魟 鱼 肝 铁 蛋 白 和 马 脾 铁 蛋 白 经

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1 林 青 陈 平 季 学 涛 柯 才 焕 黄 河 清

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4 210 分析化学 第 38卷 图 2 在不同 ph 条件下 SZLF的透射电子 显微镜图 (弱酸处理 ) F ig. 2 TEM m ap o f SZLF under the condition o f d iffe rent ph ( trea tm ent of w eak ac id ity ) A. ph 7. 0; B. ph 4. 0; C. ph 3. 0; D. ph 2. 0; E, F. ph 1. 0 壳完全解离成游离的亚基 亚基聚合体和肽链, 并能在 TEM 下观察到完全裸露的空心铁核轮廓 对图 2E 局部区域放大, 可清晰地看出少量去折叠的亚基聚合体盘绕着铁核, 形成了亚基聚合体-铁核复合物 结构 这种复合物结构大小具有随意性或无规则性 去折叠程度越大, 暴露的疏水基团越多, 形成的聚 合体直径越大 铁核被该复合体无规律地包裹在其中 (见图 2F ), 最终形成包涵体或沉淀的铁核-蛋白 质 ( 丝状结构 ), 无法呈现出标准铁蛋白的分子结构特征, 只显示铁核结构特点 (图 2E 和图 2F ) 3. 3 SZLF亚基解离途径 (弱碱处理途径 ) 释放铁动力学研究已表明, 铁蛋白在弱碱介质中释放铁的速率明显低于在弱酸介质中, 推测释放 铁的速率差异性主要与蛋白质壳的调控和释放铁核中的铁分布不同有关 [ 20] 图 3是 SZLF 经弱碱处理 途径获得的电镜图 从图 3A 可看出, 与弱酸处理现象类似, SZLF 亚基同样也随着反应介质中的 OH - 浓度增加而急剧解离 当反应介质 ph = 13. 0时 (图 3A), SZLF 亚基几乎完全被解离, 只显示裸露松散 的铁核 此现象主要起因在随着反应介质中的 OH 浓度递增, 伴随着与蛋白壳内表层氨基酸残基络合 的铁磷组成快速释放, 从而导致 SZLF亚基失去络合位点而迅速释放 图 3A 裸露的黑色斑点主要是由 铁核内层铁磷组成的铁核电镜图, 其组成不同于由铁核表层组成的空洞铁核 ( 图 2F ), 不受或略受蛋白 壳的包裹与约束, 显示较高的自由膨胀率, 因 而推测图 3A 显 示的铁核直径 应该略大 于图 2F 显示的铁核, 但图 3A 中显示的铁核仍然络 合少量去折叠的亚基, 且形成多聚体铁核的数 量也不多, 多数处于游离状态, 这与图 3F 显示 的铁 核分 布规 律 极为 相 似 但 在 反应 介 质 ph 14. 0环境下, 铁 核 出现 了 明 显 的 聚 集 状 态, 以铁核簇的方式出现 推测在 ph 14. 0的 反应介质中, 高浓度的 OH 迫使络合 于游离 的铁核上的去折叠亚基成为无规则的肽链, 此 图 3 经弱碱处理 SZLF 的透射电子显微镜图 F ig. 3 TEM m ap of SZLF w ith a lka lescence treatm ent A. ph 13. 0; B. ph 时大量疏水氨基酸残基外露, 提高不同铁核之间的肽链疏水残基相互作用机率, 加速了铁核多聚体的形 成 ( 图 3B) 由此可见, 铁蛋白 铁核和蛋白壳的分子大小与弱酸或弱碱处理途径有关, 与络合铁核的亚

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