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ICS 07.080 C 04 SZDB/Z 126 2015 深 圳 市 标 准 化 指 导 性 技 术 文 件 SZDB/Z 126-2015 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 建 设 与 管 理 规 范 2015-02 -06 发 布 2015-03 -01 实 施 I 深 圳 市 市 场 监 督 管 理 局 发 布

目 次 前 言... III 1 范 围...1 2 规 范 性 引 用 文 件...1 3 术 语 和 定 义...1 4 生 命 伦 理...4 5 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 建 设...4 6 机 构 设 置...5 7 操 作 规 范...6 8 安 全 管 理...10 附 录 A( 资 料 性 附 录 ) 供 者 健 康 信 息 采 集...16 附 录 B( 资 料 性 附 录 ) 人 类 间 充 质 干 细 胞 样 本 编 码 规 则...17 附 录 C( 资 料 性 附 录 ) 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 整 体 的 操 作 流 程...18 参 考 文 献...19 II

前 言 本 指 导 性 技 术 文 件 按 GB/T 1.1 2009 给 出 的 规 则 起 草 本 标 准 由 深 圳 市 经 济 贸 易 和 信 息 化 委 员 会 归 口 本 标 准 负 责 起 草 单 位 : 深 圳 华 大 基 因 研 究 院 本 标 准 主 要 起 草 人 : 周 欣 张 勇 张 曦 冀 旭 燕 舞 林 洁 璇 张 家 文 黄 海 军 彭 冬 秀 孙 长 斌 杨 阳 黎 苑 杰 本 标 准 为 首 次 发 布 III

人 类 间 充 质 干 细 胞 库 建 设 与 管 理 规 范 1 范 围 本 标 准 规 定 了 人 体 来 源 间 充 质 干 细 胞 库 相 关 的 生 命 伦 理 间 充 质 干 细 胞 库 建 设 机 构 设 置 操 作 规 范 和 安 全 管 理 的 基 本 方 法 本 标 准 适 用 于 人 体 来 源 间 充 质 干 细 胞 库 的 建 设 与 管 理 规 范 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件, 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件, 其 最 新 版 本 ( 包 括 所 有 修 改 单 ) 适 用 于 本 文 件 GB/T 1.1-2009 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分 : 标 准 的 结 构 和 编 写 GB 2894-2008 安 全 标 志 及 其 使 用 导 则 GB/T 5458-2012 液 氮 生 物 容 器 GB 7000.2-2008 应 急 照 明 灯 具 安 全 要 求 GB/T 12905-2000 条 码 术 语 GB 13690-2009 化 学 品 分 类 和 危 险 性 公 示 通 则 GB 15258 化 学 品 安 全 标 签 编 写 规 定 GB/T 17172-1997 417 条 码 GB/T 18347-2001 128 条 码 GB/T 18883-2002 室 内 空 气 质 量 标 准 GB 19489-2008 实 验 室 生 物 安 全 通 用 要 求 GB 19652-2005 放 电 灯 ( 荧 光 灯 除 外 ) 安 全 要 求 GB/T 20269-2006 信 息 安 全 技 术 信 息 系 统 安 全 管 理 要 求 GB/T 22278-2008 良 好 实 验 室 规 范 原 则 GB/T 27025-2008 检 测 和 校 准 实 验 室 能 力 的 通 用 要 求 GB 50016-2006 建 筑 设 计 防 火 规 范 GB 50034-2004 建 筑 照 明 设 计 标 准 GB 50052-2009 供 配 电 系 统 设 计 规 范 GB 50140-2005 建 筑 灭 火 器 配 置 设 计 规 范 GB 50346-2012 实 验 室 建 筑 技 术 规 范 GB 50351-2005 储 罐 区 防 火 堤 设 计 规 范 AQ 3013-2008 危 险 化 学 品 从 业 单 位 安 全 标 准 化 通 用 规 范 CNAS-CL05-2009 实 验 室 生 物 安 全 认 可 准 则 MH/T 1019-2005 民 用 航 空 危 险 品 运 输 文 件 WS/T 224-2002 真 空 采 血 管 及 其 添 加 剂 WHO Third Edition 实 验 室 生 物 安 全 手 册 3 术 语 和 定 义 1

下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 指 导 性 技 术 文 件 : 3.1 干 细 胞 库 stem cell bank 用 于 储 存 不 同 来 源 干 细 胞 的 专 门 机 构 3.2 样 本 specimen 在 特 定 时 间 从 受 试 者 或 捐 献 者 中 采 集 的 器 官 组 织 等 标 本 3.3 接 收 区 receiving zone 样 本 到 达 时 用 于 初 步 检 查 清 点 接 收 或 样 本 转 移 前 进 行 包 装 清 点 的 缓 冲 区 域 3.4 冷 藏 区 refrigerated storage zone 为 样 本 提 供 冷 藏 储 存 环 境 (2 ~8 ) 或 冷 藏 设 备 ( 温 度 为 2 ~8 ) 的 区 域 3.5 冷 冻 区 frozen storage zone 为 样 本 提 供 0 以 下 储 存 环 境 或 设 备 的 区 域 根 据 低 温 程 度 的 不 同, 可 分 为 普 通 低 温 冷 冻 储 存 区 ( 4 低 温 设 备 区 ) 超 低 温 冷 冻 储 存 区 ( 86 低 温 设 备 区 ) 深 低 温 冷 冻 储 存 区 ( 135 以 下 低 温 设 备 区 ) 3.6 细 胞 制 备 cell preparation 细 胞 样 本 经 过 一 系 列 规 范 处 理 达 到 入 库 标 准 的 过 程 3.7 质 量 控 制 quality control 为 达 到 入 库 质 量 要 求 所 采 取 的 操 作 技 术 和 活 动 3.8 样 本 编 码 sample coding 根 据 编 码 规 则 对 样 本 进 行 编 号 的 过 程 3.9 细 胞 分 离 cell isolation 从 机 体 组 织 或 器 官 中 分 离 出 单 个 细 胞 的 过 程 2

3.10 原 代 培 养 primary culture 直 接 从 机 体 取 下 组 织 器 官 或 细 胞 后 立 即 进 行 的 培 养 过 程 3.11 传 代 培 养 subculture 当 原 代 培 养 成 功 后, 随 着 培 养 时 间 的 延 长 和 细 胞 不 断 分 裂, 为 避 免 发 生 接 触 性 抑 制, 将 培 养 物 分 割 成 小 的 部 分, 重 新 接 种 到 新 的 培 养 器 皿 ( 瓶 ) 的 培 养 基 中 进 行 的 培 养 过 程 3.12 细 胞 冻 存 cell cryopreservation 使 细 胞 暂 时 脱 离 生 长 状 态 而 保 存 其 细 胞 特 性 的 方 法 3.13 细 胞 复 苏 cell thawing 使 细 胞 从 脱 离 生 长 状 态 重 新 获 得 生 长 活 力 的 方 法 3.14 冻 存 管 tube 在 细 胞 冻 存 过 程 中 用 于 储 存 细 胞 的 特 殊 密 封 的 无 菌 小 管 3.15 液 氮 罐 liquid nitrogen container 用 于 储 存 细 胞 的 一 种 深 低 温 冷 冻 设 备 3.16 生 物 危 险 biohazard 因 生 物 因 子 导 致 的 直 接 或 潜 在 的 危 险 3.17 实 验 室 生 物 安 全 laboratorial biosafety 实 验 室 的 生 物 安 全 条 件 和 状 态 不 低 于 允 许 水 平, 并 符 合 相 关 法 规 和 标 准 对 实 验 室 生 物 安 全 责 任 的 要 求, 避 免 实 验 室 人 员 来 访 人 员 社 区 及 环 境 受 到 不 可 接 受 的 损 害 3.18 化 学 安 全 chemical safety 使 用 化 学 物 品 时 遵 守 一 定 的 规 范 并 有 相 应 的 紧 急 预 案 应 对 事 故, 防 止 危 险 化 学 品 事 故 的 发 生 并 将 事 故 的 影 响 或 损 失 降 至 最 低 3.19 3

知 情 同 意 informed consent 具 有 完 全 民 事 行 为 能 力 的 自 然 人, 在 充 分 获 取 信 息 并 准 确 理 解 其 内 容 后, 作 出 参 与 研 究 的 决 定, 应 签 署 知 情 同 意 书, 一 式 两 份 此 决 定 不 受 恐 吓 利 诱 或 其 他 不 当 行 为 的 影 响 3.20 生 命 伦 理 bioethics 指 生 命 科 学 和 卫 生 保 健 领 域 内 人 类 行 为 的 道 德 规 范 和 原 则 3.21 伦 理 审 查 委 员 会 ethical review committee 负 责 对 科 学 研 究 中 涉 及 的 伦 理 道 德 问 题 进 行 评 估 和 审 查 的 专 门 组 织 3.22 科 学 审 查 委 员 会 scientific review committee 负 责 对 生 物 样 本 采 集 和 使 用 的 方 案 进 行 科 学 性 审 查 的 专 门 组 织 3.23 生 物 安 全 评 审 委 员 会 institutional biosafety committee 负 责 制 定 生 物 安 全 政 策 和 安 全 操 作 规 范 的 专 门 组 织 4 生 命 伦 理 4.1 知 情 同 意 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 工 作 人 员 应 当 对 风 险 及 收 益 进 行 有 效 评 估, 确 保 样 本 提 供 者 或 其 近 亲 属 对 项 目 信 息 充 分 知 情 形 成 全 面 和 准 确 的 认 识, 自 愿 做 出 是 否 同 意 的 决 定, 并 签 署 知 情 同 意 书 4.2 隐 私 保 护 措 施 研 究 人 员 医 务 人 员 应 当 对 样 本 提 供 者 的 个 人 信 息 采 取 保 密 措 施, 若 确 需 提 供, 需 要 提 交 科 学 委 员 会 批 准 后 方 可 提 供 违 反 法 律 规 定 的, 应 依 法 追 究 民 事 责 任 行 政 责 任 和 刑 事 责 任 4.3 安 全 保 护 研 究 人 员 或 相 关 医 务 人 员 在 获 取 样 本 的 过 程 中 一 般 为 最 小 风 险, 不 增 加 样 本 提 供 者 的 额 外 风 险 避 免 为 取 样 本 而 置 样 本 提 供 者 于 危 险 之 中 5 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 建 设 5.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 场 地 建 设 及 要 求 4

5.1.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 场 地 选 择 要 符 合 干 细 胞 制 备 实 验 室 以 及 干 细 胞 长 久 低 温 保 存 的 要 求 5.1.2 符 合 人 类 间 充 质 干 细 胞 实 验 室 要 求, 是 指 干 细 胞 制 备 过 程 中 无 菌 无 病 毒 无 生 物 化 学 物 质 无 尘 和 无 噪 音 等 污 染 如 垃 圾 场 旁 医 院 废 弃 物 旁 道 路 旁 和 闹 市 中 等 地 方 不 能 作 为 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 建 设 场 地 5.1.3 符 合 长 久 保 存 要 求, 是 指 不 能 频 繁 更 换 保 存 场 地, 因 此 将 要 进 行 拆 迁 的 建 筑, 易 发 生 自 然 灾 害 ( 如 易 发 生 洪 水 泥 石 流 海 啸 和 火 山 爆 发 等 ) 的 地 方 不 能 作 为 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 建 设 场 地 5.1.4 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 建 设 设 计 应 符 合 GB 19489-2008 的 规 定, 功 能 区 域 应 至 少 包 括 样 本 接 收 区 样 本 预 处 理 区 干 细 胞 培 养 区 干 细 胞 操 作 区 干 细 胞 冻 存 区 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 和 医 疗 废 弃 物 处 理 区 等 区 域, 每 个 区 域 应 标 识 洁 净 和 风 险 级 别 5.1.5 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 办 公 区 与 实 验 区 之 间 应 有 墙 壁 进 行 物 理 隔 开, 工 作 人 员 由 安 全 通 道 进 入 实 验 区, 办 公 区 域 的 通 风 系 统 应 与 实 验 区 域 的 通 风 系 统 独 立 分 开, 以 确 保 办 公 区 域 的 空 气 质 量 不 受 实 验 区 域 空 气 的 影 响 5.1.6 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 建 设 应 由 具 有 实 验 室 建 设 资 质 的 工 程 公 司 进 行 建 设, 建 设 过 程 中 所 使 用 工 人 应 为 上 岗 员 工, 不 得 随 意 更 换 建 设 人 员 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 建 设 所 用 材 料 应 符 合 要 求, 达 到 防 强 酸 防 强 碱 防 震 等 效 果 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 建 设 完 成 后, 各 功 能 区 域 的 洁 净 级 别 应 由 专 业 的 检 测 人 员 进 行 检 测 并 出 具 合 格 证 明 5.2 实 验 室 设 施 与 设 备 5.2.1 空 调 与 通 风 系 统 5.2.1.1 通 风 系 统 应 符 合 GB/T 18883 的 规 定, 气 流 由 清 洁 空 间 向 污 染 空 间 流 动, 最 大 限 度 减 少 室 内 回 流 与 涡 流 5.2.1.2 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 实 验 室 空 调 系 统 应 符 合 GB 19489-2008 的 规 定, 有 足 够 的 温 度 和 湿 度 控 制 能 力, 实 验 室 各 个 区 域 的 温 度 与 湿 度 应 控 制 在 规 定 范 围 内 5.2.2 照 明 系 统 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 照 明 系 统 应 符 合 GB 19489-2008 的 规 定, 干 细 胞 库 及 实 验 室 的 核 心 工 作 区 的 照 度 不 低 于 350 勒 克 斯, 其 它 区 域 不 低 于 200 勒 克 斯 5.2.3 备 用 电 源 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 实 验 室 的 供 电 系 统 应 符 合 GB 50052 和 GB 19489-2008 的 规 定, 应 急 照 明 不 得 少 于 30 分 钟, 需 安 装 后 备 电 池 或 者 与 后 备 发 电 机 相 连, 并 符 合 GB 7000.2 的 规 定 5.2.4 安 全 设 施 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 安 全 设 施 应 符 合 GB 19489-2008 的 规 定, 包 括 门 禁 监 控 报 警 和 危 险 处 理 系 统 6 机 构 设 置 6.1 伦 理 审 查 委 员 会 5

6.1.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 设 伦 理 审 查 委 员 会 伦 理 审 查 委 员 会 由 医 药 学 伦 理 学 法 学 等 专 家 以 及 无 利 害 关 系 的 社 区 代 表 等 人 员 组 成 6.1.2 伦 理 审 查 委 员 会 对 相 关 伦 理 问 题 进 行 审 查 和 评 价 伦 理 审 查 委 员 会 负 责 建 立 干 细 胞 库 的 伦 理 准 则 和 相 应 的 伦 理 操 作 规 范, 并 在 科 学 性 前 提 下 对 样 本 相 关 研 究 项 目 开 始 前 进 行 伦 理 审 查 及 对 已 通 过 审 查 或 正 在 进 行 的 项 目 进 行 伦 理 监 督 与 审 查, 以 保 护 样 本 提 供 者 的 权 益 和 安 全 6.2 科 学 审 查 委 员 会 6.2.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 设 有 科 学 审 查 委 员 会 科 学 审 查 委 员 会 应 由 生 物 和 医 学 领 域 的 专 家 组 成 6.2.2 科 学 审 查 委 员 会 应 负 责 对 生 物 样 本 采 集 和 使 用 的 方 案 进 行 科 学 性 审 查 6.3 生 物 安 全 评 审 委 员 会 6.3.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 设 有 生 物 安 全 评 审 委 员 会 生 物 安 全 评 审 委 员 会 应 由 生 物 学 家 医 务 人 员 技 术 人 员 和 实 验 室 管 理 人 员 等 各 方 面 的 专 家 或 工 作 人 员 组 成 6.3.2 生 物 安 全 评 审 委 员 会 负 责 干 细 胞 库 的 生 物 安 全 政 策 和 安 全 操 作 规 范 的 审 查 7 操 作 规 范 7.1 采 集 7.1.1 采 集 场 所 7.1.1.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 样 本 的 采 集 场 所 或 环 境 需 达 到 相 应 洁 净 度, 保 证 无 菌 采 集, 标 本 可 用 7.1.1.2 牙 齿 样 本 和 经 血 样 本 的 采 集 场 所 无 特 别 要 求, 需 注 意 个 人 卫 生 7.1.1.3 羊 水 样 本 新 生 儿 脐 带 脐 带 血 和 胎 盘 样 本 人 类 骨 髓 液 样 本 的 采 集 场 所 需 达 到 Ⅱ 级 一 般 洁 净 手 术 室 要 求 7.1.1.4 人 类 脂 肪 组 织 滑 膜 组 织 和 宫 内 膜 组 织 样 本 的 采 集 场 所 需 达 到 Ⅲ 级 普 通 洁 净 手 术 室 要 求 7.1.2 采 集 方 法 7.1.2.1 总 则 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 针 对 不 同 样 本 制 定 相 应 标 准 采 集 方 法 和 管 理 制 度, 并 在 符 合 GMP 的 标 准 上 严 格 执 行 人 类 间 充 质 干 细 胞 样 本 需 由 专 业 的 医 护 人 员 或 接 受 过 样 本 采 集 专 业 培 训 的 人 员 进 行 以 下 方 法 为 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 建 议 或 可 用 样 本 采 集 方 法 7.1.2.2 新 生 儿 脐 带 来 源 间 充 质 干 细 胞 样 本 采 集 方 法 a) 待 胎 儿 娩 出 后, 用 蘸 有 75% 酒 精 的 纱 布 擦 拭 脐 带 ; b) 截 取 至 少 15 厘 米 无 针 孔 的 脐 带 放 入 保 存 液 中, 标 识 清 楚, 置 于 无 菌 采 集 袋 中 ; c) 脐 带 的 两 端 需 要 用 手 术 线 结 扎 7.1.2.3 新 生 儿 胎 盘 来 源 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 胎 儿 娩 出 后, 待 胎 盘 与 母 体 完 全 分 离, 用 蘸 有 75% 酒 精 的 纱 布 擦 拭 ; b) 迅 速 将 胎 盘 放 入 保 存 液 中 ; 6

c) 将 胎 盘 放 入 无 菌 采 集 袋, 清 晰 标 识 7.1.2.4 新 生 儿 脐 带 血 来 源 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 待 新 生 儿 娩 出 后, 断 脐 结 扎 用 蘸 有 75% 酒 精 的 纱 布 擦 拭 胎 盘 远 端 脐 带 b) 采 血 针 穿 刺 消 毒 部 位 脐 静 脉, 引 流 脐 带 血 至 脐 带 血 采 集 袋, 至 无 脐 带 血 流 出 c) 旋 紧 采 血 袋 软 管 旋 塞, 或 做 热 合 处 理, 并 清 楚 标 识 7.1.2.5 人 类 脂 肪 来 源 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 脂 肪 组 织 采 集 前 应 联 系 整 形 医 师, 制 定 抽 脂 方 案 和 术 前 术 后 的 防 感 染 措 施 b) 行 脂 肪 抽 吸 术, 抽 取 脂 肪 组 织, 置 于 无 菌 采 集 袋 中 保 存, 并 清 楚 标 识 7.1.2.6 人 类 牙 髓 来 源 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 采 集 儿 童 正 常 生 长 期 即 将 脱 落 乳 牙, 或 成 年 人 正 畸 或 阻 生 需 拔 除 的 第 三 磨 牙 b) 采 集 之 前 清 洁 口 腔 ; 并 用 棉 球 擦 拭 牙 齿 四 周 进 行 消 毒 c) 用 拔 牙 器 械 拔 出 牙 齿, 即 时 转 移 到 无 菌 保 存 液 中 保 存, 并 清 楚 标 识 7.1.2.7 人 类 骨 髓 来 源 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 骨 髓 组 织 采 集 前 应 联 系 外 科 医 师, 制 定 骨 髓 穿 刺 方 案 和 术 前 术 后 的 防 感 染 措 施 b) 行 骨 髓 穿 刺 术, 抽 取 骨 髓 液, 即 时 转 移 至 无 菌 采 集 袋 中 保 存, 并 清 楚 标 识 7.1.2.8 人 类 子 宫 内 膜 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 手 术 切 除 成 年 女 性 子 宫 内 膜 增 厚 组 织 或 子 宫 内 膜 异 位 组 织, 置 于 采 集 液 中 保 存, 并 清 楚 标 识 b) 成 年 女 性 月 经 期 第 二 天 或 第 三 天, 将 月 事 杯 消 毒 后 置 于 阴 道 内, 收 集 经 血 月 事 杯 取 出 后, 将 经 血 转 移 至 保 存 液 中 保 存, 并 清 楚 标 识 7.1.2.9 人 类 羊 水 来 源 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 在 孕 妇 妊 娠 中 期, 妊 娠 16~20 周 时 进 行 羊 水 穿 刺 b) 在 B 超 引 导 下, 抽 取 羊 水 样 本 c) 将 羊 水 样 本 转 移 至 无 菌 采 集 袋 中, 并 清 楚 标 识 7.1.2.10 人 类 母 乳 来 源 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 清 水 煮 沸 吸 乳 器 3~5 分 钟 灭 菌 清 洁 双 手, 并 75% 酒 精 消 毒 哺 乳 期 女 性 乳 头 及 周 围 部 位 b) 依 照 吸 乳 器 操 作 说 明, 采 集 母 乳 c) 将 母 乳 转 移 至 采 集 液 中 保 存, 并 清 楚 标 识 7.1.2.11 人 类 滑 膜 来 源 间 充 质 干 细 胞 采 集 方 法 a) 无 菌 环 境 下, 手 术 采 集 供 者 关 节 处 滑 膜 组 织 样 本 b) 采 集 后 将 样 本 立 即 转 移 至 保 存 液 中 保 存, 并 清 楚 标 识 7.2 样 本 接 收 7.2.1 样 本 接 收 应 遵 从 安 全 与 准 确 的 原 则, 做 到 样 本 与 供 者 一 一 对 应 7.2.2 样 本 接 收 时, 做 好 自 我 防 护 工 作, 接 触 样 本 之 前 应 戴 好 手 套 与 口 罩 7.2.3 首 先 送 达 接 收 室 的 运 输 箱 内 样 本 及 信 息 记 录 表 是 否 齐 全, 同 时 确 认 记 录 表 上 应 该 记 录 的 信 息 已 经 填 写 完 成 7.2.4 观 察 样 本 容 器 外 包 装 的 外 观, 检 查 有 无 破 损 并 记 录 7

7.2.5 检 查 信 息 记 录 表 上 信 息 是 否 与 样 本 信 息 一 一 对 应, 确 认 无 误 后 进 行 接 收 7.2.6 接 收 样 本 后 用 医 用 酒 精 把 容 器 外 表 面 擦 拭 干 净, 如 不 能 及 时 对 样 本 进 行 处 理, 要 把 样 本 保 存 在 规 定 保 存 条 件 下 7.2.7 样 本 接 收 后 应 及 时 将 信 息 反 馈 给 样 本 发 送 方 7.3 人 类 间 充 质 干 细 胞 的 分 离 与 原 代 培 养 方 法 7.3.1 总 则 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 建 立 人 类 间 充 质 干 细 胞 的 样 本 采 集 以 及 干 细 胞 分 离 和 原 代 培 养 的 标 准 操 作 规 程 及 管 理 程 序, 并 在 符 合 GMP 的 标 准 上 严 格 执 行 可 行 及 建 议 样 本 采 集 方 法 和 原 代 细 胞 分 离 方 法 7.3.2 新 生 儿 脐 带 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 新 生 儿 脐 带 组 织 剥 取 华 通 氏 胶, 以 组 织 块 培 养 法 或 酶 消 化 法 分 离 新 生 儿 间 充 质 干 细 胞, 贴 壁 法 做 原 代 培 养 7.3.3 新 生 儿 脐 带 血 来 源 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 新 生 儿 脐 带 血 样 本, 与 磷 酸 缓 冲 液 1:1 稀 释 后, 以 密 度 梯 度 离 心 法 分 离 单 个 核 细 胞, 贴 壁 法 培 养 定 期 更 换 培 养 基 直 到 贴 壁 生 长 的 成 纤 维 细 胞 样 的 细 胞 达 到 汇 合 7.3.4 新 生 儿 胎 盘 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 剥 取 胎 盘 羊 膜 绒 毛 膜 或 绒 毛 组 织, 以 酶 消 化 法 分 离 胎 盘 间 充 质 干 细 胞, 贴 壁 法 做 原 代 培 养 7.3.5 人 类 脂 肪 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 成 人 脂 肪 组 织, 以 酶 消 化 法 分 离 脂 肪 间 充 质 干 细 胞, 贴 壁 法 做 原 代 培 养 7.3.6 人 类 牙 髓 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 牙 齿 样 本, 完 整 剥 离 牙 髓, 以 酶 消 化 法 分 离 牙 髓 间 充 质 干 细 胞, 贴 壁 法 做 原 代 培 养 7.3.7 人 类 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 人 骨 髓 液 样 本, 以 密 度 梯 度 离 心 法 分 离 骨 髓 间 充 质 干 细 胞, 贴 壁 法 作 原 代 培 养 7.3.8 人 类 宫 内 膜 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 宫 内 膜 组 织 样 本 以 酶 消 化 法 分 离 子 宫 内 膜 干 细 胞, 并 做 原 代 培 养 或 经 血 样 本 以 密 度 梯 度 离 心 法, 分 离 子 宫 内 膜 干 细 胞, 贴 壁 法 做 原 代 培 养 7.3.9 人 羊 水 来 源 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 人 羊 水 样 本,100 目 滤 器 过 滤 后 离 心, 弃 上 清 以 培 养 液 重 悬 细 胞 沉 淀, 贴 壁 法 培 养 定 期 更 换 培 养 基 直 到 贴 壁 生 长 的 成 纤 维 细 胞 样 的 细 胞 达 到 汇 合 7.3.10 人 类 母 乳 来 源 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 人 类 母 乳 样 本,100 目 滤 器 过 滤 后 离 心, 弃 上 清 以 培 养 液 重 悬 细 胞 沉 淀, 贴 壁 法 培 养 定 期 更 换 培 养 基 直 到 贴 壁 生 长 的 成 纤 维 细 胞 样 的 细 胞 达 到 汇 合 8

7.3.11 人 类 滑 膜 来 源 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 原 代 培 养 人 类 滑 膜 组 织 样 本, 以 酶 消 化 法 分 离 滑 膜 间 充 质 干 细 胞 离 心 洗 涤 后, 贴 壁 法 培 养 定 期 更 换 培 养 基 直 到 贴 壁 生 长 的 成 纤 维 细 胞 样 的 细 胞 达 到 汇 合 7.4 换 液 为 了 保 证 细 胞 所 处 环 境 的 稳 定, 需 进 行 换 液 操 作, 并 在 符 合 GMP 要 求 基 础 上 严 格 执 行, 并 有 严 格 的 质 量 控 制, 需 有 明 确 的 细 胞 鉴 别 特 征, 无 外 源 微 生 物 污 染 7.5 传 代 根 据 原 代 细 胞 融 合 度, 判 断 是 否 可 以 进 行 传 代 操 作, 传 代 操 作 应 即 时 迅 速 密 度 适 宜, 并 在 符 合 GMP 要 求 基 础 上 严 格 执 行, 并 有 严 格 的 质 量 控 制, 需 有 明 确 的 细 胞 鉴 别 特 征, 无 外 源 微 生 物 污 染 7.6 冻 存 细 胞 数 目 达 到 冻 存 要 求 的 细 胞 系, 可 进 行 冻 存 操 作 冻 存 细 胞 需 加 入 适 当 的 冷 冻 保 护 液, 遵 循 程 序 降 温 的 原 则, 并 在 符 合 GMP 要 求 基 础 上 严 格 执 行, 有 严 格 的 质 量 控 制, 需 有 明 确 的 细 胞 鉴 别 特 征, 无 外 源 微 生 物 污 染 7.7 入 库 将 冻 存 好 的 细 胞 移 至 液 氮 罐 中 ( 温 度 为 -196~-135 ) 长 期 储 存 并 有 严 格 的 过 程 控 制 及 完 整 的 的 信 息 录 入 档 案 填 写 7.8 细 胞 复 苏 7.8.1 自 液 氮 或 干 冰 容 器 中 取 出 冻 存 管, 检 查 盖 子 是 否 旋 紧 7.8.2 将 冻 存 管 立 即 投 入 37 水 浴 锅 中, 轻 摇 冻 存 管 使 其 在 1 分 钟 内 全 部 融 化, 以 75% 酒 精 擦 拭 保 存 管 外 部, 移 入 无 菌 操 作 台 内 7.8.3 取 出 细 胞 悬 液, 将 解 冻 的 细 胞 悬 液 加 入 含 有 培 养 基 的 离 心 管 内, 离 心 洗 涤 2~3 次, 加 入 新 鲜 培 养 基 重 选 细 胞, 混 合 均 匀, 转 移 至 培 养 瓶, 放 入 CO2 培 养 箱 培 养 7.9 细 胞 出 库 7.9.1 总 则 人 类 间 充 质 干 细 胞 在 需 要 使 用 转 移 或 销 毁 时, 可 执 行 细 胞 出 库 执 行 细 胞 出 库 前 应 先 向 伦 理 审 查 委 员 会 和 科 学 审 查 委 员 会 提 出 申 请, 通 过 审 核 后 方 可 进 行 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 建 立 人 类 间 充 质 干 细 胞 使 用 转 移 和 销 毁 的 标 准 操 作 规 程 7.9.2 细 胞 使 用 出 库 7.9.2.1 临 床 治 疗 需 使 用 细 胞 库 内 细 胞 时, 实 验 室 出 库 负 责 人 员 需 核 对 库 存 细 胞 信 息 和 细 胞 使 用 者 信 息, 制 定 严 格 的 细 胞 发 放 计 划, 由 实 验 室 出 库 负 责 人 员 填 写 能 够 记 录 细 胞 储 存 位 置 变 更 的 相 关 文 件 后, 由 质 控 人 员 监 督 从 液 氮 罐 中 取 出 需 要 的 细 胞 进 行 使 用 7.9.2.2 科 研 性 使 用 库 内 细 胞 时, 需 保 证 细 胞 供 者 在 充 分 知 情 并 签 订 知 情 同 意 书 的 情 况 下 完 成 细 胞 出 库, 由 实 验 室 出 库 负 责 人 员 填 写 能 够 记 录 细 胞 储 存 位 置 变 更 的 相 关 文 件 后, 由 质 控 人 员 监 督 从 液 氮 罐 中 取 出 需 要 的 细 胞 进 行 使 用 9

7.9.2.3 其 他 情 况 有 需 要 使 用 细 胞 库 内 细 胞 时 ( 如 定 期 检 测 细 胞 活 力 等 ), 由 实 验 室 出 库 负 责 人 员 填 写 能 够 记 录 细 胞 储 存 位 置 变 更 的 相 关 文 件 后, 由 质 控 人 员 监 督 从 液 氮 罐 中 取 出 需 要 的 细 胞 进 行 使 用 7.9.3 细 胞 转 移 出 库 7.9.3.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 内 部 因 整 改 扩 容 或 评 估 冻 存 干 细 胞 质 量 等 情 况 而 需 要 进 行 干 细 胞 转 移 时, 按 照 具 体 的 干 细 胞 转 移 操 作 规 范 进 行 转 移 操 作 7.9.3.2 干 细 胞 转 移 操 作 所 用 的 时 间 应 在 规 定 时 限 内, 确 保 干 细 胞 及 其 冻 存 容 器 的 温 度 在 -135 以 下 7.9.3.3 转 移 过 程 要 做 好 相 应 记 录 7.9.4 细 胞 销 毁 出 库 7.9.4.1 储 存 时 限 一 般 应 超 过 20 年 7.9.4.2 当 样 本 提 供 者 提 出 反 悔 意 见, 撤 销 知 情 同 意 书, 要 求 销 毁 所 提 供 的 样 本 时, 应 遵 从 样 本 提 供 者 的 意 见 将 样 本 销 毁, 并 将 样 本 提 供 者 相 关 信 息 和 数 据 从 信 息 系 统 中 清 除 7.9.4.3 样 本 的 销 毁 应 首 先 提 出 销 毁 申 请, 通 过 伦 理 审 查 委 员 会 和 科 学 审 查 委 员 会 的 审 核 后 方 可 进 行, 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 建 立 销 毁 的 标 准 操 作 规 范, 并 按 照 此 规 范 操 作 7.9.4.4 应 对 样 本 的 销 毁 进 行 记 录, 包 括 销 毁 的 原 因 批 准 和 执 行 销 毁 的 日 期 销 毁 的 操 作 人 员 等 8 安 全 管 理 8.1 人 员 管 理 8.1.1 人 员 培 训 与 考 核 8.1.1.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 工 作 人 员 应 接 受 专 业 技 能 培 训, 并 考 核 通 过 后 方 可 上 岗 干 细 胞 制 备 等 专 业 岗 位 需 具 备 一 定 的 教 育 背 景 培 训 项 目 包 括 但 不 限 于 生 命 伦 理 细 胞 培 养 基 础 相 关 仪 器 使 用 及 维 护 方 法 安 全 管 理 质 量 控 制 物 料 管 理 及 清 洁 卫 生 等 内 容 8.1.1.2 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 人 员 每 年 应 至 少 培 训 并 考 核 一 次 考 核 未 通 过 者, 应 重 新 接 受 培 训, 成 绩 合 格 后 方 可 再 次 上 岗 8.1.1.3 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 人 员 培 训 及 考 核 结 果 应 有 相 关 档 案 记 录 及 查 阅 制 度 8.1.2 人 员 出 入 制 度 8.1.2.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 相 关 区 域 应 建 立 实 验 室 人 员 及 外 来 人 员 准 入 制 度, 并 建 立 相 应 人 员 准 入 登 记 记 录 制 度 8.1.2.2 有 以 下 情 况 者 不 宜 从 事 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 工 作, 或 进 入 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 相 关 区 域 : a) 有 严 重 免 疫 系 统 疾 病, 或 正 在 服 用 免 疫 耐 受 药 物 者 ; b) 有 呼 吸 道 感 染 或 发 热 症 状 者 ; c) 身 体 有 开 放 式 损 伤 者 ; d) 有 传 染 性 疾 病 或 病 毒 携 带 者 ; e) 如 有 其 他 特 殊 情 况, 相 关 人 员 应 征 求 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 主 管 人 员 的 意 见, 批 准 后 方 可 进 入 8.1.3 人 员 健 康 管 理 10

8.1.3.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 人 员 录 用 之 前 应 进 行 严 格 体 检, 条 件 合 格 者 方 可 录 用 8.1.3.2 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 人 员 应 建 立 员 工 健 康 档 案, 并 至 少 每 年 体 检 一 次 8.1.3.3 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 若 发 生 生 物 安 全 暴 露, 相 关 人 员 应 接 受 必 要 救 治 并 制 定 医 学 观 察 方 案 对 于 出 现 异 常 情 况 者, 应 暂 时 调 离 工 作 岗 位, 或 永 久 调 离 再 次 上 岗 应 体 检 合 格, 并 取 得 主 管 人 员 的 批 准 8.1.4 供 者 健 康 管 理 8.1.4.1 间 充 质 干 细 胞 供 者 需 提 供 一 般 信 息 既 往 病 史 家 族 史 等 信 息 登 记 可 参 考 附 录 B 8.1.4.2 供 者 必 须 经 过 检 验 筛 选 证 明 无 人 源 特 定 病 毒, 结 果 应 符 合 GB 18467-2001 的 规 定 8.2 实 验 室 安 全 管 理 8.2.1 消 防 安 全 8.2.1.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 需 配 备 必 要 的 防 火 系 统 及 灭 火 装 置 特 定 区 域 如 档 案 储 存 区 域 应 配 备 相 应 的 特 殊 灭 火 装 置 如 干 冰 灭 火 器 8.2.1.2 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 定 期 对 消 防 系 统 和 消 防 装 置 进 行 检 查, 以 确 保 其 处 于 随 时 可 用 状 态 8.2.1.3 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 防 火 系 统 建 设 应 符 合 GB 19489-2008 的 规 定 8.2.1.4 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 灭 火 器 的 配 置 应 符 合 GB 50140 的 规 定 8.2.2 压 力 容 器 安 全 8.2.2.1 压 力 容 器 指 压 力 气 瓶 及 高 压 灭 菌 装 置 8.2.2.2 压 力 容 器 应 由 专 业 人 员 操 作, 并 需 持 有 压 力 容 器 资 格 证 明 文 件 压 力 容 器 使 用 应 建 立 使 用 记 录 档 案 8.2.2.3 压 力 容 器 安 全 应 符 合 中 华 人 民 共 和 国 特 种 设 备 安 全 法 的 规 定 8.2.3 化 学 用 品 安 全 8.2.3.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 涉 及 到 的 有 毒 有 害 物 质, 应 设 立 相 应 的 储 存 制 度, 包 括 储 存 条 件 储 存 地 点 和 指 定 的 管 理 人 员 ; 并 有 相 应 的 记 录 登 记 制 度 8.2.3.2 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 涉 及 到 的 有 毒 有 害 物 质, 应 制 定 明 确 的 使 用 及 管 理 制 度 ; 并 有 相 应 的 记 录 登 记 制 度 8.2.3.3 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 建 立 危 险 化 学 用 品 事 故 危 险 评 估 和 应 急 预 案, 以 应 对 可 能 发 生 的 危 害 性 事 故 8.2.3.4 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 内 涉 及 有 毒 有 害 物 质 的 工 作 区 域, 应 符 合 AQ 3013 的 规 定 8.2.4 液 氮 安 全 8.2.4.1 液 氮 罐 和 管 道 系 统 需 设 置 减 压 阀, 以 防 止 爆 炸 8.2.4.2 应 用 到 大 量 液 氮 罐 储 存 时, 需 安 装 氧 浓 度 检 测 器 8.2.4.3 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 工 作 人 员 在 操 作 中 接 触 到 液 氮 时, 需 使 用 防 护 面 罩 和 防 冻 手 套 并 做 好 其 它 防 冻 措 施 8.2.4.4 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 确 保 维 持 正 常 功 能 至 少 3 天 的 液 氮 供 应 量 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 定 期 检 查 液 氮 容 量, 并 建 立 相 应 的 检 查 登 记 制 度 8.2.4.5 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 液 氮 安 全, 应 符 合 GBT 5458-1997 的 规 定 11

8.2.5 生 物 安 全 8.2.5.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 建 立 严 格 的 生 物 安 全 及 危 害 性 评 估 方 案 生 物 安 全 审 查 制 度 及 生 物 安 全 事 故 应 急 预 案 8.2.5.2 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 生 物 安 全 制 度 应 通 过 生 物 安 全 委 员 会 及 生 命 伦 理 委 员 会 的 批 准 后 方 可 实 行 8.2.5.3 涉 及 到 感 染 性 物 质 的 操 作 运 输 等 行 为, 应 由 受 过 培 训 的 专 门 人 员 进 行, 并 使 用 特 定 的 操 作 或 运 输 工 具 ; 并 需 建 立 完 善 的 记 录 文 件 8.2.5.4 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 生 物 安 全 制 度 应 符 合 WHO 生 物 安 全 手 册 和 GB 19489-2008 的 规 定 8.2.6 安 全 标 识 8.2.6.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 相 关 区 域 及 相 关 设 施 应 具 有 安 全 标 识, 包 括 标 识 的 形 式 如 颜 色 图 标 光 信 号 等 和 标 识 内 容 如 危 险 品 消 防 设 施 洁 净 区 等 应 清 晰 明 确 8.2.6.2 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 中 相 关 安 全 标 识 的 设 计 和 编 写 应 符 合 GB 15258 和 GB 2894 的 规 定 8.3 物 料 仪 器 管 理 8.3.1 物 料 管 理 8.3.1.1 物 料 采 购 a) 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 所 用 物 料 需 从 具 备 专 业 资 质 并 经 过 验 证 核 实 的 供 应 商 处 采 购, 且 具 备 检 验 合 格 证 明 文 件 b) 物 料 的 采 购 信 息 应 具 有 严 格 的 记 录 登 记 制 度, 采 购 信 息 包 括 但 不 限 于 采 购 人 员 和 物 料 的 名 称 编 号 数 量 规 格 供 应 商 生 产 商 产 地 批 号 有 效 期 运 输 条 件 注 意 事 项 等 8.3.1.2 物 料 标 识 物 料 应 具 有 清 楚 明 确 的 标 识, 包 括 物 料 的 编 号 名 称 规 格 数 量 供 应 商 批 号 有 效 期 储 存 条 件 运 输 条 件 使 用 方 法 以 及 注 意 事 项 8.3.1.3 物 料 库 存 管 理 a) 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 具 有 物 料 管 理 系 统 和 相 应 的 物 料 信 息 管 理 系 统 b) 物 料 应 严 格 按 照 储 存 条 件 正 确 储 存 对 于 物 料 的 储 存 条 件 和 有 效 期, 应 具 有 定 期 的 审 查 制 度 和 特 殊 情 况 下 的 应 急 预 案, 并 具 有 记 录 登 记 文 件 c) 物 料 的 库 存 管 理 应 符 合 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 工 作 实 际, 在 具 备 一 定 量 物 料 储 备 的 同 时, 避 免 物 料 长 期 积 压 导 致 的 效 力 下 降 或 过 期 使 用 d) 物 料 的 出 入 库 应 具 有 严 格 的 记 录 登 记 制 度, 包 括 : 物 料 的 标 识 物 料 出 入 库 经 手 人 员 姓 名 岗 位 以 及 出 库 用 途 等 信 息 8.3.1.4 物 料 使 用 管 理 a) 物 料 应 严 格 按 照 使 用 方 法 正 确 使 用 b) 物 料 的 使 用 应 具 有 严 格 的 文 件 记 录 制 度, 包 括 物 料 的 标 识 使 用 范 围 使 用 时 间 等 信 息 物 料 的 使 用 信 息 要 做 到 可 溯 源 12

8.3.2 仪 器 管 理 8.3.2.1 设 备 使 用 a) 主 要 设 备 都 按 指 定 操 作 程 序 操 作, 重 点 设 备 技 术 水 平 要 求 较 高 的 设 备, 其 操 作 规 程 要 制 定 得 详 细 清 楚 b) 设 备 操 作 人 员 在 上 机 前 进 行 设 备 的 结 构 性 能 技 术 规 范 维 护 知 识 和 安 全 操 作 规 程 的 理 论 教 育 与 实 际 技 能 的 培 训, 做 到 三 懂 ( 懂 结 构 懂 原 理 懂 性 能 ) 四 会 ( 会 使 用 会 保 养 会 检 查 会 排 查 简 单 故 障 ) c) 仪 器 设 备 的 使 用 人 必 须 严 格 按 照 标 准 操 作 程 序 进 行 操 作 d) 在 整 个 制 备 过 程 ( 包 括 制 备 及 检 验 ) 中 起 主 要 ( 关 键 ) 作 用 或 与 产 品 质 量 相 关 性 较 大 的 设 备 要 及 时 填 写 设 备 运 行 记 录 恒 温 设 备 运 行 过 程 中, 应 每 日 监 测 其 设 定 温 度 与 实 际 温 度 是 否 一 致 8.3.2.2 设 备 维 护 a) 内 委 维 护 : 仪 器 设 备 管 理 员 对 仪 器 设 备 进 行 内 部 维 护 b) 外 委 维 护 : 由 合 作 单 位 相 关 部 门 进 行 维 护, 仪 器 设 备 管 理 员 和 实 验 室 主 管 配 合 c) 外 聘 维 护 : 保 修 期 内 维 护 由 工 程 师 维 护, 保 修 期 外 可 外 聘 仪 器 设 备 经 销 商 指 定 的 售 后 工 程 师 进 行 维 护 8.3.2.3 设 备 维 修 a) 使 用 过 程 中 出 现 故 障, 无 法 使 用 b) 可 使 用 但 达 不 到 工 艺 要 求 c) 质 控 部 检 测 出 不 合 格 项 d) 需 要 升 级 满 足 工 艺 需 求 时, 需 要 发 起 维 修 流 程 根 据 需 要 维 修 的 性 质 选 择 由 仪 器 设 备 管 理 员 具 体 组 织 实 施 由 实 验 室 主 管 同 合 作 单 位 沟 通 组 织 实 施 或 是 由 仪 器 设 备 管 理 员 和 实 验 室 主 管 共 同 组 织 实 施 8.4 样 本 管 理 8.4.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 有 独 立 的 数 据 管 理 系 统, 对 样 本 的 出 入 库 和 样 本 的 储 存 位 置 进 行 追 踪 管 理, 并 制 定 相 关 记 录 文 件 用 于 检 索 8.4.2 异 常 的 人 类 间 充 质 干 细 胞 储 存 样 本 要 设 有 独 立 的 储 存 设 备, 并 在 信 息 管 理 系 统 中 明 确 标 识 8.4.3 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 有 能 与 数 据 管 理 系 统 兼 容 的 监 控 系 统, 监 测 并 记 录 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 内 的 环 境 变 化, 包 括 储 存 设 备 内 的 各 项 重 要 指 标 储 存 室 内 的 环 境 温 度 湿 度 和 含 氧 量 等 8.4.4 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 制 定 库 存 核 实 计 划, 根 据 数 据 管 理 系 统 记 录 的 样 本 储 存 位 置 信 息 进 行 核 实, 确 保 样 本 储 存 在 正 确 的 位 置 8.4.5 库 存 核 实 应 至 少 每 年 一 次, 具 体 周 期 根 据 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 实 际 情 况 而 定, 另 外 可 进 行 不 定 期 的 抽 样 核 实 8.4.6 库 存 核 实 时 应 至 少 检 查 上 次 库 存 核 实 后 新 进 样 本 的 1% 8.4.7 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 制 定 样 本 质 量 控 制 计 划, 按 一 定 的 周 期 对 储 存 的 样 本 进 行 检 测, 如 提 取 样 本 中 的 DNA RNA 或 其 他 生 物 分 子 进 行 比 对 分 析 生 物 学 效 力 形 态 是 否 变 异 和 是 否 受 杂 菌 污 染 等 13

8.4.8 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 数 据 管 理 系 统 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 温 控 系 统 储 存 样 本 核 实 的 相 关 操 作 需 设 定 专 门 人 员 完 成 8.5 质 量 管 理 8.5.1 质 量 体 系 文 件 管 理 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 制 定 质 量 手 册 管 理 性 文 件 标 准 操 作 文 件 及 相 关 记 录 8.5.2 质 量 手 册 参 照 国 际 标 准 化 组 织 ISO 9001 ISO 14001 OHSAS 18001 认 证 的 要 求, 对 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 质 量 目 标 质 量 方 针 组 织 机 构 职 责 权 限 运 行 过 程 控 制 方 法 以 及 质 量 管 理 体 系 的 应 用 范 围 进 行 完 整 的 介 绍 8.5.3 管 理 性 文 件 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 各 类 管 理 活 动 的 规 程, 包 括 设 备 设 施 的 维 护 物 料 供 应 纠 正 预 防 不 合 格 品 处 理 内 部 评 审 以 及 各 类 文 件 的 制 定 审 核 发 放 回 收 修 订 销 毁 撤 销 相 关 程 序 8.5.4 标 准 操 作 文 件 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 应 将 实 验 和 设 备 操 作 等 制 定 标 准 的 操 作 文 件, 用 于 指 导 技 术 工 作 人 员 的 操 作 过 程 8.5.5 相 关 记 录 收 集 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 各 类 活 动 所 产 生 的 数 据 和 信 息, 实 际 详 细 的 进 行 记 录 并 保 存 8.5.6 质 量 控 制 8.5.6.1 参 照 血 站 管 理 办 法, 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 必 须 制 定 样 本 采 集 干 细 胞 制 备 检 测 储 存 的 规 章 制 度 操 作 规 程, 以 便 工 作 人 员 在 常 规 操 作 中 对 材 料 试 剂 和 设 备 进 行 质 量 控 制 8.5.6.2 确 保 完 成 必 要 及 相 关 的 检 验, 确 保 只 有 符 合 质 量 要 求 的 标 本 试 剂 耗 材 培 养 液 一 次 性 无 菌 用 品 方 可 投 入 使 用, 符 合 质 量 要 求 的 干 细 胞 方 可 储 存 8.5.7 质 量 检 验 8.5.7.1 应 采 用 有 效 的 检 验 试 剂 耗 材, 对 整 个 制 备 储 存 过 程 进 行 检 验 制 备 样 本 应 进 行 病 毒 血 清 学 检 测, 检 测 结 果 必 须 合 格, 所 有 的 检 验 方 法 必 须 经 过 验 证 8.5.7.2 所 有 样 本 供 者 应 进 行 病 毒 血 清 学 检 测, 检 测 结 果 必 须 合 格, 检 测 结 果 阳 性 者 应 予 以 销 所 有 的 冻 存 入 库 样 本 应 进 行 微 生 物 检 测, 检 测 结 果 应 合 格 8.5.7.3 所 有 冻 存 入 库 样 本 应 进 行 细 胞 均 一 性 形 态 活 力 纯 度 鉴 定 8.5.7.4 对 应 检 测 样 本 进 行 留 样, 至 少 留 样 至 检 测 结 果 出 具 8.5.7.5 应 建 立 不 合 格 品 管 理 机 制 并 实 施 8.5.8 质 量 保 证 8.5.8.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 储 存 体 系 的 设 计 与 研 发 应 考 虑 GMP 和 ISO 9001 的 要 求, 其 产 品 的 设 计 开 发 输 入 输 出 评 审 验 证 确 认 更 改 的 控 制 全 过 程 都 要 建 立 相 应 的 管 理 规 程, 进 行 严 格 的 控 制 14

8.5.8.2 明 确 规 定 制 备 和 质 量 控 制 活 动, 并 实 施 8.5.8.3 明 确 管 理 职 责 8.5.8.4 保 证 制 备 以 及 采 购 和 使 用 的 试 剂 耗 材 培 养 液 正 确 无 误 8.5.8.5 确 保 中 间 产 品 所 需 的 控 制 以 及 其 它 中 间 控 制 环 节 得 到 实 施 8.5.8.6 确 保 验 证 的 实 施 8.5.8.7 严 格 按 各 种 书 面 规 程 进 行 制 备 检 查 检 验 和 复 核 8.5.8.8 有 适 当 的 措 施 保 证 贮 存 和 随 后 的 各 种 处 理 过 程 中, 干 细 胞 质 量 在 规 定 时 间 内 保 持 相 对 稳 定 8.5.8.9 定 期 评 估 质 量 保 证 体 系 的 有 效 性 及 时 效 性 适 用 性 8.5.8.10 结 合 内 外 部 审 核, 对 质 量 目 标 方 针 进 行 内 外 部 评 审 及 管 理 评 审 8.5.9 质 量 风 险 管 理 应 事 先 对 人 类 间 充 质 干 细 胞 整 个 制 备 入 库 过 程 进 行 评 估, 可 采 取 回 顾 或 者 前 瞻 的 方 式, 持 续 进 行 危 险 识 别 风 险 评 估 和 实 施 必 要 的 控 制 机 制 8.6 信 息 化 管 理 8.6.1 样 本 追 踪 系 统 应 对 每 一 个 录 入 数 据 库 的 样 本 设 置 唯 一 的 ID, 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 样 本 接 收 没 有 标 记 的 样 本 时, 每 个 样 本 容 器 都 必 须 标 上 含 有 样 本 编 码 的 条 形 码 8.6.2 样 本 编 码 8.6.2.1 总 则 样 本 的 编 码 应 遵 循 唯 一 性 的 总 原 则 在 满 足 总 原 则 的 基 础 上, 应 精 简, 长 度 保 持 统 一 8.6.2.2 标 签 编 码 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 打 印 标 签 时, 标 签 的 编 码 应 该 按 附 录 B 规 定 的 编 码 规 则 进 行 编 码 同 时, 确 保 标 签 能 在 各 种 储 存 环 境, 特 别 是 在 干 冰 和 液 氮 环 境 下 能 正 常 使 用 8.6.2.3 编 码 规 则 编 码 规 则 的 设 定 应 该 确 保 在 资 源 库 内 有 效 分 辨 各 类 来 源 的 间 充 质 干 细 胞, 同 时 不 与 其 他 商 品 或 者 产 品 编 码 雷 同 8.6.3 信 息 安 全 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 的 信 息 管 理 系 统 应 建 立 安 全 保 障, 防 止 黑 客 入 侵 计 算 机 病 毒 传 播 和 数 据 损 坏 等 意 外 情 况, 并 应 进 行 定 期 的 维 护 和 备 份, 以 应 对 信 息 和 数 据 的 意 外 损 坏, 及 时 进 行 异 地 备 份 和 历 史 备 份 15

附 录 A ( 资 料 性 附 录 ) 表 A.1 供 者 健 康 信 息 采 集 采 集 样 本 信 息 编 码 参 与 者 信 息 姓 名 年 龄 / 出 生 日 期 国 家 民 族 过 往 疾 病 有 无 身 份 证 号 码 联 系 电 话 联 系 地 址 联 系 邮 箱 法 定 监 护 人 信 息 姓 名 年 龄 / 出 生 日 期 国 家 民 族 过 往 疾 病 有 无 身 份 证 号 码 联 系 电 话 联 系 地 址 联 系 邮 箱 化 验 结 果 血 型 A B O AB RH + - 血 常 规 Hb( 血 红 蛋 白 ) g/l;wbc( 白 细 胞 ) X109/L; PLT( 血 小 板 ) X109/L HBsAg( 乙 肝 表 面 抗 原 ) + - HBcAb( 乙 肝 核 心 抗 体 ) + - HCV-Ab( 丙 肝 抗 体 ) + - Anti-HIV( 艾 滋 病 抗 体 ) + - ALT( 谷 丙 转 氨 酶 ) 正 常 异 常 AST( 谷 草 转 氨 酶 ) 正 常 异 常 CMV-LGM ( 巨 细 胞 病 毒 LGM 抗 体 ) + - 梅 毒 血 清 + - 地 中 海 贫 血 G-6PD 缺 乏 症 + - ( 参 与 者 / 产 妇 / 配 偶 ) ( 参 与 者 / 产 妇 / 配 偶 ) + - 备 注 16

附 录 B ( 资 料 性 附 录 ) 人 类 间 充 质 干 细 胞 样 本 编 码 规 则 由 保 存 细 胞 类 别 ( 两 位 数 )+ 年 份 ( 四 位 数 )+ 流 水 号 ( 四 位 数 )+ 细 胞 代 数 ( 两 位 数 )+ 冻 存 管 份 数 ( 两 位 数 ) 组 成, 具 体 规 则 如 表 B.1 表 B.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 样 本 编 码 规 则 保 存 细 胞 类 别 年 份 流 水 号 细 胞 代 数 冻 存 管 份 数 保 存 的 细 胞 的 类 别, 定 为 两 位 数 字, 增 加 的 保 存 细 胞 类 别 再 按 顺 序 给 予 编 码 当 前 细 胞 编 码 出 具 时 所 在 的 年 份 每 个 年 份 里 给 同 一 种 保 存 细 胞 类 别 的 编 码, 定 为 四 位 数 字 细 胞 代 数 是 制 备 出 来 时 细 胞 所 属 的 代 数, 定 为 两 位 数 字, 第 0 代 细 胞 为 00, 第 1 代 细 胞 为 01 定 为 两 位 数 字, 如 果 不 是 冻 起 来 的 细 胞 此 编 码 可 以 不 用 打 印 或 编 码 00 脐 带 间 充 质 干 细 胞 01 胎 盘 羊 膜 间 充 质 干 细 胞 02 脂 肪 间 充 质 干 细 胞 03 牙 髓 间 充 质 干 细 胞 04 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 05 宫 内 膜 间 充 质 干 细 胞 06 17

附 录 C ( 资 料 性 附 录 ) 图 C.1 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 整 体 的 操 作 流 程 生 命 伦 理 知 情 同 意 隐 私 保 护 安 全 保 护 人 类 间 充 质 干 细 胞 库 整 体 的 操 作 流 程 间 充 质 干 细 胞 库 建 设 机 构 设 置 操 作 规 范 场 地 建 设 及 要 求 实 验 室 设 施 与 设 备 伦 理 审 查 委 员 会 科 学 审 查 委 员 会 生 物 安 全 评 审 委 员 会 采 集 样 本 接 收 分 离 与 原 代 培 养 方 法 换 液 传 代 冻 存 入 库 细 胞 复 苏 细 胞 出 库 安 全 管 理 人 员 管 理 实 验 室 安 全 管 理 物 料 仪 器 管 理 样 本 管 理 质 量 管 理 信 息 化 管 理 18

参 考 文 献 [1] 医 药 工 业 洁 净 厂 房 设 计 规 范 [2] 药 品 生 产 质 量 管 理 规 范 (GMP) [3] 赫 尔 辛 基 宣 言 [4] 纽 伦 堡 法 典 [5] 涉 及 人 的 生 物 医 学 研 究 的 国 际 伦 理 准 则 [6] 涉 及 人 的 生 物 医 学 研 究 伦 理 审 查 办 法 ( 试 行 ) 中 国 [7] 中 国 医 药 生 物 技 术 协 会 生 物 样 本 库 标 准 ( 试 行 )[M]. 中 国 医 药 生 物 技 术.2011(01). [8] 高 东 英.GB 18467-2011, 献 血 者 健 康 检 查 要 求 [S]. 北 京 : 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部, 2011. [9] 张 勇.SZDB/Z 89-2014, 动 物 种 质 资 源 库 建 设 与 管 理 规 范 [S]. 深 圳 : 深 圳 市 市 场 监 督 管 理 局,2014. [10] 蒋 建 东. 生 物 资 源 库 最 佳 实 践 2012 科 研 用 生 物 资 源 的 采 集 储 存 检 索 及 分 布 [M]. 2 版. 北 京 : 中 国 医 药 生 物 技 术 杂 志 社.2012:1-48. 19