西北植物学报 文章编号 中型狼尾草种质资源遗传多样性的 分析 张怀山 夏曾润 栗孟飞 王春梅 杨世柱 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 农业部兰州黄土高原生态环境重点野外科学观测试验站 兰州 兰州大学草地农业科技学院 草地农业生态系统国家重点实验室 兰州 甘肃农业大学生命科学技术学院 干旱生境作物学重点实验室 兰州 摘 要 运用 (() 标记对采自云南的 份野生种质和 份驯化新品系中型狼尾草材料进行遗传多样性分析 结果显示 条 (() 引物中共筛选出 条能扩增出清晰条带且多态性明显的引物 份材料 *!+ 共获得 个扩增位点 其中多态性位点 个 多态性比率为, 平均每条引物扩增位点为 个 平均观察等位基因数 有效等位基因数 ( & 多样性信息指数 和!- 基因多样性指数 分别为 和 种质材料间的遗传相似性系数变幅为 表现出丰富的遗传多样性 利用./ 0+ 聚类分析 以遗传相似系数 为界 份材料划分为 大类 但 0&1-' 检测表明 份种质材料的遗传聚类和地理距离之间不存在显著的正相关关系 研究结果首次从分子水平揭示了中型狼尾草的遗传多样性和变异水平 为合理地引种 驯化 保护和利用中型狼尾草野生资源提供了重要的参考依据和数据支持 关键词 中型狼尾草 (() 标记 种质资源 遗传多样性中图分类号 文献标志码 +!"# "!"!"!" "#$ " % & ' +! & & # + - 2 3 0-4- 5+! "%- 6+! ( 3&1 1 1-4 7&829&8/ &2%& - 1&'(- - "++(: -3&(-1 4;7-2 &1&8$-2 %-1-'8 (1&1 40 129 4+ 2 '1 2-4 2$'&'(9 1-% 3 -/'&1-& +2-& 3& "&" '- - 4/& 1 2&'+ 2 '1 2-(- -&8:- '93&.-219(1&1- -93&7 2&1 29 4 2&'&8+ 2-9 1-% 3& " &" '- - 43 4-(- -&8:- '9&+ 2 '1 2&'.-219&/2 &' -93&7 2&1 29 4+2 8'&8"2 (- -3&"& : - --18-219 41 - &-4 &2 42 % & &86 & -2-&&'9-879 (() %&<-2: -2-'1-81 &1 2 %-2-2- -'- 1-842 % 2 %-2 &8 '-&2 1&7'-'9% 27&8+1 1&' 4 '-2-71& -8' 8'9 % 2';& -2& -&% ' 4&11-4-& 2 %-2 & &81 - -2-1& - 4'9% 2' &, : -%-& 7-2 -8 %7-2 4&'-'- -4-1- %7-2 4&'-'- ( & 4 2%&1 8- &8!- --1 8--2-&8 2-- 1- '9 : - --1% '&2 19-4 -1!"2& -842 % 1 2--18-219 &%1 - %&1-2 &'4# &2"'1-2&&'9 1./ 0+ %-18 收稿日期 修改稿收到日期 基金项目 国家自然科学基金 甘肃省农业科技创新项目!"# 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金 兰州市科技计划项目 作者简介 张怀山 男 博士 助理研究员 主要从事草类植物种质资源与育种研究 $%& '& ' %
期 张怀山 等 中型狼尾草种质资源遗传多样性的 (() 分析 -81 &11-1- 1-8&--2-8 8-8 12&11 -'- -'!" 7 11-2- &2 2-'&1 7-1 -- --1&8-2&81& -&%1 - -2% '& %1 8-8 : -2-'141 2- -&2-2-1-4 2 11 %-1 2- -&' --18-219&8 &2 &1 4#$ &2 &11 -% '-'&2'- -'2 8-81 - 2-1&'&88&1&-8- -4 21-12 8 18 %- 1&1-2 &1&8-'1&1 4'8# &2-2% '& %2-2 - &2(()%&2<-2-2% '& %2-2 ---18-219 中型狼尾草 &2 $ 是陈守良等在 年发现并命名的长 序狼尾草新变种 为禾本科 2&% -&- 狼尾草属 多年生疏丛型草本植物 中国云南 四川 贵州 湖南 甘肃等地均有分布 中型狼尾草茎秆较粗壮 根系发达 具有适应性广 再生能力强 容 易栽培 产草量高 少有病害等优良特性 营养成分相对较高 是一种重要的饲草资源 其抗旱 耐湿性较强 并具有适度的耐盐碱性 也是一种良好的水土保持 防风固沙植物 具有较高的生态价值 遗传多样性不仅表现在表型性状上的差别 更重要的是表现在蛋白质 染色体和 *!+ 水平上的差异 分子标记的发展为从 *!+ 水平检测种质资源的遗传多样性提供了有利的工具 (() 1-2 % '- -= - -2- -&1 是由加拿大蒙特利尔大学 的 -1< - 等于 年提出的一种建立在 /") 反应基础上的新型微卫星类分子标记技术 该技术具有无需预知基因组背景信息 *!+ 样品用量少 信息量大 结果记录方便 实验成本低 操作简单 重复性好等优点 可以揭示出比 + 3/ )+/* (() 更丰富的多态性 而且不受季节 环境等外在 因素的影响 (() 目前已被广泛运用于植物种质资源鉴定 基因定位 遗传作图 进化 系统发育 物种分类及分子标记育种等研究中 是植物遗传多 样性分析中的主要技术手段之一 中型狼尾草属于典型的异花授粉植物 分布甚广 在其演化过程中无疑存在着种间杂交或平行进化等复杂现象 揭示其演化途径和不同地域野生种间的明确亲缘关系是一项繁复而持久的探究工作 国内目前对中型狼尾草的研究主要侧重于形态分 类 引种驯化 生产性能 生理生态特 性等方面 而从分子水平对中型狼尾草遗传多样性的研究还未见报道 基于此 本研究利用 (() 分子标记手段对从采自云南的 份野生种质和 份驯化新品系的中型狼尾草材料进行种间遗传多样性分析 旨在探索 (() 分子标记法在中型狼尾草 品种鉴定与分类 系统发育等研究中的可行性 同时也为中型狼尾草种质资源的开发利用及新品种培育提供理论依据 材料和方法 ( ( 供试材料 份中型狼尾草材料均采自云南 甘肃两省各地 其中 号材料是人工驯化品系 原材料来自云南昆明 年引种栽培于甘肃兰州大洼山牧草试验基地 年收种 号材料于 年采自云南各地的野生种质 具体来源见表 (!) * 提取及定量 每份材料随机取 个单株的新鲜幼嫩叶片 等量混合 采用改良 (*(8% 8 8-9'' 4&1- 十二烷基硫酸钠 法提取植物总 *!+ 用, 的琼脂糖凝胶电泳检测 *!+ 质量 经紫外可见分光光度计 :. 测定其浓度和相对纯度后 最终用 :$ 稀释至 3 > 保存备用 (!+ 引物的筛选 本试验根据加拿大哥伦比亚大学.-219 4?2 1 " ' %7 &.?" 核酸蛋白服务工作室公布的 对 (() 引物.?".?" 序列设计 挑选 条交由上海生工生物工程技术服务有限公司合成 最终筛选出 条扩增条带较多 结果稳定 背景清晰的引物用于中型狼尾草 (()/") 反应 表 (!,-./ 反应体系的建立与优化 将筛选引物分别在野生大麦 %$ 早熟禾 & 沙鞭 $ ' % 和小花棘豆 &$ 的 (() 反应体系和反应程序下进行扩增 通过预试验 建立了一套中型狼尾草 (() 分析的优化反应体系及反应程序 3 反应体系包括 3 88 ; 3 @ /")? 4-2 %% '38!:/ % '3 (() 引物. ( *!+ 聚合酶 *!+ 模板 反应程序为
西 北 植 物 学 报 卷 表 ( 试验材料及来源 :&7'-*-1& '-8 4 2%&1 4--2 %-1&'%&1-2 &' 编号! 采集地点 3&1 海拔 +'1 1 8-% 经纬度 3 1 8-&8'&1 1 8- 甘肃兰州大洼山 *& &&3&& AB!AB$ 甘肃兰州大洼山 *& &&3&& AB!AB$ 甘肃兰州大洼山 *& &&3&& AB!AB$ 甘肃兰州大洼山 *& &&3&& AB!AB$ 云南昆明官渡区福保村 7&&8 % AB!AB$ 云南昆明西山区采莲河 "& ' &# &% AB!AB$ 云南昆明呈贡区中和村 -" -% A B!AB$ 云南昆明呈贡区罗家村 3&" -% A B!AB$ 云南昆明晋宁县杨家河 6& &C % AB!AB$ 云南昆明西山区河尾村 - - # &% A B!A B$ 云南昆明官渡区新河村 #- &8 % A B!A B$ 云南昆明呈贡区滇池边 * & " -% AB!AB$ 云南嵩明县腰站村 6& &" %6 & AB!AB$ 云南嵩明县苔才村 :&& " %6 & AB!AB$ 云南嵩明县青龙潭 '1&" %6 & A B!AB$ 云南宜良县凤鸣村 - %6 ' & 6 & A B!AB$ 云南禄劝县施宽村 (< &3 = &6 & AB!A B$ 云南安宁县八街镇?&-+% A B!AB$ 云南武定县高桥镇 & = & 5 86 & AB!AB$ 云南澄江县小窑村 # & 9& " - & 6 & AB!AB$ 云南澄江县廖官营 3 & &9" - & 6 & AB!AB$ 云南姚安县栋川镇 * &6& &6 & AB!AB$ 云南禄劝县撒营盘 (&9 &3 = &6 & A B!AB$ 云南宜良县清水沟 6 ' & 6 & AB!A B$ 云南嵩明县水海村 (& " %6 & A B!A B$ 云南祥云县王家山 5& &&# & 9 6 & AB!AB$ 云南祥云县红土坡 1 # & 9 6 & AB!AB$ 云南马龙县中小屯 & 1 0&'6 & AB!AB$ 云南马龙县通泉镇 := &0&'6 & AB!AB$ > 预变性 % > 变性 % > 退火 % > 延伸 % 共 个循环 > 延伸 % > 保存 扩增产物在含有 %3$?-18%72 % 8- 溴化乙锭 的, 变性聚丙烯酰胺凝胶 5 恒功率电泳约 % 电泳结束后于紫外凝胶成像系统 :& 拍照并分析 ( 0 数据统计及分析 (() 通常被认为是显性标记 视每条多态性为一个等位基因 凝胶上相同迁移率位置上有 *!+ 条带的记为 没有 *!+ 条带或模糊不清的记为 将结果输入 $-' 表格 得到 (() 表型数据矩阵 采用 /;/ $!$D-2 软件计算 (()/") 扩增产物的多态位点数 多态位点比率 ( & 多样性信息指数!- 基因多样性指数 观察等位基因数 及有效等位 基因数 利用!:(6(/"D-2- 软件的 ( % '&2 19 程序 &' 1&1-8&1& 对原始数据矩阵进行!- 遗传相似性系数 --1% '&2 19!" 计算 应用 "'1-2 中 (!+! 程序的非加权成组配对算术平均法./ 0+ 对中型狼尾草材料进行遗传相似性聚类分析 最后在 2& 中的 :2-- ' 1 程序下建立树状图 运用 : / + D-2 软件对种质地理距离与遗传聚类之间的相关性进行 0&1'- 检验 结果与分析 )!( 扩增产物及多态性分析 按照最优反应体系及程序最终筛选出的重现性好 特异性高 多态性明显的 条 (() 引物 用于 份中型狼尾草材料 *!+ 的 /") 扩增 图 表 显示 条引物共扩增出 个位点 其中多态
期 张怀山 等 中型狼尾草种质资源遗传多样性的 (() 分析 性位点 个 平均多态性比率 达, 每条引物扩增位点 个不等 平均 个 其中多态性位点 个不等 平均 个 多态性比率最高的达, 最低的为, 引物.?" 扩增位点最多 为 个.?" 和.?" 位点最少 这说明供试中型狼尾草种质资源间存在较高的遗传变异 且 (() 标记能有效地从分子水平上揭示材料间的多态性 ) ) 遗传多样性分析观察等位基因数 有效等位基因数 ( & 多样性信息指数 及!- 基因多样性指数 都是衡量遗传多样性水平的常用指标 将 份中型狼尾草材料的 (() 扩增谱带通过 /;/ $!$ 软件分析 结果 表 表明中型狼尾草的平均 和 值分别为 和 图 引物.?" 扩增的中型狼尾草 (() 图谱 为中型狼尾草材料 编号同表 0 0&2<-2 (()&% ' 4&12-'1 4# &2 12 %-2.?" +-4# &2%7-2-2--8 :&7'-0 0&<-2 表 ) 引物序列及位点多态性 :&7'-(-= - -&8&% ' 4-8' '9% 2% 4 2 %-2 引物 /2 %-2 序列 (-= - -BB 退火温度 +-&' 1-% -2&1 2-> 位点数! 4' 多态位点数! 4 '9% 2' 多态位点比率 /2 21 4 '9% 2',.?" +" ".?" : ".?" "+ ):.?" "+ )".?" +" 6:.?" +" 6+.?" ":".?" "::"+.?" + + :: :+ ":":: +:".?" "+: : : :"+:: ::""+ 平均 + -2& - 总计 : 1&'! 1-) + 6 ": 表 +)1 份中型狼尾草材料遗传多样性指数 :&7'- --18-219 8- -4 # &2 &- 项目 1-% 样本 (&% '- - 观测等位基因数 ;7-2 -8&'-'- %7-2 有效等位基因数 $4-1- %7-2 4&'-'- ( & 多样性信息指数 ( & 8-!- 基因多样性指数!- 8- 平均 0-& 标准差 (1 *-
西 北 植 物 学 报 卷 图 基于 (() 标记的 份中型狼尾草种质资源聚类图 *-822&% 4 '1-2&&'9 7& -8(() 4 # &2-2% '& %2-2 - ) + 遗传相似性系数分析亚类 第 亚类包括来自昆明市官渡区的 号!- 遗传相似性系数!" 是用来比较群体或个号及来自禄劝县的 号共 份材料 第 亚类有体间相似程度的度量参数 平均相似系数越高 说明 份材料 分别是来自昆明市晋宁县的 号材料 相似程度越大 遗传背景一致性越强 份中型西山区的 号 号材料 呈贡区的 号 号和 狼尾草材料之间的!- 遗传相似性系数变化范围为号材料以及来自安宁县的 号材料 澄江县的 表 其中 亲缘关系最近的是来号材料 宜良县的 号材料 姚安县的 号材料和源于云南昆明市官渡区新河村的 号材料和安宁禄劝县的 号材料 第 类只包含 份来自甘肃兰县八街镇的 号材料!" 值为 遗传相似性州的 号材料 第 类有 份材料 也是划分为 个系数最低的是来源于云南昆明市禄劝县施宽村的亚类 来自甘肃兰州的 号 号和 号材料为第 号材料与来源于云南曲靖市马龙县中小屯的 号材料!" 值为 亲缘关系最远 份中型狼尾草种质材料中 大多数来自相同或相近地理位置的材料间!- 遗传相似性系数较大 亲缘关系较近 但由于采样地理分布较广 生境相差较大 有一小部分材料之间!" 值较小 从而使得供试材料间整体存在较大的遗传差异 ), 聚类分析 利用./ 0+ 法对 份中型狼尾草材料进行聚类分析 建立聚类分支树状图 图 供试材料以遗传相似系数 为分类界限 聚为 大类 第 类有 份材料 按地理来源划分为 个亚类 来自云南崇明县的 号 号 号 号材料与来自武定县的 号材料为第 亚类 来自云南马龙县的 号 号材料与来自宜良县的 号材料及来自澄江县的 号材料为地 亚类 第 类有 份材料 大部分都来自云南昆明市城郊附近 又分为 个 亚类 来自云南祥云县的 号和 号材料为第 亚类 经 0&1'- 检验 中型狼尾草种质的地理距离和遗传聚类之间并不存在显著的相关性 讨 论 鉴定 分析材料的遗传多样性是研究物种起源进化 发现新的基因资源 改良现有育种材料的基础性工作 分子标记是从 *!+ 水平上揭示品种及种群间差异性和相关性的有效工具之一 运用它可以确定样本材料之间的遗传多样性和亲缘关系 通过聚类分析可以划分出杂种优势群 提高杂交优势的应用效率 对种质资源保护和品种改良具有重要意义 中型狼尾草作为一种兼具饲草 生态型的优良 草种而受到禾草学家的高度重视 张怀山等研究表明 采自云南祥云的中型狼尾草种子在昆明地
期 张怀山 等 中型狼尾草种质资源遗传多样性的 (() 分析 表 标记的 份材料之间的遗传相似系数! "#$$% 编号 &'! (! ( (' ('! (' ('! (' ('! ('! ('! (' (' (' ('! (' (' (' (' ('! (' (' ('( (' (' (' (' (' (' (' ('! ('! (' (' ('! (' (' (' (' ( ( ('! (' (' (' (' ( (' ( ('! (' (' (' ( (' (' ('( (' (' (' (' (' (( (' ('! (' (' (' ('! (' ('! ('! (' ( ('! (' (' (' (' (( (' (' (' (' ('! (' (' (' ('( ('! (' (' ('! (' (' (' ('( (' (' (' (' ('! (' (' (' ('! ('( ('! ('! ('! ('! (' (( ('! (' ('( (' (' (' (' ('! (' ('! (' ( (' (' (' ('! (' (' ('! (' (' (' (' ( (' (' ('! (' ( ('! (' (' (' ( (' ('! (' (' (' (' (' (' (' (' (' (' (( (' (' (' ( ('!( (' (' (' (' ('! ('! (' ('! (' ('! (' (' ('! (' ( (' (' (' (' (' (' (' (' (' (' ( (' ('( ('! (' (' (' ('! (' ( (' ( (' (' ('! (' ( (' (' ('! (' (' (' (' (' (' (( (' ('! (' (' (' (' (' (' (' ( (' ('! ('! (' (' (' ('! ('! (' (' ('( ('! (' (' (' ('! ('( (' ('( (' (' (' (' (' (' ('! (' ( (' (' (' (' (' (' ('! (' ( (' ('! (' (' (' (' ('! (' ('! (' (' ('( (' (' (( (' (' ('! (' ('! (' (' (' (' (' (' ('! (' (' ('! (' ('! (' (' (' (' (' ('! ('! (' (' (' (' (' ('! ('( (' (' (' (' (' ( (' ('! (' (' (' (' (( (' ( ('! (' ('('(('(' (' (' (' (' ( (' ('! (' (' (' ('! (' ('! (' (' (' (' (( (' (' (' (( (' (' (' (' '('('( (' (' (' (' (' (' (' ('! (' ('! (' (' ( (' (' (' ( ('( (' ('! (' (' (' ('!(' ('('(' (' (' (' ('! (' (' (( ('! (' (' (' (' ('! ('! ('( (' ('! (' ('! ('! (' (' (' ('(' ('!(' ('! ('! (' ( (' (' (' (' (' ('! (' ('! (' (' ('! (' ('! (' (' (' (' (' ('! ('(' ((('!(' ( (' ('('!
西 北 植 物 学 报 卷 区栽培种植 第一年干草量为 <% 第二年干草量达 @ <% 并且每年可刈割 茬 在甘肃兰州地区引种结果 在施用水肥条件下 当年干草量就达 @ <% 拔节孕穗期粗蛋白含量, 赖氨酸含量, 对中型狼尾草进行引种驯化和遗传改良极有希望培育出对畜牧业发展和生态建设发挥突出作用的禾草新品种 然而 狼尾草属牧草分子方面的研究起步较晚 目前主要集中在 )+/* 分子标记 解新明等采用 )+/* 标记对狼尾草属 个品种遗传多样性的研究发现 品种间已有一定的遗传分化 具有较高的 遗传变异 钟小仙等对 份狼尾草属牧草资源进行 )+/* 遗传多态性聚类分析表明 筛选出的 条随机引物共扩增出 个位点 其中 个多态性位 点 将 份材料聚为 大类 朱钧对狼尾草属优质牧草的 )+/* 分析研究表明 条引物共扩增出 条谱带 多态性位点百分率在,, 之间 乔良普运用 )+/* 和 (() 分子标记对 份狼尾草属牧草遗传多态性 亲缘关系的研究显示 条 )+/* 引物共检测到 个位点 其中多态位点占,!- 基因多样度为 ( & 信息指数为 条 (() 引物共检测到 个位点 其中多态位点占,!- 基因多样度为 ( & 信息指数为 )+/* 标记和 (() 标记聚类图谱大体趋势相同 但不完全一致 本研究通过 (() 标记对 份兰州地区栽培中型狼尾草材料及 份云南地区野生中型狼尾草材料进行遗传多样性分析表明 条 (() 引物共扩增出 个位点 平均多态性位点比率为, 份材料的平均 ( & 多样性信息指数和!- 遗传多样性指数分别为 和 遗传相似性系数变幅为 这表明中型狼尾草在长期的适应和进化过程中形成了广泛的遗传变异 不同种质材料间存在着丰富的多态性 中型狼尾草具有较高的遗传多样性 可能是由其自身的生物学特性决定的 中型狼尾草是多年生草本植物 风媒传粉 而且它产生的花粉量极大 花粉粒小而干燥 重量极轻 利于远距离传播 使个体之间基因流动频繁 为基因重组提供了广阔的空间和机会 此外 一般来说植物的多样性中心可能是该物种的起源中 心 因此 中国西南地区 云南 可能是中型狼尾草的部分起源中心或是第四纪冰期避难所 中型狼尾草在云南省从南至北都有分布 而云南地形地貌 复杂 南北之间在气温 土壤 水肥 植被等生态因子上差异较大 也可能导致不同地区种质由于适应环境的需要产生不同的表型和基因型 从而扩大了中型狼尾草的遗传多样性水平 本研究结果表明采用 (() 分子标记进行中型狼尾草种质资源遗传多样性的分析是可行的 并且具有较高的多态性检测水平 这些多态性对了解中型狼尾草的遗传背景 为中型狼尾草牧草资源的开发利用 新品种培育和生产提供了理论依据./ 0+ 聚类分析显示 以遗传相似系数!" 约 为界 将 份材料划分为 大类 来自于相同或相近地理生态型的多数资源可以聚于同一类或亚类 呈现出一定的地域性分布规律 这可能是长期自然选择使个体中发生的不定向变异演变为群体遗传结构的定向变异从而导致同一地区的大部分中型狼尾草种质基因型趋于相似的结果 但是 来自兰州大洼山的栽培种质与来自云南祥云县的野生种质归为一类 而同样栽培于大洼山的 号材料却独聚一类 形成 大杂居 小聚居 的现象 表现出较大的地域分布差异性 即各种质材料间遗传分化程度较大 并且没有依据地理位置的渐变而呈现出遗传距离上的渐变规律 与前人相关野生资源的分析结论 不尽一致 号材料单独聚为一类 说明其遗传上具有一定的特殊性 可能是由于材料在引种驯化过程中有个别基因发生了适应当地环境的基因突变 引种地兰州地处黄土高原西端 气候干燥 蒸发量远大于降水量 风沙活动频繁 土壤碱化贫瘠 水土流失严重 相对于原产地雨量充沛 土壤肥沃的优越生境 这种不利的环境使得种质发生了较大变异 产生了比较独特的基因型 "' 等研究表明 高山或河道的物理隔离对生物居群间的遗传分化有一定的影响 然而 本研究中 基于种质地理距离和遗传聚类的 0&1-' 检测表明 中型狼尾草种质的遗传分化与 52 1 提出的地理距离分化模式不太相符 即地理分布与遗传多样性分布没有直接 的相关性 这与 &2%2< 等的研究结果相一致 同样地 实验中遗传相似系数最大 亲缘关系最近的来源于云南昆明市官渡区的 号材料和安宁县的 号材料虽然聚为一类 但却分属于两个不同的亚类 而地理距离最近 均来自于宜良县的 号和 号材料更是聚于两个不同的大类 进一步表明中型狼尾草的遗传聚类与地理来源无严格的一致性关系 由此可以看出 中型狼尾草种质的遗传分化受距离的影响不大 云南地区野生中型狼尾草资源遗
期 张怀山 等 中型狼尾草种质资源遗传多样性的 (() 分析 传变异的形成并非主要是由地理距离产生的遗传漂变所致 可能跟其生殖方式和基因的突变等有关 中型狼尾草属于异花传粉植物 花粉串粉导致天然杂交 使得相同生态型的种质产生特异的基因型 另一方面 环境饰变作用引起地区间偶然的基因交流导致某些基因在不同地区的入渗 造成不同地理环境中种质材料性状的交叉 使得野生中型狼尾草的遗传距离与地理来源的关系复杂化 (&1 等在腰果 )' '' 种质资源遗传多样性的研究中认为不同地区之间的相互引种可能导致种质的聚类结果与种质地理来源没有直接联 系 同样 易杨杰等在狗牙根 * '$ 种质遗传多样性的 ()+/ 研究中发现一些地理来源及遗传背景不一的品种聚在一起 这可能与江河冲刷 人类活动等将其转入异地进行无性扩繁有关 物种的遗传多样性是大自然最珍贵的自然资源 是人类赖以生存的基础 遗传多样性可以用来 描述种群遗传变异和维持变异的机制 其丰富程度决定了物种对环境的适应能力与进化潜力 通过遗传聚类了解中型狼尾草遗传变异在地理上的分布格局对于制定科学的保护策略并促进其开发利用具有极为重要的作用 云南野生中型狼尾草存在较为丰富的遗传变异与分化 虽然多数资源在聚类上呈现一定程度的地域分布规律 但是中型狼尾草的遗传关系和地理距离之间并不存在显著的正相关关系 因此 在实际开发应用研究过程中 应该重点对中型狼尾草种质资源实施异地保护 并在迁地栽培后加快对中型狼尾草的繁育技术 引种驯化研究 保持并扩大中型狼尾草资源的多态性丰富程度 此外 对中型狼尾草野生资源的原生境保护工作也不能松懈 在广泛深入评价的基础上进一步建立中型狼尾草地方种质资源库 与此同时需要加强当地农户的科普教育 防止人类活动造成的基因混杂 以保护其独特的基因资源 为中型狼尾草的生物分子进化 地理分异和物种形成等研究奠定必要的材料基础 参考文献 " $!( 3 陈守良 C! 6# 金岳杏!- 1& & 7-4" % &8*' ' C #+,+' -$ ' 植物研究, "- - ;.( 5 邹胜文 #.$:6 薛太元 5$!# 0 文晓梅 $ 1&7' 1- = - 4 &2 &8(C #.,! % '/ 草与畜杂志 "- - $:$5 " $)+ +3(+3+?.*+ * - %-4-2 2 179% '- -= - -2- -&1(()& 2-8'9%-2& -& 2-& 1&% ' 4&1 C!' ) 3( 李海生 (() % '-'&2%&2<-21- '9&8 1 &'&1'&1 --18-219&&'9C+,+ 生物学通报 +1"- - +! 6 # 张云香. 6 胡灏禹 $#C 何兴金 --18-219 40 &'/.'72 &-8& -2-8&82&2-- - 8-1- 1-879 (() C)' +#+#$ '' #"# 西北植物学报 ++"- - 5+! 6 王 瑜 6.+! 袁庆华 $ 1&7' %-1&81 %&1 4 (()2-& 1 9 1-%4 2&'4&'4& C)' )' "' 草地学报 (0 "- - ;*5! *+ : $!$ +?(0 : 3 5 +'&1 4 1-2% '- -= - -2- -&1 (()%&2<-2 1'&1 --1C #1 '$ & ( +00 )+C.C((* ;3++??(+!:)+* 8-1 4&1 4 1-2% '- -= - -2- -&1 (()%&2<-2 & &1-81 --8 - -&1 C ' )! /( ) # +;3 肖 黎 3 #3 李晓玲 5+! 6? 王玉兵 +&'9-41 - --12-'&1 &%--4 '&1(() %&2<-2C+,+' - ' 植物研究 +( "- - C;(/* +5+! D +&'94 --18-219&%"'- 19 -C+0( +! ( 张怀山 ;. # 周学辉 +; 乔国华 (1 8 - '8-- &8 11 '&1 &' - C*% 中国草食动物 +"- - 3. #( 卢欣石 ( $! 63 申玉龙 : -&8& 1-7 -2 &1&8&&'91 -' - '&1-& 2-4 '8-- C # ' "'' 草业科学 "- - " $!33 陈卢亮 12 81 4%& '1&1-8 &2-1 - &2& 1-21 4 2"- -4 2& -C* * 中国奶牛 "- -
西 北 植 物 学 报 卷 C +;( 6 焦树英 3 6 李永强 ( +6 3+ ($ : 沙依拉 沙尔合提 (--8-2% &1&8 --8' 21 &71. #)' +#+#$ '' #"# 西北植物学报 )1 "- - +! ( 张怀山 +; 乔国华 5+! " 0 王春梅 0& &2& 1-21 &8-'&'&8& 1&7 ' 19 4'1&1-8 - ' -C*% 中国草食动物 +"- - ( +! 单 志 5. 3 吴宏亮 3 " 3 李成磊 (1 8 -- 12& 11 & &2-19 4 '&1- %*!+792-4 2%& 1-(*(%-18 C!)' "'' 广东农业科学 +"- - +! : 张 韬! $ 3 聂洪丽 " $! 6 # 陈颖晓 )- -&221&'1 %&1 4 (()/")2-& 1 9 1-% '87&2'-9 C))' "'' 安徽农业科学 +0"- - 3. 0 刘 美 +; 赵桂琴 3. 刘 欢 ; 1 %&1 4 (()&% ' 4&1 9 1-% C*.,! 中国草地学报 +("- - 3 + $( --1 &2 &1&8 ' &'8-219 4' % / & -&-8-1- 1-879 (() %&2<-2C),+ 3./ 卢 萍 +; 0 3 赵萌莉 +! * 韩国栋 --18-219 1 8-4 & 79 (() -20 ' & C)' +#+#$ '' #"# 西北植物学报 ) "- -!$ 0 $ 1 %&1 4& -2& - -1-2919&8 --181& -42 %& %&' %7-2 4 8 8 &'C! '1 0 33$) 0 / :' 4 2'&1 --1&&'9 - : / ++ 822&%4 21 -&&'94&'9%-&8% '- '&2 --18&1& $?;3*- &21%-1 4?'&'(- -! 21-2 +2 &.-219 '&1&4+ & '&7'-42 % 1 7-7 -8 % %714& & 3. 刘 欢 0./ 慕 平 +; 赵桂琴 (1 89--18-219 4)%% -2% '& %2-2 - 79 (()%&2<-2 C)''"' 草业学报 )( "- - # $# 0 解新明 3. #3 卢小良 +&'94 --12-'&14'1&279)+/* %&2<-2C)''$ "' 草业学报 (, "- - ;! ## 钟小仙. ) 顾洪如 # +! 6 向阳海 +&'944 2& -2-2 - 79)+/* % '-'- %&2<-2 C..,)' "'' 江苏农业学报 (1"- - 朱 钧 狼尾草属优质牧草的形态学及其 )+/* 分析研究 * 重庆 西南大学 乔良普 狼尾草属牧草遗传多样性的 )+/* 和 (() 分析 * 福州 福建农林大学 D+D 3;D!5 '8/2-1 241-21:2--4: 2<1&&81 -"&& &81 -/2 7'-% 41 -;24 21:2--0 3 8 /2 17 121" 5. 6 :+3 + $));" 0?+ + 3/&&'94* ' 3 /-2 &2 8& 19'--1 &2 &1 C!$, ";;3!; ("+ +((; */$33$ )!; -&'-9'-2&&'&&'94 0-8 1-22&-&)' && ;2 8& -&-'&1 7& -8 ' 2'& 1% &1-' 1-&8%2&1-' 1- &2 &1 C '1'() 5) :('&17981& - C #! ') +00) " C3 ;*: 0C5 +'9%-*-219 /'&1( --0/'&1/ '&1 --1?2--8&8 --1)- 2 - (+!: ;( 5 ( ;? + *0$356! ( +-%-1 4 --18-219&--2% '& %)+/*&8 (() %&2<-2 C"' ' () 6 6C 易杨杰 +! # 张新全.+! 3 黄琳凯 --18-219 4'8* ' -2% '& %8-1- 1-8 79()+/%&2<-2C 遗传 + "- -