41.4%) 尿 标 本 株 ( 占 15.6%) 和 血 标 本 株 ( 占 9.4%) 重 要 与 特 殊 耐 药 菌 检 出 率 根 据 CLSI2014 标 准 按 全 国 及 各 省 直 辖 市 及 自 治 区 进 行 分 析, 结 果 如 下 : 一 甲 氧 西 林 耐 药 金 黄 色 葡 萄 球 菌 检 出 率 甲 氧 西 林 耐 药 金 黄 色 葡 萄 球 菌 (MRSA) 全 国 检 出 率 为 35.8%, 各 省 MRSA 检 出 率 为 20.3%~47.0%, 其 中 上 海 市 最 高, 为 47.0%, 山 西 省 最 低, 为 20.3%( 图 1) 二 甲 氧 西 林 耐 药 凝 固 酶 阴 性 葡 萄 球 菌 检 出 率 14

19 抗菌药物合理应用 甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)全国检出率为 79.4% 各省 MRCNS 检出率为 66.1%~84.3% 其中新疆维吾尔族 自治区最高 为 84.3% 海南省最低 为 66.1% 图 2 四 屎肠球菌万古霉素耐药率 屎肠球菌对万古霉素耐药率处于较低水 平 全国为 2.9% 各省屎肠球菌万古霉素耐药 率为 0%~11.2% 其中北京市最高 为 11.2% 青海省最低 为 0% 图 4 三 粪肠球菌万古霉素耐药率 五 肺炎链球菌对青霉素耐药率 粪肠球菌对万古霉素耐药率较低 全国 按非脑膜炎 静脉 折点统计 肺炎链球 为 0.8% 各省粪肠球菌万古霉素耐药率为 0% 菌中青霉素耐药肺炎链球菌 PRSP 全国检 2.4% 青海省最低 为 0% 图 % 其中黑龙江省最高 为 15.0% 青海省 ~2.4% 均处于很低水平 其中甘肃省最高 为 出 率 为 4.2% 各 省 PRSP 检 出 率 为 0% ~ 15

20 抗菌药物合理应用 最低 为 0% 图 5 六 肺炎链球菌红霉素耐药率 肺炎链球菌对红霉素耐药率处于较高水 平 全国为 91.5% 各省肺炎链球菌红霉素耐 药 率 为 72.8% ~98.8% 其 中 江 苏 省 最 高 为 98.8% 甘肃省最低 为 72.8% 图 6 药物耐药 大肠埃希菌对第三代头孢菌素 的耐药率全国为 59.0% 各省大肠埃希菌对 第三代头孢菌素耐药率为 49.2%~71.9% 其 中 河 南 省 最 高 为 71.9% 青 海 省 最 低 为 49.2% 图 7 八 大肠埃希菌对碳青霉烯类耐药率 七 大肠埃希菌对第三代头孢菌素耐药率 大肠埃希菌对碳青霉烯类耐药是指对亚 在本报告中 大肠埃希菌对第三代头孢 胺 培 南 美 罗 培 南 或 厄 他 培 南 任 一 药 物 耐 菌素耐药是指对头孢曲松或头孢噻肟任一 药 大肠埃希菌对碳青霉烯类的耐药率全国 16

21 抗菌药物合理应用 为 1.9% 各省大肠埃希菌对碳青霉烯类耐药 率为 0.3%~5.7% 其中陕西省最高 为 5.7% 宁夏回族自治 区最低 为 0.3% 图 8 十 肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素耐 药率 在本报告中 肺炎克雷伯菌对第三代头 孢菌素耐药是指对头孢曲松或头孢噻肟任一 九 大肠埃希菌对喹诺酮类耐药率 药物耐药 肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素 在本报告中 大肠埃希菌对喹诺酮类耐 的耐药率全国为 36.5% 各省肺炎克雷伯菌对 药是指对左氧氟沙星或环丙沙星任一药物耐 药 大肠埃希菌对喹诺酮类的耐药率全国为 53.5% 各省大肠埃希菌对喹诺酮类耐药率为 43.8%~67.2% 其中辽宁省最高 为 67.2% 重 庆市最低 为 43.8% 图 9 第三代头孢菌素耐药率为 18.1%~54.9% 其 中河南省最高 为 54.9% 宁夏回族自治区最 低 为 18.1% 图 10 十一 肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类耐药率 肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类耐药是指 17

22 抗菌药物合理应用 对亚胺培南 美罗培南或厄他培南任一药物 耐药 肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类的耐药 率全国为 7.6% 各省肺炎克雷伯菌对碳青霉 烯 类 耐 药 率 为 0.5%~20.0% 其 中 上 海 市 最 12.6%~32.7% 其中北京市最高 为 32.7% 广 西壮族自治区最低 为 12.6% 图 12 十三 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药率 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药是指对 高 为 20.0% 宁夏回族自治区最低 为 0.5% 亚胺培南或美罗培南任一药物耐药 鲍曼不 十二 铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药率 各省鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药率为 铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药是指对 25.6%~82.1% 其中河南省最高 为 82.1% 天 图 11 亚胺培南或美罗培南任一药物耐药 铜绿假 单胞菌对碳青霉烯类的耐药率全国为 22.4% 各省铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药率为 18 动杆菌对碳青霉烯类的耐药率全国为 59.0% 津市最低 为 25.6% 图 13 十四 重要与特殊耐药病原菌检出率分析 比较四年来我国细菌耐药监测数据 亚

23 抗 菌 药 物 合 理 应 用 胺 培 南 耐 药 鲍 曼 不 动 杆 菌 (IMP-RAB)2015 年 检 出 率 为 58.0%, 与 2012 年 的 45.8% 相 比 上 升 幅 度 较 大, 比 2014 年 的 54.5% 的 检 出 率 亦 有 所 增 加, 亚 胺 培 南 耐 药 肺 炎 克 雷 伯 菌 (IMP- RKPN)2015 年 检 出 率 为 6.8%, 较 2014 年 的 4.8% 有 较 明 显 增 加, 应 引 起 重 视 ; 头 孢 噻 肟 耐 药 大 肠 埃 希 菌 (CTX-RECO)2015 年 检 出 率 为 60.3%, 与 2014 年 的 60.0% 相 比 无 明 显 变 化, 较 2012 年 和 2013 年 的 检 出 率 有 所 下 降 ; 其 他 各 种 耐 药 菌 如 亚 胺 培 南 耐 药 大 肠 埃 希 菌 (IMP-RECO) 甲 氧 西 林 耐 药 金 黄 色 葡 萄 球 菌 (MRSA) 万 古 霉 素 耐 药 屎 肠 球 菌 (VRE FM) 青 霉 素 耐 药 肺 炎 链 球 菌 (PRSP) 和 亚 胺 培 南 耐 药 铜 绿 假 单 胞 菌 (IMP-RPA) 的 检 出 率 相 对 稳 定 ( 图 14-1 和 图 14-2) 十 五 小 结 1 本 次 所 分 析 数 据 是 全 国 细 菌 耐 药 监 测 网 (CARSS) 自 2012 年 扩 大 成 员 单 位 后 第 四 年 所 收 集 的 信 息, 为 了 与 前 三 个 年 度 进 行 比 较, 且 在 统 计 和 分 析 方 法 上 保 持 一 致 性 和 可 比 性, 通 过 计 算 机 系 统 辅 助 处 理 等 综 合 措 施, 对 部 分 不 合 格 的 数 据 进 行 了 剔 除, 以 减 少 由 于 各 监 测 网 成 员 单 位 间 因 实 验 方 法 数 据 导 入 等 问 题 所 致 的 数 据 误 差 ; 2 重 要 及 特 殊 耐 药 菌 检 出 率 在 地 域 分 布 上 具 有 一 定 的 规 律, 各 种 耐 药 菌 检 出 率 排 名 前 三 位 省 份 中, 河 南 省 出 现 次 数 最 多, 之 后 是 辽 宁 省 北 京 市 上 海 市, 与 2014 年 相 比 没 有 变 化 排 名 后 三 位 的 省 份 中, 青 海 省 宁 夏 自 治 区 天 津 市 出 现 次 数 最 多, 亦 与 2014 年 相 同 3 近 年 来 国 际 上 普 遍 关 注 的 超 级 耐 药 菌 如 碳 青 霉 烯 耐 药 肺 炎 克 雷 伯 菌 检 出 率 有 所 增 加,2015 年 全 国 有 21 个 省 份 碳 青 霉 烯 耐 药 肺 炎 克 雷 伯 菌 检 出 率 较 2014 年 有 所 增 长, 不 同 省 份 间 差 别 较 大, 个 别 地 区 处 于 较 高 水 平 对 于 此 类 耐 药 菌 株, 应 重 点 加 以 监 测 并 采 取 相 关 措 施 予 以 控 制 19

24 原 创 论 文 心 肌 细 胞 培 养 方 法 改 良 及 抗 肿 瘤 药 物 心 肌 毒 性 评 价 1,2 李 黎, 申 秀 萍 2, 张 宗 鹏 2 2,, 刘 昌 孝 (1. 贵 州 省 人 民 医 院 药 剂 科, 贵 阳 ; 2. 天 津 药 物 研 究 院 天 津 市 新 药 安 全 评 价 研 究 中 心 天 津 ) 摘 要 : 目 的 : 改 良 心 肌 细 胞 培 养 方 法, 评 价 抗 肿 瘤 药 物 多 柔 比 星 (doxorubicin, DOX) 顺 铂 (cisplatinum,ddp) 和 氯 法 拉 滨 (clofarabine,clo) 的 心 肌 细 胞 毒 性 方 法 : 采 用 双 酶 依 次 消 化 法 充 分 分 离 心 脏 组 织 中 的 心 肌 细 胞, 优 化 差 速 贴 壁 法 进 行 细 胞 纯 化 的 时 长 为 20 min, 台 盼 蓝 染 色 法 检 测 细 胞 成 活 率, 免 疫 组 织 化 学 法 鉴 定 心 肌 细 胞 纯 度,MTS 法 分 别 测 定 多 柔 比 星 顺 铂 和 氯 法 拉 滨 对 心 肌 细 胞 的 毒 性 结 果 : 较 低 浓 度 的 多 柔 比 星 (0.17 μmol L - 1 ) 顺 铂 (17.50 μmol L - 1 ) 和 氯 法 拉 滨 (0.33 μmol L -1 ) 即 能 引 起 与 对 照 组 细 胞 存 在 显 著 性 差 异 (p<0.05), 三 种 药 物 对 心 肌 细 胞 的 半 数 抑 制 浓 度 IC 50 值 分 别 为 1.17 ± ± 2.05 和 ± μmol L -1 结 论 : 与 各 自 对 照 组 细 胞 相 比, 三 种 抗 肿 瘤 药 物 的 心 肌 细 胞 毒 性 呈 浓 度 依 赖 性 增 加, 且 心 肌 细 胞 在 药 物 暴 露 早 期 对 其 敏 感 性 较 高, 提 示 临 床 需 警 惕 药 物 引 起 的 心 脏 毒 性 关 键 词 : 心 肌 细 胞 ; 多 柔 比 星 ; 顺 铂 ; 氯 法 拉 滨 ; 差 速 贴 壁 ; 心 肌 毒 性 中 图 分 类 号 :R96 文 献 标 志 码 :A 0 引 言 原 代 心 肌 细 胞 (primary cardiomyocytes, PC) 是 心 血 管 疾 病 及 药 物 安 全 性 试 验 等 研 究 的 体 外 实 验 模 型 但 目 前 采 用 的 分 离 纯 化 方 法 大 多 需 要 差 速 贴 壁 1.0~1.5 小 时, 耗 时 较 长 [1-5] [1-5] 本 文 将 对 传 统 PC 细 胞 培 养 方 法 进 行 改 良, 在 不 影 响 PC 细 胞 成 活 率 和 存 活 时 间 的 前 提 下 显 著 缩 短 分 离 纯 化 时 间, 并 将 之 用 于 评 价 三 种 不 同 作 用 机 制 的 抗 肿 瘤 药 物 多 柔 比 星 (doxorubicin,dox) 顺 铂 (cisplatinum, DDP) 和 氯 法 拉 滨 (clofarabine,clo) 的 PC 细 胞 毒 性, 为 抗 肿 瘤 药 物 提 供 更 多 心 脏 毒 性 方 面 的 安 全 性 资 料, 同 时 也 建 立 起 一 套 高 效 易 行 成 活 率 高 的 PC 细 胞 培 养 方 法 1 仪 器 与 材 料 Varioskan Flash 全 自 动 酶 标 仪 ( 美 国 Thermo 公 司 ),DKB-501 超 级 恒 温 水 浴 槽 ( 上 海 森 信 实 验 仪 器 有 限 公 司 ),Sorvall ST16 高 速 冷 冻 离 心 机 ( 美 国 Thermo 公 司 ) MCO-18AIC 二 氧 化 碳 培 养 箱 ( 日 本 SANYO 公 司 ),FS100- F 倒 置 荧 光 显 微 镜 ( 日 本 NIKON 公 司 ) DMEMF12 培 养 基, 新 生 牛 血 清 (NCS), 青 霉 素 - 链 霉 素 混 合 双 抗 试 液,0.05% 胰 蛋 白 酶 -0.02% EDTA, 磷 酸 盐 缓 冲 液 (PBS)( 美 国 Invirtogen 公 司 );5- 溴 脱 氧 尿 嘧 啶 核 苷 (Br du),ii 型 胶 原 酶,0.4% 台 盼 蓝 试 液 ( 美 国 Sig ma 公 司 ) Anti-alpha Sarcomeric Actin anti body [C5C]( 英 国 Abcam 公 司 ),IHC Se lect Immunoperoxidase Secondary Detection System DAB150 试 剂 盒 ( 美 国 Millipore 公 20

25 原 创 论 文 司 ) Cell Titer 96 Aqueous 单 溶 液 细 胞 增 殖 检 测 试 剂 盒 (MTS)( 美 国 Promega 公 司 ) 盐 酸 多 柔 比 星, 规 格 : 每 瓶 10 mg, 购 自 美 国 Pfizer 公 司 ; 顺 铂, 批 号 MKBL5671V, 购 自 美 国 Sigma 公 司 ; 氯 法 拉 滨, 纯 度 99.80%, 批 号 : , 购 自 南 京 阿 托 化 工 科 技 有 限 公 司 新 生 24 小 时 内 的 SD 大 鼠, 雌 雄 不 限, 约 12 g, 北 京 维 通 利 华 实 验 动 物 技 术 有 限 公 司 提 供, 许 可 证 号 SCXK( 京 ) 方 法 2.1 新 生 大 鼠 原 代 心 肌 细 胞 (PC 细 胞 ) 的 分 离 培 养 取 新 生 24 小 时 内 的 SD 大 鼠 乳 鼠 数 只, 75% 酒 精 中 浸 泡 消 毒 无 菌 条 件 下 用 眼 科 弯 镊 取 心 脏 心 尖 部, 置 于 预 冷 的 PBS 中, 剪 除 结 缔 组 织, 漂 洗 3 次, 剪 成 约 1 mm 3 的 小 块, 加 入 适 量 0.05% 胰 蛋 白 酶 -0.02% EDTA 溶 液 进 行 首 次 消 化 ( 组 织 趋 向 成 团 时 即 止 ), 静 置 弃 上 清 向 剩 余 心 肌 组 织 中 加 入 适 量 1.0 g L -1 II 胶 原 酶 溶 液, 于 37 恒 温 水 浴 中 轻 柔 振 荡, 消 化 约 3-5 min, 吸 取 上 清 至 消 化 终 止 液 ( 含 10%NCS 的 DMEMF12 培 养 基 ) 中 以 终 止 消 化 照 此 方 法 分 次 消 化, 至 组 织 块 基 本 消 失, 及 时 终 止 并 收 集 每 次 消 化 所 得 的 细 胞 上 清, 过 70 μm 细 胞 网 筛 后, 以 800 r min - 1 离 心 7 min 弃 上 清, 以 适 量 PC 细 胞 培 养 基 重 悬 细 胞, 按 照 ml -1 的 密 度 接 种 于 细 胞 培 养 皿 中, 采 用 差 速 贴 壁 法 以 除 去 心 肌 成 纤 维 细 胞, 将 尚 未 贴 壁 的 PC 细 胞 悬 液 吸 出 转 移 至 另 一 新 的 细 胞 培 养 皿 中 培 养, 并 加 入 终 浓 度 为 0.1 mmol L -1 的 BrdU 抑 制 杂 细 胞 生 长, 置 入 5% CO 2 培 养 箱 中 培 养 使 PC 细 胞 贴 壁,48 h 后 更 换 新 鲜 的 PC 细 胞 培 养 基 以 除 去 BrdU, 继 续 培 养 1-2 天, 待 心 肌 细 胞 呈 现 活 力 良 好 且 均 一 节 律 性 搏 动 的 细 胞 簇 时 即 可 用 于 后 续 实 验 2.2 原 代 心 肌 细 胞 的 形 态 学 检 查 采 用 倒 置 显 微 镜 观 察 新 分 离 培 养 的 PC 细 胞 的 形 态 特 征 和 节 律 性 搏 动 情 况 2.3 不 同 差 速 贴 壁 时 间 对 原 代 心 肌 细 胞 的 存 活 力 影 响 分 别 采 用 20 min,60 min,90 min 的 差 速 贴 壁 法 对 新 分 离 的 PC 细 胞 进 行 纯 化, 取 纯 化 后 的 PC 细 胞 悬 液 100 μl, 加 入 100 μl 质 量 分 数 为 0.4% 台 盼 蓝 试 液 混 匀 后 取 10 μl 滴 于 计 数 板 上, 倒 置 显 微 镜 下 观 察 并 计 数 4 个 大 格 中 的 不 着 色 的 活 细 胞 数 和 着 深 蓝 色 的 死 细 胞 数, 计 算 并 比 较 不 同 差 速 贴 壁 时 间 纯 化 方 法 对 PC 细 胞 存 活 率 的 影 响 存 活 率 (%)= 活 细 胞 数 细 胞 总 数 100, 分 别 计 数 三 次, 以 平 均 值 ± 标 准 偏 差 表 示 2.4 不 同 差 速 贴 壁 时 间 对 原 代 心 肌 细 胞 的 分 离 纯 度 影 响 分 别 采 用 20 min,60 min,90 min 的 差 速 贴 壁 法 对 新 分 离 的 PC 细 胞 进 行 纯 化, 取 纯 化 后 的 PC 细 胞 悬 液 于 六 孔 板 中 培 养, 用 抗 横 纹 肌 肌 动 蛋 白 (α-sarcomeric actin) 抗 体 的 免 疫 细 胞 化 学 染 色 法 对 其 进 行 纯 度 鉴 定 按 照 试 剂 盒 说 明 书 进 行 实 验 操 作 染 色 后 在 光 镜 下 观 察, 计 数 10 个 连 续 不 重 叠 的 视 野 中 阳 性 细 胞 个 数 ( 每 个 视 野 计 数 100 个 细 胞 ), 计 算 阳 性 细 胞 的 百 分 比, 比 较 不 同 差 速 贴 壁 时 间 纯 化 方 法 对 PC 细 胞 纯 度 的 影 响 阳 性 率 (%)= 阳 性 细 胞 数 细 胞 总 数 100, 以 平 均 值 ± 标 准 偏 差 表 示 2.5 不 同 作 用 机 制 的 抗 肿 瘤 药 物 的 心 肌 细 胞 毒 性 试 验 采 用 MTS 法 检 测 三 种 抗 肿 瘤 药 物 : 多 柔 比 星 顺 铂 和 氯 法 拉 滨 对 PC 细 胞 的 毒 性 作 用, 计 算 相 应 的 半 数 抑 制 浓 度 即 IC 50 值 受 试 药 物 工 作 液 配 制 盐 酸 多 柔 比 星 : 采 用 1 ml 0.9% 氯 化 钠 注 射 液 溶 解 10 mg 盐 酸 多 柔 比 星 配 制 成

26 原 创 论 文 mmol L -1 (10 g L -1 ) 母 液 顺 铂 : 采 用 1 ml 注 射 用 水 溶 解 3 mg 顺 铂 配 制 成 10.0 mmol L - 1 (3 g L -1 ) 母 液 氯 法 拉 滨 : 采 用 1 ml 二 甲 基 亚 砜 溶 解 20 mg 氯 法 拉 滨 配 制 成 66.0 mmol L -1 (20 g L -1 ) 母 液 以 上 三 种 药 物 的 母 液, 用 时 采 用 心 肌 细 胞 培 养 基 分 别 稀 释 配 制 成 项 下 所 述 的 终 试 浓 度 进 行 实 验 试 验 分 组 阴 性 对 照 组 ( 溶 媒 对 照 组 ): 以 不 含 药 物 的 DMEMF12 培 养 基 作 为 阴 性 对 照, 不 加 入 受 试 细 胞 ; 空 白 对 照 组 : 以 不 含 药 物 的 培 养 基 处 理 受 试 细 胞 ;DOX 组 : 分 别 以 含 DOX μmol L -1 的 培 养 基 处 理 ;DDP 组 : 分 别 以 含 DDP μmol L - 1 的 培 养 基 处 理 ;CLO 组 : 分 别 以 含 CLO μmol L -1 的 培 养 基 处 理 心 肌 细 胞 毒 性 检 测 新 分 离 的 PC 细 胞 以 ml -1 的 密 度 接 种 于 96 孔 板 中, 培 养 4 天 达 到 单 层 覆 盖 且 呈 良 好 的 节 律 性 搏 动 后, 弃 掉 原 培 养 基, 向 孔 中 依 次 加 入 含 有 不 同 浓 度 受 试 药 物 的 培 养 基, 每 孔 200 μl, 每 组 设 6 个 复 孔, 于 培 养 48 h 后, 采 用 MTS 法 在 490 nm 波 长 处 测 定 各 受 试 孔 的 吸 光 度 值 (A 值 ), 对 各 组 A 值 取 平 均 值 并 扣 除 溶 媒 对 照 组 的 平 均 A 值 后, 按 照 存 活 细 胞 (%)=A 受 试 A 空 白 对 照 100%, 计 算 不 同 浓 度 的 受 试 药 物 对 PC 细 胞 活 力 的 影 响 百 分 率 2.6 数 据 处 理 利 用 GraphPad Prism 5.0 软 件 ( 美 国 GraphPad Software 公 司 ) 对 PC 细 胞 毒 性 检 测 数 据 ( 即 项 下 所 测 的 PC 细 胞 存 活 百 分 率 ) 进 行 四 参 数 希 尔 方 程 拟 合, 绘 制 相 应 的 浓 度 - 效 应 曲 线, 计 算 不 同 受 试 药 物 对 PC 细 胞 的 IC 50 值, 以 平 均 值 ± 标 准 偏 差 表 示 采 用 SPSS 20.0 软 件 ( 美 国 IBM 公 司 ) 对 不 同 差 速 贴 壁 时 间 对 原 代 心 肌 细 胞 存 活 率 及 纯 度 影 响 的 结 果 进 行 统 计 分 析, 以 平 均 值 ± 标 准 偏 差 表 示 ; 用 单 因 素 方 差 分 析 法 对 不 同 浓 度 受 试 药 物 与 空 白 对 照 组 的 结 果 进 行 比 较 分 析, 以 p< 0.05 为 差 异 具 有 显 著 性 3 结 果 3.1 原 代 心 肌 细 胞 的 形 态 学 检 查 结 果 新 分 离 的 PC 细 胞 呈 透 亮 的 圆 形, 培 养 4 h 后 细 胞 开 始 贴 壁 生 长, 在 培 养 器 皿 壁 上 逐 渐 展 开, 伸 出 伪 足, 变 为 三 角 形 多 边 形 和 放 射 状 星 形 等 形 态 12 h 后 基 本 贴 壁, 少 数 单 个 贴 壁 细 胞 出 现 自 发 性 搏 动 ( 频 率 节 律 互 不 相 同 ) 72 h 细 胞 伸 出 伪 足 相 互 接 触 交 织 成 网, 逐 渐 形 成 细 胞 簇 或 细 胞 单 层, 呈 放 射 状 排 列 的 同 心 圆 状, 并 出 现 同 步 性 搏 动, 收 缩 明 显 而 有 力, 搏 动 频 率 为 次 min -1 生 长 72 h 的 PC 细 胞 形 态 如 图 原 代 心 肌 细 胞 的 存 活 率 检 测 经 0.4% 台 盼 蓝 染 色 后 计 数, 采 用 20 min 差 速 贴 壁 法 纯 化 后 的 心 肌 细 胞 存 活 率 为 95.0±3.7%, 与 采 用 60 min 和 90 min 差 速 贴 壁 法 纯 化 所 得 心 肌 细 胞 的 存 活 率 无 明 显 差 异 (p>0.05), 见 表 心 肌 细 胞 纯 度 鉴 定 通 过 抗 横 纹 肌 肌 动 蛋 白 (α- sarcomeric actin) 抗 体 的 免 疫 细 胞 化 学 染 色 实 验, 在 光 镜 下 观 察 ( 图 2), 被 染 成 红 褐 色 的 细 胞 即 为 心 肌 细 胞 通 过 计 数 发 现 采 用 20 min 差 速 贴 壁 法 纯 化 的 PC 细 胞 阳 性 率 为 95.2±1.5%, 与 采 用 60 min 和 90 min 差 速 贴 壁 法 纯 化 所 得 心 肌 细 胞 的 阳 性 率 无 明 显 差 异 (p>0.05), 见 表 多 柔 比 星 顺 铂 和 氯 法 拉 滨 对 心 肌 细 胞 的 毒 性 影 响 经 GraphPad Prism 5.0 软 件 进 行 拟 合 分 析 计 算,DOX DDP 和 CLO 对 PC 细 胞 的 IC 50 值 分 22

27 原创论文 Fig.1 The morphological images of primary cardiomyocytes cultured for 72 hours. (scale bars: A.100 μm; B.50 μm) A-The fluorescent antibody test of α-sarcomeric actin exhibited a positive result; B-PBS buffer as the negative control exhibited a negative result. Fig. 2 The purity results of primary cardiomyocytes isolated from neonatal rats (Scale bars: 100 μm) 别为1.17± ±2.05和34.07±14.43 μmol 可引起相比对照组 PC 细胞显著的抑制作用 L 相应的浓度-效应曲线如图 3 所示 由图 3 p<0.05 从图 3 可见 DDP 的细胞毒性曲线比 0.17 μmol L-1 和 CLO 0.33 μmol L-1 作用下 对 PC 细胞的抑制率增加速率甚至比 DOX 的抑 -1 可见 与对照组细胞相比在较低浓度的 DOX 即可产生明显抑制作用 p<0.05 但随着浓度 增加 DOX 的抑制率上升较 CLO 的抑制率快 当 DOX 的浓度高于 μmol L-1 时 对 PC 细 胞的抑制率可达 90%以上 而 CLO 需要达到 DOX 的曲线明显右移 但随其浓度增加 DDP 制率增加速率快 4 讨论 PC 细胞是心血管疾病及药物安全性试 μmol L-1 才能使约 75%的 PC 细胞被抑 验等研究的重要体外实验模型 其培养方法 呈平台水平 DDP 在浓度为 μmol L 时 纯度 在整个原代培养过程中 酶的消化与 制 且之后浓度再增加其抑制率也不再增加 -1 效率的高低直接影响到 PC 细胞的存活率及 23

28 原 创 论 文 Table 1 The effects of different differential adhesion duration on survival rate and purity of primary cardiomyocytes.results are expressed as x±s. Differential time (min) Survival rate (%)(n=3) 95.0± ± ±6.3 Purity (%)(n=10) 95.2± ± ±1.9 DOX cardiotoxicity curve; DDP cardiotoxicity curve; CLO cardiotoxicity curve; The experiments were performed in three independent runs (n = 3). Standard error bars are shown. Fig. 3 Concentration-response curves for the cardiotoxicity of doxorubicin (DOX),cis-platinum (DDP), clofarabine (CLO) on primary cardiomyocytes. 除 去 非 心 肌 细 胞 是 最 为 关 键 的 步 骤 胰 蛋 白 酶 和 II 型 胶 原 酶 等 是 目 前 常 用 的 消 化 酶 类 胰 蛋 白 酶 消 化 作 用 强 烈, 可 同 时 深 入 到 心 肌 细 胞 间 质 和 心 肌 细 胞 膜 进 行 分 解 与 破 坏, 易 导 致 心 肌 细 胞 损 伤 II 型 胶 原 酶 作 用 缓 和, 对 心 肌 细 胞 损 伤 较 小, 但 欲 彻 底 消 化, 需 要 较 长 时 间, 而 心 肌 细 胞 长 期 浸 没 于 酶 消 化 液 [2] 中 也 会 致 其 活 力 降 低 故 本 实 验 中 选 用 较 低 浓 度 (0.05%) 的 胰 蛋 白 酶 先 对 心 肌 组 织 块 进 行 广 泛 而 迅 速 的 消 化, 去 除 心 肌 组 织 表 面 致 密 的 结 缔 组 织 间 质 蛋 白 弃 掉 首 次 胰 酶 消 化 的 上 清 液 后, 再 加 入 1.0 g L -1 的 II 型 胶 原 酶 进 行 分 次 消 化, 每 次 消 化 约 3-5 分 钟, 消 化 细 胞 间 质 中 的 胶 原 纤 维 以 使 心 肌 细 胞 充 分 游 离 出 来 并 分 散 成 单 个 细 胞 这 种 双 酶 依 次 消 化 的 方 法, 最 大 限 度 地 降 低 了 心 肌 细 胞 损 伤, 有 效 提 高 了 消 化 效 率 心 肌 细 胞 活 力 及 存 活 率 心 肌 细 胞 仅 占 心 脏 组 织 的 25%, 以 心 肌 成 纤 维 细 胞 为 主 的 非 心 肌 细 胞 则 占 近 75% 的 比 例 而 心 肌 成 纤 维 细 胞 比 心 肌 细 胞 更 快 贴 壁 且 增 殖 能 力 很 强, 能 迅 速 增 殖 占 据 领 地 而 成 为 优 势 细 胞, 对 心 肌 细 胞 产 生 密 度 抑 制, 同 时 争 夺 心 肌 细 胞 生 长 所 需 的 大 量 营 养, 从 而 [1] 影 响 心 肌 细 胞 的 正 常 生 长 与 生 理 功 能 因 此, 去 除 非 心 肌 细 胞 以 获 得 纯 度 高 的 心 肌 细 胞 是 保 证 高 质 量 实 验 结 果 的 先 决 条 件 化 学 试 剂 抑 制 法 和 差 速 贴 壁 分 离 法 是 两 种 目 前 最 常 用 的 纯 化 方 法 前 者 通 过 加 入 有 丝 分 裂 抑 制 剂 如 5-BrdU 等 抑 制 心 肌 成 纤 维 细 胞 的 [6] DNA 或 蛋 白 质 合 成, 从 而 抑 制 其 增 殖, 但 对 不 具 增 殖 能 力 的 心 肌 细 胞 几 乎 无 影 响 后 者 利 用 成 纤 维 细 胞 先 于 心 肌 细 胞 快 速 贴 壁 生 长 [7-8] 的 特 点 进 行 纯 化 本 实 验 同 时 采 用 上 述 两 种 方 法 进 行 心 肌 细 胞 纯 化 首 先 考 察 分 别 采 24

29 原 创 论 文 用 20 min,60 min,90 min 差 速 贴 壁 方 法 对 心 肌 细 胞 存 活 率 及 纯 度 影 响 的 对 比 研 究, 结 果 发 现 上 述 三 种 不 同 的 差 速 贴 壁 时 间 对 心 肌 细 胞 的 存 活 率 及 纯 度 无 统 计 学 差 异 (p>0.05) 基 于 20 min 差 速 贴 壁 法 耗 时 最 短, 获 得 的 心 肌 细 胞 存 活 率 及 纯 度 均 达 95% 以 上, 且 经 本 实 验 反 复 验 证 发 现 某 些 活 力 较 好 的 心 肌 细 胞 亦 能 在 15 min 左 右 快 速 贴 壁, 若 差 速 贴 壁 时 间 过 长 意 味 着 心 肌 细 胞 将 更 难 与 成 纤 维 细 胞 分 开, 反 而 导 致 活 力 良 好 的 心 肌 细 胞 总 量 损 失 因 此, 差 速 贴 壁 时 间 不 宜 过 长 本 实 验 选 用 20 min 差 速 贴 壁 法 先 除 去 绝 大 部 分 心 肌 成 纤 维 细 胞, 再 加 入 终 浓 度 为 0.1 mmol L BrdU 进 一 步 抑 制 培 养 环 节 中 的 心 肌 成 纤 维 细 胞 增 殖, 从 而 获 得 纯 度 和 存 活 率 均 佳 的 心 肌 细 胞, 为 准 确 评 价 抗 肿 瘤 药 物 的 心 肌 毒 性 提 供 了 可 靠 保 证 [9-12] 已 有 研 究 表 明 三 种 抗 肿 瘤 药 物 DOX DDP 和 CLO 均 有 不 同 程 度 的 心 脏 毒 性, 以 蒽 醌 类 化 疗 药 DOX 的 心 脏 毒 性 最 为 严 重 本 文 利 用 经 上 述 改 良 的 培 养 方 法 获 得 的 高 纯 度 和 高 存 活 率 的 心 肌 细 胞 进 行 DOX DDP 和 CLO 的 心 肌 细 胞 毒 性 评 价 结 果 表 明, 与 对 照 组 细 胞 相 比 DOX 与 CLO 在 相 同 的 较 低 浓 度 即 可 产 生 明 显 抑 制 作 用 但 随 着 浓 度 增 加,DOX 的 抑 制 率 上 升 较 CLO 的 抑 制 率 快, 且 当 CLO 浓 度 高 于 μmol L -1 后 即 使 浓 度 增 加 ( 至 最 大 溶 解 度 ) 其 抑 制 率 也 不 再 增 加, 仍 保 持 约 75% 由 此 可 见 心 肌 细 胞 对 CLO 是 敏 感 的, 但 导 致 心 肌 细 胞 损 害 的 程 度 浓 度 和 速 度 均 比 DOX 低, 随 着 浓 度 增 加, 逐 渐 表 现 出 抗 肿 瘤 药 物 的 所 带 来 的 广 谱 细 胞 毒 性, 致 使 最 高 约 75% 的 心 肌 细 胞 损 伤 或 死 亡 与 DOX 和 CLO 相 比,DDP 在 较 高 的 浓 度 17.5 μmol L -1 才 引 起 与 对 照 组 PC 细 胞 显 著 的 抑 制 作 用, 其 细 胞 毒 性 曲 线 位 于 DOX 的 细 胞 毒 性 曲 线 右 侧 但 随 其 浓 度 增 加, DDP 对 PC 细 胞 的 抑 制 率 增 加 速 率 比 DOX 的 增 加 速 率 快 提 示 心 肌 细 胞 在 早 期 对 DDP 的 敏 感 性 低 于 DOX 和 CLO, 但 随 浓 度 增 加 与 累 积,DDP 的 心 肌 毒 性 迅 速 升 高, 说 明 DDP 具 有 较 强 的 细 胞 毒 性 综 上,DOX 与 CLO 具 有 比 DDP 明 显 的 早 期 心 肌 特 异 性 毒 性, 随 着 浓 度 增 加, 均 体 现 出 广 泛 的 细 胞 毒 性 作 用, 但 CLO 的 细 胞 毒 性 相 对 较 弱 提 示 临 床 采 用 上 述 三 种 抗 肿 瘤 药 物 进 行 化 疗 时 需 警 惕 药 物 早 期 引 起 的 心 脏 毒 性, 适 时 采 取 措 施 给 予 保 护 心 脏 的 药 物 联 合 治 疗 本 实 验 通 过 改 良 原 代 心 肌 细 胞 培 养 方 法, 快 速 高 效 地 获 取 存 活 率 和 纯 度 均 高 的 心 肌 细 胞, 为 评 价 DOX DDP 和 CLO 的 心 肌 细 胞 毒 性 奠 定 了 可 靠 的 物 质 基 础 通 过 心 肌 细 胞 毒 性 评 价 实 验, 为 三 种 抗 肿 瘤 药 物 提 供 了 更 多 的 心 脏 毒 性 安 全 性 参 考 资 料 参 考 文 献 [1] 辛 毅, 许 秀 芳, 黄 益 民, 等. 乳 小 鼠 心 肌 成 纤 维 细 胞 和 心 肌 细 胞 的 分 离 培 养 及 荧 光 鉴 定 [J] 新 乡 医 学 院 学 报,2011,28(5): [2] 王 瑞 华, 兰 晓 莉, 曹 国 祥, 等. 新 生 SD 大 鼠 心 肌 细 胞 培 养 方 法 的 简 化 及 改 良 [J]. 心 脏 杂 志,2008,20(2): [3]Fu JJ,Gao J,Pi RB,et al. An Optimized Protocol for Culture of Cardiomyocyte from Neonatal Rat [J].Cytotechnology,2005,49(2-3): [4] 丽 娜, 金 国 琴, 郭 炜, 等. 原 代 乳 鼠 心 肌 细 胞 的 培 养 方 法 [J]. 中 药 药 理 与 临 床,2010,26 (5): [5] 刘 嘉 祺, 孙 云 云. 乳 鼠 心 肌 细 胞 原 代 培 养 方 法 [J]. 微 量 元 素 与 健 康 研 究,2012,29(4):4-6. [6]Taupin P. BrdU immunohistochemistry for studying adult neurogenesis:paradigms,pitfalls,limitations,and validation [J]. Brain Res Rev,2007,53(1):

30 原 创 论 文 [7] 邵 华, 金 秀 东, 梁 军, 等. 不 同 差 速 贴 壁 时 间 对 心 肌 细 胞 培 养 的 影 响 实 验 性 研 究 [J]. 牡 丹 江 医 学 院 学 报,2008,29(1):3-4. [8]Sreejit P,Kumar S,Verma RS. An improved protocol for primary culture of cardiomyocyte from neonatal mice [J]. In Vitro Cell Dev Biol Anim,2008,44(3): [9] 彭 毅, 谭 文 勇. 抗 肿 瘤 治 疗 相 关 的 心 脏 血 管 毒 性 : 肿 瘤 心 脏 病 学 亟 待 跟 进 [J]. 临 床 与 病 理 杂 志,2015,35(3): [10]Albini A,Pennesi G,Donatelli F,et al.cardiotoxicity of anticancer drugs:the need for cardio-oncology and cardio-oncological prevention [J].J Natl Cancer Inst,2010, 102(1): [11]Curigliano G,Cardinale D,Suter T,et al. Cardiovascular toxicity induced by chemotherapy,targeted agents and radiotherapy: ESMO Clinical Practice Guidelines [J]. Ann Oncol,2012,23 Suppl 7:vii [12]Ferroni P,Della-Morte D,Palmirotta R,et al.platinum- based compounds and risk for cardiovascular toxicity in the elderly:role of the antioxidants in chemoprevention [J]. Rejuvenation Res,2011,14(3): Improved culture approach of cardiomyocytes and cardiotoxicity evaluation of antitumor drugs LI Li 1,2,SHEN Xiu-ping 2,ZHANG Zong-peng 2,LIU Chang-xiao 2, (1.Pharmacy Department,the People's Hospital of Guizhou Province,Guiyang ,China; 2.Tianjin Center for Drug Safety Assessment and Research,Tianjin ,China) Abstract:Objective:To improve the culture approach of cardiomyocytes,and evaluate the car diotoxicity of antitumor drugs of doxorubicin (DOX),cisplatinum (DDP) and clofarabine (CLO). Methods:Cardiomyocytes were isolated from heart tissue of neonatal rat by double-enzyme diges tion method,differential adhesion was optimized to 20 minutes to purify the newly isolated cardio myocyts,cell survival rate was tested by trypan blue stain assay,the purity of cardiomyocytes was identified by immunohistochemical method,afterward the cytotoxicity of DOX,DDP and CLO on cardiomyocytes were determined by MTS assay,respectively. Results:Compared with each control group,significant differences were revealed at lower concentrations of DOX (0.17 μmol L - 1 ),DDP (17.50 μmol L -1 ) and CLO (0.33 μmol L -1 ) (p<0.05),respectively.the concentrations of DOX,DDP and CLO resulting in 50% viability of primary cardiomyocytes (IC 50) were 1.17 ± 0.28,7.90 ± 2.05 and 34.07±14.43 μmol L - 1,respectively. Conclusions:Comparing with the control cell in each group,the cardiotoxicity of three antitumor drugs increase in concentration-dependent manner,and cardiomyocytes are more sensitive to these drugs in the early phase of drug exposure,which sug gests that the cardiotoxicity of antitumor drugs should be cautioned for clinical application. Key words:cardiomyocyte,doxorubicin,cisplatinum,clofarabine,differential adhesion,cardio toxicity 26

31 原 创 论 文 HPLC 同 时 测 定 人 血 清 中 茶 碱 及 其 代 谢 物 1,3- 二 甲 基 尿 酸 的 浓 度 1,2 熊 世 娟, 吴 瑞 明 2, 盛 长 城 2, 谢 娟 2, 李 龙 宽 3 1, 沈 祥 春 (1. 贵 州 医 科 大 学 天 然 药 物 资 源 优 效 利 用 重 点 实 验 室 ;2. 贵 州 省 人 民 医 院 ; 贵 阳 ;550002; 3. 贵 州 医 科 大 学 第 三 附 属 医 院 ; 都 匀 ;558200) 摘 要 : 目 的 : 建 立 一 种 同 时 测 定 人 血 清 中 茶 碱 及 其 代 谢 物 1,3- 二 甲 基 尿 酸 血 药 浓 度 的 方 法 方 法 : 血 清 样 品 经 乙 腈 沉 淀 法 除 去 蛋 白, 对 乙 酰 氨 基 酚 为 内 标, 真 空 浓 缩 复 溶 后 用 HPLC 分 析 色 谱 柱 为 :Agilent ZORBAX SB-C18 柱 (150 mm 4.6 mm,5 μm), 流 动 相 为 : 乙 腈 :0.3% 甲 酸 溶 液 (5:95), 流 速 1 ml min -1, 检 测 波 长 280 nm 结 果 : 茶 碱 1,3- 二 甲 基 尿 酸 的 血 清 浓 度 线 性 范 围 分 别 为 0.50~40.00 μg ml -1 和 0.10~12.80 μg ml -1, 两 者 的 线 性 关 系 均 良 好 (R 分 别 为 和 ), 最 低 定 量 下 限 分 别 为 μg ml -1 茶 碱 和 1,3- 二 甲 基 尿 酸 低 中 高 质 量 浓 度 的 提 取 回 收 率 分 别 为 80.22% 87.25% 89.23% 和 87.03% 80.01% 87.95%, 二 者 批 内 和 批 间 RSD 均 小 于 15% 结 论 : 该 方 法 简 便 准 确, 特 异 性 和 灵 敏 度 能 够 满 足 临 床 测 定 人 血 清 中 茶 碱 及 其 代 谢 物 1,3- 二 甲 基 尿 酸 浓 度 的 要 求, 适 用 于 评 价 和 研 究 人 体 内 茶 碱 的 药 代 动 力 学 影 响, 指 导 临 床 用 药 关 键 词 : 茶 碱 ;1,3- 二 甲 基 尿 酸 ;HPLC; 血 清 浓 度 ; 人 HPLC Method for Detection of Serum Concetrations of Theophyllineand Its Metabolite 1,3-dimethyluric Acid in Human XIONG Shi-Juan 1,2,WU Rui-ming 2,SHENG Chang-cheng 2,XIE Juan 2,LI Long-kuan 3,SHEN Xiang-chun 1 (1.The key laboratory of natural medicine resources using efficiently,guizhou Medical University; 2.Department of pharmacy, GuiZhou Provincial People s Hospital, GuiYang,550002,China; 3.The third Affiliated hospital of Guizhou Medical University, DuYun,558200, China ) Abstract: Objective:To establish a method for simultaneous detection of serum concentra tions of theophylline and its metabolite 1,3-dimethyluric acid in human. Methods:Serum protein was removed by acetonitrile precipititation, 4-Acetamidophenol was added as the internal standard substance, then it was detected after concentration and dissolution by HPLC. Samples were de temined by Agilent ZORBAX SB-C18 reversed phase column(150 mm 4.6 mm,5 μm) with a mo bile phase consisting of acetonitrile and 0.3% formic acid (5:95). The flow rate was 1 ml min -1 and the detection wavelength was 280 nm. Results:The calibration graphs were linear in the range of μg ml - 1 for theophylline and μg ml - 1 for 1,3- dimethyluric acid (R= and , respectively). The limits of quantification of theophylline and 1,3-dimethyluric 27

32 原 创 论 文 acid wewe 0.50 and 0.10 μg ml -1, respectively. The extraction recoveries of low, medium and high concentrations were 80.22%, 87.25% and 89.23% for theophylline, and 87.03%, 80.01% and 87.95% for 1,3- dimethyluric acid, respectively. Both intra- and inter- batch RDS were less than 15%. Conclusion:HPLC is an simple, sensitive and reliable method for the detection of serum concentrations of theophylline and its metabolite 1,3-dimethyluric acid in human. Therefore, it is suitable to evaluate and study the effect of drug on pkarmacokinetics of theophylline in human, and guide the drug use reasonably in clinical work. Key words: theophylline; 1,3-dimethyluric acid; HPLC;serum drug concentrations; human 茶 碱 是 临 床 呼 吸 系 统 疾 病 治 疗 的 重 要 药 物 之 一, 具 有 解 痉 平 喘 及 免 疫 调 节 的 作 用 [1], 但 由 于 该 药 物 治 疗 窗 窄, 易 发 生 严 重 不 良 反 应 [2,3], 故 临 床 使 用 氨 茶 碱 治 疗 时 进 行 血 药 浓 度 的 测 定 十 分 重 要, 以 保 证 患 者 的 临 床 疗 效 并 降 低 药 物 不 良 反 应 的 发 生 率 据 报 道 茶 碱 在 人 体 内 90% 经 肝 脏 微 粒 体 CYP450 酶 代 谢 转 化, 其 中 40~45% 氧 化 生 成 1,3- 二 甲 基 [4,5] 尿 酸, 是 其 最 主 要 的 代 谢 产 物, 因 此 研 究 茶 碱 及 其 代 谢 产 物 在 人 体 内 的 药 代 动 力 学 转 化 对 探 究 人 体 内 CYP1A2 的 活 性 及 其 介 导 的 代 谢 通 路 具 有 重 要 意 义 目 前, 采 用 HPLC 法 同 时 测 定 人 血 清 中 茶 碱 及 其 代 谢 物 的 研 究 还 未 见 报 导, 主 要 研 究 还 集 中 在 测 定 茶 碱 原 形 药 物 或 者 测 定 尿 液 ( 或 大 鼠 血 浆 ) [6-8] 中 茶 碱 及 其 代 谢 物 本 实 验 建 立 了 一 种 同 时 测 定 人 血 清 中 茶 碱 和 1,3- 二 甲 基 尿 酸 浓 度 的 HPLC 法, 可 用 于 监 测 茶 碱 血 药 浓 度 指 导 临 床 安 全 用 药, 同 时 还 可 用 于 研 究 和 评 价 人 体 内 茶 碱 药 代 动 力 学 及 其 由 CYP1A2 介 导 的 茶 碱 体 内 代 谢 通 路 的 影 响 1 材 料 高 效 液 相 色 谱 分 析 仪 (Agilent Technolo gies 1260) 茶 碱 标 准 品 ( 中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院, 批 号 : , 纯 度 为 100%),1,3- 二 甲 基 尿 酸 (Aladdin, 批 号 : K , 纯 度 为 98%), 对 乙 酰 氨 基 酚 (Aladdin, 批 号 :E , 纯 度 >98%), 甲 酸 (Aladdin, 批 号 :K , 色 谱 纯,98%), 乙 腈 (Tedia, 色 谱 纯 ) 2 方 法 与 结 果 2.1 色 谱 条 件 流 动 相 : 乙 腈 :0.3% 甲 酸 溶 液 (5:95); 流 速 1 ml min - 1 ;Agilent ZORBAX SB-C18 柱 (150 mm 4.6 mm,5 μm); 检 测 波 长 280 nm; 柱 温 30.0 ; 进 样 量 为 20 μl 2.2 标 准 溶 液 的 制 备 分 别 精 密 称 取 茶 碱 mg,1,3- 二 甲 基 尿 酸 mg, 对 乙 酰 氨 基 酚 mg, 并 分 别 以 双 蒸 水 0.25% 氢 氧 化 钠 双 蒸 水 配 置 成 质 量 浓 度 为 500 μg ml -1 1 mg ml μg ml -1 的 贮 备 液, 置 4 保 存, 临 用 前 稀 释 2.3 血 清 样 品 的 处 理 取 血 清 样 品 480 μl, 加 入 内 标 对 乙 酰 氨 基 酚 20 μl( 质 量 浓 度 100 μg ml -1 ), 振 匀, 加 乙 腈 1.5 ml, 涡 旋 混 匀 2 min,16000 r min -1 离 心 10 min, 吸 取 上 清 液 1.5 ml 于 真 空 浓 缩 仪 下 挥 干, 残 留 物 以 0.3% 甲 酸 溶 液 200 μl 复 溶,16000 r min -1 离 心 10 min 后 微 孔 滤 膜 过 滤, 取 20 μl 滤 液 进 样 分 析 2.4 色 谱 行 为 在 上 述 色 谱 条 件 及 血 样 处 理 方 法 下, 获 得 空 白 血 清, 空 白 血 清 加 茶 碱 1,3- 二 甲 基 尿 酸 和 内 标 的 血 清 样 品 HPLC 图 谱 以 及 用 药 后 患 28