畜 牧 兽 医 学 报 蜂 王 浆 对 初 情 期 前 雌 性 日 本 大 耳 兔 生 长 发 育 的 影 响 许 宝 华 曾 志 将 江 西 农 业 大 学 动 物 科 学 技 术 学 院 南 昌 南 昌 大 学 实 验 动 物 科 学 部 南 昌 摘 要 本 研 究 旨 在 探 讨 蜂 王 浆 对 雌 性 日 本 大 耳 兔 初 情 期 前 的 生 长 发 育 影 响 将 只 日 龄 雌 性 日 本 大 耳 兔 随 机 分 为 高 剂 量 蜂 王 浆 组 低 剂 量 蜂 王 浆 组 以 及 对 照 组 每 组 只 高 低 剂 量 组 分 别 按 体 质 量 和 的 量 每 天 进 行 空 腹 灌 胃 蜂 王 浆 对 照 组 灌 胃 体 质 量 的 生 理 盐 水 每 周 同 一 时 间 空 腹 称 重 后 所 有 兔 子 耳 静 脉 取 血 后 各 组 处 死 只 摘 取 心 脏 左 侧 卵 巢 和 左 侧 子 宫 称 重 并 冷 冻 保 存 右 侧 卵 巢 和 右 侧 子 宫 采 用 放 免 法 测 定 血 清 中 雌 二 醇 促 卵 泡 素! 促 黄 体 素 孕 激 素 " 催 乳 素 和 睾 酮 # 的 含 量 用 实 时 荧 光 定 量 " 检 测 右 侧 卵 巢 中 雌 激 素 受 体 $%& 和 右 侧 子 宫 中 雌 激 素 受 体 $ %& 的 表 达 结 果 表 明 灌 胃 蜂 王 浆 后 对 照 组 兔 子 没 有 换 毛 现 象 低 剂 量 和 高 剂 量 组 分 别 有 ' 和 ' 的 兔 子 换 毛 蜂 王 浆 对 体 质 量 和 心 脏 左 侧 子 宫 左 侧 卵 巢 的 脏 器 系 数 无 显 著 影 响 试 验 组 血 液 中 浓 度 极 显 著 高 于 对 照 组 而 其 它 性 激 素 无 明 显 差 异 试 验 组 在 子 宫 和 在 卵 巢 的 表 达 量 均 低 于 对 照 组 对 照 组 与 高 剂 量 组 的 差 异 极 显 著 但 低 剂 量 组 与 对 照 组 和 高 剂 量 组 之 间 均 差 异 不 显 著 结 果 提 示 蜂 王 浆 能 提 高 兔 子 的 换 毛 率 但 对 心 脏 子 宫 和 卵 巢 的 生 长 发 育 无 明 显 影 响 蜂 王 浆 可 以 提 高 初 情 期 前 雌 性 日 本 大 耳 兔 血 清 中 雌 激 素 水 平 但 抑 制 子 宫 和 卵 巢 雌 激 素 受 体 的 表 达 关 键 词 蜂 王 浆 日 本 大 耳 兔 换 毛 率 脏 器 系 数 雌 激 素 受 体 中 图 分 类 号 文 献 标 识 码 & 文 章 编 号!"#$%!&'!## (!)*%++) */-* %+2+*3!"#$!%&!"'""!!' (" )*$#+,'$! ("'(",)##+01)415+$1(6*0/-(1(/1)4,/51(1171(/75/*,21,/35/6(* 181,/4$1(/7*4*1019+(15*..+(0.17/514-.15(#+5(0+)*/,71$*,15*..+(06151 5*/$,*,/*(1(/(51135/-40/75*..+(01*+3/0135/-4,/6/0135/-4 */(5/,35/-4*..+(06151*$++0(5*(1*+, 6+( 61+3(1 * : /7./61+3(+(1+3/0135/-4*,/6/0135/-48+*3*0(5+51041(+81,0*,+1 6*(1561+3(1 /7./61+3(6*0*$++0(5*(1+(1/(5/,35/-48+*3*0(5+&7(15 *04,*0$*0*$4,16*0/,1(175/$1*5*..+(*(1,181,0/7!" " *# 6151**,;1.5*+/+$$-/*00*#11*5(,17(-(15-0*,17(/8*56151/,1(1 75/$0+)0,*-3(15*..+(0+1*35/-4*(11)45100+//7(110(5/315114(/5*,4* +5+3(/8*5*10(5/315114(/5.1(* +5+3(-(15-061511(1(1.51*,(+$1# 收 稿 日 期 基 金 项 目 国 家 现 代 蜂 产 业 技 术 体 系 资 助 项 目 () 作 者 简 介 许 宝 华 ' 男 江 西 彭 泽 人 副 教 授 博 士 生 主 要 从 事 实 验 动 物 研 究 工 作 $*+,)-.*/'0+*/$ 通 讯 作 者 曾 志 将 $*+,.1100+*/$
畜 牧 兽 医 学 报 卷 "#1510-,(00/61(*(#1$/,(+35*(1/75*..+(0+*6*0' *' *7(15*051041(+81,#1516*0/+7,-11/7/(1./ 61+3( 1*5(-(15-0*/8*5/17++1(0/75*..+(#1/1(5*(+//7 6*00+3+7 +*(,+315+ (51*(135/-40(*(*(+/(5/,35/-4.-(/0+3+7+*( +715116*0/.01581+(1/(1501)/5$/10#11)45100+//7+(1 -(15-0*+(1/8*56151,/615+(51*(135/-40(*(*(+/(5/,#1510-,(0+ +*(1(*(5/*,21,*351*(,+$45/81(1$/,(+35*(1/7(15*..+(0.-(+(+/(+7,-11 (135/6(/7(11*5(-(15-0*/8*5+(+51*01(1015-$10(5/31,181,*++.+(1(1 1)45100+//710(5/315114(/5+-(15-0*/8*5/7*4*1019+(15*..+(0.17/514-.15( -$#&)5/*,21,*4*1019+(15*..+(0$/,(+35*(1/53*/17++1(10(5/315114(/5 我 国 是 世 界 第 一 养 蜂 大 国 养 蜂 生 产 出 的 蜂 王 浆 蜂 花 粉 蜂 胶 等 产 品 已 在 畜 牧 生 产 中 应 用 蜂 王 浆 又 称 为 蜂 皇 浆 或 蜂 乳 它 是 日 龄 工 蜂 王 浆 腺 和 上 颚 腺 分 泌 的 一 种 乳 白 色 或 淡 黄 色 浆 状 物 质 是 工 蜂 用 来 饲 喂 蜂 王 和 蜜 蜂 幼 虫 的 一 种 高 营 养 食 物 蜂 王 浆 包 含 蛋 白 质 糖 类 脂 肪 酸 丰 富 的 维 生 素 矿 物 质 和 多 种 活 性 物 质 具 有 非 常 高 的 营 养 价 值 而 且 所 含 有 的 微 量 生 物 活 性 物 质 对 动 物 生 殖 系 统 的 发 育 也 有 一 定 的 影 响 但 蜂 王 浆 对 家 兔 的 动 物 生 殖 系 统 的 发 育 是 否 有 影 响 目 前 还 未 见 报 道 本 研 究 以 初 情 期 前 的 雌 性 日 本 大 耳 兔 为 研 究 对 象 研 究 不 同 浓 度 的 蜂 王 浆 对 初 情 期 前 雌 性 日 本 大 耳 兔 生 长 换 毛 血 清 中 性 激 素 水 平 以 及 对 卵 巢 雌 激 素 受 体 子 宫 雌 激 素 受 体 表 达 的 影 响 以 便 为 研 究 蜂 王 浆 对 生 殖 功 能 的 影 响 提 供 基 础 数 据 材 料 与 方 法. 实 验 材 料 实 验 动 物 和 材 料 只 日 龄 的 健 康 雌 性 日 本 大 耳 兔 体 质 量 3 由 南 昌 大 学 实 验 动 物 科 学 部 提 供 新 鲜 蜂 王 浆 由 江 西 农 业 大 学 动 物 科 学 技 术 学 院 蜜 蜂 研 究 所 提 供 主 要 试 剂 雌 二 醇 促 卵 泡 素! 促 黄 体 素 睾 酮 # 孕 激 素 " 和 催 乳 素 " 放 射 免 疫 试 剂 盒 由 北 京 华 英 生 物 技 术 研 究 所 生 产 焦 磷 酸 二 乙 酯 "&$150/ 公 司 美 国 #5+;/, 试 剂 8+(5/31 公 司 美 国 逆 转 录 试 剂 盒 15$1(*0 公 司 加 拿 大 " +) #5*031 中 国! 511&$150/ 公 司 美 国 主 要 仪 器 &00(1$' 型 " 仪 & 公 司 美 国 核 酸 蛋 白 分 析 仪 "*5$*+*+/ (1( 公 司 英 国 高 速 冷 冻 离 心 机!+3$* 公 司 美 国 5 全 自 动 放 免 计 数 仪 中 国 科 技 大 学 实 业 总 公 司 中 国. 试 验 方 法 动 物 分 组 和 饲 养 将 只 日 龄 雌 性 日 本 大 耳 兔 随 机 分 为 高 剂 量 蜂 王 浆 组 低 剂 量 蜂 王 浆 组 以 及 对 照 组 每 笼 只 饲 养 于 南 昌 大 学 实 验 动 物 科 学 部 开 放 环 境 中 每 天 饲 喂 充 足 的 基 础 日 粮 配 方 为 豆 粕 玉 米 草 粉 麦 麸 食 盐 和 的 微 量 元 素 自 由 饮 水 灌 胃 每 天 早 上 兔 子 分 别 空 腹 灌 胃 体 质 量 和 的 新 鲜 蜂 王 浆 对 照 组 灌 胃 体 质 量 的 生 理 盐 水 每 周 早 上 同 一 时 间 空 腹 称 重 血 清 性 激 素 和 脏 器 系 数 测 定 兔 子 灌 胃 至 第 天 次 日 上 午 对 每 只 实 验 兔 称 量 体 质 量 后 耳 静 脉 取 血 离 心 获 得 血 清 分 别 按 放 免 检 测 试 剂 盒 说 明 书 测 定 血 清 中 #"" 和! 的 浓 度 采 血 后 每 组 处 死 只 兔 子 迅 速 取 右 侧 子 宫 和 右 侧 卵 巢 于 液 氮 中 速 冻 再 转 入 < = 冰 箱 中 保 存 同 时 分 离 心 脏 左 侧 子 宫 和 左 侧 卵 巢 剔 除 组 织 黏 附 的 脂 肪 和 筋 膜 并 用 滤 纸 吸 干 表 面 体 液 后 立 即 称 重 计 算 各 脏 器 系 数 脏 器 质 量 体 质 量 > 子 宫 和 卵 巢 $%& 的 表 达 检 测 用 #5+;/, 进 行 子 宫 和 卵 巢 组 织 的 总 %& 提 取 合 成 子 宫 和 卵 巢 引 物 并 进 行 扩 增 其 引 物 序 列 分 别 为 #&## #&& &&&######## ##&&&##&# #&#&&& 以 -). 为 内 参 其 引 物 序 列 为 #&&&&###&
期 许 宝 华 等 蜂 王 浆 对 初 情 期 前 雌 性 日 本 大 耳 兔 生 长 发 育 的 影 响 &#&###&#& 引 物 均 由 北 京 三 博 远 志 生 物 公 司 合 成 逆 转 录 反 应 体 系 为 %&3 引 物 >51*(+/.-715 %*01++.+(/5%#"181501#5* 05+4(*01" 水 至 %& 合 成 的 反 应 条 件 为 = $+ = $+' = $+?" 反 应 条 件 为 = 预 变 性 $+ = 变 性 0 = 退 火 0' = 延 伸 0 个 循 环 反 应 结 束 后 立 即 进 行 熔 解 曲 线 分 析 数 据 处 理 与 统 计 分 析 采 用!"!! 软 件 差 异 显 著 性 多 重 比 较 方 法 对 试 验 结 果 进 行 分 析 结 果. 蜂 王 浆 对 日 本 大 耳 兔 换 毛 的 影 响 从 表 可 知 灌 胃 蜂 王 浆 期 间 对 照 组 兔 子 被 毛 光 泽 颜 色 无 改 变 未 见 脱 毛 低 剂 量 组 和 高 剂 量 组 在 灌 胃 蜂 王 浆 后 出 现 明 显 的 换 毛 现 象 换 毛 率 分 别 为 ' 和 ' 与 对 照 组 相 比 差 异 极 显 著 由 此 可 知 蜂 王 浆 对 兔 子 换 毛 作 用 明 显. 蜂 王 浆 对 兔 子 体 质 量 和 脏 器 系 数 的 影 响 由 图 可 知 试 验 组 与 高 低 剂 量 组 每 周 称 量 的 体 质 量 值 没 有 显 著 差 异 从 表 可 知 连 续 灌 胃 后 高 低 剂 量 组 与 对 照 组 之 间 的 心 脏 左 侧 子 宫 以 及 左 侧 卵 巢 个 脏 器 系 数 差 异 不 明 显 表 各 组 换 毛 率 的 比 较 /0#+)!+!1#+!%1# 样 本 含 量 只 换 毛 只 数 只 换 毛 率 5/-4 /,(+3-$.15 /,(+35*(1 对 照 组 & 低 剂 量 组 ' 高 剂 量 组 ' 表 中 同 列 数 字 有 相 同 肩 标 字 母 表 示 差 异 不 显 著 不 同 小 写 字 母 表 示 差 异 显 著 不 同 大 写 字 母 表 示 差 异 极 显 著 下 同 #18*,-10+(10*$1,+16+((10*$10-41505+4(*81/0+3+7+ *(+71511(1+7151(,1(150++*(10+3+7+*( +715110(1+7151(*4+(*,,1(150++*(11)(51$1,0+3+7+*(+715110#10*$1*0.1,/6 图 蜂 王 浆 灌 胃 对 体 质 量 的 影 响 (+1.!&$+1% 表 各 组 脏 器 系 数 比 较 /0#+)!#1!++!)!1&+#!1#) 5/-4 样 本 含 量 心 脏 1*5( 左 侧 子 宫 17(-(15-0 左 侧 卵 巢 17(/8*5 对 照 组 '' * ' * * 低 剂 量 * * * 高 剂 量 * * *. 蜂 王 浆 对 兔 子 性 激 素 水 平 的 影 响 由 表 可 知 高 低 剂 量 组 血 清 中 浓 度 都 极 显 著 高 于 对 照 组 但 两 剂 量 组 之 间 差 异 不 显 著 而 高 低 剂 量 组 和 对 照 组 之 间 的 其 他 种 性 激 素 浓 度 差 异 均 不 显 著. 子 宫 和 卵 巢, 的 表 达 由 表 可 知 与 对 照 组 相 比 随 着 剂 量 增 加 试 验 组 子 宫 和 卵 巢 $%& 的 表 达 呈 下 降 趋 势 且 对 照 组 与 高 剂 量 组 的 差 异 极 显 著 但 对 照 组 与 低 剂 量 组 间 低 剂 量 组 和 高 剂 量 组 间 均 差 异 不 显 著 讨 论 家 兔 存 在 生 理 性 换 毛 现 象 分 为 年 龄 性 换 毛 和 季 节 性 换 毛 仔 兔 出 生 后 的 日 龄 间 会 发 生 年 龄 性 换 毛 换 毛 受 多 种 因 素 的 影 响 有 研 究 表 明 雌 激 素 可 以 影 响 生 物 毛 发 周 期 高 浓 度 的 雌 激 素 使 毛 囊 表 皮 生 长 因 子 受 体 水 平 升 高 而 表 皮 生 长 因 子 受 体 介 导 表 皮 生 长 因 子 可 以 使 毛 发 生 长 受 抑 制
畜 牧 兽 医 学 报 卷 表 对 性 激 素 水 平 的 影 响 /)!%#!)+!) 对 照 组 低 剂 量 组 高 剂 量 组 5/-4 样 本 含 量 只 43$ < & ' #3$ < '' * ''' * * "3$ < ' * ' * *! $$ < ''' * ''' * '' * $$ < '' * * ' * " 3$ < ' * ' * ' * 表 子 宫 和 卵 巢, 的 表 达 /#)+!+!#)!&,+!# 5/-4 样 本 含 量 只 雌 激 素 受 体 雌 激 素 受 体 对 照 组 & ' & 低 剂 量 组 & & 高 剂 量 组 ' 毛 发 直 径 缩 小 毛 发 断 裂 生 长 期 毛 囊 呈 现 退 行 期 改 变 本 研 究 的 实 验 兔 处 于 年 龄 性 换 毛 期 间 在 蜂 王 浆 灌 胃 的 试 验 组 中 日 本 大 耳 兔 分 别 有 ' 和 ' 的 兔 子 提 前 出 现 明 显 的 换 毛 现 象 这 可 能 与 蜂 王 浆 中 含 有 雌 二 醇 有 关 本 研 究 发 现 试 验 组 血 清 中 雌 激 素 水 平 升 高 这 进 一 步 证 实 蜂 王 浆 对 家 兔 换 毛 的 影 响 可 能 与 蜂 王 浆 中 雌 激 素 的 水 平 有 关 蜂 王 浆 的 成 分 复 杂 具 有 非 常 高 的 营 养 价 值 而 且 各 种 营 养 成 分 比 例 较 为 均 衡 具 有 促 进 生 长 的 作 用 有 文 献 报 道 蜂 王 浆 能 促 进 培 养 细 胞 的 生 长 然 而 本 试 验 检 测 了 蜂 王 浆 对 兔 子 脏 器 生 长 发 育 的 影 响 结 果 发 现 蜂 王 浆 并 没 有 对 兔 子 脏 器 系 数 产 生 明 显 的 影 响 这 说 明 蜂 王 浆 的 雌 激 素 水 平 在 安 全 范 围 内 这 与 郭 芳 彬 曾 指 出 蜂 王 浆 中 性 激 素 的 含 量 是 痕 量 的 距 离 发 挥 人 的 生 理 活 性 的 剂 量 甚 远 的 认 识 是 一 致 的 雌 激 素 是 通 过 其 受 体 介 导 的 蜂 王 浆 中 高 水 平 的 雌 激 素 不 能 起 到 使 家 兔 脏 器 质 量 增 加 的 作 用 可 能 与 雌 激 素 受 体 的 表 达 受 到 影 响 有 关 雌 激 素 存 在 和 两 种 受 体 在 女 性 繁 殖 器 官 中 和 主 要 存 在 于 卵 巢 及 乳 房 中 而 子 宫 中 以 为 主 本 试 验 发 现 蜂 王 浆 中 的 雌 激 素 未 能 使 子 宫 和 卵 巢 质 量 增 加 却 出 现 了 和 $%& 的 表 达 下 降 这 表 明 尽 管 蜂 王 浆 中 含 有 较 高 水 平 的 雌 激 素 但 其 中 也 可 能 含 有 抑 制 和 $%& 表 达 的 成 份 受 体 水 平 的 下 降 限 制 了 雌 激 素 的 作 用 使 雌 激 素 的 某 些 作 用 控 制 在 一 定 范 围 内 目 前 蜂 王 浆 对 成 年 动 物 作 用 的 研 究 比 较 ' 多 但 对 未 成 熟 的 哺 乳 动 物 作 用 报 道 很 少 本 试 验 是 针 对 蜂 王 浆 对 初 情 期 前 日 本 大 耳 兔 影 响 的 首 次 研 究 结 果 表 明 一 定 浓 度 的 蜂 王 浆 可 以 促 使 生 理 性 换 毛 提 前 和 换 毛 率 的 提 高 促 使 日 本 大 耳 兔 血 液 中 雌 激 素 水 平 上 升 但 却 抑 制 子 宫 和 卵 巢 雌 激 素 受 体 的 表 达 然 而 这 些 作 用 结 果 的 具 体 机 理 还 不 清 楚 后 续 的 试 验 将 深 入 探 讨 蜂 王 浆 对 未 成 熟 哺 乳 动 物 的 作 用 机 理 以 便 更 科 学 地 揭 示 蜂 王 浆 对 哺 乳 动 物 生 长 发 育 的 作 用 机 制 为 更 有 效 的 利 用 蜂 王 浆 提 供 理 论 依 据 结 论 一 定 剂 量 的 蜂 王 浆 能 提 高 初 情 期 前 日 本 大 耳 兔 的 换 毛 率 但 对 心 脏 子 宫 和 卵 巢 的 生 长 发 育 无 明 显 影 响 蜂 王 浆 可 以 提 高 初 情 期 前 雌 性 日 本 大 耳 兔 血 清 中 雌 激 素 水 平 同 时 还 可 以 抑 制 子 宫 $%& 和 卵 巢 $%& 的 表 达 参 考 文 献 陈 秀 芝 : 蜂 王 浆 可 促 进 肉 仔 鸡 生 长 中 国 家 禽 : 曾 志 将 刘 三 凤 潘 珂 等 : 蜂 花 粉 蜂 胶 对 肉 鸡 生 产 性 能 及 免 疫 性 能 的 影 响 中 国 农 业 科 学 ''': 张 国 锋 刁 其 玉 屠 焰 等 : 蜂 花 粉 及 其 多 糖 对 犊 牛 体 增 质 量 物 质 消 化 与 血 清 指 标 的 影 响 : 畜 牧 兽 医 学 报 ': 许 宝 华 谢 宪 兵 康 路 妹 等 : 蜂 王 浆 提 高 动 物 繁 殖 性
期 许 宝 华 等 蜂 王 浆 对 初 情 期 前 雌 性 日 本 大 耳 兔 生 长 发 育 的 影 响 ' 能 的 研 究 进 展 畜 牧 与 饲 料 科 学 曾 志 将 养 蜂 学 第 版 北 京 中 国 农 业 出 版 社 陈 华 生 高 育 仁 黄 文 忠 等 : 蜂 王 浆 对 提 高 白 鹇 繁 殖 能 力 的 试 验 初 报 蜜 蜂 杂 志 ' ' 孙 亮 先 林 春 玉 陈 朝 阳 等 : 饲 喂 蜂 王 浆 对 果 蝇 繁 殖 力 影 响 的 研 究 中 国 蜂 业 王 立 新 杜 娟 张 树 杰 等 : 饲 喂 胡 萝 卜 和 蜂 王 浆 对 黄 粉 虫 繁 殖 力 的 影 响 昆 虫 知 识 #@%#@% #1.+/,/3+*,*(+/0/710(5/ 310/0+ :*)$!,' : &% # &@ # 1(*71(0/7 % *10(5/310/ -$* *+57/,+,1 "" /" 01 苏 哗 敬 璞 丁 晓 雯 等 蜂 王 浆 的 化 学 成 分 生 理 活 性 及 应 用 农 牧 产 品 开 发 '!&&& &"&@%& A!511+3/7.+/,/3+*,*(+8+(+1045101(+/1.11*4+0 $1,+7 15*5/*,21,&! 郭 芳 彬 走 出 蜂 王 浆 会 引 起 性 早 熟 的 误 区 蜜 蜂 杂 志 詹 晓 庆 王 鲜 忠 张 家 骅 雌 激 素 受 体 和 雌 性 生 殖 研 究 进 展 动 物 医 学 进 展!&B& @#@&@ 1(* -*(+(*(+81**,0+0 /710(5/31 5114(45/(1+0+ 5*(/8*5%$! ' 曹 均 史 伯 伦 张 艺 圃 等 蜂 王 浆 活 性 成 分 的 研 究 连 载 性 激 素 的 研 究 农 业 新 技 术 ' '!% B #145/-(+815104/ 0107/,/6+35/*,21,(51*($1(*$++0(151/5*, /5+(5*$-0-,*5,+(/ 45/310(15/1(51*(1 &6*00+ 1610$*%'!% &&!& %16*445/*(/ 1*15145/-(+814157/5$*1+0114-0+35/ *,21,+/$4*5+0/ 6+(1?-+1/5+/+3/*/ (5/4+ $*% B #&B#!!145/-(+8151 04/010+1610(51*(16+(1/5+51*0+3/010 /75/*,21, $*%' 编 辑 郭 云 雁