136 OIE 陆生动物卫生法典 ( 上卷 ) 原文为英文版 e) 蓝舌病根据动物来源国或地区的蓝舌病疫情状况, 动物应符合本法典第条或第条的规定 2. 进入采精设施前在隔离设施中的检测在进入人工授精中心的采精设施之前, 公牛和试情动物必须在隔离设施隔离观察至少 28 天

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伦垂狄
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1 原文为英文版第四篇关于疫病预防和控制的一般性建议 135 第 4.6 章牛小反刍动物和猪精液采集和处理第条总则对精液生产进行官方卫生控制的目的在于 : 1) 维护人工授精中心动物卫生水平, 从而保证精液在国际间流通时, 通过精液传播病原体感染其他动物或人类的风险可忽略不计 2) 保证精液采集处理和储存的卫生水平人工授精中心应遵守第 4.5 章的建议诊断试验标准参见陆生手册第条关于检测种公牛和试情动物的规定仅在种公牛和试情动物满足以下要求时才能进入人工授精中心 1. 进入隔离设施之前如果动物源自未达到无疫状态的国家或地区, 进入隔离设施之前, 动物应符合下列要求 : a) 牛布鲁氏菌病第条第 3 或第 4 点 b) 牛结核病第条第 3 点或第 4 点 c) 牛病毒性腹泻 (BVD) 应对动物作下述检查 : ⅰ) 病毒分离或抗原检查, 结果阴性 ; 且 ⅱ) 血清学试验确定每头牛的血清学状况 d) 牛传染性鼻气管炎 / 传染性脓疱性外阴道炎 (IBR/IPV) 如果人工授精中心被视为无 IBR/IPV, 动物应 : ⅰ) 来自第条规定的无 IBR/IPV 畜群 ; 或 ⅱ) 血样血清学检查结果阴性

2 136 OIE 陆生动物卫生法典 ( 上卷 ) 原文为英文版 e) 蓝舌病根据动物来源国或地区的蓝舌病疫情状况, 动物应符合本法典第条或第条的规定 2. 进入采精设施前在隔离设施中的检测在进入人工授精中心的采精设施之前, 公牛和试情动物必须在隔离设施隔离观察至少 28 天进入隔离室最少应等待 21 天后按下述要求进行检测, 胎儿弯曲杆菌和毛滴虫除外, 这两种病的检测可在进入隔离室 7 天后进行除牛病毒性腹泻抗体血清学试验 [ 见下面 2b)i)] 外, 其他所有检测结果均应为阴性 a) 牛布鲁氏菌病血清学检测结果应为阴性 b) 牛病毒性腹泻 ⅰ) 动物进入隔离室前均应进行病毒分离或病毒抗原检测, 结果为阴性仅在隔离室内所有动物检测结果都为阴性时, 动物才能进入采精设施 ⅱ) 所有动物都要进行血清学检测以判定是否存在牛病毒性腹泻抗体 ⅲ) 仅在进入隔离设施前检测阴性的动物未发生血清学转换, 才可允许在隔离室中的任何动物 ( 血清学阴性或阳性 ) 进入采精设施 ⅳ) 如果发生血清学转换, 所有血清学阴性的动物应在隔离室继续隔离观察, 直至该群在 3 周内不再出现阳转动物可以允许血清学阳性动物进入采精设施 c) 胎儿弯曲杆菌性病亚种 ⅰ) 小于 6 月龄或此后一直在单一性别群中饲养的动物, 在进入隔离室前应进行一次包皮采样检测, 结果须为阴性 ⅱ)6 月龄或 6 月龄以上, 在进入隔离室前可能接触过母畜的动物, 应每间隔一周进行一次包皮采样检测, 共 3 次, 每次检测均须为阴性 d) 胎毛滴虫 ⅰ) 不足 6 月龄或此后仅在单一性别畜群中饲养的动物, 在进入隔离室前应作一次包皮采样检测, 结果须为阴性 ⅱ)6 月龄或更大, 有可能在进入隔离室前接触了母畜的动物, 应每间隔一周进行一次包皮采样检测, 共 3 次, 每次检测均须为阴性 e) IBR IPV 如认为人工授精中心无 IBR/IPV, 则应对动物血样进行 IBR/IPV 诊断检测, 结果须为阴性如检测结果阳性, 应立即将这些动物从隔离室移出, 同群的其他动物继续留在隔离室隔离在阳性动物移出后至少等待 21 天后再次检测, 结果须为阴性 f) 蓝舌病根据隔离设施所在国或地区的蓝舌病疫情状况, 动物卫生状况应符合本法典第 8.3.6,

3 原文为英文版第四篇关于疫病预防和控制的一般性建议 137 第条或第条规定 3. 精液采集设施内公牛和试情动物的检测程序如果采精设施所在国或地区不是下述疫病的无疫国或无疫区, 采精设施留养的牛及试情动物至少要针对下列疫病每年进行一次检查, 结果须为阴性 : a) 牛布鲁氏菌病 b) 牛结核病 c) 牛病毒性腹泻对之前血清学试验阴性动物进行再检测, 证实无抗体如某动物变为血清学阳性, 应废弃其在末次阴性结果以后采集的所有精液, 或进行病毒检测, 结果为阴性才可保留 d) 胎儿弯曲杆菌性病亚种 ⅰ) 检测包皮样本 ; ⅱ) 仅需对生产精液的或与生产精液公牛有过接触的公牛进行检测停用 6 个月以上, 再次用于采精的公牛要在重新生产前 30 天内进行检测 e) 蓝舌病动物应符合本法典第条或第条的规定 f) 胎毛滴虫 ⅰ) 培养包皮拭子样本 ⅱ) 仅需对生产精液的或与生产精液公牛有接触的公牛进行检测停用 6 个月以上, 再次用于采精的公牛要在重新生产前 30 天内进行检测 g) IBR/IPV 如认为人工授精中心无 IBR/IPV, 动物应符合第条的 2 c) 的规定 4. 对每头 BVD 血清学阳性公牛的精液首次发放前的检测在 BVD 血清学阳性公牛精液首次发放前, 需对每头牛的精液样本进行一次 BVD 病毒分离或抗原检测如出现阳性结果, 就应将该阳性公牛从人工授精中心移出, 并销毁其全部精液 5. 对未认定无 IBR/IPV 人工授精中心所产冷冻精液的 IBR/IPV 的检测每份冷冻精液应按照本法典第条进行检测第条关于检测公羊 / 雄鹿和试情动物的规定只有达到以下要求时, 公羊 / 雄鹿和试情动物才能进入人工授精中心

4 138 OIE 陆生动物卫生法典 ( 上卷 ) 原文为英文版 1. 进入隔离室之前隔离室所在国或地区未排除下列相关疫病时, 动物在进入隔离室进行隔离前, 必须满足下述要求 : a) 山羊和绵羊布鲁氏菌病动物应符合本法典第条规定 b) 绵羊附睾炎应符合本法典第条规定 c) 接触性无乳症应符合本法典第条第 1 和第 2 点规定 d) 小反刍兽疫符合本法典第条中第 1 2 和第 4 或第 5 点规定 e) 山羊传染性胸膜肺炎根据动物来源国或地区该疫病状况, 动物应符合本法典第条规定 f) 副结核病动物在过去的两年内没有副结核病临床症状 g) 痒病如果动物不是来自第所述的痒病无疫国或地区, 动物应符合本法典第条规定 h) 梅迪 - 维斯那病动物应符合本法典第条规定 i) 山羊关节炎 / 脑炎如果是山羊, 应符合本法典第条规定 j) 蓝舌病根据动物来源国或地区的蓝舌病状况, 动物应符合本法典第条或第条规定 k) 结核病如果是山羊, 应进行单一或比较性结核菌素试验, 结果须为阴性 2. 进入采精设施前在隔离室中的检测在进入人工授精中心设施的精液采集设施之前, 公羊 / 雄鹿和试情动物应在隔离室设施隔离至少 28 天进入隔离室最少 21 天后要对动物进行下述诊断检查, 结果须为阴性 a) 山羊和绵羊布鲁氏菌病参见本法典第条 1 c) b) 绵羊附睾炎参见本法典第条 1d) 点 c) 梅迪 - 维斯那病和山羊关节炎 / 脑炎应对动物进行检测 d) 蓝舌病根据隔离室所在国家或地区的蓝舌病状况, 动物应符合本法典第条第条或第条规定 3. 精液采集设施内对种公羊 / 公鹿和试情动物的检查程序如果精液采集设施所在国家或地区不排除以下疾病, 所有饲养在精液采集设施内的种公羊 / 公鹿和试情动物, 应每年至少检测一次下列疾病, 结果须为阴性 : a) 山羊和绵羊布鲁氏菌病 b) 绵羊附睾炎 c) 梅迪 - 维斯那病和山羊关节炎 / 脑膜炎 d) 结核病 ( 仅对山羊 ) e) 蓝舌病

5 原文为英文版第四篇关于疫病预防和控制的一般性建议 139 这些动物应符合本法典第条或第条规定第条关于检测公猪的规定公猪只有满足下列要求, 才能进入人工授精中心 1. 进入隔离室之前动物应临床健康生理学正常当动物的来源国或地区不属于以下疫病的无疫区时, 进入隔离室的前 30 天内应符合下列要求 : a) 猪布鲁氏菌病参见本法典第条 b) 口蹄疫参见本法典第条第条或第条 c) 伪狂犬参见本法典第条或第条 d) 传染性胃肠炎参见本法典第条 e) 猪水疱病参见本法典第条或第条 f) 非洲猪瘟参见本法典第条或第条 g) 古典猪瘟参见本法典第条或第条 h) 猪繁殖与呼吸综合征按陆生手册的标准检测 2. 进入精液采集设施前在隔离室的检测进入人工授精中心的精液采集设施之前, 公猪至少应在隔离室隔离 28 天进入隔离室最少 21 天后, 应接受以下诊断性检测, 结果须为阴性 a) 猪布鲁氏菌病参见本法典第条 b) 口蹄疫参见本法典第条第条第或第条 c) 伪狂犬参见本法典第条第条或第条 d) 传染性胃肠炎参见本法典第条 e) 猪水疱病参见本法典第条或第条 f) 非洲猪瘟参见本法典第条或第条 g) 古典猪瘟参见本法典第条或第条 h) 猪繁殖与呼吸综合征按陆生动物手册的标准检测 3. 对饲养在精液采集设施内公猪的检测程序精液采集设施所在国家或地区不排除以下疾病时, 所有饲养在精液采集设施的公猪应至少每年检测一次, 结果须为阴性 :

6 140 OIE 陆生动物卫生法典 ( 上卷 ) 原文为英文版 a) 猪布鲁氏菌病参见本法典第条 b) 口蹄疫参见本法典第条第条第或第条 c) 伪狂犬参见本法典第条第条或第条 d) 传染性胃肠炎参见本法典第条 e) 猪水疱病参见本法典第条或第条 f) 非洲猪瘟参见本法典第条或第条 g) 猪瘟参见本法典第条或第条 h) 猪繁殖与呼吸综合征按陆生手册的标准检测第条对精液采集和处理的一般卫生要求遵守以下所述建议可大大降低精液污染普通致病菌的可能性第条关于采精的规定 1) 爬跨区地面应保持清洁, 立足要稳, 避免使用起尘土的地面 2) 无论是动物模型或活体动物, 应保持试情动物的后躯清洁, 动物模型在每批采精后必须彻底清洗, 在每批采精前必须清洁试情动物的后躯在每次采集精液后, 对动物模型或试情动物进行清洁可使用一次性塑料罩 3) 采精人员的手不得接触公猪阴茎采精者应戴一次性塑料手套, 每次采精都要更换 4) 每次采精后必须彻底清洗干净人工阴道, 应将其拆开, 冲洗各部件, 并干燥, 保护不沾染灰尘装置内侧和锥状体应消毒后再组装, 消毒方法要使用规定的消毒技术, 如酒精环氧乙烷或蒸汽组装后, 置于定期清洁和消毒过的柜中 5) 所用润滑油必须干净涂油棒必须擦净, 在连续采精过程中不得暴露于灰尘 6) 射精后不得摇晃人工阴道, 否则润滑油和碎屑会落入锥状体混进采精管内 7) 连续采精时, 每次爬跨都要使用新的假阴道, 即使公牛已插入阴茎但未射精也要更换 8) 采精管应无菌, 或是一次性的, 或用高压或加热 180 加热至少 30min 在备用时应密封防止暴露在环境中 9) 采精后, 应把采精管连同其管套留在锥状体内, 直至从采精室移送检验室后才取下

7 原文为英文版第四篇关于疫病预防和控制的一般性建议 141 第条关于实验室精液处理和精液样本制备的规定 1. 稀释剂 a) 所有使用的容器均应经过灭菌 ; b) 配制稀释剂实验室制备的缓冲液应经过过滤 (0.22µm) 或高压 (121,30min) 灭菌, 或在加入卵黄 ( 如果可行 ) 或等效的添加剂和抗生素之前用无菌水制备 c) 如稀释剂成分是市售粉剂, 所用水应是蒸馏水或去离子水, 已灭菌 (121,30min 或等效方法 ), 保存得当, 冷却备用 d) 如需用牛乳卵黄或其他动物性蛋白配制精液稀释剂时, 配制物应无病原体或无菌牛乳采用 92 加热 3~5min, 如果可行, 鸡蛋应来自 SPF 鸡群应使用无菌技术从鸡蛋中分离卵黄, 也可使用供人食用的商品卵黄或经消毒处理的卵黄 ( 可用巴氏消毒法或辐射消毒法灭菌 ) 其他添加剂在使用前也应灭菌 e) 稀释剂在 5 以上储存时间不得超过 72h, 在零下 20 保存时间可适当延长, 贮存容器应该加塞 f) 在冷冻精液中加入抗生素混合液, 每毫升冷冻精液的灭菌活性至少与下列混合液相当 : 庆大霉素 (250µg) 泰乐菌素(50µg) 林肯霉素- 大观霉素 (150µg /300µg); 青霉素 (500IU) 链霉素(500µg) 林肯菌素- 大观霉素 (150µg /300µg); 或阿米卡星 (75µg) 地贝卡星 (25µg) 应在国际兽医证书中说明所加抗生素的名称和浓度 2. 稀释和包装程序 a) 装有新鲜精液的试管应在采集后尽快密封, 并在处理前保持密封状态 b) 稀释后的冷冻期间, 精液同样要保存于有塞的容器中 c) 在将精液注入发送容器 ( 如授精吸管 ) 过程中, 该容器和其他一次性用品应在开包后立即使用重复使用的材料要用乙醇环氧乙烷蒸汽或其他批准的消毒技术进行消毒 d) 如使用封闭粉, 应注意防止污染 3. 适于精液贮存的条件出口精液在出口之前, 应在装有新鲜液氮的灭菌烧瓶中储存, 并与不符合本章要求的其他遗传物质分开吸管应按国际动物标记委员会 (ICAR) 的标准密封和标记出口前, 应在官方兽医的监督下, 对放精液的吸管或精粒清晰而永久性地标识, 并放在盛有新鲜液氮的新的或灭菌的烧杯或容器中在出口前用官方带编号的密封条进行密封前, 容器或烧杯内的内容物应经官方兽医确认, 并附带国际兽医证书, 列清其内容物及官方密封条的编号

8 142 OIE 陆生动物卫生法典 ( 上卷 ) 原文为英文版 4. 精子分离应根据设备许可证发证者的建议, 对每只动物的操作均应使用洁净和消毒的性别分选设备冷冻或储存前, 如需将精浆或类似成分加入到分选后的精液中时, 该精浆应来自同级别或更高卫生级别的动物