2018 年 3 月第 20 卷第 3 期中国现代中药 ModChinMed Mar 2018 Vol 20 No 3 食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一, 我国食管癌发病率和病死率均居世界之首 5 年生存率仅为 20% ~30%, 死亡率居恶性肿瘤的第四位 [1] 顺铂 (cis Dichlorodi

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1 年 月 第 卷 第 期 中国现代中药 M C M M V N 基础研究 启膈化痰合剂对顺铂治疗小鼠食管癌的减毒增效作用 周青 孙长侠 孙斐 荀丽英 聊城市中医医院 山东 聊城 山东中医药大学 山东 济南 摘要 目的 探讨启膈化痰合剂 QGHT 对顺铂 DDP 治疗小鼠食管癌的增效减毒作用 方法 建立小鼠 E 皮下移 植 瘤 模 型 随 机 分 为 模 型 组 DDP对 照 组 m DDP m QGHT低 剂 量 组 m DDP m QGHT中剂量组 m DDP m QGHT m 高剂 量组 另设正常对照组 连续给药 给药结束后 摘眼球取血并处死小鼠 剥离瘤块并称重 计算抑瘤率 分 离脾脏并称重 计算脾脏指数 取腹腔巨噬细胞 提前免疫 计算鸡红细胞吞噬率 制备脾细胞悬液 测定 NK细 胞活性 MTT法检测 C A诱导的小鼠脾脏 T淋巴细胞增殖 尾尖取血进行 WBC计数 取骨髓计数骨髓有核细胞 检测肿瘤组织中 数 w κbα及 NFκB的表达水平 结果 QGHT与 DDP联合应用可显著提高对 E 荷瘤小鼠的抑瘤作用 P 或 P 明显改善 DDP化疗所致的脾脏指数下降 WBC及骨髓有核细胞数的减 少 脾脏 T淋巴细胞增殖抑制等不良反应 P 或 P 显著提高 E 荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能 和 NK细胞的杀伤活性 P 显著降低肿瘤组织中的 κbα及 NFκB的 水 平 结 论 QGHT对 DDP治 疗 E 荷瘤小鼠具有减毒增效作用 关键词 启膈化痰合剂 食管癌 顺铂 增效减毒 A A m E Q C m w D m m E Tm M ZHOUQ UNC UNF XUNL L T C M H L C U T C M J C A O T m Q QGHT m w D m m DDP E m m M T E m m m w M w m m w DDP m QGHT DDP m m A m w m A m m w m w w m MTT w C A T P m w k w T NK w m w k w WBC B w k m w NFκBw w R QGHT m w DDP κbα m P DDP WBC m w P P m T P P NK NFκB m P κbα m C QGHT m w DDP m E m m K w Q m m 基金项目 山东省重点产业关键技术项目 通信作者 荀丽英 副教授 研究方向 心脑血管病机制 T E m m

2 2018 年 3 月第 20 卷第 3 期中国现代中药 ModChinMed Mar 2018 Vol 20 No 3 食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一, 我国食管癌发病率和病死率均居世界之首 5 年生存率仅为 20% ~30%, 死亡率居恶性肿瘤的第四位 [1] 顺铂 (cis Dichlorodiamineplatinum,DDP) 是临床用于肿瘤化疗的常用药物, 但它引起的骨髓抑制 免疫低下等不良反应严重降低了肿瘤患者的生存质量 [2 3], 限制了其在临床的使用 启膈方是由 医学心悟 治疗噎嗝的启膈散化裁而来, 是聊城市中医医院治疗食管癌 胃癌及术后患者放 化疗的常用辅助用药, 并且取得了较好的临床疗效, 可改善食管癌 胃癌患者吞咽不顺 胃脘胀痛 纳差 泛吐痰涎等症状 ; 对于食管癌 胃癌术后患者及放化疗患者可改善胃运动功能, 增加食欲, 减轻烧心 吐酸, 减少癌细胞转移, 延长生存时间 [4] 但启膈化痰合剂在荷瘤动物体内对顺铂的增效减毒作用尚未见报道 本研究采用小鼠 Eca109 皮下移植瘤模型对启膈化痰合剂的增效减毒作用进行研究, 旨在为启膈化痰合剂的临床应用提供实验依据 1 材料启膈化痰合剂 (QGHT) 由聊城市中医医院提供 ( 批号 : , 方药组成 : 瓜蒌 浙贝母 清半夏 橘红 半枝莲 蚤休 白术 生薏苡仁 露蜂房 砂仁 酒大黄 黄连 胆南星 丹参等 ); 顺铂注射液 ( 江苏豪森制药股份有限公司 );CytoTox96 非放射性细胞毒性检测试剂盒 [ 普洛麦格 ( 北京 ) 生物技术有限公司 ]; 兔抗 NFκB 及兔抗 p IκBα(Santa cruze;sds PAGEGelKit),BCA 蛋白定量试剂盒 / 高灵敏度化学发光检测试剂盒 ( 康为世纪生物科技有限公司 );RPMI1640 培养基 ( 美国 Gibco 公司 ); 超净工作台 ( 苏州净化设备有限公司 );CO 2 培养箱 ( 美国 Thermo 公司 ) K562 细胞及食管癌 Eca109 细胞 ( 中国医学科学院基础医学研究所细胞中心 ) 鸡红细胞及绵羊红细胞 ( 北京信利来生物科技有限公司 ) ICR 小鼠,SPF 级,, 体质量 18~20g, 购自北京维通利华实验动物技术有限公司, 许可证号 SCXK( 京 ) 方法 2 1 肿瘤模型的建立将 Eca109 细胞以 ml -1 的浓度接种于小鼠右前肢皮下, 每只注射 0 2mL 细胞悬液 动物分组及给药接种 Eca109 细胞 24h 后将小鼠随机分为模型组 DDP 对照组 (2mg kg -1 ),DDP(2mg kg -1 )+ QGHT 低剂量组 (50mg kg -1 ) DDP(2mg kg -1 )+ QGHT 中剂量组 (100mg kg -1 ) DDP(2mg kg -1 )+ QGHT(200mg kg -1 ) 高剂量组, 每组 10 只, 另设正常对照组 10 只 正常组 模型组小鼠腹腔注射 0 9% 氯化钠溶液 10mL kg -1, 每天 1 次 ;DDP 组腹腔注射 DDP2mg kg -1, 每 2d1 次 ;DDP+ QGHT 低剂量组 DDP+QGHT 中剂量组 DDP+ QGHT 高剂量组, 腹腔注射 DDP2mg kg -1, 每 2d 1 次, 同时分别灌胃给药 mg kg -1, 每天 1 次 以上各组连续给药 14d 2 3 启膈化痰合剂联合顺铂对 Eca109 荷瘤鼠抑瘤率及脏器指数的影响 末次给药 24h 后, 小鼠脱颈椎处死, 剥离瘤块并称取瘤质量, 按公式 (1) 计算抑瘤率 ; 同时剥离脾脏称质量, 按公式 (2) 计算脾脏指数 抑瘤率 =( 模型组平均瘤质量 - 治疗组平均瘤质量 )/ 模型组平均瘤质量 100% (1) 脏器指数 = 免疫器官质量 (mg)/ 体质量 (g)(2) 2 4 启膈化痰合剂联合顺铂对 Eca109 荷瘤小鼠外周血 WBC 数及骨髓有核细胞数的影响 小鼠处死前一天, 末次给药 1h 后, 尾尖取血 10μL 置于 1 5mL 的 EP 管中, 用 3% 的稀醋酸稀释, 待红细胞充分裂解后于血细胞计数板上计数 末次给药 24h 后, 小心剥离右侧股骨, 吸取 0 5mLHank s 液, 通过注射器针头反复冲洗骨髓, 收集洗液, 用 3% 的稀醋酸稀释 10 倍后在显微镜下计数骨髓有核细胞数 2 5 启膈化痰合剂联合顺铂对 Eca109 荷瘤小鼠腹腔 [5] 巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响 于给药第 10d 小鼠腹腔注射 2%(V/V) 的绵羊红细胞悬液,0 2mL/ 只 于末次给药 24h 后处死小鼠, 每只小鼠腹腔注射等量的 Hank s 液 ( 含 5% FBS), 轻揉腹部并吸取腹腔洗液 将腹腔洗液与等量 1% 的鸡红细胞悬液轻轻吹打混匀, 滴于玻片上并推平, 于 37 培养箱中孵育 30min 孵育结束后冲洗玻片并用甲醇进行固定 最后用 Giemsa 染液染色 10min, 染色结束后玻片用蒸馏水冲洗玻片并晾干 油镜下观察吞噬情况并按公式 (3) 计算吞噬率,

3 2018 年 3 月第 20 卷第 3 期中国现代中药 ModChinMed Mar 2018 Vol 20 No 3 共计数 100 个巨噬细胞中吞噬鸡红细胞的细胞数目 吞噬率 =( 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数 / 计数的巨噬细胞总数 ) 100% (3) 2 6 启膈化痰合剂联合顺铂对 Eca109 荷瘤小鼠 NK 细胞活性的影响末次给药 24h 后小鼠脱颈椎处死,NK 细胞活性测定按照 CytoTox96 非放射性细胞毒性检测试剂盒说明操作进行检测 即无菌取脾, 常规制备脾细胞悬液并裂解红细胞后, 调整脾细胞浓度为 个 ml -1 ; 实验前一天将 K562 细胞进行传代培养 使用时将细胞浓度调整为 个 ml -1 反应孔加入 K562 细胞和脾细胞悬液各 50μL( 效靶比 50 1), 轻轻吹匀后加入 U 型 96 孔培养板 ; 靶细胞自然释放孔则加入 K562 细胞和培养液各 50μL; 靶细胞最大释放孔加入 K562 细胞和裂解液各 50μL; 上述各项设 5 个平行复孔, 于 5% CO 2 培养箱中 37 条件下培养 4h, 离心后, 轻轻吸取 50μL 上清液置 96 孔板中, 加入底物混合物 50μL, 振摇混匀后于避光条件下室温孵育 30min, 最后加入 50μL 终止液终止反应, 在酶标仪上于 490nm 处测定吸光度 (A) 值, 按公式 (4) 计算 NK 细胞活性 NK 细胞活性 =(A 反应孔 -A 自然释放孔 )/(A 最大释放孔 - A 自然释放孔 ) 100% (4) 2 7 启膈化痰合剂联合顺铂对 Eca109 荷瘤小鼠脾脏 T 淋巴细胞增殖的影响末次给药 24h 后, 在无菌环境下取脾, 常规制备脾细胞悬液并调整脾细胞浓度为 个 ml -1, 取 300μL 加入 48 孔板中 加入等量的 ConA 液使 ConA 的终质量浓度为 9μg ml -1, 将培养板置含 5% CO 2 的孵箱中于 37 培养 44h, 培养结束后加入 30μL 质量浓度为 5mg ml -1 的 MTT(0 9% 氯化钠溶液配制 ), 继续培养 4h 4h 后, 小心吸取 240μL 上清液弃去, 加入 240μL 细胞裂解液, 置 5% 的 CO 2 孵箱中于 37 过夜培养, 于 570nm 波长处测定吸光度 (A) 值 2 8Westernbloting 分析取肿瘤组织约 100mg, 剪碎, 加入 1mLRIPA 裂解液并用匀浆器匀浆充分裂解肿瘤组织,12000g (4 ) 离心 10min, 收集上清液, 用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度并调整各组蛋白至相同蛋白浓度 将蛋白与 5 SDS PAGE 蛋白上样缓冲液以 4 1 的比例混合, 沸水煮 10min 取 20μL 样品进行 SDS PAGE 电泳, 并转于 PVDF 膜上 用含 5% 脱脂牛奶的 TBST 液封闭 2h 加入兔抗 NFκB 兔抗 P IκBα(1 300 稀释 ) 置于 4 冰箱中孵育过夜, TBST 洗涤 3 次, 每次 15min 用山羊抗兔二抗 ( 稀释 ) 孵育 1h 后 TBST 洗涤 3 次, 每次 10min 使用高灵敏度化学发光检测试剂盒进行显影, 并用 Image J 软件分析各蛋白相对表达量 2 9 统计学方法采用 SPSS17 0 统计软件进行单因素方差分析, 比较组间差异性, 数据以 ( x±s) 表示,P<0 05 代表差异有统计学意义 3 结果 3 1 启膈化痰合剂对 Eca109 荷瘤小鼠抑瘤率的影响表 1 结果显示, 与模型组相比, 各给药组均有明显的抑瘤作用 (P<0 01), 其中 DDP+QGHT 中剂量组 DDP+QGHT 高剂量组的抑瘤率分别为 60 74% 和 58 92%, 明显优于单用 DDP 组 (P< 0 01), 表明启膈化痰合剂中 高剂量能明显增强 DDP 的抑瘤作用 表 1 启膈化痰合剂联合顺铂给药对 Eca109 荷瘤小鼠抑瘤率的影响 ( x±s,n=10) 组别 动物 / 只 空白组 10 DDP QGHT 瘤重 /g 模型组 ±0 56 抑瘤率 (%) DDP 组 ± DDP+QGHT 低 ± DDP+QGHT 中 ±0 25 ## DDP+QGHT 高 ±0 20 ## 注 : 与模型组比较, P<0 01, P<0 05; 与 DDP 组比较, ## P< 0 01, # P< 启膈化痰合剂联合顺铂给药对 Eca109 荷瘤小鼠免疫器官指数 外周血白细胞计数 骨髓有核细胞数的影响 表 2 结果显示, 与模型对照组比较,DDP 组小鼠的脾脏指数显著降低, 外周血 WBC 数及骨髓有核细胞数显著减少 (P<0 01) 与单用 DDP 组小鼠比较, DDP+QGHT 中剂量组 DDP+QGHT 高剂量组荷瘤小鼠脾脏指数 外周血白细胞数 骨髓有核细胞数显著增加, 差异具有统计学意义 (P<0 01,P<0 05) 285

4 2018 年 3 月第 20 卷第 3 期中国现代中药 ModChinMed Mar 2018 Vol 20 No 3 表 2 启膈化痰合剂联合顺铂给药对免疫器官指数 外周血白细胞计数 骨髓有核细胞计数的影响 ( x±s,n=10) 组别 动物 / 只 DDP QGHT 脾脏指数 WBC( 10 6 )/ 个 ml -1 骨髓有核细胞计数 ( 10 6 )/ 个 空白组 ± ± ±3 84 模型组 ± ± ±2 51 DDP 组 ± ± ±1 71 DDP+QGHT 低 ± ± ±3 01 DDP+QGHT 中 ±1 49 # 12 48±3 47 # 9 04±4 37 ## DDP+QGHT 高 ±1 81 # 19 01±5 22 ## 9 34±3 59 ## 注 : 与空白对照组比较, P<0 01, P<0 05; 与模型组比较, P<0 01, P<0 05; 与 DDP 组比较, ## P<0 01, # P<0 05; 下同 3 3 启膈化痰合剂对 Eca109 细胞荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响表 3 结果显示, 小鼠接种 Eca109 后, 腹腔巨噬细胞的吞噬率明显下降 (P<0 01) DDP 组小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬率进一步降低, 而 DDP+QGHT 中剂量组 DDP+QGHT 高剂量组小鼠巨噬细胞的吞噬率与 DDP 组比较, 显著升高 (P<0 01) 表 3 启膈化痰合剂联合顺铂给药对 Eca109 荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响 ( x±s,n=10) 组别 动物 / 只 吞噬百分率 (%) DDP QGHT 空白组 ±3 98 模型组 ±2 54 DDP 组 ±2 16 DDP+QGHT 低 ±3 57 DDP+QGHT 中 ±5 25 ## DDP+QGHT 高 ±4 99 ## 3 4 启膈化痰合剂对 Eca109 细胞荷瘤小鼠 NK 细胞活性的影响表 4 结果显示, 与模型组相比,DDP 组小鼠的 NK 细胞活性显著降低 (P<0 01) DDP+QGHT 低剂量组 DDP+QGHT 中剂量组 DDP+QGHT 高剂量组小鼠的 NK 细胞活性较 DDP 组显著升高 (P< 0 01,P<0 05) 3 5 启膈化痰合剂联合顺铂给药对荷瘤小鼠脾脏 T 淋巴细胞增殖的影响表 5 结果显示, 与空白对照组比较, 模型组荷瘤小鼠脾脏 T 淋巴细胞的增殖没有明显变化 而与模型组比较,DDP 组荷瘤小鼠脾脏 T 淋巴细胞的增殖有明显下降 DDP+QGHT 中剂量组 DDP+ QGHT 高剂量组与单用 DDP 组比较, 可显著提升脾 286 脏 T 淋巴细胞的增殖能力 (P<0 01,P<0 05) 表 4 启膈化痰合剂联合顺铂给药对 Eca109 荷瘤小鼠 NK 细胞活性的影响 ( x±s,n=10) 组别 动物 / 只 NK 细胞活性 DDP QGHT 空白组 ±6 03 模型组 ±9 01 DDP 组 ±6 19 DDP+QGHT 低 ±10 02 # DDP+QGHT 中 ±9 31 # DDP+QGHT 高 ±11 21 ## 表 5 启膈化痰合剂联合顺铂给药对 Eca109 荷瘤小鼠 脾脏 T 淋巴细胞增殖的影响 ( x±s,n=10) 组别 动物 / 只 A570 DDP QGHT 空白组 ±0 44 模型组 ±0 29 DDP 组 ±0 11 DDP+QGHT 低 ±0 87 DDP+QGHT 中 ±0 55 # DDP+QGHT 高 ±0 79 ## 3 6 启膈化痰合剂联合顺铂对 NFκB 信号通路的影响与模型组比较,DDP+QGHT 中剂量组 DDP+ QGHT 高剂量组荷瘤小鼠肿瘤组织中的 p IκBα NFκB 水平显著降低 (P<0 01), 而单用 DDP 组荷瘤小鼠肿瘤组织中的 NFκB 水平没有显著性变化 p IκBα 及 NFκB 在 DDP+QGHT 中剂量组 DDP+ QGHT 高剂量组荷瘤小鼠肿瘤组织中的表达水平与单用 DDP 组比较, 同样显著降低 (P<0 01) 见图 1

5 年 月 第 卷 第 期 中国现代中药 M C M M V N 归肺 脾经 能理气宽中 燥湿化痰 丹参 味苦 性微寒 归 心 肝 二 经 能 清 心 除 烦 凉 血 消 痈 胆南星 清热化痰 半枝莲 重楼 黄连清热解毒 露蜂房 解毒 共为佐药 旋覆花降逆化痰 降逆 止呕 酒大黄活血祛瘀 为使药 启膈方临床应用 取得了一定的成效 但其免疫调节作用及对顺 铂的增效减毒作用尚缺乏实验数据支持 本实验采 用小鼠的 E 皮下移植瘤模型 研究启膈化痰合 剂的免疫调节作用及对顺铂的增效减毒作用 实验 结果表明 小鼠接种 E 瘤株以后 会出现腹腔 巨噬细胞吞噬功能下降 NK细胞活性降低等免疫抑 制状态 这与文献报道基本一致 给予启膈化痰 注 A κbα及 NFκB蛋白表达 B κbα及 NFκB蛋白相对表 达量 模型组 DDP组 DDP QGHT低剂量组 DDP DDP QGHT高剂量组 QGHT中剂量组 图 启膈化痰合剂联合顺铂对 E 荷瘤小鼠肿瘤 组织中的 κbα NFκB水平的影响 合剂治疗后 可提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力以及 提高 NK细胞活性 因此 可以提高机体对肿瘤细 胞的杀伤能力 在启膈化痰合剂与顺铂联合应用的 实验结果表明 DDP的抑瘤效果显著 但是引起了 免疫器官指数下降 外周血 WBC数 骨髓有核细胞 讨论 数下降 T淋巴细胞增殖抑制等免疫功能低下状态 启膈化痰合剂与 DDP联合应用 可 显 著 提 高 对 小 鼠 食管癌是严重威胁我国人民生命健康的疾病之 一 大多数食管癌确诊时已失去手术机会 因此 对晚期食管癌的治疗只能采用放疗 化疗相结合模 式 但大多数化疗药物缺乏肿瘤细胞特异性 在 杀伤肿瘤细胞的同时也对包括免疫细胞在内的分裂 E 实体瘤的抑瘤作用 启膈化痰合剂联合 DDP 治疗组的抑瘤率要显著高于单用 DDP组 启膈化痰 合剂与 DDP联合应用对 DDP引起的脾脏指数 外周 血 WBC数 骨髓有核细胞数下降及 T淋巴细胞增殖 抑制等免疫功能低下状态也具有一定的改善作用 增殖旺盛的正常细胞具有杀伤作用 产生骨髓抑制 同时 启膈化痰合剂联合 DDP可显著抑制 NFκB通 影响 T淋巴细胞 NK细胞 巨噬细胞等免疫细胞正 路 以上结果显示 启膈化痰合剂对荷瘤小鼠的免 常的增殖活化 从而引起机体免疫功能的抑制 严 疫功能 具 有 一 定 的 调 节 作 用 并 可 对 抗 化 疗 药 物 重影响到恶性肿瘤的治疗 因此 提高机体免疫 DDP所导致的机体免疫功能的抑制 使机体的免疫 功能 增强化疗药物疗效 降低其不良反应 尤其 功能得到恢复 提高机体的抗肿瘤作用 该研究为 是预防治疗患者化疗后出现的免疫功能抑制 是有 启膈化痰合剂临床应用提供了实验数据支持 效改善食管癌患者生存条件的关键 启膈化痰合剂甘寒濡润 是 在 古 方 的 基 础 上 根据多年临床应用体会 按照中医理法方药和君臣 佐使配伍而成 方中瓜蒌 甘 微苦 性寒 归肺 胃 大肠经 具有清热化痰 宽胸散结 润肠通便 参考文献 陈万青 郑荣寿 曾红梅 等 年中国恶性肿瘤发病 中国肿瘤 和死亡分析 J 王福香 朴金霞 苏清秀 等 不同剂量顺铂周化疗治疗 功能 为君药 浙贝母 味苦 性寒 归肺 心经 吉林大学学报 ⅡB期 ⅣA期宫颈癌的疗效评价 J 能清热化痰止咳 解毒散结 消 痈 清 半 夏 味 辛 医学版 性温 归脾 胃 肺经 能燥湿化痰 白术 味苦 甘 性温 归 脾 胃 经 能 补 气 健 脾 燥 湿 利 水 为臣 药 生 薏 苡 仁 味 甘 淡 性 凉 归 脾 胃 肺经 能利水渗湿 健脾止泻 除痹 排脓 解毒 散结 砂仁 味辛 性温 归脾 胃 肾经 能化 湿开胃 温脾止泻 理气 橘红 味辛 苦 性温 刘应荣 西药顺铂的药理作用和临床应用效果 J 临床 医药文献电子杂志 李晶 刘亚娴 卢付河 等 启膈方抑制小鼠前胃癌肺转 移的实验研究 J 四川中医 陈忠华 注射用核糖核酸对小鼠免疫功能的影响 J 药 学实践杂志 下转第 页

6 年 月 第 卷 第 期 中国现代中药 M C M M V N 表 不同产地南五味子药材中木脂素类成分的含量测定结果 m 样品编号 五味子醇甲 五味子醇乙 五味子酯甲 五味子酯乙 五味子酚 安五脂素 五味子甲素 总量 平均值 R D 注 表示未检测到 含量测定项分别选择目前报道的与南五味子发挥 传统功效密切相关的 个木脂素类成分作为指标性成 分 可较为全面地反映南五味子药材的内在质量 含量测定结果显示不同产地南五味子药材中 个木脂 D值均大于 含量差异较大 素类成分含量的 R 提示在生产过程中应作为重点指标加以控制 本研究所建立的南五味子药材指纹图谱相似度 京 中国医药科技出版社 杨文潮 杨洁 段金廒 等 南五味子中氨基酸类成分分 析评价 J 中药材 杨洁 段金廒 李国龙 等 南五味子中核苷类成分分析 评价 J 药物分析杂志 杨洁 段金廒 李国龙 等 不同产地南五味子中木脂素 中国中药杂志 分析研究 J 胡竟一 白筱璐 雷玲 等 南五味子总木脂素的催眠作 大于 所建立的同时测定 个指标的含量测定 用及对脑单胺类神经递质的影响 J 中药药理与临床 方法灵敏度高 专属性强 二者结合可有效杜绝为 达到某一质量标准而人为添加某一成分的现象 为 南五味子药材质量标准的提升提供了支撑 李强 杜思邈 张忠亮 等 中药指纹图谱技术进展及未 中草药 来发展方向展望 J 王领弟 臧亚茹 潘伟东 等 基于指纹图谱结合多元统 参考文献 国家药典委员会 中华人民共和国药典 一部 北 计分析 评 价 山 楂 叶 质 量 差 异 性 J 中 国 现 代 中 药 收稿日期 檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿 上接第 页 尤静 朱广迎 食管癌放化疗相关进展 J 中国癌症防 治杂志 任维维 米登海 李征 等 非小细胞肺癌紫杉醇类联合 顺铂同步或序贯放化疗对比的 M 分析 J 中华肿瘤 防治杂志 王静 李峻岭 石远凯 等 吉西他滨联合顺铂在非小细 胞肺癌辅助化疗中的应用 J 中国全科医学 李晶 李娜 刘亚娴 等 启膈方对小鼠前胃癌转移相关 因子的影响 J 河北中医 李晶 李娜 刘亚娴 等 启膈方对人胃癌 MGC细胞增 殖 运动能力及分泌 MMP MMP 酶活性的影响 J 中国中医药信息杂志 李晶 刘 亚 娴 邢 彦 霞 等 启 膈 方 对 人 食 管 癌 细 胞 株 EC 人胃癌细胞株 MGC黏附的影响 J 中国中医基 础医学杂志 刘亚娴 李际君 付小梅 等 启膈方对小鼠免疫功能的 影响 J 中国实验方剂学杂志 收稿日期

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