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稍惟锐
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1 中国农学通报 2012,28(20):77-82 Chinese Agricultural Science Bulletin 猪肺炎支原体地方毒株 P97-R1 基因序列分析及原核表达贾丽艳 1, 高玉花 2 2, 张映 ( 1 山西农业大学食品科学与工程学院, 山西太谷 ; 2 山西农业大学动物科技学院, 山西太谷 ) 摘要 : 为克隆和表达猪肺炎支原体 (Myeoplasma hyopneumoniae) 地方毒株 Z 株 P97-R1 基因, 探索不同菌株 P97-R1 基因的差异及其蛋白作为诊断抗原的可能性本研究根据 GenBank 登陆的猪肺炎支原体 (Mhp)232 株 P97 基因, 使用 Primer Permier 5.0 和 DNAman 设计引物, 以猪肺炎支原体地方毒株 Z 株基因组 DNA 为模板, 用 PCR 方法扩增出了 P97-R1 基因片段, 并将该基因片段连接到 T-easy 和 pet-32a 载体上分别进行测序和原核表达测序结果表明 : 与参考株 232 株序列对比分析发现 Z 株 P97-R1 区发生了多处碱基突变 ; 经 DNAstar 软件分析表明 Z 株包含 11 个 5aa 重复序列,232 株 P97-R1 区包含 15 个 5aa 重复序列, 推测 Rl 重复序列的差异与菌株毒力强弱有关 Z 株 P97-R1 基因原核表达产物经 SDS-PAGE 分析, 得到了分子量约为 30 KD 的蛋白, 经 Western-blot 鉴定表明该表达蛋白具有免疫原性这为 Mhp 的诊断预防及进一步深入研究奠定了基础关键词 : 猪肺炎支原体 ;P97-R1; 序列分析 ; 原核表达中图分类号 :Q 文献标志码 :A 论文编号 : Sequence Analysis and Prokaryotic Expression on P97-R1 Gene of Mycoplasma hyopneumoniae Jia Liyan 1, Gao Yuhua 2, ZhangYing 2 ( 1 College of Food Science and Technology of Shanxi Agricultural University, Taigu Shanxi ; 2 College of Animal Science and Veterinary Medicine of Shanxi Agricultural University,Taigu Shanxi ) Abstract: To express P97-R1 gene on Z strains of Mycoplasma hyopneumoniae for the exploration of possibility of use as a diagnostic antigen, a pair of primers were designed according to the online database of P97 genes of Mhp232 on GenBank, a strain of Mycoplasma hyopneumoniae, and subsequently contributed to the successful amplification of interest segments using the genomic DNA of Z strains of Mhp as templates by PCR. P97-R1 gene was ligated with T-easy, sequenced and was used to transform competent E. coli Rosetta. The results was compared with 232 referential strains. It was revealed that there were many sites of mutations in the P97-R1. There were 11 5-aa repeats in that of the Z strain,15 5-aa repeats in the P97-R1 region of the 232 strains as analyzed by DNAstar software. Speculated that differences in repeat sequence R1 may be the reasons of the strain was strong or weak. Synthesized products were analyzed using SDS-PAGE and 30 KD proteins of the P97-R1 was detected. The reactionogenicity was then verified by Western-blotting. This work laid a foundation for the diagnosis, prevention Mhp and further research the Mycoplasma hyopneumoniae. Key words: Mycoplasma hyopneumoniae; P97-R1; sequence analysis; prokaryotic expression 基金项目 : 山西省教委科技项目猪肺炎支原体的噬菌体展示抗原文库构建及应用 (051056) 第一作者简介 : 贾丽艳, 女,1979 年出生, 山西汾阳人, 讲师, 博士生, 主要从事生物化学与分子生物学方面的研究通信地址 : 山西农业大学食品科学与工程学院,Tel: , liyangjia1979@163.com 通讯作者 : 张映, 女,1954 年出生, 山西偏关人, 教授, 硕士生导师, 研究方向为动物生物化学及分子免疫学通信地址 : 山西农业大学动物科技学院,Tel: , dkyzy@126.com 收稿日期 : , 修回日期 :

肺炎支原体 (Mhp)232 株 P97 基因, 使用 Primer Permier 5.

2 78 中国农学通报 0 引言猪肺炎支原体 (Mycoplasma hyopneumoniae,mhp) 是猪支原体肺炎 (Mycoplasma Pneumoniae of Swine, MPS) 的主要病原猪支原体肺炎是一种慢性顽固性传染病, 药物治疗效果不够理想, 停药后容易复发 [1] 该病一旦在猪场流行很难根除因此,MPS 早期快速准确诊断对更好的预防和早期治疗此病具有重要意义 [2] 猪肺炎支原体表面黏附因子 P97 蛋白是猪肺炎支原体的主要抗原蛋白,R1 区是 P97 抗原决定簇基 [3] 因, 在 Mhp 致病中起着关键作用 Inamine 等报道, 猪感染 Mhp 以后最先产生的抗体是针对 P97 的 IgA 和 IgM, 比 Mhp 引起机体所产生的其他主要抗原要早 30~60 天, 由此,P97-R1 可用于 Mhp 的早期检测强弱毒株黏附力的分析以及疫苗的研制目前, 对猪肺炎支原体不同菌株 P97-R1 基因的研究比较多 [4-8], 但对猪肺炎支原体地方毒株 Z 株 P97-R1 区基因的研究及开发却很少本研究利用目前已知的 Mhp 遗传背景资料和基因工程技术手段, 对猪肺炎支原体地方毒株 Z 株 P97-R1 区进行克隆和原核表达, 为 MPS 的快速诊断预防亚单位疫苗的研制和开发奠定良好的基础 1 材料和方法 1.1 材料与试剂猪肺炎支原体强毒株冻干菌种 (ZF59 株 ) 购自中国兽药监察所 ; 大肠杆菌 DH 5α 大肠杆菌 Rosetta 及表达载体 pet-32a 由本实验室保存 ;λ-ecol I digest Taq DNA 聚合酶 (5 U/µL) dntps mixture(2.5 mmol/l) 购于 Takara 公司 ; 限制性内切酶 EcoR I Hind Ⅲ 购于 Fermentas 公司 ; 异丙基硫代 -β-d 半乳糖苷 (IPTG) 购于 OXOID 公司 ;X-gal 购于 Merck 公司 ;T-easy 载体试剂盒购于北京博迈德生物有限公司 ;T 4 DNA ligase 购于大连宝生物工程有限公司 ; 酶标二抗羊抗兔 (IgG-HRP) DAB 显色试剂盒购于北京索莱宝科技有限公司 ; 兔抗猪肺炎支原体阳性血清购于中国兽医药品监察所 ; 其他均为常规试剂 1.2 方法猪肺炎支原体培养和基因组 DNA 的提取按文献 [9] 方法培养猪肺炎支原体采用文献 [10] 方法提取支原体基因组 DNA PCR 引物的设计及目的片段的扩增根据 GenBank 登录的猪肺炎支原体 232 株 P97 基因序列 (MHU50901), 利用 Primer Permier 5.0 和 DNAman 设计, 合成一对引物, 并在上下游引物的近 5 端添加 EcoR I 和 Hind Ⅲ 酶切位点 ( 小写字母部分 ), 引物由北京奥科生物技术有限公司合成, 引物序列如下 : 5 -GCGaagcttAAGCCATTGGGAAATAGTCT-3, 5 -CCgaattcTTACCTCAGCCGCCAGCAG-3 ;PCR 反应体系为 :2.5 ml 10 PCR buffer (Mg 2 + Free) 1.5 ml MgCl 2 (25 mmol/l) 2 ml dntps Mixture ( 各 2.5 mmol/l) 0.5 ml 上引物 P 1 (10 pmol/ml) 0.5mL l 下引物 P 2 (10 pmol/ml) 0.25 ml TaqDNA 聚合酶 (5 μ/ml) 0.5 ml 模板 16 ml 灭菌超纯水 ; 循环参数为 94 预变性 5 min;94 变性 1 min,52 退火 1 min, 72 延伸 2 min,35cycles 后 ;72 延伸 5 min PCR 完成后, 产物通过琼脂糖凝胶电泳分析 PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳及产物的回收将含有目的基因片段的凝胶块在紫外灯下切下, 放入 Eppendorf 管中, 按照 300 ml/ mg 加入溶胶液,65 水浴加热 10 min, 每隔 2 min 摇匀, 待全部融化, 温度降到室温 ;(2) 将溶胶移入吸附柱,00 g 离心 1 min, 弃去收集管内液体, 将吸附柱放入同一支收集管 ;(3) 在吸附柱中加入等体积的漂洗液,00 g 离心 1 min, 弃去收集管内的液体, 再将吸附柱放入同一支收集管中 ; (4) 将溶胶移入吸附柱, 静置 1 min,00 g 离心 1 min, 弃去收集管内液体, 将吸附柱放入同一个收集管, 离心 1 min;(5) 将吸附柱放入另一支干净的 Eppendorf 管中, 加入 40 ml 预热洗脱缓冲液, 静置 2 min 后,00 g 离心 2 min, 电泳鉴定, 获得目的片段重组克隆质粒的构建转化鉴定及测序将回收的目的片段 P97-R1 和阴性对照与 T-easy 载体用 T4 DNA 连接酶进行黏性末端定向连接, 构建成克隆质粒, 命名为 T-P97-R1, 连接反应体系如下 :5 ml P97-R1/control 1 mlt 载体 2 ml 10 Ligase Buffer 1 ml T 4 DNA Ligase 11 ml 灭菌超纯水, 混匀后,16 条件下连接 12 h 反应连接产物转化于感受态细胞 E. coil DH 5α, 通过蓝白斑筛选获得含有重组质粒的转化子阳性质粒用 PCR 和双酶切鉴定将含有经 PCR 和双酶切鉴定均为阳性重组质粒的菌液, 送北京奥科生物技术有限公司进行测序重组表达载体的构建用 EcoR I 和 Hind Ⅲ 将 pet32a 载体和经测序证实插入片段序列阅读框正确的克隆载体双酶切后, 连接, 转化到制备好的 Rosetta 感受态细胞内利用 Amp 抗性筛选转化子通过菌落 PCR 和双酶切鉴定含阳性重组表达载体的大肠杆菌 Rosetta 菌落诱导表达及 SDS-PAGE 和 Western-blot 分析将重组表达质粒 pet32a-p97-r1 转化的大肠杆菌 Rosetta 菌落接种于含氨苄青霉素 (50 mg/ml) 的 LB 培养基中, 37 过夜活化以 2%(v/v) 接种活化培养物于 5 ml 含

场流行很难根除因此,MPS 早期快速准确诊断对更好的预防和早期治疗此病具有重要意义 [2] 猪肺炎支原体表面黏附因子 P97 蛋白是猪肺炎支原体的主要抗原蛋白,R1 区是 P97 抗原决定簇基 [3] 因, 在 Mhp 致病中起着关键作用

3 贾丽艳等 : 猪肺炎支原体地方毒株 P97-R1 基因序列分析及原核表达 79 氨苄青霉素 (50 mg/ml)lb 液体培养基中,37 培养 2~ 3 h 至 OD 600 达 0.4~0.6( 对数生长期 ) 时, 取 1 ml 菌液 ( 诱导前 ), 加入 IPTG 至终浓度 1 mol/l,37, r/min 诱导表达 2 h, 然后进行 SDS-PAGE 和 Western-blot 分析 2 结果与分析 2.1 Mhp 基因组 DNA 电泳经 0.7% 琼脂糖凝胶电泳检测可知 Mhp Z 株基因组 DNA 大小约为 30 kb, 条带清晰无拖尾现象, 可用于 PCR 扩增反应 2.2 P97-R1 基因的 PCR 扩增通过对 PCR 扩增体系条件的优化, 成功地扩增出目的基因片段经 1.5% 琼脂糖凝胶电泳检测可知以 Mhp Z 株 DNA 为模板扩增出了 P97-R1 区基因序列, 条带约为, 见图蓝白斑筛选重组子观察转化后涂布的蓝白斑筛选培养基, 可见阴性对照生长有蓝色菌落, 重组质粒转化后的培养基上生长有蓝白色菌落, 白色菌落可初步判定为重组子所生长的菌落 2.4 克隆重组子的 PCR 鉴定以重组菌质粒 DNA 为模板,Primer P97-R1 为引物成功扩增出了预期目的基因片段经 1.5% 琼脂糖凝胶电泳检测可知以 Mhp Z 株重组质粒 DNA 为模板可扩增出 P97-R1 区基因序列, 条带为, 见图克隆重组质粒双酶切鉴定将 Mhp Z 株基因插入到克隆载体的重组质粒用 EcoR I 和 Hind Ⅲ 双酶切, 结果得到约为 2.7 kb 和 2 个片段, 说明目的基因片段插入正确, 见图 M 0 0 1:P97-R1 gene PCR products of Z strain Lane;M:DNA Marker 图 1 Mhp Z 株 P97-R1 区基因的 PCR 扩增产物 1:P97-R1 gene PCR products of Z strain ;M:DNA Marker 图 2 Z 株质粒 DNA 为模板 P97-R1 区基因 PCR 产物 :Double-enzyme digestion of recombinant plasmid of Z strain;m:dna Marker 0 图 3 P97-R1 重组质粒的双酶切鉴定

7% 琼脂糖凝胶电泳检测可知 Mhp Z 株基因组 DNA 大小约为 30 kb, 条带清晰无拖尾现象, 可用于 PCR 扩增反应 2.2 P97-R1 基因的 PCR 扩增通过对 PCR 扩增体系条件的优化, 成功地扩增出目的基因片段经 1.

4 80 中国农学通报 P97-R1 区测序结果及目的基因推导氨基酸序列分析 Mhp Z 株 P97-R1 区测序结果与参照株 232 株的 P97-R1 区 DNA 对比, 并用 DNAstar 软件预测其编码的氨基酸序列, 见图 4 结果发现 :Z 株与 232 株相比较, 共有 11 个位点发生了碱基突变, 其中 6 个位点由原来的 A 变 T,3 个位点 G 变 A,2 个位点 A 变 G,Z 株缺失了 81 个碱基从氨基酸序列分析结果发现 Z 株包含有 11 个 5aa 重复,232 株包含有 15 个 5aa (AAKPA/V), 其中 232 株的第 4 个重复单元为 TTKPV,Z 株为 AAKPV, 由苏氨酸变成丙氨酸在其 5aa 重复序列之后包含 TN 简单重复序列,232 株包含 1 个,Z 株包含 3 个 2.7 含 Mhp Z 株 P97-R1 菌落 PCR 鉴定含 Mhp Z 株 P97-R1 质粒 pet32a-p97-r1 的重组菌通过菌落 PCR 扩增获得了一条的条带, 见图 GCAGCAAAACCAGAAGCAGCAAAACCAGTAGCGGCTAAACCAGAAACAACAAAACCAGTA Z *****T*****T********************A********T******G*********** GCAGCAAAACCAGTAGCGGCTAAACCAGAAGCAGCAAAACCAGTAGCGGCTAAACCAGAA Z **G**T*****T*A***A**********T********** GCAGCAAAACCAGTAGCGGCTAAACCAGAAGCAGCAAAACCAGTTGCTACTAATACTG Z GCTTTTCACTTACAAATAAA Z CCAGTTGCTACTAATACTAATACTAATACTG******************** CCAAAAGAAGACTATTTCCCAATGGCTT Z **************************** 232 株 R1 区氨基酸序列 : AAKPEAAKPVAAKPETTKPVAAKPEAAKPEAAKPVAAKPEAAKPVAAKPEAAKPVAAKPEAAKPVAAKPEAAKPVATNTGFSLT NKPKEDYFPMA Z 株 R1 区氨基酸序列 : AAKPEAAKPVAAKPEAAKPVAAKPEAAKPVAAKPEAAKPVAAKPEAAKPVAAKPVATNTNTNTGFSLTNKPKEDYFPMA 图 4 Mhp Z 株 P97-R1 碱基序列及氨基酸序列与 232 株对比 :PCR products Line;M:DNA Mraker 图 5 菌落 PCR 鉴定 P97-R1 基因结果 2.8 重组表达质粒的双酶切鉴定将插入 Mhp Z 株 P97-R1 基因的重组质粒用 EcoR I 和 Hind Ⅲ 双酶切, 结果得到约为 5.8 kb 和的 2 个片段, 证明目的片段已经插入表达载体, 见图重组菌的诱导表达重组菌 Rosetta(pET32a-P97-R1)SDS-PAGE 电泳重组菌 Rosetta(pET32a- P97-R1) 经 1 mmol/l 的 1:Double-enzyme digestion of recombinant plasmid Line; M:DNA Marker 0 图 6 P97-R1 区重组质粒的酶切鉴定 IPTG 诱导 2 h,sds-page 电泳结果显示 : 与未诱导菌 ( 泳道 2) 和空质粒诱导菌 ( 泳道 3) 相比, 重组菌 ( 泳道 1) 在 30 KD 的位置明显多出一条条带 ( 图 7), 表明 P97-R1 基因经 IPTG 诱导后表达

基突变, 其中 6 个位点由原来的 A 变 T,3 个位点 G 变 A,2 个位点 A 变 G,Z 株缺失了 81 个碱基从氨基酸序列分析结果发现 Z 株包含有 11 个 5aa 重复,232 株包含有 15 个 5aa (AAKPA/V), 其中 232 株的第 4 个重复单元为 TTKPV,Z 株为

5 贾丽艳等 : 猪肺炎支原体地方毒株 P97-R1 基因序列分析及原核表达 81 KD Western-blot 鉴定以兔抗猪肺炎支原体高免血清为一抗, 辣根过氧化酶标记的羊抗兔抗体做为二抗, 诱导表达的产物经 Western-blot 鉴定, 结果显示 : 在 30 KD 处有条带出现 ( 图 8), 表明 pet32a-p97r1 转化菌经诱导表达的产物具有免疫原性 3 讨论 2 3 1:Protein expression induced by IPTG for 2 h;2:the bacteria did not induced by IPTG;3:Empty plasmid induced by IPTG;M: Protein Marker 图 7 Mhp Z 株 P97-R1 基因蛋白诱导表达产物 KD :Imumunobloting of pet32a- P97-R1;M:Protein Marker 本研究根据 GenBank 登陆的猪肺炎支原体 (Mhp) 232 株 P97 基因, 使用 Primer Permier 5.0 和 DNAman 设计引物, 以猪肺炎支原体地方毒株 Z 株基因组 DNA 为模板, 用 PCR 方法扩增出了 P97-R1 基因片段, 将该基因片段连接到 T-easy 和 pet32a 载体上分别进行测序和原核表达测序结果与参考株 232 株序列对比发现 :Z 株 P97-R1 区发生了多处碱基突变,A T 碱基处于 [11] 极其不稳定的状态, 容易缺失和突变, 这与邵国青提出的支原体进化过程中 A T 碱基压力作用的观点相符经 DNAstar 软件分析表明,Z 株包含 11 个 5 aa 30 图 8 pet32a-p97-r1 Western-blot 鉴定结果重复序列, 国际标准株 232 株的 P97-R1 区包含 15 个 5 aa 重复序列,5 aa 重复单元的第 4 个重复单元氨基酸 [12] 序列为 TTKPV, 李颖平等发现国际标准株 J 株 P97-R1 区 5 aa 重复单元中第四个重复单元的氨基酸序列同样为 TTKPV, 而国内弱毒株 168 株的第四个重复单元和 Z 株的第四个重复单元的氨基酸序列为 AAKPV, 推断此序列与毒株的地区性存在着一定的联系在其 5aa 重复单元之后为 TN 简单重复序列, 分析发现 232 株的 5aa 重复单元后含 1 个 TN 序列,Z 株包含 [13] 2 个 TN 序列, 贾广乐等测得的 168 株同样也包含 2 个 TN 重复, 推测该简单序列的重复可能和毒株的地区差异也有一定的联系为进一步验证 R1 区的免疫原性, 本实验构建了 Z 株 P97-R1 基因的原核表达载体, 并在其宿主菌大肠杆菌 Rosetta 中经 IPTG 诱导表达, 获得大小约为 30 KD 的蛋白, 所表达蛋白经 Westen-blot 检测显示良好的免 [14] 疫原性, 从而获得了 P97-R1 区蛋白与刘茂军报道的 168 株 P97-R1 区所表达的蛋白 (26.5 KD) 相比,Z 株 [15] P97-R1 区表达蛋白分子量略大张美晶等利用 Mhp BST27 株成功制备了 P97 C 末端单克隆抗体, 通过 Westen-blot 验证该抗体具有免疫原性, 黏附实验表明其单克隆抗体不具备抗黏附特性本实验与其相比, 成功地构建了 Z 株 P97-R1 基因的原核表达载体, 并在大肠杆菌 Rosetta 中经 IPTG 诱导表达, 获得大小约为 30 KD 的蛋白, 经 Westen-blot 检测显示良好的免疫原性, 从而获得了黏附因子 R1 区蛋白, 这为 Mhp Z 株 - 宿主相互作用机理的研究, 支原体种类的免疫学鉴定, 保护性免疫诱导的分析及建立基于抗原蛋白的特异敏感的诊断方法和亚单位疫苗的研制奠定了基础 4 结论 (1) 运用 PCR 方法扩增出了 Mhp Z 株 P97-R1 基因片段, 片段大小扩增片段经序列分析及比对, 揭示猪肺炎支原体毒株的强弱与此区的碱基突变和 5 aa 重复次数相关 ;(2) 本研究成功原核表达了 Mhp Z 株 P97-R1 蛋白, 分子量约为 30 KD 通过 Western-blot 鉴定表明表达的目的蛋白具有良好的免疫原性参考文献 [1] 沈青春, 宁宜宝, 覃青松. 猪肺炎支原体的研究进展 [J]. 中国兽药杂志,2003,37(6): [2] 肖国生, 文心田, 吕祖德, 等. 猪支原体肺炎诊断技术 [J]. 中国兽药杂志,2003,37(7): [3] Inamine J M, Kcho K, Sloechel A, et al. Evidence that UGA is read as a tryptopan codon rather than as a stop codon by M. hyopneumoniae, M.genitalium and M. gallisepticum[j].bacteriol,

49 35 26 19 2.9.2 Western-blot 鉴定以兔抗猪肺炎支原体高免血清为一抗, 辣根过氧化酶标记的羊抗兔抗体做为二抗, 诱导表达的产物经 Western-blot 鉴定, 结果显示 : 在 30 KD 处有条带出现 ( 图 8), 表明 pet32a-p97r1 转化菌

6 82 中国农学通报 ,172(1): [4] 徐广贤, 李娟, 李勇, 等. 猪肺炎支原体 P102 基因 C 末端序列的克隆及原核表达 [J]. 黑龙江畜牧兽医,2009,3(1) [5] Chen J R, Lin J H, Weng C N, et al. Identification of a novel adhesin-like glycoprotein from Mycoplasma hyopneumoniae[j]. Veterinary Microbiology,1998,62(2) [6] Klinkert M Q. surface proteins of Mycoplasma hyopeumoniae identified from an escherchia coil expression plasmid library[j]. Infect Imuun,1985,49: [7] 张映, 王肈悦, 聂向庭. 猪肺炎支原体膜蛋白的电泳分析及免疫印迹检测 [J]. 畜牧兽医,2003,35:6-7. [8] 熊焰, 孙霞, 苟琳. 猪肺炎支原体 MY-99 株膜蛋白 SDS-PAGE 分析及免疫原性研究 [J]. 畜牧兽医学报,2004,35(1): [9] 丁庆猷. 猪肺炎霉形体培养基配方 [M]. 中国兽药监察所,1986:1-6. [10] 张映, 任斌知, 聂向庭. 猪肺炎支原体基因组 DNA 文库的构建 [J]. 中国预防兽医学报,2002,2(6): [11] 邵国青, 蔡宝祥. 猪肺炎支原体的分子生物学研究进展 [J]. 中国人兽共患病杂志,1999,15: [12] 李颖平. 猪肺炎支原体 P97 基因抗原表位片段的克隆表达及黏附测定 [D]. 太谷 : 山西农业大学硕士论文,2006:6. [13] 贾广乐. 猪肺炎支原体 P97 基因的 PCR 扩增序列分析及原核表达 [D]. 太谷 : 山西农业大学硕士论文,2002:6. [14] 刘茂军. 猪肺炎支原体 P97 基因抗原决定簇 R1 区重组表达质粒的构建表达及活性鉴定 [D]. 山西农业大学硕士论文,2003:6. [15] 张美晶, 王亮, 李媛, 等. 猪肺炎支原体 P97C 末端蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位分析 [J]. 中国兽医科学,2010,40(02):

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说明为了反映教运行的基本状态, 为校和院制定相关政策和进行教建设与改革提供据依据, 校从程资源 ( 开类别开量规模 ) 教师结构程考核等维度, 对 2015 年春季期教运行基内部资料东北师范大教运行基本状态据报告 2015 年春季期教务处 2015 年 10 月 27 日说明为了反映教运行的基本状态, 为校和院制定相关政策和进行教建设与改革提供据依据, 校从程资源 ( 开类别开量规模 ) 教师结构程考核等维度,