5 1 Vol. 5 No. 1 2014 1 Journal of Food Safety and Quality Jan., 2014 惠 芸 华, 于 * 欢, 于 慧 娟 (, 200090) 摘 要 : 目 的 方 法, FMOC-CL 结 果 45 1 h 50 μg FMOC-CL V :V KH2 PO 4 =2:1 结 论, 关 键 词 : ; ; Study on optimization of derivatization reaction conditions during determination of erythromycin residues HUI Yun-Hua, YU Huan, YU Hui-Juan * (Ministry of Agriculture Supervision and Testing Center for Aquatic Products, East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Science, Shanghai 200090, China) ABSTRACT: Objective To investigate the conditions of derivatization reaction during the process of erythromycin determination in aquatic products. Methods The reaction temperature, reaction time, FMOC-CL quantity and reaction system were studied to optimize the derivatization reaction. Results The results showed that the best derivatization reaction conditions of erythromycin were as follows: the derivatization reaction temperature was 45, the reaction time was 1 h, and the amount of FMOC-CL was 50 μg under the reaction system of V acetonitrile :V KH2PO4 =2:1. Conclusion suitable for the established experiment. KEY WORDS: erythromycin; derivatization reaction; optimization The derivatization reaction condition was (erythromycin), [1-2],, (Aristichys nobilis) (Hypophthalmichthys molitrix) [3],, [4-9],, [10],,,,, 9- * 通 讯 作 者 :,, E-mail: yuhuijuan607@sohu.com *Corresponding author: YU Hui-Juan, Researcher, East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Science, No.300, Jungong Road, Shanghai 200090, China. E-mail:yuhuijuan607@sohu.com
90 5 (FMOC-CL), [11] FMOC-CL, FMOC-CL, 1 1 Fig. 1 The derivation reaction of erythromycin 1 材 料 与 方 法 1.1 仪 器 和 试 剂 (organomation), (MSI IKA), Agilent1100, (101-2B, ), TSQ Quantum ; (Fisher, ), ( ), ( ), ( ), ( ), : 99%(SIGMA ), : 99%(SIGMA ), 9- (FMOL-CL): 98%(SIGMA ) 1.2 溶 液 配 制 : 0.0100 g, 100 ml, 100 μg/ml,, 10 μg/ml FMOL-CL : FMOL-CL, 100 ml 1.3 实 验 方 法 1, 3 3, 3, 15 min, 1.3.1 不 同 反 应 温 度 对 红 霉 素 衍 生 化 程 度 的 影 响 30 35 40 45 50 55 60 1.3.2 不 同 反 应 时 间 对 红 霉 素 衍 生 化 程 度 的 影 响 30 60 90 120 min 1.3.3 不 同 量 的 衍 生 试 剂 对 红 霉 素 衍 生 化 程 度 的 影 响 12.5 25 37.5 50 62.5 75 μg FMOC-CL, 1.3.4 不 同 反 应 体 系 对 红 霉 素 衍 生 化 程 度 的 影 响 V :V KH2 PO 4 =1:1, V :V KH2 PO 4 =2:1, V :V KH2 PO 4 =3:1, V :V KH2 PO 4 =4:1, V :V KH2 PO 4 =5:1 1.3.5 高 压 液 相 色 谱 分 析 条 件 : : CAPCELL PAK MGⅡ-C 18 (4.6 mm 150 mm) : A: ; B: 0.03 mol/l (ph 6.3) 1 : 40 : 2 ml/min : 50 μl : 255 nm; : 315 nm Table 1 (min) 表 1 梯 度 洗 脱 程 序 The gradient elution procedure A(%) B(%) 0.00 63 37 12.0 63 37 13.0 75 25 19.0 75 25 19.1 63 37 25.0 63 37
1, : 91 2 结 果 与 讨 论 2.1 反 应 温 度 对 红 霉 素 衍 生 化 程 度 的 影 响 2,,, 40~50, 50 2.2 反 应 时 间 对 红 霉 素 衍 生 化 程 度 的 影 响 3, 60~90 min,, 2.3 不 同 量 的 反 应 试 剂 对 红 霉 素 衍 生 化 程 度 的 影 响 4,,, 50 μg,, 4 FMOC-CL (n=3) Fig. 4 The effect of amount of FMOC-CL on erythromycin 2.4 不 同 反 应 体 系 对 红 霉 素 衍 生 化 程 度 的 影 响 5, V :V KH2 PO 4 =2:1,, 2 (n=3) Fig. 2 The effect of reaction temperature on erythromycin 5 (n=3) Fig. 5 The effect of ratio of acetonitrile to KH 2 PO 4 on : : 40~50, 3 (n=3) Fig. 3 The effect of reaction time on erythromycin : 1 h, : 50 μg, V :V KH2 PO 4 =2:1,, 6 11.610 min, 17.221 min
92 5 Fig. 6 6 HPLC chromatogram of erythromycin and roxithromycin standard 参 考 文 献 [1]. [J]., 2000, 35(3): 58 60. Ren CZ. The progress of structure-activity relationship study on erythromycin and its derivatives[j]. Chin J Vet Med, 2000, 35(3): 58 60. [2]. [J]., 2005, 14(19): 2620 2621. Yuan TS. Progress in research and application of macrolide antibiotics [J]. Mod J Integr Tradit Chin Western Med, 2005, 14(19): 2620 2621. [3]. [J]., 2004, (6): 31. Cao FX. Application of antibiotics in fish production[j]. World of Breeding, 2004: 31. [4],,. [J]., 2004, 23(8): 39 41. Zhao HM, Jiang XM, Lin XF. Current status on residues of antibiotics in seafood [J]. Fisheries Sci, 2004, 23(8): 39 41. [5] Billedeau SM, Heinze TM, Siitonen PH. Liquid chromatography analysis of erythromycin in salmon tissue by electrochemical detection with confirmation by electrospray ionization mass spectrometry [J]. J Agric Food Chem, 2003, 51(6): 1534 1538. [6] Dreassi E, Corti P, Bezzini F. High-performance liquid chromatography assay of erythromycin from biological matrix using electrochemical or ultraviolet detection [J]. Analyst, 2000, 125: 1077 1081. [7],. [J]., 2003, 24(2): 118 120. Han NY, Zhou T. Determination of erythromycin residues in honey[j]. Food Sci, 2003, 24(2): 118 120. [8] Xiao WT, Chen B, Yao SZ, et al. Simultaneous determination of erythromycin propionate and base in human plasma by high performance liquid chromatography-electrospray mass spectrometry [J]. J Chromatogr B, 2005, (817): 153 158. [9],,. - [J]., 2013, (6): 198 202. Zhou L, Wu LM, Zhou JH. Determination of Erythromycin Residues in Honeycomb by High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry [J]. J Chin Inst Food Sci Technol, 2013, (6): 198 202. [10],,,. [J]., 2009, 28(11): 33 36. Hui YH, Cai YQ, Sheng XS, et al. A high performance uquid chromatographic method for the determination of erythromycin residues in aquatic products[j]. Chin J Anal Lab, 2009, 28(11): 33 36. [11] Edder P, Coppex L, Cominoli C. Analysis of erythromycin and oleandomycin residues in food by high-performance liquid chromatography with fluorometric detection [J]. Food Addit Contam, 2002, 19(3): 232 240. ( 责 任 编 辑 : 赵 静 )
1, : 93 作 者 简 介 惠 芸 华, 助 理 研 究 员, 主 要 研 究 方 向 为 水 产 品 质 量 安 全 管 理 水 产 品 中 渔 药 残 留 及 生 物 毒 素 检 测 技 术 和 渔 药 在 生 物 体 中 富 集 及 代 谢 规 律 E-mail: huiyunhuamaomao@126.com 于 慧 娟, 教 授, 主 要 研 究 方 向 为 水 产 品 质 量 安 全 管 理 水 产 品 中 渔 药 残 留 及 生 物 毒 素 检 测 技 术 和 渔 药 在 生 物 体 中 富 集 及 代 谢 规 律 E-mail: yuhuijuan607@sohu.com 转 基 因 食 品 安 全 专 题 征 稿 30, 2001 SCI 14 ISO 4 20 2014 4 2014 2 15 Email 投 稿 方 式 : www.chinafoodj.com Email jfoodsq@126.com 食 品 安 全 质 量 检 测 学 报 编 辑 部