Drug Evaluation Research 第 35 卷 第 4 期 2012 年 8 月 1.3 实 验 动 物 KM 小 鼠 ( 雌 雄 各 半 ),Wistar 大 鼠 ( 雄 性 ), 均 购 于 天 津 市 山 川 红 实 验 动 物 科 技 有 限 公 司, 合 格
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1 Drug Evaluation Research 第 35 卷 第 4 期 2012 年 8 月 通 脉 养 心 方 提 取 工 艺 优 选 徐 道 情, 耿 彤 天 津 中 新 药 业 集 团 股 份 有 限 公 司, 天 津 摘 要 : 目 的 优 选 通 脉 养 心 方 的 提 取 工 艺 方 法 使 用 氯 仿 诱 发 小 鼠 室 颤 模 型 和 大 鼠 离 体 胸 主 动 脉 血 管 环 试 验 结 果 结 合 甘 草 酸 含 量 作 为 指 标, 通 过 正 交 试 验 优 化 通 脉 养 心 方 提 取 工 艺, 并 进 行 验 证 结 果 确 定 最 优 提 取 工 艺 为 60% 乙 醇 提 取 2 次, 第 一 次 8 倍 量 水 提 取 1.5 h, 第 二 次 6 倍 量 水 提 取 1 h 结 论 工 艺 优 化 后 的 通 脉 养 心 方 具 有 良 好 药 理 活 性, 呈 现 量 效 关 系 关 键 词 : 通 脉 养 心 方 ; 提 取 工 艺 ; 心 律 失 常 ; 胸 主 动 脉 环 中 图 分 类 号 :R943 文 献 标 志 码 :A 文 章 编 号 : (2012) Optimization of extraction technology for Tongmai Yangxin Prescription XU Dao-qing, GENG Tong Tianjin Zhongxin Pharmaceutical Group Co. Ltd., Tianjin , China Abstract: Objective To optimize extraction technology of Tongmai Yangxin prescription. Methods Animal arrhythmia on mice by chloroform and isolated thoracic aortic ring of rats to observe effects of pharmacological activity and contents of glycyrrhizic acid were used to optimization and verify the extraction process of Tongmai Yangxin prescription. Results Optimum extraction conditions were as follows: heating refluxing extracted 2 times with the amount of 60% ethanol for 8 times 1.5 hours and 6 times 1 hour. Conclusion Tongmai Yangxin prescription in the optimized extraction technology with significant pharmacological activity, showing the dose-effect relationship. Key words: Tongmai Yangxin Prescription; extraction technology; arrhythmia; thoracic aortic ring 通 脉 养 心 丸 为 天 津 中 新 药 业 集 团 股 份 有 限 公 司 乐 仁 堂 制 药 厂 生 产, 由 炙 甘 草 汤 与 生 脉 散 化 裁 而 得, 具 有 益 气 养 阴 通 脉 止 痛 之 功 效, 临 床 用 于 治 疗 冠 心 病 心 绞 痛 及 心 律 不 齐 之 气 阴 两 虚 证, 症 见 胸 痛 胸 闷 心 悸 气 短 脉 结 代 [1] 本 实 验 根 据 处 方 药 材 主 要 成 分 的 性 质 及 其 药 理 作 用, 设 计 提 取 路 线, 采 用 氯 仿 诱 发 小 鼠 室 颤 试 验 及 大 鼠 离 体 胸 主 动 脉 血 管 环 试 验, 考 察 通 脉 养 心 方 不 同 工 艺 提 取 物 在 药 效 上 的 差 异 根 据 试 验 结 果 确 定 提 取 工 艺, 使 用 正 交 法 进 一 步 优 化 工 艺 参 数, 并 进 行 药 效 试 验 验 证 1 材 料 1.1 药 材 处 方 药 材 均 由 天 津 中 新 药 业 集 团 股 份 有 限 公 司 乐 仁 堂 制 药 厂 提 供, 经 鉴 定 均 为 中 国 药 典 正 品 药 材 1.2 药 品 与 试 剂 甘 草 酸 铵 对 照 品 ( 批 号 , 中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院 ), 无 水 乙 醇 ( 分 析 纯, 批 号 , 天 津 市 科 密 欧 化 学 试 剂 有 限 公 司 ), 乙 腈 ( 色 谱 纯, 批 号 , 天 津 市 科 密 欧 化 学 试 剂 有 限 公 司 ), 盐 酸 利 多 卡 因 注 射 液 ( 批 号 , 天 津 金 耀 氨 基 酸 有 限 公 司 ), 氯 仿 ( 分 析 纯, 批 号 , 天 津 市 科 密 欧 化 学 试 剂 有 限 公 司 ), 重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 注 射 液 ( 批 号 , 武 汉 远 大 制 药 集 团 有 限 公 司 ), 二 甲 基 亚 砜 ( 分 析 纯, 批 号 , 天 津 市 科 密 欧 化 学 试 剂 有 限 公 司 ), 氯 化 钠 ( 天 津 科 密 欧 化 学 试 剂 有 限 公 司, 批 号 ), 氯 化 钾 ( 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司, 批 号 F ), 氯 化 钙 ( 天 津 市 北 方 化 玻 购 销 中 心, 批 号 ), 磷 酸 二 氢 钾 ( 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司, 批 号 F ), 硫 酸 镁 ( 天 津 力 特 吉 尔 环 保 技 术 研 究 所, 批 号 ), 碳 酸 氢 钠 ( 天 津 科 密 欧 化 学 试 剂 有 限 公 司, 批 号 ), 葡 萄 糖 ( 天 津 市 北 方 天 医 化 学 试 剂 厂, 批 号 ), 以 上 试 剂 均 为 市 售 分 析 纯 收 稿 日 期 : 作 者 简 介 : 徐 道 情 E-mai: @qq.com Tel: (022)
2 Drug Evaluation Research 第 35 卷 第 4 期 2012 年 8 月 1.3 实 验 动 物 KM 小 鼠 ( 雌 雄 各 半 ),Wistar 大 鼠 ( 雄 性 ), 均 购 于 天 津 市 山 川 红 实 验 动 物 科 技 有 限 公 司, 合 格 证 号 SCXK( 津 ) 仪 器 Agilent 1200 高 效 液 相 色 谱 仪 ( 美 国 Agilent 公 司 ),Sartorius BP211D 型 分 析 天 平 ( 德 国 赛 多 利 斯 公 司 ),HV 4 离 体 组 织 器 官 恒 温 灌 流 系 统 ( 成 都 泰 盟 科 技 有 限 公 司 ) 2 提 取 工 艺 考 察 2.1 样 品 制 备 根 据 传 统 中 医 药 理 论 以 及 处 方 中 各 药 味 的 化 学 成 分 药 理 作 用, 设 计 提 取 工 艺 路 线, 制 备 样 品 工 艺 一 : 龟 甲 加 水 先 煎, 后 加 入 鸡 血 藤 党 参 大 枣 煎 煮 2 次, 滤 液 浓 缩, 加 入 乙 醇, 静 置 24 h, 滤 过, 滤 液 备 用 ; 其 余 地 黄 等 6 味, 用 乙 醇 浸 渍 48 h 后 渗 漉, 收 集 渗 漉 液, 与 上 述 提 取 液 合 并, 减 压 回 收 乙 醇 至 稠 膏, 将 阿 胶 粉 碎 成 细 粉, 过 筛, 与 上 述 稠 膏 混 合, 干 燥, 粉 碎 成 细 粉 工 艺 二 : 龟 甲 加 水 先 煎, 后 加 入 鸡 血 藤 党 参 大 枣 麦 冬 地 黄 煎 煮 2 次, 滤 液 浓 缩, 加 入 乙 醇, 静 置 24 h, 滤 过, 滤 液 备 用 ; 其 余 五 味 子 等 4 味, 乙 醇 提 取 2 次, 与 上 述 提 取 液 合 并, 减 压 回 收 乙 醇 至 稠 膏, 将 阿 胶 粉 碎 成 细 粉, 过 筛, 与 上 述 稠 膏 混 合, 干 燥, 粉 碎 成 细 粉 工 艺 三 : 鸡 血 藤 党 参 五 味 子 大 枣 龟 甲 加 水 煎 煮, 合 并 滤 液, 滤 过, 浓 缩 成 稠 膏, 其 余 药 材 粉 碎 成 细 粉, 与 稠 膏 混 合 均 匀, 干 燥, 粉 碎 成 细 粉 工 艺 四 : 除 阿 胶 外 10 味 药 材 加 水 煎 煮, 提 取 液 浓 缩 至 稠 膏, 阿 胶 粉 碎, 与 上 述 稠 膏 混 合, 干 燥, 粉 碎 成 细 粉 [1] 2.2 样 品 中 甘 草 酸 定 量 测 定 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 Agilent XDB C 18 (250 mm 4.6mm,5 μm); 流 动 相 为 乙 腈 - 水 - 冰 醋 酸 ( ); 检 测 波 长 254 nm; 体 积 流 量 1.0 ml/min, 理 论 塔 板 数 按 甘 草 酸 峰 计 算 应 不 低 于 对 照 品 溶 液 配 制 取 甘 草 酸 铵 对 照 品 适 量, 精 密 称 定, 加 稀 乙 醇 制 成 含 甘 草 酸 铵 100 μg/ml 的 溶 液 ( 折 合 甘 草 酸 为 μg/ml), 即 得 供 试 品 溶 液 配 制 取 工 艺 一 至 工 艺 四 制 得 的 干 燥 粉 碎 物 约 0.5 g, 精 密 称 定, 置 具 塞 锥 形 瓶 中, 精 密 加 入 稀 乙 醇 25 ml, 密 塞, 称 定 质 量, 超 声 处 理 30 min, 放 冷, 再 称 定 质 量, 用 稀 乙 醇 补 足 减 失 的 质 量, 摇 匀, 滤 过, 取 续 滤 液, 即 得 测 定 结 果 精 密 吸 取 上 述 供 试 品 溶 液 与 对 照 品 溶 液 10 μl, 分 别 注 入 液 相 色 谱 仪, 记 录 色 谱 图 按 外 标 法 以 峰 面 积 计 算 样 品 的 含 量 各 工 艺 制 得 样 品 中 甘 草 酸 的 质 量 分 数 分 别 为 mg/g 2.3 提 取 工 艺 确 定 通 脉 养 心 方 为 炙 甘 草 汤 化 裁 而 来, 甘 草 为 其 中 主 药 同 时 甘 草 酸 是 中 国 药 典 2010 年 版 一 部 通 脉 养 心 丸 通 脉 养 心 口 服 液 含 量 测 定 项 下 指 标 成 分 因 此, 试 验 中 按 照 药 典 方 法 对 4 个 不 同 工 艺 制 备 而 成 样 品 进 行 了 甘 草 酸 含 量 测 定 由 测 定 结 果 可 知 工 艺 一 工 艺 二 中 甘 草 酸 含 量 较 高, 且 出 膏 率 较 低 因 此 决 定 对 工 艺 一 和 工 艺 二 制 得 的 样 品 进 行 药 效 对 比 试 验 3 药 效 试 验 对 比 3.1 离 体 试 验 受 试 样 品 配 制 离 体 试 验 受 试 样 品 需 要 配 制 成 澄 清 溶 液, 因 此 在 离 体 试 验 中 将 通 脉 养 心 方 提 取 物 均 进 行 再 次 提 取 具 体 操 作 方 法 : 受 试 样 品 用 70% 乙 醇 提 取 2 次, 提 取 液 合 并 浓 缩, 减 压 干 燥, 再 用 60% 的 二 甲 基 亚 砜 溶 解 3.2 方 法 [2-4] 氯 仿 诱 发 小 鼠 室 颤 试 验 KM 小 鼠 按 照 体 质 量 随 机 分 组, 即 空 白 对 照 组, 阳 性 药 利 多 卡 因 组 (15 mg/kg), 通 脉 养 心 方 g 生 药 /kg 工 艺 一 组 和 工 艺 二 组, 每 组 10 只, 雌 雄 各 半 利 多 卡 因 组 为 尾 iv 单 次 给 药 后 即 时 观 察 其 余 各 组 均 为 ig 给 药, 每 日 给 药 1 次, 连 续 给 药 14 d 末 次 给 药 1 h 后 将 小 鼠 投 入 倒 扣 的 500 ml 烧 杯 中, 烧 杯 内 放 一 个 含 氯 仿 5 ml 的 脱 脂 棉 球 (0.5 g), 小 鼠 呼 吸 停 止 立 即 取 出 剖 开 胸 腔, 肉 眼 观 察 心 室 颤 动 发 生 情 况, 计 算 每 组 实 验 动 物 的 室 颤 发 生 率 每 测 试 一 只 小 鼠 后 向 棉 球 中 添 加 1 ml 氯 仿 试 验 数 据 采 用 SPSS11.5 软 件 Fisher 检 验 进 行 分 析 室 颤 发 生 率 = 发 生 室 颤 动 物 数 / 该 组 别 全 部 动 物 数 [2, 5] 大 鼠 离 体 胸 主 动 脉 血 管 环 试 验 大 鼠 断 头 后, 打 开 胸 腔, 迅 速 剪 下 胸 主 动 脉 降 支, 置 于 盛 有 4 氧 饱 和 的 K-H 液 的 培 养 皿 中 冲 洗 血 管 内 血 迹, 剔 除 多 余 脂 肪 和 结 缔 组 织, 剪 成 3~4 mm 的 血 管 环, 将 血 管 环 的 一 端 用 不 锈 钢 钩 垂 直 连 接 在 组
3 Drug Evaluation Research 第 35 卷 第 4 期 2012 年 8 月 织 浴 槽 中, 另 一 端 连 接 张 力 换 能 器, 使 用 生 物 机 能 系 统 记 录 血 管 环 张 力 的 变 化 浴 槽 中 K-H 液 保 持 37, 持 续 通 95% O 2 和 5% CO 2, 调 节 组 织 灌 流 系 统 的 张 力 调 节 旋 钮, 给 予 血 管 环 2 g 初 始 张 力, 平 衡 1.5~2 h, 每 15 min 更 换 营 养 液 1 次 平 衡 结 束 后, 用 去 甲 肾 上 腺 素 ( 终 浓 度 为 10 6 mol/l) 造 成 血 管 收 缩, 主 动 脉 环 稳 定 后, 采 用 累 计 加 样 法 在 浴 槽 中 加 入 通 脉 养 心 方 提 取 液, 累 计 依 次 加 样 使 药 物 终 浓 度 分 别 为 mg 生 药 /ml 每 次 加 药 观 察 5 min 后 记 录 张 力 值 对 照 组 加 入 相 同 体 积 的 60% 二 甲 亚 砜 溶 液 试 验 数 据 采 用 单 因 素 方 差 分 析 用 SPSS11.5 软 件 进 行 处 理 张 力 下 降 率 =( 给 药 前 张 力 值 - 给 药 后 张 力 值 )/ 给 药 前 张 力 值 3.3 结 果 氯 仿 诱 发 小 鼠 室 颤 试 验 结 果 表 明, 通 脉 养 心 方 不 同 工 艺 提 取 物 均 可 降 低 氯 仿 致 小 鼠 室 颤 的 发 生 率 但 5 g 生 药 /kg 剂 量 下, 与 空 白 对 照 组 相 比, 工 艺 一 差 异 无 显 著 性, 工 艺 二 差 异 有 显 著 性 (P< 0.05) 结 果 见 表 大 鼠 离 体 胸 主 动 脉 血 管 环 试 验 结 果 表 明, 通 脉 养 心 方 不 同 工 艺 提 取 物 均 能 抑 制 去 甲 肾 上 腺 素 造 成 的 血 管 环 收 缩, 表 现 为 张 力 下 降 但 10 mg 生 药 /ml 剂 量 下, 与 空 白 对 照 组 比 较, 工 艺 一 差 异 无 显 著 性, 工 艺 二 差 异 具 有 极 显 著 性 (P<0.01) 结 果 见 表 2 表 1 通 脉 养 心 方 不 同 工 艺 提 取 物 对 氯 仿 致 小 鼠 室 颤 的 影 响 Table 1 Effect of extracts by different techniques of Tongmai Yangxin Prescription on ventricular fibrillation induced by chloroform in mouse 组 别 剂 量 /(g 生 药 kg 1 ) 室 颤 发 生 率 /% 对 照 盐 酸 利 多 卡 因 15 mg kg 1 0 ** 通 脉 养 心 方 工 艺 一 * * 工 艺 二 5 50 * * * 与 对 照 组 比 较, * P<0.05, ** P<0.01 * P < 0.05, ** P < 0.01 vs blank group 表 2 通 脉 养 心 方 不 同 工 艺 提 取 物 对 大 鼠 离 体 血 管 环 的 影 响 ( x ± s, n =10) Table 2 Effect of extracts by different techniques of Tongmai Yangxin prescription on vascular ring tension in vitro of rats ( x± s, n =10) 组 别 不 同 剂 量 (mg 生 药 ml 1 ) 下 的 张 力 下 降 率 /% 对 照 0.90± ± ± ± ±7.70 通 脉 养 心 方 工 艺 一 0.37± ± ± ± ±5.74 * 工 艺 二 0.49± ± ± ±3.03 ** 25.20±3.76 ** 与 对 照 组 比 较 : * P<0.05, ** P<0.01 * P < 0.05, ** P < 0.01 vs blank group 4 正 交 试 验 优 化 通 脉 养 心 方 醇 提 组 提 取 工 艺 药 效 试 验 对 比 结 果 显 示, 在 抗 实 验 性 心 率 失 常 以 及 舒 张 血 管 方 面, 通 脉 养 心 方 工 艺 二 的 药 理 作 用 优 于 工 艺 一 使 用 正 交 试 验, 对 工 艺 二 醇 提 组 ( 五 味 子 甘 草 制 何 首 乌 桂 枝 ) 提 取 工 艺 进 行 优 化 水 提 组 工 艺 采 用 中 国 药 典 2010 年 版 一 部 收 载 的 通 脉 养 心 口 服 液 制 法 项 下 的 方 法, 暂 不 进 行 考 察 乙 醇 体 积 分 数 溶 剂 用 量 和 提 取 时 间 是 决 定 提 取 率 的 重 要 因 素 在 单 因 素 筛 选 预 实 验 的 基 础 上, 按 照 L 9 (3 4 ) 正 交 表 安 排 试 验, 因 素 水 平 见 表 3 取 醇 提 组 药 材, 粉 碎 成 粗 粉, 称 取 9 份, 置 于 圆 底 烧 瓶 中, 按 照 表 1 中 的 试 验 条 件 进 行 提 取 试 验 方 法 结 果 及 方 差 分 析 见 表 4 和 5 直 观 分 析 结 果 ( 表 4) 表 明, 影 响 甘 草 酸 含 量 的 因 素 中, 按 重 要 性 次 序 为 :A>C>B 最 佳 组 合 为 A 2 B 2 C 3 方 差 分 析 ( 表 5) 结 果 表 明, 乙 醇 体 积 浓 度 对 甘 草 酸 含 量 有 显 著 性 影 响, 溶 剂 用 量 和 提 表 3 因 素 水 平 表 Table 3 Factors and levels 因 素 水 平 乙 醇 体 积 分 数 (A)/% 溶 剂 用 量 (B)/ 倍 提 取 时 间 (C)/h
4 Drug Evaluation Research 第 35 卷 第 4 期 2012 年 8 月 试 验 号 表 4 正 交 试 验 结 果 Table 4 Results of orthogonal test 因 素 A B C D 甘 草 酸 /(mg g 1 ) K K K R 表 5 方 差 分 析 Table 5 Variances analysis 方 差 来 源 偏 差 平 方 和 自 由 度 F F 临 界 值 P A <0.05 B C D( 误 差 ) 取 时 间 对 结 果 无 显 著 性 影 响 因 此 结 合 直 观 分 析, 确 定 最 佳 提 取 工 艺 为 : 第 一 次 加 8 倍 量 60% 乙 醇 提 取 1.5 h, 第 二 次 加 6 倍 量 60% 乙 醇 提 取 1 h 5 最 佳 提 取 工 艺 药 效 验 证 5.1 受 试 样 品 配 制 按 照 4.2 中 确 定 的 最 优 工 艺 制 备 通 脉 养 心 样 品, 并 配 置 成 离 体 受 试 样 品, 配 制 方 法 同 氯 仿 诱 发 小 鼠 室 颤 试 验 试 验 方 法 同 结 果 表 明,10 20 g 生 药 /kg 通 脉 养 心 方 最 佳 提 取 工 艺 提 取 物 可 以 降 低 氯 仿 致 小 鼠 室 颤 的 发 生 率, 与 空 白 对 照 组 相 比, 差 异 有 显 著 性 (P<0.05 P<0.01), 呈 现 量 效 关 系 结 果 见 表 大 鼠 离 体 胸 主 动 脉 血 管 环 试 验 试 验 方 法 同 mg 生 药 /ml 通 脉 养 心 方 最 佳 提 取 工 艺 提 取 物 能 抑 制 去 甲 肾 上 腺 素 造 成 的 大 鼠 离 体 胸 主 动 脉 血 管 环 的 收 缩, 表 现 为 张 力 下 降 与 对 照 组 比 较, 具 有 显 著 性 差 异 (P<0.05 P<0.01), 呈 现 量 效 关 系 结 果 见 表 7 表 6 通 脉 养 心 方 最 佳 提 取 工 艺 提 取 物 对 氯 仿 诱 发 小 鼠 室 颤 的 影 响 (n=10) Table 6 Effect of optimum extraction of Tongmai Yangxin Prescription on ventricular fibrillation induced by chloroform in mouse (n=10) 组 别 剂 量 /(g 生 药 kg 1 ) 室 颤 发 生 率 /% 对 照 盐 酸 利 多 卡 因 15 mg kg 1 0 ** 通 脉 养 心 方 * 与 对 照 组 比 较 : * P<0.01, ** P<0.05 * P<0.05, ** P<0.01 vs blank group ** 表 7 通 脉 养 心 方 最 佳 工 艺 提 取 物 对 离 体 大 鼠 胸 主 动 脉 血 管 环 的 影 响 ( x ± s, n =10) Table 7 Effect of optimum extraction of Tongmai Yangxin Prescription on vascular ring tension in vitro of rats 组 别 不 同 剂 量 (mg 生 药 ml 1 ) 下 的 张 力 下 降 率 /% 对 照 2.70± ± ± ± ±5.65 通 脉 养 心 方 4.85± ± ±10.98 * 26.01±12.61 * 34.51±18.81 ** 与 对 照 组 比 较 : * P<0.01, ** P<0.05 P < 0.01, ** P < 0.05 vs blank group
5 Drug Evaluation Research 第 35 卷 第 4 期 2012 年 8 月 讨 论 通 脉 养 心 丸 由 炙 甘 草 汤 与 生 脉 散 化 裁 而 得, 方 中 用 炙 甘 草 益 气 养 心 为 主 药, 党 参 大 枣 益 气 补 脾 养 心, 再 辅 以 滋 养 阴 血 活 血 通 脉 温 阳 通 脉 的 药 物, 诸 药 配 合 达 到 益 气 养 阴 通 脉 止 痛 之 功 效, 临 床 用 于 治 疗 冠 心 病 心 绞 痛 及 心 律 不 齐 之 气 阴 两 虚 证, 症 见 胸 痛 胸 闷 心 悸 气 短 脉 结 代 现 代 药 理 研 究 表 明, 通 脉 养 心 丸 具 有 抗 心 肌 缺 血 抑 制 大 鼠 实 验 性 血 栓 形 成 的 作 用 [6], 且 对 实 验 性 心 律 失 常 具 有 保 护 作 用 [4] 经 前 期 试 验 发 现, 通 脉 养 心 方 具 有 降 低 氯 仿 诱 发 小 鼠 室 颤 发 生 率 及 抑 制 去 甲 肾 上 腺 素 造 成 的 大 鼠 离 体 胸 主 动 脉 血 管 收 缩 的 药 理 作 用 本 实 验 采 用 以 上 两 个 药 理 实 验 模 型 对 通 脉 养 心 方 的 不 同 工 艺 路 线 制 备 的 样 品 进 行 药 效 对 比 试 验 结 果 显 示, 通 脉 养 心 方 新 工 艺 提 取 物 均 具 有 降 低 氯 仿 诱 发 小 鼠 室 颤 发 生 率 及 抑 制 去 甲 肾 上 腺 素 造 成 的 离 体 大 鼠 胸 主 动 脉 血 管 收 缩 的 药 理 作 用, 相 同 剂 量 下, 工 艺 二 药 理 作 用 优 于 工 艺 一 以 甘 草 酸 含 量 为 考 察 指 标, 使 用 正 交 试 验 优 化 醇 提 工 艺 参 数, 包 括 乙 醇 体 积 分 数 提 取 时 间 溶 剂 用 量, 确 定 最 优 提 取 工 艺 为 :60% 乙 醇 提 取 2 次, 第 一 次 8 倍 量 提 取 1.5 h, 第 二 次 6 倍 量 提 取 1 h 采 用 上 述 药 理 模 型 对 通 脉 养 心 方 最 佳 提 取 工 艺 样 品 进 行 验 证 试 验 结 果 表 明, 工 艺 优 化 后 的 通 脉 养 心 方 具 有 良 好 的 降 低 实 验 性 心 律 失 常 及 舒 张 大 鼠 离 体 胸 主 动 脉 的 活 性, 呈 现 量 效 关 系 通 脉 养 心 方 在 心 血 管 方 面 药 理 作 用 的 评 价 及 作 用 机 制 的 考 察, 还 有 待 进 一 步 的 研 究 和 探 讨 参 考 文 献 [1] 中 国 药 典 [S]. 一 部 [2] 徐 叔 云. 药 理 实 验 方 法 学 [M]. 第 4 版. 北 京 : 人 民 卫 生 出 版 社, [3] 陈 奇. 中 药 药 理 研 究 [M]. 第 2 版. 北 京 : 人 民 卫 生 出 版 社, [4] 蔡 小 军, 王 怡, 胡 利 民, 等. 通 脉 养 心 口 服 液 对 实 验 性 心 律 失 常 的 保 护 作 用 [J]. 世 界 中 医 药, 2010, 5(6): 425. [5] 冯 蓓, 张 三 印. 参 附 注 射 液 对 离 体 大 鼠 胸 主 动 脉 血 管 环 的 实 验 研 究 [J]. 中 药 药 理 与 临 床, 2010, 26(5): [6] 赵 树 仪, 陈 卫 平, 祝 君 梅, 等. 通 脉 养 心 口 服 液 与 通 脉 养 心 丸 药 理 作 用 比 较 [J]. 中 草 药, 1994, 25(6): 308.
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