542 ISSN (print) ISSN (online) 世 界 华 人 消 化 杂 志 2014 年 2 月 8 日 第 22 卷 第 4 期 研 发 前 沿 生 物 力 学 是 国 内 外 研 究 新 热 点, 目 前 门 脉 系 统 的 力 学 研
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1 世 界 华 人 消 化 杂 志 2014 年 2 月 8 日 ; 22(4): ISSN (print) ISSN (online) 研 究 快 报 RAPID COMMUNICATION 肝 内 型 门 脉 高 压 大 鼠 门 静 脉 超 微 结 构 及 生 物 力 学 特 性 的 改 变 文 彬, 邓 鑫, 陈 然, 彭 佩 纯 文 彬, 邓 鑫, 陈 然, 彭 佩 纯, 广 西 中 医 药 大 学 附 属 瑞 康 医 院 广 西 壮 族 自 治 区 南 宁 市 文 彬, 在 读 硕 士, 主 要 从 事 消 化 系 统 疾 病 的 研 究. 国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目, No 广 西 科 技 厅 重 点 课 题 基 金 资 助 项 目, No. 2011GXNSFD 广 西 卫 生 厅 重 点 课 题 基 金 资 助 项 目, No. 广 重 中 南 大 学 博 士 后 科 学 基 金 资 助 项 目, No. 2013M 作 者 贡 献 分 布 : 文 彬 与 邓 鑫 对 此 文 所 作 贡 献 均 等 ; 此 课 题 由 邓 鑫 设 计 ; 过 程 由 文 彬 陈 然 及 彭 佩 纯 操 作 完 成 ; 研 究 所 用 新 试 剂 及 分 析 工 具 由 邓 鑫 提 供 ; 数 据 分 析 由 文 彬 完 成 ; 本 论 文 写 作 由 文 彬 与 邓 鑫 完 成. 通 讯 作 者 : 邓 鑫, 主 任 医 师, , 广 西 壮 族 自 治 区 南 宁 市 华 东 路 10 号, 广 西 中 医 药 大 学 附 属 瑞 康 医 院 消 化 科. dx8848@126.com 电 话 : 收 稿 日 期 : 修 回 日 期 : 接 受 日 期 : 在 线 出 版 日 期 : Changes in ultrastructure and biomechanical properties of the portal vein in rats with intrahepatic portal hypertension Bin Wen, Xin Deng, Ran Chen, Pei-Chun Peng Bin Wen, Xin Deng, Ran Chen, Pei-Chun Peng, Ruikang Hospital Affiliated to Guangxi Chinese Medicine University, Nanning , Guangxi Zhuang Autonomous Region, China Supported by: the National Natural Science Foundation of China, No ; the Guangxi Natural Science Foundation, No. 2011GXNSFD018035; the Guangxi Health Department Key Project, No ; and the China Postdoctoral Science Foundation Funded Project, No. 2013M Correspondence to: Xin Deng, Chief Physician, Department of Gastroenterology, Ruikang Hospital, Guangxi Traditional Chinese Medical University, 10 Huadong Road, Nanning , Guangxi Zhuang Autonomous Region, China. dx8848@126.com Received: Revised: Accepted: Published online: Abstract AIM: To observe the ultrastructure and biomechanical properties of the portal vein in rats with intrahepatic portal hypertension to provide an experimental basis for further exploring the pathogenesis of portal hypertension. METHODS: Subcutaneous injection of carbon tetrachloride was performed to induce intrahepatic portal hypertension in rats. Biomechanical methods were used to determine portal vein diameter, longitudinal tensile stress-strain curve and the size of the residual stress during portal hypertension formation. Portal vein ultrastructure was observed by electron microscopy. RESULTS: Compared with normal rats, the portal vein diameter was significantly greater in rats with portal hypertension (1.53 ± 0.28 mm vs 1.14 ± 0.17 mm, P < 0.01); portal vein ultrastructure changed significantly; longitudinal tensile stress - strain curve was steeper; the time consumed for the whole process of tensile strain was shorter; the stress at 50% strain was significantly larger (1.04 ± 0.13 N vs 0.51 ± 0.08 N, P < 0.01); the opening angle of the portal vein and arc fluctuations increased significantly ( ± 8.09 vs ± 2.44, P < 0.01). CONCLUSION: Rats with intrahepatic portal hypertension have abnormal portal vein wall remodeling, decreased portal vein compliance, and changes in circumferential and axial biomechanical characteristics Baishideng Publishing Group Co., Limited. All rights reserved. Key Words: Portal hypertension; Ultrastructure; Stress-strain; Residual stress; Compliance Wen B, Deng X, Chen R, Peng PC. Changes in ultrastructure and biomechanical properties of the portal vein in rats with intrahepatic portal hypertension. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2014; 22(4): URL: DOI: dx.doi.org/ /wcjd.v22.i4.541 摘 要 目 的 : 观 察 肝 内 型 门 脉 高 压 大 鼠 门 静 脉 超 微 结 构 及 生 物 力 学 特 性, 为 进 一 步 探 索 门 脉 高 压 病 理 机 制 提 供 实 验 依 据. 方 法 : 四 氯 化 碳 皮 下 注 射 诱 导 肝 内 型 门 静 脉 背 景 资 料 门 脉 高 压 时 门 脉 系 统 生 物 力 学 发 生 了 显 著 改 变, 据 应 力 - 生 长 法 则, 应 力 环 境 的 改 变 将 导 致 应 力 - 生 长 失 衡, 门 静 脉 管 壁 形 态 结 构 也 随 之 发 生 改 变, 因 此 研 究 门 静 脉 管 壁 超 微 结 构 力 学 特 性 与 门 脉 高 压 症 的 相 关 性 至 关 重 要. 同 行 评 议 者 杨 家 和, 教 授, 中 国 人 民 解 放 军 第 二 军 医 大 学 附 属 东 方 肝 胆 外 科 医 院 综 合 治 疗 三 科
2 542 ISSN (print) ISSN (online) 世 界 华 人 消 化 杂 志 2014 年 2 月 8 日 第 22 卷 第 4 期 研 发 前 沿 生 物 力 学 是 国 内 外 研 究 新 热 点, 目 前 门 脉 系 统 的 力 学 研 究 多 集 中 于 血 流 动 力 学 研 究, 对 门 静 脉 管 壁 超 微 结 构 力 学 分 布 与 门 脉 高 压 相 关 性 研 究 尚 未 深 入. 相 关 报 道 张 宗 棨, 汤 松 伟 等 在 门 脉 高 压 兔 的 模 型 中, 认 为 门 脉 系 统 的 低 剪 切 应 力 与 高 周 向 应 力 状 态 参 与 了 门 脉 高 压 症 并 发 症 发 生 的 力 学 基 础 ( 肝 前 型 门 静 脉 高 压 兔 门 脉 系 统 血 管 应 力 的 研 究 ). 贺 细 菊, 张 兴 华 等 对 门 静 脉 高 压 症 猪 离 体 状 态 的 生 物 力 学 特 性 改 变 和 几 何 性 状 的 进 行 研 究, 发 现 门 脉 高 压 时 门 静 脉 弹 性 模 量 随 压 力 变 大 而 增 大, 顺 应 性 随 压 力 增 大 而 下 降 ( 门 静 脉 高 压 症 猪 门 静 脉 的 生 物 力 学 特 性 及 其 临 床 意 义 ), 为 临 床 血 管 移 植 提 供 了 一 定 力 学 数 据. 施 斌, 朱 樑 等 观 察 了 大 鼠 肝 内 型 门 脉 高 压 症 形 成 中 门 静 脉 零 应 力 状 态 及 轴 向 拉 伸 时 应 力 - 伸 长 比 的 动 态 变 化, 认 为 门 脉 高 压 时 高 压 力 高 流 量 的 特 殊 血 液 动 力 学 状 态 可 引 起 门 静 脉 力 学 特 性 ( 轴 向 和 周 向 ) 的 力 学 改 变, 这 些 变 化 又 可 进 一 步 加 重 门 脉 高 压 血 液 动 力 学 异 常 及 病 理 生 理 改 变, 造 成 恶 性 循 环. 高 压 大 鼠 模 型, 生 物 力 学 技 术 测 定 门 脉 高 压 形 成 中 门 静 脉 在 体 直 径 纵 向 拉 伸 应 力 - 应 变 曲 线 及 残 余 应 力 大 小, 透 视 电 镜 下 观 察 门 静 脉 超 微 结 构. 结 果 : 与 正 常 组 大 鼠 相 比, 门 脉 高 压 组 大 鼠 门 静 脉 体 外 直 径 显 著 增 粗 (1.53 mm±0.28 mm vs 1.14 mm±0.17 mm, P <0.01); 门 静 脉 超 微 结 构 发 生 显 著 改 变 ; 纵 向 拉 伸 应 力 - 应 变 曲 线 较 陡 峭, 整 个 拉 伸 应 变 过 程 耗 时 短, 50% 应 变 时 应 力 是 1.04 N±0.13 N, 显 著 大 于 正 常 组 (0.51 N±0.08 N, P <0.01); 门 静 脉 张 开 角 的 弧 度 及 组 内 波 动 幅 度 较 正 常 组 显 著 增 大 ( 度 ± 8.09 度 vs 度 ±2.44 度, P <0.01). 结 论 : 肝 内 型 门 脉 高 压 大 鼠 门 静 脉 管 壁 存 在 异 常 重 构, 其 顺 应 性 下 降, 门 静 脉 呈 周 向 和 轴 向 高 应 力 的 生 物 力 学 特 性 改 变 年 版 权 归 百 世 登 出 版 集 团 有 限 公 司 所 有. 关 键 词 : 门 脉 高 压 ; 超 微 结 构 ; 应 力 - 应 变 ; 残 余 应 力 ; 顺 应 性 核 心 提 示 : 肝 内 型 门 脉 高 压 时, 门 静 脉 超 微 结 构 存 在 异 常 重 构, 如 门 静 脉 管 壁 内 皮 细 胞 基 底 膜 不 完 整, 细 胞 间 隙 连 接 疏 松 ; 平 滑 肌 细 胞 减 少, 周 围 胶 原 纤 维 增 多, 胞 质 肌 丝 少 而 紊 乱, 部 分 线 粒 体 嵴 断 裂 空 泡 化 ; 外 膜 可 见 大 量 胶 原 纤 维 及 疏 松 结 缔 组 织 增 生, 管 壁 顺 应 性 下 降, 门 静 脉 轴 向 及 周 向 处 于 高 应 力 状 态. 文 彬, 邓 鑫, 陈 然, 彭 佩 纯. 肝 内 型 门 脉 高 压 大 鼠 门 静 脉 超 微 结 构 及 生 物 力 学 特 性 的 改 变. 世 界 华 人 消 化 杂 志 2014; 22(4): URL: asp DOI: 0 引 言 目 前, 国 内 外 对 门 脉 系 统 的 血 流 动 力 学 已 作 了 广 泛 研 究 [1,2], 发 现 门 脉 高 压 时 最 突 出 的 病 理 生 理 特 征 为 门 脉 系 统 的 高 阻 力 高 压 力 高 流 量 及 低 外 周 阻 力 的 全 身 高 动 力 循 环 状 态. 由 于 原 有 力 学 平 衡 遭 打 破, 门 脉 系 统 的 生 物 力 学 发 生 了 结 构 和 功 能 改 变 已 得 到 初 步 证 实 [3,4]. 但 门 静 脉 管 壁 重 构 生 物 力 学 特 性 的 改 变 与 门 脉 高 压 相 关 性 的 研 究 尚 未 深 入, 本 实 验 拟 对 大 鼠 门 静 脉 超 微 结 构 纵 向 拉 伸 应 力 - 应 变 及 无 载 荷 状 态 下 残 余 应 力 的 探 讨, 对 门 静 脉 超 微 结 构 和 顺 应 性 进 行 测 试 评 估, 旨 在 进 一 步 从 生 物 力 学 角 度 阐 述 门 脉 高 压 的 病 理 机 制. 1 材 料 和 方 法 1.1 材 料 SD 大 鼠, SPF 级, 6-7 周 龄, 体 质 量 160 g ±20 g, 购 自 广 西 医 科 大 学 动 物 实 验 中 心, 动 物 合 格 证 : scxk 桂 四 氯 化 碳 (CCl 4 ), 购 自 天 津 富 宇 精 细 化 工 试 剂 厂 产 品. T Y8000 系 列 ( N) 伺 服 控 制 拉 力 试 验 机. Image-Pro Plus6.0 图 像 分 析 软 件 (Media Cybernetics 公 司 ). 纯 丙 酮 (EPON812), H-7650 型 透 射 电 子 显 微 镜 ( 日 本 日 立 公 司 ). 1.2 方 法 分 组 和 模 型 制 备 : 大 鼠 在 适 应 性 饲 养 1 wk 后, 随 机 分 为 对 照 组 (30 只 ) 和 模 型 组 (40 只 ), 采 用 复 合 因 素 法 造 模 [5], 造 模 组 大 鼠 首 次 按 0.5 m L/100 g 腹 部 皮 下 注 射 ( 贝 蒂 斯 橄 榄 油 60%+ 40%CCl 4 ) 混 合 液, 以 后 每 隔 3 日 按 0.3 ml/100 g 体 质 量 皮 下 注 射, 每 周 2 次, 150 ml/l 乙 醇 为 唯 一 饮 料, 同 时 辅 以 20% 猪 油 0.5% 胆 固 醇 79.5% 玉 米 面 混 合 饲 料, 共 计 12 wk; 正 常 组 则 以 普 通 饲 料 和 纯 净 水 喂 养 大 鼠 门 静 脉 在 体 直 径 的 测 量 : 造 模 成 功 后 ( 正 常 组 n = 30, 模 型 组 n = 35), 水 合 氯 醛 以 0.3 ml/100 g 腹 腔 注 射 麻 醉, 剖 开 腹 腔, 逐 层 分 离 出 门 静 脉, 将 分 离 出 的 门 静 脉 以 记 号 笔 标 记 两 端, 平 行 置 上 刻 度 尺, 数 码 相 机 拍 照, 所 得 数 值 输 入 计 算 机, Image-Pro Plus6.0 图 像 分 析 软 件 测 量 门 静 脉 段 ( 胃 冠 状 静 脉 分 支 点 下 游 2 cm) 在 体 的 直 径. 门 静 脉 纵 向 拉 伸 试 验 残 余 应 力 超 微 结 构 的 测 定 均 在 测 量 门 静 脉 体 外 直 径 后 随 机 抽 取 进 行 实 验 大 鼠 门 静 脉 纵 向 拉 伸 试 验 : 逐 层 剥 离 出 门 静 脉 ( 正 常 组 n = 12, 模 型 组 n = 12), 沿 其 轴 向 主 干 两 端 剪 下 长 度 25 mm, 将 门 静 脉 两 端 夹 在 伺 服 控 制 拉 力 试 验 机 的 夹 具 上, 夹 具 间 距 为 20 mm, 以 5%/min 应 变 率 增 加 (5 mm/min) 进 行 拉 伸 测 试, 记 录 应 变 为 50% 及 试 样 断 裂 时 的 应 力, UTM107 WIN-XP 测 试 软 件 描 绘 出 应 力 - 应 变 曲 线. 实 验 前 需 要 对 每 个 试 样 反 复 加 载 卸 载 进 行 预 调 处 理 大 鼠 门 静 脉 残 余 应 力 的 测 定 : 所 有 操 作 均 在 25 下 进 行, 取 新 鲜 门 静 脉 主 干 ( 正 常 组 n = 12, 模 型 组 n = 12), 移 入 剩 有 生 理 盐 水 的 培 养 皿 中, 沿 其 长 轴 连 续 横 切, 得 到 厚 度 约 为 1 mm 的 血 管 环, 沿 门 静 脉 血 管 环 径 向 剪 开, 静 置 20 min 左 右, 数 码 相 机 拍 照 零 应 力 状 态 血 管 环 横 切 面 图 像 ( 以 门 静 脉 环 内 壁 中 点 为 顶 点, 沿 两 个 断 端 的 内 壁 作 一 连 线, 所 形 成 的 夹 角 即 为 张 开 角 ), 计 算 机 图 文 系 统 测 量 门 静 脉 张 开 角, 以 此 代 表 门 静
3 文 彬, 等. 肝 内 型 门 脉 高 压 大 鼠 门 静 脉 超 微 结 构 及 生 物 力 学 特 性 的 改 变 543 A B 图 1 大 鼠 门 静 脉 体 外 直 径 (mm). A: 正 常 组 ; B: 门 脉 高 压 组. 创 新 盘 点 本 文 从 门 静 脉 微 观 结 构 及 力 学 异 常 分 布 等 方 面 探 讨 门 脉 高 压 病 理 机 制, 与 传 统 侧 重 研 究 门 脉 系 统 血 流 动 力 学 相 比 具 有 一 定 创 新 性. 应 力 (N) 脉 零 应 力 状 态 的 变 化 大 鼠 门 静 脉 超 微 结 构 测 定 : 取 相 同 部 位 新 鲜 门 静 脉 主 干 ( 正 常 组 n = 6, 模 型 组 n = 11), 切 成 大 小 约 1 mm 1 mm 1 mm, 投 入 4 预 冷 的 4% 戊 二 醛, 固 定 24 h, 再 经 1% 四 氧 化 锇 固 定 2 h, 常 规 乙 醇 和 丙 酮 脱 水, 加 丙 酮 -EPON812 环 氧 树 脂 包 埋, 修 块 及 切 片, 铀 - 铅 染 色, 透 视 电 镜 下 观 察 门 静 脉 管 壁 超 微 结 构. 统 计 学 处 理 实 验 数 据 以 mean±sd 表 示, 采 用 SPSS11.5 统 计 软 件 行 t 检 验 和 方 差 分 析, 比 较 组 间 差 异 有 无 统 计 学 意 义, P <0.05 为 差 异 有 统 计 学 意 义. 2 结 果 图 2 门 静 脉 应 力 - 应 变 曲 线. 开 角 ( 度 ) 正 常 组 门 脉 高 压 组 50% 断 裂 断 裂 应 变 (5 mm/min) 大 鼠 / 只 图 3 门 静 脉 残 余 应 力 曲 线. 门 脉 高 压 组 正 常 组 2.1 大 鼠 门 静 脉 体 外 直 径 变 化 正 常 组 大 鼠 实 验 期 间 无 死 亡, 模 型 组 大 鼠 死 亡 5 只, 模 型 成 功 率 达 87.5%. 与 正 常 组 大 鼠 相 比, 门 脉 高 压 组 大 鼠 门 静 脉 管 腔 充 盈, 体 外 直 径 显 著 增 粗 (1.53 mm± 0.28 mm vs 1.14 mm±0.17 mm, P <0.01, 图 1). 2.2 大 鼠 门 静 脉 纵 向 拉 伸 试 验 结 果 正 常 组 大 鼠 门 静 脉 以 每 分 钟 5% 应 变 率 增 加 (5 mm/min) 进 行 拉 伸 过 程 中, 应 变 达 50% 时 应 力 为 0.51 N±0.08 N, 此 时 应 力 - 应 变 曲 线 较 平 坦, 门 静 脉 拉 伸 应 变 从 50% 到 试 样 断 裂 过 程 中, 应 力 - 应 变 曲 线 较 前 陡 峭, 应 力 达 1.47 N, 应 变 为 96.46% 时 试 样 断 裂. 门 脉 高 压 组 大 鼠 门 静 脉 以 同 样 速 率 拉 伸 过 程 中, 应 力 - 应 变 曲 线 始 终 陡 峭, 门 静 脉 拉 伸 应 变 达 50% 时 应 力 为 1.04 N±0.13 N, 当 应 力 达 到 1.51 N 应 变 为 95.67% 时 门 静 脉 断 裂, 试 样 拉 伸 应 变 耗 时 较 正 常 组 短, 在 同 等 应 变 条 件 下, 门 脉 高 压 组 的 应 力 显 著 高 于 正 常 组 (P <0.01)( 图 2). 2.3 大 鼠 门 静 脉 张 开 角 的 变 化 正 常 大 鼠 门 静 脉 沿 径 向 剪 开 后 展 开 角 呈 小 c 形, 角 度 约 75.4 度 至 83.2 度 左 右, 组 内 波 动 范 围 小 ; 门 脉 高 压 组 试 样 切 开 后 展 开 角 呈 大 C 形, 角 度 在 98.7 度 至 度 之 间, 组 内 波 动 幅 度 较 大. 对 两 组 门 静 脉 张 开 角 均 值 行 方 差 分 析 与 t 检 验, 显 示 两 组 门 静 脉 开 角 大 小 之 间 有 统 计 学 差 异 (P <0.01); 正 常 大 鼠 门 静 脉 组 内 差 异 小, 门 脉 高 压 组 组 内 差 异 大 (P <0.01), 以 均 值 为 基 数 绘 制 门 静 脉 张 开 角 曲 线, 正 常 组 大 鼠 门 静 脉 张 开 角 图 像 基 本 呈 一 直 线, 门 脉 高 压 组 门 静 脉 张 开 角 图 像 较 正 常 组 大 ( 图 3). 2.4 门 静 脉 超 微 结 构 改 变 正 常 组 大 鼠 门 静 脉 内 膜 内 皮 细 胞 表 面 光 滑, 基 底 膜 完 整, 细 胞 间 隙 连 接 紧 密 ; 中 膜 层 平 滑 肌 细 胞 呈 梭 形, 排 列 成 束, 胞 质 中 可 见 肌 丝 ; 外 膜 可 见 弹 性 纤 维 胶 原 纤 维 及 疏 松 结 缔 组 织 排 列 规 则. 门 脉 高 压 组 门 静 脉 内 皮 细 胞 基 底 膜 不 完 整, 细 胞 间 隙 连 接 疏 松 ; 中 膜 层 平 滑 肌 细 胞 减 少, 周 围 胶 原 纤 维 增 多, 胞 质 中 肌 丝 少 而 紊 乱, 部 分 线 粒 体 嵴 断 裂 空 泡
4 544 应用要点 ISSN (print) ISSN (online) 探讨门静脉管壁 超微结构及力学 异常分布, 为我们 从生物力学角度 揭示门脉高压病 理机制提供新思 路; 同时为人工血 管移植提供力学 参考价值, 提高血 管移植远期不良 并发症. 世界华人消化杂志 2014年2月8日 A B C D E F 第22卷 第4期 图 4 门静脉超微结构(TEM). A: 正常组门静脉内膜层; B: 门脉高压组门静脉内膜层; C: 正常组门静脉中膜层; D: 门脉高压 组门静脉中膜层; E: 正常组门静脉外膜层; F: 门脉高压组门静脉外膜层. 化; 外膜未见平滑肌细胞 弹性纤维, 可见大量 改变, 中膜平滑肌细胞及胞质肌丝减少, 胶原纤 胶原纤维及疏松结缔组织增生(图4). 维相应增多, 平滑肌细胞处于合成型状态, 有利 于门静脉管壁持续扩张; 另一方面门静脉管壁 3 讨论 外膜中胶原纤维与弹性纤维比值增大, 无疑促 肝硬化门脉高压症病理机制复杂, 其中一个显 进血管硬度增加 弹性下降. 因此我们推测门 著特点就是全身高动力循环状态. 这种特殊的 静脉平滑肌细胞转型及外膜胶原纤维与弹性纤 血流动力学改变势必影响门静脉的应力状态[6]. 维等微观结构成分失衡是门脉高压时门静脉持 顺应性是反应血管应力状态的重要指标之一, 续扩张及管壁顺应性下降等生物力学改变的重 血管管壁超微结构与之密切相关, 目前与管壁 要原因之一. 顺应性密切相关的组织学成分主要包含内皮细 血管轴向拉伸是研究生物材料力学特性的 胞 平滑肌细胞 弹力纤维及胶原纤维. 研究 重要方法, 可以反映生物材料的轴向力学特性, 发现血管在低应力时, 主要由管壁内皮细胞及 与血管的顺应性显著相关. 顺应性是单位压力 平滑肌细胞承载 [7,8], 高应力时则胶原纤维的拉 下血管容积改变, 涵盖周向应力和轴向应力, 是 伸起主要作用. 平滑肌细胞主要分为收缩和合 检测血管弹性功能重要指标[10]. 本研究显示正常 成型两种, 收缩型平滑肌细胞胞质内肌丝丰富 组大鼠门静脉纵向拉伸应变达到50%时只需很 而细胞器较少, 合成型平滑肌细胞则是胞质内 小的力, 试样应力-应变曲线平坦, 试样拉伸应变 肌丝少, 细胞器丰富, 生理条件下两者处于动态 可塑性强, 说明门静脉组织具有极好的弹性拉 平衡, 合成型占绝对优势时会影响血管的收缩 伸性能, 顺应性好; 门脉高压组门静脉拉伸应变 功能, 使管壁趋于扩张. 但持续的管壁扩张, 血 为50%时应力较正常组大(P <0.01), 整个拉伸应 管力学会重新分布, 胶原纤维被拉伸, 由于胶原 变耗时较短, 血管组织容易达到自身弹性极限 纤维比弹性纤维具备一定的强度和刚度, 因此 (断裂), 在相同应变下, 门脉高压组门静脉拉伸 门静脉管壁相对会变硬, 顺应性下降. 目前常用 应力显著高于正常组. 结合门静脉超微结构改 胶原纤维与弹性纤维含量比值来代表血管刚度, 变, 我们认为门静脉异常重构及高轴向应力共 比值越大则刚度越大, 反之血管弹性及顺应性 同作用下, 门静脉管壁相对固有成分被破坏, 硬 越差[9]. 实验中通过透视电镜观察门静脉超微结 度增加, 顺应性下降. Cahill等[11]与Menon等[12]进 构, 发现门脉高压时门静脉超微结构发生显著 一步研究发现应力在门静脉顺应性下降 硬度
5 文 彬, 等. 肝 内 型 门 脉 高 压 大 鼠 门 静 脉 超 微 结 构 及 生 物 力 学 特 性 的 改 变 545 增 加 时 对 管 壁 的 直 接 破 坏 力 增 强. 这 与 本 实 验 结 果 中 门 静 脉 超 微 结 构 异 常 重 构 相 符 合, 血 管 壁 的 破 坏 则 有 助 于 门 静 脉 血 栓 形 成, 进 一 步 加 重 肝 脏 的 损 害 及 门 脉 高 压 的 维 持. 血 管 的 零 应 力 状 态 并 不 是 无 载 荷 状 态 下 的 血 管, 而 是 指 血 管 环 被 径 向 切 开, 将 残 余 应 力 释 放 后 的 状 态, 此 时 血 管 环 会 自 动 张 开 呈 一 定 弧 度, 我 们 称 之 为 张 开 角 [13]. 门 静 脉 张 开 角 代 表 门 静 脉 的 残 余 应 力 大 小, 其 意 义 在 于 可 从 力 学 角 度 反 映 血 管 组 织 重 建 程 度 应 力 分 布 情 况 及 周 向 力 学 特 性 [14]. 本 实 验 基 于 此 原 理, 通 过 测 量 两 组 大 鼠 门 静 脉 张 开 角 来 量 化 残 余 应 力 大 小. 实 验 中 正 常 组 门 静 脉 零 应 力 状 态 下 张 开 角 较 小, 组 内 波 动 幅 度 不 大 ; 而 门 脉 高 压 组 门 静 脉 张 开 角 大, 组 内 波 动 范 围 差 异 大, 表 明 门 脉 高 压 组 大 鼠 门 静 脉 处 于 高 周 向 应 力 状 态 下. 也 有 研 究 发 现 门 脉 高 压 时, 门 脉 高 应 力 状 态 使 门 静 脉 内 外 壁 应 力 分 布 不 一 致, 导 致 内 外 壁 生 长 不 均 匀, 内 壁 细 胞 的 生 长 速 度 大 于 外 壁 细 胞 的 生 长 速 度, 造 成 内 壁 周 向 应 变 大 于 外 壁, 内 壁 的 残 余 应 力 增 大, 张 开 角 相 应 增 大 [15]. 由 此 可 知 血 管 内 部 微 观 结 构 重 排 可 引 起 残 余 应 力 的 改 变, 残 余 应 力 一 旦 改 变 势 必 影 响 承 载 对 象 - 管 壁 组 织 细 胞 学 的 活 性, 引 起 管 壁 结 构 成 分 和 功 能 发 生 变 化, 最 终 导 致 周 向 应 力 在 血 管 壁 的 分 布 异 常. 这 种 正 反 馈 调 节 可 能 是 门 脉 高 压 症 并 发 恶 性 循 环 的 原 因 之 一. 总 之, 本 实 验 通 过 对 门 静 脉 超 微 结 构 及 生 物 力 学 特 性 的 研 究, 结 果 表 明 肝 内 型 门 脉 高 压 时, 门 静 脉 超 微 结 构 存 在 异 常 重 构 管 壁 顺 应 性 下 降, 门 静 脉 轴 向 及 周 向 处 于 高 应 力 状 态. 门 静 脉 管 壁 这 种 重 构 及 力 学 异 常 分 布, 为 我 们 从 生 物 力 学 角 度 揭 示 门 脉 高 压 病 理 机 制 提 供 新 思 路 ; 同 时 对 门 静 脉 微 观 成 分 及 顺 应 性 的 研 究 可 以 为 人 工 血 管 移 植 提 供 力 学 依 据, 提 高 血 管 移 植 成 功 率, 减 少 远 期 不 良 并 发 症. 4 参 考 文 献 1 Zekanovic D, Ljubicic N, Boban M, Nikolic M, Delic-Brkljacic D, Gacina P, Klarin I, Turcinov J. Doppler ultrasound of hepatic and system hemodynamics in patients with alcoholic liver cirrhosis. Dig Dis Sci 2010; 55: [PMID: DOI: /s ] 2 张 潭, 宇 雪 豹, 秦 艳 娟, 吴 小 微, 范 文 涛. 肝 硬 化 患 者 门 静 脉 血 流 动 力 学 彩 色 多 普 勒 超 声 检 测 分 析. 中 国 中 西 医 结 合 消 化 杂 志 2013; 23: 贺 细 菊, 黄 铁 柱. 门 静 脉 高 压 症 对 肝 内 外 相 关 血 管 形 态 结 构 及 生 物 力 学 特 性 的 影 响. 中 国 临 床 解 剖 学 杂 志 2008; 26: 邓 鑫, 吴 发 胜, 梁 健. 肝 宁 方 对 肝 硬 化 门 脉 高 压 生 物 力 学 的 影 响. 医 学 信 息 2011; 24: 梁 扩 寰, 李 绍 白. 门 静 脉 高 压 症. 北 京 : 人 民 军 医 出 版 社, 1999: 张 宗 棨, 汤 松 伟, 朱 樑, 吴 国 强, 姜 宗 来, 施 斌. 肝 前 型 门 静 脉 高 压 兔 门 脉 系 统 血 管 应 力 的 研 究. 生 物 医 学 工 程 学 杂 志 2008; 25: Reneman RS, Arts T, Hoeks AP. Wall shear stress-- an important determinant of endothelial cell function and structure--in the arterial system in vivo. Discrepancies with theory. J Vasc Res 2006; 43: [PMID: DOI: / ] 8 Cunningham KS, Gotlieb AI. The role of shear stress in the pathogenesis of atherosclerosis. Lab Invest 2005; 85: 9-23 [PMID: DOI: / labinvest ] 9 李 运 辉, 褚 海 波, 徐 永 波, 王 涛, 王 国 华. 曲 张 大 隐 静 脉 管 壁 病 理 改 变 与 临 床 病 期 的 关 系. 实 用 医 药 杂 志 2009; 26: Kong X, Han B, Wang H, Li H, Xu W, Liu W. Mechanical properties of biodegradable small-diameter chitosan artificial vascular prosthesis. J Biomed Mater Res A 2012; 100: [PMID: DOI: /jbm.a.34136] 11 Cahill PA, Redmond EM, Sitzmann JV. Endothelial dysfunction in cirrhosis and portal hypertension. Pharmacol Ther 2001; 89: [PMID: DOI: /S (01) ] 12 Menon KV, Kamath PS. Regional and systemic hemodynamic disturbances in cirrhosis. Clin Liver Dis 2001; 5: , viii [PMID: DOI: / S ] 13 Fung YC, Liu SQ. Strain distribution in small blood vessels with zero-stress state taken into consideration. Am J Physiol 1992; 262: H544-H552 [PMID: ] 14 宋 玉 祥, 陈 峰, 熊 江, 郭 伟, 潘 秀 颉, 贾 森 皓, 刘 杰. 氢 气 饱 和 生 理 盐 水 对 腹 主 动 脉 瘤 大 鼠 主 动 脉 残 余 应 力 的 影 响. 中 国 修 复 重 建 外 科 杂 志 2013; 27: Liu SQ. Focal expression of angiotensin II type 1 receptor and smooth muscle cell proliferation in the neointima of experimental vein grafts: relation to eddy blood flow. Arterioscler Thromb Vasc Biol 1999; 19: [PMID: DOI: /01. ATV ] 编 辑 郭 鹏 电 编 闫 晋 利 同 行 评 价 本 文 进 一 步 探 讨 了 肝 内 型 门 脉 高 压 大 鼠 门 静 脉 生 物 力 学 特 性 及 力 学 特 点, 为 后 续 治 疗 及 血 管 移 值 创 造 条 件, 证 据 充 分, 引 用 合 理, 研 究 具 有 一 定 新 颖 性.
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