間 本 省 文 蛤 產 卵 期 由 其 天 然 採 苗 期 推 測 可 能 在 農 曆 四 至 六 月 而 以 夏 季 最 盛 其 人 工 繁 殖 流 程 可 分 成 幾 個 步 驟 : ( 一 ) 繁 殖 前 之 準 備 ( 孵 化 池 清 洗 及 孵 化 設 施 之 檢 查 水 質 處 理 稚

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1 文 蛤 的 種 苗 生 產 雪 嘉 地 區 孟 耍 皇 具 類 繁 養 殖 拭 俯 會 每 陳 鴻 議 何 雲 達 一 前 言 文 蛤 (Meretrix fusaria) 屬 二 枚 貝 斧 足 綱 英 文 名 hard clam. 本 省 俗 稱 粉 燒 蛤 仔 燒 仔 車 甘 仔 外 型 呈 卵 三 角 型 型 態 色 彩 斑 紋 隨 環 境 不 同 而 有 差 異 故 種 類 辨 識 不 易 依 記 載 本 省 約 有 文 蛤 朝 鮮 文 蛤 中 國 文 蛤 台 灣 文 蛤 簾 文 蛤 等 五 種 而 其 中 以 文 蛤 為 主 要 養 殖 對 象 年 間 水 試 所 台 西 分 所 參 考 國 內 外 相 關 資 料 將 文 章 含 種 貝 催 熟 採 卵 採 精 授 精 而 孵 化 成 功 1981 年 民 間 業 者 首 次 推 出 沉 著 稚 貝 苗 人 工 苗 始 進 入 市 場 年 間 在 彰 化 雲 林 嘉 義 沿 海 各 種 規 模 之 人 工 繁 殖 場 如 雨 後 春 筍 般 的 設 立 人 工 苗 在 市 場 上 完 全 被 接 受 至 1985 年 人 工 苗 幾 乎 已 供 過 於 求 文 蛤 魚 坦 養 殖 面 積 亦 達 顛 峰 二 十 年 來 文 蛤 人 工 繁 殖 技 術 大 致 已 確 立 然 存 活 率 仍 然 不 穩 定 有 很 多 問 題 有 待 突 破 及 努 力 可 見 其 仍 二 文 蛤 人 工 繁 殖 圖 1. 文 蛤 (Meretrix fusaria) 81

2 間 本 省 文 蛤 產 卵 期 由 其 天 然 採 苗 期 推 測 可 能 在 農 曆 四 至 六 月 而 以 夏 季 最 盛 其 人 工 繁 殖 流 程 可 分 成 幾 個 步 驟 : ( 一 ) 繁 殖 前 之 準 備 ( 孵 化 池 清 洗 及 孵 化 設 施 之 檢 查 水 質 處 理 稚 貝 育 苗 池 之 0 整 理 和 種 貝 垮 育 與 成 熟 度 之 試 驗 )o( 二 ) 種 貝 處 理 ( 吐 砂 和 洗 淨 ) ( 三 ) 0 採 卵 採 精 授 精 ( 物 理 刺 激 化 學 刺 激 ) ( 四 ) 洗 卵 ( 五 ) 孵 化 ( 六 ) 0 浮 游 幼 生 之 管 理 ( 投 餌 水 質 管 理 鏡 檢 ) ( 七 ) 沈 著 稚 貝 之 管 理 ( 投 餌 水 質 管 理 鏡 檢 ) ( 一 ) 繁 殖 前 之 準 備 1. 孵 化 池 清 洗 及 孵 化 設 施 之 檢 查 一 定 要 清 洗 乾 淨 孵 化 池 可 分 硬 池 式 及 舖 砂 式 二 種 將 污 物 減 少 至 最 低 不 論 何 種 型 式 繁 殖 前 以 免 繁 殖 期 間 影 響 水 質 及 沈 底 存 活 率 而 舖 砂 式 的 底 砂 應 選 擇 粒 徑 細 者 且 不 合 泥 沙 及 乾 淨 者 最 佳 池 壁 要 保 持 平 滑 若 水 泥 漆 有 脫 落 則 要 重 新 補 刷 以 兔 對 受 精 卵 造 成 機 械 損 傷 在 孵 化 設 施 方 面 應 注 意 供 氣 動 力 及 給 排 水 等 系 統 是 否 有 有 問 題 供 氣 系 統 方 面 必 須 檢 查 打 氣 機 有 否 故 障 管 路 有 否 漏 氣 打 氣 石 是 否 分 佈 平 均 調 節 閥 有 否 故 障 以 防 孵 化 期 問 供 氣 系 統 出 問 題 影 響 孵 化 率 及 活 存 率 在 動 力 系 統 方 面 要 檢 查 發 電 機 有 否 正 常 油 是 否 充 足 以 兔 停 電 造 成 損 失 給 排 水 系 統 方 面 要 檢 查 排 水 管 是 否 有 阻 塞 或 漏 水 進 水 管 路 閉 關 是 否 正 常 另 外 在 大 量 繁 殖 時 用 人 工 投 餌 是 很 不 合 乎 成 本 白 色 因 此 可 視 各 場 經 費 自 行 設 計 一 套 給 餌 系 統 送 過 濾 2. 水 質 處 理 再 送 至 孵 化 池 將 藻 水 利 用 動 力 抽 文 蛤 苗 孵 化 用 水 鹽 度 適 宜 範 圍 在 %0 ' 必 須 經 過 濾 沈 澱 去 除 水 中 浮 游 動 物 並 讓 水 中 有 機 質 充 分 分 解 以 減 少 繁 殖 期 間 之 污 染 繁 殖 前 一 天 須 先 蓄 水 並 充 分 曝 氛 蓄 水 前 須 將 積 存 於 管 內 過 久 之 水 排 除 水 待 無 異 味 及 異 色 後 三 分 鐘 方 可 開 始 蓄 82

3 3 巳 蛤 的 穩 首 當 產 3. 沈 著 稚 貝 育 苗 池 之 整 理 由 於 文 蛤 苗 浮 游 期 約 在 7-10 天 後 即 行 沈 著 視 水 溫 而 定 此 稚 貝 育 苗 池 於 繁 殖 前 就 需 整 理 好 稚 貝 育 苗 池 之 底 質 以 純 細 海 砂 最 佳 且 愈 細 愈 好 如 呆 使 用 的 底 質 是 河 沙 貝 11 必 須 將 沙 中 之 雜 草 垃 圾 石 塊 用 文 蛤 採 收 機 清 除 因 並 將 其 中 之 大 量 泥 砂 儘 可 能 減 至 最 少 過 多 之 泥 砂 將 會 影 響 沈 著 稚 貝 之 活 動 及 生 長 池 底 整 平 後 必 須 先 行 試 水 檢 查 有 否 漏 水 及 保 水 4. 種 貝 垮 育 與 成 熟 度 之 試 驗 在 繁 殖 季 節 時 期 選 擇 殼 長 約 在 25 公 度 以 上 之 文 蛤 種 貝 一 般 在 每 年 3 4 月 至 10 月 間 皆 可 取 得 發 育 成 熟 之 種 貝 但 有 時 生 殖 巢 並 非 個 個 皆 成 熟 飽 滿 常 會 因 大 量 注 排 水 颱 風 下 兩 或 池 水 異 常 攪 動 等 等 自 然 或 人 為 因 素 於 池 中 自 然 排 卵 排 精 因 此 在 做 繁 殖 前 應 先 行 試 驗 其 成 熟 度 其 方 法 為 : (1) 逢 機 挑 選 粒 以 工 其 直 接 敲 破 使 軟 體 部 份 裸 露 在 斧 足 上 方 鼓 起 部 位 即 為 生 殖 巢 外 觀 雌 雄 不 易 分 辨 以 利 器 刮 開 生 殖 巢 取 少 許 抹 於 0 載 玻 片 上 以 40 倍 解 剖 顯 微 鏡 鏡 檢 精 卵 的 成 熟 度 ( 圖 2) (2) 取 2-3 斤 之 文 蛤 種 貝 進 行 排 卵 排 精 授 精 觀 察 排 卵 量 及 孵 化 率 定 是 否 使 用 良 好 環 境 如 餌 料 水 溫 等 如 生 殖 巢 成 熟 度 不 夠 飽 滿 促 進 其 成 熟 則 可 以 人 為 方 式 再 決 提 供 圖 2. 鏡 檢 精 卵 的 成 熟 度 圖 3. 採 卵 採 精 前 吐 砂 83

4 ( 二 ) 種 貝 處 理 水 決 定 繁 殖 用 之 種 貝 取 回 後 要 先 放 入 蓄 水 池 中 注 入 清 澈 海 讓 其 吐 砂 1 小 時 左 右 ( 圖 3) 以 減 少 誘 發 產 卵 排 精 期 間 蛤 之 排 泄 物 及 泥 砂 污 染 水 質 表 去 除 表 面 可 能 之 污 染 源 並 予 陰 乾 ( 三 ) 採 卵 採 精 及 授 精 文 吐 完 砂 後 的 文 蛤 要 以 清 水 沖 洗 外 再 進 行 分 籃 作 業 儘 量 不 要 重 疊 文 蛤 繁 殖 由 於 無 法 如 牡 蠣 一 樣 直 接 從 生 殖 巢 取 出 卵 和 精 子 再 加 以 人 工 授 精 且 又 因 從 外 觀 很 難 分 辨 出 雌 雄 因 此 採 卵 採 精 之 誘 發 皆 在 同 一 孵 化 池 中 進 行 據 研 究 指 出 二 枚 貝 於 產 卵 誘 發 前 以 低 溫 飼 育 處 理 半 日 以 上 可 提 高 誘 發 之 效 果 目 前 刺 激 文 蛤 排 精 之 方 法 有 化 學 刺 激 法 及 物 理 激 法 現 分 述 如 下 : 1. 化 學 刺 激 法 將 種 貝 置 入 孵 化 池 中 加 入 過 濾 海 水 至 淹 沒 表 殼 為 止 再 使 用 含 氧 % 之 氫 氧 化 錢 溶 液 N 之 氯 水 誘 導 排 卵 排 精 60 分 鐘 左 右 授 精 後 要 迅 速 換 水 2. 物 理 刺 法 文 法 控 制 有 效 當 量 濃 度 在 約 30 分 鐘 即 可 誘 發 產 卵 即 可 排 放 完 畢 使 用 化 學 藥 劑 誘 導 排 卵 排 精 物 理 刺 激 法 是 一 般 所 採 行 控 制 不 當 則 會 造 成 胚 胎 中 毒 發 育 畸 型 雖 然 其 排 卵 率 不 能 百 分 之 百 但 其 孵 化 率 較 化 學 法 為 高 畸 型 率 亦 較 少 常 用 的 方 法 為 : (1) 陰 乾 變 溫 刺 激 法 : 種 貝 吐 砂 洗 淨 後 置 於 陰 涼 處 陰 乾 小 時 然 後 放 入 預 先 增 溫 3-4 DC 的 孵 化 池 中 並 充 分 打 氣 約 分 後 即 開 始 排 精 排 卵 等 排 卵 量 足 夠 峙 即 可 取 出 種 貝 排 卵 量 之 多 寡 可 由 水 色 之 濁 度 或 或 用 燒 杯 取 樣 觀 測 卵 粒 數 判 斷 排 卵 量 此 法 排 卵 量 一 般 可 達 八 成 左 右 ( 圖 4) (2) 陰 乾 後 精 液 誘 導 法 : 此 法 即 將 種 貝 陰 乾 後 置 入 沒 有 升 溫 之 84

5 孵 化 池 中 充 分 打 氣 貝 排 卵 排 精 ( 圖 5) 取 通 量 的 精 液 加 入 孵 化 池 中 久 蛤 的 稽 苦 量 產 誘 導 種 此 法 一 般 是 要 在 雌 貝 相 當 成 熟 時 才 可 不 過 亦 可 和 陰 乾 變 溫 法 一 同 採 用 尤 其 在 加 溫 設 備 不 足 之 場 子 可 以 利 用 (1) 法 的 精 子 卵 子 在 (2) 法 進 行 誘 發 排 精 排 卵 刺 激 排 卵 排 精 後 之 種 貝 再 放 回 種 貝 池 繼 續 蓄 養 以 待 下 次 繁 殖 用 化 學 刺 激 法 和 物 理 刺 激 法 各 有 其 優 缺 點 用 化 學 法 時 其 時 效 快 排 卵 率 高 但 化 學 濃 度 不 易 掌 握 且 所 產 劣 質 卵 亦 多 孵 化 率 低 畸 型 率 高 一 有 疏 忽 可 能 導 致 全 池 畸 型 而 物 理 刺 激 法 則 是 操 作 簡 便 所 產 卵 質 優 良 孵 化 率 及 存 活 率 皆 高 惟 時 間 較 長 但 衡 量 優 缺 點 仍 以 物 理 刺 激 法 較 佳 圖 4. 陰 乾 變 溫 刺 激 法 圖 5. 陰 乾 後 精 液 誘 導 法 熟 度 不 足 精 排 卵 覆 刺 激 ( 四 ) 洗 卵 造 成 無 法 排 精 排 卵 之 原 因 可 能 為 :1. 雌 貝 雖 已 成 熟 無 法 先 排 精 遺 留 未 熟 之 精 卵 3. 亦 無 法 排 精 排 卵 喪 失 誘 引 雌 貝 排 卵 效 果 2. 但 雄 貝 成 已 經 自 然 排 採 卵 用 之 水 質 條 件 不 過 合 雖 經 反 因 為 文 蛤 雌 雄 種 貝 辨 識 不 易 因 此 排 卵 排 精 誘 發 皆 在 同 一 池 子 中 故 洗 卵 步 驟 常 被 忽 略 除 非 精 子 濃 度 太 高 如 需 進 行 洗 卵 其 方 法 為 停 止 打 氣 讓 受 精 卵 下 沈 後 使 用 鑽 孔 排 水 管 套 上 浮 游 生 物 網 將 上 層 未 受 精 之 卵 精 子 減 少 至 最 少 再 注 入 經 沈 85

6 澱 過 濾 處 理 過 的 乾 淨 海 水 進 行 孵 化 ( 五 ) 孵 化 文 蛤 受 精 卵 孵 化 時 間 因 水 溫 不 同 而 異 在 水 溫 28 精 至 孵 化 成 D 型 幼 蟲 約 小 時 卵 子 受 精 後 的 -20 分 鐘 左 右 뀀 C 下 自 受 一 極 體 出 現 40 分 鐘 左 右 分 裂 成 兩 個 細 胞 80 分 鐘 左 右 分 裂 成 8 個 細 胞 期 依 次 為 桑 權 期 原 腸 期 擔 輪 子 體 D 型 幼 蟲 ( 圖 6- 圖 13 ) 第 圖 6. 受 精 卵 圖 7. 極 體 出 現 圖 8. 二 細 胞 圈 9. 四 細 月 包 圖 10./ \ 細 且 包 圖 11. 原 腸 期 這 輩 骷 髏 圖 12. 擔 輪 子 期 圖 13. D 型 幼 蟲 圖 14. 沉 著 稚 貝 86

7 蛤 的 種 苦 受 產 文 蛤 在 原 腸 期 時 作 緩 慢 旋 轉 運 行 擔 輪 子 體 時 開 始 行 浮 游 生 活 受 精 卵 於 孵 化 期 間 打 氣 量 要 調 至 適 中 以 兔 打 氣 量 過 大 對 受 精 卵 造 成 機 械 性 損 傷 影 響 受 精 卵 之 孵 化 率 而 受 精 後 無 法 發 育 之 原 因 可 能 為 :1. 雄 貝 排 精 過 多 造 成 多 重 受 精 使 受 精 卵 無 法 分 裂 2. 雄 貝 排 精 過 多 造 成 水 質 惡 化 3. 種 貝 棲 息 於 高 水 溫 環 境 過 長 使 卵 子 過 熟 所 孵 化 出 之 胚 胎 成 畸 型 而 夭 折 ( 六 ) 浮 游 苗 之 飼 育 與 管 理 1. 飼 育 文 蛤 受 精 卵 孵 化 時 間 受 水 溫 之 影 響 很 大 在 28 뀀 C 下 從 受 精 卵 至 成 為 D 型 幼 生 約 12 小 時 正 常 孵 化 後 浮 游 苗 即 開 始 攝 餌 餌 料 以 5 微 米 -10 微 米 之 微 細 藻 類 為 佳 如 等 鞭 金 藻 (Isochrysis g α lbana) 擬 球 藻 (Nannochloropsis oculat α ) 海 水 綠 藩 等 投 餌 量 以 少 量 多 餐 為 原 則 而 投 餌 量 要 如 何 判 斷 呢? 在 此 提 供 一 簡 單 方 法 供 參 考 投 餌 量 以 池 水 出 現 投 餵 藻 水 之 顏 色 並 於 4 小 時 內 清 耗 完 為 準 ' 故 開 始 投 餌 時 量 不 可 太 多 需 緩 緩 的 增 加 投 餵 量 如 投 餌 量 過 多 文 蛤 幼 生 會 因 過 度 攝 食 而 沈 底 死 亡 或 分 泌 出 粘 液 將 餌 料 以 擬 糞 排 出 無 法 充 分 被 利 用 而 造 成 污 染 藻 水 來 源 不 論 是 純 種 培 養 或 者 是 天 然 藻 種 垮 養 引 用 時 皆 須 先 鏡 檢 及 微 米 港 網 過 濾 以 兔 引 用 到 老 化 死 亡 受 浮 游 動 物 原 生 動 物 污 染 或 粒 徑 太 大 之 藻 類 餌 料 生 物 技 與 採 兩 種 以 上 混 合 方 式 較 單 一 的 技 與 效 果 為 佳 因 單 一 餌 料 投 與 極 難 供 應 全 部 的 管 養 需 求 量 而 兩 種 以 上 餌 料 混 合 則 可 以 互 補 他 方 之 不 足 而 達 均 衡 充 分 供 予 所 需 之 營 養 2. 管 理 浮 游 期 間 投 餌 後 藻 水 的 顏 色 變 化 可 做 為 管 理 之 參 考 當 投 餌 後 水 色 於 正 常 消 耗 時 間 過 後 仍 沒 有 變 化 或 少 許 變 化 時 就 需 注 意 水 質 有 否 惡 化 同 時 亦 須 鏡 檢 是 否 有 沈 底 死 亡 現 象 或 87

8 是 餌 料 物 性 不 被 接 受 當 水 質 惡 化 時 即 須 換 水 此 外 可 於 夜 間 用 手 電 筒 照 射 池 水 察 看 浮 游 幼 生 之 密 度 變 化 做 為 生 長 情 形 之 判 斷 為 了 維 持 良 好 之 飼 育 水 質 可 降 低 孵 化 池 的 照 明 度 以 減 少 附 著 物 繁 殖 及 水 槽 內 浮 游 生 物 發 生 而 且 要 每 隔 2-3 期 採 取 100 毫 升 l 水 樣 測 定 其 中 所 含 個 體 數 及 最 大 最 小 體 型 日 定 記 錄 之 做 為 成 長 率 生 存 率 之 判 斷 並 觀 察 蛤 苗 色 澤 及 消 化 管 內 之 消 化 情 形 做 為 幼 生 健 康 之 辨 別 另 要 注 意 的 是 任 何 生 物 皆 有 死 亡 臨 界 點 而 產 卵 量 大 的 二 枚 貝 更 是 明 顯 所 以 在 浮 游 期 第 3-4 天 時 常 會 自 然 淘 汰 一 些 卵 質 不 佳 及 適 應 力 差 的 文 蛤 苗 而 有 明 顯 死 亡 現 象 故 可 於 浮 游 期 間 提 高 鹽 度 溫 度 淘 汰 不 過 之 文 蛤 苗 3. 浮 游 苗 變 態 前 之 處 理 : 當 文 蛤 苗 於 浮 游 期 間 並 若 水 質 不 過 餌 料 品 質 不 佳 投 餌 過 量 卵 質 不 佳 時 皆 會 提 早 沈 底 死 亡 在 正 常 溫 度 下 稚 貝 沈 著 時 間 一 般 在 孵 化 後 7-10 天 內 浮 游 幼 生 在 變 態 沈 著 峙 攝 餌 量 會 減 少 此 時 投 餌 量 應 減 少 當 接 近 沈 著 期 時 每 天 應 抽 底 鏡 檢 是 否 開 始 變 態 當 有 斧 足 伸 出 時 即 表 示 開 使 變 態 ( 圖 14) 應 著 手 做 外 移 之 準 備 如 果 是 在 沈 著 期 間 外 移 可 先 排 上 層 水 再 用 收 集 網 收 集 然 後 移 至 稚 貝 育 苗 池 平 均 撒 佈 ' 不 過 因 幼 生 外 殼 脆 弱 在 沖 洗 採 集 過 程 中 易 造 成 機 械 性 損 傷 若 孵 化 池 為 舖 砂 式 則 可 以 待 其 沈 著 後 3-4 砂 ' 平 均 撒 佈 於 育 苗 池 ( 七 ) 沈 著 稚 貝 之 管 理 與 飼 育 1. 初 期 沉 底 稚 貝 之 飼 育 管 理 天 再 排 乾 池 水 C 創 起 表 層 之 沈 著 稚 貝 的 成 長 過 溫 在 ' 鹽 度 在 %0 之 間 底 質 砂 質 愈 高 泥 愈 少 存 活 率 愈 高 而 砂 粒 徑 在 公 屋 間 最 好 初 期 稚 貝 ( 圖 15 ) 對 餌 料 種 類 之 選 擇 範 園 較 廣 因 此 不 一 定 要 投 餵 純 種 藻 類 只 要 粒 徑 合 適 稚 貝 攝 取 相 當 低 88

9 支 持 的 種 訪 華 產 濃 度 即 可 維 持 成 長 除 浮 游 性 微 藻 外 亦 可 以 小 顆 粒 之 有 機 碎 局 為 食 物 2. 紅 點 苗 ( 大 小 在 0.5 公 屋 左 右 ) 之 飼 育 管 理 (1) 保 持 較 高 之 透 明 度 : 紅 點 苗 ( 圖 16 ) 為 肉 眼 可 見 之 稚 貝 此 階 段 不 再 需 要 外 加 藻 水 自 然 繁 生 之 藻 水 若 不 足 會 影 響 其 成 長 養 殖 期 間 池 水 儘 量 保 持 較 高 之 透 明 度 (2) 適 量 投 餌 : 以 非 生 餌 為 原 則 仍 不 投 餌 量 以 在 目 視 下 無 明 顯 沉 澱 物 飼 料 可 在 水 中 懸 浮 或 溶 解 極 微 量 在 沉 於 底 部 後 緩 慢 分 解 除 直 接 被 稚 貝 利 用 外 亦 可 為 微 藻 所 利 用 圖 15. 初 期 沉 著 稚 貝 圖 16. 紅 點 苗 3. 黑 砂 苗 ( 大 小 在 公 度 左 右 ) 之 飼 育 管 理 黑 沙 苗 稚 貝 殼 表 呈 深 色 其 大 小 如 砂 粒 般 黑 砂 苗 約 天 左 右 有 顯 注 差 異 較 大 規 格 者 成 長 愈 快 管 理 方 式 與 紅 點 苗 相 同 因 此 由 主 工 點 苗 養 至 但 個 體 成 長 必 需 定 期 採 補 較 大 規 格 之 蛤 苗 出 售 或 移 池 讓 個 體 較 小 者 有 機 會 成 長 4. 育 苗 池 之 管 理 沉 底 稚 貝 移 出 後 最 要 緊 的 就 是 防 止 絲 藻 產 生 以 免 影 響 稚 貝 成 長 及 活 動 抑 制 絲 藻 生 長 之 方 法 如 :1. 提 高 水 位 2. 注 入 藻 水 降 低 透 明 度 3. 使 用 甲 基 藍 來 造 水 色 遮 光 4. 放 養 草 食 性 魚 類 如 臭 肚 魚 變 身 苦 鼠 目 魚 等 如 透 明 度 過 低 則 需 進 行 排 注 水 以 提 高 透 明 度 在 注 排 水 時 應 防 止 肉 食 性 及 易 破 壞 底 床 的 魚 蝦 進 入 故 最 好 能 於 注 排 水 口 加 一 層 網 89

10 如 池 水 鹽 份 過 高 時 則 以 漸 進 方 式 調 至 適 當 沈 著 稚 貝 之 餌 料 除 可 由 海 水 中 得 到 外 亦 可 適 時 引 入 藻 水 而 且 每 隔 數 日 逢 機 抽 底 觀 察 其 成 長 情 形 稚 貝 放 養 一 段 時 日 後 應 以 蛤 仔 機 沖 鬆 池 底 使 有 機 物 上 浮 並 予 以 排 出 才 不 會 將 稚 貝 覆 蓋 阻 礙 濾 食 當 池 中 有 扁 虫 發 生 時 即 顯 示 池 中 有 機 質 過 高 庭 注 意 處 理 三 微 細 藻 類 之 保 種 與 培 養 ( 一 ) 餌 藻 選 擇 對 貝 類 幼 生 之 重 要 性 一 般 二 枚 貝 的 攝 餌 方 式 像 濾 食 性 其 餌 料 以 環 境 周 圍 之 浮 游 微 細 藻 類 及 有 機 碎 屑 為 主 但 並 非 池 垃 內 每 種 藻 類 皆 其 餌 料 效 果 因 此 必 須 進 行 篩 選 若 能 進 行 單 種 垮 養 對 堪 養 二 枚 貝 如 : 文 蛤 及 花 蛤 等 將 可 減 少 人 工 飼 料 之 成 本 1974 年 英 國 Wanle 曾 試 驗 各 種 之 微 藻 對 牡 蠣 育 成 效 果 結 果 顯 示 等 鞭 金 藻 (Isochrysis galb 仰 )( 圖 17.1) 及 周 氏 為 藻 (Tetr αselmis suecica)( 圖 17 力 最 其 餌 料 效 益 美 國 之 沿 岸 牡 蠣 公 司 (Coast oyster compan) 快 '1 以 矽 藻 類 之 skeletonema sp. Th α 的 ssiosira pseudonana 及 Ch α etoceros c α lcitrans 等 為 該 公 司 之 牡 蠣 苗 及 成 貝 餌 料 日 本 則 以 牟 氏 角 毛 藻 (Ch α etoceros muelleris) ( 圖 17.3) 培 育 牡 蠣 苗 經 全 世 界 多 年 印 證 通 令 水 產 養 殖 用 餌 藻 以 Isochrysis α 成 航 'e1vs 叫 你 SlOSlYa 巴 夫 藻 (Pavlava) 扁 藻 (1 訪 問 selmis) 及 擬 球 藻 (Nannochloropsis oculat α ) ( 圖 17.4) 等 六 屬 為 主 海 水 中 之 藻 種 很 多 但 要 成 為 餌 料 必 須 其 備 1. 粒 徑 大 小 合 適 2. 學 養 價 值 高 3. 便 於 養 殖 物 攝 取 與 消 化 4. 藻 體 生 長 代 謝 物 或 分 泌 物 對 養 殖 生 物 無 毒 5. 對 環 境 適 應 力 強 且 易 於 大 量 培 養 因 此 如 何 選 擇 通 合 的 藻 種 以 利 保 種 與 垮 養 對 文 蛤 等 二 枚 貝 養 殖 成 敗 與 否 至 為 重 要 本 文 將 簡 介 影 響 藻 類 生 長 之 因 子 再 探 討 其 生 長 模 式 與 管 養 需 求 進 而 介 紹 如 何 保 種 與 玲 養 期 能 使 養 殖 業 者 對 藻 類 培 養 技 術 之 提 升 有 所 助 益 90

11 蛤 的 種 苦 量 產 ( 二 ) 影 響 藻 類 生 長 之 因 子 藻 類 是 利 用 光 合 作 用 將 環 境 中 之 有 機 或 無 機 物 合 成 本 身 之 營 養 物 質 以 達 增 殖 目 的 因 此 除 藻 類 之 營 養 需 求 外 環 境 中 之 光 照 溫 度 鹽 度 二 氧 化 碳 含 量 及 酸 鹼 值 (ph) 等 都 與 藻 類 增 殖 關 條 密 切 1. 光 照 藻 類 與 陸 生 植 物 一 樣 藉 著 行 光 合 作 用 而 生 長 因 此 光 照 強 度 對 其 生 長 發 育 影 響 頗 大 藻 類 之 光 合 作 用 強 度 隨 光 照 強 弱 而 不 同 當 在 某 一 光 照 強 度 下 謝 所 耗 之 氧 氣 速 率 相 等 時 藻 類 光 合 作 用 所 產 生 之 氧 氣 和 生 長 代 只 能 維 持 其 基 本 代 謝 而 不 能 生 長 時 期 之 光 照 強 度 稱 為 補 償 光 照 當 光 照 強 度 大 於 補 償 光 照 時 光 照 度 增 強 殖 達 到 最 高 時 償 光 照 及 飽 和 光 照 藻 類 光 合 作 用 亦 隨 著 增 加 ; 方 向 等 培 養 條 件 不 同 而 有 異 此 隨 當 光 合 作 用 或 藻 細 胞 增 此 時 期 之 光 照 強 度 稱 為 飽 合 光 照 同 種 藻 類 之 補 隨 藻 水 深 度 濃 度 垮 養 容 器 透 光 度 光 照 一 般 在 低 藻 水 濃 度 時 所 需 之 光 照 度 較 弱 因 藻 細 胞 對 光 之 吸 收 與 散 射 至 無 光 照 而 高 瀑 水 濃 度 度 時 光 照 強 度 隨 藻 水 深 度 增 加 而 減 弱 甚 故 所 須 光 照 度 亦 較 高 不 同 藻 種 所 需 之 光 照 度 亦 有 異 如 擬 球 瀑 喜 歡 強 光 照 增 殖 率 隨 照 度 增 加 而 增 加 至 2000 lux lux 增 殖 率 最 高 而 周 氏 為 藻 在 光 照 lux 間 增 殖 率 隨 照 度 增 強 而 增 加 ' 環 境 下 增 殖 長 與 擬 球 藻 比 較 周 氏 扁 藻 適 合 在 較 低 光 照 而 不 耐 強 光 照 此 外 光 照 時 間 長 短 亦 會 影 響 藻 類 生 不 同 藻 類 對 光 照 的 時 間 需 求 也 不 一 樣 一 般 長 光 照 環 境 下 藻 類 成 長 較 短 光 照 快 但 有 些 藻 類 卻 是 相 反 的 如 粉 核 小 球 藻 24 L> 12 L/12 D 又 因 不 同 藻 類 細 胞 所 含 光 合 作 用 色 素 不 一 樣 因 此 對 光 之 波 長 吸 收 亦 有 差 別 如 矽 瀑 類 以 綠 色 光 最 好 其 次 為 青 光 ; 粉 核 小 球 藻 以 紅 光 最 好 2. 溫 度 綠 光 最 差 91

12 研 F s 個. 9 學 6 圖 17. 常 見 微 瀑 與 浮 游 動 物 1. 等 鞭 金 藻 (lsochrys 釘 galbana) 2 月 氏 扁 藻 (1 全 tn ωelmis suecica) 3. 牟 氏 角 毛 藻 (Chaetoceros muelleris) 4. 擬 球 藻 ( 九 伽 nochloropsis 0< ω 旬 的 5. 台 灣 骨 藻 (Skele 的 nem α costa 的 m) 6. 輪 蟲 (Brachionus 仰 的 n 匈 arm 釘 ) 7. 活 字 仆 蟲 (Euploli 臼 ') 8 92

13 溫 度 是 限 制 單 胞 藻 體 內 生 理 機 制 反 應 之 主 要 因 子 -}.. 蛤 的 種 苦 受 產 並 且 能 限 制 其 分 布 範 園 在 生 長 及 繁 殖 速 度 最 快 之 過 溫 範 園 稱 之 為 最 適 溫 度 範 園 當 溫 度 低 於 通 溫 範 園 時 則 生 長 停 滯 或 呈 休 眠 狀 甚 至 死 亡 高 於 通 溫 範 園 時 則 易 死 亡 一 般 生 物 於 過 溫 範 圍 內 溫 度 每 增 加 10 뀀 C 時 體 內 生 理 代 謝 速 率 約 增 加 24 倍 綠 藻 類 一 般 適 溫 範 圍 上 限 為 35 ' ' 右 左 最 適 溫 範 園 為 뀀 C 矽 藻 類 最 適 溫 在 뀀 C 右 左 而 金 뀀 뀀 藻 類 最 適 溫 在 25 C 左 右 擬 球 藻 的 通 溫 範 圍 為 c 而 以 뀀 間 增 殖 率 最 高 在 37 C 時 仍 能 活 2-4 小 時 周 氏 扁 藻 的 通 溫 範 園 為 c 뀀 而 以 后 增 殖 率 最 高 15 뀀 C 增 殖 最 差 臺 灣 骨 藻 (Skeletonema costatum) ( 圖 17.5) 通 溫 範 園 為 뀀C 而 以 뀀 增 殖 率 最 高 一 般 藻 類 對 低 溫 之 忍 受 性 較 強 力 較 低 3. 鹽 度 因 此 常 藉 此 特 性 進 行 藻 種 之 保 存 單 胞 藻 類 有 淡 水 種 狹 鹽 性 種 及 廣 鹽 性 種 度 適 應 範 園 c 뀀 C 問 在 低 溫 條 件 下 其 生 理 活 不 同 種 有 其 不 同 之 鹽 例 如 擬 球 藻 適 合 範 園 為 5-77 ppt ' 而 以 ppt 增 殖 最 佳 周 氏 扁 藻 在 ppt 均 能 生 殖 ' 而 以 ppt 問 增 殖 最 佳 臺 灣 骨 藻 是 以 7-50 ppt 為 適 合 範 園 ppt 較 適 合 生 殖 ' 並 以 ppt 間 最 合 適 4. 水 中 二 氧 化 碳 含 量 單 胞 藻 行 光 合 作 用 時 要 吸 取 水 中 CO2 ' 因 此 但 以 ppt 間 最 適 等 鞭 金 藻 以 5-60 要 供 應 CO2 才 能 維 持 其 生 存 水 中 二 氧 化 碳 (CO2) 以 各 種 方 式 存 在 分 別 有 游 離 之 CO2 碳 酸 氫 鹽 及 碳 酸 鹽 離 子 CO2 游 離 之 CO2 和 水 (H2O) 水 解 成 氫 離 子 和 石 炭 酸 氫 根 極 少 數 石 炭 酸 氫 根 離 子 再 解 離 成 氫 離 子 及 碳 酸 根 離 子 被 藻 類 吸 收 後 氫 離 子 和 碳 酸 氫 根 離 子 會 結 合 成 H2CO3 當 水 中 之 放 出 CO2 供 藻 類 利 用 當 白 天 光 合 作 用 旺 盛 時 水 中 之 氫 離 子 大 量 減 少 使 得 ph 值 增 加 夜 間 光 合 作 用 停 止 呼 吸 作 用 增 加 CO2 被 大 量 釋 出 和 水 (H2O) 水 解 成 氫 離 子 和 碳 酸 氫 根 離 子 造 成 ph 值 下 降 當 池 水 藻 類 濃 度 高 時 日 夜 間 池 水 之 氫 離 子 變 化 可 達 倍 一 般 海 水 中 之 CO2 93

14 含 量 是 充 足 的 但 人 工 培 養 單 胞 藻 時 因 藻 類 密 度 高 用 旺 盛 時 CO2 往 往 不 足 而 成 為 藻 類 增 殖 時 之 限 制 條 件 國 外 已 有 CO2 補 充 之 技 術 ' 可 提 高 藻 類 之 生 產 量 在 光 和 作 目 前 在 5. 酸 鹼 值 (ph) 各 種 藻 類 均 有 一 定 之 ph 值 適 應 範 園 如 擬 球 藻 在 培 養 初 期 ph 間 值 與 增 殖 率 的 關 條 呈 拋 物 線 而 周 氏 扁 藻 在 間 其 增 殖 最 好 之 範 圍 在 之 超 過 或 低 於 該 適 應 範 園 將 會 造 成 死 亡 天 然 海 水 之 ph 值 約 在 8.3 左 右 但 在 人 工 培 育 情 況 下 單 位 容 積 藻 體 密 度 可 高 達 每 毫 升 1 千 多 萬 個 藻 細 胞 由 於 藻 細 胞 迅 速 生 長 繁 殖 ' 大 量 吸 收 水 體 中 之 CO2 及 利 用 重 碳 酸 鹽 結 呆 引 起 水 中 ph 值 增 加 若 無 適 時 降 低 ph 值 最 後 將 造 成 藻 類 死 亡 既 俗 稱 之 倒 藻 或 倒 水 ( 三 ) 單 胞 藻 類 之 生 長 模 式 單 胞 藻 類 在 一 次 培 養 過 程 中 有 一 定 之 生 長 模 式 曲 線 可 分 成 五 期 概 述 如 下 : 1. 延 緩 期 此 期 為 新 接 種 後 藻 類 為 適 應 新 環 境 而 進 行 生 理 與 代 謝 之 調 節 此 時 外 觀 顏 色 無 變 化 細 胞 數 目 變 動 不 大 生 長 繁 殖 不 明 顯 O 此 期 形 成 可 能 原 因 為 :1. 接 種 到 已 老 化 中 之 藻 種 胞 已 無 增 殖 能 力 僅 少 數 其 有 增 殖 能 力 即 大 部 份 細 增 殖 能 力 和 死 亡 率 相 近 2. 接 種 到 發 育 中 之 藻 種 尚 不 能 立 即 進 行 分 裂 3. 接 種 量 不 足 致 藻 類 生 長 過 程 中 所 需 藻 體 本 身 特 殊 分 泌 物 質 在 培 養 液 中 不 足 所 引 起 4. 接 種 環 境 差 異 過 大 藻 體 須 重 新 調 整 生 理 與 代 謝 之 通 應 能 力 縮 短 延 緩 期 之 方 法 可 採 取 下 類 措 施 :1. 接 種 之 藻 體 必 須 處 於 指 數 期 細 胞 此 期 細 胞 生 長 旺 盛 分 裂 繁 殖 快 速 2. 接 種 時 藻 種 量 要 大 除 可 保 持 優 勢 種 外 藻 類 生 長 過 程 所 需 瀑 體 本 身 特 殊 分 泌 物 質 濃 度 亦 較 高 3. 防 止 新 舊 培 養 液 環 境 條 件 ( 如 ph 值 ) 差 異 過 大 94

15 -5c.. 蛤 的 種 苦 差 產 2. 指 數 生 長 期 : 此 期 細 胞 迅 速 生 長 及 繁 殖 ' 細 胞 數 目 呈 幾 何 級 數 增 加 培 養 之 藻 種 開 始 佔 優 勢 其 它 藻 種 不 易 成 長 3. 相 對 生 長 下 降 期 : 指 數 生 長 期 到 了 一 定 程 度 後 細 胞 增 殖 減 緩 然 後 不 再 增 加 相 對 指 數 生 長 期 已 明 顯 下 降 本 期 形 成 原 因 可 能 為 :1. 營 養 鹽 不 敷 生 長 需 求 生 長 受 抑 制 甚 至 停 止 生 長 2. 二 氧 化 碳 與 氧 氣 供 應 不 足 無 法 供 應 光 合 作 用 及 代 謝 活 動 3. 垮 養 液 環 境 巨 幅 改 變 4. 藻 類 濃 度 過 高 增 殖 空 間 不 足 且 光 照 強 度 受 細 胞 間 相 互 遮 避 無 法 穿 透 大 部 分 細 胞 如 同 生 活 在 黑 睹 中 5. 代 謝 分 泌 物 自 體 抑 制 如 : 小 球 藻 (ChIarella vulgaris) 在 生 長 過 程 其 代 謝 作 用 產 生 一 些 分 泌 物 當 分 泌 物 濃 度 增 加 至 某 種 程 度 時 會 對 本 身 產 生 一 些 毒 性 或 抑 制 生 長 4. 靜 止 期 或 高 原 期 : 此 期 藻 細 胞 數 目 維 持 不 變 並 持 續 一 段 時 間 時 間 長 短 視 藻 種 不 同 而 異 時 間 越 短 表 示 越 不 能 忍 受 惡 劣 環 境 5. 死 亡 期 : 此 期 細 胞 開 始 自 我 分 解 死 亡 數 目 急 速 下 降 ( 四 ) 藻 類 之 營 養 需 求 單 胞 藻 生 長 過 程 中 之 必 需 元 素 有 碳 (c) 氫 (H) 氧 (0) 氮 (N) 鈣 ( Ca) 磷 (p) 針 (K) 鎮 (Mg) 鐵 (Fe) 硫 (s) 等 10 種 此 外 還 需 要 一 些 微 量 元 素 如 生 孟 (Mn)' 鈴 (Zn) 銅 (Cu) 研 (B) 鋁 (AI) 碘 (1) 矽 ( so 鉤 (Mo) 錢 (Sr) 及 錯 (Co) 等 在 生 長 過 程 中 需 求 量 較 大 者 有 碳 氫 氧 氮 磷 及 鐵 等 6 種 1. 氮 之 主 要 來 源 與 效 用 氮 為 構 成 單 胞 藻 類 蛋 白 質 主 要 成 分 為 不 可 缺 少 之 元 素 除 水 中 含 有 少 量 外 生 產 上 常 添 加 下 列 幾 種 化 合 物 KN03 NaN03 其 NH2CONH2 NH4N03 Ca(N03)2 NH4Cl (NH4)2S0 4 或 有 機 發 酵 液 這 些 化 合 物 中 之 氮 鹽 以 NO-N 及 NH-N 型 態 存 在 在 不 同 環 境 下 其 利 用 之 情 形 亦 不 同 中 性 時 NH-N 利 用 率 大 於 NO -N' 弱 酸 時 NO-N 利 用 率 大 於 NH4-N ; 低 光 照 時 NO-N 有 研 究 發 現 NH-N 利 用 率 大 於 海 洋 中 之 NO -N 含 量 比 NH-N 及 NO-N 含 量 95

16 高 NO-N 含 量 成 為 矽 藻 之 限 制 因 子 而 在 垮 養 液 中 NH-N NO -N NO-N 較 易 被 矽 藻 吸 收 利 用 尿 素 在 培 養 液 中 不 直 接 被 利 用 而 是 被 分 解 成 NH4HCO3 及 NH4OH ' 因 不 會 造 成 垮 養 液 之 ph 值 變 化 為 其 優 點 由 於 餌 藻 是 用 來 垮 育 養 殖 生 物 為 避 免 氛 對 養 殖 生 物 之 影 響 2. 磷 主 要 來 源 與 效 用 藻 類 利 用 磷 在 體 內 合 成 磷 化 物 為 組 成 核 酸 與 能 量 轉 換 物 質 如 ATP 可 缺 乏 之 物 質 源 故 以 KNO3 NaNO3 最 常 被 利 用 存 在 於 原 生 質 與 細 胞 核 中 比 ADP 脂 類 及 維 生 素 等 的 不 對 生 命 活 動 其 有 重 要 之 意 義 培 養 液 中 磷 的 來 主 要 有 下 列 幾 種 : 磷 酸 二 氫 針 (KH2PO4) 磷 酸 二 氫 鍋 (NaH2PO4) 磷 酸 氫 二 針 (K2HPO4) 磷 酸 氫 二 納 (Na2HPO4) 及 過 磷 酸 鈣 等 磷 在 不 同 條 件 下 其 利 用 情 形 亦 不 同 如 新 月 菱 形 藻 在 光 照 下 比 在 黑 睹 中 對 磷 之 吸 收 大 ; 有 些 藻 類 可 以 預 先 吸 收 過 量 之 磷 以 便 在 缺 磷 時 使 用 磷 與 氮 對 藻 類 生 長 與 發 育 皆 其 作 用 兩 者 之 吸 收 利 用 有 一 定 比 例 關 餘 用 常 用 之 磷 鹽 為 過 磷 酸 鈣 以 免 形 成 不 溶 性 之 物 質 3. 鐵 之 主 要 來 源 與 效 用 此 自 然 界 中 鐵 存 在 量 很 多 但 合 理 的 氮 源 供 應 有 利 於 磷 的 利 但 過 磷 酸 鈣 不 可 和 石 灰 共 同 使 用 但 在 ph 值 7 以 上 易 於 氧 化 沉 澱 因 如 依 靠 天 然 水 以 滿 足 此 種 需 要 更 為 困 難 鐵 對 藻 類 之 葉 綠 素 合 成 有 促 進 作 用 並 且 是 許 多 氧 化 酵 素 必 備 之 元 素 對 體 內 氧 化 還 原 作 用 其 有 調 節 功 能 常 用 之 鐵 鹽 有 氣 化 鐵 硫 酸 亞 鐵 及 檸 檬 酸 鐵 等 使 用 時 可 以 添 加 EDTA-Na2 使 其 不 發 生 沉 澱 或 者 使 用 有 機 鐵 來 代 替 無 機 鐵 4. 矽 之 主 要 來 源 與 效 用 矽 ' 根 據 分 析 單 胞 藻 類 中 特 別 是 矽 藻 類 且 整 個 生 長 發 育 過 程 更 是 不 可 缺 少 不 但 細 胞 壁 合 成 需 要 大 量 的 無 法 被 其 他 元 素 取 代 矽 藻 類 細 胞 壁 之 組 成 成 分 矽 酸 佔 96.5 % ' 但 隨 種 類 不 96

17 同 需 要 量 亦 有 差 異 在 生 產 上 物 垮 養 液 中 矽 之 含 量 常 用 之 矽 源 為 矽 酸 鍋 已 證 明 不 能 為 矽 藻 所 用 5. 針 鈣 鎮 硫 之 主 要 來 源 與 效 用 生 甲 能 使 藻 細 胞 保 持 一 定 程 度 之 膨 脹 及 其 他 生 活 機 能 的 運 作 是 必 需 的 此 外 水 化 合 物 合 成 具 有 轉 移 與 儲 存 鈣 能 調 節 藻 細 胞 內 部 酸 鹼 反 應 鈣 結 晶 久 蛤 的 種 苦 受 產 影 響 矽 藻 最 後 之 產 量 而 更 高 度 聚 合 形 成 之 矽 化 合 這 對 細 胞 內 部 新 陳 代 謝 植 物 行 光 合 作 用 時 對 碳 並 對 蛋 白 質 合 成 有 促 進 作 用 把 有 毒 之 代 謝 產 物 如 合 成 之 草 酸 以 減 少 環 境 過 酸 之 毒 害 同 時 對 碳 水 化 合 物 和 蛋 白 質 之 合 成 有 促 進 作 用 鎮 是 葉 綠 素 的 組 成 物 質 質 量 6. 微 量 元 素 微 量 元 素 在 垮 養 液 中 需 要 量 很 少 硫 則 是 蛋 白 質 組 成 物 但 又 不 可 或 缺 如 鐘 對 單 胞 藻 類 光 合 作 用 呼 吸 作 用 及 氮 代 謝 有 一 定 之 影 響 鉤 在 單 胞 藻 類 蛋 白 質 合 成 的 成 分 其 供 應 氫 原 子 及 能 量 轉 體 之 作 用 錯 為 維 生 素 B12 而 維 生 素 B12 又 是 單 胞 瀑 類 生 長 之 重 要 維 生 素 對 單 胞 藻 類 生 長 是 有 相 當 成 效 7. 維 生 素 單 胞 藻 類 之 生 長 除 了 上 述 礦 物 質 營 養 外 素 所 以 結 還 需 吸 收 某 些 維 生 其 中 以 維 生 素 B 族 群 影 響 較 顯 著 女 口 維 生 素 B12 及 Bl 對 於 等 鞭 金 藻 的 培 養 非 常 重 要 ( 五 ) 藻 類 之 培 養 方 式 藻 類 之 垮 養 方 式 依 堵 養 之 目 的 要 求 與 採 收 之 方 式 述 多 種 方 式 1. 依 垮 養 基 之 型 態 (1) 固 體 堵 養 : 將 培 養 液 配 好 後 滅 菌 冷 卻 後 接 種 可 分 成 下 加 入 洋 菜 粉 (Agar) % 分 裝 主 要 用 於 藻 種 之 分 離 保 存 (2) 液 體 培 養 : 在 滅 菌 清 毒 之 海 水 中 加 入 某 種 藻 類 所 需 之 營 養 鹽 97

18 接 種 培 養 用 於 保 種 及 量 產 2. 依 培 養 純 度 不 同 (1) 單 種 垮 養 : 指 排 除 雜 藻 的 單 一 藻 種 玲 養 一 般 大 量 垮 養 拈 此 種 ( 圖 18.1) 不 排 除 細 菌 之 存 在 (2) 純 種 垮 養 : 指 排 除 一 切 生 物 存 在 條 件 之 草 種 垮 養 (3) 昆 種 培 養 : 指 直 接 施 肥 於 水 中 讓 其 自 然 繁 衍 之 藻 種 3. 根 據 藻 液 與 外 界 接 觸 程 度 (1) 封 閉 式 : 垮 養 過 程 是 把 堵 養 液 密 封 在 透 明 之 垮 養 瓶 中 工 光 源 及 二 氧 化 碳 並 利 用 抽 水 機 使 培 養 液 不 斷 循 環 (2) 開 放 式 : 指 垮 養 過 程 是 把 培 養 液 在 開 放 容 器 或 水 池 中 成 循 環 式 與 通 氣 式 二 種 4. 依 據 藻 液 採 收 方 式 之 不 同 使 用 人 又 可 分 (1) 一 次 垮 養 : 在 培 養 容 器 或 水 池 中 根 據 玲 養 藻 類 所 需 之 營 養 鹽 配 成 培 養 液 然 後 接 種 適 量 之 藻 種 經 一 段 時 間 後 當 藻 類 進 入 指 數 生 長 末 期 時 進 行 一 次 採 收 採 收 後 一 部 分 做 種 源 至 新 的 垮 養 池 或 容 器 毒 做 為 重 新 垮 養 用 接 種 舊 有 之 垮 養 池 或 容 器 則 進 行 清 洗 及 消 (2) 連 續 培 養 : 此 種 方 式 是 在 特 製 之 容 器 中 新 的 培 養 液 不 斷 注 入 使 達 到 一 定 濃 度 之 藻 液 不 斷 流 出 亦 即 為 經 由 人 為 控 制 使 瀑 類 維 持 在 指 數 生 長 期 這 種 方 式 所 需 的 培 養 條 件 及 藻 類 濃 度 要 保 持 穩 定 因 此 也 要 有 較 高 之 自 動 化 程 度 要 求 (3) 半 連 續 培 養 : 此 垮 養 方 式 是 在 一 次 垮 養 的 基 礎 上 當 藻 液 達 一 O 定 濃 度 之 後 每 天 收 穫 一 部 分 並 補 充 新 的 培 養 液 繼 續 培 養 5. 依 據 培 養 規 模 大 小 和 目 的 (1) 小 型 垮 養 : 又 稱 一 級 垮 養 主 要 是 在 保 種 室 進 行 目 的 在 進 行 分 離 及 藻 種 垮 養 與 研 究 一 般 採 一 次 培 養 (2) 中 繼 式 垮 養 : 又 稱 二 級 培 養 目 的 在 培 養 較 多 量 高 濃 度 藻 液 供 大 量 培 養 用 一 般 多 在 室 內 進 行 採 一 次 培 養 或 連 續 式 堵 98

19 蛤 的 種 苦 量 產 養 ( 圖 ) (3) 大 量 垮 養 : 又 稱 三 級 培 養 為 生 產 性 堵 養 可 在 室 內 或 室 外 進 行 採 一 次 培 養 或 開 放 通 氣 式 半 連 續 式 培 養 以 生 產 大 量 藻 液 作 為 餌 料 用 ( 六 ) 藻 種 之 分 離 與 垮 養 料 效 果 天 然 海 水 中 有 很 多 種 藻 類 生 長 在 一 起 因 此 但 並 非 每 種 藻 類 皆 有 餌 在 垮 養 藻 類 前 必 須 進 行 分 離 篩 選 以 利 單 種 培 養 圖 18. 藻 類 培 養 方 式 1. 恆 溫 水 槽 保 種 培 養 3. 室 內 擴 大 垮 養 2. 室 內 放 大 培 養 4. 室 外 量 產 培 養 並 有 助 於 降 低 成 本 而 在 分 離 前 須 確 定 標 的 種 物 特 性 並 利 用 該 藻 種 之 生 如 有 無 趨 光 性 游 動 能 力 及 對 營 養 是 否 有 特 別 需 求 等 來 決 定 在 分 離 藻 種 前 應 先 進 行 預 備 垮 養 首 先 將 含 有 該 標 的 藻 種 之 水 樣 取 回 以 20 微 米 之 網 目 過 濾 雜 質 原 生 動 物 及 大 型 微 藻 等 再 將 過 j 慮 後 之 樣 品 水 分 裝 至 預 備 培 養 瓶 中 並 添 加 營 養 鹽 放 在 光 照 99

20 適 宜 之 環 境 下 培 養 待 標 的 藻 種 呈 優 勢 種 後 回 之 標 的 藻 種 分 離 之 方 法 有 : 在 樣 品 水 已 是 優 勢 種 於 經 過 濾 後 就 可 進 行 分 離 若 取 既 可 進 行 分 離 1. 微 吸 管 分 離 法 : 比 方 法 為 利 用 微 吸 管 的 自 吸 原 理 將 試 水 滴 於 凹 載 玻 片 上 於 顯 微 鏡 下 用 微 吸 管 挑 選 欲 分 離 之 藻 種 行 一 次 鏡 檢 挑 選 後 需 再 進 以 確 定 無 雜 藻 ' 後 再 可 移 入 減 菌 培 養 液 中 培 養 2. 稀 釋 分 離 法 : 取 預 備 垮 養 之 試 水 一 毫 升 加 入 事 先 準 備 好 裝 有 十 毫 升 滅 菌 水 之 試 管 中 充 分 振 盪 後 再 取 出 一 毫 升 加 入 裝 有 滅 菌 水 之 試 管 中 反 覆 操 作 4-5 回 再 取 各 試 管 試 水 一 毫 升 注 到 固 態 培 養 基 板 上 前 後 傾 斜 數 回 後 倒 出 多 餘 之 試 水 靜 置 培 養 或 以 減 菌 噴 霧 器 垂 直 方 向 將 試 水 噴 霧 移 植 至 堵 養 血 上 另 可 以 白 金 耳 沾 取 各 試 管 之 試 水 以 蛇 形 方 式 在 固 態 培 養 基 板 上 畫 線 接 種 將 上 述 處 理 後 之 培 養 血 密 封 後 置 於 光 照 1000 lux 左 右 溫 度 2025 QC 培 養 1-2 週 ' 待 藻 落 長 出 後 篩 選 所 欲 之 藻 種 進 行 純 種 保 種 3. 運 動 能 力 分 離 法 : 有 些 藻 類 其 有 鞭 毛 性 可 利 用 此 特 性 將 其 分 離 游 泳 能 力 強 且 常 有 趨 光 ( 七 ) 藻 種 之 保 存 藻 種 保 存 之 目 的 為 1. 將 分 離 出 之 藻 種 或 從 其 他 單 位 取 得 之 藻 種 保 存 下 來 2. 像 在 低 溫 弱 光 照 環 境 下 法 殖 是 將 無 污 染 之 藻 種 是 為 生 產 後 續 培 養 提 供 足 夠 量 之 優 質 種 保 存 方 法 以 固 態 垮 養 或 液 態 保 存 固 態 玲 養 保 存 接 種 於 回 態 培 養 基 上 可 保 存 6-12 個 月 液 態 保 存 法 用 之 容 器 以 有 蓋 之 試 管 或 三 角 瓶 為 佳 1.25 大 氣 壓 下 以 120 QC 滅 菌 的 分 鐘 菌 吸 管 接 種 活 力 佳 之 藻 種 期 移 植 接 種 至 新 試 管 以 確 保 活 力 另 可 以 不 同 大 小 之 三 角 瓶 進 行 保 種 並 加 入 適 量 之 營 養 鹽 使 細 胞 慢 慢 生 長 繁 則 採 分 批 式 繼 代 培 養 保 種 試 管 先 裝 八 分 滿 海 水 在 待 冷 卻 後 使 用 接 種 時 以 減 約 1-2 個 月 就 定 並 可 隨 時 作 為 擴 大 培 養 用 作 法 如 同 試 管 保 種 處 理 約 --AU AV

21 久 蛤 的 種 苦 量 產 4-5 天 既 可 移 植 一 次 ( 八 ) 大 量 培 養 1. 單 種 堵 養 : 可 分 成 室 內 恆 溫 保 種 培 養 及 室 外 大 量 純 種 垮 養 ( 圖 18.4) 由 於 室 內 保 種 垮 養 設 備 費 用 較 高 本 文 只 就 室 外 大 量 垮 養 做 介 紹 海 產 微 細 藻 類 的 培 養 最 廣 泛 使 用 的 培 養 液 為 Walne 配 方 表 二 綠 色 藻 培 養 用 肥 料 配 方 如 表 三 褐 色 藻 培 養 用 肥 料 配 方 如 表 四 垮 養 步 驟 如 下 : 先 利 用 700 公 升 FRP 桶 注 入 沈 澱 過 濾 後 之 海 水 450 公 升 再 以 300 毫 升 漂 白 水 消 毒 12 小 時 後 添 加 中 和 用 海 波 40 公 克 並 暴 氣 1 小 時 再 接 種 中 繼 垮 養 之 藻 水 200 公 升 之 後 加 入 200 毫 升 之 營 養 液 並 充 分 打 氣 待 透 明 度 達 公 分 時 移 入 更 大 型 之 水 泥 池 ( 高 120 公 分 長 200 公 分 寬 180 公 分 ) 注 入 過 濾 海 水 接 種 前 以 50 ppm 漂 白 水 消 毒 12 小 時 再 用 60 ppm 海 波 中 手 口 並 j 暴 氣 l 小 時 原 生 動 物 每 次 注 水 量 以 能 保 持 藻 水 水 10 公 分 高 加 營 養 液 400 以 殺 死 池 水 中 浮 游 動 物 或 公 分 之 透 明 度 每 注 毫 升 由 於 此 法 在 低 透 明 度 時 能 維 持 的 時 間 並 不 穩 定 最 好 適 時 分 池 繼 續 垮 養 以 維 持 某 一 生 長 密 度 如 無 法 分 池 則 應 於 高 濃 度 時 排 出 部 份 藻 水 再 注 入 新 水 及 營 養 液 就 可 持 續 較 長 垮 養 時 間 當 持 續 垮 養 過 久 常 會 出 現 老 化 現 象 如 起 泡 沫 結 塊 變 色 及 浮 游 動 物 原 生 動 物 污 染 將 造 成 藻 類 全 部 死 亡 2. 天 然 藻 類 培 養 : 一 般 養 殖 池 中 常 可 發 現 成 長 較 穩 定 且 可 維 持 高 濃 度 之 藻 種 主 要 有 褐 色 及 綠 色 兩 系 但 褐 色 藻 象 雖 然 效 果 佳 但 也 較 不 穩 定 天 然 藻 類 雖 有 容 易 取 得 的 優 點 添 加 的 不 確 定 性 常 有 變 種 及 受 原 生 動 物 但 因 其 對 營 養 鹽 如 輪 蟲 ( 圖 17.6) 游 仆 虫 ( 圖 17.7) 纖 毛 虫 ( 圖 17.8) 撓 腳 類 污 染 之 困 擾 一 般 利 用 沒 有 放 養 魚 蝦 的 空 池 注 入 過 濾 海 水 以 魚 粉 大 豆 粉 魚 漿 下 雜 魚 等 有 機 肥 或 使 用 尿 素 過 磷 酸 鈣 石 灰 酸 錢 石 灰 等 化 學 肥 料 任 其 自 然 長 出 水 色 再 鏡 檢 其 粒 徑 大 小 以 進 行 篩 選 及 垮 101

22 ' 養 然 此 法 較 不 易 控 制 質 與 量 ( 九 ) 日 常 管 理 在 大 量 垮 養 藻 類 過 程 中 l 攪 動 與 通 氣 : 攪 動 與 通 氣 是 十 分 必 要 的 有 下 列 幾 點 是 日 常 管 理 時 應 注 意 的 : 因 可 增 加 藻 水 與 空 氣 接 觸 使 空 氣 中 之 二 氧 化 碳 溶 解 至 水 中 補 充 光 合 作 用 所 耗 之 二 氧 化 碳 ' 並 能 幫 助 底 層 之 藻 細 胞 上 浮 而 獲 得 光 照 又 可 防 止 水 表 產 生 菌 脹 及 使 上 下 層 水 溫 一 致 常 用 之 方 法 為 以 鼓 風 機 水 車 或 水 中 增 氧 機 造 成 水 流 2. 調 節 光 照 : 適 合 的 光 照 大 量 生 產 的 必 要 條 件 之 一 對 於 藻 類 生 長 影 響 很 大 強 光 照 是 藻 類 但 在 高 溫 時 過 強 之 光 照 則 可 能 對 瀑 類 造 成 危 害 一 般 在 室 內 近 窗 口 培 養 之 藻 類 於 中 午 強 光 照 時 應 適 度 遮 光 室 外 小 型 池 亦 可 以 遮 光 網 蓋 上 在 陰 雨 天 時 光 照 通 常 不 足 室 內 可 以 人 工 光 源 增 加 光 照 3. 控 制 溫 度 : 溫 度 是 限 制 單 胞 藻 類 體 內 生 理 機 制 反 應 之 主 要 因 子 在 過 溫 範 圍 內 可 以 生 長 及 繁 殖 ' 如 能 控 制 在 此 溫 度 下 垮 養 當 然 最 理 想 一 般 高 溫 對 藻 類 生 長 不 利 夏 天 室 內 培 養 應 保 持 室 內 通 風 也 可 使 用 降 溫 設 備 降 溫 或 降 低 光 照 率 4.pH 值 之 變 化 : 當 白 天 藻 類 光 合 作 用 旺 盛 時 水 中 之 二 氧 化 碳 大 量 減 少 'ph 值 增 加 夜 間 光 合 作 用 停 止 呼 吸 作 用 增 加 二 氧 化 碳 大 量 被 釋 出 水 解 成 氫 離 子 和 碳 酸 氫 根 離 子 'ph 值 下 降 池 水 藻 色 濃 度 高 時 日 夜 間 池 水 之 氫 離 子 變 化 可 達 倍 因 此 可 於 垮 養 液 中 添 加 緩 衝 劑 以 減 少 ph 值 之 變 化 5. 生 長 情 況 之 觀 察 與 檢 查 : 藻 類 生 長 情 況 之 觀 察 與 檢 查 十 分 重 要 可 暸 解 藻 類 生 長 情 形 生 長 良 好 之 藻 類 可 由 其 顏 色 變 化 細 胞 活 動 能 力 與 是 否 有 沉 澱 附 壁 菌 脹 泡 沫 動 物 性 敵 害 及 池 水 黏 度 變 化 來 觀 察 現 簡 述 如 後 : (1) 顏 色 之 變 化 : 生 長 良 好 之 扁 藻 垮 養 液 顏 色 由 嫩 綠 到 深 綠 色 如 變 黃 則 表 示 生 長 不 良 若 變 清 表 示 死 亡 當 若 有 其 它 顏 色 出 現 102

23 1r.. 蛤 的 種 苦 量 產 表 示 有 雜 藻 或 敵 害 出 現 矽 藻 類 生 長 良 好 時 呈 褐 色 淡 表 示 生 長 不 良 金 藻 類 呈 金 褐 色 當 水 色 由 深 轉 淡 當 水 色 轉 表 示 生 長 不 良 (2) 細 胞 活 動 能 力 : 其 有 活 動 能 力 之 藻 類 垮 養 液 靜 止 時 常 會 呈 雲 霧 狀 在 水 中 聚 集 或 上 浮 (3) 是 否 有 沉 澱 : 有 沉 澱 但 還 保 有 正 常 藻 色 色 變 淡 或 白 色 表 示 死 亡 表 示 尚 未 死 亡 若 顏 (4) 附 壁 : 生 長 良 好 之 藻 類 不 會 附 壁 如 有 表 示 生 長 不 良 (5) 菌 脹 泡 沫 : 水 面 出 現 菌 脹 表 示 細 菌 大 量 增 生 出 現 泡 沫 表 示 藻 類 以 已 經 大 量 死 亡 (6) 動 物 性 敵 害 : 動 物 性 敵 害 包 含 原 生 動 物 輪 蟲 撓 腳 類 動 物 性 敵 害 增 殖 快 速 藻 類 很 快 就 會 被 吃 光 此 等 四 常 用 之 藻 類 培 養 液 配 方 藻 類 垮 養 液 配 方 很 多 最 常 使 用 的 有 的 Walne K GPM 綠 色 藻 肥 料 褐 色 藻 肥 料 及 骨 藻 垮 養 用 肥 料 等 配 方 ( 表 1- 表 7) Walne 配 方 可 用 在 大 多 數 種 類 f/2 配 方 為 美 國 國 家 海 洋 微 藻 收 集 中 心 所 使 用 之 基 本 配 方 K 配 方 為 其 衍 生 配 方 GPM 配 方 為 澳 洲 CSIRO 微 瀑 收 集 中 心 所 使 用 之 基 本 配 方 種 及 大 量 培 養 配 方 藻 垮 養 用 肥 料 則 用 來 為 培 養 骨 藻 五 問 題 及 未 來 展 望 綠 色 藻 肥 料 為 綠 色 藻 保 褐 色 藻 肥 料 則 為 褐 色 藻 類 大 量 培 養 配 方 骨 本 省 文 蛤 人 工 繁 殖 技 術 雖 已 有 20 餘 年 歷 史 了 且 繁 殖 技 術 大 致 已 完 備 但 存 活 率 不 穩 定 仍 是 事 實 有 待 克 服 之 問 題 仍 然 不 少 今 後 發 展 的 趨 勢 為 : ( 一 ) 還 種 育 種 : 目 前 所 使 用 之 繁 殖 種 貝 大 都 來 自 同 一 養 殖 場 判 斷 方 法 出 現 近 親 繁 殖 劣 勢 遺 傳 機 率 相 當 高 因 此 開 發 族 群 運 用 種 問 雜 交 技 術 ' 垮 育 耐 高 溫 抗 高 鹽 度 103

24 成 長 快 速 及 抗 病 力 強 之 文 蛤 ' 為 今 後 發 展 目 標 之 一 ( 二 ) 生 物 技 術 之 利 用 : 台 灣 文 蛤 產 卵 季 節 每 年 從 4-11 月 長 達 八 個 月 之 久 而 此 期 間 下 雨 或 颱 風 機 率 相 當 高 對 池 水 改 變 蠻 大 常 會 誘 發 文 蛤 於 養 殖 池 中 自 然 排 卵 或 排 精 耗 費 不 少 能 量 造 成 體 質 衰 弱 甚 且 死 亡 因 此 能 運 用 多 倍 技 術 ' 垮 育 出 不 會 成 熟 或 成 熟 較 慢 之 文 蛤 以 增 加 成 長 時 間 提 高 餌 料 效 率 促 進 成 長 減 少 因 自 然 排 卵 排 精 後 所 造 成 之 死 亡 將 可 提 高 經 濟 效 益 ( 三 ) 餌 料 生 物 之 垮 養 技 術 及 藻 種 開 發 : 目 前 文 蛤 人 工 繁 殖 遭 遇 到 較 大 困 難 之 一 是 餌 料 生 物 垮 養 穩 定 性 不 夠 因 此 對 垮 養 技 術 上 有 需 史 進 一 步 探 討 如 : 藻 類 的 生 理 對 環 境 條 件 的 要 求 與 培 養 液 成 份 等 此 外 開 發 更 多 的 藻 種 並 充 分 研 究 其 營 養 組 成 以 探 尋 最 佳 餌 料 物 ( 四 ) 研 究 文 蛤 幼 苗 之 管 養 需 求 開 發 人 工 微 粒 子 飼 料 餌 料 生 物 的 依 賴 性 減 少 對 ( 五 ) 繁 殖 技 術 之 開 發 : 期 以 利 用 成 本 最 低 佔 用 空 間 最 小 之 設 備 及 最 簡 便 之 技 術 ' 繁 殖 出 量 最 多 的 健 康 文 蛤 苗 如 : 洗 卵 技 術 種 貝 人 工 催 熟 技 術 等 ( 六 ) 加 強 文 蛤 病 毒 疫 苗 之 間 發 及 貝 類 疾 病 診 斷 技 術 如 單 株 抗 體 核 酸 探 針 之 研 發 104

25 久 蛤 的 種 苦 注 產 表 1.[/2 配 方 (Guillard ' 1975) 每 公 升 加 入 量 單 位 NaNO3 75 毫 克 Na2HPO 毫 克 * 矽 藻 培 養 時 使 用 Na2iO3 * 6.59 毫 克 維 生 素 Bl 100 微 克 B 微 克 H(Biotin) 0.5 微 克 微 量 金 屬 EDTA(Na2) 2.36 毫 克 FeCh.6H2O 3.16 毫 克 MnChAH2O 0.18 毫 克 ZnSO4.7H2O 毫 克 CoCh.6H2O 0.01 毫 克 CuSO4.5H2O AÅ 0 1Å 毫 克 Na2MoO4.2H2O 毫 克 105

26 表 2.Walne 培 養 液 配 方 向 Tal 間 1974) 每 1000 公 升 加 入 量 單 位 財 備 液 A NaNO3 唔 1 Aυ Aυ Aυ Aυ 公 克 使 用 時 每 1 公 升 海 NaH2PO4.2H2O 公 克 水 力 口 貝 宇 備 EDTA(Na2) 公 克 液 Al 毫 H3BO 公 克 升 財 備 FeCh.6H2O 1.30 公 克 jy C 0. 1kë MnCb.4H2O 0.36 公 克 貝 宇 備 液 B 蒸 餾 水 到 毫 升 公 升 升 主 吾 養 矽 藻 時 每 1 公 升 海 水 加 貝 于 備 液 B ZnSO4.7H2O 4.4 公 克 貝 宇 備 液 A CoCb.6H2O 2.0 公 克 l 毫 升 CuSO4.5H2O 2.0 公 克 P 4 * M o { h 4. 4 H i ) 0.9 公 克 貝 宇 備 液 C 0.1 毫 升 財 備 液 D1 蒸 餾 水 到 100 毫 升 毫 升 貝 宇 備 液 C 維 生 素 B1 200 毫 克 維 生 素 B12 10 毫 克 蒸 餾 水 到 100 毫 升 貝 于 備 液 D Na2IO 公 克 蒸 餾 水 到 公 升 表 3. 綠 色 藻 肥 料 大 量 堵 養 配 方 石 炭 酸 主 安 公 克 / 每 噸 水 尿 素 30 公 克 / 每 頓 水 過 磷 酸 鈣 30 公 克 / 每 w 頓 水 106

27 蛤 的 種 訪 華 產 表 4. 褐 色 藻 肥 料 大 量 垮 養 配 方 尿 素 30 公 克 / 每 噸 水 過 磷 酸 鈣 30 公 克 / 每 噸 水 w 氣 化 鐵 2.7 公 克 / 每 頓 水 表 5.K 培 養 液 配 方 (Keller et al ' 1987) 每 公 升 加 入 量 單 位 NaNO3 75 毫 克 * 只 用 於 矽 藻 b6 - a 2. g 1 y c e r o. P O 毫 克 Na2IO3.9H2O 維 生 素 Bl * 15 毫 克 1 0 0Å 微 克 B 微 克 H(Biotin) 戶 0.5υ 微 克 微 量 金 屬 EDTAFe 毫 克 MnCbAH2O 0.18 毫 克 ZnSO4.7H2O 毫 克 CoCb.6H2O 毫 克 CuSO4.5H2O 毫 克 EDTA(Na2) 毫 克 Na2MoO4.2H2O 毫 克 TRIS(ph7) 毫 克 NH4Cl 毫 克 Na2SeO 毫 克 107

28 表 6. 骨 藻 垮 養 用 肥 料 ( 公 克 / 噸 水 )( 廖 等 1991 ) 使 用 例 組 合 磷 酸 針 尿 素 石 東 西 支 主 安 磷 酸 氫 二 納 3 10 過 磷 酸 鈣 氣 化 主 甲 矽 酸 納 2-5 硫 酸 亞 鐵 0.25 氣 化 鐵 0.25 EDTA(N a2)

29 文 蛤 的 稽 首 當 產 表 7.GPM 垮 養 液 配 方 (Loeblich 1975) 每 公 升 加 入 量 KNO3 202 回 叭 Lh 生 U 35 維 索 Bl 且 1I B12 2 H(Biotin) 微 量 金 層 NazEDTA 48.4 叫 kmljkm 112 d 可 i 吋 / 缸 HM 啊!- 2E- 02 Aυ CoClz.6HzO 0.22 H3BO3 土 壤 抽 出 液 哩 位 早 一 -t 宅 克 毫 克 微 克 微 克 微 克 毫 克 毫 克 毫 克 毫 克 毫 克 毫 克 毫 克 109