利 用 天 敵 防 治 作 物 害 蟲 95 抗 蟲 基 因 轉 殖 作 物 之 研 發 林 鳳 琪 自 古 以 來 人 們 就 有 改 造 物 種 的 願 望, 拜 現 代 生 物 科 技 進 步 之 賜, 自 1983 年 開 始, 科 學 家 研 究 以 農 桿 菌 Ti 質 體 作 為 載 體, 將 外 來 的 基 因 轉 殖 入 植 物 染 色 體 中 讓 植 物 表 現 新 特 性 (Caplan et al., 1983 ), 因 此, 根 據 人 類 意 志 改 變 遺 傳 物 質, 而 創 造 更 高 價 值 的 動 植 物 品 種 已 不 再 是 遙 不 可 及 的 夢 想 二 十 年 來, 運 用 基 因 轉 殖 技 術 使 植 物 表 現 出 新 的 特 性, 歸 納 分 別 具 有 增 加 營 養 成 份 耐 殺 草 劑 抗 蟲 抗 病 雄 不 捻 顏 色 改 變 延 遲 老 化 抗 逆 境 等 因 為 能 提 高 產 量 與 可 利 用 性, 已 經 成 為 作 物 生 產 上 的 一 項 重 大 改 變 自 1994 年 美 國 第 一 個 基 因 轉 改 造 的 番 茄 上 市, 至 2004 年 全 球 栽 培 基 因 轉 殖 作 物 的 面 積 約 8100 萬 公 頃, 而 其 中 為 解 決 栽 培 作 物 上 害 蟲 問 題 而 種 植 抗 蟲 基 因 作 物 約 占 30% 科 學 家 將 不 同 的 基 因 轉 殖 入 作 物, 使 作 物 含 有 抗 蟲 物 質, 在 眾 多 研 究 發 展 中, 最 主 要 的 抗 蟲 物 質 可 分 為 : 蘇 力 菌 內 毒 素 凝 集 素 酵 素 抑 制 物 酵 素 等 類 別 抗 蟲 基 因 轉 殖 植 物 的 發 展, 使 植 物 依 靠 自 有 的 能 力 抵 禦 害 蟲, 與 傳 統 利 用 殺 蟲 劑 相 較, 改 種 抗 蟲 基 因 轉 殖 作 物 不 但 不 必 擔 心 農 藥 效 果 受 天 候 之 影 響, 反 而 因 害 蟲 得 以 控 制, 故 而 不 須 施 用 或 是 減 少 施 用 殺 蟲 藥 劑, 降 低 生 產 成 本, 也 減 少 附 近 水 源 或 食 物 中 以 及 土 壤 中 殺 蟲 劑 殘 存 的 毒 性, 有 助 於 自 然 環 境 生 態 之 維 護 與 發 展 台 灣 目 前 並 無 核 准 任 何 抗 蟲 基 因 轉 殖 作 物 栽 種 在 田 間, 但 衛 生 署 核 准 多 種 進 口 的 抗 蟲 基 因 轉 殖 食 品, 其 中 以 玉 米 為 最 大 宗, 均 為 單 獨 轉 殖 Bt 毒 蛋 白 或 同 時 具 耐 殺 草 劑 ( 嘉 磷 賽 固 殺 草 ) 基 因 的 玉 米 種 子, 作 為 畜 牧 業 用 飼 料 所 用,(http://food.doh.gov.tw/chinese/info/ gmo4.htm) 因 此, 社 會 大 眾 在 日 常 生 活 中 或 多 或 少 都 可 能 接 觸 基 因 轉 殖 食 品
96 作 物 蟲 害 之 非 農 藥 防 治 技 術 抗 蟲 基 因 轉 殖 植 物 發 展 現 況 農 業 試 驗 所 應 用 動 物 組 王 清 玲 博 士 等 曾 在 2004 年 撰 文, 詳 細 介 紹 全 球 抗 蟲 基 因 轉 殖 植 物 的 發 展 現 況, 因 此 本 文 不 再 詳 細 贅 述, 整 理 簡 述 目 前 發 展 概 況 一 蘇 力 菌 內 毒 素 蛋 白 在 四 大 抗 蟲 物 質 中, 首 先 被 成 功 研 發 之 植 物 為 具 蘇 力 菌 (Bacillus thuringiensis Berliner, Bt) 內 毒 素 的 轉 殖 作 物 (Hilder, 1987 ; Veack et al., 1987), 這 些 被 稱 為 Bt 植 物 是 目 前 唯 一 商 業 化 且 大 量 生 產 栽 培 的 抗 蟲 基 因 轉 殖 作 物, 主 要 是 防 治 鱗 翅 目 或 鞘 翅 目 害 蟲, 尤 其 是 Bt 玉 米 及 棉 花 為 大 宗, 用 以 防 治 玉 米 穗 蟲 甜 菜 夜 蛾 玉 米 螟 菸 草 夜 蛾 科 羅 拉 多 金 花 蟲 等 ( 王 等 2004) 用 於 轉 殖 蘇 力 菌 毒 蛋 白 的 品 系 包 括 cry1 cry2 cry3 及 cry4 等 基 因, cry1 對 鱗 翅 目 cry2 對 鱗 翅 目 與 雙 翅 目 cry3 對 鞘 翅 目 及 cry4 對 雙 翅 目 的 昆 蟲 有 毒 效 其 中 以 cry 1 應 用 最 普 遍, 又 再 分 為 多 種 不 同 品 系, 各 品 系 產 生 不 同 之 毒 蛋 白, 對 不 同 種 類 的 鱗 翅 目 昆 蟲 各 具 不 同 程 度 的 毒 性,cry1Ab 是 其 中 最 常 應 用 的 一 種 目 前 許 多 生 物 科 技 公 司 積 極 開 發 殖 入 雙 重 基 因, 使 作 物 同 時 表 現 兩 種 新 特 性, 如 Aventis 公 司 研 發 出 一 種 玉 米, 即 同 時 殖 入 蘇 力 菌 毒 蛋 白 cry9c 與 抗 嘉 磷 賽 (glyphosate) 殺 草 劑 的 基 因, 因 此 對 歐 洲 玉 米 螟 與 嘉 磷 賽 殺 草 劑 均 具 抗 性 孟 山 都 (Monsanto) 公 司 將 蘇 力 菌 毒 蛋 白 cry3a 基 因 及 抗 病 毒 基 因 同 時 殖 入 馬 鈴 薯, 使 其 同 時 可 以 抗 科 羅 拉 多 金 花 蟲 與 病 毒 病 (Potato Leaf Roll Virus 或 Potato Virus Y) (Cornell University, 2004) 台 灣 各 大 學 及 研 究 試 驗 單 位 多 位 研 究 人 員 也 致 力 於 開 發 本 土 的 Bt 植 物 轉 殖 或 改 良 Bt 菌 株 的 殺 蟲 效 果, 例 如 將 蘇 力 菌 臺 灣 分 離 株 E 9-11 之 cry1 Ac 基 因, 以 PCR 增 幅 等 方 法, 轉 殖 菌 株 成 功 表 現 出 130 kda 蛋 白 質 產 物,( 曾 等, 2002), 該 轉 殖 菌 對 小 菜 蛾 幼 蟲 效 果 較 遲 緩 但 後 續 具 良 好 的 殺 蟲 活 性 或 以 PCR 的 技 術, 對 蘇 力 菌 台 灣 分 離 株 D4-01, 進 行 cry 1Ac 型 毒 蛋 白 基 因 的 全 長 增 幅, 隨 後 接 入 載 體 yt&a, 成 為 質 體 p1acta1 並 以 電 穿 孔 法 送 入 無 質 體 之 蘇 力 菌 Cry - B 中, 得 到 轉 殖 的 蘇 力 菌 株 1Ac 5SB 此 一 轉 殖 具 良 好 的 殺 蟲 活 性, 處 理 擬
利 用 天 敵 防 治 作 物 害 蟲 97 尺 蠖 (Trichoplusia ni) 2 齡 幼 蟲 及 小 菜 蛾 (Plutella xylostella)3 齡 幼 蟲, 72 小 時 後, 可 達 80 ~ 90% 的 致 死 率 ( 陳, 2006) 此 外 在 芥 藍 菜 嫩 葉 上 篩 選 出 本 土 葉 表 生 菌 (Erwinia herbicola) 中 轉 殖 入 蘇 力 菌 (Bacillus thuringiensis) 基 因 cry1aa1 的 質 體, 得 到 的 轉 殖 株 總 蛋 白 質 抽 出 物, 在 濃 度 為 2.5 mg/ml 下, 餵 食 小 菜 蛾 三 齡 幼 蟲 72 小 時 後, 幾 乎 可 達 到 100 % 的 死 亡 率 使 Erwinia herbicola 不 但 具 有 抗 火 燒 (fire blight) 病 原 菌 Erwinia amylovora 的 生 長, 同 時 具 抗 蟲 的 效 果, 提 高 E. herbicola 在 經 濟 作 物 保 護 上 的 利 用 價 值 ( 林 等, 2002) 二 凝 集 素 (Lectins) 植 物 凝 集 素 重 要 作 用 之 一 就 是 避 免 植 物 受 到 其 他 動 物 或 昆 蟲 侵 害, 是 一 種 植 物 防 禦 蛋 白 (defensive protein) 或 稱 為 殺 蟲 蛋 白 (insecticidal protein) 尤 其 是 在 豆 類 種 子 中 普 遍 存 在 這 種 抗 蟲 物 質, 相 關 化 學 研 究 甚 為 廣 泛 且 深 入, 例 如 菜 豆 (Phaseolus vulgaris L.) 種 子 已 經 分 離 出 至 少 10 種 不 同 結 構 與 性 質 之 凝 集 素 Hamelryck et al., 1996) 昆 蟲 取 食 含 有 凝 集 素 成 份 的 植 物 後, 凝 集 素 與 昆 蟲 腸 道 尤 其 是 中 腸 壁 之 醣 蛋 白 結 合, 使 腸 道 的 生 理 代 謝 作 用 受 到 抑 制, 無 法 正 常 吸 收 營 養 成 分, 腸 壁 的 絨 毛 組 織 崩 解 破 壞, 引 發 病 灶, 導 致 消 化 道 內 細 菌 增 殖, 造 成 傷 害 中 毒 昆 蟲 會 出 現 進 食 停 滯 攝 食 減 少 體 重 無 法 正 常 增 加 等 現 象 目 前 研 究 最 多 的 的 凝 集 素 有 小 麥 凝 集 素 (wheat germ agglutinin, WGA) 基 因 及 或 自 石 蒜 科 (Amaryllidaceae) 雪 花 蓮 (snowdrop, Galanthus nivalis L.) 所 分 離 出 的 凝 集 素 (Snowdrop lectin, Galanthus nivalis agglutinin, GNA) 在 小 麥 凝 集 素 殖 入 玉 米 中, 可 以 防 治 歐 洲 玉 米 螟 (Ostrinia nubilabis (Hübner)) 與 鞘 翅 目 金 花 蟲 科 的 胡 瓜 斑 甲 蟲 (Diabrotica undecimpunctata Mannerheim )( Czapla and Lang, 1990) 雪 花 蓮 凝 集 素 殖 入 水 稻 菸 草 馬 鈴 薯 及 小 麥 等 作 物, 對 於 某 些 鱗 翅 目 害 蟲 如 蛾 類 與 同 翅 目 害 蟲 如 蚜 蟲 飛 蝨 類 有 抑 制 作 用 (Down et al. 1996; Fitches et al., 1997; Foissac et al., 2000; Gatehouse et al., 1997; Powell et al., 1993; Stoger et al., 1999) 中 央 研 究 院 研 究 人 員 自 抗 蟲 綠 豆 品 系 (VC6089A) 分 離 出 VrD1 的 防
98 作 物 蟲 害 之 非 農 藥 防 治 技 術 禦 素, 含 豐 富 的 半 胱 胺 酸 的 蛋 白 質, 亦 稱 為 VrCRP 是 目 前 唯 一 兼 具 抗 病 原 菌 及 抗 蟲 害 功 能 的 防 禦 素 ( 陳, 2005) 並 嘗 試 以 將 VrCRP 基 因 轉 殖 到 蕃 茄, 培 育 具 抗 病 蟲 害 的 新 品 種 蕃 茄 三 酵 素 抑 制 物 (Enzyme inhibitors) 具 抗 蟲 效 果 的 酵 素 抑 制 物 包 括 : 蛋 白 酶 抑 制 物 (Protease inhibitor), 澱 粉 酶 抑 制 物 (α-amylase inhibitor), 其 中 以 蛋 白 酶 抑 制 物 研 發 應 用 最 為 普 遍, 如 serine 蛋 白 酶 抑 制 物 質 的 胰 蛋 白 酶 抑 制 物 (trypsin inhibitor), 該 成 分 在 豆 類 種 子 中 尤 其 普 遍 昆 蟲 消 化 道 內 原 有 胰 蛋 白 酶 trypsin, 作 用 於 蛋 白 質, 分 解 蛋 白 質 成 小 分 子 生 鏈 (peptides), 再 經 peptidase 作 用, 生 成 氨 基 酸 類 此 蛋 白 酶 抑 制 物 質 被 昆 蟲 食 入 後, 蛋 白 酶 就 會 失 去 功 能, 以 致 蛋 白 質 無 法 分 解, 昆 蟲 無 法 吸 收 蛋 白 質 營 養 成 分 應 用 基 因 轉 殖 技 術, 使 作 物 具 有 生 成 此 抑 制 物 的 表 現 基 因, 作 物 即 具 有 抗 蟲 性 目 前 研 發 將 翼 豆 (winged bean) 或 大 豆 的 胰 蛋 白 酶 抑 制 基 因 轉 殖 入 水 稻, 可 以 抗 拒 二 化 螟 (Chilo suppresalis (Walker))(Duan et al., 1996; Mochizuki et al., 1999; Xu et al., 1996) 及 褐 飛 蝨 (Nilaparvata lugens Stal ) 幼 蟲 有 抑 制 作 用 大 麥 種 子 中 trypsin inhibitors 基 因 轉 殖 至 小 麥 (Triticum aestivum L.), 對 麥 蛾 (Sitotroga cerealella (Olivier)) 幼 蟲 的 生 長 有 抑 制 作 用 將 芥 菜 的 trypsin inhibitors 轉 殖 至 菸 草 芥 菜 (Arabidopsis) 油 菜 (oilseed rape), 對 於 小 菜 蛾 (Plutella xylostella (L.)) 夜 盜 蟲 (Mamestra brassicae (L.)) 及 Spodoptera littoralis (Boisduval) 有 不 同 程 度 之 毒 性 (De Leo et al., 2001) 轉 殖 綠 豆 的 trypsin inhibitors 馬 鈴 薯 植 株, 使 葉 片 含 有 TI 為 可 溶 性 蛋 白 質 約 1% 的 濃 度, 可 使 番 茄 淡 紋 褐 翅 夜 蛾 ( Lacanobia oleracea1 (L.)) 幼 蟲 體 重 減 輕, 各 齡 蟲 發 育 時 間 均 延 緩, 整 體 生 長 發 育 受 到 抑 制 作 用 台 灣 研 發 將 台 農 57 號 甘 藷 的 胰 蛋 白 酶 抑 制 物 殖 入 煙 草, 將 使 斜 紋 夜 盜 蟲 (Spodoptera litura (F.)) 幼 蟲 生 長 緩 慢, 體 重 與 存 活 率 均 顯 著 降 低 (Yeh et al., 1997) 除 嘗 試 將 甘 藷 的 抗 蟲 基 因 轉 殖 至 十 字 花 科 蔬 菜, 亦 將 此 抗 蟲 物 質 轉 殖 入 菊 花 上, 初 步 測 試 結 果 轉 殖 株 被 斜 紋 葉 盜 幼 蟲 取 的 食 面 積 較 對 照 小
利 用 天 敵 防 治 作 物 害 蟲 99 四 酵 素 ( Enzymes) 此 類 抗 蟲 物 質 主 要 包 括 : 幾 丁 質 分 解 酶 (Chitinase) 及 膽 固 醇 氧 化 酶 (Cholesterol oxidase) 若 植 物 會 產 生 幾 丁 質 分 解 酶, 被 昆 蟲 取 食 後, 對 其 外 骨 骼 部 分 作 用 較 輕 微, 主 要 毒 害 是 發 生 於 昆 蟲 中 腸 壁 對 圍 食 膜 的 破 壞 膽 固 醇 氧 化 酶 則 來 自 細 菌 中, 其 效 用 則 是 破 壞 昆 蟲 消 化 道 細 胞 的 細 胞 膜 目 前 自 菸 草 天 蛾 (Manduca Sexta (L.)) 體 內 分 離 出 三 種 幾 丁 酶, (Zhu et al., 2001), 其 中 一 種 轉 殖 於 馬 鈴 薯 後, 葉 片 含 有 該 成 份 對 於 象 鼻 蟲 ( Oryzaephilis mercator (Fauvel) 幼 蟲 及 番 茄 淡 紋 褐 眼 夜 蛾 幼 蟲 (Lacanobia oleracea (L.)) 有 致 死 效 果 (Wang et al., 1996; Gatehouse et al., 1997) 或 者 來 自 鏈 球 菌 Streptomyces albidoflavus 的 chitinolytic enzymes (endochitinase and chitobiosidase) 殖 入 番 茄, 可 以 減 緩 擬 尺 蠖 (Trichoplusia ni (Hübner)) 幼 蟲 生 長 速 度, 使 死 亡 率 增 加 (Gongora et al., 2001) 膽 固 醇 氧 化 酶 對 某 些 棉 花 鱗 翅 目 害 蟲, 如 菸 芽 夜 蛾 (Heliothis virescens (F.)), 美 洲 棉 鈴 蟲 (Helioverpa zea (Boddie)), 紅 鈴 蟲 (Pectinophora gossypiella (Saunders)), 亦 有 某 種 程 度 的 抑 制 功 效 (Greenplate et al. 1997) 未 來 展 望 作 物 抗 蟲 相 關 的 轉 殖 技 術 研 究 頗 多, 除 上 述 幾 種 較 為 顯 著 的 抗 蟲 成 分 外, 研 究 人 員 仍 不 斷 努 力 篩 選, 尋 求 其 他 可 能 的 化 學 抗 蟲 物 質 迄 今 商 業 化 大 面 積 栽 植 仍 侷 限 於 蘇 力 菌 毒 蛋 白 的 轉 殖 作 物 由 於 受 作 物 類 別 與 栽 種 面 積 的 限 制 或 有 不 利 於 人 畜 健 康 的 疑 慮 或 是 田 間 防 蟲 效 果 未 達 足 堪 應 用 階 段 等 因 素 限 制, 其 他 蘇 力 菌 毒 蛋 白 以 外 的 轉 殖 作 物, 目 前 尚 未 有 商 業 化 栽 植 的 品 種 生 產, 但 是 這 些 藉 由 轉 殖 技 術 而 表 現 不 同 抗 蟲 機 制 的 作 物, 在 研 究 人 員 孳 孳 努 力 下, 技 術 與 成 果 日 新 月 異, 未 來 的 發 展 仍 深 具 潛 力 除 化 學 抗 蟲 物 質, 根 據 傳 統 育 種 的 理 念, 篩 選 具 物 理 抗 蟲 機 制 的 植 物 基 因, 發 展 基 因 轉 植 技 術, 改 造 作 物
100 作 物 蟲 害 之 非 農 藥 防 治 技 術 使 其 增 加 葉 面 葉 毛 密 度 讓 害 蟲 無 法 棲 息 於 植 物 上, 或 者 增 加 葉 毛 的 高 度, 致 害 蟲 的 口 器 無 法 刺 吸 危 害 植 物, 甚 至 對 一 些 具 傳 播 病 毒 的 媒 介 昆 蟲 如 粉 蝨 或 薊 馬, 可 以 達 到 阻 斷 其 傳 播 植 物 病 毒 的 途 徑, 未 嘗 不 是 開 發 抗 蟲 基 因 轉 殖 植 物 的 另 一 方 向 基 因 轉 殖 作 物 固 然 帶 給 人 類 農 業 耕 作 上 的 便 利, 但 也 可 能 對 生 態 環 境 產 生 負 面 影 響, 例 如 抗 殺 草 劑 作 物 的 種 植, 若 導 致 某 種 類 型 殺 草 劑 過 量 使 用, 可 能 減 少 某 些 野 生 植 物 的 種 類, 如 這 種 改 變 使 某 些 昆 蟲 棲 所 與 食 物 減 少, 將 使 這 些 昆 蟲 族 群 面 臨 生 存 壓 力 或 是 面 臨 滅 絕 的 威 脅 基 於 對 於 改 性 活 生 物 體 (Living modified organism, 包 括 基 因 轉 殖 生 物 ) 可 能 對 地 球 上 生 物 資 源 有 不 利 影 響, 在 聯 合 國 生 物 多 樣 性 公 約 組 織 主 導 下, 全 體 締 約 國 於 2000 年 決 議 通 過 卡 塔 赫 納 生 物 安 全 議 定 書, 表 明 關 切 現 代 生 物 技 術 的 迅 速 拓 展, 可 能 對 生 物 多 樣 性 產 生 不 利 的 影 響, 約 定 於 發 展 生 物 技 術 的 同 時, 對 改 性 活 生 物 體 的 轉 移 處 理 與 使 用, 應 採 取 妥 善 的 安 全 措 施, 以 確 保 人 類 健 康 與 生 物 多 樣 性 之 安 全 此 議 定 書 的 通 過, 更 加 強 國 際 間 於 風 險 評 估 時 對 生 物 多 樣 性 影 響 之 重 視 我 國 在 2005 年 六 月 公 佈 的 基 因 轉 殖 植 物 隔 離 田 間 試 驗 管 理 辦 法 中, 亦 有 關 於 環 境 安 全 評 估 的 規 定, 對 於 提 出 評 估 申 請 評 估 的 程 序 與 方 法 等, 有 原 則 性 之 規 範 而 基 因 轉 殖 植 物 即 使 通 過 評 估 而 釋 出 種 植, 其 對 於 環 境 生 態 系 之 長 期 影 響, 仍 需 要 做 持 續 的 追 蹤 監 控, 一 旦 發 現 有 不 利 於 環 境 生 態 的 情 形, 立 即 採 取 管 制 或 禁 止 之 措 施, 才 可 能 使 基 因 轉 殖 植 物 對 環 境 產 生 破 壞 之 風 險 降 至 最 低 希 望 能 在 獲 取 現 代 科 技 所 衍 生 利 益 的 同 時, 盡 量 避 免 對 環 境 生 態 造 成 任 何 負 面 影 響, 基 因 轉 殖 作 物 方 可 永 續 之 經 營 參 考 文 獻 王 清 玲 林 鳳 琪 林 俊 義 2004 抗 蟲 基 因 轉 殖 植 物 之 類 別 與 其 對 環 境 中 昆 蟲 類 之 影 響 植 保 會 刊 :46: 181-209 林 志 輝 黃 文 忠 曾 經 洲 陳 良 築 2002 含 蘇 力 菌 毒 素 基 因 cry1aa1 之 轉 形 葉 表 生 菌 Erwinia herbicola 的 殺 蟲 活 性 與 質 體 留 存 之 分 析 植 保 會 刊 44:21-36 陳 韋 如 李 國 欽 高 穗 生 曾 耀 銘 曾 經 洲 2006 台 灣 蘇 力 菌 cry 1A c5 殺 蟲 基 因 選 殖 及 表 現 植 保 會 刊 48:17-30
利 用 天 敵 防 治 作 物 害 蟲 101 陳 慶 三 2005 抗 蟲 蛋 白 質 科 學 發 展 392: 12-15 曾 經 洲 高 穗 生 陳 良 築 翟 建 富 侯 豐 男 2002 蘇 力 菌 臺 灣 分 離 株 cry1ac 基 因 之 選 殖 及 表 現 測 試 植 保 會 刊 44:185-208 Caplan, A., L Herrera-Estrella, D. Inze, E. van Haute, and M. van Montagu. 1983. Introduction of genetic material into plant cells Agrobacterium tumefaciens, plant vector, genetic engineering. Science 222: 815-821. Cornell University. 2004. Bt-based insect resistance. Genetically Engineered Organisms. Public Issues Education. http:// www.comm.cornell.edu/gmo/traits/ Czapla, T. H., and, B. A. Lang.1990. Effect of plant lectins on the larval development of European corn borer and southern corn rootworm. J. Econ. Entomol. 83: 480-2485. De Leo, F., M. Bonade-Bottino, L. R. Ceco, R. Gallerani, and L. Jouanin. 2001. Effects of a mustard trypsin inhibitor expressed in different plants on three lepidopteran pests. Insect Biochemistry and Molecular Biology (UK) 31: 593-602. Down, R. E., A. M. R. Gatehouse, W. D. O. Hamilton, and J. A. Gatehouse. 1996. Snowdrop lectin inhibits development and decreases fecundity of the glasshouse potato aphid (Aulacorthum solani) when administered in vitro and via transgenic plants both in laboratory and glasshouse trials. J. Insect Physiol. 42: 1035-1045. Duan, X., X. Li., Q. Xue, M. Abo-El-Saad, D. Xu, and R. Wu. 1996. Transgenic rice plants harboring an introduced potato proteinase inhibiter II gene are insect resistant. Nature Biotechnol. 14: 494-498. Fitches, E., A. M. R. Gatehouse, and J. A. Gatehouse. 1997. Effects of snowdrop lectin (GNA) delivered via artificial diet and transgenic plants on the development of tomato moth (Lacanobia oleracea) larvae in laboratory and glasshouse trials. J. Insect Physiology (UK) 43: 727-739. Foissac, X., T. L. Nguyen, P. Christou, A. M. R. Gatehouse, and J. A. Gatehouse. 2000. Resistance to green leafhopper (Nephotettix virescens) and brown planthopper (Nilaparvata lugens) in transgenic rice expressing snowdrop lectin. J. Insect Physiol. 46: 573-583. Gatehouse, A. M., G. M. Davison, C. A. Newell, A. Merryweather, W. D. O. Hamilton, E. P. J. Burgess, R. J. C. Gilbert, and J. A. Gatehouse. 1997. Transgenic potato plants with enhanced resistance to the tomato moth, Lacanobia oleracea: growth room trials. Molecular Breeding: New Strategies in Plant Improvement 3: 49-63. Gongora, C. E., S. Wang, R. V. Barbehenn, and R. M. Broadway. 2001. Chitinolytic enzymes from Streptomyces albidoflavus expressed in tomato plants: effects on Trichoplusia ni. Entomol. Exp. Appl. 99: 193-204. Greenplate, J. T., D. R. Corbin, and J. P. Purcell. 1997. Cholesterol oxidase: potent boll weevil larvicidal and oostatic agent suitable for transgenic cotton development. Proceedings (Memphis, Tenn.: National Cotton Council of America) 2: 877-880. Hamelryck, T. W., F. Poortmans, A. Goossens, G. Angenon, M. van Montagu, L. Wyns, and R. Loris. 1996. Crystal structure of Arcelin-5, a lectin-like defense protein form Phaseolus vulgaris. J. Biological Chemistry 271: 32796-32802.
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