htp: //www chinagp net E mail:zgqkyx@chinagp net 693 加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生组织血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达水平的影响 中医 中西医结合研究 李峰, 郑仿, 闫家文, 赵书晓, 黄新, 马林枫, 郑艺, 钟新兰, 赵军辉, 伍松合 摘要 目的通过加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生组织中血管内皮生长因子 (VEGF) 碱性成纤维细胞生长因子 (bfgf) 表达水平影响的研究, 探讨加味桂枝茯苓颗粒对良性前列腺增生症 (BPH) 的作用机制 方法 2013 年 1 月 2015 年 6 月, 选取 90 只雄性 SD 大鼠, 采用随机数字表法将其分成正常组 (A 组,25 只 ) 和模型组 (65 只 ),A 组随机取 20 只, 模型组在验证造模成功后随机取 60 只, 模型组采用随机数字表进一步分为对照组 (B 组,20 只 ) 加味桂枝茯苓颗粒组 (C 组,20 只 ) 非那雄胺片组 (D 组,20 只 ) A 组大鼠正常饲养, 模型组造模, 之后 B 组大鼠 0 9% 氯化钠溶液灌胃,C 组大鼠加味桂枝茯苓颗粒溶液灌胃,D 组大鼠非那雄胺片溶液灌胃 于末次灌胃治疗结束 24h 后进行前列腺组织标本采集 记录各组大鼠前列腺体积 前列腺增生指数, 采用免疫组化 SP 法检测 VEGF bfgf 表达水平 结果 B 组前列腺体积 前列腺增生指数大于 A 组 (P<0 05);C 组 D 组前列腺体积 前列腺增生指数小于 B 组 (P<0 05) B 组 C 组 D 组 VEGF bfgf 表达水平高于 A 组 (P<0 05);C 组 D 组 VEGF bfgf 表达水平低于 B 组 (P<0 05) 结论加味桂枝茯苓颗粒通过降低大鼠前列腺增生腺体组织中 VEGF bfgf 表达水平, 进而缩小前列腺体积, 降低前列腺增生指数, 从而达到治疗 BPH 的效果 关键词 前列腺增生 ; 加味桂枝茯苓颗粒 ; 非那雄胺 ; 血管内皮生长因子 A; 成纤维细胞生长因子 2 中图分类号 R697 3 文献标识码 A doi:10 3969/j isn 1007-9572 2016 06 014 李峰, 郑仿, 闫家文, 等 加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生组织血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达水平的影响 [J]. 中国全科医学,2016,19(6):693-697 [www chinagp net] LiF, ZhengF, YanJW, etal Influenceofflavoredcasiatwigtuckahoeparticlesontheexpresionofvascular endothelialgrowthfactorandbasicfibroblastgrowthfactor[j].chinesegeneralpractice,2016,19(6):693-697 InfluenceofFlavoredCasiaTwigTuckahoeParticlesontheExpresionofVascularEndothelialGrowthFactorand BasicFibroblastGrowthFactor LIFeng,ZHENGFang,YANJia-wen,etal DepartmentofUrologySurgery,theFirst AfiliatedHospitalofGuangxiUniversityofChineseMedicine,Nanning530001,China Abstract Objective Toexplorethemechanismofflavoredcasiatwigtuckahoeparticlesinthetreatmentofbenign prostatichyperplasia(bph)byresearchingtheinfluenceofflavoredcasiatwigtuckahoeparticlesontheexpresionofvascular endothelialgrowthfactor(vegf)andbasicfibroblastgrowthfactor(bfgf) Methods FromJanuary2013toJune2015,we selected90malesdrats Usingrandom numbertablemethod,wedividedtheratsintonormalgroup(groupa,n=25)and modelgroup(n=65) Aftermodelbuilding,werandomlyselected20ratsfromgroupAand60ratsfrommodelgroup The60 ratsselectedfrommodelgroupwerefurtherdividedintothreegroups:controlgroup(groupb,n=20),flavoredcasiatwig tuckahoeparticlesgroup(groupc,n=20)andfinasteridegroup(groupd,n=20)byrandornnumbertablemethod Therats ofgroupawerenormalyfed;groupbwasgivengavagewithsodiumchloridesolution;groupcwasgivengavagewithflavored casiatwigtuckahoeparticlesolution;groupdwasgivengavagewithfinasteridesolution Twenty-fourhoursafterlastgavage, prostatetisuesweresampled,andwerecordedtheprostatevolumeandprostatehyperplasiaindexofeachgroup;theexpresion levelsofvegfandbfgfweredetectedbyimmunohistochemicalspmethod Results GroupBwashigherthangroupA in prostatevolumeandprostatehyperplasiaindex(p<0 05);groupCandgroupDwerelowerthangroupBinprostatevolumeand prostatehyperplasiaindex(p<0 05) GroupB,groupCandgroupDwerehigherthangroupAinthelevelsofVEGFand 基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 (81160485) 作者单位 :530001 广西南宁市, 广西中医药大学第一附属医院泌尿外科 ( 李峰, 郑仿, 赵书晓, 黄新, 马林枫, 郑艺, 钟新兰, 伍松合 ); 广西中医药大学外科学研究生 ( 闫家文 ); 湖北民族学院附属医院民大医院耳鼻喉头颈外科 ( 赵军辉 ) 通信作者 : 郑仿,530001 广西南宁市, 广西中医药大学第一附属医院泌尿外科 ;E-mail:20611213@qq com
694 htp: //www chinagp net E mail:zgqkyx@chinagp net bfgf(p<0 05);groupCandgroupDwerelowerthangroupBinthelevelsofVEGFandbFGF(P<0 05) Conclusion FlavoredcasiatwigtuckahoeparticlescanlesenprostatevolumeandprostatehyperplasiaindexbyreducingthelevelsofVEGF andbfgfinthehyperplasiaofprostateglandtisueofrats,thusachievingeficacyinbphtreatment Keywords Prostatichyperplasia;Flavoredcasiatwigtuckahoeparticles;Finasteride;Vascularendothelialgrowth factora;fibroblastgrowthfactor2 良性前列腺增生症 (benignprostatichyperplasia,bph) 是引起老年男性排尿障碍的常见泌尿系疾病之一, 发病率随年龄增长而增高,50 岁发病率为 30% ~50%, 到 80 岁可达 90% [1] 随着工业社会的发展与人口老龄化的到来,BPH 已成为现代社会困扰老年男性的常见疾病, 其发病率呈逐年增高的趋势, 给家庭及社会带来了巨大经济负担 [2] 因此, 对于 BPH 治疗方法的研究与突破就显得尤为迫切 桂枝茯苓丸组方为桂枝 茯苓 牡丹 ( 去心 ) 桃仁 ( 去皮尖, 熬 ) 芍药各等分, 原方功效为活血化瘀 缓消症块, 治妇人宿有症病, 但其不独用于妇女, 亦可用于男子 [3] 本研究组在大量的前期临床研究中发现,BPH 患者多以血瘀为主要病理变化 [4], 湿热蕴结为主要兼证, 桂枝茯苓丸可明显改善 BPH 患者因湿热蕴结 瘀阻下焦所引起的下尿路症状 (lowerurinarytractsymptoms,luts), 部分患者在经过以桂枝茯苓颗粒辩证加味的治疗后, 增生的前列腺明显缩小, 以 LUTS 为主的临床症状显著减轻 [5] 本研究通过复制 SD 大鼠 BPH 动物模型, 观察加味桂枝茯苓颗粒对前列腺腺体大小变化和相关病理改变的影响, 对其药理作用及可能作用机制进行探讨 ; 并进行细胞因子 血管内皮生长因子 (VEGF) 碱性成纤维细胞生长因子 (bfgf) 表达水平的免疫组化研究, 试图从免疫学角度进一步探讨 BPH 可能的病理机制以及加味桂枝茯苓颗粒在其中的可能作用机制 1 材料与方法 1 1 实验材料 1 1 1 实验动物 SPF 级雄性 SD 大鼠 90 只, 体质量 (220 ±25)g, 购于广西医科大学动物实验中心, 动物编号为 : SCXK ( 桂 )2009-0002 1 1 2 实验药物加味桂枝茯苓颗粒 : 采用配方颗粒, 由江苏江阴天江药业有限公司生产, 原方为桂枝 10g 茯苓 15g 牡丹皮 10g 赤芍 10g 桃仁 10g, 然后加入大黄 6g 王不留行 15g 泽泻 15g 组成 ; 此处标注制剂单位为饮片剂量, 其中配方颗粒 1g/ 袋, 相当于中药饮片剂量 6g 非那雄胺片: 批号 1010072, 由 MerckSharp&DohmeLimited 生产, 由杭州默沙东制药有限公司分装, 规格 5mg/ 片 10 片 / 盒 制成粉状物, 溶于 60 蒸馏水, 制成浓度为 0 5mg/ml 饱和溶液, 冰箱存储 丙酸睾丸酮注射液 : 批号 1104161, 由天津金耀氨基酸有限公司生产, 规格 25mg ml -1 支 -1 10 支 / 盒, 使用时溶于橄榄油中 橄榄油 : 西班牙生产, 规格 500ml/ 瓶 ( 作为丙酸睾丸酮的溶媒 ) 1 1 3 实验试剂兔抗鼠 VEGF 单克隆抗体 兔抗鼠 bfgf 单克隆抗体 链霉菌素抗生物素蛋白 - 过氧化物酶 (S-P) 超敏试剂盒 二氨基联苯胺 (DAB) 显色试剂盒 磷酸盐缓冲液 (PBS) 从北京中杉金桥生物技术有限公司采购 欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍 本研究创新点 : 良性前列腺增生症 (BPH) 是引起中老年男性排尿 障碍的最常见的一种良性疾病,BPH 主要表现为组织学 上的前列腺间质和腺体成分的增生 加味桂枝茯苓颗粒 是根据广西中医药大学唐乾利教授的经验用方桂枝茯苓 丸加减而成, 为中成药制剂, 患者服用简单, 依从性较 好, 并且患者大多数为高龄男性, 中成药不良反应小, 为广大患者所接受 本课题将中医治疗女性疾病的理论 应用于男性前列腺增生疾病的治疗, 以加味桂枝茯苓颗 粒为被试因素, 大鼠前列腺组织为受试对象, 西药非那 雄胺为阳性参照, 综合应用分子生物学 生物化学等现 代研究技术, 在前期研究和临床应用的基础上, 进一步 探讨加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺组织血管内皮生长 因子 (VEGF) 碱性成纤维细胞生长因子 (bfgf) 表达 水平的影响, 以期明确加味桂枝茯苓颗粒对前列腺新生 血管产生和基质细胞生长干预的分子生物学机制, 为中 医治疗 BPH 提供理论依据, 亦为中医外科学的 活血祛 瘀 以通为用 法则提供理论依据, 为传统中医药在该 病的基础研究提供新的思路 1 1 4 实验仪器 欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍 ACS-3A 型电子计重称 ( 上海友声衡器有 限公司 ),BH-2 光学显微镜 (OLYMPUS),PHIAS-1000 高 清晰度彩色病理分析系统,Image-ProPlus6 0 图像分析软 件, 恒温箱 ( 德国莱卡仪器公司 ), 全自动免疫组化染色仪 ( 澳大利亚 HESTION) 1 2 实验方法 1 2 1 分组 2013 年 1 月 2015 年 6 月, 将 90 只雄性 SD 大 鼠在广西中医药大学第一附属医院实验中心适应性饲养 ( 正 常饲养, 即将 SD 大鼠置于清洁鼠笼中, 每日予以鼠粮及饮用 水, 无特殊药物添加及人工干预 )1 周后开始实验 采用随机 数字表法将其分成正常组 (A 组,25 只 ) 和模型组 (65 只 ), A 组随机取 20 只, 模型组在验证造模成功后随机取 60 只, 模 型组采用随机数字表法进一步分为对照组 (B 组,20 只 ) 加 味桂枝茯苓颗粒组 (C 组,20 只 ) 非那雄胺片组 (D 组, 20 只 ) 1 2 2 建立模型 1 2 2 1 去势 A 组大鼠正常饲养 模型组大鼠采用吴符火 [6] 等的方法造模, 去势 参照原卫生部 新药 ( 西药 ) 临床 研究指导原则汇编 [7], 给予盐酸氯胺酮注射液 100mg/kg 腹腔麻醉, 暴露阴囊 ; 常规皮肤消毒, 逐层切开大鼠阴囊, 摘 除双侧睾丸, 残端用 1 号无菌丝线结扎, 止血彻底后, 将阴囊 全层缝合
htp: //www chinagp net E mail:zgqkyx@chinagp net 695 1 2 2 2 注射激素 观察 7d, 模型组大鼠颈部皮下注射溶于 橄榄油的丙酸睾丸酮 ( 丙酸睾丸酮注射液与橄榄油的比例为 4 1, 浓度为 5mg/ml),5mg/kg, 连续给药 21d, 给药期间每 7d 称重并调整药物注射剂量 1 2 2 3 造模样品检验 A 组和模型组随机选择 2 只大鼠, 以离断颈椎法处死, 将其置于解剖台, 采集大鼠前列腺组织, 采用 ACS-3A 型电子计重称称量大鼠体质量 前列腺湿重, 以容积法测量大鼠前列腺体积, 计算大鼠前列腺增生指数 ( 前列腺增生指数 = 前列腺湿重 / 体质量 100%), 然后保存 于甲醛溶液中固定,HE 染色, 利用 PHIAS-1000 高清晰度彩 色病理分析系统行病理学检查, 确定模型组大鼠前列腺存在细 胞数量增多 体积增大的现象, 证明造模成功 1 2 3 药物治疗 A 组大鼠正常饲养 ;B 组大鼠 0 9% 氯化钠 [8] 溶液灌胃,2ml/d;C 组大鼠参考管家齐等的方法, 加味桂 [9] 枝茯苓颗粒溶液灌胃,2ml/d;D 组大鼠参照蔡冰等的方 法, 非那雄胺片溶液灌胃,2ml/d 除 A 组外其余各组均连续 灌胃治疗 30d, 每周测量 1 次体质量, 以便准确调整药物 剂量 1 2 4 前列腺组织标本采集 于末次灌胃治疗结束 24h 后进 行前列腺组织标本采集 各组大鼠称重并记录, 然后以离断颈 椎法处死大鼠, 将前列腺组织整体摘除 标记并测量各项指 标, 然后置入装有甲醛溶液的密闭容器存储, 全自动免疫组化 染色仪进行后续免疫组化检测 1 2 5 观察指标及方法 1 2 5 1 大鼠前列腺体积 前列腺增生指数 采用 ACS-3A 型电子计重称称量大鼠体质量 前列腺湿重, 以容积法测量大 鼠前列腺体积, 计算大鼠前列腺增生指数 1 2 5 2 VEGF bfgf 表达水平 采用免疫组化 SP 法检测 VEGF bfgf 表达水平 前列腺组织石蜡切片经 3 缸二甲苯脱 蜡 45min( 每缸 15min);100% 90% 75% 梯度乙醇水化共 30min;3% 过氧化氢 (H 2 O 2 ) 中 12min; 蒸馏水中 5min; 磷 酸盐缓冲液 (PBS) 冲洗 3 次,5min/ 次 ; 滴加 1 4 的胰酶液, 37 恒温箱内孵育 15min;PBS 冲洗 3 次,5min/ 次 ; 滴加 50μl1 10 的羊血清,37 恒温箱内孵育 15min; 倾去羊血 清, 勿洗, 滴加兔抗鼠 bfgf 单克隆抗体 50μl,4 冰箱孵育 过夜,PBS 冲洗 3 次,5min/ 次 ; 滴加兔抗鼠 VEGF 单克隆抗 体 50μl,37 恒温箱孵育 30min,PBS 冲洗 3 次,5min/ 次 ; 滴加 S-P50μl,37 恒温箱孵育 30min,PBS 冲洗 3 次,5 min/ 次 ; 滴加新鲜配置的 DAB 溶液,BH-2 光学显微镜下控 制显色 ; 背景染色出现前终止染色, 自来水冲洗, 苏木素复染 20s, 自来水充分洗涤 ;0 5% 盐酸乙醇分化至切片变为红色, 投入自来水终止 ;0 25% 气水返蓝, 投入自来水终止 ;75% 90% 100% 梯度乙醇脱水,20min; 经 3 缸二甲苯透明, 共 30min; 中性树胶封固 采用 PBS 对抗体进行稀释, 其中 VEGF bfgf 的抗体滴度均为 1 100; 生物素标记的二抗及辣 根过氧化酶标记的链霉卵白素滴度为 1 100 VEGF 阳性表达 为细胞质呈棕黄色改变, 主要位于血管内皮细胞及血管周围基 质细胞胞质中 [9] bfgf 阳性表达为细胞质呈棕黄色改变, 主 要表达于前列腺间质细胞 平滑肌细胞及血管内皮细胞胞质 中 [10] 在相同光强度的光镜下, 每张切片选取 5 个含有阳性 染色颗粒数目多的区域,10 40 视野拍照截图, 采用 Image- ProPlus6 0 图像分析软件计算出阳性表达细胞的积分光密度 (integratedopticaldensity,iod), 取平均值作为 VEGF bfgf 表达水平 用已知标准阳性片做阳性对照, 用 PBS 代替兔抗 鼠 bfgf 单克隆抗体作阳性对照 1 3 统计学方法 应用 SPSS18 0 软件进行统计学分析 计 量资料以 (x±s) 表示, 多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用 SNK-q 检验 以 P<0 05 为差异有统计学 意义 2 结果 2 1 大鼠前列腺体积 前列腺增生指数比较 4 组大鼠前列 腺体积 前列腺增生指数比较, 差异有统计学意义 (P< 0 05) B 组前列腺体积 前列腺增生指数大于 A 组, 差异有 统计学意义 (P<0 05);C 组 D 组前列腺体积 前列腺增 生指数小于 B 组, 差异有统计学意义 (P<0 05, 见表 1) 2 2 VEGF bfgf 表达水平比较 4 组 VEGF bfgf 表达水 平比较, 差异有统计学意义 (P<0 05) B 组 C 组 D 组 VEGF bfgf 表达水平高于 A 组, 差异有统计学意义 (P< 0 05);C 组 D 组 VEGF bfgf 表达水平低于 B 组, 差异有 统计学意义 (P<0 05, 见表 2) 表 1 各组大鼠前列腺体积 前列腺增生指数比较 (x±s) Table1 Comparisonofprostatevolumeandprostatehyperplasiaindex amongeachgroup 组别 只数 前列腺体积 (ml) 前列腺增生指数 (mg/g) A 组 20 0 75±0 16 2 15±0 19 B 组 20 1 40±0 19 a 3 47±0 27 a C 组 20 0 86±0 18 b 2 29±0 25 b D 组 20 0 82±0 15 b 2 26±0 22 b F 值 61 13 140 41 P 值 <0 001 <0 001 注 :A 组为正常组,B 组为对照组,C 组为加味桂枝茯苓颗粒组, D 组为非那雄胺组 ; 与 A 组比较, a P<0 05; 与 B 组比较, b P<0 05 表 2 各组大鼠前列腺组织中 VEGF bfgf 表达水平比较 (x±s) Table2 ComparisonofthelevelsofVEGFandbFGFintheprostatetisue ofratsamongeachgroup 组别只数 VEGF bfgf A 组 20 1162746±257936 2379126±51625 B 组 20 3728454±363375 a 5236782±73315 a C 组 20 2416866±344389 ab 2896576±64928 ab D 组 20 2356173±256429 ab 2863582±63269 ab F 值 229 58 8109 83 P 值 <0 001 <0 001 注 : 与 A 组比较, a P<0 05; 与 B 组比较, b P<0 05;VEGF= 血 管内皮生长因子,bFGF= 碱性成纤维细胞生长因子
696 htp: //www chinagp net E mail:zgqkyx@chinagp net 3 讨论 BPH 是引起中老年男性排尿障碍最为常见的一种良性疾病, 主要表现为组织学上的前列腺间质和腺体成分的增生 解剖学上的前列腺增大 (benignprostaticenlargement,bpe) LUTS 为主的临床症状以及尿动力学上的膀胱出口梗阻症状 [9] 目前认为,BPH 发生和发展的生物学基础是间质和腺体上皮这两种前列腺组分的差异性生长方式 [11] 形态计量学研究表明,BPH 是以基质增生为主的疾病, 在正常腺体中基质与上皮增生的比例为 2 1, 在 BPH 中这个比例则升高为 5 1; 平滑肌细胞的明显增殖是基质细胞组分变化的主要特点 [12] 由于其发病原因尚不完全清楚, 主要以对症治疗为主, 可分为以下 4 种 : 等待观察治疗 药物治疗 手术治疗和微创治疗 [13] 但每种治疗均有明显的局限性: 等待观察治疗常适用于症状较轻且无其他并发症的患者 ; 西药治疗虽然可以取得良好的治疗效果, 但是服药时间长, 不良反应大 ; 手术治疗目前在前列腺增生症治疗中仍起着不可替代的作用, 特别是在重度前列腺增生患者中尤为重要, 但是出血多 创伤大 术后恢复慢等缺点为广大患者所不能接受 ; 随着微创技术在泌尿外科学领域的应用, 微创治疗特别是经尿道前列腺电切术 (TURP) 为目前国际公认的治疗 BPH 的金标准 [14], 但是仍然存在着大量的 BPH 患者因心血管 脑血管等各种基础疾病而存在手术禁忌证 [15] 所以中医中药治疗以其不良反应小 患者依从性好而逐渐走进人们的视野 [15] 桂枝茯苓丸出自 金匮要略, 是张仲景治疗妇科症瘕的名方 [16] 加味桂枝茯苓颗粒在原方 ( 桂枝茯苓丸 ) 的基础上加大黄 王不留行 泽泻, 用以活血通便 清热利湿之效而寓 以通为用 的法则 方中桂枝辛甘而温, 入经络而宣通血脉, 消瘀祛滞 ; 桃仁苦甘而平, 活血祛瘀, 除 瘕, 增强桂枝化瘀消 功效 ; 茯苓淡渗利湿, 通利小便 ; 丹皮辛 苦寒, 凉血而不留瘀, 通经络, 破积血 ; 芍药以调和气血, 行血中之滞 ; 泽泻利水通淋, 通调水道 通过辩证加减, 诸药相配, 相辅相成, 补肾气, 除淤血, 通调水道 [17] 考虑 BPH 与妇科症瘕相似的病理机制, 依据 异病同治 的理论以及现代的制药方法 [18], 本研究组采用加味桂枝茯苓颗粒来治疗 BPH 前列腺正常体积和生理功能依赖于对其产生影响的生长促进因子和生长抑制因子的相对的 动态的平衡 [19] BPH 的发生有赖于新生血管的形成, 而新生血管的形成与 VEGF bfgf 及血管生成素密切相关 [20] 近来有学者认为,BPH 中相关的因子如 VEGF bfgf CD 34 可以被药物非那雄胺所抑制, 导致增生组织中血管密度下降, 从而使增生的前列腺腺体和间质萎缩, 前列腺整体体积减小, 因而 BPH 症状能够相对减轻和缓解 [21] 因此, 研究 VEGF bfgf 诱发血管新生和促进间质增长的作用, 对于揭示 BPH 病因 为临床开辟新的防治途径有重要意义 本研究结果显示,B 组前列腺体积 前列腺增生指数大于 A 组,C D 组前列腺体积 前列腺增生指数小于 B 组,B C D 组 VEGF bfgf 表达水平高于 A 组,C D 组 VEGF bfgf 表达水平低于 B 组 ;C D 组前列腺体积 前列腺增生指数 VEGF bfgf 表达水平无差异 提示加味桂枝茯苓颗粒 非那雄胺能够使腺体和间质均出现萎缩, 明显缩小前 列腺体积 降低前列腺增生指数 ; 加味桂枝茯苓颗粒在治疗前列腺增生方面与非那雄胺有着相似的机制, 其机制可能是通过抑制 BPH 组织中 VEGF bfgf 的表达及分布, 使新生血管增生被抑制, 造成增生的间质组织及腺上皮萎缩, 抑制 bfgf 分泌可使 BPH 组织中成纤维细胞 基质细胞 平滑肌细胞萎缩 减少, 进一步通过上皮 - 间质相互作用机制和血供的减少造成腺上皮萎缩 [22] 当然, 本研究尚存在一定局限性, 主要是检测范围相对较小, 仅局限于 VEGF bfgf 两个因子, 可进一步检测前列腺组织的抗凋亡基因 bcl-2 促增殖基因 c-myc 等基因的调控, 更全面地明确加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺新生血管产生和基质细胞生长影响的分子生物学机制, 此外, 今后继续密切关注学术动态, 选择更有意义的切入点开展深入研究 综上所述, 加味桂枝茯苓颗粒通过降低大鼠前列腺增生腺体组织中 VEGF bfgf 表达水平, 进而缩小前列腺体积, 降低前列腺增生指数, 从而达到治疗 BPH 的效果 另外, 加味桂枝茯苓颗粒及非那雄胺对大鼠 BPH 的治疗效果无差异, 其长期治疗效果及不良反应有待长期临床观察研究 作者贡献 : 李峰 郑仿 赵书晓 黄新进行实验设计与实施 资料收集整理 撰写论文 成文并对文章负责 ; 闫家文 马林枫 郑艺 钟新兰 赵军辉进行实验实施 评估 资料收集 ; 伍松合进行质量控制及审校 本文无利益冲突 参考文献 [1] 夏术阶, 张亚强, 顾晓箭, 等 良性前列腺增生症防治进展 [J]. 中华老年医学杂志,2012,31(9):741-746 [2] 刘海燕, 郭秀云 经尿道前列腺等离子双极汽化电切术患者的围术期护理体会 [J]. 中国医学创新,2012,5(34):82-83 [3] SunYM, YuCF, LiY, etal Clinicalobservation on modified decoctionofguizhifulingwancombinedwithacupointinjectionon50 patientswithbenignprostatichyperplasia[j].journaloftraditional ChineseMedicine,2015,56(11):945-947 (inchinese) 孙一鸣, 余长飞, 李岳, 等 桂枝茯苓丸加味联合穴位注射治疗前列腺增生症 50 例临床观察 [J]. 中医杂志,2015,56(11): 945-947 [4] 赵恒, 段萍 桂枝茯苓丸加味治疗前列腺增生症 60 例 [J]. 世界最新医学信息文摘 : 连续型电子期刊,2015,15(4):130 [5] Wu JY Treatingbenign prostatichyperplasiain60 patientswith combined treatmentoftraditionalchinesemedicineand Western Medicine[J]. Tianjin JournalofTraditionalChineseMedicine, 2010,27(4):292-293 (inchinese) 吴佳寅 中西医结合治疗良性前列腺增生 60 例临床观察 [J]. 天津中医药,2010,27(4):292-293 [6] WuFH, XieJD, XieXJ, etal Studyonestablishingmodelof hyperplasiaofprostateglandinrats[j].journaloffujiancolegeof TraditionalChinese Medicine, 2005, 15 (6): 37-38 (in Chinese) 吴符火, 谢金东, 谢学建, 等 大鼠前列腺增生模型的建立 [J]. 福建中医学院学报,2005,15(6):37-38 [7] 中华人民共和国卫生部药政局 新药 ( 西药 ) 临床研究指导原则
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