河南省农业科学院动物免疫学重点实验室 HeNan Provincial Key Laboratory of Animal Immunology 猪繁殖与呼吸综合征防控体会 郭振华农学博士 国家执业兽医师 2016 年 10 月 16 日, 南京 手机 :13381275273 电子邮箱 :gzhuavet@163.com
PRRSV 感染流行历史及现状 1987 年, 美国报道 1990 年, 德国发生 1991 年, 欧洲分离到病毒 1992 年, 北美分离病毒 1995 年, 中国报道 1996 年, 分离到病毒 CH-1 2004~2005 年, 经典毒株弱毒疫苗在国内开始大范围使用 2006 年, 中国爆发 PRRS 2007 年, 分离到毒株 JXA1(HP-PRRSV) 2011 年, 高致病性毒株弱毒疫苗在国内大范围使用 2015~2016 现状 经典毒株 (CH-1) 高致病性毒株 (JXA1) 未来? NADC30-like 毒株 HENAN-HEB / HENAN-XINX
PRRSV 病原简介 1 病毒学分类 套式病毒目 (Nidovirals), 动脉炎病毒科 (Arteriviridae), 动脉炎病毒属 (Arterivirus) 2 基因组结构 单股正链 RNA 病毒, 大小约 15kb, 编码 16 个非结构蛋白和 8 个结构蛋白 3 分子流行病学 Genotype I: 欧洲型毒株, 以 LV(Lelystad virus) 毒株为代表 ; 进一步又分为 3 个亚型中国已有欧洲毒株的流行 Genotype II: 美洲型毒株, 以 VR2332 毒株为代表, 进一步又分为 9 个系谱 (Lineages) 4 PRRSV 难于防控原因 抗原变异 基因重组 弱毒返祖 不同毒株之间血清学交叉保护性差
研究简介 跟踪 2014 年 10 月份以来, 代表性规模化猪场 PRRS 的发病 控制情况, 对比一年来代表性猪场的生产成绩, 评估 : 1) 现有疫苗免疫在 PRRS 防控中的效果 2) 血清学和病原学检测在 PRRS 诊断防控中的应用 3) 总结现阶段 PRRS 的有效防控措施
材料方法 猪场选择 : 1) 母猪存栏 200~1000 头之间, 2) 相对标准化的猪场建造模式 均为一点式生产模式 3) 生产管理水平接近 4) 有农场生产管理软件, 便于监控生产数据 诊断检测 由专业可靠的检测服务中心提供病原或血清学检测结果
PRRS 发病场跟踪观察情况 规模场 发病猪群及临床表现 检测样品猪瘟伪狂犬圆环 蓝耳 - 经典 蓝耳 - 变异 疫苗免疫情况 A 保育喘气, 发烧 肺脏, 淋巴结 - - + - + 母猪和商品猪均免疫 VR2332 毒株 B 产房仔猪, 发烧, 肺脏, 淋巴死亡率高结 - - NT + - 母猪和商品猪均免疫群免疫 TJM-F92 毒株 C 育肥咳嗽 喘气, 肺脏, 淋巴发烧结 - - NT + - D 妊娠母猪流产流产胎儿 - - + - + E 妊娠母猪流产流产胎儿 - + + F 保育喘气, 发烧 肺脏, 淋巴结 - - 弱阳 +( 未区分 ) 母猪群免疫 VR2332 毒株, 商品猪免疫 CH-1R 毒株 母猪群免疫 TJM-F92 毒株, 商品猪未免疫疫苗 母猪群免疫 VR2332 毒株, 商品猪免疫 TJM-F92 毒株 母猪免疫 VR2332 毒株 ; 商品猪未免疫疫苗 G 保育喘气, 发烧 肺脏, 淋巴结, 扁桃体 - - NT +( 未区分 ) 母猪群免疫 JX-AR 毒株, 商品猪未免疫疫苗 H 保育喘气, 发烧肺脏 - - + - + 母猪群免疫 VR2332 毒株, 商品猪未免疫疫苗
代表性规模场生产成绩对比 PRRSV 疫苗未免疫场和免疫场商品猪各阶段生产成绩比较 代表性猪场 产房仔猪保育猪育肥猪 未免疫场免疫场未免疫场免疫场未免疫场免疫场 1 2.85% 9.38% 1.62% 9.26% 2.22% 8.71% 9.00% P>0.05 2 6.16% 6.38% 7.87% 6.39% 8.53% 4.4% 3 7.31% 3.89% 2.07% 5.06% 3.23% 1.68% 4 10.63% 7.27% 5.33% 5.14% 6.73% 4.34% 5 3.79% 2.63% 0.66% 4.77% 1.47% 3.57% 6 2.84% 7.47% 1.78% 3.97% 2.96% 4.2% 7 5.79% 5.33% 4.67% 7.1% 7.97% 3.71% 平均损失率 5.62% 6.05% 3.43% 5.96% 4.73% 4.37% 各阶段猪群损失率 6.00% 3.00% 0.00% 产房仔猪 保育 育肥 未免异场 5.62% 3.43% 4.73% 免疫场 6.05% 5.96% 4.37%
诊断检测 血清学 A 血清学监控结果 100.00% 80.00% 60.00% 40.00% 20.00% 0.00% 2013 年 2014 年 2015 年 抗体阳性率 77.80% 85.70% 84.90% 猪场阳性率 99.50% 98.70% 98% 疫苗免疫或者 PRRSV 感染的普遍性 数据来源 : 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室 B 猪群种猪群保育猪育肥猪 良好 S/P 值 0.7~2.0 <1.4 <2.0 离散度 40% 偏高 S/P 值 2.5 1.5 2.1 离散度 40% 血清学检测结果结 合猪群临床表现 血清学检测在疫病防控中的应用 (IDEXX)
诊断检测 病原学 针对 ORF5 的通用型引物 A bp M 1 2 3 4 5 B HP-PRRSV 2000 1000 750 500 250 Classical PRRSV NADC30-like ORF5 基因检测结果及分子进化树构建 A)ORF5 基因的检测, 泳道 1~5 分别对应样品 BJ-4 HN07 HNzm1 HNzm2 HNhx B) 基于 ORF5 基因全序列的分子进化树构建 HNzm1 和 HNzm2 属于 HP-PRRSV 毒株,HNhx 属于 NADC30-like 毒株
诊断检测 病原学 针对 Nsp2 设计的特异型引物 A bp M 1 2 3 4 5 2000 1000 750 500 250 1040(CH-1a) 950(HP-PRRSV) 647(NADC30-like) B 323 433 TSFDWNVVLPGVEAANQTTKQLHVNQCRALVPVVTQEPLDKDSVPLTAFSLSNCYYPAQGDEVRHRERLNSVLSKLEGVVLEEYGLMSTGLGPRPVLPSGLDELKDQMEEDLLKLANAQATSEMMAWAAEQVDLKAWVKSYPRWTPPPPP TSFDWNVVLPGVVAANQTTEQPHVNSCCTLVPPVTQEPLGKDSVPLTAFSLSNCYYPAQGDEVHHRERLNSVLSKLEEVVLEEYGLMSTGLGPRPVLPSGLDELKDQMEEDLLKLANTQATSEMMAWAAEQVDLKAWVKSYPRWTPPPPP TSFDWNVVLPGVEAANQTTDQPHVNSCCTLVPPVTQEPLGKDSVPLTAFSLSNCYYPAQGDEVHHRERLNSVLSKLEEVVLEEYGLMSTGLGPRPVLPSGLDELKDQMEEDLLKLTNTQATSEMMAWAAEQVDLKAWVKSYPRWTPPPPP TSFDWNVVLPRVEAANQTTDQPHVNSCCTLVPPVTQEPLGKDSVPLTAFSLSNCYYPAQGDEVHHRERLNSVLSKLEEVVLEEYGLMSTGLGPRPVLPSGLDELKDQMEEDLLKLTNTQATSEMMAWAAEQVDLKAWVRSYPRWTPPPPP TSFDWDVVLPGVGVAAQAAKLPLINQCHAPVTVVTQKSL--------------------------------------------------------------------------------------------------------------- TSFDWGFVLPGVEMVAQAAELPLVNQCHAPVTVVAQRSS--------------------------------------------------------------------------------------------------------------- CH-1a JXA1 HNzm1 HNzm2 HNhx NADC30 481/482 504 522 533 561 PRVQPRKTKPVKSLPENKPVPAPRRKVGSDCGSPILMGDNVPNGWEDFAVGGPLDFPTPSEPMTPLSEPVLMPASQHIPRPVTPLSGPAPVPAPRRTVSRPMTPLSEPIFVSAPRHKFQQVEEANPAATTLTYQDEPLDLSAFSQTECEA PRVQPRRTKSVKSLPEGKPVPAPRRKVRSDCGSPVLMGDNVPNGSEE-TVGGPLNFPTPSEPMTPMSEPVLVPASRRVPKLMTPLSGSAPVPAPRRTVT-----------------------------TTLTHQDEPLDLSASSQTEYEA PRVQPRRTKSVKSLPEGKPVPAPRREVRSDCSSPVLMGDNVPNGSEE-TVGGPLNFPTPSEPMTPMNEPALVPASRRVPKLMTPLSGSAPVPAPRRTVT-----------------------------TTLTHQDEPLDLSVSSQTEYEA PRVQPRRTKSVKSLPEGKPVPAPRRKVRSDCSSPVLMGDNVPNGSEE-TVGGPLNFPTPSEPMTPMSEPVLVPASRRVPKLMTPLSGSAPVPAPRRTVT-----------------------------TTLTHQDEPLDLSVSSQTEYEA PEFQSRKAESVRSLPENRPLPAPRRKIRSRCGSLVSLGGNFPDSWEDL-AGGPFRSPVLPESVARSNEPV-------------------PVPAPRRTVSRLKPSPIVSTPVPAPRCGLQQVEGMNLAVGTLACQDELLDLSTSSQTEYEA PEFQSQKAESVRSLPENRPTPTPRKKIRPRCGSLVSLGSNIPDSWGDL-VGGSFHSPVQPESVARSNEPV-------------------PVPAPRRTVSRLKPSPITSTPVPAPRCGLQQVGGMNLAVGTPACQDRLLDLSASSQTEYEA CH-1a JXA1 HNzm1 HNzm2 HNhx NADC30 无缺失 30aa 缺失 131aa 缺失
小结 1 PRRSV 逐步成为猪场的一种常在病毒, 呈亚临床感染长期存在, 在特 定条件下表现出较严重的临床疾病 ( 应激源 ) 2 中国田间流行的 PRRSV 毒株多样性在进一步加大 目前以 HP-PRRSV 和 2013 年以来新出现的 NADC30-like 毒株为主, 后者应着重关注
PRRS 防控措施 1. 疫苗免疫 科学使用 疫苗种类毒株新兽药证书时间研发机构及企业 灭活疫苗 CH-1a 株 2005 年哈尔滨维科 NVDC-JXA1 农医药便函 (2007)176 号温氏大华农 R98 株 2009 年 南农高科 / 瑞普 / 中岸 弱毒苗 ( 经典毒株 ) CH-1R 株 2007 年 哈尔滨维科 VR2332 2005 年 4 月 勃林格 JXA1-R 2011 年 中国动物疾病预防控制中心 HuN4-F112 株 2011 年 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 哈尔滨维科生物技术开发公司 上海海利生物药品有限公司 吉林正业生物制品股份有限公司 哈药集团生物疫苗有限公司 弱毒疫苗 ( 高致病毒株 ) TJM-F92 株 2011 年 北京健翔和牧生物科技有限公司 中国农业科学院特产研究所 吉林特研生物技术有限责任公司 山西隆克尔生物制药有限公司 新疆天康畜牧生物技术股份有限公司 吉林国原动物保健品有限公司 青岛易邦生物工程有限公司 GDr180 株 2015 年广东永顺, 国兽医药品监察所 TJM-F92 株 +C 株 2015 年华威特 中监所 硕腾 中牧 7 种毒株,10 类疫苗产品
PRRS 防控措施 1. 疫苗免疫 科学使用 后备猪和母猪群应根据本场具体情况来确定 公猪不进行免疫 商品猪不建议做, 有时出于疫病控制的考虑, 可阶段性使用 重新认识 自家组织灭活疫苗 在疫病控制中的作用
PRRS 防控措施 2. 重视生产工艺改进 两点式的生产布局对于猪场疫病的防控净化具有重要的意义 商品猪群经历了一个蓝耳缓慢 温和感染的过程, 蓝耳处于阳性稳定状态
PRRS 防控措施 2. 重视生产工艺改进 两点式的生产布局对于猪场疫病的防控净化具有重要的意义
PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善 环境控制是防控 PRRS 的关键因素 夏季通风模式和冬季通风模式
PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善 环境控制是防控 PRRS 的关键因素 屋顶进风口 屋顶出风口 夏季通风模式和冬季通风模式
PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善 环境控制是防控 PRRS 的关键因素 冬季通风模式 ( 管道式通风 )
冬季通风模式 ( 管道式通风 ) PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善 环境控制是防控 PRRS 的关键因素
冬季通风模式 ( 管道式通风 ) PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善
PRRS 防控措施 4. 重视通过生产环节的改进来控制清除病毒 全进全出 : 转群标准的设定与执行 空舍消毒 : 清洁 清洗 消毒 干燥 部分清群或者闭群 : 制定周密的生产调整计划 后备猪驯化流程
小结 猪场建设布局 环境改善 ( 温度和通风 ) 生产流程标准化 疫苗和药物的应用 疫苗免疫是疫病防控的最后一道防线, 而非第一道防线 大多数的疫苗免疫不是消除性免疫或者不再发生感染的免疫
郑州国际会展中心 谢谢您的倾听 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
欧洲型 美洲型 East European L9 ATP/JA142 CH-1a JXA1 L8 East European L7 L6 MLV/VR2332 BJ-4 L5.1 L5.2 L4 L3 L2 Pan-European Tomasz Stadejek, Martin B. Oleksiewicz et al,2008 MN184A~C NADC30 NADC30-like Mang Shi, Tommy Tsan- Yuk Lam et al,2010 L1